植物组织培养步骤
植物组织培养的一般过程
植物组织培养的一般过程
以下是有关植物组织培养的一般过程：
1.植物组织培养的一般过程
（1）在无菌条件下，将植物器官或组织（如芽、茎尖、根尖或花药）的一部分切下，用纤维素酶和果胶酶处理以去除细胞壁，使之露出原生质体。
（2）然后放在适当的人工培养基上进行培养，这些器官和组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。
不过这种组织没有发生分化，只是一团薄壁细胞，称为愈伤组织。
（3）在合适的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下，愈伤组织便开始分化，分化成植物的各种器官和组织，进而发育成一株完整的植株。
2.植物组织培养的特点
（1）培养条件可以人为控制，组织培养采用的植物材料完全是在人为提供的培养基和小气候环境条件下进行生长，摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响，且条件均一，对植物生长极为有利，便于稳定地进行周年培养生产。
（2）生长周期短，繁殖率高，植物组织培养是由于人为控制培养条件，根据不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培养条件，因此生长较快，另外，植株也比较小，往往20~30天为一个周期。
所以，虽然植物组织培养需要一定设备及能源消耗，但由于植物材料能按几何级数快速繁殖生产，故总体上成本低廉，且能及时提供规格一致的优质种苗或脱病毒种苗。
（3）管理方便，利于工厂化生产和自动化控制。
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植物组织培养的工作流程
植物组织培养的工作流程引言：植物组织培养是一项重要的生物技术，用于研究植物的生长和发育过程，以及培养新的植物品种。
本文将介绍植物组织培养的工作流程，包括材料准备、组织采集、培养基制备、植物培养和结果分析等步骤。
一、材料准备：植物组织培养需要准备一系列材料，包括无菌培养器皿、无菌工具、培养基成分、植物种子或组织等。
这些材料需要提前准备并进行无菌处理，以确保实验的准确性和可靠性。
二、组织采集：在进行植物组织培养之前，需要从植物中采集组织样品。
这些组织样品可以是幼苗的种子、叶片、茎段等。
在采集组织样品时，需要注意避免外界的污染，以及及时将样品转移到无菌条件下进行后续处理。
三、培养基制备：培养基是植物组织培养中至关重要的因素之一。
制备培养基时，需要根据具体实验的要求选择不同的成分和浓度。
一般来说，培养基包括基础培养基、激素和营养物质等。
这些成分需要按照一定比例混合，并加入适量的琼脂糖进行凝固。
四、植物培养：将采集到的植物组织样品转移到培养基中进行培养。
在进行植物培养时，需要注意无菌操作，并将培养器皿密封，放置在恒温培养箱中。
培养过程中，还需要定期观察植物的生长情况，并根据实验需要进行必要的处理，如添加激素、调整培养基成分等。
五、结果分析：植物组织培养的最终目的是获得预期的结果，如新的植株、组织或细胞。
在培养过程结束后，需要对培养结果进行分析和评估。
这可以通过观察植物的形态、结构和生长状态，以及进行细胞学和分子生物学等实验手段来完成。
结论：植物组织培养是一项复杂而有趣的技术，通过对植物组织的培养和生长，可以研究植物的生物学特性并培育新的植物品种。
本文介绍了植物组织培养的工作流程，包括材料准备、组织采集、培养基制备、植物培养和结果分析等步骤。
通过遵循这些步骤，我们可以获得准确可靠的实验结果，并为植物科学研究提供有力支持。
植物的组织培养方法
植物的组织培养方法植物组织培养是一种无性繁殖技术，通过培养植物的各种器官组织，包括种子、茎、叶和根的细胞和组织，使其在适当的条件下进行生长和分化，从而产生新的植株。
这项技术已被广泛应用于农业、园艺、林业和植物学研究中。
以下是植物组织培养的一般步骤和方法：1. 材料准备：首先，选择适合的植物作为材料，常用的包括水果、蔬菜和花卉植物。
收集新鲜的种子、茎、叶或根，并进行消毒处理，以防止细菌、真菌和其他病原体的污染。
2. 植物组织的分离：将植物材料切成小块或将细胞分离开来。
对于植物的种子，可以直接将种子表面进行消毒处理后，在培养基上进行培养；对于茎、叶和根等组织，则需要进行切割处理。
3. 培养基的准备：制备适当的培养基是进行植物组织培养的重要步骤。
培养基通常由无机盐和有机添加剂组成，以提供植物生长所需的营养物质。
根据组织的不同类型，可以使用不同种类和浓度的培养基。
4. 培养基的调整：将分离的组织放入培养基上，可以将培养基涂覆在组织表面上，或者将组织植入培养基中。
然后，在无细菌的条件下，将组织培养在适当的温度、湿度和光照条件下。
5. 激素的添加：植物生长激素是控制植物生长和分化的关键因素。
在组织培养中，可以根据实验的需要添加适量的激素来促进细胞分裂和分化。
常用的激素有生长素、细胞分裂素和愈伤组织生成素等。
6. 愈伤组织的诱导：愈伤组织是植物组织培养中产生的一种可分化细胞。
通过搅拌、震荡或辐射等途径，诱导组织分化成愈伤组织，然后将其继续培养。
7. 植株的再生：通过培养基中激素的平衡调节，可以使愈伤组织再生为整个植株。
在培养基中，植株的幼苗养分丰富，需要的培养基成分和激素浓度可能与之前的不同。
8. 培养环境的控制：为了使植物组织正常生长和分化，需要控制培养环境的参数。
例如，可以调节培养基的pH值、光照强度、温度和湿度等因素。
9. 组织转化：经过培养，植物组织中可以引入外源基因，使其具有某种特定的性状，这被称为转基因。
植物组织培养流程图及注意事项
5.培养：放在合适的环境里，温度、光照、湿度都得控制好哇！
6.观察和记录：要时刻盯着，看看有没有啥异常情况，及时做好记录哟！
接下来讲讲注意事项哈！
1.无菌操作：这可是重中之重呢！任何一个环节都不能让细菌病毒钻空子呀！
2.培养基配方：哎呀呀，配方得合适，营养不均衡可不行！
9.仪器设备清洁：用完的仪器得洗干净消毒好，为ห้องสมุดไป่ตู้一次使用做好准备哦！
10.人员培训：操作人员得经过专业培训，不然容易出错哟！
怎么样，这些流程图和注意事项是不是很重要呀？希望能对您有所帮助哇！
3.外植体来源：得保证来源可靠，质量过关呀！
4.培养条件控制：温度不能高也不能低，光照时间和强度都得恰到好处，你说难不难？
5.防止污染：哇，一旦污染了，那可就前功尽弃啦！
6.定期观察：可别偷懒，要经常看看植物的生长情况，及时调整条件呢！
7.操作规范：每个步骤都得按照标准来，不能随心所欲哟！
8.材料处理：处理外植体的时候，手法要熟练，不能损伤了它们呀！
植物组织培养流程图及注意事项
嘿呀！以下就是植物组织培养的流程图及注意事项啦！
首先咱们来说说流程图哈！
1.准备阶段：哎呀呀，这可得把各种器具都准备齐全呢！像培养皿、培养基、消毒工具等等，一个都不能少呀！
2.外植体选取：哇，这可重要啦！得挑那些健康、无病害的部位，你说是不是？
3.消毒处理：这一步可不能马虎哟！要用合适的消毒剂，把外植体好好消消毒，不然细菌病毒啥的可就捣乱啦！
植物组织培养实验基本步骤
植物组织培养实验基本步骤
1. 材料准备：准备所需的植物材料和培养基。
2. 消毒：消毒植物材料，如叶片、茎段等，以防止细菌和真菌的污染。
3. 器具消毒：消毒实验所需的培养瓶、显微镜片、剪刀等器具。
4. 取材料：用消毒过的器具将所需植物材料取出，例如茎段。
5. 材料处理：将植物材料进行预处理，如切割、消毒或暴露在光线下以诱导发芽等。
6. 培养基制备：根据实验需求准备培养基，培养基是一种富含营养物质的液体或凝胶。
7. 培养瓶准备：将培养基倒入消毒过的培养瓶中，通常是将液体培养基加入到瓶中，然后用胶状凝胶封上。
8. 材料接种：将植物材料放入培养瓶中的培养基中，通常是将茎段插入培养基中或将植物组织切割成小块直接放入培养基中。
9. 培养条件调控：设置适宜的光照、温度、湿度和气体浓度等
培养条件，以促进植物组织的生长和分化。
10. 观察和记录：随着时间的推移，观察植物组织的发育和生长情况，并记录相关的数据。
11. 分离和传代：当组织生长到一定程度时，可以将其分离成更小的部分，并继续在新的培养基上进行培养，以扩增植物组织。
12. 实验结束：当实验达到预定的目标或需要终止时，停止培养，处理培养瓶和实验残余物，如进行消毒处理。
需要注意的是，以上步骤只是植物组织培养实验的一般步骤，具体的实验步骤和条件可能因实验目的和植物种类的不同而有所变化。
植物组织培养的七大步骤
植物组织培养的七大步骤植物组织培养是一种通过体外条件、培养基和植物激素等手段，从植物的细胞或组织片段中培养出完整植株或其它的植物器官的生物技术方法。
它在现代生物技术和农业生产中有着广泛的应用。
下面将详细介绍植物组织培养的七大步骤。
步骤一：组织材料的选择与处理植物组织培养的第一步是选择合适的组织材料。
组织材料可以是从植物的各个部位（如根、茎、叶）中获得的发育中组织片段或细胞。
在选择组织材料时，需要考虑到植物的种类、性别、生长期等因素。
同时，在取材时要注意保持材料的活性和无菌状态，以避免外部微生物的污染。
步骤二：材料的消毒和无菌处理在进行植物组织培养之前，必须对组织材料进行消毒和无菌处理。
常用的消毒方法有热处理和化学消毒法。
热处理是将组织材料放入含有消毒剂的培养基中，在适当的温度下进行反复处理，以达到杀灭细菌和真菌孢子的目的。
化学消毒法是使用一些消毒剂如过氧化氢、酒精等对组织材料进行处理，以达到无菌状态。
步骤三：培养基的配制与过滤培养基是植物组织培养的基础，它提供了植物生长所需的营养和生长因子。
培养基的配制需要根据组织材料的特性和需求来确定。
一般来说，培养基包括有机营养物、无机盐、糖类、维生素、植物激素等成分。
配制好的培养基需要进行过滤，以去除其中的颗粒物和微生物，保证培养基的无菌状态。
步骤四：培养体外的组织将经过消毒和无菌处理的组织材料，放在含有适当培养基的培养容器中。
培养容器可以是培养皿、瓶子或装载体。
然后，将培养容器放在恒温恒湿的光照条件下进行培养。
在培养过程中，需要定期检查培养容器的状态，确保培养基和气氛的正常。
步骤五：选择培养因子和激素在组织培养过程中，可以根据需要添加不同的培养因子和激素，以促进组织的生长和发育。
常见的培养因子包括生长素、细胞分裂素、维生素等，它们可以提供植物生长所需的营养物和调节植物生长的信号。
激素包括植物生长素、植物激素、生长激素等，它们可以调节植物的生长和发育，促进组织的分化和再生。
植物组织培养的一般流程
植物组织培养的一般流程一个完整的植物组织培养过程一般包括以下几个步骤：1）准备阶段（然根据已成功培养的相近植物资料，结合实际制订出切实可行的培养方案。
查阅相关文献，并经高压灭菌或过后根据实验方案配制适当的化学消毒剂以及不同培养阶段所需的培养基，滤除菌后备用。
2）外植体选择与消毒（将消毒后的外然后进行消毒处理。
选择合适的部位作为外植体，采回后经过适当的预处理，接种到初代培养基上。
植体在无菌条件下切割成一定大小的小块，或剥离出茎尖，挑出花药，）初代培养（3促使外植体中已分化的细胞脱分化形成愈伤接种后的材料置于培养室或光照培养箱中培养，然后将愈伤组织转移到分化培养基分化成不同的器官组织，或顶芽、腋芽直接萌发形成芽。
原基或形成胚状体，最后发育形成再生植株。
（4）继代培养当芽苗繁殖到一分化形成的芽、原球茎数量有限，采用适当的继代培养基经多次切割转接。
进行脱毒苗培养的需提前定数量后，再将一部分用于壮苗生根，另一部分保存或继续扩繁。
进行病毒检测。
5）生根培养（提高生长素浓多数无根，此时可降低细胞分裂素浓度或不加，刚形成的芽苗往往比较弱小，度，促进小苗生根，提高其健壮度。
6）炼苗移栽（选择生长健壮的生根苗进行室外炼苗，待苗适应外部环境后，再移栽到疏松透气的基质中，注意保温、保湿、遮荫，防止病虫危害。
当组培苗完全成活并生长一定大小后，即可移向大田用于生产。
P P 1 、二、单项选择题1. 在衡量杂种优势（H ）时，超中优势的计算方法为（[F 1 -(P 1 +P A. H ＝2 分别表示两亲本的性状平均值，F 1 为杂种一代的性状平均值）：[F 1 -(P 1 +P 2 )/2]/(P 1 +P 2 )/2 D. H ＝2 )/2]/(P 1 -P 2 )/2 B. H ＝(F 1 -P 1 )/P 1 C. H ＝(F 1 -P 2 )/P 2层细胞发生突变，则下列器官或组织会发L II 2. 根据植物梢端组织发生层学说，如果生变异的是：中柱C. 不定根D. ．表皮A B. 种子3. 对于孢子体型自交不亲和而言，下列基因型的杂交组合能产生后代的是：S 1 S 2 B ．S 1 S 2 ×S 1 S 3 C ．S 1 S 2 ×．A S 1 S 2 ×S 2 S 3 D ．S 1 S 2 ×S 3 S44. 原始群体性状差异较大的异花授粉园林植物，实生选种时一般采用：A ．一次单株选择B ．一次混合选择C ．混合－单株选择D ．单株－混合选择5. 现有两种菊属植物，其染色体组类型分别为AABB 和CC ，则将它们进行体细胞杂交获得的谐和细胞杂种染色体组类型应该为： A. AABB B. ABC C. AABBCC D.CC6. 下列射线中，哪一种属于可以引起物质电离的电磁波？A ．X 射线B ．β射线C ．紫外线D ．激光7. 园林植物的多倍体与二倍体相比，一般会表现为：A ．气孔增多B ．花大色艳C ．适应性减弱D ．结实率增加8. 常用的化学诱变剂EMS （甲基磺酸乙酯）是一种：A ．碱基类似物B ．烷化剂C ．抗生素D ．生长调节物质9. 在下列有性杂交方式中，被称为双交的是：A ．(A ×B) ×(C ×D)B ．[(A ×B) ×B] ×BC ．A ×BD ．[(A ×B) ×C] ×D10. 对于繁殖系数较高的草花而言，有时为了加速其选种进程，下列哪个程序或圃地可以省略？A ．株系圃B ．品种比较预备试验圃C ．品种比较试验圃D ．区域试验三、填空题（每空0.5 分，共15 分）1. 园林植物品种应具备的三个基本特征是：___ 、___ 和___。
植物组织培养的六大步骤
植物组织培养的六大步骤植物组织培养是指通过体外不断培养植物细胞、组织和器官，以研究其发育过程和生物学特性，也包括人工繁殖植物和生产植物次生代谢产物。
在植物组织培养的过程中，需要进行一系列的步骤，下面将详细介绍植物组织培养的六大步骤。
第一步：选择适宜的材料植物组织培养需要选取适宜的材料作为起始材料，这通常是从植物体中选择健康、无病虫害并具有较高再生能力的组织部分，如茎、叶片、种子等。
同时，还应注意选择具有较高再生能力的植物品种或种质资源，以提高培养成功率。
第二步：消毒处理为了减少外界微生物的污染，必须对选取的材料进行消毒处理。
常用的消毒方法有酒精消毒、双氧水消毒、高温高压消毒等。
消毒后的材料在无菌操作下移到无菌培养室，准备进行下一步的操作。
第三步：组织分离和培养经过消毒处理的材料，可以通过组织分离的方法来获得组织的单个细胞或小块组织。
常用的组织分离方法有切割法、振荡法、酶解法等。
分离得到的组织或细胞可以直接进行培养，也可以在培养基中添加适当的生长调节剂，以促进组织的增殖和分化。
第四步：培养基的选择和配置培养基是植物组织培养中重要的因素之一，它为植物细胞提供养分和生长因子，同时调控其生长和分化。
培养基通常由无机盐、有机物质、糖类、维生素、生长调节剂等组成。
根据需要，培养基可以分为基础培养基和不同类型的专用培养基。
基础培养基通常为MS培养基或白培养基，而专用培养基则针对不同的组织和目的进行调配。
第五步：培养条件的调控和优化在植物组织培养的过程中，培养条件的调控和优化对细胞和组织的生长和分化起着至关重要的作用。
光照、温度、湿度、pH值以及培养物的搅拌等因素都需要合理控制和调节。
此外，根据不同类型的组织和目的，还需要添加适量的生长调节剂、抗生素和其他辅助因子。
第六步：再生植株的分离和繁殖最后一步是将培养的组织或细胞分离出来，得到再生植株。
这需要将培养物转移到含有较稀释生长因子的培养基上，以便干扰物的去除和适度延长培养时间。
植物组织培养步骤
植物组织培养概念（广义）又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
植物组织培养概念（狭义）指用植物各部分组织，如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
组织培养的步骤一、培养基配制配制培养基有两种方法可以选择，一是购买培养基中所有化学药品，按照需要自己配制；二是购买商品的混合好的培养基基本成分粉剂，如MS、B5等。
自己配制可以节约费用，但浪费时间、人力、且有时由于药品的质量问题，给实验带来麻烦。
就目前国内的情况看，大部分还是自己配制。
为了方便起见，现以MS培养基为例介绍配置培养基的主要过程。
1、配制几种母液（1）配制MS大量元素母液一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。
分别称取NH4NO3 165g KH2PO4 17gKNO3 190g CaCl2·2H2O 44gMgSO4·7H2O 37g各自配成1L的母液。
倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。
（2）配制MS微量元素母液一般将微量元素配制成100倍母液。
依次称取KI 0.083g Na2MoO4·2H2O 0.025gH3BO3 0.62g CuSO4·5H2O 0.0025gMnSO4·H2O 1.69g CoCl2·6H2O 0.0025gZnSO4·7H2O 0.86g配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。
CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O 由于称取量很小，如果天平精确度没有达到万分之一，可先配成调整液。
分别称取CuSO4·5H2O 0.05g CoCl2·6H2O 0.05g各自配成100ml的调整液，然后取5ml就还有0.0025g的量。
植物组织培养技术的过程
植物组织培养技术的过程一、材料准备在进行植物组织培养前，首先需要准备培养基、植物材料和培养器具等。
培养基是植物生长和发育所需的营养物质，通常包括无机盐、有机物、植物生长激素和固化剂等。
植物材料可以是植物的种子、茎段、叶片等，要选择健康、无病虫害的材料。
培养器具要进行高温高压灭菌，以确保无菌条件。
二、无菌处理植物组织培养必须在无菌条件下进行，以防止外来微生物的污染。
无菌处理包括无菌操作台的准备、培养器具的灭菌和植物材料的表面消毒。
无菌操作台是一个密闭的工作区域，通过高效的过滤器和紫外线杀菌灯来保持无菌环境。
培养器具可以通过高温高压灭菌或化学消毒的方式进行无菌处理。
植物材料的表面消毒可以用漂白粉或酒精进行处理。
三、外植体切割外植体是指植物体中用于培养的组织或细胞，可以是茎段、叶片、花药等。
外植体切割是将植物材料切割成适当大小的片段，以便于培养和繁殖。
切割时要注意保持无菌操作，避免污染。
四、培养基配置培养基的配制是植物组织培养的关键步骤之一。
根据不同的培养目的和植物材料的特性，可以选择不同类型的培养基配方。
常用的培养基有MS培养基、B5培养基等。
在配制培养基时，要按照一定的比例将无机盐、有机物、植物生长激素和固化剂等加入到蒸馏水中，并进行搅拌和调pH值。
五、组织培养组织培养是将外植体培养在含有适当营养物质的培养基上，通过调控培养基中植物生长激素的浓度和比例，促进外植体的生长和分化。
培养过程中要注意控制培养基的温度、光照和湿度等环境因素，以及培养器具的无菌操作。
培养时间的长短和外植体的生长状态有关，通常需要数周至数个月的时间。
六、分化和增殖在组织培养过程中，外植体会经历分化和增殖的过程。
分化是指外植体的细胞在培养基中逐渐发育成不同的组织和器官，如根、茎、叶等。
增殖是指外植体的细胞在培养基中不断分裂和增殖，形成新的植株。
分化和增殖的过程可以通过调控培养基中植物生长激素的浓度和比例来实现。
七、移栽和生根当外植体在培养基上分化和增殖到一定程度后，可以进行移栽和生根。
植物组织培养的完整过程
植物组织培养的完整过程1.选择适宜的母体植物：选择具有优良性状和抗病虫害能力的母体植物，从中选择健康的叶片、茎段等组织作为外植体。
2.外植体的准备：将母体植物采集的叶片或茎段进行无菌处理，去除表面杂菌和泥沙，然后用75%酒精或漂白粉消毒外表。
3.外植体的切割：将无菌环境下的外植体切割成小片，大小约为0.5-1cm，同时尽量保持外植体的干燥，以防止外植体内部水分过多。
4.外植体的接种：将切好的外植体小片接种在含有植物生长激素的无菌培养基上。
培养基通常由无机盐溶液、有机源、糖和植物生长激素等组成，植物生长激素的种类和浓度会影响到后续培养过程中的分化和增殖。
5.分化：外植体接种到培养基后，会经历分化阶段，外植体的组织逐渐增殖和分化为不同种类的细胞，形成生长点。
6.增殖：通过定期的次级培养，子培养、分生器、病毒消除等手段，将外植体中的细胞不断分化和增殖，以便大量生产幼苗。
7.再分化：经过增殖后的外植体，可以再次进行分化，形成茎尖、腋芽或花蕾等器官，以便进一步培养和繁殖。
8.根的诱导：在合适的培养条件下，外植体可以诱导生成根系，这是为了使外植体脱离体外培养环境，继续生长的必要步骤。
9.移栽：当幼苗的根系已经发达足够，可以将外植体移栽到含有适宜营养成分的固体培养基上或直接移植到土壤中，进行实地管理和生长。
10.过程控制：在整个培养过程中，要控制好环境条件，例如温度、湿度和光照等，以保证培养的成功率。
11.病毒清除：植物组织培养中经常伴随着病毒感染问题，可以通过不同的方法对外植体和培养基进行检测和清除，以保证获得健康的植株。
总的来说，植物组织培养是一个复杂的过程，需要严格的无菌操作和合适的培养条件。
它广泛应用于植物的繁殖、遗传改良、新品种选育以及病毒和细菌的清除工作中，对推动植物学研究和农业生产具有重要的意义。
植物组织培养的完整过程
植物组织培养的完整过程植物组织培养是一种利用植物细胞和组织在无菌条件下生长和繁殖的技术。
它可以用于研究植物的生理、生化和遗传特性，也可以用于繁殖珍稀濒危植物、改良农作物品种等。
下面将介绍植物组织培养的完整过程。
1. 培养基的配制需要准备培养基。
培养基是一种含有营养物质和激素的液体或固体介质，用于供给植物细胞和组织生长所需的营养物质。
培养基的配制根据不同的植物和目的而有所不同，但一般包括无菌水、糖类、植物激素、无机盐和维生素等。
2. 材料的采集和处理接下来，需要采集植物材料，并对其进行处理。
一般情况下，选择健康的植物器官，如叶片、茎尖、芽等作为培养材料。
采集后，要进行表面消毒，以杀灭植物表面的细菌和真菌。
3. 植物材料的切割和接种将经过消毒处理的植物材料切割成小块或小段，然后将其接种到含有培养基的培养器皿中。
在接种过程中，要保持无菌操作，以防止细菌和真菌的污染。
4. 培养条件的控制接种完成后，将培养器皿置于恒温培养箱中，并控制适宜的温度、湿度和光照条件。
不同植物对于培养条件的要求有所不同，因此需要根据具体情况进行调节。
5. 营养物质的供给在培养过程中，需要定期给培养基补充新的营养物质。
一般情况下，每隔一段时间就需要更换培养基或添加新的营养物质，以保证植物细胞和组织的正常生长和分化。
6. 组织的增殖和分化经过一段时间的培养，植物组织开始进行增殖和分化。
在培养基中含有适量的激素，可以促进细胞分裂和分化。
根据所需的目的，可以通过调节培养基中激素的种类和浓度来控制组织的增殖和分化。
7. 植株的生长和繁殖当组织增殖和分化达到一定程度后，可以将其转移到含有适量营养物质的新培养基中，促进植株的生长和繁殖。
在此过程中，还需要进行适当的剪枝和调整，以控制植株的形态和生长速度。
8. 确认培养物的纯度和稳定性在植物组织培养过程中，可能会出现细菌和真菌的污染，或者不同种植物的混合。
因此，在植株生长和繁殖后，需要对培养物进行纯化和鉴定，以确保其纯度和稳定性。
植物组织培养的六大步骤
植物组织培养的六大步骤植物组织培养是近年来发展较快的一种生物技术，其重要性逐渐得到人们的认识和重视。
作为一种综合性的技术，它涉及到多个方面的知识和技能，在实施过程中需要经过一系列的步骤，下面我们简单介绍一下植物组织培养的六大步骤。
第一步，组织获取。
植物组织培养需要从植物体中获取适合培养的组织物质，这可以通过很多方法实现，例如从植物的茎、根、叶子、花粉和种子等不同部位取得。
一般情况下，采用茎尖或幼嫩的叶片为原料较为合适。
第二步，表面消毒。
从植物中获取的组织物质可能存在细菌、真菌、病毒等污染物，因此需要进行表面消毒处理，以保证无菌条件。
消毒的方法一般使用86%乙醇、次氯酸钠、过氧化氢等化学药剂，先用药液浸泡若干时间，再反复冲洗至干燥即可。
第三步，组织切割。
经过表面消毒后，将组织切割成小片、小段等形式，这种切割过程需要技术娴熟的操作，以保持细胞完整性，从而提高培养成功率。
第四步，营养基选择。
营养基是植物组织培养的重要基础，因为它可以为细胞提供必需的营养和生长因子，从而促进细胞生长分裂。
选择合适的营养基可以根据培养细胞类型和优化实验条件等进行，例如常用的MS、B5、WPM等营养基。
第五步，添加生长因子。
生长因子是植物组织培养中不可或缺的重要物质，它可以促进细胞分裂和分化。
在营养基中添加适宜的生长因子可以最大程度地促进组织生长。
第六步，环境条件控制。
植物组织培养的结果也与环境条件有关，需要控制培养的温度、湿度、光强度等因素，使其处于最适宜的条件下生长发育。
根据不同的培养要求，可以调整培养箱内的温湿度条件，或者使用光照箱等设备进行光照调节。
以上就是植物组织培养的六个步骤，每一步都显得格外重要。
在实施过程中，需要严格遵循操作规程，注意消毒、防护和注意事项等，以保证实验的正常进行。
植物组织培养的工作流程
植物组织培养的工作流程植物组织培养是一种常见的生物技术方法，用于研究植物生长发育、遗传转化和产生新品种等。
本文将介绍植物组织培养的一般工作流程。
1. 选择母本植物植物组织培养的第一步是选择合适的母本植物。
母本植物应具有所需的性状和遗传特性，通常选择优良的品种或种质资源作为母本。
此外，植物组织培养还可以利用野生植物进行基因资源的保护和利用。
2. 提取组织样品从母本植物中提取组织样品是植物组织培养的关键步骤。
样品通常包括茎、叶、种子、花等部位，根据具体的实验目的进行选择。
提取样品时要注意无菌操作，以避免外源性微生物的污染。
3. 表面消毒为了去除样品表面的细菌和真菌，需要将样品进行表面消毒处理。
常用的消毒剂包括70%的乙醇或含有一定浓度的次氯酸钠溶液。
消毒时间和浓度应根据具体材料的特性进行调整。
4. 建立无菌培养基无菌培养基是植物组织培养的基础，它提供了植物生长所需的营养物质和激素。
根据不同的实验目的，可以选择不同种类和配方的培养基。
常用的培养基包括MS培养基、B5培养基等。
5. 培养组织样品将经过消毒处理的组织样品转移到无菌培养基上进行培养。
通常使用无菌操作箱或无菌室进行操作，以确保无菌条件。
培养过程中需要控制培养基的温度、光照和湿度等条件，以促进组织生长和增殖。
6. 分化和再生在培养基上，组织样品会经历分化和再生的过程。
通过调整培养基的激素含量和类型，可以控制组织样品的分化方向和再生能力。
例如，增加激素的浓度可以促进根的生成，减少激素的浓度则有利于芽的发生。
7. 鉴定和筛选经过一段时间的培养，组织样品会产生不同的形态和表型。
在此阶段，可以对组织样品进行鉴定和筛选。
鉴定可以通过形态学、生理学和分子生物学等手段进行，以确定组织样品的特性和品质。
8. 根据实验目的进行后续处理根据具体的实验目的，可以对培养的组织样品进行进一步的处理。
例如，可以进行基因转化、组织分化、植株再生等实验，以获得所需的研究结果。
植物组织培养的工作流程
植物组织培养的工作流程
植物组织培养是一种常用的植物繁殖和研究方法，其工作流程包括以下几个主要步骤：
1.材料准备：选择适宜的原植物材料，如茎段、叶片、种子等作为外植体。
确保材料的新鲜性和无病原体污染。
2.表面消毒：将外植体进行表面消毒，以去除表面的微生物和杂质。
这可以通过在消毒剂（如酒精、次氯酸钠等）中浸泡、搅拌等方法进行。
3.分离和切割：根据实验需求，将外植体切割成适当大小的组织片段。
可以使用手工切割、离心分离或显微镜下的操作等方法进行。
4.培养基制备：制备适合植物生长和繁殖的培养基。
培养基通常包括基本盐、有机物、维生素、植物激素和其他添加剂。
根据实验需求可以调整培养基成分。
5.外植体接种：将分离和切割好的外植体进行培养基中的接种。
接种可以通过将外植体直接放置于培养基上或将其插入培养基中的凝胶（如琼脂）中进行。
6.培养条件控制：对培养的温度、光照、湿度和气体条件进行控制。
这些条件可以根据不同植物的生长习性和实验要求进行调整。
7.植物增殖和分化：在培养基中，外植体会通过分裂、再生和分化等过程进行植物增殖和不同类型的器官分化。
植物激素的添加和培养条件的调整可以影响生长和分化的过程。
8.增殖体移栽：将培养的增殖体转移到新的培养基或固体培养基中，以促进继续生长和发育。
9.实验分析：通过观察、记录和分析培养组织的生长情况、形态特征、遗传表达等参数，进行实验结果的分析和研究。
植物组织培养的步骤
植物组织培养的流程：第一步，将采来的植物材料除去不用的部分，将需要的部分仔细洗干净，如用适当的刷子等刷洗。
把材料切割成适当大小，即灭菌容器能放入为宜。
置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时，冲洗时间视材料清洁程度而宜。
易漂浮或细小的材料，可装入纱布袋内冲洗。
流水冲洗在污染严重时特别有用。
洗时可加入洗衣粉清洗，然后再用自来水冲净洗衣粉水。
洗衣粉可除去轻度附着在植物表面的污物，除去脂质性的物质，便于灭菌液的直接接触。
当然，最理想的清洗物质是表面活性物质—吐温。
第二步是对材料的表面浸润灭菌。
要在超净台或接种箱内完成，准备好消毒的烧杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、无菌水、手表等。
用70%酒精浸10～30秒。
由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用，加之70%酒精穿透力强，也很易杀伤植物细胞，所以浸润时间不能过长。
有一些特殊的材料，如果实、花蕾、包有苞片、苞叶等的孕穗，多层鳞片的休眠芽等等，以及主要取用内部的材料，则可只用70%酒精处理稍长的时间。
处理完的材料在无菌条件下，待酒精蒸发后再剥除外层，取用内部材料。
第三步是用灭菌剂处理。
表面灭菌剂的种类较多，可根据情况选取1～2种使用见表。
第四步是用无菌水涮洗，涮洗要每次3min左右，视采用的消毒液种类，涮洗3～10次左右。
无菌水涮洗作用是免除消毒剂杀伤植物细胞的副作用注意：①酒精渗透性强，幼嫩材料易在酒精中失绿，所以浸泡时间要短，防止酒精杀死植物细胞。
②老熟材料，特别是种子等可以在酒精中浸泡时间长一些，如种子可以浸泡5分钟。
③升汞的渗透力弱，一般浸泡10分钟左右，对植物材料的杀伤力不大。
④漂白粉容易导致植物材料失绿，所以对于幼嫩材料要慎用。
⑤在消毒液中加入浓度为0.08～0.12%的吐温20或80（一种湿润剂），可以降低植物材料表面的张力，达到更好的消毒效果。
将植物组织培养流程
附录一
植物组织培养流程及相应图片
1、配制培养基并进行高温蒸汽灭菌20min；
2、接种工具以及超净工作台灭菌：接种工具用高温蒸汽灭菌，超
净工作台用紫外灯灭菌30min；
3、外植体消毒：首先用流水冲洗外植体，用酒精灭菌30s，再用
0.1%升汞消毒10min，最后用无菌蒸馏水冲洗4-5次；
4、用75%酒精对手进行灭菌消毒；
5、接种：用剪刀剪取1cm2左右的叶片或者1cm长的茎段，迅速
放入三角瓶中，并立即封口；
6、将接种的三角瓶放入组培室中进行培养，大约2周后（时间根
据培养条件不同而不同）长出愈伤组织，如图1、2；
图1 西瓜茎段愈伤组织图2 烟草叶片愈伤组织7、长出愈伤组织后，即可进行继代和分化培养，具体流程与接种
一致，只是将外植体换成愈伤组织，并注意无菌条件的控制，如图3、4；
图3 西瓜愈伤分化 图4烟草愈伤分化 8、 将继代分化的愈伤组织放入适宜的条件下进行光照培养，诱导
出芽和根，如图5、6
图5 西瓜诱导发芽 图6西瓜诱导发芽生根
9、 将诱导出根和芽的植株进行练苗； 10、 练苗后的植株移栽到自然条件下，让其自然生长繁殖，最终达
到植物组织培养的目的。
植物组织培养的六大步骤
植物组织培养的六大步骤植物组织培养是利用植物体内的细胞和组织的再生能力，通过体外培养的方法，使其生长、分化和发育，用于研究植物生长发育规律、生理生化过程等方面。
其具体操作步骤主要包括以下六个方面。
一、材料准备植物组织培养需要用到多种材料，包括培养基、植物组织、培养器具等。
其中，培养基是关键材料之一，是植物细胞和组织在体外生长发育所需的必需物质，需要根据不同的植物种类和培养目的选择。
植物组织要求新鲜、健康、无病虫害，通常采自幼苗或嫩枝等部位。
培养器具需要消毒处理，以避免细菌和真菌污染。
二、材料处理植物组织培养前需要进行材料处理。
首先是组织分离，将植物幼苗或嫩枝等部位分离出需要的组织。
接下来是表面消毒，将分离得到的组织进行消毒处理，以避免细菌和真菌污染。
最后是组织切割，将处理好的组织切成适当大小的小块，以利于培养。
三、组织接种组织接种是将处理好的组织块放置在培养基上，使其能够生长分化。
组织接种需要注意接种密度和接种方式，以避免组织过于密集或不平均生长。
四、培养条件调节植物组织培养需要保持适宜的培养条件，包括光照、温度、湿度、气体浓度等。
不同的植物种类和培养目的需要不同的培养条件，需要进行适当调节。
五、观察和记录植物组织培养需要进行观察和记录，以了解组织生长和分化情况。
观察内容包括组织外观、生长速度、颜色变化、分化情况等。
记录的内容应详细、准确，以便对培养过程进行分析和总结。
六、维护和传代植物组织培养需要进行维护和传代，以保持组织的生长和分化。
维护包括添加适当的营养物质、调节培养条件等，传代则是将生长好的组织块移植到新的培养基上，使其继续生长分化。
植物组织培养是一项复杂的实验操作，需要严格遵循操作步骤和注意事项，才能保证培养效果和实验结果的准确性和可靠性。
植物组织培养步骤
植物组织培养步骤公司内部编号：（GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-概念（广义）又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织.器官或，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
植物组织培养概念（狭义）指用植物各部分组织，如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
组织培养的步骤一、培养基配制配制培养基有两种方法可以选择，一是购买培养基中所有化学，按照需要自己配制；二是购买商品的混合好的培养基基本成分粉剂，如MS、B5等。
自己配制可以节约费用，但浪费时间、人力、且有时由于药品的质量问题，给实验带来麻烦。
就目前国内的情况看，大部分还是自己配制。
为了方便起见，现以为例介绍配置培养基的主要过程。
1、配制几种母液（1）配制MS大量元素母液一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。
分别称取NH4NO3 165g KH2PO4 17gKNO3 190g CaCl2·2H2O 44gMgSO4·7H2O 37g各自配成1L的母液。
倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。
（2）配制MS微量元素母液一般将微量元素配制成100倍母液。
依次称取KI Na2MoO4·2H2OH3BO3 CuSO4·5H2OMnSO4·H2O CoCl2·6H2OZnSO4·7H2O配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。
CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O 由于称取量很小，如果精确度没有达到万分之一，可先配成调整液。
分别称取CuSO4·5H2O CoCl2·6H2O各自配成100ml的调整液，然后取5ml就还有的量。
（3）配制MS有机母液一般配制成100倍MS有机母液。
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植物组织培养概念(广义)乂叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
植物组织培养概念(狭义)指用植物各部分组织，如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
组织培养的步骤一、培养基配制配制培养基有两种方法可以选择，一是购买培养基中所有化学药品，按照需要自己配制；二是购买商品的混合好的培养基基本成分粉剂，如MS B5等。
自己配制可以节约费用，但浪费时间、人力、且有时由丁药品的质量问题，给实验带来麻烦。
就目前国内的情况看，大部分还是自己配制。
为了方便起见，现以MS 培养基为例介绍配置培养基的主要过程。
1、配制几种母液(1) 配制MSfc!元素母液一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。
分别称取NH4NO3 165g KH2PO4 17g KNO3 190g CaCl2・ 2H2O 44g MgSO4 7H2O 37g各自配成1L的母液。
倒入1L试剂瓶中，存放丁冰箱中。
(2) 配制MSa量元素母液一般将微量元素配制成100倍母液。
依次称取KI 0.083g Na2MoO4 - 2H2O 0. 025gH3BO3 0.62g CuSO4 5H2O 0.0025gMnSO4 H2O 1.69g CoCl2 - 6H2O 0.0025gZnSO4 7H2O 0.86g配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放丁冰箱中。
CuSO4 5H2O和CoCl2・6H2。
由丁称取量很小，如果天平精确度没有达到万分之一，可先配成调整液。
分别称取CuSO4 5H2O 0.05g CoCl2 - 6H2O 0.05g各自配成100ml的调整液，然后取5ml就还有0.0025g的量。
(3) 配制MSt机母液一般配制成100倍MS＜机母液。
依次称取肌醇10g 盐酸硫胺素(VB1) 0.01g烟酸0.05g 甘氨酸0.2g盐酸毗哆醇(VB6) 0.05g配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放丁冰箱中。
(4) 配制MS铁盐母液一般配制成100倍MS铁盐母液。
依次称取EDTAT钠3.73g FeSO4 7H2O 2.78g配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放丁冰箱中。
所以MS母液有5种大量元素母液，加上MS微量元素母液、MS有机母液和MS铁盐母液，共8种母液。
激素母液的配制各种生长素和细胞分裂素要单独配制，不能混合在一起，生长素类一般要先用少量95%勺洒精或1当量的NaOH容解，细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解，然后再加蒸僻水定容。
一般取100mg配成100ml母液。
2、配制培养基以配置1L MS培养基为例，按顺序进行如下操作：(1) 先在烧杯中放入一些蒸僻水。
(2) 分别取上面八种母液10ml倒入。
(3) 一般称取30g蔗糖倒入，搅拌溶解。
(4) 加蒸僻水用量筒定溶至1L。
(5) 按设计好的方案添加各种激素，由丁激素的用量很小，而且激素对组培植物的生长至关重要。
所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取，减少误差。
(6) 用精密试纸或酸度计调整PH至5.7-5.8。
(有条件的话使用酸度计，比较精确) 可配1当量的HCL和1 当量的NaOH用来调溶液PH值。
1当量HCL配制：用量筒量取8.3ml配成100ml溶液。
1当量NaOH配制：称取NaOH 4g配成100ml溶液。
(7) 称取5g左右琼脂粉(质量好的琼脂粉)，倒入上面配好的溶液中，放在电炉上加热至沸腾，直到琼脂粉熔化。
(8) 稍微冷却后，分装入培养容器中。
无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口，用橡皮筋或绳子扎紧。
(9) 放入消蠹灭菌锅灭菌，灭菌20分钟左右。
(10) 灭菌后从灭菌锅中取出培养基，平■放在实验台上令其冷却凝固。
二、灭菌灭菌是组织培养重要的工作之一。
初学者要活楚有菌和无菌的范畴。
有菌的范畴是：凡是暴露在空气中的物体，接触自然水源的物体，至少它的表面都是有菌的。
依此观点，无菌室等未处理的地方、超净台的表面、简单煮沸的培养基、我们使用的刀、剪在未处理之前、我们身体的整个外表及与外界相连的内表，如整个消化道、呼吸道，即我们呼出的气体、培养容器无论洗得多干净等等都是有菌的。
这里所指的菌，包括细菌、真菌、放线菌、藻类及其他微生物。
菌的特点是：极小，肉眼看不见。
无处不在，无时不有，无孔不入。
在自然条件下忍耐力强，生活条件要求简单，繁殖力极强，条件适宜时便可大量滋生。
无菌的范畴是：经高温灼烧或一定时间蒸煮过后的物体，经其他物理或化学的灭菌方法处理后的物体（当然这些方法必须已经证明是有效的），高层大气、岩石内部、健康的动、植物的不与外部接触的组织内部，强酸强碱，化学元素灭菌剂等表面和内部都是无菌的。
从以上可以看出：在地球表面无菌世界要比有菌世界小的多。
灭菌是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，即把所有生命的物质全部杀死。
与此相关的一个概念是消蠹，它指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用，显然经过消蠹，许多细菌芽抱、霉菌厚垣抱子等不会完全杀死，即由丁在消蠹后的环境里和物品上还有活着的微生物，所以通过严格灭菌的操作空间（接种、超净台等）和使用的器血，以及操作者的衣着和手都不带任何活着的微生物。
在这样的条件下进行的操作，就叫做无菌操作。
植物组织培养对无菌条件的要求是非常严格的，甚至超过微生物的培养要求，这是因为培养基含有丰富的营养，稍不小心就引起杂菌污染。
要达到彻底灭菌的目的，必须根据不同的对象采取不同的切实有效的方法灭菌，才能保证培养时不受杂菌的影响，使试管苗能正常生长。
常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类，即：物理方法如干热（烘烧和灼烧）、湿热（常压或高压蒸煮）、射线处理（紫外线、超声波、微波）、过滤、活洗和大量无菌水冲洗等措施；化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高铤酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、洒精化学药品处理。
这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选用。
1、培养基用湿热灭菌培养基在制备后的24小时内完成火菌工序。
周压火菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。
在0.1MPa的压力下，锅内温度达121C。
在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽抱。
注意完全排除锅内空气，使锅内全部是水蒸气，灭菌才能彻底。
高压灭菌放气有几种不同的做法，但目的都是要排净空气，使锅内均匀升温，保证灭菌彻底。
常用方法是：关闭放气阀，通电后，待压力上升到0.05MPa 时，打开放气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。
关阀再通电后，压力表上升达到0.1MPa时，开始计时，维持压力0.1-0.15MPa , 20 分钟。
按容器大小不同，保压时间有所不同，见表。
该表所列数字是彻底灭菌很保险的数字，如果容器体积较大，但是放置的数量很少，也可以减少时间。
三、接种接种时由丁有一个敞口的过程，所以是极易引起污染的时期，这一时期主要由空气中的细菌和工作人员本身引起，接种室要严格进行空间消蠹。
接种室内保持定期用1%-3%勺高铤酸钾溶液对设备、墙壁、地板等进行搽洗。
除了使用前用紫外线和甲醛灭菌外，还可在使用期间用70%勺洒精或3%勺来苏儿喷雾，使空气中灰尘颗粒沉降下来。
无菌操作可按以下步骤进行：(1) 在接种4小时前用甲醛熏蒸接种室，并打开其内紫外线灯进行杀菌；(2) 在接种前20分钟，打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯；(3) 接种员先洗净双手，在缓冲问换好专用实验服，并换穿拖鞋等；(4) 上工作台后，用洒精棉球搽拭双手，特别是指甲处。
然后搽拭工作台面；(5) 先用洒精棉球搽拭接种工具，再将镶子和剪刀从头至尾过火一遍、然后反复过火尖端处，对培养也要过火烤干；(6) 接种时，接种员双手不能离开工作台，不能说话、走动和咳嗽等；(7) 接种完毕后要活理干净工作台，可用紫外线灯灭菌30分钟，若连续接种，每5天要大强度灭菌一次。
接种是将已消蠹好的根、茎、叶等离体器官，经切割或剪裁成小段或小块，放入培养基的过程。
现将接种前后的程序连贯地介绍。
无菌接种步骤：(1) 将初步洗涤及切割的材料放入烧杯，带入超净台上，用消直剂灭菌，再用无菌水冲洗，最后沥去水分，取出放置在灭过菌的纱布上或滤纸上。
(2) 材料吸干后，一手拿镶子、一手拿剪刀或解剖刀，对材料进行适当的切割。
如叶片切成0.5cm平方的小块；茎切成含有一个节的小段。
微茎尖要剥成只含1-2片幼叶的茎尖大小等。
在接种过程中要经常灼烧接种器械，防止交义污染。
(3) 用灼烧消蠹过的器械将切割好的外植体插植或放置到培养基上。
具体操作过程(以试管为例)是：先解开包口纸，将试管几乎水平拿着，使试管口靠近洒精灯火焰，并将管口在火焰上方转动，使管口里外灼烧数秒钟。
若用棉塞盖口，可先在管口外面灼烧，去掉棉塞，再烧管口里面。
然后用镶子夹取一块切好的外植体送入试管内，轻轻插入培养基上。
若是叶片直接附在培养基上，以放1-3块为宜。
至丁材料放置方法除茎尖、茎段要正放(尖端向上)夕卜，其他尚无统一要求。
接种完后，将管口在火焰上再灼烧数秒种。
并用棉塞，塞好后，包上包口纸，包口纸里面也要过火。
四、培养培养指把培养材料放在培养室(有光照、温度条件、无菌)里，使之生长，分裂和分化形成愈伤组织或进一步分化成再生植株的过程。
1、培养方法(1) 固体培养法即用琼脂固化培养基来培养植物材料的方法。
是现在最常用的方法。
虽然该方法设备简单，易行，但养分分布不均，生长速度不均衡，并常有褐化中蠹现象发生。
(2) 液体培养法即用不加固化剂的液体培养基培养植物材料的方法。
由丁液体中氧气含量较少，所以通常需要通过搅动或振动培养液的方法以确保氧气的供给，采用往复式摇床或旋转式摇床进行培养，其速度一般为50-100r/min ,这种定期浸没的方法，既能使培养基均一，乂能保证氧气的供给。
2、培养步骤(1) 初代培养初代培养旨在获得无菌材料和无性繁殖系。
即接种某些外植体后，最初的几代培养。
初代培养时，常用诱导或分化培养基，即培养基中含有较多的细胞分裂素和少量的生长素。
初代培养建立的无性繁殖系包括：茎梢、芽丛、胚状体和原球茎等。
根据初代培养时发育的方向可分为：1) 顶芽和腋芽的发育采用外源的细胞分裂素，可促进使具有顶芽或没有腋芽的休眠侧芽启动生长，从而形成一个微型的多枝多芽的小灌木丛状的结构。
在几个月内可以将这种丛生苗的一个枝条转接继代，重复芽苗增殖的培养，并且迅速获得多数的嫩茎。
然后将一部分嫩茎转移到生根培养基上，就能得到可种植到土壤中去的完整小植株。