临床病理检验常用骨组织脱钙液效果的比较

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骨的煅烧和骨的脱钙实验

骨的煅烧和骨的脱钙实验骨骼是人体重要的组成部分，它不仅是身体的支撑系统，还有储存钙质、造血等重要功能。

骨骼中含有大量的有机和无机成分，其中有机成分主要是胶原蛋白，无机成分主要是磷酸钙。

骨的煅烧和骨的脱钙实验是研究骨骼组成的常用方法。

一、骨的煅烧实验骨的煅烧实验是一种通过高温处理来研究骨骼组成的方法。

该实验的原理是将骨骼样品加热至高温，使有机物质被分解，从而得到无机物质的残留物。

该残留物主要由磷酸钙和少量的其他无机盐组成。

该实验的步骤如下：1. 取骨骼样品，去除软组织，洗净并晾干。

2. 将样品放入炉中，加热至800℃左右，保持一定时间。

3. 取出样品，冷却后得到煅烧后的骨骼样品。

4. 对样品进行质量分析和化学分析。

通过煅烧实验得到的残留物主要是磷酸钙，因此可以通过测定残留物的重量和磷酸钙的含量来计算出煅烧前骨骼中磷酸钙的含量。

二、骨的脱钙实验骨的脱钙实验是一种通过化学方法去除骨骼中的钙质，从而研究骨骼有机成分的方法。

该实验的原理是将骨骼样品加入强酸中，使钙质溶解，从而得到有机物质的残留物。

该残留物主要由胶原蛋白等有机成分组成。

该实验的步骤如下：1. 取骨骼样品，去除软组织，洗净并晾干。

2. 将样品放入强酸中，如盐酸或硝酸，使钙质溶解。

3. 取出样品，冲洗干净，晾干。

4. 对样品进行质量分析和化学分析。

通过脱钙实验得到的残留物主要是胶原蛋白等有机成分，因此可以通过测定残留物的重量和有机成分的含量来计算出脱钙前骨骼中有机成分的含量。

总结骨的煅烧和骨的脱钙实验是研究骨骼组成的重要方法。

通过这些实验可以得到骨骼中有机和无机成分的含量，从而更深入地了解骨骼的构成和作用。

这些实验不仅可以用于医学研究，也可以应用于材料科学、地质学等领域的研究。

不同的脱钙液在骨组织制片中的比较应用

不同的脱钙液在骨组织制片中的比较应用【摘要】目的比较不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力的差异，探讨其对HE染色的影响。

方法选取50例手术切除的新鲜骨标本，运用4种常用的脱钙液(14%硝酸、10%盐酸、20%甲盐酸和EDTA脱钙液)进行脱钙，比较其脱钙效果和对HE染色的影响。

结果不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力、HE染色效果影响有显著区别。

结论14%硝酸脱钙能力最强，用时间最短，染色的效果最差；10%盐酸对骨组织的损伤小，HE染色的效果最好，但用时较长；20%甲盐酸脱钙能力和HE染色效果都介于10%盐酸和EDTA脱钙液之间；EDTA脱钙液脱钙用时最长, 对骨组织的损伤最小。

【Abstract】Objective To investigate the different ability of four different decalcifying solutions to decalcify and their influence of HE stain and immunohistochemistry. Methods 50 cases of fresh human bone example are selected. The bones had been decalcified with four kinds of decalcifying solution (including 14% nitric acid, 10% hydrochloric acid, 20% a hydrochloric acid and EDTA). Results Different decalcifying solutions had the different decalcified ability and the influence of HE stain and immunohistochemistry. Conclusion 14% nitric acid can decalcify strongly and rapidly. But its deficiency is the infection of HE coloration and immunohistochemistry. 10% hydrochloric acid doesn’t destroy the tissue and has the best influence for HE stain. The effect of 20% a hydrochloric acid and HE stain between 10% hydrochloric acid and EDTA decalcifying acid. EDTA can decalcify for a long , have the minimum damage for bone tissue.【Key words】Decalcifying solution; HE stain; Bone tissue骨组织是一种坚硬的结缔组织，由骨细胞和骨基质组成，骨基质内含大量无机盐，主要是羟磷灰石-磷酸钙和碳酸钙。

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响作者：张大贵等来源：《中国现代医生》2012年第24期[摘要] 目的探讨三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响。

方法选择12例骨组织，随机分为3组。

A组用14%硝酸脱钙液进行处理，B、C组分别用EDTA脱钙液、PLANK脱钙液进行处理，同时对CD3、CD68、Ki—67 和TTF—1染色。

结果室温条件下，硝酸脱钙液的脱钙时间最短，但对组织损伤最大。

PLANK脱钙液和EDTA脱钙液脱钙效果较好，组织结构完整，形态清晰，免疫组化染色较好。

结论室温条件下，三种脱钙液中PLANK脱钙液和EDTA脱钙液对骨组织脱钙及免疫组化染色效果较好。

但由于EDTA脱钙液脱钙时间过长，PLANK脱钙液脱钙均匀，速度快，更适合用于临床病理检查。

硝酸脱钙液脱钙最快，但是免疫组化染色效果较差。

[关键词] 脱钙液；骨组织；免疫组化染色[中图分类号] R446.4+1 [文献标识码] B [文章编号] 1673—9701（2012）24—0101—03骨组织内含有大量无机钙盐，结缔组织坚硬，难以直接制片[1]。

如果强制切片，在蓝色钙盐背景下，往往无法看清细胞结构，所以需要选择一种能保持骨组织形态结构和染色后有利于保持细胞结构清晰度和对比度的脱钙液。

本文研究14%（体积分数）硝酸脱钙液、EDTA脱钙液、PLANK脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响，以期寻找一种效果比较理想的脱钙液，对病理诊断工作提供帮助。

1 材料与方法1.1 标本选择12例骨组织标本均来源于我院，切成1 cm×1 cm×0.3 cm的骨块，在福尔马林中性液内固定24 h，用于脱钙及免疫组化染色实验。

1.2 三种脱钙液①脱钙液Ⅰ：14%（体积分数）硝酸脱钙液，配制方法为14 mL浓硝酸加入86 mL蒸馏水；②脱钙液Ⅱ：EDTA脱钙液，配制方法为EDTA10 g，蒸馏水100 mL，加NaOH充分搅拌溶解，在用10 mol/L的HCl调pH为8.0，最后加入4%甲醛15 mL。

骨组织脱钙技术及其应用

骨组织脱钙技术及其应用张绪斌;熊正文;张华东;解放军第【摘要】@@ 骨组织不同于一般的软组织,是一种坚硬的结缔组织,由粘多糖和一些胶原纤维样骨胶纤维构成的骨样组织和沉着于其中的无机盐(骨盐)形成的.【期刊名称】《医学理论与实践》【年(卷),期】2011(024)011【总页数】4页(P1264-1267)【关键词】骨组织;脱钙技术;应用【作者】张绪斌;熊正文;张华东;解放军第【作者单位】解放军第251医院,河北省张家口市,075000;解放军第251医院,河北省张家口市,075000;解放军第251医院,河北省张家口市,075000;解放军第251医院,河北省张家口市,075000【正文语种】中文【中图分类】R954.65;R392.1骨组织不同于一般的软组织,是一种坚硬的结缔组织,由粘多糖和一些胶原纤维样骨胶纤维构成的骨样组织和沉着于其中的无机盐(骨盐)形成的。

无机盐以羟基磷灰石结晶的形式存在,其中绝大部分为水合磷酸钙,此外还包括微量碳酸盐和柠檬酸盐等[1,2],因此骨和其他一些已钙化的组织在脱水、透明等制片前必须将组织中的钙盐用脱钙剂除去,才能制成4～5μm厚的切片。

目前,常用的脱钙剂主要有单纯酸类、混合酸类、螯合剂、离子交换树脂和电解脱钙等方法[3～6],尤其是近年来应用微波技术辅助脱钙明显缩短了脱钙时间,改善了HE、组织化学、免疫组织化学染色和原位杂交[7～11]。

现将骨组织的脱钙技术及应用等有关内容简介如下。

1 骨组织的组织学特点[1,2]骨组织由骨基质和骨细胞组成,骨基质是由有机物质和无机物质紧密结合而成,主要成分有:(1)胶原纤维:为Ⅰ型胶原;(2)粘蛋白:为胶原纤维间的无定型物质;(3)骨盐:主要是羟基磷灰石;(4)酶:包括碱性磷酸酶、酸性磷酸酶和胶原酶等。

软骨基质是由软骨母细胞分泌丰富的蛋白多糖组成的,HE染色呈淡蓝色,A lcian蓝染色阳性(蓝色),甲苯胺蓝呈异染性反应(紫红色),软骨的胶原属Ⅱ型胶原。

骨组织脱钙方法

骨组织脱钙方法
一、化学脱钙法
化学脱钙法是一种常用的骨组织脱钙方法，通过使用酸性溶液或者强酸来溶解骨组织中的钙盐，从而去除骨组织中的钙离子。

常用的化学脱钙溶液包括盐酸、硝酸、硫酸等。

这种方法的优点是操作简单、脱钙效果好，但同时也存在一些缺点，如酸性溶液对骨组织本身有一定的损伤，且脱钙过程中会产生有毒气体，需要良好的通风设施。

二、酶解脱钙法
酶解脱钙法是一种较为温和的骨组织脱钙方法，通过使用酶制剂来分解骨组织中的胶原蛋白和钙盐，从而达到脱钙的目的。

常用的酶制剂包括胶原酶、弹性蛋白酶等。

酶解脱钙法的优点是操作简单、对骨组织损伤小、不产生有毒气体，但同时也存在一些缺点，如脱钙速度较慢，需要较长时间才能完成脱钙。

三、微波脱钙法
微波脱钙法是一种新型的骨组织脱钙方法，通过使用微波辐射来加速骨组织中的水分子运动，产生热量使骨组织内部的温度升高，从而加
速骨组织中的钙盐溶解和脱钙过程。

微波脱钙法的优点是脱钙效果好、速度快、对骨组织损伤小，但同时也存在一些缺点，如需要使用特殊的微波设备，且操作技术要求较高。

综上所述，不同的骨组织脱钙方法各有优缺点，应根据实际需求和实验条件选择适合的脱钙方法。

10％ EDTA、5％硝酸用于大鼠颞骨脱钙处理的效果对比观察

10％ EDTA、5％硝酸用于大鼠颞骨脱钙处理的效果对比观察卓洋;王巧;杨聪颖;陈昊;李爱民【摘要】目的观察并比较10％乙二胺四乙酸二钠(EDTA)和5％硝酸脱钙处理大鼠颞骨的效果.方法 SD大鼠10只,随机分为EDTA组和硝酸组,取出大鼠颞骨后分别置于10％ EDTA、5％硝酸脱钙液中进行脱钙处理.观察两组脱钙效果,记录脱钙时间,采用甲苯胺蓝染色进行颞骨组织形态学观察,采用免疫荧光双标染色检测α-tubulin蛋白、水通道蛋白1(AQPl).结果两组取材过程中,颅骨硬度适当,颞骨可轻松切下,无砂砾感,切下的颞骨无松散及组织脱落.硝酸组脱钙所需时间分别为(11.20±0.83)d、(26.20 ±2.38) min,两组相比,P＜0.05.EDTA组颞骨整体形态保持完好,蜗管、镫骨肌、岩动脉、神经元、雪旺细胞、郎飞结、神经干可清晰辨识;硝酸组颞骨整体结构保存较理想,神经元形态保持尚可,但存在骨质染色不均、雪旺细胞崩解、轴突肿胀、郎飞结消失现象.EDTA组颞骨脱钙后AQP1、α-tubulin蛋白定位准确,组织区分度高;硝酸组由于细胞膜中AQP1遭受破坏、位于微管内的α-tubulin蛋白漏出细胞,荧光消减明显,组织形态保持较差.结论 10％ EDTA和5％硝酸用于大鼠颞骨脱钙处理效果均较好,两种脱钙液均适用于普通病理及结构观察,若用于蛋白定量及定性方面研究,应首选10％ EDTA.【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2016(056)031【总页数】3页(P43-45)【关键词】骨脱钙技术;乙二胺四乙酸二钠;硝酸;颞骨【作者】卓洋;王巧;杨聪颖;陈昊;李爱民【作者单位】徐州医学院附属连云港医院,江苏连云港222000;徐州医学院附属连云港医院,江苏连云港222000;徐州医学院附属连云港医院,江苏连云港222000;徐州医学院附属连云港医院,江苏连云港222000;徐州医学院附属连云港医院,江苏连云港222000【正文语种】中文【中图分类】R446.6颞骨参与构成头颅的侧部与颅底，其中穿行面神经、脑膜中动脉及分支，颞骨同时容纳听觉器官及其附属结构，颞骨骨折可造成上述结构损伤，引起相应并发症[1]。

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响目的探讨三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响。

方法选择12例骨组织，随机分为3组。

A组用14%硝酸脱钙液进行处理，B、C组分别用EDTA 脱钙液、PLANK脱钙液进行处理，同时对CD3、CD68、Ki—67 和TTF—1染色。

结果室温条件下，硝酸脱钙液的脱钙时间最短，但对组织损伤最大。

PLANK 脱钙液和EDTA脱钙液脱钙效果较好，组织结构完整，形态清晰，免疫组化染色较好。

结论室温条件下，三种脱钙液中PLANK脱钙液和EDTA脱钙液对骨组织脱钙及免疫组化染色效果较好。

但由于EDTA脱钙液脱钙时间过长，PLANK 脱钙液脱钙均匀，速度快，更适合用于临床病理检查。

硝酸脱钙液脱钙最快，但是免疫组化染色效果较差。

标签：脱钙液；骨组织；免疫组化染色骨组织内含有大量无机钙盐，结缔组织坚硬，难以直接制片[1]。

1 材料与方法1.1 标本选择12例骨组织标本均来源于我院，切成1 cm×1 cm×0.3 cm的骨块，在福尔马林中性液内固定24 h，用于脱钙及免疫组化染色实验。

③脱钙液Ⅲ：PLANK脱钙液，配制方法为氯化铝10 g，甲酸50 mL，10%福尔马林10 mL，冰乙酸1.5 mL，加蒸馏水至总体积100 mL。

骨组织脱钙液介绍

骨组织脱钙液介绍骨组织脱钙液概述在病理实验制作切片时，我们会经常碰到一些含钙组织，而且钙十分坚硬。

由于组织中的钙和石蜡之间的密度不同，含钙的组织一般不能直接制作切片。

骨组织含钙量最多。

除了骨组织之外其它组织也可发生钙化，在组织中形成钙化区，所以需要经过脱钙过程。

脱钙是制作骨组织切片的重要环节，尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。

为达到骨组织既充分脱钙，又保护骨组织的抗原不受破坏，需要对含钙的织固定之后再进行脱钙或采用固定兼有脱钙的液体处理，固定并脱钙。

然后再行常规制片。

用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸（ethylenediamine tetraacetic acid EDTA）除此之外还有电解脱钙法。

强有机酸，如硝酸和盐酸可用于密皮质骨的脱钙，在短时间内可除去大量的钙。

令人遗憾的是这些强酸对组织形态会产生不良影响，脱钙作用强对组织破坏性大。

细小的组织，例如，骨髓组织不推荐用强酸脱钙。

虽然可以使用各种附加剂，如缓冲液具有保护组织的作用，但也降低了脱钙速度。

因此，各种脱钙液的配方都围绕着脱钙速度和消除对组织的不良影响而设计。

在酸类脱钙液中醋酸和甲酸比较适合于骨髓组织脱钙。

甲酸是一种使用范围较广的脱钙剂。

甲酸脱钙 10% 浓度比较合适。

醋酸和甲酸的作用比较弱，脱钙速度比较慢，它们不适合密皮质骨的脱钙。

EDTA 是一种比较温和的脱钙剂（EDTA 不是酸）。

对组织的渗透性差，作用慢。

大剂量使用价格较贵。

电解脱钙对组织损害最小，因为它的脱钙速度太慢，所以，不适合常规使用。

不同的脱钙液对骨组织的脱钙作用不同，脱钙效果也不完全相同。

为了达到良好的脱钙效果，建议使用EDTA脱钙液，该脱钙液对组织损伤较小，缺点就是脱钙时间会比较长些，但脱钙时间也要根据组织块大小而定。

目前国内生产EDTA脱钙液的公司也很少，个人感觉上海舜百生物的EDTA脱钙液使用效果还不错，脱钙脱的比较彻底，而且对组织损伤很小，就是周期长了些。

脱钙方法总结

缺：
（1）该液对细胞核作用较慢，使细胞核着色较差。
（2）要用5%硫酸钠液中和，然后充分流水冲洗至少12小时。
4．Perenyi’s液：
10%硝酸4份，0.5%铬酸3份，无水乙醇3份。
5mm厚的骨组织块脱钙时间需要2-7天。
优点：
（1）该液是一种暖和的脱钙液，可能由于铬酸和乙醇的存在可以抑制组织泡软。
厚度5mm骨组织块脱钙3-7天。
优点：
（1）细胞核染色相当好。
（2）不需要水洗，脱水时酸就会首先被脱出来。
缺点：使用化学方法测试不能确定脱钙的终点。
6．甲酸液：
甲酸10ml，10%福尔马林盐90ml。
厚度5mm骨组织块脱钙时间需要3-7天。
优点：
（1）脱钙同时可以对组织固定。
（2）对细胞核染色比较好。
（2）细胞核和细胞浆细微结构着色均好。
（3）推荐该液作为常规脱钙使用。
（4）组织脱钙后不需要碱性液中和和流水冲洗。脱钙组织直接移到90%乙醇中。
缺点：
（1）脱钙较慢，因此，紧急情况下不能使用。
（2）用化学方法测试不能确定脱钙的终点。
5．Von Ebener’s液：
饱和水溶液氯化钠50ml，蒸馏水50 ml，浓盐酸8 ml。
9．AFIP甲酸-柠檬酸钠液：
A液：甲酸25ml，蒸馏水25ml。B液：枸橼酸钠（结晶）10g，蒸馏水50ml。
临用时A液和B液等量混合，每日换1次，因为柠檬酸钠可以和钙离子螯合，具有促进脱钙的作用。
10．蒋维中（Jangweizhong’s）液：
盐酸80ml。甲酸70ml，三氯化钙50g，冰醋酸25ml甲醛100ml，生理盐水900ml。
缺点：脱钙时间必需仔细控制防止过度脱钙损害组织。

骨组织甲酸脱钙浓度探讨

２结果
脱钙终点是充分利用两次取材的间隔时间．下一次取材前检
查脱钙情况，后用水冲洗残余的甲酸２～Ｏｍｎ无须特别然０３ｉ，提示，常方便，践证明效果很好，数骨组织都能在２非实多４ｈ脱钙好。当然由于甲酸是弱酸，果是硬的皮质骨脱钙时如
我ｆ对２０例骨组织经不同浓度甲酸脱钙后的切片、ｆ】０染色结果分４级进行评价。ｔ：片完整，明显刀痕，Ｅ染色』切亡无Ｈ核质清晰，质鲜艳；：片完整，少量刀痕，Ｅ染色核胞良切有Ｈ
理想，但染色不稳定，核质有时偏浅，胞质有时偏红，这可能是
甲酸浓度偏高，时间偏长，对组织结构有所破坏的缘故。经４％、００３％甲酸脱钙液脱钙的组织切片效果理想，色稳定染染色结果与不脱钙的组织比较差异无统计学意义；０４％与３％０甲酸脱钙液切片、色效果差异无统一意义，３％甲酸染学丽０脱钙液较４％甲酸脱钙液更能节约试剂成本。实践证明：０为了保持组织结构的完整性，细胞核的稳定性，质染色的埘比核性，钙液的浓度脱钙时间必须控制在最低限度，此，脱ｊ因３％甲酸脱钙液作为日常：液是较好的选择。０１作脱钙剂的温度越高脱钙速度越快．对组织损伤也越严但重，一般在２～５（常温下最适宜；仃选择常温下２０２＝ｃ我】４ｈ为

三种脱钙液对骨组织脱钙后切片染色效果分析

顺利制出一张质量较好的组织切片并非易事，本要求是切基
片完整，色后各种骨细胞的细胞核及胞浆清晰，胞外胶染细
原对比度好。目前使用的脱钙方法有很多种，以分为酸类可脱钙液、螯合剂脱钙液、电解法脱钙液等。
右，辐射５ｍｎ测量脱钙液的温度（（，ｉ，＜６℃）间隙３ｍｎ）ｉ。用同
钙的效果（２。表）
表２三种脱钙液不同时间效果分析
ＬｉＡＰ０ｅａＳ３（自动脱水机；４ＬＩＡ全自动包埋机；５东ｃ￣全（）ＥＣ（）方一Ａ型恒温干燥箱；６Ｏｙｐｓ（）ｌａ显微镜及ＣＩＳ图像分析ｍＭＡ仪；７ＲｎｓｅｇＣ（）ｏｇｈｎＢＤ一１５６０冰箱；８Ｎ一６０（）８３自动温度控制漂片烤片仪。
２０ｍ，０ｌ盐酸８５｜，．Ｔ甲酸５ｎＩ２１％甲醛＋５１ｌｄ（）０％硝酸液：
４％甲醛，５０６％硝酸，０ｌ馏水；３ＥＴ中性液：ＤＡ１０ｍ蒸（）ＤＡＥＴ１，馏水１０ｍ，ＮＯ０ｇ蒸０ｌ加ａＨ搅拌溶解后，１ｏＬ的ＨＩ用０ｍｌ／Ｃ调ｐＨ为７０然后加４甲醛ｌｒ。．，％５ｎｌ１１３仪器．．（）ｉ０微波炉；２ＬｉＲ２３片机；３１ｒ２ｐ（）ｅａＭ１５切ｃ（）
３讨论
１２２脱钙方法．．
见表１。
骨组织分别按以下方法脱钙，脱钙时间
表１三种脱钙方法脱钙时间表

组织学技术脱钙切片标本制作

组织学技术脱钙切片标本制作含钙的组织，骨、牙1 脱钙剂常用：硝酸、盐酸、硫酸、甲酸（蚁酸）、枸橼酸（柠檬酸）、三氯醋酸（三氯乙酸）、乙二胺四乙酸（EDTA）最常用的无机酸为硝酸，最常用的有机酸为EDTA。

（1）硝酸脱钙快，效果好一般用5%硝酸水溶液，不超过10%2毫米厚的骨片脱钙2~3天（2）甲酸良好的脱钙剂。

脱钙较慢，对骨组织结构破坏较轻2~3毫米厚骨片，松质骨约48小时，密质骨7~10天，经常换液染色效果比硝酸好脱钙时加入尿素等试剂，防止纤维性组织过度肿胀而使组织受破坏（3）乙二胺四乙酸（EDTA）很好的脱钙剂，对组织破坏极小，长期脱钙也无明显破坏脱钙后的染色效果好脱钙时间长。

2周以上甚至3个月。

加温至37℃可加快脱钙常用15%水溶液。

2 脱钙液（1）单纯脱钙液：一种脱钙剂浓硝酸5毫升，尿素3~5克，蒸馏水100毫升浓硝酸5毫升，甲醛5毫升，甘油5毫升，蒸馏水100毫升浓甲酸50毫升，70%酒精 50毫升5%甲酸水溶液5毫升，蒸馏水95毫升三氯醋酸5克，10%甲醛100毫升浓盐酸15毫升，氯化钠175克，蒸馏水1000毫升。

用时每200毫升每天加浓盐酸1亳（von Ebner）EDTA15克，蒸馏水100毫升（2）混合脱钙液枸橼酸甲酸液：枸橼酸钠结晶10克，90%甲酸25毫升，蒸馏水75毫升甲酸三氯醋酸液：85%甲酸50毫升，95%酒精50毫升，枸橼酸钠结晶10克，三氯醋酸0.5克，蒸馏水50毫升3 脱钙基本方法⑴取新鲜骨固定于10%甲醛水溶液或稍久。

⑵脱钙（针刺能顺利进入组织），充分水洗（中止脱钙）。

⑶入5%硫酸钠水溶液12~24小时（中和），流水冲洗过夜。

⑷脱水、透明、浸蜡、包埋、切片50%、70%、80%、90%、95%酒精、冬青油透明1、冬青油透明2、二甲苯洗去冬青油（70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、正丁醇1、正丁醇2、软蜡、硬蜡、包埋、切片）切片10微米左右。

⑸苏木精伊红染色。

临床病理检验常用骨组织脱钙液效果的比较

临床病理检验常用骨组织脱钙液效果的比较发表时间：2016-03-03T10:32:27.000Z 来源：《健康世界》2015年18期作者：蒲正芳[导读] 南部县人民医院病理科将快速脱钙液运用在临床病理检验中，可将切片质量显著提高，有推广运用意义。

南部县人民医院病理科 637300摘要：目的：探讨临床病理检验常用骨组织脱钙液的临床效果。

方法：选取在2013年12月-2014年12月在我院行手术切除的骨病变、骨肿瘤以及骨髓穿刺患者标本70例，把70例标本随机分成两组，观察组和对照组，每组分别35例标本。

给予对照组硝酸脱钙液检验，观察组快速脱钙液检验，比较观察两组标本在微波以及常温条件下骨组织脱钙和切片染色效果。

结果：使用快速脱钙液处理的观察组标本组织切片在4μm-5μm之间，切片完整平坦，薄厚均匀并且颜色新鲜，细胞核有清晰染色；使用硝酸脱钙液处理的组织切片薄厚不均匀，没有完整切片，染色较模糊并且没有清晰的核着色，会对病理诊断造成相应的影响。

结论：将快速脱钙液运用在临床病理检验中，可将切片质量显著提高，有推广运用意义。

关键词：临床病理检验；常用骨组织脱钙液；效果；比较因骨组织中有大量钙盐沉淀，形成坚硬的结缔组织，实施直接切片治疗非常复杂，选取对保护骨组织形态结构有利并且制片效果较好的脱钙方式是当前重点研究的问题，这对临床检验中诊断病理有重要意义。

当前众多研究中使用的改良脱钙方式较多，但具体何种方式可保证取得良好的检验效果仍不明朗[1]。

为研究临床病理检验常用骨组织脱钙液的临床效果，选取在2013年12月-2014年12月在我院行手术切除的骨病变、骨肿瘤以及骨髓穿刺患者标本70例，现将结果报告如下：1资料与方法1.1一般资料选取在2013年12月-2014年12月在我院行手术切除的骨病变、骨肿瘤以及骨髓穿刺患者标本70例。

将70例标本随机分成两组，每组35例。

按照标本的差异把骨组织切取为体积是1.5×1.5×0.5cm的标本薄片，通常骨髓的直径为0.1cm，将所有标本放入到浓度为10%的福尔马林中固定24h，随后运用到脱钙实验中。

四种脱钙液对骨和骨髓组织及结构影响的比较

骨髓组织内的各种造血细胞幼稚娇嫩强劲的硝酸本实验所采用的骨组织来源于狗实验材料相同实容易破坏骨髓组织的正常组织结构和细胞结构脱钙时验条件相同实验结果更具可比性该实验可以从脱钙时间难与控制一般来说14硝酸水溶液不宜用来作骨问脱钙速度和切片质量以及切片苏木精一伊红的染色效果组织特别是骨髓组织的脱钙液
中国组织工程研究笫７９誊第３７期
２０１５ — ０９ — １０出版
，
ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｎａｒｌｏｆＴｉｓｓｕｅＥｎｇ￣ｅｅｉｆｎｇＲｅｓｅａｒｃｈＳｅｐｔｅｍｂｅｒ１０，２０１５ＶｏＬ１９Ｎｏ．３７
中图分类号：Ｒ３１８文献标识码＝２０９５（￣２０：
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１５１３７＿０５９２
片、苏木精一伊红染色，镜下观察，对比４种脱钙液对骨和骨髓组织常规病理切片质量和其苏木精一伊红件受：２０１５－０６－１８染色效果。ｈｔｔｐ：／／ＷＷＷｃｒｔｅｒ．ｏｒｇ结果与结论：１４％硝酸甲醛生理盐水溶液组脱钙能力最强，脱钙最均匀，耗时最短，既能有效完全除去骨皮质中的钙质，又能保护骨髓组织及细胞的形态完好，切片质量和苏木精伊红染色的效果最佳；１４％硝酸水溶液组脱钙液，使骨组织疏松发泡，组织变黄，对组织的损伤大，脱钙不均匀，组织切片不完整，制片质量和苏木精一伊红染色的效果最差；２Ｏ％甲盐酸甲醛生理盐水溶液组对组织的脱钙能力、损伤程度、制片质量和苏木精一伊红染色效果都比１４％硝酸甲醛生理盐水溶液组稍差；２０％甲盐酸水溶液组对骨和骨髓组织的损伤小，脱钙效果好，切片质量和苏木精一伊红染色的效果佳，介于２０％甲盐酸甲醛生理盐水溶液组和１４％硝酸水溶液组之间。结果表明，４种脱钙液对骨和骨髓组织都具有良好的脱钙能力，制片质量及苏木精一伊红染色效果比较，１４％硝酸甲醛生理盐水溶液＞２０％甲盐酸甲醛生理盐水溶液＞２０％甲盐酸水溶液＞１４％硝酸水溶液１４％硝酸甲醛生理盐水溶液最适用于临床常规病理制片中骨和骨髓组织的脱钙。多灿矫．莫本璩．聂钠铭．镑觉民．李宇彬．辩税钙液对骨静骨髓组织及结构影响的沈＃ＥＹｅ，２０１５，１９￣：５９２８－５９３２．ｄｏｉ：ｌ０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．２０９５－４３４４．２０１５．３７．００５

临床病理检验中不同骨组织脱钙液效果的比较

临床病理检验中不同骨组织脱钙液效果的比较李玉莲;徐晓艳【摘要】目的对两种脱钙方法进行比较,获得简单、便捷、快速适用于临床病理制片的脱钙方法. 方法观察两种脱钙液:5％硝酸脱钙液(硝酸5ml加入95 ml蒸馏水)和快速脱钙液(含36％-38％盐酸8ml、冰醋酸5ml、水杨酸10 g、蒸馏水87ml),在常温及微波条件下对骨组织脱钙及HE切片染色效果的影响. 结果常温条件下,5％硝酸使组织结构有些破坏,染色效果不佳.微波条件下,使用快速脱钙液对骨组织结构损伤小,染色效果佳,适合于临床病理的骨组织制片. 结论标本经快速脱钙液处理后,其切片质量大大提高并远远优于普通脱钙液.【期刊名称】《山西医科大学学报》【年(卷),期】2014(045)010【总页数】3页(P996-997,1004)【关键词】骨组织;脱钙液;HE切片【作者】李玉莲;徐晓艳【作者单位】内蒙古医科大学病理学教研室,呼和浩特010059;内蒙古医科大学第一附属医院病理科;内蒙古医科大学病理学教研室,呼和浩特010059;内蒙古医科大学第一附属医院病理科【正文语种】中文【中图分类】R361.2含有骨质的肿瘤，钙化组织及骨髓穿刺组织都很坚硬，要想制成几微米的漂亮HE 切片是很困难的。

脱钙液是决定骨骼、牙齿、病理性钙化或骨化组织切片质量、染色效果的关键技术之一。

目前使用的脱钙液大多数是无机强酸类制剂，虽然脱钙效果好，但造成组织形态，特别是细胞结构的破坏。

因此，在本实验中我们选择了传统的脱钙液和快速脱钙液两种脱钙液进行比较，进而寻找一种更适合于骨组织脱钙的方法。

研究中发现快速脱钙液在不破坏组织结构及影响染色的同时，它可促进脱钙并加快脱钙速度，防止纤维性组织过度膨胀，并且保证了切片的质量，现报道如下。

1 材料与方法1.1 材料收集内蒙古医科大学附属医院2009-2011年手术切除的骨肿瘤、病变骨及骨髓穿刺病人标本共40例。

根据标本的不同将骨组织取成体积为1.5 cm×1.5 cm×0.5 cm的薄片(骨髓一般直径均为0.1 cm)，放入10%中性福尔马林固定24 h，用于脱钙实验。

病理组织脱钙液传统组方的比较分析

病理组织脱钙液传统组方的比较分析赵宝忠;张毅;刘志兰【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2014(030)006【总页数】2页(P699-700)【关键词】组织脱钙;盐酸脱钙液;硝酸脱钙液【作者】赵宝忠;张毅;刘志兰【作者单位】天津市北辰区宜兴埠镇社区卫生服务中心,天津300402;天津医科大学药学院,天津300070;天津市第二医院检验科,天津300141【正文语种】中文【中图分类】R-33病理组织脱钙液传统组方种类繁多，组分剂量差异较大。

本文就相关溶质、溶剂、溶液的性质及对病理组织成分的作用，对各种传统组方质量进行比较分析(传统组方组分剂量的统一换算以100 ml溶液量计，组织钙盐以碳酸钙计)。

传统组方:(1)Ⅰ组方［1，2］:浓硝酸 5 ml，去离子水 95 ml;(2)Schaffer组方［3］:浓硝酸5 ～7.5 ml，去离子水 92.5 ～95 ml;(3)Ⅱ组方［1，2］:浓硝酸 10 ml，去离子水90 ml;(4)Ⅲ组方［2］:浓硝酸 4.8 ml，尿素 3 ～ 5 g，去离子水95 ml;(5)Clayden 组方［4］:浓硝酸5 ～10 ml，尿素0.1 g，去离子水90 ～95 ml;(6)Haug 组方［3］:浓硝酸 16.7 ml，邻苯三酚 1.7 g，去离子水83.3ml;(7)Ⅳ组方［4］:浓硝酸7.5 ～15 ml，37%甲醛5 ml，去离子水 80 ～87.5ml;(8)Alexander组方［3］:浓硝酸6.2 ml，37%甲醛4.5 ml，去离子水 89.3 ml;(9)Schridde 组方［3］:浓硝酸 16.7 ml，37% 甲醛 8.3 ml，去离子水 75 ml;(10)Ⅴ组方［2］:浓硝酸 4.3 ml，37% 甲醛 4.3 ml，甘油 4.3 ml，去离子水87 ml;(11)Thoma 组方［3］:浓硝酸 15.4 ml，37%甲醛 7.7 ml，95%乙醇 77 ml;(12)Perenyi组方［4］:浓硝酸 4 ml，浓铬酸 0.15 ml，30% 乙醇 96 ml。

不同脱钙液对钙化性主动脉瓣膜脱钙效果的比较

不同脱钙液对钙化性主动脉瓣膜脱钙效果的比较李灿波;李海清;叶晓峰;赵强【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2015(035)008【摘要】目的比较不同脱钙液对钙化性主动脉瓣膜标本的脱钙效果.方法选择6例主动脉瓣钙化患者的病变瓣膜标本,每个瓣膜等分成3份后随机分配到5％硝酸(硝酸组)、10％甲酸(甲酸组)、10％ EDTA(EDTA组)溶液中进行脱钙,观察和比较各组病理切片的苏木精-伊红染色(H-E染色)和免疫组织化学染色效果.结果 EDTA 组脱钙速度较慢,但显示瓣膜组织结构完整,形态清晰,脱钙及免疫组织化学染色效果最佳.硝酸组脱钙时间最短,也能获得良好的脱钙效果.甲酸组脱钙时间较短,但脱钙效果最差.结论在钙化性主动脉瓣的病理学研究中,EDTA脱钙液仍是脱钙的最佳选择.而在考虑时间因素的情况下,硝酸脱钙液则是良好的替代.甲酸脱钙液由于对钙化瓣膜的脱钙效果较差,不推荐使用.【总页数】4页(P1234-1237)【作者】李灿波;李海清;叶晓峰;赵强【作者单位】上海交通大学医学院附属瑞金医院心脏外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院心脏外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院心脏外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院心脏外科,上海200025【正文语种】中文【中图分类】R542.52【相关文献】1.三种不同脱钙液在骨组织石蜡切片中的应用比较 [J], 杜洪;金荣2.临床病理检验中不同骨组织脱钙液效果的比较 [J], 李玉莲;徐晓艳3.不同脱钙条件下三种脱钙液脱钙效果的比较 [J], 陈敬文;张伟;王天娲;程俊;罗金风4.不同成份脱钙液对骨组织脱钙效果的比较 [J], 祁宏枝; 罗添友; 唐涛5.三种脱钙液对狗牙齿及牙槽骨脱钙效果的比较 [J], 于洪藻;李玉林;张丽红;王成坤;蔡家骏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

制作骨骼组织切片的新脱钙液

第7卷第3期2009年7月延安大学学报(医学科学版)Jour nal of Y ana n U ni ve rs i t y(M ed Sci)V01．7N o．3Jul．2009制作骨骼组织切片的新脱钙液王淑兰(延安大学附属医院病理科，陕西延安716000)摘要：目的制作人体骨骼组织脱钙及脱钙组织的病理切片。

方珐用日常病理技术工作中常用的脱钙液与新的脱钙液对人体不同部位骨骼组织同时进行脱钙处理后，制作的病理切片显微镜下观察。

站栗新脱钙液制备的骨骼组织切片完整，染色鲜艳，组织结构清晰；而旧脱钙液制作的骨骼组织切片不平整，染色偏红，切片整体效果不佳。

砖论新的脱钙液脱钙速度快．对组织损伤小．切片染色效果好．试剂配制方法简单．值得I临床推广应用。

关键词：骨骼组织；切片；脱钙液中图分类号：R36文献标识码：A文章编号：1672—2639(2009J03—0155—02在日常病理工作中，对骨骼组织、牙齿及某些钙化的坚硬组织，在做病理切片之前，要进行脱钙处理，通常用的脱钙液有硝酸、盐酸、甲酸为主配制的脱钙液…，还有铬酸和螫合剂配制的脱钙液，但是大多数酸类脱钙液都会对骨骼组织造成一定的损害，如：硝酸、铬酸脱钙液脱钙速度快，但对组织损害大B o，染色效果不佳，以盐酸和冰醋酸为主配制的脱钙液对组织损害小，但脱钙速度慢。

现介绍一种对脱钙组织损伤小而且配制简便的脱钙液，固定脱钙组织时不需要配制专用固定液，只用10％中性福尔马林液即可，方便了脱钙组织和其它组织共同进行固定、脱水，使操作程序简化，经过这种脱钙液脱钙后的组织制作出的切片完整，染色效果好，组织形态结构清晰，是一种适合于日常骨骼组织病理制片工作的脱钙液。

1资料与方法1．1资料延安大学附属医院病理科从2005—03—2009—03取人体各种骨骼组织、牙齿及钙化组织共96例，其中下颌骨5例、肋骨27例、股骨18例、椎骨3l例、牙齿7例、钙化组织8例，取材大小1．5c m x l．5cm×0．3cm。

对比骨组织的表面脱钙法和常规脱钙法对免疫组化抗原的影响

对比骨组织的表面脱钙法和常规脱钙法对免疫组化抗原的影响发布时间：2021-04-15T05:57:28.848Z 来源：《健康世界》2021年2期作者：鞠学萍[导读] 目的对比骨组织的表面脱钙法和常规脱钙法对免疫组化抗原的影响。

方法选取本院21例骨肿瘤患者标本开展本次研究，时间2019年01月-2020年01月，21例患者分别给予常规脱钙法（对照组）和表面脱钙法（观察组），比较两组对免疫组化抗原的影响。

结果观察组的骨松质脱钙时间、骨密质脱钙时间和光密度值均明显优于对照组（P＜0.05）；鞠学萍大庆市第四医院 163712摘要：目的对比骨组织的表面脱钙法和常规脱钙法对免疫组化抗原的影响。

结果观察组的骨松质脱钙时间、骨密质脱钙时间和光密度值均明显优于对照组（P＜0.05）；与对照组的ki-67阳性率和Vimentin阳性率相比，观察组均明显偏高（P＜0.05）。

结论相对比于常规脱钙法来说，表面脱钙法更有利于保存免疫组化抗原，脱钙效果更理想，具有推广价值。

关键词：骨组织；表面脱钙法；免疫组化抗原 [Abstract] Objective To compare the effect of surface decalcification and conventional decalcification on immunohistochemical antigen of bone tissue.Methods 21 cases of bone tumor patients in our hospital were selected to carry out this study from January 2019 to January 2020.21 cases were given conventional decalcification method（control group）and surface decalcification method（observation group），and the influence of two groups on immunohistochemical antigen was compared.Results the cancellous decalcification time，dense decalcification time and optical density value of the observation group were significantly better than those of the control group（P < 0.05）；compared with the Ki-67 positive rate and vimentin positive rate of the control group，the observation group was significantly higher（P < 0.05）.Conclusion compared with the conventional decalcification method，the surface decalcification method is more conducive to the preservation of immunohistochemical antigen，and the decalcification effect is more ideal. [Key words] bone tissue；surface decalcification；immunohistochemical antigen骨组织是人体中存在的一种非常坚硬的结缔组织，基质中存在大量钙盐是骨组织存在的最突出特点【1】。