高中生物 检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质课件

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2 ml组织样液
1 ml新配制的斐林试剂
5065℃水浴加热 约2min
浅蓝色
棕色
观察颜色变化 砖红色
【斐林试剂】：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05 g/mL的CuSO4溶液，使用前等体积混合均匀（生成浅蓝色 的Cu（OH）2悬浊液），现配现用（时间一长，Cu（OH） 2 沉淀在溶液底部无法发生反应。且需要水浴加热。
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还原糖的检测结果
斐林试剂与可溶性还原糖在水浴热的条件下，生成砖红色的 Cu2O沉淀。
-CHO+Cu(OH)2悬浊液 高中生物
检测生物组织-中C的O糖类O脂H肪和+蛋C白u质2O↓（砖红色）
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二、脂肪的检测 （1）选材：经浸泡去种皮的花生种子。 （2）检测过程： 苏三（苏丹Ⅲ）送了我一个橘黄色的胭脂（脂肪） 切片：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片。
紫色，说明鸡蛋清中有高中蛋生物白检测质生物存组织在中的。糖类脂肪和蛋白质
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蛋白质的检测结果 高中生物 检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质
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注意事项：
（1）如果用鸡蛋清作为材料，则必须进行充分稀释，否则反应 后的产物会粘固在试管内壁上，使反应不彻底，且试管不易洗 刷干净。 （2）【双缩脲试剂】：A液：0.1g/mL NaOH，B液：0.01g/mL CuSO4。先加A液后加B液，且B不能过量，不需要加热。 （3）过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而 掩盖生成的紫色。 （4）先加入A液2ml，摇匀；再加入B液3-4滴，摇匀。
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制备组织样液 黄豆组织样液（或鸡蛋清稀释液）
黄豆 浸泡
研磨
去皮、切片
过滤
鸡蛋
稀释
蛋清液
鸡蛋清稀释液
滤液
显色反应
向试管中注入 2ml组织样液
向试管中注入 2ml双缩脲试剂A
加入3-4滴双缩 脲试剂B
观察现象 观察颜色变化：无→紫色
结论：加入双缩脲试剂A后，颜色呈现为无色，加入B后，变为
第一章 细胞的分子组成
第三节 有机化合物及生物大分子
实验1：检测生物组织中的糖类、脂肪和 蛋白质
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实 有实肪验 机验和原 化：蛋理合检 白：物产某测 质生些生特化物定学组的试织颜剂中色能的反够应使糖。生类物、组脂织中的有关
水浴加热
①还原糖 + 斐林试剂
砖红色沉淀
色的Cu2O沉淀。因此，利用该反应，可证明样液中 含可溶性还原糖。
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
甲液乙液等量混合，现用现配，切不可分开滴 加，或者久置后才用。
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制备组织样液
砖红色的糖（还原糖）非（斐林试剂）常好吃
洗净、去皮、切块
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橘黄色小圆颗粒 即为脂肪颗粒
脂肪 + 苏丹Ⅲ（高或中生苏物丹检测Ⅳ生物）组织染中的液糖类脂肪和蛋橘白质黄色（或红色）
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注意事项：
（1）若用花生种子作实验材料，必须提前浸泡3～4小时，浸 泡时间短了，不容易切片，浸泡时间过长，则组织太软，切 下的薄片不易成形，切片要尽可能的薄。
选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央
染色：在薄片上滴加23滴苏丹Ⅲ染液，染色23min
制片
洗去浮色：用吸水纸吸去染液，滴加体积分数为50%的酒精12滴
制成临时装片：滴12滴蒸馏水，盖上盖玻片
镜检观察：在低倍镜下寻找到已着色的 圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。
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视野中 有橘黄 色颗粒
3-4滴双缩脲试剂B液，摇匀
2 ml组织样液
2 ml双缩脲试剂A液，摇匀
观察颜色变化
紫 色
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双缩脲≠双缩脲试剂
将尿素加热，两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。 反应式为:
双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）在碱性环境（NaOH）中 能和Cu2+作用生成紫色的络化物，这个反应叫做双缩脲反应。 蛋白质分子中含有的肽键结构与双缩脲结构相似，因此，蛋白 质也可与双缩脲试剂发生颜色反应。
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2mL 组织 样液
双缩脲试 剂A 2mL
双缩脲试 剂B 3-4滴
（创造碱性条件） （提供Cu2+）
无色
紫色
在碱性条件（NaOH）下，蛋白质中的肽键（—NH—CO—） 与Cu2＋作用生生紫色络合物。因此，操作时，应先加A再加B， 且A多B少，如果B过量， Cu2＋的蓝色就会遮盖生成的紫色。
梨或苹果
研磨
取5g，放入研钵中
过滤
滤液
（用单层纱布）
显色反应
向试管中加入 2ml组织样液
向试管中加入2ml 振荡混匀 50～65℃水
新配制的斐林试剂
浴加热2min
或本尼迪特试剂
观察现象 观察溶液颜色变化：浅蓝色→棕色→砖红色
结论：生成砖红色沉淀，说明梨或苹果中含有还原糖。
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②脂肪 + 苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液→橘黄色（或红色）
③蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色
④淀粉 + 碘→蓝色
化学试剂+有机化合物→特定的颜 色
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一、可溶性还原糖的检测：
（1）原理：还原糖 + 斐林试剂 水浴加热 砖红色沉淀。 （2）选材：苹果、梨、白萝卜。含糖量较高，颜色为 白色或近于白色的植物组织。 （3）检测过程：
2mL 组织 样液
刚配制的斐 林试剂2mL
振荡混匀
呈现浅蓝色
50～65℃水浴 加热2min
变成砖红色（Cu2O）
还原糖：含有半缩醛羟基的糖类，主要是葡萄糖、果糖和 麦芽糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。
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当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量 浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后，立即生成淡 蓝色的Cu（OH）2悬浊液。 Cu（OH）2与葡萄糖、 果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热，能够生成砖红
（2）染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色（酒精能溶解 苏丹Ⅲ），染色和洗浮色时间不宜过长。
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三、蛋白质的检测： 双（双缩脲）子（紫色）弹（蛋白质）
（1）原理：蛋白质 + 双缩脲试剂
紫色络合物
（2）选材：黄豆、鸡蛋清（稀释）、牛奶、豆浆
（3）检测过程：