含种植体硬组织骨计量学不脱钙塑料包埋技术

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介绍一种简易快速的骨髓组织脱钙法

介绍一种简易快速的骨髓组织脱钙法
氨水 ( 氨水 1 mL , 蒸馏水 9 9 mL ) 。
在骨髓脱钙过程 中, 应 注意以下几点 : ① 未固定 好的标本 易 受 酸性 脱 钙 液 的损 害 , 因 此组 织 固定 一 定要 充 分 , 时 间
>3 0 m i n ; ②脱 钙 液用量 要充 足 , 为标本体 积 3 0 倍; ③ 骨髓
的方法『 l _ 2 1 。在实 际临床病理工作 中 , 上 述两种方法 制片效果
均不佳 , 常出现切片不完整 , 刀痕 多 , 给临床病理诊断 造成极
大 的 困难 。
骨髓组织较小 、 硬碎 、 纤维支架少且富含钙盐。在制片过 程 中容易 出现切片破碎 、 离断及染 色不 良。因此 , 骨髓 活检组 织制 片 的关 键 问题 在 于脱 钙是 否彻底 及组织 细胞 的结构 及 成分是否保存完整 。 既往文献【 3 — 5 ] 报道 , 部分医院病理科采 用
勤 夏

李林丰
刘 智 罗启翅
梁海桥
在病理技术石蜡切片 中, 常常会 收到骨髓穿刺标本 。 因骨
髓组织 富含脂肪 组织及钙 盐 , 不 能直接切 片 , 必 须先脱脂 脱
匀, 对组织 收缩小 , 并可适度保 护组织免受酸 的侵蚀[ 6 1 。 而冰醋
酸穿透快 , 可加速脱 钙 , 且 较好地保存染 色体结构 , 减少酸对
的改 良 诊 断病理 学杂志 , 2 0 1 1 ,1 8 ( 2 ) :1 5 1 . 『 4 1 崔京 淑. 改 良脱钙 液在 骨髓 穿刺组 织制 片 中的应用 . 吉林 医
学 ,2 0 1 l , 3 2 ( 2 2 ) : 4 6 6 0 .
骨髓 穿刺组织 脱钙 后切 片 ,组织完整并可 以弥补骨髓组

骨组织形态计量学方法

骨组织形态计量学方法

2.5.4骨组织形态计量学方法2.5.4.1 不脱钙骨骨标本的包埋(1)包埋前单体(甲基丙烯酸甲酯)的洗脱方法①将1500ml的甲基丙烯酸甲酯倒入分液漏斗(2L)中。

②加入5% NaOH溶液500ml,充分摇匀,静置,待溶液分层后,放出下层溶液,弃去。

③重复操作“2”三次,三次的总量与单体量相当(洗脱阻滞剂)。

④加入500ml蒸馏水,充分摇匀,静置,待溶液分层后,放出下层溶液,弃去。

⑤重复操作“2”三次,三次的总量与单体量相当(洗脱NaOH)。

⑥将上述处理过的单体放入无水CaCl2(1000 ml:500g)脱水2次。

⑦滤纸过滤,收集滤液。

⑧-20℃保存备用,第二天取出看有无冰晶漂浮:无,表明无水可备用;有,则需重新脱水。

(2)胫骨上段包埋前的制备过程①暴露骨髓腔将固定液中的胫骨用低速锯锯开,暴露骨髓腔,解剖部位如下:②脱水分别通过70%乙醇2天,95%乙醇2天,100%乙醇1天,100%乙醇1天,四个脱水过程,二甲苯透明1天。

③渗透先后用浸液Ⅰ、浸液Ⅱ、浸液Ⅲ分别浸透2天。

三种浸液的配制方法如下:浸液Ⅰ甲基丙烯酸甲酯90ml,邻苯二甲酸二丁酯10ml,磁力搅拌器上搅拌3小时。

浸液Ⅱ甲基丙烯酸甲酯90ml,邻苯二甲酸二丁酯10ml,过氧化笨甲酰1.0g,磁力搅拌器上搅拌4小时。

浸液Ⅲ甲基丙烯酸甲酯90ml,邻苯二甲酸二丁酯10ml,过氧化苯甲酰2.5g,磁力搅拌器上搅拌6小时。

(3)包埋用新鲜配置的浸液Ⅲ(当日配置)倒入装有浸润好的骨头块容积约为15 ml 的小瓶中,倒入的包埋剂约,盖好瓶盖,并在瓶盖上插一注射器针头,室温过夜。

第二天把包埋瓶置入37-39℃的水育箱中聚合约48小时,直至包埋块形成。

若为胫骨中段骨,则需在包埋前几天预先倒入少量包埋剂于小玻璃瓶中作包埋块底衬,变硬后为1.5cm高为宜。

包埋时将胫骨中段至于瓶中央,在倒入2cm高的包埋剂。

若为胫骨上段,仅需将其锯开面贴瓶底中央包埋,倒入约3.5cm高的包埋剂即可。

用Bouin液固定不脱钙制作胎儿指骨整体切片

用Bouin液固定不脱钙制作胎儿指骨整体切片

硬脂酸和组织脱蜡透明液完全替代二甲苯的病理制片方法,简便、经济,制片效果良好,尤其是避免了二甲苯对人体的危害及对环境的污染,值得推广使用。

参考文献:[1] 刘镜愉.临床医师诊疗全书:现代职业病诊疗手册[M].北京:北京医科大学中国协和医科大学联合出版社,1997:142-143.[2] 龚志锦,詹镕洲.病理组织制片和染色技术[M].上海:上海科学技术出版社,1994:18-19.[3] 王伯沄.病理学技术[M].北京:人民卫生出版社,2000:78-79.[4] 胡小安,卢 静,张 润.改良硬脂酸石蜡切片的免疫组化染色效果观察[J].诊断病理学杂志,2004,12:439.[5] 古 伟,张国宾.硬脂酸替代二甲苯后组织脱片的预防[J].诊断病理学杂志,1995,2:240.用Bouin液固定不脱钙制作胎儿指骨整体切片唐泽立1,谢 玲1,林坚涛2关键词:Bouin固定液;氯仿;胎儿;指骨;不脱钙切片中图分类号:R446.8 文献标识码:B文章编号:1001-7399(2009)04-0443-02 组织学观察是骨组织研究的重要手段之一[1],由于骨组织致密、坚硬,并含有骨胶等成分,所以要制作一张高质量的切片(和软组织相比)有一定的困难[2]。

近年来出现的塑料包埋等[3,4]不脱钙骨切片及染色技术尚不够成熟和稳定[2]。

我们在教学过程中用胎儿指骨的整体切片做为观察软骨内成骨和骨组织组成及细胞结构的标本,制作时采用Bouin液做为固定液,用氯仿做为透明剂,不需脱钙制作出切片的组织和细胞的形态结构完整,染色鲜明、色泽深浅适当。

而将皮肤和结缔组织等一起固定包埋制作骨切片的文献极少。

现将我们的经验报道如下。

1 材料与方法1.1 取材与固定 取6~8个月的胎儿指骨[5],放于Bouin 固定液(苦味酸饱和水溶液75m l、10%福尔马林液25m l、冰醋酸5m l)内固定,1天后修整组织,把手指两侧的结缔组织切开修为平面后,置换一次固定液,在固定3~7天时间途中可再换一次固定液。

骨组织形态计量学方法解析

骨组织形态计量学方法解析

2.5.4骨组织形态计量学方法2.5.4.1 不脱钙骨骨标本的包埋(1)包埋前单体(甲基丙烯酸甲酯)的洗脱方法①将1500ml的甲基丙烯酸甲酯倒入分液漏斗(2L)中。

②加入5% NaOH溶液500ml,充分摇匀,静置,待溶液分层后,放出下层溶液,弃去。

③重复操作“2”三次,三次的总量与单体量相当(洗脱阻滞剂)。

④加入500ml蒸馏水,充分摇匀,静置,待溶液分层后,放出下层溶液,弃去。

⑤重复操作“2”三次,三次的总量与单体量相当(洗脱NaOH)。

⑥将上述处理过的单体放入无水CaCl2(1000 ml:500g)脱水2次。

⑦滤纸过滤,收集滤液。

⑧-20℃保存备用,第二天取出看有无冰晶漂浮:无,表明无水可备用;有,则需重新脱水。

(2)胫骨上段包埋前的制备过程①暴露骨髓腔将固定液中的胫骨用低速锯锯开,暴露骨髓腔,解剖部位如下:②脱水分别通过70%乙醇2天,95%乙醇2天,100%乙醇1天,100%乙醇1天,四个脱水过程,二甲苯透明1天。

③渗透先后用浸液Ⅰ、浸液Ⅱ、浸液Ⅲ分别浸透2天。

三种浸液的配制方法如下:浸液Ⅰ甲基丙烯酸甲酯90ml,邻苯二甲酸二丁酯10ml,磁力搅拌器上搅拌3小时。

浸液Ⅱ甲基丙烯酸甲酯90ml,邻苯二甲酸二丁酯10ml,过氧化笨甲酰1.0g,磁力搅拌器上搅拌4小时。

浸液Ⅲ甲基丙烯酸甲酯90ml,邻苯二甲酸二丁酯10ml,过氧化苯甲酰2.5g,磁力搅拌器上搅拌6小时。

(3)包埋用新鲜配置的浸液Ⅲ(当日配置)倒入装有浸润好的骨头块容积约为15 ml 的小瓶中,倒入的包埋剂约,盖好瓶盖,并在瓶盖上插一注射器针头,室温过夜。

第二天把包埋瓶置入37-39℃的水育箱中聚合约48小时,直至包埋块形成。

若为胫骨中段骨,则需在包埋前几天预先倒入少量包埋剂于小玻璃瓶中作包埋块底衬,变硬后为1.5cm高为宜。

包埋时将胫骨中段至于瓶中央,在倒入2cm高的包埋剂。

若为胫骨上段,仅需将其锯开面贴瓶底中央包埋,倒入约3.5cm高的包埋剂即可。

用于关节软骨组织修复或再生的植入性医疗器械体内评价

用于关节软骨组织修复或再生的植入性医疗器械体内评价

用于关节软骨组织修复或再生的植入性医疗器械体内评价1 基本要求本文件使用者应按照GB/T16886.1的要求,在做本文件所述的体内评价前,进行材料和/或器械的细胞毒性和生物相容性试验。

注1:对于特定的产品,本文件中所建议的某些方法可能不完全适用时,可根据技术发展现状,结合国内外相关指南进行个案分析。

注2:动物模型结果并不一定能完全预示人体使用结果,所以应谨慎解释其在人体的适用性。

2 动物模型2.1 概述2.1.1 本章提供了在确定合适的动物模型、关节软骨缺损大小和部位等方面的考虑点,详见表1。

2.1.2 本文件中涉及的动物研究应符合伦理和福利的要求。

表1 软骨组织修复评价的动物模型2.2 关节大小和载荷选择2.2.1 人体透明关节软骨损伤常发生在膝关节,主要在内侧部分(如股骨内髁和胫骨平台)。

因此,宜在动物模型中选择膝关节评价软骨修复/再生。

2.2.2 不同种属的动物在重量、关节解剖和步态方面有显著差异,具有不同的关节力学。

这些因素影响了关节软骨的厚度和分布、关节基质的大分子物质含量、分布和胶原结构等。

上述环节在关节软骨疾病或损伤反应中起着重要作用。

宜仔细考虑适于植入物阶段的动物模型。

2.2.3 应选择合适的动物和关节部位,尤其是关节面和关节软骨厚度应选择适于进行对预期在人体使用的配方、设计、尺寸和配套使用器械等的充分研究和优化,其中:——较大的动物具有更大的关节软骨表面积和厚度,更接近人体情况,更适于关节软骨修复研究;——较大的缺损通常需要某种方式的固定以保护植入物,减少植入物脱位。

植入物的固定方法可能对缺损周围宿主组织和修复有不利影响。

小型动物通常不需要固定,通过小型动物试验结果预测在需要固定的大型动物和人体试验的结果时,需要注意试验中植入物设计的不同之处。

2.2.4 对每种动物而言,关键大小的缺损定义为动物不经干预不能修复的最小尺寸(直径)的缺损。

每种动物的关键缺损的大小通常不同,应在设计植入物大小和固定方法时仔细考虑。

组织脱钙名词解释

组织脱钙名词解释

组织脱钙名词解释一、组织脱钙的定义组织脱钙就是把硬组织(像骨头、牙齿这些)里面的钙盐去除掉的一个过程。

为啥要这么做呢?这是因为在进行一些病理检查或者组织学研究的时候,钙盐会影响切片制作还有染色等操作。

就好比你要研究一块石头里面的东西,但是石头太硬了,不好操作,就得先把那些让它变硬的东西去掉一些,这样才能更好地深入研究。

二、组织脱钙的常见方法1. 酸脱钙法这是最常用的方法。

比如说用硝酸、盐酸这些酸。

硝酸脱钙速度比较快,但是它对组织的损伤也比较大,就像一个急性子的人做事,虽然快但是可能会有点粗糙。

盐酸脱钙相对温和一些,不过脱钙的时间会长一点。

在使用酸脱钙的时候,要注意控制酸的浓度和脱钙的时间。

如果酸的浓度太高或者脱钙时间太长,就会把组织腐蚀得太厉害,就像把肉煮过头了一样,最后得到的组织就不适合做研究啦。

2. 螯合剂脱钙法像乙二胺四乙酸(EDTA)这种螯合剂就可以用来脱钙。

它的优点是对组织的损伤比较小,能够很好地保持组织的结构和抗原性。

不过呢,它的脱钙速度超级慢,就像乌龟爬行一样,可能需要几周甚至几个月的时间。

但是在一些对组织要求比较高,比如要做免疫组化研究的时候,这种方法就很有用。

三、组织脱钙后的处理脱钙完成后,不能就这么不管了。

得把组织进行充分的水洗,把脱钙液残留的东西都洗干净。

如果不洗干净,残留的酸或者螯合剂可能会对后续的染色等操作产生不良影响。

就像你洗碗,如果洗洁精没冲干净,下次吃饭的时候就会吃到洗洁精的味道,那可不好。

然后就可以按照常规的组织处理方法进行固定、脱水、透明、浸蜡、包埋等操作,这样就能得到适合做切片和染色研究的组织样本了。

骨组织形态计量学方法讲解

骨组织形态计量学方法讲解

2.5.4骨组织形态计量学方法2.5.4.1 不脱钙骨骨标本的包埋(1)包埋前单体(甲基丙烯酸甲酯)的洗脱方法①将1500ml的甲基丙烯酸甲酯倒入分液漏斗(2L)中。

②加入5% NaOH溶液500ml,充分摇匀,静置,待溶液分层后,放出下层溶液,弃去。

③重复操作“2”三次,三次的总量与单体量相当(洗脱阻滞剂)。

④加入500ml蒸馏水,充分摇匀,静置,待溶液分层后,放出下层溶液,弃去。

⑤重复操作“2”三次,三次的总量与单体量相当(洗脱NaOH)。

⑥将上述处理过的单体放入无水CaCl2(1000 ml:500g)脱水2次。

⑦滤纸过滤,收集滤液。

⑧-20℃保存备用,第二天取出看有无冰晶漂浮:无,表明无水可备用;有,则需重新脱水。

(2)胫骨上段包埋前的制备过程①暴露骨髓腔将固定液中的胫骨用低速锯锯开,暴露骨髓腔,解剖部位如下:②脱水分别通过70%乙醇2天,95%乙醇2天,100%乙醇1天,100%乙醇1天,四个脱水过程,二甲苯透明1天。

③渗透先后用浸液Ⅰ、浸液Ⅱ、浸液Ⅲ分别浸透2天。

三种浸液的配制方法如下:浸液Ⅰ甲基丙烯酸甲酯90ml,邻苯二甲酸二丁酯10ml,磁力搅拌器上搅拌3小时。

浸液Ⅱ甲基丙烯酸甲酯90ml,邻苯二甲酸二丁酯10ml,过氧化笨甲酰1.0g,磁力搅拌器上搅拌4小时。

浸液Ⅲ甲基丙烯酸甲酯90ml,邻苯二甲酸二丁酯10ml,过氧化苯甲酰2.5g,磁力搅拌器上搅拌6小时。

(3)包埋用新鲜配置的浸液Ⅲ(当日配置)倒入装有浸润好的骨头块容积约为15 ml 的小瓶中,倒入的包埋剂约,盖好瓶盖,并在瓶盖上插一注射器针头,室温过夜。

第二天把包埋瓶置入37-39℃的水育箱中聚合约48小时,直至包埋块形成。

若为胫骨中段骨,则需在包埋前几天预先倒入少量包埋剂于小玻璃瓶中作包埋块底衬,变硬后为1.5cm高为宜。

包埋时将胫骨中段至于瓶中央,在倒入2cm高的包埋剂。

若为胫骨上段,仅需将其锯开面贴瓶底中央包埋,倒入约3.5cm高的包埋剂即可。

四种防脱片剂在不脱钙骨组织切片中的应用研究

四种防脱片剂在不脱钙骨组织切片中的应用研究

四种防脱片剂在不脱钙骨组织切片中的应用研究王东胜;赵征;吕燕【摘要】Objective: Undecalcification sections are quite different from paraffin sections due to the more organic and inorganic calcium. A good anti-slice escaping agentia is one of the key factors for success. The purpose of this study is to find an ideal anti-slice escaping agentia to reduce tissue damage and improve success rate. Methods: Three anti-slice escaping agentia including APES, chrome alum - gelatin and Poly-L-Lysine were used to pretreat slides, the other group was imported slides coated with SUPERFROST? PLUS.The tissue sections were dyed with Goldners' staining, and the tissue preversation of the undecalcification sectins was studied. Results: The slides were processed respectively by APES, chrome alum- gelatin, Poly-L-Lysine and SUPERFROST? PLUS, microscopy showed that the rate of complete adhesion in chrome alum - gelatin group was 75% which was the highest; the rates in Poly-L-Lysine group and SUPERFROST? PLUS group were the same which was about 30%; and the rate in APES was the lowest which was 15%. Conclusion: Based on the comparison of four anti-slice escaping agentia, we conclud that chrome alum-gelatin is an ideal anti-slice escaping agentia for undecalcification sections.%目的:不脱钙骨组织切片因组织有机及无机钙较多,其与普通石碏切片有较大差别.一种良好的防组织脱片剂是制片成功的关键因素之一,本研究的目的是寻找一种效果良好的防组织脱片剂以减少组织的损失,提高制片成功率.方法:选择目前组织病理制片中常用的三种防组织脱片剂对捞取切片的载玻片进行处理,防组织脱片剂分别为:3-氨丙基-3-乙氧基甲硅烷(APES)、铬明矾-明胶、多聚赖氨酸;另一种直接用已涂好防组织脱片剂(SUPERFROST(R) PLUS)的进口玻片.组织切片经Goldners’三色法染色,比较分别使用上述四种防组织脱片剂的不脱钙骨组织切片组织保存的效果.结果:载玻片经3-氨丙基-3-乙氧基甲硅烷(APES);铬明矾-明胶;多聚赖氨酸;SUPERFROST(R)PLUS等四种防组织脱片剂处理后,镜下观察:防组织脱片效果最好即组织保存最完整的是经铬明矾-明胶处理的玻片,完整贴片率为75%;多聚赖氨酸与SUPERFROST(R) PLUS玻片两种基本相当,完整贴片率为30%;四种中效果最差的防组织脱片剂是3-氨丙基-3-乙氧基甲硅烷(APES),完整贴片率为15%.结论:通过对上述四种防组织脱片剂的应用比较,我们认为铬明矾-明胶作为不脱钙骨组织切片用防脱片剂是最理想的.【期刊名称】《中华老年口腔医学杂志》【年(卷),期】2011(009)006【总页数】3页(P329-331)【关键词】不脱钙切片;防脱片剂;APES;多聚赖氨酸;铬明矾-明胶【作者】王东胜;赵征;吕燕【作者单位】解放军总医院口腔医学研究所北京 100853;解放军总医院口腔医学研究所北京 100853;解放军总医院口腔医学研究所北京 100853【正文语种】中文【中图分类】R783不脱钙骨组织切片,因包埋介质为树脂,不同于石蜡切片通过高温烘烤,石蜡熔化而使切片完全贴合于载玻片上。

新疆病理科模拟题2021年(34)_真题-无答案

新疆病理科模拟题2021年(34)_真题-无答案

新疆病理科模拟题2021年(34)(总分99.XX99,考试时间120分钟)A1/A2题型1. 下列方法适宜于含水较多的组织进行速冻的是A. 液氮法B. 干冰-丙酮法C. 干冰-乙醇法D. 干冰-异戊烷法E. 异戊烷-液氮法2. 对于铬酸固定液的描述错误的是A. 属于强氧化剂,不能与乙醇、甲醛等混合B. 能沉淀蛋白质,核蛋白固定良好C. 对脂肪有良好的固定作用D. 对组织穿透能力弱,一般组织需固定12~24小时E. 经其固定的组织必须彻底流水冲洗24小时以上的时间3. 关于Carnoy固定液的描述错误的是A. 对于染色体固定好B. 常用于糖原和尼氏体的固定C. 能保存脂类D. 有防止乙醇的硬化和收缩作用E. 固定速度快4. 要保存细胞内糖原宜用A. Bouin液B. Zenker液C. Orth液D. Carnoy液E. Rossman液5. 恒温切冷冻组织切片出现皱褶应调节A. 切片速度B. 切片厚度C. 刀刃距离D. 刀的角度E. 防卷板6. 切片上形成横皱纹,其主要原因是A. 固定失时或固定不当B. 组织脱水、透明和浸蜡不足C. 组织陈旧、腐败D. 组织脱水、透明和浸蜡温度过度E. 切片刀不锋利、固定不牢7. 对于整合剂脱钙法描述错误的是A. 对组织无损伤B. 脱钙速度快C. 可保留组织内酶活性D. 对组织抗原性的损伤较小E. 适合于组织化学和免疫组织化学染色的组织8. 液氮速冻时下列注意事项错误的是A. 标本盒不能直接浸入液氮B. 速冻的包埋剂要适量C. 新鲜组织不能放入-10℃冰箱内缓慢冷却D. 冷冻后的组织块应密封保存E. 组织块复温时要自然复温9. 对于锇酸固定液的描述错误的是A. 属于强氧化剂,不能与乙醇、甲醛等混合B. 电镜研究的必需固定剂C. 剧毒品,使用时注意防护D. 应用时现用现配E. 固定液浓度和配方依固定目的而不同10. 可用于胚胎组织、神经组织和脂肪组织的固定液是A. Bouin液B. Carnoy液C. Orth液D. Müller液E. Rossman液11. 下列混合固定液虽有氧化剂和还原剂,但可以临用时配制,久置后则失效的是A. Bouin液B. Zenker液C. HIelly液D. Carnoy液E. Rossman液12. 冰冻切片时用甘油明胶封片是进行哪种染色A. 脂肪染色B. 网状纤维染色C. 巴氏染色D. HE染色E. 伊红染色13. 不属于脱落细胞学检查的标本是A. 胸水标本B. 腹水标本C. 痰液标本D. 宫颈涂片14. 既是组织处理过程中的透明剂,其精制品又常用作显微镜镜油的是A. 二甲苯B. 氯仿C. 香柏油D. 水杨酸甲酯和苯胺油E. 松油醇15. 树脂包埋法不适用于A. 不脱钙骨髓活检组织B. 肝穿刺活检组织C. 肾穿刺活检组织D. 眼球组织E. 淋巴结组织16. 下列混合固定液不含有重铬酸钾的是A. Zenker液B. Helly液C. Maximov液D. Bouin液E. Regaud液17. 锇酸固定液的特点描述中,错误的是A. 渗透力极弱B. 固定的组织块应小C. 主要为脂类固定剂D. 不溶于乙醇与苯等有机溶剂E. 不能用于线粒体和内质网的固定18. 下列适用于富含糖类组织的固定的是A. B-5固定液B. Bouin液C. PFG液D. PLP液和PLPD液E. Orth液19. 关于微波固定法错误的描述是A. 优点是核膜清晰、染色质均匀、组织结构收缩小B. 应用时要严格控制温度C. 不要使用新鲜非缓冲甲醛D. 储存时间长的甲醛应放入少量的碳酸盐中和E. 甲酸产生,溶液呈酸性,有利于细胞核的着色20. 有关组织固定的情况,下面的描述不正确的是A. 固定使细胞内的一些蛋白等凝固位于细胞内的原有部位,有利于其后的确切定位B. 及时充分固定,可防止组织自溶C. 对于不同的组织均可选用甲醛常温固定方法,不影响其以后的标本制作和染色D. 及时充分固定,可防止组织腐败E. 固定可保持细胞内特殊的成分与生活状态相21. 下面的透明剂进行组织透明后,需用苯漂洗去除,然后进行浸蜡的是B. 氯仿C. 香柏油D. 水杨酸甲酯E. 松油醇22. 可同时进行光镜和电子显微镜检测的包埋法是A. 火棉胶包埋法B. 树脂包埋法C. 塑料包埋法D. 碳蜡包埋法E. 明胶包埋法23. 关于甲醛固定液的描述错误的是A. 甲醛固定液是水溶液渗透能力强B. 能使白蛋白和核蛋白沉淀C. 能与蛋白质中许多氨基酸反应D. 冷冻切片法能保存脂类和类脂体E. 可固定高尔基体、线粒体,是糖的保护剂24. 用锇酸固定液固定组织时,其特点是A. 延长固定时间,组织的脆性增加,对染色有利B. 缩短固定时间,组织的脆性增加,对染色有利C. 延长固定时间,组织的脆性增加,对染色不利D. 延长固定时间,组织的脆性减弱,对染色有利E. 缩短固定时间,组织的脆性增加,对染色不利25. 对免疫球蛋白染色最好的固定液是A. Bouin液B. Carnoy液C. Orth液D. Zenker液E. Rossman液26. 用下列哪种固定液固定的组织一般不可冲洗A. 重铬酸钾B. 铬酸C. 苦味酸D. 氯化汞E. 乙醇27. 甲状腺肿瘤的特异性标记抗体是什么A. 促甲状腺素B. 上皮细胞膜抗原C. 降钙素D. 癌胚抗原E. 甲状腺球蛋白28. 下面的组织透明剂一般少用,而且能使阿尼林染料退色的是A. 丁香油B. 氯仿D. 水杨酸甲酯E. 松油醇29. 关于冷冻干燥包埋法错误的描述是A. 可保存组织内可溶性物质,防止蛋白质变性B. 可保存组织内酶的活性,减少抗原的丢失C. 可用于免疫荧光标记D. 可用于放射自显影E. 适合电镜标本制备30. 关于重铬酸钾固定液的描述正确的是A. 无毒性B. 未酸化的重铬酸钾能使蛋白质沉淀C. 固定高尔基体和线粒体效果良好D. 经其固定的组织酸性染料着色较差E. 能与乙醇还原剂混合31. 对于丙酮固定液的描述不正确的是A. 可与水、醇、氯仿和醚等混合B. 可使蛋白质沉淀,渗透力强,对核的固定差C. 广泛用于酶组织化学中各种酶的固定D. 其作用基本与乙醇相同E. 对糖原有极好的固定作用32. 不适合用Zenker液固定的组织是A. 横纹肌肉瘤B. 恶性畸胎瘤C. 病毒包涵体D. 肺梗死的标本E. Negri小体33. 石蜡切片法一般常规切片厚度为A. 1~2μmB. 6~8μmC. 1μm以下D. 4~6μmE. 8μm以上34. 恒冷冰冻切片机箱内工作状态下温度范围是A. -10℃±B. -4℃±C. -25℃±D. -40℃±E. -30℃±35. 下面的组织透明剂可作为骨组织石蜡切片透明剂的是A. 丁香油B. 氯仿C. 香柏油D. 水杨酸甲酯36. 组织脱水时通常乙醇的正确浓度顺序是A. 70%-75%-80%-90%-100%B. 70%-75%-85%-90%-100%C. 70%-80%-85%-90%-100%D. 70%-80%-85%-95%-100%E. 70%-80%-90%-95%-100%37. 下列固定液易燃易爆,保存要注意的是A. 三氯醋酸B. 锇酸C. 铬酸D. 醋酸E. 苦味酸38. 对于乙醇固定液的描述正确的是A. 乙醇是一种氧化剂B. 固定速度快,不易使组织变脆C. 具有固定兼脱水作用D. 属于氧化剂,易还原E. 可以与铬酸、锇酸等混合39. 不能用金属容器盛放,且组织固定后也不要用金属镊夹取的固定液是A. Bouin液B. Zenker液C. Orth液D. Carnoy液E. Rossman液40. 转式切片机切取组织,由下向上切,为得到完整切片,防止组织出现刀纹裂缝,应该将A. 皮肤组织的表皮部分向上,胃肠组织的浆膜面向上B. 皮肤组织的表皮部分向上,胃肠组织的浆膜面向下C. 皮肤组织的表皮部分向下,胃肠组织的浆膜面向下D. 皮肤组织的表皮部分向下,胃肠组织的浆膜面向上E. 皮肤组织,胃肠组织哪面向上下都可以41. 组织石蜡切片过程中透明的作用A. 使组织变硬B. 使组织利于染色C. 脱去多余水分D. 媒介作用E. 固定作用42. 下列不是骨和含钙组织的脱钙方法的是A. 硝酸脱钙法B. 盐酸脱钙法C. 电解脱钙法D. 整合剂脱钙法E. 超声波脱钙法43. 有关一般肿瘤标本的取材选择,下列错误的是A. 肿瘤的主体部分B. 肿瘤组织及其邻近的组织C. 肿瘤两端的切缘组织D. 肿瘤周围的正常组织E. 远离病灶的正常组织不必取材44. 关于苦味酸固定液的描述错误的是A. 能沉淀一切蛋白质B. 穿透慢,组织收缩明显C. 对脂肪和类脂无固定作用D. 不能软化火棉胶E. 固定组织时间不宜超过24小时45. 下列组织不能用乙醇固定的是A. 肝组织B. 阿米巴原虫C. 尤因肉瘤D. 纤维蛋白和弹力纤维E. 含血红蛋白等色素的组织46. 中性甲醛液不含A. 40%甲醛B. 无水乙醇C. 磷酸二氢钠D. 磷酸氢二钠E. 蒸馏水47. 影响切片的质量因素中不包括A. 取材时组织块的大、固定液不足B. 组织块的陈旧、腐败、干枯C. 切片时环境的温度D. 组织固定不及时E. 以上各项均包括48. 常用的组织石蜡切片的透明剂是A. 乙酸B. 铬酸C. 二甲苯D. 乙醇E. 甲醛49. 骨和含钙组织脱钙时其组织厚度不宜超过A. 2cmB. 4mmC. 1.5cmD. 8mmE. 1cm50. 标本取材的注意事项中,错误的是A. 在时间上原则是尽快取材B. 皮肤组织包埋面必须与表面平行C. 过多的血凝块应该清除D. 组织周围的多余脂肪组织应清除E. 有钙化时应先脱钙51. 关于升汞固定液的描述错误的是A. 一般用其5%~7%饱和水溶液作为固定剂B. 单独使用组织收缩明显C. 穿透力低,只宜固定薄片组织D. 对蛋白质有沉淀作用E. 对类脂和糖类有固定作用52. 对于Bouin混合固定液的描述不正确的是A. 适用于结缔组织染色B. 细胞核着色鲜明C. 细胞质着色较差D. 适宜于标本的长期保存E. 对于脂肪的固定效果好53. 检查嗜铬细胞宜用A. Bouin液固定B. Zenker液固定C. 0rth液固定D. Carnoy液固定E. Rossman液固定54. 对于要进行糖原尿酸盐结晶染色的标本其乙醇固定液浓度是A. 70%乙醇B. 75%乙醇C. 80%乙醇D. 90%乙醇E. 100%乙醇55. T细胞淋巴瘤标记抗体很多,但目前比较常用于石蜡切片的全T标记抗体是A. CD8B. CD45ROC. CD20D. CD30E. CD35。

口腔种植体体内实验种植体-骨结合检测方法研究进展

口腔种植体体内实验种植体-骨结合检测方法研究进展

全科口腔医学电子杂志Electronic Journal Of General Stomatology2019 年7月 第6卷/第20期V ol.6, No.20 July. 201938口腔种植体体内实验种植体-骨结合检测方法研究进展王 欢,魏彤梅,郭赵梁,戚孟春*,孙 红(华北理工大学,河北 唐山 063210)【摘要】种植已经成为目前修复口腔牙列缺损或缺失的热门手段,而种植体的体内研究效果是评价种植体临床应用可行性必要的途径。

骨结合已成为体内实验中重要的检测指标,常通过对种植体-骨结合界面的情况进行检测观察,故种植体-骨结合的检测方法尤为重要,本文针对目前应用较为广泛的种植体-骨结合检测方法进行综述。

【关键词】口腔;种植体;骨结合;检测手段【中图分类号】R78 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-8803.2019.20.38.01近年来,种植已成为一种很有前途的口腔修复方法[1],各学者热衷于对口腔种植体的体内研究。

骨结合已成为体内实验中重要的检测指标,而对其的评价常通过对种植体-骨结合界面的情况进行检测观察[2]。

体内实验是检测种植体研发成果的重要检测方法,为种植体临床应用前提供必要的理论依据,故本文针对目前应用较为广泛的种植体-骨结合检测方法进行综述。

1 宏观观察通过对比不同标本观察种植体松动情况和种植体周围新生骨质沉积现象,以评价种植体-骨结合情况。

但宏观观察无法客观反应真实情况,受主观影响较大。

2 影像学检查X 线检测可以观察骨生长情况、种植体的位置、骨质密度区别、不同时点对比的骨吸收程度等,并且因其成本低、便捷操作、辐射剂量低,在体内实验中也广泛应用。

但X 线检测只能对种植体-骨结合界面相应检测指标在二维层面上做出定性描述,但对实质骨吸收、缺损等呈现骨密度增减或有无透射区等粗略的定性结果评价种植体周围骨情况。

锥形束投照计算机重组断层影像设备(CBCT)可以对种植体-骨结合区域进行扫描,构建三维立体图像,通过种植体周围阴影区域、密度等参数来评价骨结合能力,并可粗略定量分析种植体植入后出现的骨吸收现象,可以三维重建种植体骨内位置以及评价种植体稳定性。

组织形态学检验技术

 组织形态学检验技术

组织形态学检验技术骨髓切片是检验有核细胞增生程度的金标准,也是许多造血和淋巴组织疾病检验诊断的金标准。

骨髓活检中,对组织技术处理有骨髓脱钙石蜡包埋和不脱钙的塑料包埋两种方法。

塑料包埋技术可以弥补骨髓脱钙石蜡包埋技术的某些不足,是当前临床血液病理学检验诊断的较优项目。

这里介绍的检查方法和形态学都是以塑料包埋技术处理的骨髓切片为标本的。

一、检查方法和步骤(一)塑料包埋切片技术1.仪器设备骨髓组织塑料包埋切片所需仪器属于小型简便类。

主要有切片机,其型号和功能的类型很多,可选用多功能旋转切片机或轮转式切片机;摊片和烤片机;磨刀机;恒温水浴箱;烤片机,可选用小型烤箱;其他,如锉刀、镊钳、毛笔、载玻片等。

2.骨髓组织脱水由骨髓活检二步法获取并经Bouin固定液后的骨髓组织标本,一般将组织固定30~60分钟后即进入脱水等步骤。

在取出包埋于塑料前,需要除去组织中水分。

除水分的方法可经浸渍于浓度逐级递增的乙醇来处理,根据高浓度溶剂向低溶度渗透原理,把组织中水分置换出来。

先小心地将组织块从固定液中取出,用自来水漂洗几下,吸水纸吸干。

用小纱布将组织块和写有其编号的小纸块包裹后,置于盛有自来水的搪瓷罐或钢罐内10分钟,然后用止血钳挤去纱布上的残余水分,如图-1所示逐级脱水10分钟,脱水罐均应置于55℃恒温水浴箱内,并每间隔2~3分钟振摇一次。

最后一步无水乙醇处理后,室温搁置2~3小时左右。

一般下午脱水后,放置过夜,第二天包埋。

图-1 髓组织分级脱水示意图各级乙醇浓度脱水必须充分,若不充分,切出的组织片较易断裂或松散,也易出现组织细胞水肿3.组织塑料包埋浸透(1)Hemapun 865包埋剂配制1)甲液(浸透剂):甲基丙烯酸-2-羟基乙基酯单体(HEMA,日本产品)100ml,聚乙二醇(PEG-400)10ml,过氧化苯甲酰0.4g充分混匀待过氧化苯甲酰全部溶解后置玻璃瓶内,贮存在4℃备用。

2)乙液(促进剂):PEG-400 10~15ml,N,N-二甲基苯甲胺2ml,混合后置青霉素小瓶内,4℃贮存备用。

初级(师)卫生资格初级病理学技术师模拟题2021年(27)_真题-无答案

初级(师)卫生资格初级病理学技术师模拟题2021年(27)_真题-无答案

初级(师)卫生资格初级病理学技术师模拟题2021年(27)(总分100,考试时间120分钟)A1/A2题型1. 有关一般肿瘤标本的取材选择,下列错误的是A. 肿瘤的主体都分B. 肿瘤组织及其邻近的组织C. 肿瘤两端的切缘组织D. 肿瘤周围的正常组织E. 远离病灶的正常组织不必取材2. 下面的成分不属于组织处理和染色时的透明剂的是A. 二甲苯和氯仿B. 苦味酸和异丙醇C. 松油醇D. 香柏油和丁香油E. 水杨酸甲酯和苯胺油3. 对松脂醇的描述正确的是A. 松脂醇是一种组织固定剂,可替代甲醛B. 松脂醇属于化学染料,主要用于细胞特殊染色C. 松脂醇主要使细胞核着色D. 松脂醇主要使细胞质着色E. 松脂醇可取代无水乙醇用作脱水剂和随后的浸透和包埋4. 不能用金属容器盛放,且组织固定后也不要用金属镊夹取的固定液是A. Bouin液B. Zenker液C. Orth液D. Carnoy液E. Rossman液5. 对于4%多聚甲醛磷酸二钠/氢氧化钠混合固定液,下面的描述不正确的是A. 该固定液适用于光镜免疫组织化学B. 固定液性质温和,可长期保存组织C. 该固定液用于电镜的免疫组织化学时,应加入新鲜配制的戊二醛D. 固定液毒性大,不适合于长期保存组织E. 该固定液配制后pH应凋至7.2~7.46. 既是脱水剂,又可用作封片溶剂,对染料不溶的是A. 正丁醇和叔丁醇B. 环己酮C. 四氢呋喃D. 还氧己环E. 松脂醇7. Carnoy液除了常用于糖原和尼氏体的固定外,还有下面哪项特点A. 该固定方法适用于标本的长期保存B. 对于染色体固定住,显示DNA和RNA效果好C. 用于保存脂类D. 该固定液固定速度慢而温和E. 该固定液渗透力差8. 要保存细胞内糖原宜用()。

A. Carnoy液B. Bouin液C. Orth液D. Zenker液E. Rossman液9. 对于整合剂脱钙法描述不正确的是()。

A. 对组织抗原性的损伤较小B. 对组织无损伤C. 可保留组织内酶活性D. 脱钙速度快E. 适合于组织化学和免疫组织化学染色的组织10. 在组织处理过程中,对丙酮的描述错误的是()。

骨髓塑料包埋活检在诊断骨髓纤维化中的价值

骨髓塑料包埋活检在诊断骨髓纤维化中的价值
陕西医学杂志 2008 年 10 月第 37 卷第 10 期
1631
骨髓塑料包埋活检在诊断骨髓纤维化中的价值
陕西中医学院第二附属医院 ( 咸阳 712000 ) 李 宏 董昌虎 何春玲 王越月 田亚宁 张云志 闫昱江 姚松夏 摘 要 目的: 探讨各类骨髓纤维化 ( MF ) 骨髓活组织病理图像改变。 方法: 用不脱钙的塑 料包埋技术研究 210 例骨髓纤维化骨髓活组织病理切片。 结果: 原发骨髓纤维化 58 例, 继发骨髓 纤维化 152 例; 髓系、 淋巴系、 骨髓转移癌、 恶性疾病与分期、 纤维组织多少差异有显著性 (P <0. ) ( ) 01 ; 巨核细胞数量与纤维组织多少差异有显著性 P <0.01 。结论: 不脱钙的塑料包埋法骨髓活 检对骨髓纤维化的诊断具有重要的价值 , 不但可以确定诊断骨髓纤维化 , 而且能鉴别各种不同类 型。 主题词 骨髓纤维化�诊断 骨髓活检 @ 塑料包埋法 骨髓活组织塑料包埋切片检查对血液病的诊断和 治疗具有重要的意义 , 我院自开展骨髓塑料包埋骨髓 活检技术以来共做骨髓标本 6000 余例 , 通过对 210 例 MF 骨髓活检研究分析, 确定了骨髓塑料包埋法骨 髓活检技术在骨髓纤维化中的诊断价值。 临床资料 1 一般资料 资料来源于本院 1992 年 1 月至 2007 年 10 月门诊和住院病人共计 210 例 , 其中男 117 例, 女 93 例 , 年龄 2 ~ 83 岁, 中位年龄 50.0 岁; 原发性 骨髓纤维化 ( IMF ) 58 例 ( 27.6% ) , 继发性骨髓纤维化 ( SMF ) 152 例 ( 72.4% ) , 其中继发于慢性粒细胞白血 病 49 例, 骨髓增生异常综合征 15 例, 急性非淋巴细胞 白血病 18 例, 骨髓转移癌 12 例, 多发性骨髓瘤 19 例 , 巨球蛋白血症 5 例, 非霍奇金淋巴瘤 12 例 , 霍奇金病 2 例, 急性淋巴细胞白血病 14 例 , 慢性淋巴细胞白血 病 3 例 , 毛细胞白血病 1 例, 真性红细胞增多症 急粒 变、 浆细胞白血病各 1 例。临床诊断标准按国内有关 血液 疾病 诊 断 标准 , 骨 髓网 状 纤维 积 分标 准 (Manoharon 分期 。 2 方 法 仪 器: 快 速组 织处 理仪。 试剂: Bouin 液: 饱和苦味酸水溶液 75ml、 40% 甲醛 20ml、 冰 醋酸 5ml , 混匀置棕色瓶保存; 塑料包埋剂甲液: 甲基 丙稀 酸 羟 乙 基 酯 单 体 ( HEMA ) 100ml 、聚 乙 二 醇 ( PEG 2400 ) 7.2 g、 过氧化苯甲酰 0.72 g, 充分混匀溶液 后置冰箱 4 ℃保存; 塑料包埋剂乙液: PEG 240015 ml 、 N2 N 二甲基苯甲胺 1 ml , 混匀置冰箱 4℃保存备用。方 法与步骤: ( 1) 取材: 常规消毒局麻髂后或髂前上棘, 用 国产 ( 上海 ) B 65201 骨髓活检穿刺针采取二步法提取 骨髓组织块。 (2 ) 固定: 将骨髓组织块放入盛有 B ouin

塑料包埋结合四环素荧光标记制作不脱钙骨组织切片的实验研究

塑料包埋结合四环素荧光标记制作不脱钙骨组织切片的实验研究
有利于行骨形态计量分析 以及植入体与骨整合 的研究 。
应 用塑料 包埋技 术制作 四环 素荧光标 记不脱 钙骨 组织切 片 ,
关键词 : 塑料包埋 ; 四环素荧 光标记 ; 骨组 织 ; 不脱钙切 片 ; 植人体
中图分 类号 : 4 . R4 6 8 文献标 志码 : A 文章编号 : 0 7 9 (0 2 0 04 0 1 1— 39 2 1 )5— 5 3— 3 0
临床与 实验 病理 学杂志
JCi EpP to 0 2Ma ;8 5 l x ah l 1 y2 ( ) n 2
・4 5 3・
塑 料 包 埋 结 合 四环 素 荧 光 标 记Байду номын сангаас制 作 不脱 钙 骨组 织 切 片 的实验 研 究
王勇平 李晓琴 张 辉 蒋 , , ,
摘要 : 目的

探讨塑料包埋技术结合 四环素荧光标记制 作不 脱钙骨 组织切 片 的关 键步骤 及应 用。方法 选取 四环 素荧光标
记 的兔股骨进行 塑料 包埋 ,e aS 6 0切片机切片 , L i P10 e 荧光显微镜观察后用 苦味酸 品红染色 , 并与 常规石蜡包 埋切片相 比较 。 结果 四环 素荧 光标 记不 脱钙骨组织经塑料包埋技 术处理 后 , 可清楚 地观察 类骨 质形成 、 入体及 周 围骨 组织 的整合程 度 , 植 与常规石蜡包埋相 比 , 染色层次分 明 , 组织移位形变 小。结论
T e r s l e e c mp r d w t o v n in lp rf n e e d n e h iu .Re u t W i h h e u t w r o a e i c n e t a aa f mb d ig tc n q e s h o i sl s t t e印 p i ain o lsi mb d i g tc — h l t f a t e e d n e h c o p c n q e i n e acfe o e t s e h e o e a d o tod we e ee d b ev d C mp r g w t h a af e t n ,t e c lr i u n u d e li d b n i u ,te n w b n n se i r la y o s re . o ai i t e p rf n s c i s h oo s i s n h i o b t e ed f r n is e r a i ob ee mie n e o ii a su t cu ed d n tc a g c .Co cu i n T es e ewe n t i e e t s u swe e e s y t e d tr n d a d t rgn lt s e s u tr i o h n e mu h h f t l h i r n l so h e — t n r p r d va t ep a t mb d i g tc nq e c mb n d wi er c ci e f o e c n e l ei ga e o t l o o e mo p o tia i s p e a e i lsi e e d n h i u o i e t t t y l u r s e c o h c e h a n l b a l pi n r ma f r n r h me r l b c a ay i a d te i t ga in o h mp a ta d n w b n . n lss n h n e r t ft e i l n n e o e o Ke r s lsi mb d i g t t c ci e f o e c n e l e i g b n i u ; n e acf d s ci n i ln y wo d :p a t e e d n ;er y l u r s e c a l ; o e t s e u d c i e e t ;mp a t c a n l b n s l i o

不同固定和包埋方法对大鼠骨组织免疫组化结果的影响

不同固定和包埋方法对大鼠骨组织免疫组化结果的影响
t o c h e m i c l a ma r k e r s o f r a t b o n e t i s s u e . Me t h o d s F o u r r a t s w e r e a n e s t h e t i z e d wi t h 2 % p e n t o b a r b i t a l s di o u m a n d t h e n s a c i r i f c e d b y a b d o mi n a l a o r t a b l e e d i n g . T h e f e mo r a nd a t i b i a s w e r e mo v e d q u i c k l y a n d t h e n p l a c e d i n 4 % p a r a f o r ma ld e h y d e a t r o o m t e n- r
p l a s m . O P G a b s o r b nc a e v l a u e o f t h e w h o l e e be m d d e d f e m r u nd a t i b i a( 4 5 2 ± n 3 , 4 . 4 2  ̄ Q4 , 8 . 6 6 ± 0 . 3 , 0 . 2 1 ± 0 . 1 ; 6 . 4 5 4 -
4 , 0 . 0 8  ̄ 0 . 1 )均显著高于相应截断包埋的吸光度值 ,差异有统计学意义 ( P < O . 0 5 ) ;整段包埋的股骨和胫骨吸光 度值均在 固定 3 d( 8 . 6 6 + _ 0 . 3 , 9 . 6 6  ̄ 0 . 4 )时达到最高峰值,显著高于 1 、2和 4 d的吸光度值 ,差异有统计学意义
i f x e d i n p a r a f o r m l a d e h y d e f o r 1 d a y , 2 d a y s , 3 d a y s , 4 d a y s , r e s p e c t i v e l y . he T h e m a t o x y l i n — e o s i n( H E )s t a i n i n g a n d e x p r e s s i o n o f o s t e o p r o t e g e r i n( O P G )p r o t e i n w a s d e t e c t e d b y i m m u n o h i s t o c h e m i s t r y i n p r a a f i f n s e c t i o n . R e s u l t s H E s t i a n i n g s h o w e d t h a t

组织包埋程序

组织包埋程序

组织包埋程序1. 包埋剂及其使用范围:用于组织包埋的材料有石蜡、碳蜡、火棉胶和各种塑料(甲基丙烯酸甲酯,环氧树脂,Epon 等)。

石蜡是最常用的组织包埋剂。

甲基丙烯酸甲酯的硬度很强,多用于未脱钙骨组织的包埋。

环氧树脂和甲基丙烯酸甲酯同样需要更复杂的包埋处理过程。

Epon主要用于电镜组织的包埋。

碳蜡包埋的主要优点是不经过脱水与透明处理,故组织块收缩较少,所以特别适用于脂肪及类脂的制片。

火棉胶主要用于大块组织和眼球的包埋,对研究神经组织和眼球等有一定的帮助。

塑料包埋需要特殊试剂脱水和透明,全过程必须手工操作。

塑料包埋多用于骨髓穿刺,肾穿刺和肝穿刺等小块组织的包埋。

石蜡包埋是一种常规包埋法,组织从脱水机中取出后仍在脱水盒内,必须人工将组织从脱水盒中取出来,然后放进包埋框里排列整齐,调整好方位,再灌满(62℃)熔化的石蜡。

2. 包埋步骤:(1)包埋时的用蜡需预先熔化,充分沉淀后使用。

(2)将熔蜡注入蜡模内,将镊子在酒精灯上加温,夹持浸好蜡的组织块,选择好包埋面,将其朝下埋入熔蜡内,用镊子轻轻按压,使组织在蜡中并紧贴蜡模底部。

随即将组织块号码签嵌入熔蜡的一侧。

(3)待熔蜡表面凝固后,可投入流水中、放进冰箱冷冻室或包埋机冷台上促凝。

(4)待蜡完全凝固后脱模,并把蜡块四周适当修切。

组织周围应留有1~2mm的蜡边。

提倡使用石蜡包埋机,质量更好!3. 包埋面的选择:(1)一般情况下以组织最大面为包埋面。

(2)管状结构的组织以横切面为包埋面。

(3)皮肤组织或有表层上皮的组织,包埋面应垂直于上皮表面。

(4)带有病变特点的组织,或者对包埋面有特别要求的组织应按预先标记的包埋。

小鼠胫骨不脱钙树脂包埋法的改良与应用

小鼠胫骨不脱钙树脂包埋法的改良与应用

小鼠胫骨不脱钙树脂包埋法的改良与应用邓仲豪; 林锦德; 聊哲霆; 陈宇璠; 吴德胜; 冯舒皓; 陈纳淳; 赵宝红; 赵亮【期刊名称】《《南方医科大学学报》》【年(卷),期】2019(039)009【总页数】7页(P1038-1044)【关键词】树脂包埋; 不脱钙; 复数胫骨包埋; 预防脱片【作者】邓仲豪; 林锦德; 聊哲霆; 陈宇璠; 吴德胜; 冯舒皓; 陈纳淳; 赵宝红; 赵亮【作者单位】南方医科大学南方医院关节与骨病外科广东广州 510515; 美国特种外科医院David Z. Rosensweig基因组学研究中心关节炎与组织再生项目组纽约10021; 安溪中医院骨科福建泉州 362400【正文语种】中文基因在许多骨病病程中发挥着重要的调控作用[1]。

近年来,随着基因编辑技术的发展以及新的骨病靶点基因的不断发现,基因编辑动物模型在骨病研究中的应用越来越广泛[2-5]。

在骨病研究中,对骨骼组织变化进行多个水平的检测是各个实验的中心环节,在组织学水平,获取体内实验数据的金标准方法是对组织进行包埋切片及染色分析,石蜡包埋法及树脂包埋法是最常用于包埋骨组织的方法[6]。

成熟骨组织质地坚硬且脆,使用石蜡包埋前要对骨组织进行脱钙处理[7]。

但脱钙后,石蜡切片无法用于骨形成及矿化沉积的分析,而骨形成及矿化沉积是衡量骨重建功能的不可替代的指标[8]。

为了能够完整保留骨骼的成分并进行切片分析,有研究提出不需脱钙的树脂包埋法[9]。

树脂包埋法中以树脂液代替石蜡,凝固后的树脂标本质地坚韧,不易碎裂,适用于不脱钙骨组织切片及分析[10-14]。

树脂包埋切片法现被认为是骨组织学研究的最佳方法之一[6]。

传统的树脂包埋切片法仍存在树脂凝固时间长、树脂凝固不完全、在切片采集及染色过程中容易脱片等缺点[15-16]。

针对传统树脂包埋法缺点的改良报道较少,有科研团队尝试构建识别程序以提高效率[17]。

有文献报道了一种预防软组织树脂切片发生脱片的方法[16],也有通过改善载玻片的方式进行预防脱片的报道[18]。

不脱钙骨组织包埋技术的改进

不脱钙骨组织包埋技术的改进

不脱钙骨组织包埋技术的改进李朵;魏启幼;范松青;蒋谊;袁凌青;戴如春;谢辉;廖二元【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2005(21)6【摘要】在骨组织切片上同时进行组织形态学计量与免疫组化有较大难度。

这是因为常用的包埋介质石蜡只能用于不含钙或含钙很少的组织,而骨组织富含钙盐,所以必须先脱钙。

脱钙的骨组织可做免疫组化与原位杂交,但骨小梁的结构遭到了破坏,不能进行组织形态学计量,从而丢失了骨的生长与钙化方面的信息。

塑料包埋的不脱钙骨组织虽能行组织形态学计量,却难以兼顾免疫组化与原位杂交。

因此,建立一种可靠的、简便的且同时适应于三者的不脱钙骨组织包埋方法是骨病理学研究的关键。

【总页数】3页(P731-733)【作者】李朵;魏启幼;范松青;蒋谊;袁凌青;戴如春;谢辉;廖二元【作者单位】中南大学湘雅二医院病理科,长沙,410011;中南大学湘雅二医院病理科,长沙,410011;中南大学湘雅二医院病理科,长沙,410011;中南大学湘雅二医院病理科,长沙,410011;中南大学湘雅二医院内分泌研究所,长沙,410011;中南大学湘雅二医院内分泌研究所,长沙,410011;中南大学湘雅二医院内分泌研究所,长沙,410011;中南大学湘雅二医院内分泌研究所,长沙,410011【正文语种】中文【中图分类】R361.2【相关文献】1.塑料包埋结合四环素荧光标记制作不脱钙骨组织切片的实验研究 [J], 王勇平;李晓琴;张辉;蒋垚2.塑料包埋不脱钙大块骨组织切片及染色 [J], 吕荣;徐新智;王军3.塑料不脱钙、石蜡包埋、明胶浸泡法对骨组织切片的比较 [J], 吕荣;杨光4.含植入物不脱钙骨组织病理切片技术在骨组织形态学研究中的应用 [J], 朱福余;梁洁;金毅;袁暾;张杰;蒲林云;车国喜;刘成虎;王昕;王阁奇;孙立魁5.应用甲基丙烯酸甲酯包埋不脱钙骨组织方法的探讨 [J], 谭见容;杨小红;康宁;王文;陈鸿辉;梁伟国因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

取材和切片制作室题库13-2-10

取材和切片制作室题库13-2-10

取材和切片制作室题库13-2-10问题:[单选,A1型题]骨和含钙组织脱钙时其组织厚度不宜超过()A.2cmB.4mmC.1.5cmD.8mmE.1cm骨、牙齿和有钙化的组织在充分固定后,应进行脱钙处理。

脱钙时其组织厚度不宜超过4cm问题:[单选]组织脱钙是否完全下面哪项检测方法不妥当()A.用针刺组织是否有阻力感B.用镊子可弯曲120°可否回弹C.脱钙液进行钙盐试验是否有沉淀D.严格根据脱钙的时间推算E.脱钙液进行钙盐试验是否透明问题:[单选,A1型题]对于整合剂脱钙法描述错误的是()A.对组织无损伤B.脱钙速度快C.可保留组织内酶活性D.对组织抗原性的损伤较小E.适合于组织化学和免疫组织化学染色的组织整合剂脱钙法对组织无损伤,但是脱钙速度慢,其因为可保留组织内酶活性,对组织抗原性的损伤较小,因此用于组织化学和免疫组织化学染色较为理想。

(11选5 )问题:[单选,A1型题]树脂包埋法不适用于()A.不脱钙骨髓活检组织B.肝穿刺活检组织C.肾穿刺活检组织D.眼球组织E.淋巴结组织问题:[单选,A1型题]可同时进行光镜和电子显微镜检测的包埋法是()A.火棉胶包埋法B.树脂包埋法C.塑料包埋法D.碳蜡包埋法E.明胶包埋法问题:[单选,A1型题]关于冷冻干燥包埋法错误的描述是()A.可保存组织内可溶性物质,防止蛋白质变性B.可保存组织内酶的活性,减少抗原的丢失C.可用于免疫荧光标记D.可用于放射自显影E.适合电镜标本制备问题:[单选]组织脱水时通常乙醇的正确浓度顺序是()A.70%-75%-80%-90%-100%B.70%-75%-85%-90%-100%C.70%-80%-85%-90%-100%D.70%-80%-85%-95%-100%E.70%-80%-90%-95%-100%问题:[单选,A1型题]有关一般肿瘤标本的取材选择,下列错误的是()A.肿瘤的主体部分B.肿瘤组织及其邻近的组织C.肿瘤两端的切缘组织D.肿瘤周围的正常组织E.远离病灶的正常组织不必取材一般肿瘤标本的取材,应选择肿瘤的主体部分,肿瘤组织及其邻近的组织(包括表面、基底面和侧面)及其肿瘤两端的切缘组织。

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浸泡液 成分 浸泡液 Ⅰ 甲基丙烯酸甲酯
邻苯二甲酸二丁酯 浸泡液 Ⅱ 甲基丙烯酸甲酯
邻苯二甲酸二丁酯 过氧化苯甲酰 浸泡液 Ⅲ 甲基丙烯酸甲酯 邻苯二甲酸二丁酯 过氧化苯甲酰
配制含量 磁力搅拌时间
95 m l 2h
5 ml
95 m l
5 ml 4h
1. 5 g
95 m l
5 ml
4. 5 g
4h
后漏弃下层液体 ,反复 3次 ,再用蒸馏水以同样方法洗 3次 ,去除液体中氢氧化钠 。然后往分液漏斗加无水 氯化钙 ,震荡混合数分钟 ,吸除水份 ,滤纸过滤去除氯 化钙 。上层滤液收集于瓶中 , 在 - 4℃冰箱中保存备 用 。取去除阻聚剂的甲基丙烯酸甲酯 (单体 ) 95 m l,邻 苯二甲酸二丁酯 5 m l,无水过氧化苯甲酰 410 g放入宽 口耐热塑料瓶中 ,放入磁力转子 ,置于热水杯中水浴恒 温加热 ,恒温保持在 50℃,置于磁力搅拌器搅拌 2 h。 注意液体温度不要过高 ,观察液体状态 ,出现气泡应该 采取降温措施 ,可浸于冷水中不断搅拌 ,或加入凉的单 体 。煮过后待液体完全降温 ,贴上标签置于 - 4℃冰箱 中保存备用 。将备好的标本置于底平 、壁薄 、干洁和大 小适宜的玻璃瓶内 ,并标记编号 。加入包埋剂后盖上 胶盖 ,在胶盖 插上 针 头以 便 排气 。继 而连 续 抽真 空 2 h,置于 37℃水浴恒温箱 2 ~3 d,取出包埋组织块即 可做切片 。 1. 4 切片制作 包埋后塑料部分均匀透明 ,可以清楚 地观察到塑料内样本 ,定位简单方便 ,也可通过 X线定 位 。将定位好的标本固定在 Leica SP1600硬组织切片 机的圆形样本紧固装置上进行锯切 ,切成厚度大约为 200~250 μm 左右 ,然后采用碳化硅耐水砂将薄片依 次从 500 目 、800 目 、1 000 目磨至 1 200 目 ,磨片后切 片厚度磨至 70 μm 左右 , 经亚甲基蓝 - 酸性品红染 色 [1 ]后显微镜观察 。
[ 2 ] 李青南. 骨质疏松实验动物研究 - 骨组织形态计量学 [M ]. 四川大学出版社 , 2001: 30.
[ 3 ] 王东胜. 带种植体骨磨片制作方法的改进 [ J ]. 口腔颌面修复 学杂志 , 2006, 7 ( 3) : 169 - 170.
[ 4 ] 吴哲 , 马冬丽 , 洪丽华 , 等. 不脱钙的牙齿骨骼塑料包埋制片 技术及方法探讨 [ J ]. 华西口腔医学杂志 , 2006, 24 ( 6) : 564
318 - 326. [ 6 ] YANG R, DAV IES C M , ARCHER C W , et al. Immunohisto2
chem istry of matrix markers in technovit 9100 new emedded unde2 calcified bone sections[ J ]. Eur Cell Mat, 2003, 6: 57 - 71.
【关键词 】 塑料包埋 组织形态学 种植体 骨整合 骨计量学
种植体植入材料研究通常需要通过制作含金属骨 组织切片 ,观察植入金属与组织的界面的结合情况 。 由于生物体硬组织中含有大量无机钙盐 ,坚硬易碎 ,制 作切片时金属与组织容易脱离 , 导致切片制作失败 。 常规骨组织切片制作一般有脱钙法和不脱钙法 ,由于 脱钙后组织软化及骨组织细微结构改变 ,影响含金属 - 骨组织界面的观察 ,所以含金属硬组织一般采用不 脱钙塑料包埋 。本实验采用甲基丙烯酸甲酯 (MMA ) 进行塑料包埋 ,通过 Leica SP1600 硬组织切片机制作 切片观察 ,探讨采用甲基丙烯酸甲酯对含种植体硬组 织进行塑料包埋的应用方法及优点 。
采用甲基丙烯酸甲酯塑料包埋技术对含金属硬组 织进行包埋 ,包埋液充分渗透进入骨组织 ,聚合塑化后 透明坚硬 ,制作切片过程金属与组织结合良好 ,不易脱 离 。能解决含金属硬组织不脱钙切片的制作 ,此方法 可以广泛应用于硬组织的组织形态学研究和口腔种植 体 - 骨整合界面的研究 。
参考文献
[ 1 ] MAN IATOPOULOS C, RODR IGUEZ A, DEPORTER D A, et al. An imp roved method for p reparing histological sections of metallic im2 p lants[ J ]. Jnt J O ral Maxillotac Imp lants, 1986, 1 (1) : 31 - 37.
表 2 四环素 - 钙黄绿素双色荧光标记平均间距及
其平均矿化速率骨计量学比较
x ±s
新骨位置
近种植体区 远种植体区
间隔时间 ( d) 10 10
双色荧光 标间距 (μm )
9. 4 ±0. 61 5. 8 ±0. 0. 94 ±0. 11 0. 58 ±0. 14
3 讨论
随着包埋材料 、切片机和特殊切割系统的发展 ,制 作不脱钙组织 切 片的 技术 已 经逐 渐 成熟 。DONATH 等 [5 ]首先描述了采用 EXAKT切磨系统 ,制作不脱钙含 金属骨 切 片 的 切 磨 技 术 , 把 乙 二 醇 甲 基 丙 烯 酸 酯 ( GMA)作为包埋介质 ,使异丁烯酸和甲基丙烯酸发生 聚合反应 ,并成功完成塑料包埋 ,但是反应中酶的活性 和蛋白的抗原性都发生了变化 。随着新一代甲基丙烯 酸甲酯 (MMA )的出现 ,包埋反应允许在较低温度进行 聚合 ,聚合温度可以低于 20℃。低温反应 , 能保持了 酶的活性和蛋白质的抗原性 ,使免疫组织化学研究成 为了可能 [6 ] 。MMA 还用于骨髓活检样本包埋 ,包埋后 骨髓组织形态学结构保存完好 ,且免疫细胞化学检测 可靠 ,能够证明药物治疗后骨髓细胞的再生 。
- 465. [ 5 ] DONATH K, BREUNER G. A method for the study of undecalci2
fied bones and teeth with attached soft tissues. The Sage - Schliff ( sawing and grinding) technique [ J ]. J O ral Pathol, 1982, 11:
【摘要 】 目的 探讨含种植体硬组织骨计量学研究采用不脱钙塑料包埋技术的运用技巧与优点 。方法 选 取含钛种植体骨组织块 ,采用甲基丙烯酸甲酯进行塑料包埋 ,包埋后经 Leica SP1600硬组织切片机切锯成 200 μm 厚切片 ,手工磨至 70μm ,染色后进行观察 。结果 制成切片在显微镜下观察钛种植体与骨组织界面 ,可见到界面 及其周围骨组织矿化过程 ,种植体骨结合良好 ,其周围新骨荧光双色标记间距为 ( 914 ±0161)μm。结论 塑料包 埋技术适用于不脱钙硬组织包埋 ,制作含金属硬组织切片 ,可以广泛应用于含金属硬组织的组织形态学研究和口 腔种植体的骨整合界面研究 。
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广东医学 2008年 3月 第 29卷第 3期 Guangdong M ed ica l Journa l Mar. 2008, Vol. 29, No. 3
1. 5 统计学方法 计量数据采用 t检验 。
2 结果
2. 1 含种植体硬组织骨不脱钙塑料包埋结果 含金 属骨组织被塑料坚实均匀包埋 ,塑料为透明状 ,可以直 接透过塑料层清晰观察包埋物 , 切锯定位简单准确 。 制成磨片厚薄均匀 ,约 70 μm,染色效果较好 。切片中 骨组织与金界面清楚 ,磨片过程金属无脱落 。显微镜 下观察骨质的矿化程度 、金属种植体与骨组织机械锁 结 ,骨组织与金属的接触面积等如图 1, 2。 2. 2 四环素 - 钙黄绿素双色荧光标记示踪覌察 近 种植体处可见四环素条带粗大荧光强度较强 ,钙黄绿 素条带与四环素条带间隔较大 。荧光显微镜下可清晰 覌察骨 - 种植体界面的骨质生长过程 ,如图 3所示 ,新 骨先沉积于种植体表面再向外生长 ,说明种植体具有 很好的生物相容性和骨传导性 。通过测量荧光带可以 计算其矿化速率如表 2,两组间差异具有统计学意义 ( P < 0101) ,说明靠近种植体区新骨矿化较快 。
广东医学 2008年 3月 第 29卷第 3期 Guangdong M ed ica l Journa l Mar. 2008, Vol. 29, No. 3
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含种植体硬组织骨计量学不脱钙塑料包埋技术 3
郭泽鸿 容明灯 朱安棣 周磊 △
广东省口腔医院 ,南方医科大学附属口腔医院 (广州 510280)
通过切片观察我们发现种植体具有良好的生物相 容性和骨引导性 ,种植体骨界面形成种植体 - 骨结合 。 通过四环素 - 钙黄绿素双色荧光标记发现 ,近种植体 区荧光条带间隔比远种植体区较宽 ,说明近种植体位 置骨改建比远离种植体区骨改建活跃 ,新骨形成较多 。 从荧光示踪还发现骨组织从种植体表面开始向其周围 生长 ,说明该种植体具有十分良好的骨引导作用 。
3 广 东 省 科 技 三 项 经 费 计 划 项 目 (编 号 : 2006B19901006; 2006B 35801001 ) △通讯作者 。电话 : 020 - 84233801; 传真 : 020 - 84433177; E -
mail: Zho668@263. net
表 1 浸泡流程
1 材料与方法
1. 1 不脱钙带金属骨块切片制作方法 选取含金属 种植体的新西兰兔胫骨组织 ,动物处死前第 13 和 14 天连续两天皮下注射四环素 ,处死前第 3 和第 4 天皮 下注射钙黄绿素 ,进行双色荧光标记 。根据标本大小 切割成大小为 110 cm ×110 cm ×112 cm 的组织块 ,将 含种植体骨标本置于 10%福尔马林液在 4℃下固定 24 h备用 。也可以先采用甲醛 、甲醇和蒸馏水以 1∶1∶115 (V /V )的比例混合后进行血管灌注固定再采取骨标 本 [1 ] 。本研究采用前者方法 。 1. 2 脱水与浸泡 固定后标本先采用不同浓度梯度 的酒精进行脱水 [2 ] ,再以三氯甲烷进行浸泡 。脱水后 将标本置于浸泡液中浸泡 ,浸泡液需当天新鲜配制 ,浸 泡过程均在 4℃中进行 。浸泡液中甲基丙烯酸甲酯与 邻苯二甲酸二丁酯按表 1方法 [3 ]配制 。依次浸泡标本 各 2 d,每天抽真空 2 h。 1. 3 包埋聚合 配制包埋剂方法 [4 ] 去除成品甲基 丙烯酸甲酯中的阻聚剂 ,将 1 ∶1 成品甲基丙烯酸甲酯 和 5%的氢氧化钠加入分液漏斗 ,充分震荡 ,静止分层
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