脱钙液的配制

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快速脱钙液在骨组织脱钙中的应用效果-病理学论文-基础医学论文-医学论文

快速脱钙液在骨组织脱钙中的应用效果-病理学论文-基础医学论文-医学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——含有骨质的肿瘤，钙化组织及骨髓穿刺组织都很坚硬，要想制成几微米的漂亮HE 切片是很困难的。

脱钙液是决定骨骼、牙齿、病理性钙化或骨化组织切片质量、染色效果的关键技术之一。

目前使用的脱钙液大多数是无机强酸类制剂，虽然脱钙效果好，但造成组织形态，特别是细胞结构的破坏。

因此，在本实验中我们选择了传统的脱钙液和快速脱钙液两种脱钙液进行比较，进而寻找一种更适合于骨组织脱钙的方法。

研究中发现快速脱钙液在不破坏组织结构及影响染色的同时，它可促进脱钙并加快脱钙速度，防止纤维性组织过度膨胀，并且保证了切片的质量，现报道如下。

1 材料与方法1．1 材料收集内蒙古医科大学附属医院2009 －2011 年手术切除的骨肿瘤、病变骨及骨髓穿刺病人标本共40 例。

根据标本的不同将骨组织取成体积为1．5cm 1．5 cm 0．5 cm 的薄片( 骨髓一般直径均为0．1 cm) ，放入10% 中性福尔马林固定24 h，用于脱钙实验。

1．2 普通脱钙液及脱钙方法与步骤普通脱钙液是5%的硝酸，即5 ml 硝酸加入95ml 蒸馏水配制而成。

具体脱钙步骤: ①先把大块骨组织标本切成小段，小块骨组织标本不用改刀，然后放入10%中性福尔马林中固定24 h 左右后再进行脱钙。

②将待脱钙的标本放入5% 硝酸脱钙液中，脱钙液不少于待脱钙标本总体积的10 倍。

③室温下进行脱钙: 骨髓穿刺标本需30 －60 min，肋骨、指趾骨需3 －6 d，皮质骨需要5 －7 d。

④脱钙后的组织经流水冲洗后进行取材、脱水、透明、常规石蜡包埋、制片。

1．3 快速脱钙液及脱钙方法与步骤快速脱钙液是由36% －38% 盐酸8 ml、冰醋酸5 ml、水杨酸10 g 、蒸馏水87 ml 混合而成。

用微波炉进行微波时，微波辐射可加速组织内部分子运动，加快脱钙速度，因标本在酸性溶液中滞留的时间短，所以对组织的损伤小。

不同的脱钙液在骨组织制片中的比较应用

不同的脱钙液在骨组织制片中的比较应用【摘要】目的比较不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力的差异，探讨其对HE染色的影响。

方法选取50例手术切除的新鲜骨标本，运用4种常用的脱钙液(14%硝酸、10%盐酸、20%甲盐酸和EDTA脱钙液)进行脱钙，比较其脱钙效果和对HE染色的影响。

结果不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力、HE染色效果影响有显著区别。

结论14%硝酸脱钙能力最强，用时间最短，染色的效果最差；10%盐酸对骨组织的损伤小，HE染色的效果最好，但用时较长；20%甲盐酸脱钙能力和HE染色效果都介于10%盐酸和EDTA脱钙液之间；EDTA脱钙液脱钙用时最长, 对骨组织的损伤最小。

【Abstract】Objective To investigate the different ability of four different decalcifying solutions to decalcify and their influence of HE stain and immunohistochemistry. Methods 50 cases of fresh human bone example are selected. The bones had been decalcified with four kinds of decalcifying solution (including 14% nitric acid, 10% hydrochloric acid, 20% a hydrochloric acid and EDTA). Results Different decalcifying solutions had the different decalcified ability and the influence of HE stain and immunohistochemistry. Conclusion 14% nitric acid can decalcify strongly and rapidly. But its deficiency is the infection of HE coloration and immunohistochemistry. 10% hydrochloric acid doesn’t destroy the tissue and has the best influence for HE stain. The effect of 20% a hydrochloric acid and HE stain between 10% hydrochloric acid and EDTA decalcifying acid. EDTA can decalcify for a long , have the minimum damage for bone tissue.【Key words】Decalcifying solution; HE stain; Bone tissue骨组织是一种坚硬的结缔组织，由骨细胞和骨基质组成，骨基质内含大量无机盐，主要是羟磷灰石-磷酸钙和碳酸钙。

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响作者：张大贵等来源：《中国现代医生》2012年第24期[摘要] 目的探讨三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响。

方法选择12例骨组织，随机分为3组。

A组用14%硝酸脱钙液进行处理，B、C组分别用EDTA脱钙液、PLANK脱钙液进行处理，同时对CD3、CD68、Ki—67 和TTF—1染色。

结果室温条件下，硝酸脱钙液的脱钙时间最短，但对组织损伤最大。

PLANK脱钙液和EDTA脱钙液脱钙效果较好，组织结构完整，形态清晰，免疫组化染色较好。

结论室温条件下，三种脱钙液中PLANK脱钙液和EDTA脱钙液对骨组织脱钙及免疫组化染色效果较好。

但由于EDTA脱钙液脱钙时间过长，PLANK脱钙液脱钙均匀，速度快，更适合用于临床病理检查。

硝酸脱钙液脱钙最快，但是免疫组化染色效果较差。

[关键词] 脱钙液；骨组织；免疫组化染色[中图分类号] R446.4+1 [文献标识码] B [文章编号] 1673—9701（2012）24—0101—03骨组织内含有大量无机钙盐，结缔组织坚硬，难以直接制片[1]。

如果强制切片，在蓝色钙盐背景下，往往无法看清细胞结构，所以需要选择一种能保持骨组织形态结构和染色后有利于保持细胞结构清晰度和对比度的脱钙液。

本文研究14%（体积分数）硝酸脱钙液、EDTA脱钙液、PLANK脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响，以期寻找一种效果比较理想的脱钙液，对病理诊断工作提供帮助。

1 材料与方法1.1 标本选择12例骨组织标本均来源于我院，切成1 cm×1 cm×0.3 cm的骨块，在福尔马林中性液内固定24 h，用于脱钙及免疫组化染色实验。

1.2 三种脱钙液①脱钙液Ⅰ：14%（体积分数）硝酸脱钙液，配制方法为14 mL浓硝酸加入86 mL蒸馏水；②脱钙液Ⅱ：EDTA脱钙液，配制方法为EDTA10 g，蒸馏水100 mL，加NaOH充分搅拌溶解，在用10 mol/L的HCl调pH为8.0，最后加入4%甲醛15 mL。

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响目的探讨三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响。

方法选择12例骨组织，随机分为3组。

A组用14%硝酸脱钙液进行处理，B、C组分别用EDTA 脱钙液、PLANK脱钙液进行处理，同时对CD3、CD68、Ki—67 和TTF—1染色。

结果室温条件下，硝酸脱钙液的脱钙时间最短，但对组织损伤最大。

PLANK 脱钙液和EDTA脱钙液脱钙效果较好，组织结构完整，形态清晰，免疫组化染色较好。

结论室温条件下，三种脱钙液中PLANK脱钙液和EDTA脱钙液对骨组织脱钙及免疫组化染色效果较好。

但由于EDTA脱钙液脱钙时间过长，PLANK 脱钙液脱钙均匀，速度快，更适合用于临床病理检查。

硝酸脱钙液脱钙最快，但是免疫组化染色效果较差。

标签：脱钙液；骨组织；免疫组化染色骨组织内含有大量无机钙盐，结缔组织坚硬，难以直接制片[1]。

1 材料与方法1.1 标本选择12例骨组织标本均来源于我院，切成1 cm×1 cm×0.3 cm的骨块，在福尔马林中性液内固定24 h，用于脱钙及免疫组化染色实验。

③脱钙液Ⅲ：PLANK脱钙液，配制方法为氯化铝10 g，甲酸50 mL，10%福尔马林10 mL，冰乙酸1.5 mL，加蒸馏水至总体积100 mL。

脱钙方法总结

缺：
（1）该液对细胞核作用较慢，使细胞核着色较差。
（2）要用5%硫酸钠液中和，然后充分流水冲洗至少12小时。
4．Perenyi’s液：
10%硝酸4份，0.5%铬酸3份，无水乙醇3份。
5mm厚的骨组织块脱钙时间需要2-7天。
优点：
（1）该液是一种暖和的脱钙液，可能由于铬酸和乙醇的存在可以抑制组织泡软。
厚度5mm骨组织块脱钙3-7天。
优点：
（1）细胞核染色相当好。
（2）不需要水洗，脱水时酸就会首先被脱出来。
缺点：使用化学方法测试不能确定脱钙的终点。
6．甲酸液：
甲酸10ml，10%福尔马林盐90ml。
厚度5mm骨组织块脱钙时间需要3-7天。
优点：
（1）脱钙同时可以对组织固定。
（2）对细胞核染色比较好。
（2）细胞核和细胞浆细微结构着色均好。
（3）推荐该液作为常规脱钙使用。
（4）组织脱钙后不需要碱性液中和和流水冲洗。脱钙组织直接移到90%乙醇中。
缺点：
（1）脱钙较慢，因此，紧急情况下不能使用。
（2）用化学方法测试不能确定脱钙的终点。
5．Von Ebener’s液：
饱和水溶液氯化钠50ml，蒸馏水50 ml，浓盐酸8 ml。
9．AFIP甲酸-柠檬酸钠液：
A液：甲酸25ml，蒸馏水25ml。B液：枸橼酸钠（结晶）10g，蒸馏水50ml。
临用时A液和B液等量混合，每日换1次，因为柠檬酸钠可以和钙离子螯合，具有促进脱钙的作用。
10．蒋维中（Jangweizhong’s）液：
盐酸80ml。甲酸70ml，三氯化钙50g，冰醋酸25ml甲醛100ml，生理盐水900ml。
缺点：脱钙时间必需仔细控制防止过度脱钙损害组织。

edta脱钙液配制方法

edta脱钙液配制方法EDTA脱钙液是一种常用的化学试剂，适用于在生化、分子生物学以及细胞生物学实验中，去除镁和钙离子的干扰。

本文将介绍一种EDTA脱钙液配制方法。

1.原料准备：1) 乙二胺四乙酸(EDTA)：分子式为C10H16N2O8，化学纯，实验室常备品，一定要质量优良。

2) 纯水：经过蒸馏或离子交换处理的自来水。

3) 氢氧化钠(NaOH)：实验室常备品，化学纯。

4) 氯化钙(CaCl2)：实验室常备品，纯度要求95%以上。

2. 配制方法：1) 取EDTA 10克，加入100毫升蒸馏水中，并充分搅拌至完全溶解。

2) 用氢氧化钠溶液调节pH值至8.0，溶液会变成无色透明。

3) 用蒸馏水将溶液加至总体积200毫升，均匀混合。

4) 氯化钙和氯化镁分别加入到50毫升蒸馏水中，若有残留颗粒，则需过滤至溶液无颗粒为止。

5) 将氯化钙和氯化镁溶液缓慢滴加到EDTA水溶液中，同时用磁力搅拌器搅拌，注意滴加时不要加的过快，需滴加至完全反应。

6) 倒入500毫升容量瓶中，并用蒸馏水加至刻度处，摇匀。

3. 注意事项：1) 在配制EDTA脱钙液时，应严谨操作，确保实验的准确性。

2) 水溶液的pH值应被精确地测量，并调节至8.0，以确保溶液的准确性与稳定性。

3) 在溶液调节和滴加氯化钙和氯化镁的过程中，应缓慢平稳，反应完全，避免产生沉淀和反应失误。

4) 为了得到稳定的EDTA脱钙液，应将其保存在阴凉、避光的环境中，并尽量降低其与大气中的CO2接触的机会。

总结：以上就是制备EDTA脱钙液的方法，这是适用于实验室的一种方法。

在添加脱钙剂到实验中时，确保您了解反应的机理和适用于您实验的最佳体系。

脱钙液的配制

脱钙液配制30%盐酸溶液1000 ml(10%中性福尔马林液700 ml+浓盐酸300 ml)加入140 g 氯化钠,待其完全溶解后再加入20 ml冰醋酸。

在日常病理技术工作中,有多种对骨骼的脱钙方法和脱钙组织切片的制作方法,本文所述脱钙方法和脱钙液从脱钙速度,对组织的损伤程度以及切片染色等方面效果都比较理想,这种脱钙液与其他酸类脱钙液相比较,对组织损伤小,脱钙时间短,并作用温和,其中30%的盐酸溶液对脱钙组织造成的损害较小,对组织不膨胀,不至于导致脱钙过程缓慢,但核染色不佳。

加入氯化钠可以防止脱钙组织因经过盐酸脱钙后导致的切片染色偏红,加入冰醋酸可使脱钙组织软化,有利于切片,从而使制片效果更加理想。

对照组以单纯30%盐酸为主的脱钙液与新方法脱钙液对同等体积、大小、部位相同的骨组织同时进行脱钙,前者制作的骨骼切片不平整,染色偏红,胞核红染,核质不清晰,切片整体组织结构显示不清。

经新方法脱钙后所制作的切片组织结构显示清晰,切片中的软组织和骨组织结构均可完整显示,细胞染色清晰,核质对比鲜明,制片中所用的固定剂、脱水剂、透明剂等都为日常技术工作必备试剂,而且制作出的切片效果很好,在本方法中所用的固定、脱水、透明、浸蜡、染色试剂都可以数次重复使用,试剂配制和操作方法简单,值得临床推广应用。

王淑兰，制作骨骼组织切片的新脱钙液改良的Plank·Rycho脱钙液的配制:氯化铝7g ,盐酸815ml ,甲酸5ml ,甲醛15ml ,TritonX-1000.5ml ,蒸馏水100ml。

为了保持良好的骨组织形态结构,达到脱钙目的,我们在Plank·Rycho脱钙液中加入甲醛和TritonX-100 ,更加充分发挥各自的作用,使固定、脱脂、脱钙同时进行。

甲醛不仅是优良的固定剂,还可适度保护组织免受酸的侵蚀。

TritonX-100 (聚乙醇辛基苯基醚)是一种表面活性剂,虽不具备脱钙作用,但能溶解脂质,改善细胞膜的通透性〔1 ,2〕,使骨组织中的脂质在短时间内脱去,加快了脱钙速度。

骨及钙化组织切片的复方脱钙液的配制及脱钙方法

骨及钙化组织切片的复方脱钙液的配制及脱钙方法作者：温娜唐泽波王爽朱辛为来源：《中国医药导报》2008年第27期[关键词] 骨及钙化组织；复方脱钙液；脱钙方法；改良除酸[中图分类号]R816.8 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210（2008）09（c）-116-01骨及钙化组织非常坚硬，将其制成几微米薄切片难度较大。

常用的方法是先脱钙，使组织变软后再切片，所以脱钙是非常关键的技术。

目前使用的脱钙剂多为无机强酸类制剂，虽脱钙效果较好，但常造成组织形态，特别是细胞结构的破坏，影响骨组织形态观察和研究。

为此，我们使用复方脱钙液脱钙，不仅能够保持组织形态良好，亦能用于特殊染色及切片，现介绍如下：1 材料临床医学生对狗行外科手术后，取胫骨分别锯成1 cm长，再沿胫骨纵向劈成四段。

用生理盐水或0.1 mol/L的PBS(pH7.2~7.4)缓冲液洗2次，然后入3%戊二醛和4%多聚甲醛1:1混合液固定4 h；SHARP3A65型微波炉(日本，最大功率850 W，分5档可调)。

复方脱钙液：盐酸8 ml，醋酸5 ml和水杨酸10 g；依次加入蒸馏水87 ml中混合，配制成复方脱钙液。

2 方法2.1 脱钙方法将装标本的塑料提篮放在中型平底烧杯内加入复方脱钙液，再将其放入装有冰水的大平底烧杯或微波炉专用的塑料容器内，入微波炉2档10 min，取出更换经冰水制冷的脱钙液及吸热用的冷水，置炉内继续重复进行。

判断脱钙情况，决定是否再次重复，操作致脱钙完成。

脱钙过程中要随时检测脱钙液温度以不超过40℃为宜，并视情况更换脱钙液和检查脱钙程度。

该法是众多加速脱钙法中效果最显著，应用最多的方法[1]。

2.2 脱钙终点判定脱钙完成即应终止，以免脱钙过度，造成不应有的损伤。

脱钙未完成即终止，脱钙不净在切片时标本破碎，影响切片质量。

因此，如何判定脱钙终点很重要。

从理论上讲，脱钙终点的测定方法有物理、化学及X线照相技术等。

在实际工作中我们常采用针刺法，该法简单方便，易于掌握，唯其用于刺戳之针应采用针灸用体针为宜。

临床病理检验常用骨组织脱钙液效果的比较_曹颖

文章编号：1000-5404（2009）23-2399-02短篇论著临床病理检验常用骨组织脱钙液效果的比较曹颖（第三军医大学西南医院病理学研究所，重庆400038）摘要：目的比较几种骨组织的脱钙溶液与脱钙方法的效果，获得快捷、简便、适用于临床病理检验的脱钙技术。

方法考察在常温、恒温、搅拌状态下，几种常用的脱钙液对猪干骨中段脱钙、染色效果。

结果40ħ恒温搅拌条件下，盐酸-氯化钠脱钙液（脱钙液Ⅰ）、高浓度盐酸-甲酸-氯化钠脱钙液（脱钙液Ⅳ）、低浓度盐酸-甲酸-氯化钠脱钙液（脱钙液Ⅶ）、Plank-Rycho 脱钙液（脱钙液Ⅸ），都具有脱钙时间短、组织损伤小、不影响染色效果。

结论恒温搅拌条件下，脱钙液Ⅰ是最适合于临床病理检验的脱钙溶液。

关键词：脱钙液；骨组织；临床病理中图法分类号：R446文献标识码：A脱钙是决定骨骼、牙齿、病理性钙化或骨化组织切片质量、染色效果的重要技术关键之一。

简单、便捷、快速、有效的骨组织脱钙方法，有利于保持骨组织结构和组织中的抗原物质，对于临床正确诊断具有重要的意义。

目前报道的脱钙液和脱钙方法比较多［1－8］，但尚无公认的理想方法［2］，为此我们拟在恒温搅拌条件下，对几种备受推崇的脱钙液进行实验比较，期望获得适合于临床病理检验的骨组织脱钙液组成与脱钙方法。

报告如下。

作者简介：曹颖，女，湖南省长沙市人，主管技师，主要从事临床病理技术方面的研究。

电话：（023）68765462，E-mail ：chenji63@ 收稿日期：2009-06-22；修回日期：2009-07-131材料与方法1.1材料取新鲜的猪干骨，手术刀去除软组织与骨膜，大量水漂洗，用骨锯切取干骨中段，获得组织体积为10mm ˑ5mm ˑ1.5mm 的骨块，在4%中性甲醛液内固定24h ，用于脱钙实验。

1.2脱钙液组成选取文献报道比较多的几种脱钙溶液，用于考察操作条件、脱钙溶液组成对骨组织的脱钙效果。

各种脱钙溶液的组成及配制如下：盐酸-氯化钠脱钙液（脱钙液Ⅰ）：5ml HCl +15g NaCl +H 2O 至100ml 。

OSTEOSENS脱钙液

OSTEOSENS脱钙液使用说明书组织学中用于敏感脆弱组织脱钙产品编号：OS-OT-1L (1000 ml) OS-OT-2.5L (2500 mL)产品介绍硬组织脱钙是显微分析的必要在标准组织学方法里，把样品完全浸入到脱钙液中。

脱钙的时间主要由样品的大小和密度决定。

该试剂含有EDTA，在组织脱钙期间可以结合钙离子。

使组织变软以便于进一步处理。

测试样品敏感硬组织髂骨嵴(Latin Crista iliaca)和角化组织（血管）。

产品描述OSTEOSENS脱钙液—在组织学中用于敏感脆弱组织的脱钙液，含有EDTA.需准备的材料：固定液：4%中性甲醛固定液、10%中性甲醛固定液脱水/返水试剂：70%酒精 80%酒精 95%酒精 100%酒精透明试剂：二甲苯或者二甲苯替代物（脂肪族烃）包埋石蜡：BioWax Plus, BioWax 56/68, BioWax Blue, BioWax Micro封片剂： BioMount, BioMount High, BioMount M, BioMount New, BioMount New Low, BioMount DPX, BioMount DPX High, BioMount DPX Low, BioMount DPX Low Eco, BioMount C, BioMount Aqua, 加拿大树胶高品质载玻片：防脱载玻片、病理级载玻片高品质盖玻片：标准级别尺寸范围 18×18mm -24×60mm浸镜油：分为A, C, FF, 37组织染色液样品脱钙准备：①组织样品首先需要被固定②组织样品要被完全浸入到OSTEOFAST 脱钙液，使其完全脱钙脱钙步骤髂骨嵴(Latin Crista iliaca)和其他硬组织脱钙的时间和脱钙液的使用量依据处理样品的尺寸，类型，密度。

15 x 9 x 3 mm 的髂骨嵴浸入50 ml OsteoSens 脱钙液 18-24小时紧密的钙化组织一块紧密的钙化组织1.5 x 1 x 0.3 cm)需花费 48-72 小时脱钙注意：如果组织不要求用组织学方法处理，可以用OSTEOFAST 1脱钙液加快对骨硬组织的脱钙和固定结束例如：当髂骨嵴组织飘在脱钙液上脱钙即可结束。

固定脱钙液配方范文

固定脱钙液配方范文
脱钙液是指用于去除物体表面的钙质沉淀的溶液。

通常应用于去除管道、水槽、浴缸等表面的钙垢。

以下是一种固定脱钙液的配方，适用于家庭使用。

配方：
-1升白醋
-2汤匙柠檬酸
-500毫升温水
步骤：
1.将白醋倒入一个容器中。

2.加入柠檬酸，并搅拌均匀，直到柠檬酸完全溶解在醋中。

3.逐渐加入温水，同时不断搅拌，直到液体变得均匀。

4.将混合溶液倒入一个喷雾瓶中，以便于使用。

使用方法：
1.将脱钙液喷洒在需要去除钙垢的表面上。

2.等待约10分钟，让脱钙液发挥作用。

3.使用刷子或海绵擦拭表面。

对于较严重的钙垢，可能需要额外的擦拭。

4.用水冲洗表面，以确保彻底去除脱钙液和钙垢。

注意事项：
-在使用脱钙液时，请戴上橡胶手套，以免直接接触溶液。

-在使用脱钙液时，请确保通风良好的环境，以防刺激性气味和蒸汽。

-避免将脱钙液接触到眼睛或口腔中，如有发生，请及时用清水冲洗
并寻求医疗帮助。

-在使用脱钙液之前，请事先测试在较小的表面上，以确保对材料没
有损坏。

-如果材料表面需要特别注意，请先阅读和遵循制造商的清洁和护理
指南。

总结：
这种固定脱钙液配方简单易制作，使用方便。

白醋和柠檬酸都是天然
的酸性物质，能够有效去除钙垢。

然而，不同的材料和表面可能需要不同
的脱钙液配方和处理方法。

因此，在使用脱钙液之前，请务必先测试在较
小的表面上，以确保达到理想的效果并且不会损坏材料。

病理室常用试剂配制方法

福尔马林的配制
固定液的种类很多，分为单纯固定液和混合固定液。常用单纯固定液：1.甲醛(formaldehyde ）；
2.乙醇(alcohol) ； 3.醋酸(aceticacid)又名乙酸
福尔马林的配制
甲醛为非沉淀性固定剂，是一种约有40％重量溶于水的气体，易挥发，市售的为40 ％的甲醛水溶液，也称为福尔马林原液 (formalin)。此液久存自行分解，形成的白色沉淀为副醛(三聚甲醛或多聚甲醛)。
苏木精染色液的配制
人工氧化：是指在配制苏木精染液时加入一定量的氧化剂如氧化汞、碘酸钠等可立即使苏木精氧化成苏木红。但要注意加入氧化剂的量不能太多，不要使苏木精分子全部氧化变成苏木红，否则，苏木精染液的染色力减弱甚至失效。
苏木精染色液的配制
苏木精氧化剂中首选碘酸钠。其优点是在室温下易溶于水，不需煮沸就能放氧。氧化后，产生的碘化钠是无害的，染液的稳定性好。而氧化汞需要在苏木精染液煮沸时加入才能放氧，当开始放氧时又要立即把染液置入冷水中终止放氧。随后苏木精染液每天都会在液面形成一层金属膜，需要把染液过滤后才能用以染色，而汞盐也是一种毒性物质。
伊红染色液的配制
伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。伊红是细胞浆的良好染料。
伊红染色液的配制
先将伊红0.5-1g溶于95%酒精100ml中，用玻璃棒研碎溶解后，每100ml加冰醋酸一滴。用乙醇性伊红液染细胞浆后，可不经水洗直接用85%酒精脱水。伊红染色液有效期3个月。
脱钙液的配制