亚砷酸联合粉防己碱抗乳腺癌的作用机制研究
粉防己碱与抗肿瘤药物相互作用对HNE-1细胞周期的影响
中 图分 类 号 ：２ ５ ５ 文 献 标 识 码 ： 文 章 编 号 ：０ ４—７ ５ ２ １ ） ３ ４ １ ２ Ｒ ８ ． Ａ １０ ４ Ｘ（０ ０ ０ —０ ８ —０
【 摘要 】 目的 观察天然有效成 分粉防己碱 （ｅｒｎｒ ｅ Ｅ ）与常用抗肿瘤药物长 春新 碱 （ ｉ ｒ ｔ ｅ Ｔｔ ｄｉ ，Ｔ Ｔ ａ ｎ Ｖｎ ｉｉ ， ｃｓｎ
中国中医急症 ２ １ 年 ３ ００ 月第 １ 卷 第 ３ ９ 期 Ｊ Ｔ Ｍ Ｍ ｒ ０ ０ Ｖ １ ！ ： Ｅ Ｃ ． ａ． １ ， ． ！ ２ ０
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４８１ ・
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实 验 研 究
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粉 防 己碱 与 抗 肿 瘤 药 物 相 互 作 用 对 Ｈ Ｅ一１ Ｎ 细 胞 周 期 的影 响
ｗｔ ｎｉ ａ ｃ ｒｄｕ ｓ ｎ ｅａ ａ ｌ （ Ｐ）ｇｏ ｐ （ ｉ ａ ｔ ｃ ｎ ｅ ｒｇ ）ａ ｄ ｖｒｐ ｍｉ ＶＲ ｈ — ｒｕ ＶＲＰ ｃｍｂｎ ｄ ｗ ｔ ｎｉｃｎ ｅ ｒｇ ）． ｈ ｅｌｃ ｃｅｗ ｓ ｏ ｉｅ ｉ ａ ｔ ａ ｃｒｄｕ ｓ Ｔ ｅｃ ｌ ｙｌ ａ ｈ —
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【 ｓａｔ Ａｂｔ ｃ】 Ｏｂｅｔ ｅ ｏｓ ｄ ｅｅｆ ｔ ｆｅｒ ｄｉｅ （Ｅ ）ａｄｃｍ ｏ ｎｉ ａｃｒ ｒｇ （ｉｃｉｉ 。 ｒ ｊｃｉ ：Ｔ ｔ ｙｔ ｆ ｃ ｏ ｔ ｎ ｒ ｖ ｕ ｈ ｅ ｔ ａ ｎ Ｔ Ｔ ｎ ｏ ｍ ｎａｔｃｎｅ ｕ ｓ ｖ ｒｔ ｅ — ｄ ｎ ｓｎ
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粉防己碱逆转肿瘤多药抗药性细胞的凋亡抗性作用
粉防己碱逆转肿瘤多药抗药性细胞的凋亡抗性作用
符立梧
【期刊名称】《中国药理学通报》
【年(卷),期】1998(14)4
【摘要】目的探讨粉防己碱逆转ＭＤＲ细胞凋亡抗性的作用及其机制。
方法ＭＤＲ细胞株ＭＣＦ－７／Ａｄｒ与其相应的敏感株ＭＣＦ－７进行对比研究。
比较粉防己碱对阿霉素（Ｄｏｘ）诱导ＭＤＲ细胞及其相应的敏感株的凋亡作用。
并比较粉防己碱对ＭＤＲ细胞及其相应的敏感株的细胞ｂｃｌ－２蛋白的表达的影响。
细胞凋亡及ｂｃｌ－２蛋白表达的测定以流式细胞仪法。
结果加入Ｄｏｘ共同培养２４ｈ可诱导７４．６％ＭＣＦ－７细胞凋亡，而只
【总页数】1页(P309)
【作者】符立梧
【作者单位】中山医科大学肿瘤防治中心;中山医科大学肿瘤防治中心
【正文语种】中文
【中图分类】R979.1
【相关文献】
1.粉防己碱逆转人卵巢癌耐药细胞SKOV3/DDP耐药的逆转作用及机制 [J], 刘风玲;杨旭
2.粉防己碱逆转耐阿霉素的人乳腺癌MCF-7细胞的抗凋亡作用 [J], 王金华;叶祖光;孙爱续
3.粉防己碱逆转膀胱癌耐药株BIU-87/ADM凋亡抗性的作用 [J], 刘锦裕;李永生;
谢恩杰;黄玉清
4.粉防己碱逆转获得性多药耐药小鼠S180肿瘤细胞P_(170)过度表达与调控细胞凋亡相关性研究 [J], 孙付军;聂学诚;李贵海;尹格平
5.粉防己碱逆转人乳腺癌MCF-7多药耐药细胞的抗凋亡作用 [J], 王金华;叶祖光;孙爱续;薛宝云;梁爱华;李春英;王岚
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粉防己碱对人乳腺癌细胞 MDA - MB -435S的作用
（ １ ． Ｄ ｏ ｎ ｇ ｆ ａ ｎ ｇ Ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ， Ｂ ｅ ｉ ｊ ｉ ｎ ｇ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ Ｔ ｒ ａ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ， Ｂ ｅ ｉ ｊ ｉ ｎ ｇ １ ０ ０ ０ ７ ８ ； ２ ． Ｔ ｈ ｉ ｒ ｄ Ａ ｆ ｉ ｆ ｌ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ
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世界 中西医 结合 杂 志 ２ Ｏ ｌ ５年 第 ｌ Ｏ卷第 ７期
三氧化二砷与粉防己碱联合作用对MCF-7细胞的影响
三氧化二砷与粉防己碱联合作用对MCF-7细胞的影响裴晓华;樊英怡【期刊名称】《南京中医药大学学报》【年(卷),期】2009(25)2【摘要】目的观察三氧化二砷与粉防已碱联合作用对人乳腺癌细胞系MCF-7的影响.方法 MTT法检测三氧化二砷与粉防己碱联合作用对MCF-7细胞增殖的影响;流式细胞术检测三氧化二砷与粉防己碱联合作用对MCF-7细胞凋亡的影响;扫描电镜观察三氧化二砷与粉防己碱联合作用对MCF-7细胞形态的影响.结果 MTT比色实验显示两药联用产生的抑制率高于单药使用,联合用药时随着两药比例不同,效果有差异,在一定用药比例时产生协同作用;选取MTT比色实验中产生协同作用的药物浓度进行细胞凋亡实验,联合用药组的凋亡率高于单独用药组,且根据计算联合用药指数得出有协同作用;细胞形态学观察,联合用药组细胞表面微绒毛和伪足消失,细胞较小,表面出现塌陷.结论粉防己碱和三氧化二砷单独和联合用药作用于MCF-7细胞均可抑制细胞生长,阻止细胞周期,诱导细胞凋亡.联合用药作用强于单独用药.在一定浓度范围产生协同作用.【总页数】7页(P114-117,插3-插5)【作者】裴晓华;樊英怡【作者单位】北京中医药大学第三附属医院,北京,100029;北京中医药大学第三附属医院,北京,100029【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.胶滴肿瘤药敏检测技术检测乳腺癌细胞对三氧化二砷和粉防己碱的敏感性 [J], 杨扬;李曰庆2.粉防己碱逆转耐阿霉素的人乳腺癌MCF-7细胞的抗凋亡作用 [J], 王金华;叶祖光;孙爱续3.粉防己碱对人乳腺癌细胞MCF-7细胞株的作用 [J], 裴晓华;樊英怡4.粉防己碱抗人乳腺癌细胞MCF-7/TAM对三苯氧胺的耐药性研究 [J], 谌海燕;陈信义5.粉防己碱逆转人乳腺癌MCF-7多药耐药细胞的抗凋亡作用 [J], 王金华;叶祖光;孙爱续;薛宝云;梁爱华;李春英;王岚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
粉防己碱的抗肿瘤药理研究新进展
王丽敏 ， 吕宏彦 李庆勇 ， ， 祖元 刚ｈ
（． １ 东北 林业 大学 森林植 物 生态学 教育 部重点 实验 室 ， 黑龙 江 哈尔 滨 １０ ４ ５ ０ ０； ２ 仲术 斯大 学基 础医学 院 ， ． 黑龙 江 佳木 斯 １４ ０ ） ５０７
摘要 ： 目的 综述近年来粉防 己碱抗肿瘤药理研 究的最新进 展 ， 为其 深入 研 究和开发提供 参考 。方 法 通过 检 索近 年来 的有关文献资料 ， 行整理和 归纳。结果 粉防 己碱 不仅 能直接抑 制 多种 肿瘤 生长， 进 并且 具有放 疗增敏 、 逆转 耐药、 减轻 放 化疗毒 副反应 的作 用 其作 用机制与诱导肿 瘤细胞 凋亡， 下调 ＭＲ Ｐ表达等 有关。结论 粉 防 己碱在抗肿 瘤方 面具有 多种 药理 作 用 ， 有 广 泛 的 开 发 前 案 。 具
关键词 ： 粉防己 ； 药理作用； 综述 碱
防己诺林碱抑制前列腺癌pc-3细胞增殖的机制研究
华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文摘要粉防己（fenfangji），Radix Stephaniae Tetrandrae, 别名汉房己，白木香，为房己科植物石蟾蜍Stephania Tetrandra S. Moore的根。
含多种异喹啉生物碱，主要药用成分为粉防己碱（tetrandrine）和防己诺林碱（fangchinoline）。
其目前主要的功效有利水消肿，祛风止痛。
用于水肿脚气，小便不利，风湿痹痛，湿疹疮毒，高血压症。
目前研究发现粉防己碱能显著抑制肿瘤细胞增殖，因此具有很好的药物开发价值。
但是对其结构非常相似的防己诺林碱的抗肿瘤研究则相对甚少，本文将以人类前列腺癌PC-3细胞为研究材料，应用RT-PCR，Western blotting以及裸鼠模型等实验方法研究防己诺林碱对PC-3细胞的增殖影响，主要研究结果包括以下几个方面:1)防己诺林碱具有剂量和时间依赖性地抑制前列腺癌PC-3细胞增殖的作用。
MTT实验显示分别用10、20、30 µm/ml防己诺林碱处理PC-3细胞1-4天后，30 µm/ml防己诺林碱处理细胞4天后的抑制效果最好，达到86%抑制率；通过对细胞周期研究发现30 µm/ml防己诺林碱处理PC-3细胞1天后，PC-3细胞明显被阻断在G1/S期。
Western blotting结果则进一步证实防己诺林碱能调节PC-3细胞中细胞周期相关蛋白Cyclin D1、p27以及PCNA的表达。
30 µm/ml防己诺林碱处理PC-3细胞1天后，参与细胞周期G1/S期的Cyclin D1和PCNA明显下降，而抑制细胞增殖的p27蛋白表达量显著性上升。
2)Western blotting检测PC-3细胞在经过防己诺林碱处理后，细胞内参与细胞凋亡的相关蛋白的表达量变化。
PC-3细胞在30 µm/ml防己诺林碱处理1天后，细胞内的促凋亡蛋白Bax和激活型Caspase-3蛋白表达量都显著上升，同时抗细胞凋亡的Bcl-2蛋白表达量则显著下降。
粉防己碱抗肿瘤作用机制的研究进展
综 述粉防己碱抗肿瘤作用机制的研究进展尚雯倩0张艾民0付 燕6，孔 宁0刘新苑1(1.山东省淄博市妇幼保健院，山东 淄博255000； 9c 山东理工大学，山东 淄博255000 )［关键词］粉防己碱；抗肿瘤；作用机制dal ： 1. 3969/j. issn. 103 -8849.2021.03.023［中图分类号］R235.0 ［文献标识码］A粉防己碱又名汉防己甲素，是一种双节基异唾 咻类生物碱，主要从中药粉防己(Stephania tetrandraS. Moor)根中提取，属于天然产物。
其化学结构为2 -径基-4 -甲氧基苯乙酮，分子式为 C38H46N6O6,呈无色针状结晶，几乎不溶于水。
现代药理研究显示，粉防己碱具有多种生物活性，包括 钙通道阻滞剂、抗炎、免疫抑制、抗过敏、抗氧化，抗癌，抗菌等作用［1。
近年来针对粉防己碱抗肿瘤作 用的研究越来越多，其对肝癌、肾癌、鼻咽癌、乳腺 癌、宫颈癌、结肠癌、口腔癌和前列腺癌等［6「9多种 肿瘤均有明显抑制作用。
本文主要从以下几个方面，对粉防己碱抗肿瘤作用机制进行综述，以进一步其作为 肿瘤 的前 。
1抑制肿瘤细胞增殖细胞增殖是细胞物质积累与细胞分裂的循环过程，是通过细胞周期来实现的。
肿瘤进展过程中，异 常细胞分裂导致的细胞增殖常伴有细胞周期的失调［14。
细胞周期的各个阶段是由周期蛋白依赖性激酶(cyclin - dependent kinua),CDK )和细胞周期蛋白协同控制的。
因此，细胞周期蛋白可作为癌症治疗的潜在靶点［1。
有研究显示粉防己碱可以抑制Huh -5肝癌细胞的增殖，药物作用24 h 和48 h 后的IC50分别是20.6和3.0 ^M ［0］。
随着粉防己碱浓度的增加，S 期和G2期细胞百分率下降，G1期细胞百分率上升。
Chen 等［3］发现粉防己碱对786 - 0,769 - P 和［通信作者］ 张艾民，E-maii ： 3 **************［基金项目］淄博市科学技术发展计划项目(2618kj01040 )；淄博市妇幼保健WW 内基C 项目(Q2015009)［文章编号］ 108 -8849(2021)03 -0324 -06ACHN 肾癌细胞系均有抑制作用。
亚砷酸注射液治疗恶性胸腺瘤获缓解1例
亚砷酸注射液治疗恶性胸腺瘤获缓解1例
蒋梅;林丽珠
【期刊名称】《临床肿瘤学杂志》
【年(卷),期】2006(011)002
【摘要】我国自古就有用砒霜治疗肿瘤的实践，《本草纲目》中记载：“除（鼻句）喘，积痢，烂肉，蚀瘀腐、瘰疬。
”亚砷酸注射液是从砒霜中提取的有效药用成分，在临床治疗白血病、原发性肝癌取得了确切的疗效。
我们试用于1例恶性胸腺瘤取得显著疗效，特报告如下。
【总页数】1页(P94-94)
【作者】蒋梅;林丽珠
【作者单位】510405,广州,广州中医药大学第一附属医院二肿瘤科;510405,广州,广州中医药大学第一附属医院二肿瘤科
【正文语种】中文
【中图分类】R730.53;R736.3
【相关文献】
1.中药亚砷酸注射液获支持资金1200万元 [J],
2.亚砷酸联合维甲酸诱导治疗缓解成功急性早幼粒细胞白血病1例报告 [J], 郭鹏翔;王季石
3.亚砷酸注射液治疗直肠癌术后复发获完全缓解1例 [J], 郑作深;饶健
4.亚砷酸治疗复发性急性早幼粒细胞白血病3次缓解1例 [J], 强伟晨;于海英;王锐
5.亚砷酸治疗APL获完全缓解6年1例 [J], 王海虹;邵长静;陈玉广
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粉防己碱对肝癌细胞凋亡及放射敏感性的调控作用的开题报告
粉防己碱对肝癌细胞凋亡及放射敏感性的调控作用的开题报告一、研究背景肝癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，也是威胁人类生命健康的重大疾病。
放疗作为治疗肝癌的重要手段之一，其作用机制主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现抑制肿瘤生长的目的。
然而，放疗的局限性在于肿瘤细胞的抗放射性，因此，需要寻找与放疗联合应用的辅助治疗方法，提高肝癌的放疗敏感性。
粉防己碱是一种从植物粉防己中提取的天然产物。
已有研究表明，粉防己碱具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎等多种生物活性，尤其是对于肝癌具有一定的抑制作用，且能够增强化疗和放疗对肝癌的敏感性，但其具体作用机制还需要进一步研究。
二、研究内容本次研究旨在探究粉防己碱对肝癌细胞凋亡以及放射敏感性的调控作用。
具体内容包括以下三个方面：1. 探究粉防己碱对肝癌细胞凋亡的影响采用CCK-8法和流式细胞术分析粉防己碱对人肝癌细胞株HepG2和Bel-7402的细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响，以及探讨其影响机制。
2. 探究粉防己碱对肝癌细胞放射敏感性的调控作用将HepG2和Bel-7402细胞株随机分为三组：粉防己碱处理组、放疗组和粉防己碱与放疗联合处理组，分别使用单独粉防己碱、单独放疗、粉防己碱与放疗联合处理肝癌细胞，比较不同处理组的细胞凋亡率、放射敏感性等指标，研究粉防己碱对肝癌细胞放射敏感性的调控作用。
3. 探究粉防己碱对放射诱导肝损伤的保护作用采用放射性核素示踪技术观察粉防己碱对放射诱导的肝损伤的保护作用，评价粉防己碱对放疗治疗肝癌的临床应用价值。
三、研究意义通过探究粉防己碱对肝癌的影响机制，了解其所具有的抗肿瘤和增强放疗敏感性等作用，为辅助治疗肝癌提供新的思路和方法，可为临床肝癌的治疗提供技术支持，实现精准治疗、提高疗效，有着重要的理论和实践意义。
三氧化二砷与粉防己碱联合作用对MCF-7细胞的影响
浓度 ， 防己碱 ２ ５ｔ ／ Ｌ和 ３ ｇ ｍ 浓 度 粉 ． ｇ ｍ ￣ ０￣／ Ｌ２个
收 稿 日期 ：０８—１ ２０ ０—１ ； 稿 日期 ：０ ８ １ ３ ８修 ２０ 一Ｉ —０
基金项目： 国家 自然科学基金 （０７２ １ ３４２２ ） 作者简介： 裴晓华（９３一） 男， １６ ， 河南潢川人 ， 北京 中医药大学第三附属 医院主任医师。 ＊通讯作者 ：ｘ ２ ＠１３．ｏ ｐｈ一１７ ６ ｃｒ ｎ
粉 防 己碱 和
三氧化二砷单独和联合 用药作 用于 ＭＣ － Ｆ７细胞均 可抑制 细胞 生长 ， 阻止 细胞周期 ， 导细胞 凋亡 。联合用药作 用强于单 诱
三 氧 化 二 砷 （ ｓ ３ 和 粉 防 己碱 （ ｔ ｎｒ ｅ Ａ２ ） ０ ｔｒ ｄ ｎ ， ｅａ ｉ
单 独与联 合用 药 。 ＭＣ ． Ｆ７细胞 于对 数 生 长 期 ， 整 细 胞 适 当浓 调 度接种 于 ９ Ｌ 养板 ， 于 ３℃ 、％ｃ ２ ６孑培 置 ７ ５ ０ 培养 箱 内培 养 ２ ， 胞 贴壁 后 ， ４ｈ细 更换 培 养液 ， 照 组加 对 入新鲜 培养 液 ， 实验 组 按 照 以上 的分组 分 别 加入
ｍ ， ．８ ｇ ｍ ， ．７ ｇ ｍ ， ．５ｔ ／ Ｌ５ Ｌ ０ １７５ｔ ／ Ｌ ０ ３５ｔ／ Ｌ ０ ７ ｇｍ 个 ， ￣ ￣
独用 药及 联合用 药组 。 ＭＣ ． Ｆ７细胞 于 对数 生 长 期 ， 整 细 胞 适 当浓 调 度接 种于 ６孔 培 养 板 中 ， 于 ３ ℃ 、％Ｃ ２ 养 置 ７ ５ Ｏ培 箱 内培养 ２ 。细 胞贴壁 后 ， 培养 液 ， 据上 ４ｈ 更换 根 述分组 加 入 对 照组 和 不 同 浓 度 实 验 组 。于 培 养
粉防己碱对宫颈癌细胞周期影响及其机制研究
其抗肿 瘤机制 ， 开发抗 宫颈癌新药提供理论和实验依据 。 为
１ 材 料 与 方 法 １ １ 主 要 试 剂 ．
Ｒ ＭＩ６ ０培养基购 自 ＧＢ Ｏ公 司 ， Ｐ １４ ＩＣ 粉防 己碱 （ ｅ） 自 Ｔ ｔ购
防已碱对 Ｈ Ｌ ｅ ａ细胞 的生 长 抑制 作 用 随着 浓度 和 时 间 的增
ｐｏｅ ｅ［ ］ ａ ｃ ｅ ， ０ ，５ １ ） ５０ ５ １ ． ｒ ｒ ｓ Ｊ ．Ｃｎ ｅ Ｒ ｓ２ ５６ （ ３ ：５６— ５ １ ｐｔ ｉ ｒ ０ ［ ］ 韩 晓 兵 ， 友 清 ， 运 萍 ， ． 防 已碱对 人 卵 巢 癌细 胞 株 ４ 柳 卢 等 粉 Ａ ７ ０增殖与凋亡 的影 响 ［ ］ 中国肿 瘤临 床 ， ０ ，３ ４ ： ２８ Ｊ． ２ ６３（ ） ０
现 代 肿 瘤 医学
２１ 年 １ 第 １ 第 １ 期 ０１ １月 ９卷 １
ＭＯ Ｅ Ｎ Ｏ Ｃ Ｌ Ｇ Ｎ ｖ ２ １ ， Ｏ ．９ Ｎ ． １ Ｄ Ｒ Ｎ Ｏ Ｏ Ｙ， ｏ．０ １ Ｖ Ｉ１ ， ０ １
・ １１－ ２９
粉防 己碱对 宫颈癌细胞周期影响及其 机制研究
慕建宁 ， 马小红 李 ， 玢 邓 ， 卓 韩晓兵 朱克修 ， ，
上海友 思生 物技术有限公司 ， 据文献 以双蒸水稀 释粉防 根
置浓度为 ０ １ ｍｏ Ｌ的粉 防 已碱 储存 液 （ ．ｍｏ Ｌ ．ｍ ｌ ／ ０１ ｌ ／ ＨＣ Ｌ助溶 ，．ｍｏ ＬＮ Ｏ 调整 ｐ ０１ ］ ａＨ ／ Ｈ值 至 ６ ６—６ ７ ，℃ 保 ． ． ）４ 存， 四甲基偶 氮 唑 蓝 （ ｒ 购 自 Ａ ｅｃ ＭＴ ） ｍｒ ｏ公 司， 化 丙 啶 ｓ 碘
《2024年新型砷代谢产物联合隐丹参酮对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用研究》范文
《新型砷代谢产物联合隐丹参酮对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用研究》篇一摘要：本研究关注新型砷代谢产物与隐丹参酮联合对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的协同作用。
采用现代生物学技术手段，深入探讨了两种化合物对癌细胞增殖的抑制效果及其作用机制。
实验结果表明，新型砷代谢产物与隐丹参酮联合使用可有效诱导MCF-7细胞凋亡，为乳腺癌的治疗提供了新的思路和实验依据。
一、引言乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一，其发病率逐年上升，严重威胁着女性的生命健康。
目前，临床治疗乳腺癌的主要手段包括手术、放疗、化疗及靶向治疗等。
然而，由于肿瘤细胞的异质性和耐药性的存在，治疗效果并不理想。
因此，寻找新的治疗策略和药物成为当前研究的重点。
近年来，天然药物及其活性成分在抗肿瘤领域展现出巨大的潜力。
隐丹参酮作为一种从中药丹参中提取的活性成分，已显示出对多种癌细胞的抑制作用。
而新型砷代谢产物的发现，也为抗癌药物的研究提供了新的方向。
本研究旨在探讨新型砷代谢产物与隐丹参酮联合对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响及作用机制。
二、材料与方法1. 材料：新型砷代谢产物、隐丹参酮、人乳腺癌MCF-7细胞株。
2. 方法：（1）细胞培养：在体外培养MCF-7细胞，并观察其生长状态。
（2）药物处理：将新型砷代谢产物与隐丹参酮以不同浓度和比例联合处理MCF-7细胞。
（3）细胞凋亡检测：采用流式细胞术、免疫荧光等技术检测细胞凋亡情况。
（4）蛋白表达分析：利用蛋白质印迹法（Western Blot）等技术分析相关蛋白的表达水平。
（5）数据统计与分析：实验数据采用SPSS软件进行统计分析，并绘制图表。
三、结果1. 细胞增殖抑制：实验结果显示，新型砷代谢产物与隐丹参酮单独或联合使用均能显著抑制MCF-7细胞的增殖，且呈现剂量依赖性。
2. 细胞凋亡诱导：流式细胞术和免疫荧光实验显示，新型砷代谢产物与隐丹参酮联合使用可有效诱导MCF-7细胞发生凋亡，且凋亡率随药物浓度的增加而提高。
一种抑制乳腺癌细胞体外生长和治疗乳腺癌的药物[发明专利]
![一种抑制乳腺癌细胞体外生长和治疗乳腺癌的药物[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/951a822f5fbfc77da369b1d8.png)
专利名称：一种抑制乳腺癌细胞体外生长和治疗乳腺癌的药物专利类型：发明专利
发明人：裴晓华,李曰庆,樊英怡,马秀璟,李桃花
申请号：CN200810177336.X
申请日：20081117
公开号：CN101422483A
公开日：
20090506
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明给出了一种治疗乳腺癌的药物，它包括三氧化二砷和粉防己碱两种组份，粉防己碱含量为5～40mg/ml，三氧化二砷含量为0.9～7.5mg/ml；粉防己碱剂量为5mg·kg·d，三氧化二砷剂量为0.3mg·kg·d；其成分中还可包括氟尿嘧啶和/或多糖。
本发明的另一技术方案为一种抑制乳腺癌细胞体外生长的药物，其粉防己碱含量为0.5～4ug/ml，三氧化二砷含量为0.09～0.75ug/ml。
本发明的有益效果在于三氧化二砷和粉防己碱两药联合使用时可以降低三氧化二砷毒性，效果优于单独用药；在上述浓度范围内，联合用药产生协同作用，且协同作用有可重复性；大于或小于此浓度范围，则属于相加甚至拮抗作用。
申请人：裴晓华,李曰庆,樊英怡
地址：100029 北京市朝阳区安定门外小关街51号
国籍：CN
代理机构：北京捷诚信通专利事务所
代理人：董同源
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基于ATP7A探讨粉防己碱对乳腺癌细胞顺铂耐药的逆转作用及机制
基于ATP7A探讨粉防己碱对乳腺癌细胞顺铂耐药的逆转作用及机制作者：肖奕马大昌王红磊吉琨武力来源：《中国医药导报》2018年第34期[摘要] 目的基于ATP7A探讨粉防己碱对乳腺癌细胞顺铂耐药的逆转作用及机制。
方法建立两种人乳腺癌顺铂耐药细胞株及ATP7A高表达细胞。
检测粉防己碱对顺铂耐药细胞的逆转作用，高效液相色谱测定胞内顺铂含量，检测ATP7A蛋白表达。
结果耐药乳腺癌细胞的顺铂敏感性显著降低（P < 0.05），ATP7A表达升高（P < 0.05），胞内顺铂含量明显降低（P < 0.05）；ATP7A高表达细胞较正常乳腺癌细胞顺铂敏感性下降（P < 0.05），胞内顺铂含量降低（P < 0.05）。
而粉防己碱对细胞耐药性具有明显的逆转作用，较耐药细胞及转染细胞可升高胞中顺铂含量（P < 0.05），降低ATP7A表达（P < 0.05）。
结论粉防己碱对人乳腺癌顺铂耐药细胞及ATP高表达细胞的顺铂耐药性有逆转作用，其机制可能与抑制ATP7A表达相关。
[关键词] 粉防己碱；乳腺癌；顺铂耐药；ATP7A[中图分类号] R737.9 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2018）12（a）-0018-05顺铂是乳腺癌化疗一线用药，但耐药严重影响临床疗效[1-2]。
ATP7A参与肿瘤对顺铂的泵出，耐药乳腺癌细胞中表达明显增高[3-4]。
粉防己碱对肿瘤耐药具有逆转作用[5-7]，可提高阿霉素在人口腔上皮癌耐药细胞中的浓度；与苦参碱联用可有效提高多柔比星对乳腺癌的细胞毒性[8-9]，但对其在乳腺癌顺铂耐药中的作用有待探究。
本研究采用两种人乳腺癌细胞株建立顺铂耐药细胞及ATP7A高表达乳腺癌细胞，考察粉防己碱对不同顺铂耐药细胞的影响及作用机制。
1 材料与方法1.1 材料人乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MCF-7购自中国科学院上海细胞库；RPMI1640培养基、胎牛血清（Gibco，美国）；粉防己碱、顺铂、DMSO（Sigma公司，美国）；BCA蛋白测定试剂盒（碧云天生物研究所，中国）；LipofectamineTM2000（Invivogen，法国）；pCMV6/ATP7A转染试剂（上海吉玛生物公司，中国）；ATP7A、GAPDH（abcam，英国）；其他试剂均为国产分析纯。
粉防己碱的药理作用研究进展
粉防己碱的药理作用研究进展
朱洪剑;辛国松;王聪然;宋尚纯;宋明昊
【期刊名称】《中医药学报》
【年(卷),期】2018(046)004
【摘要】近年来国内外学者对中药的重视程度增加,对中药药理作用的研究日益增多.其中粉防己碱是从中药粉防己中提取的一种异喹啉类生物碱,亦是粉防己的主要活性成分.粉防己碱具有多种药理作用,其良好的药理活性逐渐被国内外学者关注.本文通过查阅大量的国内外文献,从抗肿瘤、抗多药耐药、对心血管系统、抗菌、防治消化系统疾病、抗炎的作用以及治疗烫伤、眼科疾病等作用进行了综述总结,为粉防己碱进一步研究与合理开发提供参考.
【总页数】6页(P109-114)
【作者】朱洪剑;辛国松;王聪然;宋尚纯;宋明昊
【作者单位】哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心,黑龙江哈尔滨150076;哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心,黑龙江哈尔滨150076;国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心,黑龙江哈尔滨150076;哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心,黑龙江哈尔滨150076;哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心,黑龙江哈尔滨150076;哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心,黑龙江哈尔滨150076
【正文语种】中文
【中图分类】R282.71
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5.粉防己碱对大鼠膀胱平滑肌的药理作用 [J], 胡敏;姚伟星;夏国瑾;江明性
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亚砷酸用途
亚砷酸是一种抗肿瘤药，主要用于治疗急性早幼粒细胞性白血病、晚期原发性肝癌等恶性肿瘤。
亚砷酸主要成分为三氧化二砷，呈无色澄明液体，味微咸，主要作用机制是通过调控癌相关基因的表达及阻碍细胞周期的进程等途径，发挥其抗癌的生物学效应，阻止细胞生长。
此外，亚砷酸还有以下用途：
亚砷酸盐通常作为酶的抑制剂用于酶学性质研究中，最常用的是作为二硫键还原酶的抑制剂，因其能与-SH特异性结合故能抑制二硫键还原酶的活性。
亚砷酸H₃AsO₃中含有各种类型的盐，但用来作为酶反应抑制剂的是砷酸钠（Na₃AsO₃）。
使用亚砷酸治疗时常见皮肤干燥、丘疹、红斑、色素沉着、恶心、腹胀、食欲减退等不良反应。
由于亚砷酸属于医疗用毒性药品，过量使用可能会引起中毒，需在专科医生指导下观察使用。
此外，孕妇禁止使用此药，哺乳期妇女用药时不宜哺乳。
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亚砷酸联合粉防己碱抗乳腺癌的作用机制研究研究目的和意义:近年来,中医药治疗乳腺癌在临床治疗和基础研究方面都取得了很好的进展,从中药中筛选抗肿瘤药物已成为国内外研究的热点。
目前研究发现砷剂和粉防己碱(Tetrandrine,Tetra)均具有较好的抑癌作用,然而砷剂的毒性问题对其临床应用造成了一定的困扰,亟待解决。
本课题根据“防己杀雄黄毒”理论,将这两味药的有效成分砷和粉防己碱联合应用于乳腺癌细胞,从抑制乳腺癌细胞增殖的角度探讨相杀配伍是否具有协同增效以减毒的作用?并进一步从凋亡、自噬、坏死以及细胞周期阻滞等方面探索亚砷酸钠(NaAsO2)联合粉防己碱(Tetra)诱导乳腺癌细胞增殖抑制的相关分子机制,挖掘MAPK信号通路及活性氧(Reactive oxygen species,ROS)在联合用药诱导细胞死亡过程中的作用。
同时,研究NaAs02联合Tetra能否诱导乳腺癌细胞分化,并探索其诱导分化的具体分子机制;以及联合用药对人外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的影响。
以期为临床应用NaAs02联合Tetra治疗乳腺癌提供实验依据,对中药药对的推广应用具有重要的理论和实际意义。
研究方法:(1)NaAsO2联合Tetra对乳腺癌细胞增殖、凋亡、自噬、坏死以及细胞周期阻滞的影响分别以梯度浓度NaAsO2、Tetra单用及联用干预乳腺癌MDA-MB-231及T47D细胞,以XTT法检测细胞增殖情况,以流式细胞术分析检测凋亡率、细胞周期,Western-Blot法检测自噬相关蛋白、线粒体凋亡通路相关蛋白、MAPK信号通路蛋白的表达。
分别检测自噬抑制剂Wortmannin、ROS抑制剂NAC及Trolox、MAPK各信号通路抑制剂对MDA-MB-231增殖抑制率、细胞凋亡率、坏死率、细胞周期以及自
噬标志蛋白LC3、Beclin-1的影响。
检测NaAsO2联合Tetra作用后细胞内ROS 含量的变化。
通过Transwell小室实验检测NaAsO2联合Tetra作用后对细胞迁移的影响。
(2)NaAsO2联合Tetra诱导乳腺癌细胞分化分别以梯度浓度NaAsO2、Tetra单用及联用干预乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7及T47D细胞,流式细胞术检测乳腺癌分化标志物ICAM-1免疫荧光,Western-Blot法检测ICAM-1、p-ERK、ERK、HER2等细胞分化相关蛋白的表达。
分别检测应用ERK抑制剂对三种细胞ICAM-1免疫荧光的影响,初步揭示联合用药诱导分化的具体分子机制。
以亚砷酸注射液、汉防己甲素注射液单用及联用干预乳腺癌移植瘤裸鼠,Western-Blot法检测肿瘤组织内ICAM-1、p-ERK、ERK、HER-2等分化相关蛋白的表达。
(3)NaAsO2联合Tetra对PBMC中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的影响。
用淋巴分离剂分离人外周血获得人外周血单个核细胞细胞(PBMC),分别以梯度浓度NaAsCh、Tetra单用及联用干预PBMC细胞,以XTT法检测药物对PBMC增殖的影响。
用流式细胞术检测药物干预后CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞群比例的变化,探索NaAs02联合Tetra对免疫功能的影响。
研究结果:NaAsO2和Tetra单用或联用可抑制MDA-MB-231、T47D细胞的增殖,且呈剂量依赖性,并且联用效果优于单独用药。
MDA-MB-231对Tetra的敏感性高于T47D细胞,联合用药对MDA-MB-231细胞的增殖抑制效果优于T47D细胞。
NaAsO2联合Tetra可诱导MDA-MB-231细胞及T47D细胞凋亡。
其诱导的MDA-MB-231细胞凋亡具有剂量依赖性及时间依赖性,为caspase
非依赖性,且联合用药增强了单独用药时的凋亡诱导效果,并可达到与他莫昔芬(TAM)一致的凋亡诱导效果。
其诱导的T47D细胞凋亡与caspase-8活化有关,可能经死亡受体途径诱导凋亡。
横向比较相同药物浓度作用时两细胞的凋亡率,发现联合用药对
MDA-MB-231细胞凋亡诱导效果优于T47D细胞。
细胞周期结果表明联合用药可将MDA-MB-231细胞阻滞于S期。
联合用药可明显抑制细胞迁移;经联合用药处理后的细胞,即使在不含药的
正常情况下培养,细胞迁移力也明显降低,具有一定的后移效应。
NaAsO2联合Tetra可诱导MDA-MB-231细胞自噬,其诱导的自噬抑制了肿瘤细胞的生长,表现
为自噬性细胞死亡。
联合用药所诱导的自噬对凋亡没有促进作用,对细胞坏死具有一定程度的促进作用。
当NaAsO2联合Tetra诱导的自噬性死亡被强烈抑制时,S期阻滞的细胞逐渐向G2/M期过渡,细胞周期在一定程度上呈现恢复趋势。
从MAPK通路蛋白水平变化及MAPK抑制剂对细胞存活率影响的结果来看,JNK、ERK、p38的表达虽然均有明显上调,但仅JNK通路与联合用药所致的细胞增殖抑制作用直接相关。
NaAsO2联合Tetra所诱导的MDA-MB-231细胞凋亡和自噬均与JNK通路激活无关,其诱导的MDA-MB-231细胞S期阻滞可能与JNK通路激活有关。
NaAsO2联合Tetra可诱导MDA-MB-231细胞内ROS水平下降,并且ROS水平
的下降与联合用药诱导的增殖抑制有关。
联合用药诱导的MDA-MB-231细胞凋亡、坏死、自噬与细胞内ROS水平可能无关,但其诱导的细胞周期阻滞于S期可能与ROS水平下降有关。
在体外实验中,Tetra可诱导MDA-MB-231、MCF-7、T47D细胞分化,NaAsO2可诱导MCF-7细胞分化,NaAsO2联合Tetra可诱导MDA-MB-231、MCF-7、T47D细胞分化。
对MDA-MB-231细胞,联合使用NaAsO2可降低诱导分化所需使用的药物浓度;对MCF-7细胞,联合使用NaAsO2可增强两药单用时的分化诱导效果。
NaAsO2和Tetra单用或联用诱导的MDA-MB-231、MCF-7细胞分化与ERK信号通路激活有关,抑制ERK信号,其分化诱导效果也受到抑制;NaAsO2和Tetra单用或联用诱导的MDA-MB-231、MCF-7细胞分化也与HER2下调有关。
在体内实验中,亚砷酸氯化钠注射液和汉防己甲素注射液单用或联用均可诱导乳腺癌移植瘤细胞分化,并且可能与ERK蛋白上调有关。
两药联用在较低的三个浓度下(0.5+0.5、0.25+0.25、0.125+0.125)对PBMC 增殖均无影响,Tetra可轻微降低CD4+CD25+Foxp3+细胞比例,但无统计学差异。
不同个体的PBMC对NaAsO2的反应有较大的不同,部分人的反应同文献报道结果一致,即CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的比例增高,但部分人CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞比例基本无变化;两药联用也可轻微降低CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例,但无统计学差异。
结论:(1)NaAsO2联合Tetra可抑制乳腺癌细胞增殖,抑制细胞迁移,诱导细胞凋亡、自噬及细胞周期阻滞;其增殖抑制作用与JNK信号通路激活及细胞内ROS 水平降低有关;其诱导的自噬、凋亡、坏死及细胞周期阻滞之间存在一定的关系。
(2)NaAsO2联合Tetra可诱导MDA-MB-231、MCF-7、T47D细胞分化,其诱导的MDA-MB-231、MCF-7细胞分化与ERK通路激活,HER2表达下降有关。
亚砷酸氯化钠注射液和汉防己甲素注射液单用或联用均可诱导乳腺癌移植瘤细胞分化,并且可能与ERK蛋白上调有关。
(3)NaAsO2联合Tetra在较低浓度
下对PBMC增殖无影响;Tetra单用有降低CD4+CD25+Foxp3+细胞比例的趋势;不同个体的PBMC对NaAsO2的反应有较大的不同,部分人CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的比例增高,但部分人CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例基本无变化;两药联用也有轻微降低CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例的趋势,初步推测联合用药可能具有降低CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例的作用。