碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求beiken

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碱性磷酸酶测定试剂盒 (NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求北化康泰

碱性磷酸酶测定试剂盒 (NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求北化康泰

碱性磷酸酶测定试剂盒 (NPP底物-AMP缓冲液法)适用范围:本试剂盒用于定量检测人体血清样本中碱性磷酸酶的活性。

1.1. 包装规格试剂1:10ml×10(干粉复溶后的体积);试剂2:100ml×1。

2.1 外观:试剂1为干燥粉末,试剂2为澄清溶液,外包装完整。

2.2 净含量:不少于标示值。

2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度:A≤0.70(波长405nm,光径1cm)。

2.3.2试剂空白吸光度变化率:△A/min≤0.005(波长405nm,光径1cm)。

2.4 分析灵敏度:浓度为120U/L时,吸光度变化率△A/min≥0.03。

2.5 线性区间2.5.1线性相关系数:[25,750]U/L范围内,线性相关系数r≥ 0.990。

2.5.2线性偏差:[25,100] U/L时,绝对偏差不超过±10U/L;(100,750] U/L 时,相对偏差不超过±10%。

2.6 精密度2.6.1重复性:变异系数(CV)≤5%。

2.6.2批内瓶间差: CV≤5%。

2.6.3批间差:相对极差≤10%。

2.7 准确度:采用比对试验,相关系数r2≥0.95,[25,100] U/L时,绝对偏差不超过±10U/L;(100,750] U/L时,相对偏差不超过±10%。

2.8 稳定性2.8.1效期稳定性:试剂盒在2℃~8℃贮存,有效期为24个月。

保存至有效期末进行测定,试验结果满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.6.2、2.7的要求。

2.8.2复溶稳定性:工作液(将试剂1用10ml试剂2溶解)18℃~25℃可稳定2天,2℃~8℃可稳定3天。

测定结果满足2.5、2.7的要求。

碱性磷酸酶检测试剂盒(PNP比色法)

碱性磷酸酶检测试剂盒(PNP比色法)

碱性磷酸酶检测试剂盒(PNP 比色法)简介:碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase ,简称ALP 或AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需最适pH 9.2~9.8。

Leagene 碱性磷酸酶检测试剂盒(PNP 比色法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用PNP 比色法,其检测原理是Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)为一种常用的磷酸酶显色底物,可在碱性磷酸酶的作用下生成p -nitrophenol 。

在碱性条件下p -nitrophenol 转变成醌式结构,呈较深的黄色,通过分光光度比色法测定400~415nm处吸光度,据此通过比色分析就可以计算出碱性磷酸酶活性水平。

该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的碱性磷酸酯酶活性。

该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

组成:操作步骤(仅供参考):1、 配制检测工作液:① 配制显色工作液: 取出1支pNPP ,恢复至室温后溶解于2ml ALP Assay buffer ,混匀,冰上预冷备用。

新配制的显色工作液应在6h 内用完。

② 配制标准品工作液。

2、 准备样品:① 细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-80℃冻存,用于碱性磷酸酯酶的检测。

② 血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-80℃冻存,但为了消除样品本身颜色的干扰,需设置加了血浆或血清但不加底物的对照。

③ 高活性样品:如果样品中含有较高活性的碱性磷酸酶,可以使用原有的裂解液或PBS 等进行稀释,也可以采用ALP Assay buffer 稀释。

编号 名称TE0003 100T Storage试剂(A): ALP Assay buffer 15ml 4℃ 试剂(B): pNPP2支 -20℃ 避光 试剂(C): p -nitrophenol(10mM) 0.1ml -20℃ 避光 试剂(D): Stopping Solution 12mlRT 使用说明书1份3、加样:按照下表设置96孔板空白对照、标准品、待测样品,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。

碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求kemei

碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求kemei

碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清中的碱性磷酸酶(ALP)的活性。

1.1包装规格1.2主要组成成分试剂1主要组分:AMP缓冲液 42 0mmol/L试剂2主要组分:4-硝基苯磷酸二钠 56mmol/L2.1外观2.1.1试剂1应为无色或淡黄色透明溶液,无混浊,无未溶解物。

2.1.2试剂2应为无色或淡黄色透明溶液,无混浊,无未溶解物。

2.2装量液体试剂的净含量应不少于标示值。

2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度:ALP试剂盒在波长395~415nm处测定试剂的空白吸光度值,应不大于0.8。

2.3.2试剂空白吸光度变化率:ALP试剂盒在波长395~415nm处测定试剂的空白吸光度变化率,应不大于0.0050。

2.4分析灵敏度测试120U/L碱性磷酸酶时,吸光度变化率应不小于0.01。

2.5准确度用本公司ALP试剂盒和已上市ALP试剂盒同时测定40个临床样本,相关系数r2应不小于0.95,在[20,100]U/L区间内,线性绝对偏差应不超过±10U/L;在(100,800]U/L区间内,线性相对偏差应不超过±10%。

2.6精密度2.6.1重复性重复测试(120±12)U/L的样本,所得结果的变异系数CV应不大于5%;2.6.2批间差测试(120±12)U/L的样本,所得结果的批间相对极差应不大于10%。

2.7线性范围ALP试剂盒在[20,800]U/L范围内,线性相关系数(r)应不小于0.990;在[20,100]U/L区间内,线性绝对偏差应不超过±10U/L;在(100,800]U/L区间内,线性相对偏差应不超过±10%。

2.8稳定性原包装的ALP试剂盒在2℃~8℃避光保存,有效期为12个月。

在ALP试剂盒有效期满后2个月内,分别检测2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7项,结果应符合各项目的要求。

碱性磷酸酶测定试剂(ALPAKP)

碱性磷酸酶测定试剂(ALPAKP)

北京华宇亿康生物工程技术有限公司Co-Health (Beijing )Laboratories Co., Ltd. 液体生化试剂使用说明书_碱性磷酸酶测定试剂(ALP/AKP ) (IFCC ,AMP 缓冲液)【注册产品标准】YZB/国 1959-2003 ◇ 【医疗器械注册证号】京药监械(准)字2005第2400405号本试剂适用于人血清或血浆中碱性磷酸酶活性的体外定量分析。

临床意义碱性磷酸酶存在于体内多种组织和器官,其病理性变化表现在:增加:(1) 肝脏疾病如胆汁淤积和肝硬化;(2) 骨骼疾病如软骨病、佝偻病、成骨肉瘤; (3) 恶性肿瘤。

减少:(1) 停止生长(克汀氏病、软骨发育不全); (2) 先天性低磷酸酶血症。

方法学原理磷酸对硝基苯酚(4-NPP )在碱性磷酸酶的作用下,将其磷酸基转移到2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP )受体分子上,释放出的对硝基苯酚(4-NP )在碱性溶液中分子重排形成黄色醌,可在405nm 下检测。

黄色醌形成速率与ALP 活力成正比。

ALP 4 -NPP + H 2O → 4 -NP + 磷酸 Mg 2+, 碱性 试剂组成试剂1(R 1) 试剂2(R 2)AMP 0.35mol/L 4 -NPP 80mmol/L MgCl 2 10.5mmol/L 稳定剂 适量 适用仪器ZYA-1003:适用于日立7060/7150、岛津7200/ 7300/8000全自动生化分析仪;ZYB-1003:适用于日立7170 A /7170、奥林巴斯AU400 /600/1000全自动生化分析;ZYC-1003:适用于日立7020全自动生化分析仪; ZYD-1003:适用于贝克曼CX 系列全自动生化分析仪;ZYE-1003:适用于东芝全自动生化分析仪;TYA-1003、TYB-1003、TYC-1003:适用于其它全自动生化分析仪及各类半自动生化分析仪。

试剂贮存及稳定性试剂自生产日期起2—8℃避光存放可稳定12个月;R 1、R 2按4:1比例混为工作液2—8℃避光可稳定4周。

骨源性碱性磷酸酶检测试剂盒(凝集素亲和法)产品技术要求北京中生金域诊断

骨源性碱性磷酸酶检测试剂盒(凝集素亲和法)产品技术要求北京中生金域诊断

骨源性碱性磷酸酶检测试剂盒(凝集素亲和法)适用范围:用于体外半定量检测人体全血或血清中骨源性碱性磷酸酶催化活性。

1.1 产品型号:JY–Color–BAP NB;JY–Color–BAP AB。

1.2 产品规格1.2.1 包装规格:20人份/盒、50人份/盒、100人份/盒。

1.2.2产品组成:产品主要组成成分见表1、表2。

表1 试剂盒配置表配 置 规 格 (装量)20人份/盒 50人份/盒 100人份/盒反应装置 1×20支 1×50支 5×20支显色液 JY–Color–BAP NB1ml ×1瓶3.5ml ×1瓶7ml ×1瓶 JY–Color–BAP AB洗涤液 JY–Color–BAP NB3ml ×1瓶 8ml ×1瓶 8ml ×2瓶 JY–Color–BAP AB终止液 JY–Color–BAP NB3ml ×1瓶4ml ×1瓶 8ml ×1瓶 JY–Color–BAP AB 7ml ×1瓶 7ml ×2瓶一次性定量取血管(含吸头)21支(含吸头1个)52支(含吸头1个)104支(含吸头1个)注:试剂盒中一次性定量取血管为外购有医疗器械证书的产品。

表2试剂配方和浓度配 置 组成 浓度显色液 氯化钠(NaCl) 700mmol/L氯化镁(MgCl2) 25mmol/L二甲基亚砜(DMSO)0.9%(体积比)洗涤液 氯化钠(NaCl) 13%氯化镁(MgCl2) 2.9% 聚乙二醇(PEG)13%氯化锌(ZnCl2) 7%氯化钙(CaCl2) 18%氯化锰(MnCl2) 32%迭氮钠(NaN3) 5%JY–Color–BAP NB终止液氯化钠(NaCl) 18%迭氮钠(NaN3) 25% JY–Color–BAP AB终止液 乙磺酸(MES) 9%氯化钠(NaCl) 13%迭氮钠(NaN3) 7%2.1 外观2.2.1 反应装置为白色塑料制品,结构应完整、表面光洁、无缺失、无折损、无脱落;2.2.2 测定用液体外观要求:a) 显色液为浅黄色液体,不得有任何沉淀及絮状悬浮物;b) 洗涤液为无色透明液体,不得有任何沉淀及絮状悬浮物;c) 终止液为无色透明液体,不得有任何沉淀及絮状悬浮物。

碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒标准操作程序

碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒标准操作程序

碱性磷酸酶(ALP)测定标准操作程序1.摘要碱性磷酸酶(ALP)存在于成骨细胞、干细胞、白细胞、肾、脾、胎盘、前列腺和小肠内。

测定血清或肝素化血浆中的碱性磷酸酶活力,做临床辅助诊断用。

2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中碱性磷酸酶(ALP)的活力。

3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定碱性磷酸酶(ALP)活力的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理;本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的碱性磷酸酶(ALP)试剂盒采用的是AMP缓冲液法。

5.原理在AMP的缓冲环境下,磷酸对硝基苯在碱性磷酸酶的作用下,可以水解成磷酸盐和对硝基苯酚。

在一定底物浓度范围内,磷酸对硝基苯的水解产物对硝基苯酚会引起405nm处吸光度的上升,其上升速率与血清中碱性磷酸酶的活力成正比。

−→−+OH−−磷酸盐对硝基苯酚磷酸对硝基苯碱性磷酸酶+26.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源:上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分:R1:AMP缓冲液(PH10.50)、乙酸镁;R2:AMP缓冲液(PH8.85)、磷酸对硝基苯、乙酸镁。

AMP:2-氨基-2-甲基-1-丙醇7.3试剂稳定性:试剂在2-8℃避光保存,有效期1年。

试剂工作液在2-8℃避光保存,可稳定4周,15-25℃可保存稳定4天。

7.4试剂准备:试剂为即用式。

8.标准品和质量控制8.1校准程序:使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求,并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白,经校准测定,仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。

每日在测定前做一次质控。

该质控品为干粉包装,在2-8℃冰箱可稳定到失效期,使用前用5ml去离子水复溶,待质控物充分溶解(大约30分钟)后使用。

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求zhongshengbeikong

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求zhongshengbeikong

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)适用范围:本产品用于体外定量测定人血清中碱性磷酸酶的活性。

1.1包装规格液体双剂型试剂1(R1):80mL×3,试剂2(R2):60mL×1;试剂1(R1):80mL×2,试剂2(R2):20mL×2;试剂1(R1):60mL×3,试剂2(R2):45mL×1;试剂1(R1):40mL×3,试剂2(R2):30mL×1;试剂1(R1):40mL×3,试剂2(R2):10mL×3。

1.2主要组成成分试剂1(R1)液体:AMP缓冲液350mmol/L(pH 10.5)2.5mmol/LMgCl2试剂2(R2)液体:对硝基苯磷酸盐 16mmol/L2.1 外观试剂盒中各组件的外观应满足:2.1.1试剂1(R1)应为无色透明溶液,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损;2.1.2 试剂2(R2)应为淡黄色透明溶液,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损。

2.2 净含量液体试剂净含量不少于标示值。

2.3 试剂空白吸光度在波长410nm(400nm~420nm)(光径1cm)处,试剂空白吸光度(A)应≤1.000;试剂空白吸光度变化率(△A/min)应≤0.005。

2.4准确度测定GBW(E)090593,相对偏差应不超过±10%。

2.5分析灵敏度对应于活性为120U/L的ALP所引起的吸光度变化率(△A/min)的绝对值应在0.010~0.050范围内。

2.6重复性重复测试同一样本,变异系数(CV)应≤5%。

2.7批间差测试同一样本,批间差(R)应≤6%。

2.8线性范围在[1,1200]U/L(37℃)范围内,线性相关系数(r)应≥0.990;在(20,1200] U/L(37℃)范围内,线性相对偏差应不超过±10%;在[1,20]U/L(37℃)范围内,线性绝对偏差应不超过±2U/L。

Elabscience碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒使用说明书

Elabscience碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒使用说明书

(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)Elabscience®碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒Alkaline Phosphatase (ALP) Activity Assay Kit产品货号:E-BC-K091-M产品规格:48T(32 samples)/96T(80 samples)检测仪器:酶标仪(500-530 nm)使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。

请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。

用途本试剂盒适用于检测动物血清(浆)、体液、组织及细胞中碱性磷酸酶的活力。

检测原理在pH=10的反应液中,碱性磷酸酶催化磷酸苯二钠水解,生成游离酚和磷酸。

酚在碱性溶液中与4-氨基安替吡啉结合,并经铁氰化钾氧化生成红色的醌的衍生物,根据红色的深浅计算酶活的高低。

本试剂盒检测组织和细胞样本时,需测定总蛋白浓度,推荐使用BCA法(货号:E-BC-K318-M)。

提供试剂和物品说明:试剂严格按上表中的保存条件保存,不同测试盒中的试剂不能混用。

对于体积较少的试剂,使用前请先离心,以免量取不到足够量的试剂。

所需自备物品仪器:酶标仪(500-530 nm,最佳检测波长520 nm)、涡旋混匀仪、37℃恒温箱。

耗材:枪头(1000 µL,200 µL,10 μL)、EP管(10 mL,2 mL)。

试剂:双蒸水、PBS(0.01 M,pH 7.4)或生理盐水(0.9% NaCl)试剂准备①试剂盒中的试剂平衡至室温。

②工作液的配制:按试剂一:试剂二为1:1的体积比混匀,现用现配,未用完的试剂2-8℃避光可保存1天。

③不同浓度标准品的稀释:样本准备①样本处理血清血浆等液体样本:直接测定。

碱性磷酸酶活性测定试剂盒说明书

碱性磷酸酶活性测定试剂盒说明书

碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP/ALP)活性测定试剂盒说明书分光光度法50管/24样注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白酶,在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。

AKP/ALP 广泛分布于人体各脏器中,以肝脏为主。

测定原理:在碱性环境中,AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚;酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应红色亚醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通过测定510 nm吸光度增加速率,来计算AKP活性。

自备仪器和用品:可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。

试剂组成和配制:试剂一:液体×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体×1瓶,4℃避光保存。

试剂三:液体×1瓶,4℃避光保存。

试剂四:液体×1瓶,4℃避光保存,未变成蓝绿色之前均可使用。

标准品:液体×1支(EP管中),2 μ mol/mL酚标准液,4℃保存。

粗酶液提取:1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,4℃、8000g离心10min,取上清液待测。

2. 细菌或细胞:按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

3. 血液可直接测定,或者适当稀释后测定。

测定步骤:1. 分光光度计预热30min,调节波长到510 nm,蒸馏水调零。

2. 试剂三置于37℃水浴中预热30 min。

3. 空白管:取EP管,加入20μL蒸馏水,200μL试剂二,200μL试剂三,混匀后置于37℃水浴中保温15min;加入试剂四600μL,混匀后于510 nm测定吸光度,记为A空白管。

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求lepu

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求lepu

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中碱性磷酸酶的活性.1.1 规格试剂1:1×60mL,试剂2:1×12mL;试剂1:1×60mL,试剂2:1×15mL;试剂1:1×60mL,试剂2:1×20mL;试剂1:4×60mL,试剂2:4×15mL;试剂1:2×40mL,试剂2:2×10mL;试剂1:1×4L,试剂2:1×1L;试剂1:2×4L,试剂2:1×2L。

1.2 主要组成成分试剂1主要组分:试剂2主要组分:2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。

2.2 外观试剂1:无色或淡黄色透明溶液;试剂2:无色或微黄色溶液。

外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。

2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在405nm处测定试剂空白吸光度,应≤0.5;2.3.2 试剂空白吸光度变化率用生理盐水作为样品加入试剂测试时,试剂空白吸光度变化率(△A/min)应不大于0.005。

2.4 分析灵敏度测试120U/L碱性磷酸酶时,吸光度变化率(ΔA/min)应不低于0.0009。

2.5 准确度参照CLSI EP9-A2的方法,与比对试剂盒同时测试40例线性范围内的不同浓度的血清样本,其相关系数r2≥0.95。

每个浓度点在[25,100]U/L区间内绝对偏差不超过±10U/L;(100,750]U/L区间内相对偏差不超过±10%。

2.6 重复性用血清样品或质控样品重复测试所得结果的变异系数(CV)应不大于5%。

2.7 线性2.7.1在[25,750]U/L(37℃)区间内,线性相关系数r应不小于0.990;2.7.2 [25,100]U/L区间内绝对偏差不超过±10U/L;(100,750]U/L区间内相对偏差不超过±10%。

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求wantaiderui

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求wantaiderui

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)适用范围:用于体外定量测定人血清中碱性磷酸酶的活性。

1.1包装规格试剂1:58mL×8 、试剂2:58mL×2;试剂1:62mL×3 、试剂2:48mL×1;试剂1:48mL×4 、试剂2:24mL×2;试剂1:48mL×1 、试剂2:12mL×1;试剂1:64mL×3 、试剂2:16mL×3;试剂1:20mL×1、试剂2:5mL×1;1200测试/盒(试剂1:68mL×2、试剂2:17mL×2);2400测试/盒(试剂1:68mL×:4、试剂2:17mL×4);1050测试/盒(试剂1:20mL×6、试剂2:10mL×3);1680测试/盒(试剂1:48mL×4、试剂2:12mL×4);1260测试/盒(试剂1:48mL×3、试剂2:12mL×3);800测试/盒(试剂1:24mL×2、试剂2:6mL×2);1750测试/盒(试剂1:100mL×2、试剂2:25mL×2);960测试/盒(试剂1:48mL×4、试剂2:48mL×1);1650测试/盒(试剂1:62mL×3、试剂2:49mL×1);800测试/盒(试剂1:64mL×1、试剂2:16mL×1)。

1.2组成成分试剂1:乙酸镁 1.0mmol/LAMP缓冲液 900mmol/L试剂2:对-硝基苯磷酸盐 17mmol/L2.1试剂装量应不低于瓶签标示装量。

2.2外观试剂1:无色澄清液体;试剂2:黄色或淡黄色澄清液体。

2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度测定温度:37℃;测定波长:405nm;比色杯光径:1.0cm;其空白吸光度应<1.0。

AKP说明书

AKP说明书

碱性磷酸酶 (U / gprot)
=
测定管吸光度 标准管吸光度
×
标准管含酚的量 (0.003mg)
÷
取样量中的蛋白克数
= 0.081 × 0.003 ÷ (1.29 ×10−3 × 0.03) = 32.37U / gprot 0.194
南京建成生物工程研究所 南京建成科技有限公司
地 址: 南京市中央路 258-27 号 电 话:(025)83360321
基质液(ml)
0. 5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
充分混匀,37℃水浴 15 分钟
显色剂(ml)
1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5
立即混匀,在 520nm 处,1cm 光径,0 管调零,测各管 OD 值
以所测得的吸光度为纵坐标,以相应的标准浓度单位为横坐标,绘制标准曲线。
×
100ml 0.05ml
= 0.404 × 0.005 × 100 = 16.16金氏单位 /100ml
0.250
0.05
1
本试剂盒仅用于科研、实验室
南京建成
(二)、组织匀浆中 AKP 的测定:
1、 操作表:
测定管
标准管
空白管
1%组织匀浆(ml)
0.03
0.1mg/ml 酚标准液(ml)
三、操作:
Байду номын сангаас
(一)、血清(浆)中 AKP 的测定: 1、操作表:
测定管
标准管
空白管

清(ml)
0.05
0.1mg/ml 酚标准应用液(ml)
0.05
双 蒸 水(ml)
0.05

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求柏定

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求柏定

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)适用范围:本试剂用于体外定量测定人血清中碱性磷酸酶的活性。

1.1 包装规格见表1。

产品组成
2.1 外观
2.1.1 试剂1为无色透明液体,无混浊,无未溶解物。

2.1.2 试剂2为无色或微黄色透明液体,无混浊,无未溶解物。

2.1.3 标签内容清晰,字迹牢固不易脱落。

2.2 试剂装量
液体试剂的净含量不少于标示值。

2.3 试剂空白
2.3.1 试剂空白吸光度
A≤0.600(光径1.0cm,405nm±20nm 波长)。

2.3.2 试剂空白吸光度变化率
ΔA/分≤0.005。

2.4 分析灵敏度
测定120U/L样本,吸光度变化在0.024/分~0.072/分范围内。

2.5 线性区间
2.5.1 [5,1000]U/L(37℃)。

在规定的线性范围内,测定值与样本浓度值的相关系数(r)不低于0.990。

2.5.2 [5,50]U/L范围内,线性绝对偏差不超过±5U/L;(50,1000]U/L范围内,线性相对偏差不超过±10%。

2.6 精密度
2.6.1 重复性
变异系数CV≤5%。

2.6.2 批间差
批间相对极差≤6%。

2.7 准确度
相对偏差在±10%范围内(测试国际参考物质(JC ERM 20327,Lot003))。

2.8 稳定性
原装试剂2℃~8℃保存,有效期12个月,有效期满后2个月内测定结果符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、和2.7要求。

碱性磷酸酶染色试剂盒(改良Gomori钙钴法)

碱性磷酸酶染色试剂盒(改良Gomori钙钴法)

碱性磷酸酶染色试剂盒(ALP/AKP,改良Gomori钙钴法) 产品简介:碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需最适pH 9.2~9.8。

此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮。

此酶还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜及吞饮小泡。

现用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性。

此法以天然存在的β-甘油磷酸钠为底物,经酶水解释放出磷酸,立即被钙离子沉淀为磷酸钙,再依次被置换为磷酸钴和硫化钴,最终产物为黑色硫化钴沉淀。

产品组成:自备材料:1、蒸馏水2、温箱或水浴锅操作步骤(仅供参考):(一)石蜡切片染色1、石蜡切片脱蜡至蒸馏水。

2、切片入ALP孵育液中,37℃孵育2~12h。

3、流水洗2min,入蒸馏水。

4、入硝酸钴溶液中,37℃孵育5min。

5、流水洗5min后,入蒸馏水。

6、在上述过程中,配制硫化工作液,即取试剂(C)用蒸馏水或者去离子水稀释50倍, 即为硫化工作液,即配即用。

切片入硫化工作液,孵育2min。

7、流水洗10min,入蒸馏水。

8、石蜡切片常规脱水、透明,树胶封片。

(二)冰冻切片染色1、冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液内,4℃固定2~5min。

2、切片入ALP孵育液,37℃孵育5~15min。

3、流水洗2min,入蒸馏水。

4、入硝酸钴溶液中,37℃孵育5min。

5、流水洗5min后,入蒸馏水。

6、在上述过程中,配制硫化工作液,即取试剂(C)用蒸馏水或者去离子水稀释50倍, 即为硫化工作液,即配即用。

切片入硫化工作液,孵育2min。

8、流水洗10min,入蒸馏水。

9、冰冻切片用甘油明胶封片。

染色结果:酶所在阳性部位黑色硫化钴沉淀阴性对照(可选):1、试剂(D)为不含底物的孵育液。

alp试剂盒 说明书

alp试剂盒 说明书

碧云天生产的碱性磷酸酶检测试剂盒(Alkaline Phosphatase Assay Kit)是一种用于快速、便捷地检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血清、血浆、尿液等样品中内源性的碱性磷酸酶活性的试剂盒。

碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase),也称碱性磷酸酯酶,可以在碱性条件下催化磷酸酯键的水解。

哺乳动物中,肝脏、胆管、肾脏、骨头和胎盘中的碱性磷酸酶活性比较高。

常见的碱性磷酸酶包括肠道碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, intestinal, ALPI)、非组织特异性碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme, ALPL)和胎盘碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, placental type, 也称placental alkaline phosphatase, PLAP)。

干细胞,如iPS中,碱性磷酸酶的活性很高,常被用作iPS成功诱导的标志。

另外,分化的结肠癌细胞中碱性磷酸酶的活性也会显著升高,被当作结肠癌细胞分化程度定性和定量的指标。

此外,血清中碱性磷酸酯酶的升高,被称作高碱性磷酸酶血症(hyperalkalinephosphatasemia),被认为和恶性胆管阻塞(malignant biliary obstruction)、原发性胆管硬化(primary biliary cirrhosis)、原发性硬化胆管炎(primary sclerosing cholangitis)、肝淋巴瘤(hepatic lymphoma)和肝肉瘤(hepatic sarcoidosis)等肝胆疾病密切相关。

血清中碱性磷酸酶活性升高还和骨头生成密切相关,因为碱性磷酸酶是成骨细胞的副产物。

血清中碱性磷酸酶活性过低也和一些疾病相关。

儿童和孕妇血清中的碱性磷酸酶活性较普通人高一些。

血清中碱性磷酸酶活性范围在20-140U/L。

碧云天生物技术碱性磷酸酶检测试剂盒产品说明书

碧云天生物技术碱性磷酸酶检测试剂盒产品说明书

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线:400-1683301或800-8283301 订货e-mail :******************技术咨询:*****************网址:碧云天网站 微信公众号碱性磷酸酶检测试剂盒产品编号 产品名称包装 P0321S 碱性磷酸酶检测试剂盒 100次 P0321M碱性磷酸酶检测试剂盒500次产品简介:碧云天生产的碱性磷酸酶检测试剂盒(Alkaline Phosphatase Assay Kit)是一种用于快速、便捷地检测细胞或组织样品的裂解或匀浆产物的上清液、血清、血浆、尿液等样品中内源性的碱性磷酸酶活性的试剂盒。

碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)也称碱性磷酸酯酶(EC 3.1.3.1),可以在碱性条件下催化磷酸酯键的水解。

哺乳动物中,肝脏、胆管、肾脏、骨头和胎盘中的碱性磷酸酶活性比较高。

常见的碱性磷酸酶包括肠道碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, intestinal, ALPI)、非组织特异性碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme, ALPL)和胎盘碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, placental type, 也称placental alkaline phosphatase, PLAP)。

常见的小牛肠碱性磷酸酶(Calf Intestinal Alkaline Phosphatase, CIAP/CIP)被广泛用于二抗等的标记最终用于蛋白和核酸等的检测,也常用于DNA 或RNA 5´和3´末端的去磷酸化(去单磷酸化),特别是质粒的5´末端去磷酸化以避免质粒自连等。

干细胞,如iPS 中,碱性磷酸酶的活性很高,常被用作iPS 成功诱导的标志。

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物—AMP缓冲液法) 产品技术要求广州市伊川生物科技

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物—AMP缓冲液法) 产品技术要求广州市伊川生物科技

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP 底物-AMP 缓冲液法)
性能指标
1.外观和性状
1.1试剂盒各组分应齐全、完整、无液体渗漏;中文包装标签应清晰,准确、牢固;
1.2试剂R1 应为无色澄清液体、无沉淀、无悬浮物、无絮状物。

1.3试剂R2 应为无色或淡黄色澄清液体,无沉淀、无悬浮物、无絮状物。

2.装量
液体试剂的净含量应不小于标示量。

3.准确度
采用对比试验,相关系数r2 应≥0.95;[0,100]U/L 区间内,偏差应不超过±10U/L;(100,1000] U/L 区间内,偏差应不超过±10%。

4. 分析灵敏度
ALP活性为120U/L时,平均每分钟吸光度变化率(△A/min)应≥0.03。

5.试剂空白
5.1试剂空白吸光度
在温度37℃、波长405nm条件下检测,试剂工作液空白吸光度应≤0.50(比色杯光径1.0cm)。

5.2试剂空白吸光度变化率
用生理盐水作为样品测试时,试剂空白吸光度变化率(△A/min)≤0.005 (比色杯光径1.0cm)。

6.线性区间
线性区间在0~1000 U/L区间内:
a)理论浓度与实测浓度的线性相关系数︱r︳应≥0.990。

b)[0,100] U/L区间内,线性偏差应不超过±10 U/L;(100,1000] U/L区间内,线性偏差应不超过±10%。

(温度37℃、波长405nm、比色杯光径1.0cm) 7.精密度
7.1重复性
变异系数(CV)≤5%。

7.2批间差
相对极差(R)≤10%。

碱性磷酸酶比活性测定实验报告

碱性磷酸酶比活性测定实验报告

碱性磷酸酶比活性测定实验报告一、实验目的本实验旨在测定碱性磷酸酶(ALP)的比活性,了解其在生物体内的作用和活性水平。

通过实验,掌握碱性磷酸酶比活性测定的基本原理和方法,培养实验操作技能和数据处理能力。

二、实验原理碱性磷酸酶是一种广泛存在于生物体内的酶,能够催化磷酸酯的水解反应。

在本实验中,以对硝基苯磷酸二钠(pNPP)为底物,在碱性条件下,碱性磷酸酶能够将 pNPP 水解生成对硝基苯酚(pNP)和磷酸。

pNP 在碱性溶液中呈黄色,其在 405nm 波长处有最大光吸收。

通过测定反应体系在405nm 处的吸光度变化,可以计算出碱性磷酸酶的活性。

比活性是指每毫克蛋白质所含的酶活性单位数,通过测定蛋白质含量和酶活性,即可计算出碱性磷酸酶的比活性。

三、实验材料与仪器1、实验材料碱性磷酸酶标准品对硝基苯磷酸二钠(pNPP)碳酸钠碳酸氢钠缓冲液(pH 100)氢氧化钠溶液(1mol/L)考马斯亮蓝 G-250 试剂牛血清白蛋白标准品待测样品(组织提取液或细胞培养液)2、实验仪器分光光度计离心机恒温水浴锅移液器容量瓶试管四、实验步骤1、标准曲线的绘制配制不同浓度的对硝基苯酚(pNP)标准溶液:分别吸取 0、01、02、03、04、05ml 的 1mmol/L pNP 标准溶液,加入到 10ml 容量瓶中,用碳酸钠碳酸氢钠缓冲液定容至刻度,得到浓度为 0、10、20、30、40、50μmol/L 的标准溶液。

长处测定各标准溶液的吸光度。

绘制标准曲线:以 pNP 浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。

2、蛋白质含量的测定(考马斯亮蓝法)配制考马斯亮蓝 G-250 试剂:将 100mg 考马斯亮蓝 G-250 溶解于50ml 90%乙醇中,加入100ml 85%磷酸,最后用蒸馏水定容至1000ml。

配制牛血清白蛋白标准溶液:将牛血清白蛋白标准品用蒸馏水配制成 0、01、02、03、04、05mg/ml 的标准溶液。

生化多项低值质控品产品技术要求北京世纪沃德生物科技

生化多项低值质控品产品技术要求北京世纪沃德生物科技

生化多项低值质控品适用范围:本产品包含项目与本公司生产的试剂盒配套使用,用于50个项目的室内质量控制。

本产品所含项目为:白蛋白、总蛋白、丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、α-淀粉酶、胰淀粉酶、γ-谷氨酰基转移酶、亮氨酸氨基肽酶、乳酸脱氢酶、α-羟丁酸脱氢酶、肌酸激酶、胆碱酯酶、脂肪酶、腺苷脱氨酶、天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶、乳酸脱氢酶同工酶1、甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶、乳酸、总胆汁酸、总胆红素、直接胆红素、胆固醇、甘油三酯、肌酐、尿素、尿酸、葡萄糖、二氧化碳、钙、铁、镁、锌、无机磷、D-3羟丁酸、唾液酸、同型半胱氨酸、磷脂、游离脂肪酸、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、肌酸激酶MB同工酶、单胺氧化酶、胰岛素、心脏型脂肪酸结合蛋白、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、胱抑素C。

1.1包装规格5.0mL×1;5.0mL×6;5.0mL×10;5.0mL×20。

1.2 主要组成成分以人血清为基质的冻干型质控品,约含20mmol/L磷酸盐缓冲液、0.03%防腐剂、5%保护剂、0.15mol/L氯化钠。

具体信息见表1:表1组成及范围质控品质控范围批特异,详见质控品靶值单。

2.1 外观人血清基质质控品,白色至黄色冻干粉,复溶后为无色至黄色澄清液体,目测不得有沉淀及絮状悬浮物。

试剂盒标签标识清晰,外包装完整无损。

2.2水分含量水分含量应≤5.0% 。

2.3可接受区间/值检测结果应在各项目质控范围内。

2.4均匀性2.4.1瓶内均匀性)应≤10%。

各项目赋值结果的瓶内变异系数(CV瓶内2.4.2瓶间均匀性各项目赋值结果的瓶间变异系数(CV)应≤10%。

瓶间2.5 稳定性2.5.1效期稳定性原包装质控品在2℃~8℃避光保存,有效期为24个月,稳定期内赋值结果的变化趋势不显著。

2.5.2复溶稳定性游离脂肪酸、单胺氧化酶、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白复溶后质控品在2℃~8℃密封保存24小时,天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶、乳酸脱氢酶同工酶1复溶后质控品在2℃~8℃密封保存72小时,丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、葡萄糖复溶后质控品在2℃~8℃密封保存5天,α-羟丁酸脱氢酶、腺苷脱氨酶、心脏型脂肪酸结合蛋白复溶后质控品在2℃~8℃密封保存6天,白蛋白、总蛋白、碱性磷酸酶、α-淀粉酶、胰淀粉酶、γ-谷氨酰基转移酶、亮氨酸氨基肽酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、胆碱酯酶、脂肪酶、甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶、乳酸、总胆汁酸、总胆红素、直接胆红素、胆固醇、甘油三酯、肌酐、尿素、尿酸、二氧化碳、钙、铁、镁、锌、无机磷、D-3羟丁酸、唾液酸、同型半胱氨酸、磷脂、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、肌酸激酶MB同工酶、胰岛素、胱抑素C复溶后质控品在2℃~8℃密封保存7天,稳定期内赋值结果的变化趋势不显著。

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碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)
适用范围:本品用于体外定量测定人血清中碱性磷酸酶的活性。

1.1包装规格
1.2产品组成成分
试剂盒由试剂A 、试剂B 组成,各组分见表2。

表2 试剂组成
2.1外观
试剂为澄清、透明溶液,无沉淀及絮状悬浮物,外包装完整无破损。

2.2净含量
用通用量具量取,试剂的净含量应不少于标示量。

2.3试剂空白
2.3.1试剂空白吸光度
用试剂盒测试生理盐水,在405nm的波长下测试,1cm光径下试剂吸光度值不大于0.80。

2.3.2试剂空白吸光度变化率
用试剂盒测试生理盐水,试剂空白吸光度变化率ΔA/min,应不大于0.005。

2.4分析灵敏度
测试一定浓度的碱性磷酸酶,120U/L的碱性磷酸酶引起的吸光度变化率ΔA/min 大于0.024。

2.5线性区间
试剂线性在[25,750] U/L区间内,线性相关系数│r│应不小于0.990,当检测范围在[25,100)U/L区间内,绝对偏差不超过±10U/L;当检测范围在[100,750]U/L区间内,相对偏差不超过±10%。

2.6精密度
2.6.1重复性
用质控品重复测试所得结果的变异系数CV应不大于5%。

2.6.2批间差
用同一水平浓度的质控品分别测试3个不同批号的试剂盒,其相对偏差不大于10%。

2.7准确度
进行比对试验(与国内批准上市的试剂盒进行比对),用线性回归方法计算两组结果的相关系数(│r│应不小于0.990)及每个浓度点的偏差。

当测试值在[25,40)U/L区间内,偏差不超过±4 U/L;当测试值在[40,750]U/L区间内,偏差不超过±10%。

2.8稳定性
试剂贮存在2℃~8℃条件下,有效期为18个月。

有效期满后,分别检测2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7项,结果符合各项要求。

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