骨组织脱钙液介绍
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骨组织脱钙液概述
在病理实验制作切片时,我们会经常碰到一些含钙组织,而且钙十分坚硬。
由于组织中的钙和石蜡之间的密度不同,含钙的组织一般不能直接制作切片。
骨组织含钙量最多。
除了骨组织之外其它组织也可发生钙化,在组织中形成钙化区,所以需要经过脱钙过程。
脱钙是制作骨组织切片的重要环节,尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。
为达到骨组织既充分脱钙,又保护骨组织的抗原不受破坏,需要对含钙的织固定之后再进行脱钙或采用固定兼有脱钙的液体处理,固定并脱钙。
然后再行常规制片。
用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(ethylenediamine tetraacetic acid EDTA)除此之外还有电解脱钙法。
强有机酸,如硝酸和盐酸可用于密皮质骨的脱钙,在短时间内可除去大量的钙。
令人遗憾的是这些强酸对组织形态会产生不良影响,脱钙作用强对组织破坏性大。
细小的组织,例如,骨髓组织不推荐用强酸脱钙。
虽然可以使用各种附加剂,如缓冲液具有保护组织的作用,但也降低了脱钙速度。
因此,各种脱钙液的配方都围绕着脱钙速度和消除对组织的不良影响而设计。
在酸类脱钙液中醋酸和甲酸比较适合于骨髓组织脱钙。
甲酸是一种使用范围较广的脱钙剂。
甲酸脱钙 10% 浓度比较合适。
醋酸和甲酸的作用比较弱,脱钙速度比较慢,它们不适合密皮质骨的脱钙。
EDTA 是一种比较温和的脱钙剂(EDTA 不是酸)。
对组织的渗透性差,作用慢。
大剂量使用价格较贵。
电解脱钙对组织损害最小,因为它的脱钙速度太慢,所以,不适合常规使用。
不同的脱钙液对骨组织的脱钙作用不同,脱钙效果也不完全相同。
为了达到良好的脱钙效果,建议使用EDTA脱钙液,该脱钙液对组织损伤较小,缺点就是脱钙时间会比较长些,但脱钙时间也要根据组织块大小而定。
目前国内生产EDTA脱钙液的公司也很少,个人感觉上海舜百生物的EDTA脱钙液使用效果还不错,脱钙脱的比较彻底,而且对组织损伤很小,就是周期长了些。
EDTA 是一种相对较好螯合脱钙剂,对组织结构影响最小,可以较好的保存组织抗原性。
经 EDTA 脱钙的组织可以进行免
疫组化和原位杂交染色,缺点是脱钙速度比较慢。
一般脱钙时间需要数周至数月。
为了提高 EDTA 的脱钙速度,骨组织取材尽量取薄 0.3mm,采用微波脱钙。
用微波炉辅助脱钙可以大大缩短脱钙时间,只要设置好脱钙程序,严格控制好温度和脱钙时间,一般不会对组织造成不良影响,据资料介绍微波炉脱钙,骨髓组织EDTA 脱钙,只需要花费3-4 个小时。
这样的脱钙时间完全可以满足常规使用。
另外,使用 EDTA 可以避免强酸脱钙所造成组织结构不良的影响。
EDTA可用于各种骨组织、牙齿等的脱钙,是一种比较理想的脱钙剂。