ABT-199抑制剂生物数据说明书M2017
QIAGEN Endotoxin Removal Solution说明书
Endotoxin Removal Solution Catalog Number E4274Product DescriptionEndotoxins are lipopolysaccharides (LPS), a major component of the Gram-negative bacterial cell wall, and are commonly found as contaminants in plasmid DNA preparations from E. coli. Endotoxins are large, negatively charged molecules that co-purify with DNA on ion exchange and size exclusion columns and in CsCl banding. Endotoxins are extremely potent stimulators of the mammalian immune system and are toxic to primary cells and to animals. The endotoxin toxicity is an obstacle to in vitro and in vivo transfection experiments.Non-ionic detergents, traditionally used for separation of integral membrane proteins,1 can be utilized for removal of endotoxins from DNA solutions by phase separation.2The solubility behavior of a detergent in a dilute, aqueous solution at physiological salt and pH conditions is strongly dependent upon the temperature of the solution. At low temperatures, the detergent forms a clear, micellar solution, but above the cloud point temperature, the micelles form larger, turbid aggregates and ultimately fuse to form a separate phase. The lower phase is detergent-enriched and the detergent-depleted upper phase contains detergent at a concentration slightly above the critical micellar concentration (CMC). Amphiphilic and hydrophobic molecules associated with the micelles of the detergent will aggregate within the detergent-enriched phase, while the soluble, hydrophilic molecules will remain in the detergent-depleted upper phase.Extraction of endotoxin contaminated DNA solutions with the appropriate non-ionic detergent will separate the hydrophilic DNA from the amphiphilic endotoxin. The amphiphilic endotoxin will associate with the lower phase, while the DNA will remain in the upper, detergent-depleted phase.2Reagents and equipment required, but not provided • Water, Molecular Biology Reagent, Catalog Number W4502• E-TOXATE® Water, Catalog Number 2107, or Tris-EDTA (TE) buffer 100×, Catalog NumberT9285• DNA solution (0.5 ml), ~ 1 mg/ml in E-TOXATE®Water or TE buffer• 3 M sodium acetate solution, pH 7.5.• 2-Propanol, Catalog Number I9516, or Ethanol, 190 proof, Catalog Number E7148; 200 proof, CatalogNumber E7023• 70% Ethanol• E-TOXATE®reagents Kits, Catalog Numbers 210A1, 210B1 or 210C1• Ice bucket• Heat block or incubator at 37 °C• Microcentrifuge at room temperature• 1.5 or 2 ml sterile microcentrifuge tubes• Endotoxin-free pipet tips (40-200 µl, 200-1000 µl) Precautions and DisclaimerThis product is for R&D use only, not for drug, household, or other uses. Please consult the Material Safety Data Sheet for information regarding hazards and safe handling practices.StorageStore at room temperature.Note: Removal of endotoxins from DNA preparations can be performed either during the final stage of DNApreparation, or during an earlier stage.Procedures for Endotoxin RemovalDuring the final stage of DNA preparationNote: The procedure described below was performed on plasmid DNA produced in E. coli DH5α cells.• Losses of up to 50% of the DNA are expected. • Use of a DNA concentration above therecommended 1 mg/ml reduces the efficiency ofthe procedure.1. Pipette 500 µl of the DNA solution into a sterilemicrocentrifuge tube.2. Add 50 µl of the 3 M sodium acetate solution to theDNA sample.3. Incubate on ice for 5 minutes.4. Add 100 µl of cold Endotoxin Removal Solution.5. Mix thoroughly and incubate on ice for 10 minutes.The solution should be light blue and clear.6. Incubate the tube at 37 °C for 20 to 30 minutes oruntil the phases separate.7. Spin for 5 minutes at 3000 x g in themicrocentrifuge. The upper phase is colorless and clear, while the lower phase is blue.8. Carefully transfer the upper phase containing theDNA to a clean microcentrifuge tube.9. Repeat steps 4 through 8 twice.10. Add 0.6× volume of 2-propanol. Mix by inversion atroom temperature and centrifuge at 15,000 x g for30 minutes at 4 °C. Alternatively, add2.5× volumes of ethanol. Incubate overnight at –20°C or 20 minutes at –70 °C and centrifuge at15,000 x g for 30 minutes at 4 °C.11. Carefully remove the supernatant12. Wash the DNA pellet twice with cold 70% ethanol.Remove the supernatant.13. Air-dry the pellet.14. Suspend the DNA in 100 µl of endotoxin free wateror TE buffer.15. Determine DNA concentration and endotoxin levelsusing endotoxin assay reagents and compare tothe starting material. During an earlier stage of DNA preparationThis procedure is based on the alkaline lysis of E. coli DH5α cells.3 The endotoxins are removed immediately after alkaline cell lysis, neutralization, and a clarification step. The resulting high salt solution is suitable for the endotoxin removal step. It is performed under “endotoxin free” conditions. The plasticware used is either sterile and disposable, or NaOH-treated. The buffers are prepared with endotoxin free water.1. Add the Endotoxin Removal Solution (0.2× volume)to the cold, crude DNA solution.2. Incubate on ice and mix occasionally by inversionto obtain a homogenous, clear blue solution3. Incubate at 37 °C for 20 to 30 minutes until thephase separation is obvious.4. Spin for 5 minutes at low speed (3000 x g) at roomtemperature.5. Transfer the upper aqueous phase to an endotoxinfree container.6. Proceed with the DNA purification by any method.Use endotoxin-free buffers and containers. References1. Bordier, C., J. Biol. Chem., 256, 1604-1607, (1981).2. Cotten, M. et al., Gene Therapy, 1, 239-246,(1994).3. Sambrook et al., Molecular Cloning, a LaboratoryManual, 2nd Ed. p. 1.38RK,PHC 09/05-1Sigma brand products are sold through Sigma-Aldrich, Inc.Sigma-Aldrich, Inc. warrants that its products conform to the information contained in this and other Sigma-Aldrich publications. Purchaser must determine the suitability of the product(s) for their particular use. Additional terms and conditions may apply. Please see reverse side ofthe invoice or packing slip.。
碧云天生物技术Oligomycin A产品说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线:400-1683301或800-8283301订货e-mail:******************技术咨询:*****************网址:碧云天网站微信公众号Oligomycin A (ATPase抑制剂)产品编号产品名称包装SC0366-10mM Oligomycin A (ATPase抑制剂) 10mM×0.2mlSC0366-5mg Oligomycin A (ATPase抑制剂) 5mgSC0366-25mg Oligomycin A (ATPase抑制剂) 25mg产品简介:化学信息:化学名Spiro[2,26-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-4,18,20-triene-27, 2'-[2H]pyran]-3,9,13-trione,22-ethyl-3',4',5',6'-tetrahydro-7,11,14,15-tetrahydroxy-6'-[(2 R)-2-hydroxypropyl]-5',6,8,10,12,14,16,28,29-nonamethyl-, (1R,2'R,4E,5'S,6S,6'S,7R,8S,10R,11R,12S,14R,15S,16R,18 E,20E,22R,25S,28S,29R)-简称Oligomycin A别名oligomycin中文名寡霉素A化学式C45H74O11分子量791.06CAS号579-13-5纯度≥98%溶剂/溶解度Water <1mg/ml; DMSO 10mg/ml; Ethanol <1mg/ml溶液配制5mg加入0.63ml DMSO,或者每7.91mg加入1ml DMSO,配制成10mM溶液。
SC0366-10mM用DMSO配制。
阿替利珠单抗注射液Atezolizumab-详细说明书与重点
阿替利珠单抗注射液Atezolizumab 英文名称: Atezolizumab Injection商品名称: 泰圣奇/Tecentriq【成分】活性成份:阿替利珠单抗(Atezolizumab),一种针对程序性死亡配体1(PD-L1)的人源化免疫球蛋白G1(IgG1)单克隆抗体。
辅料:L-组氨酸,冰醋酸,蔗糖,聚山梨酯20 和注射用水。
【性状】应为无色至微黄色溶液,不含防腐剂。
【适应症】小细胞肺癌:本品与卡铂和依托泊苷联合用于广泛期小细胞肺癌(ES-SCLC)患者的一线治疗。
肝细胞癌:本品联合贝伐珠单抗治疗既往未接受过全身系统性治疗的不可切除肝细胞癌患者。
非小细胞肺癌:本品用于经国家药品监督管理局批准的检测方法评估为≥50%肿瘤细胞PD-L1 染色阳性(TC≥50%)或肿瘤浸润PD-L1 阳性免疫细胞(IC)覆盖≥10%的肿瘤面积(IC≥10%)的表皮生长因子受体(EGFR)基因突变阴性和间变性淋巴瘤激酶(ALK)阴性的转移性非小细胞肺癌(NSCLC)一线单药治疗。
该适应症是基于 IMpower110 临床研究中 PD-L1 高表达受试者的分析结果给予的附条件批准。
该适应症的完全批准将取决于ML42606 试验证实本品在中国人群的临床获益(见【临床试验】)。
本品联合培美曲塞和铂类化疗用于表皮生长因子受体(EGFR)基因突变阴性和间变性淋巴瘤激酶(ALK)阴性的转移性非鳞状非小细胞肺癌(NSCLC)患者的一线治疗。
【规格】1200 mg/ 20 ml (60 mg/ml)。
【用法用量】本品应在专业医生指导下静脉输注给药。
不得以静脉推注或快速静脉输注的方式给药。
不得与其他药物使用同一输液管给药。
本品首次静脉输注时间需至少持续60 分钟。
如果首次输注患者耐受性良好,则随后的输注时间可适当缩短,但至少持续30 分钟。
本品与其他药品联合用药时,也应同时参考联用药品的完整处方信息。
如在同一天给药,本品应在其联用药品之前先行给药。
(完整版)★抗肿瘤药物临床应用指导原则全文
抗肿瘤药物临床应用指导原则(征求意见稿)目录第一章抗肿瘤药物临床应用的基本原则 (4)一、权衡利弊,最大获益 (4)二、目的明确,治疗有序 (4)三、医患沟通,知情同意 (4)四、治疗适度,规范合理 (5)五、熟知病情,因人而异 (5)六、不良反应,谨慎处理 (5)七、临床试验,积极鼓励 (6)第二章抗肿瘤药物临床应用的管理 (7)一、抗肿瘤药物的管理 (7)(一)分级管理 (7)(二)使用管理 (8)(三)配置管理 (9)(四)人员资质管理 (9)二、落实与督查 (10)第三章各类抗肿瘤药物的适应证和注意事项 (11)一、细胞毒类药物 (11)(一)作用于DNA化学结构的药物 (11)(二)影响核酸合成的药物 (15)(三)作用于核酸转录的药物 (19)(四)作用于DNA复制的拓扑异构酶抑制剂 (20)(五)主要作用于有丝分裂M期干扰微管蛋白合成的药物 (21)(六)其他细胞毒药物 (23)二、激素类药物 (24)(一)芳香化酶抑制剂 (24)(二)雌激素和抗雌激素 (27)(三)雄激素与抗雄激素 (29)(四)孕激素 (31)(五)RH-LH激动剂/拮抗剂 (32)三、肿瘤分子靶向和生物治疗 (33)(一)生物反应调节剂 (33)(二)单克隆抗体 (36)(三)细胞分化诱导剂 (40)(四)细胞凋亡诱导剂 (41)(五)新生血管生成抑制剂 (42)(六)表皮生长因子受体抑制剂 (43)(七)基因治疗 (43)(八)多靶点小分子抑制剂 (44)四、肿瘤治疗辅助药物 (45)(一)造血生长因子 (45)(二)止吐药 (51)(三)镇痛药 (53)(四)抑制破骨细胞药 (55)(五)神经精神用药 (57)第四章各类肿瘤的治疗原则 (61)一、头颈部恶性肿瘤 (61)(一)鼻咽癌 (62)(二)鼻腔和鼻旁窦恶性肿瘤 (62)(三)喉癌 (63)(四)甲状腺癌 (66)二、胸部肿瘤 (67)(一)非小细胞肺癌 (67)(二)小细胞肺癌 (71)(三)胸腺肿瘤 (73)(四)恶性胸膜间皮瘤 (74)三、消化系统肿瘤 (75)(一)食管癌 (75)(二)贲门癌 (77)(三)胃癌 (77)(四)结直肠癌 (79)(五)胆管癌、胆囊癌 (82)(六)胰腺癌 (83)(七)肝癌 (85)四、乳腺癌 (86)(一)复发转移乳腺癌药物治疗 (87)(二)可手术乳腺癌术后抗肿瘤药物治疗 (89)五、泌尿系统、男生殖系统肿瘤 (91)(一)肾上腺肿瘤 (91)(二)肾脏肿瘤 (93)(三)尿路上皮癌 (94)(四)前列腺癌 (97)(五)阴茎肿瘤 (100)(六)睾丸肿瘤 (101)六、妇科肿瘤 (103)(一)宫颈癌 (103)(二)卵巢癌 (105)(三)子宫内膜癌 (108)(四)外阴癌 (110)(五)阴道癌 (112)(六)妊娠滋养细胞肿瘤 (113)七、血液淋巴系统肿瘤 (116)(一)白血病 (116)(二)恶性淋巴瘤 (120)(三)多发性骨髓瘤 (140)八、颅脑肿瘤 (142)(一)胶质瘤 (142)(二)髓母细胞瘤 (145)(三)脑转移瘤 (147)(四)中枢神经系统淋巴瘤 (149)(五)颅内生殖细胞瘤 (151)(六)颈静脉球瘤 (153)(七)垂体腺瘤 (155)九、原发恶性骨与软组织肿瘤 (159)(一)骨肉瘤 (159)(二)尤文氏肉瘤 (164)(三)软组织肉瘤 (166)《抗肿瘤药物临床应用指导原则》编审专家名单 (167)第一章抗肿瘤药物临床应用的基本原则正确合理地应用抗肿瘤药物是提高肿瘤患者生存率和生活质量,降低死亡率、复发率和药物不良反应发生率的重要手段,是肿瘤综合治疗的重要组成部分。
ABTS 自由基清除能力检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4571
ABTS自由基清除能力检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-4571规格:100T/48S微量法产品内容:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体80mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体40mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×1支2-8℃保存试剂三液体20μL×1支2-8℃保存试剂四液体 1.5mL×1支-20℃保存试剂五粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制:1、试剂二:临用前加入1mL蒸馏水,充分溶解;用不完的试剂可分装后保存,-20℃可保存四周,避免反复冻融;2、试剂三工作液的配制:液体置于试剂瓶内EP管中。
临用前根据样本量按试剂三(μL):蒸馏水(mL)=1μL:12mL的比例配成试剂三工作液,现用现配,用多少配多少,尽量在4h之内用完;3、试剂四工作液的配制:可先将试剂四-20℃分装保存。
临用前根据样本量按试剂四:试剂一(V:V)=1:9的比例配成试剂四工作液,现配现用,用不完的试剂放于-20℃可保存两周。
4、试剂五:粉剂置于试剂瓶内玻璃瓶中,含有5mg维生素C,临用前加入2.8mL提取液,充分振荡溶解;配成10mmol/L维生素C溶液,用于阳性对照。
2-8℃可保存两周。
5、ABTS工作液的配制:临用前根据试验所需量按试剂一:试剂二:试剂三工作液(V:V:V)=76:5:4的比例配成ABTS工作液,现用现配,室温避光保存,务必在30分钟内使用。
产品说明:ABTS法可用于亲水性和亲脂性物质抗氧化能力测定,是使用最广泛的间接检测方法。
ABTS经氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子ABTS自由基,在405nm或734nm处有最大吸收峰。
被测物质加入ABTS自由基溶液后,所含抗氧化成分能与ABTS自由基发生反应而使反应体系褪色,405nm的吸光度下降,在一定范围内其吸光度的变化与自由基被清除的程度成正比。
鬼笔环肽标记系列产品说明书
鬼笔环肽标记系列产品说明书保存:-20℃干燥、避光保存,有效期一年。
若配制成水溶液,请小量分装保存,避免反复冻融。
注意:本产品为冻干粉形式,使用前请瞬时离心,加适当溶剂溶解后使用。
产品介绍:鬼笔环肽是从致命的伞形毒蕈蘑菇中分离出来的一种毒素。
它是特异性结合于F-肌动蛋白的双环肽(1)。
因此用荧光染料标记的鬼笔环肽可以非常方便的研究F-肌动蛋白的分布。
鬼笔环肽内部,在半胱氨酸和色氨酸之间含有不常见的硫醚桥形成内环结构。
在pH 升高时,该硫醚被裂解,鬼笔环肽失去对肌动蛋白的亲和力。
荧光标记的鬼笔环肽可在纳摩尔水平染色F-肌动蛋白(1-3)。
在各种植物细胞或动物细胞中,标记的鬼笔环肽对大、小细丝具有相似的亲和力,平均每个肌动蛋白亚基结合一个鬼笔环肽分子。
不同于抗体,鬼笔环肽与肌动蛋白的结合亲和力在不同物种间没有显着变化。
非特异性染色可以忽略不计,染色和未染色区域之间的对比度非常大。
鬼笔环肽将单体/聚合物的平衡转向聚合状态,将聚合临界浓度降低至30倍(3,4)。
Phallotoxins 可通过抑制细胞松弛素的解聚,碘化钾和升高的温度,稳定F-肌动蛋白。
因为鬼笔环肽缀合物很小,大约直径12-15埃,分子量<2000道尔顿,多种肌动蛋白结合蛋白,包括肌球蛋白,原肌球蛋白和后肌钙蛋白依然可以和鬼笔环肽标记的肌动蛋白结合。
更重要的是,鬼笔环肽标记的肌动蛋白丝保持功能,标记甘油肌纤维仍然收缩,标记的肌动蛋白丝仍然可以继续移动(5,6)。
而且荧光标记的鬼笔环肽也可用于对细胞中F-肌动蛋白进行定量研究(7,8)。
实验方法:1.储液制备:荧光染料标记的鬼笔环肽:取适量甲醇或无菌水溶解棕色管中冻干的粉末,制备成200U/mL 的储液(300T 规格染料加入1.5mL 的液体)。
荧光标记的标记鬼笔环肽的一个单位(T )的定义是染色一个加载细胞的载玻片所用染料的量。
使用时的推荐稀释比例为1:40-1:200,一个单位相当于200µL 总染色体积中加入1-5µL 200U /mL 储备溶液。
TAKARA公司pMD19-T说明书
40.2
0
* 效率是指白色菌落中的目的 DNA Insert 片段的连入效率。
■一般DNA片段的克隆实验
1)在微量离心管中配制下列 DNA 溶液,全量为 5 μl。
pMDTM19-T Vector*1
1 μl
Insert DNA*3
0.1 pmol~0.3 pmol
dH2O
up to 5 μl
-2-
*1 pMDTM19-T Vector的使用量 取 0.5 μl实验也可得到满意的结果。实际操作时,可按实验需要确定T载体的使用量。pMDTM19-T Vector 1 μl(50 ng)的摩尔数约为 0.03 pmol。
*2 Control Insert Control Insert 为 500 ห้องสมุดไป่ตู้p 的 3′末端带有 A 碱基的 PCR 产物,Control Insert 1 μl(50 ng)的摩 尔数约为 0.15 pmol。
●使用注意
1. Solution I 请于冰中融解。 2. 克隆时使用的 Insert DNA 片段(PCR 产物)建议进行切胶回收纯化,否则 PCR 产物中的短片段
DNA(甚至是电泳也无法确认的非特异性小片段)、残存引物等杂质都会影响 TA 克隆效率。 3. 按照本实验操作进行连接后,直接进行转化时的连接液不要超过 20 μl。当要转化的 DNA 量较大或
注) ① 室温(25℃)也能正常进行连接反应,但反应效率稍微降低。 ② 5 分钟也能正常进行连接反应,但反应效率稍微降低。
4)全量(10 μl)加入至 100 μl JM109 感受态细胞中,冰中放置 30 分钟。 5)42℃加热 45 秒钟后,再在冰中放置 1 分钟。 6)加入 890 μl SOC 培养基,37℃振荡培养 60 分钟。 7)在含有 X-Gal、IPTG、Amp 的 L-琼脂平板培养基上培养,形成单菌落。计数白色、蓝色菌落。 8)挑选白色菌落,使用 PCR 法确认载体中插入片段的长度大小。
阿替利珠单抗 Atezolizumab说明书
阿替利珠单抗Atezolizumab说明书Tecentriq(atezolizumab)注射液使用说明2016年第一版批准治疗:2016年5月18日;公司:Genentech,Inc.FDA为批准对膀胱癌新靶向治疗。
Tecentriq是FDA批准的第一个PD-L1抑制剂。
FDA的药品评价和研究中心血液学和肿瘤产品室主任Richard Pazdur,M.D.说:“Tecentriq提供这些患者一个新治疗靶向PD-L1通路,”“产品阻断PD-1/PD-L1的机制部分地与机体的免疫系统和它的与癌细胞间相互作用相互关系有关。
”突破性治疗指定,优先审批状态和加速批准处方资料重点这些重点不包括安全和有效使用TECENTRIQ所需所有资料。
请参阅TECENTRIQ完整处方资料。
TECENTRIQTM(atezolizumab)注射液,为静脉使用美国初次批准:2016适应证和用途TECENTRIQ是一种程序死亡配体1(PD-L1)阻断抗体适用为有局部晚期或转移尿路上皮癌患者的治疗患者:⑵含铂化疗期间或后有疾病进展(1)⑵用含铂化疗新辅助或辅助治疗12个月内有疾病进展(1)这个适应证在加快批准下被根据肿瘤反应率和反应时间批准的。
继续批准这个适应证可能取决于在验证性试验临床获益的确证和描述。
(1,14)剂量和给药方法每3周给予1200 mg作为一次静脉输注历时60分。
(2.1)静脉输注前稀释。
(2.3)剂型和规格注射液:1200 mg/20 mL(60 mg/mL)溶液在一单剂量小瓶中(3)禁忌证无。
(4)警告和注意事项●免疫相关肺炎:对中度不给和对严重或危及生命肺炎永久地终止。
(5.1)●免疫相关肝炎:监视肝功能变化。
对中度不给和对严重或危及生命转氨酶或总胆红素升高永久地终止。
(5.2) ●免疫相关结肠炎:对中度不给或严重,和对危及生命结肠炎永久地终止。
(5.3)●免疫相关内分泌病(5.4):o 垂体炎:对中度不给或严重和对危及生命垂体炎永久地终止。
ABT-199_选择性的Bcl-2抑制剂_1257044-40-8_Apexbio产品说明书
特别声明
产品仅用于研究, 不针对患者销售,望谅解。 每个产品具体的储存和使用信息显示在产品说明书中。ApexBio 产品在推荐的条件下是稳定
的。产品会根据不同的推荐温度进行运输。许多产品短期运输是稳定的,运输温度不同于长 期储存的温度。我们确保我们的产品是在保持试剂质量的条件下运输的。收到产品后,按照 产品说明书上的要求进行储存。
血液系统肿瘤的抗肿瘤活性,同时保留了血小板。据报道,在几种人类血液系统肿瘤的异种 移植模型中,ABT-199 能够抑制肿瘤的生长。 参考文献: Matthew S. Davids and Anthony Letai. ABT-199: a new hope for selective BCL-2 inhibition. Cancer Cell 2013; 23(2): 139-141
产品反馈
Treatment of ABT-199 induced apoptosis and cytochrome c release
S1 induces apoptosis and interrupts glucose metabolism in SKOV3 cells. Extracellular acidifcation rates were measured in the presence of Bcl-2 inhibitors ABT-737, ABT-199, and obatoclax mesylate (Oba) or antimycin A (2.5 µM). *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001 compared with control group (n=4). Int J Oncol. 2016 Aug;49(2):773-84.
碧云天 基因组编辑突变检测试剂盒 说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线:400-1683301或800-8283301 订货e-mail :******************技术咨询:*****************网址:碧云天网站 微信公众号基因组编辑突变检测试剂盒产品编号 产品名称包装 D0508S 基因组编辑突变检测试剂盒 25次 D0508M基因组编辑突变检测试剂盒100次产品简介:碧云天生产的基因组编辑突变检测试剂盒(Genome-Editing Mutation Detection Kit),也称基因编辑突变检测试剂盒(Gene-Editing Mutation Detection Kit),是一种简单、可靠、快速的基于T7 Endonuclease I (T7EI)的用于检测基因组DNA 在基因编辑后发生突变的试剂盒。
本试剂盒主要利用了T7 Endonuclease I (T7EI)能识别并酶切不完全配对的DNA 双链(也称异源双链DNA ,heteroduplex DNA)的特性。
本试剂盒组分特别齐全。
提供了包括一步法基因组DNA 提取、高保真PCR 扩增、变性退火和T7EI 酶切的全套试剂,并且还提供了阳性对照。
本试剂盒使用特别便捷。
一步法基因组DNA 提取非常快速便捷,并且提取后可以直接用于高保真PCR 扩增,PCR 扩增产物也可以直接用于后续的变性退火和T7EI 酶切。
无需额外的分离纯化步骤。
本试剂盒检测基因组编辑突变的原理如下。
首先需要编辑的细胞、组织或器官通过转染、病毒感染等技术手段表达CRISPR/Cas9 (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/Cas9 nucleases)、TALEN (Transcription activator-like effector nucleases)或ZFN (Zinc-finger nucleases)等核酸酶。
BCL-2选择性抑制剂——ABT-199的合成工艺改进
BCL-2选择性抑制剂——ABT-199的合成工艺改进许云雷;葛敏【摘要】以3,3-二甲基环己酮(2)为原料,经5步反应制得中间体1-氯4.[2-(氯甲基)-5,5-二甲基环己基-1-烯]苯(5);以5-溴-7-氮杂吲哚为原料,经3步反应制得制得5-羟基-1-三异丙基硅基-7-氮杂吲哚(8);8与4-[3-氟-4-(甲氧基羰基)苯基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(9)经取代反应制得4-{3-[(7-氮杂吲哚)氧]-4.(甲氧基羰基)苯基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯(10);10脱保护后与5进行SN2取代反应,所得中间体与3-硝基-4-{[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基}苯磺酰胺经缩合反应合成了BCL-2选择性抑制剂ABT-199,总收率28.4%,其结构经1H NMR和ESI-MS确证.【期刊名称】《合成化学》【年(卷),期】2015(023)011【总页数】5页(P1063-1067)【关键词】3,3-二甲基环己酮;5-溴-7-氮杂吲哚;BCL-2选择性抑制剂;ABT-199;合成;工艺改进【作者】许云雷;葛敏【作者单位】南京工业大学生物与制药工程学院材料化学工程国家重点实验室,江苏南京210009;南京工业大学生物与制药工程学院材料化学工程国家重点实验室,江苏南京210009【正文语种】中文【中图分类】R914.5;O625.6B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)蛋白定位于线粒体膜、内质网膜和核膜上,具有离子通道和停靠蛋白的双重功能,其在介导细胞凋亡的途径中起关键性作用[1]。
癌细胞通常利用BCL-2蛋白来抑制传统化疗的治疗效应,从而导致病人需要更大的化疗药物剂量来解决这一问题,并由此导致了诸如恶心及脱发之类的副作用。
雅培生命开发的BCL-2抑制剂——2-[(7-氮杂吲哚)氧]-4-【4-【{ 4'-氯-5,5-二甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1'-联苯]-2-基}甲基】哌嗪-1-基】-N-【【3-硝基-4-{[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基}苯】磺酰基】苯甲酰胺(ABT-199,1),是一种能够够消除和减少癌细胞中BCL-2水平的药物,使化疗能够对这些癌细胞起作用,同时又不会影响BCL-XL——血小板形成必需的一种蛋白,从而有效降低了副作用。