4种不同厂家哌拉西林 他唑巴坦制剂的

[ 作者简介 ] 龚志成 ,男 ,硕士 ,副研究员 ,电话 :073124327317
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中国医院药学杂志 2007 年第 27 卷第 7 期 Chin Ho sp Pharm J ,2007 J ul ,Vol 27 ,No . 07
结果有差异 ,不同的样品之间 M IC、M IC50 、M IC90 的浓度梯 度有 1 个差值 。
1 mL 加纯化水 9 mL ,获得 C 药质量浓度为5 120 mg·L - 1 。
采用 M H 肉汤对倍稀释配置以下 12 个浓度比 ,分别取 C 药 2 mL 加入一系列内径为 90 mm 的平板内 ,再取融化后已在 (50 ±5) ℃水浴中平衡半小时以上的 M H 琼脂 18 mL 加到 平板内 (药物∶琼脂 = 1∶9) ,边加边摇晃平板 ,使药物与培养
uct s
产品
样品 1 样品 2 样品 3 样品 4
相对含量
哌拉西林/ % 他唑巴坦/ %
94. 3
91. 2
91. 8
88. 6
98. 3
97. 4
92. 2
92. 6
峰数目
4 6 7 6
杂质 峰面积百分比/ %
0. 55 0. 75 2. 14 1. 62
3. 2 细菌药敏结果 4 种不同的样品对 60 株临床细菌的最 低抑菌浓度结果见表 2 。4 种不同的样品对实验菌株的药敏
液色谱图中杂质峰的个数 、所有杂质峰面积之和占总峰面积
的百分比 ,得到杂质的含量 。 2. 2 细菌药敏测定 2. 2. 1 细 菌 来 源 60 株 细 菌 中 , 1 株 为 标 准 株 , 为
ATCC25922 大肠埃希菌 ;59 株临床菌株均为革兰阴性杆菌 , 19 株为大肠埃希菌 ,20 株为铜绿假单胞菌 ,20 株为克雷伯肺 炎杆菌 。
药品生产工艺的相对水平 。而一定量的杂质在临床使用过
2 方法
2. 1 药物成分含量和杂质含量的测定 2. 1. 1 色谱条件 色谱柱为 ZORBA X extent2C8 ODS 柱 (4. 6 mm ×150 mm) ;流动相为乙腈∶水相 = 225∶775 ,其中水 相是用超纯水配置成0. 005 mol·L - 1 四丁氢氧化胺溶液 ,再 用磷酸调平 p H 值至3 . 3 ,流速 1 mL·min - 1 ;检测波长为 210 nm ,柱温 30 ℃。进样量 20 μL 。该实验条件下 ,样品中的哌 拉西林 、他唑巴坦及各杂质峰能有效分离 ,互不干扰测定 。 2. 1. 2 含量测定 取本品 10 瓶 ,倾出内容物 ,混合均匀 ,精 密称取适量 ,加流动相制成每 1 mL 约含哌拉西林0 . 2 mg 的
板逐个接种 ,最终接种菌量约每个接种点含 104 个菌 。在 35 ℃培养 20 h 后观察结果 ,菌落生长被完全抑制的最低药物 浓度为该药对检测菌的 M IC。
2. 2. 5 药敏结果分析 采用 W HON ET 5. 1版本软件对药 敏结果进行分析 。
3 结果
3. 1 药物成分和杂质分析结果 4 种产品 H PL C 色谱图见
基充分混匀 ,获得的哌拉西林/ 他唑巴坦终浓度为 256/ 256 ,
128/ 128 ,64/ 64 , 32/ 32 , 16/ 16 , 8/ 8 , 4/ 4 , 2/ 2 , 1/ 1 , 0. 5/ 0. 5 , 0. 25/ 0. 25 ,0. 125/ 0. 125 ,0. 06/ 0. 06 。 2. 2. 4 检测菌和标准菌的准备 在已分纯的检测菌和标准
0. 25 - 256 4
2～64
8
2～64
4
2～64
8
2 - 64
8
1～128
8
0 . 5～128
8
1～128
16
0. 5 - 128 8
M IC90
32 64 32 64 16 32 32 32 64 128 64 64
4 讨论
国内 目 前 进 行 抗 菌 药 物 的 质 量 考 察 一 般 是 采 用
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4 种不同厂家哌拉西林/ 他唑巴坦制剂 的质量考察
供试溶液 ,精密量取 20 μL 进样分析 ;另精密称取哌拉西林 及舒巴坦对照品适量 ,同法制成哌拉西林 、他唑巴坦标准溶 液 ,作为对照溶液 。同法进样 ,按外标法以峰面积计算 ,分别 得到哌拉西林和他唑巴坦的标示百分含量 。另计算供试溶
谱分析[J ] . 中国现代应用药学 ,2001 ,18 (6) :4602461 . [ 6 ] 张永龙 ,李家泰. 舒巴坦与第三代头孢菌素联合对第三代头孢
菌素耐药菌的体外抗菌作用研究 [J ] . 中国临床药理学杂志 ,
2000 ,16 (5) 3232326 . [ 收稿日期 ]2007202205
龚志成1 ,戴智勇1 ,徐平声1 ,黄勋2 (1. 中南大学湘雅
医院药剂科 ,湖南 长沙 410008 ;2 中南大学湘雅医院感染科 , 湖南 长沙 410008)
[ 摘要 ] 目的 :比较不同厂家的哌拉西林/ 他唑巴坦制剂的 质量 。方法 :采用高效液相色谱法对 4 种不同厂家的哌拉西 林/ 他唑巴坦进行含量的测定 ,同时将 4 种产品采用 M2H 琼 脂稀释法对 60 株临床菌株进行最小抑菌浓度的测定 。结 果 :发现不同厂家的药物成分含量 、杂质含量不同 ,体外对细 菌的抑菌浓度也有不同 。结论 :临床上应该对不同厂家的同 一类型抗菌药物进行疗效及安全性监测 。 [ 关键词 ] 哌拉西林/ 他唑巴坦 ;质量 ;高效液相色谱 ;最小 抑菌浓度 [ 中图分类号 ] R927 . 11 [ 文献标识码 ] A [ 文章编号 ] 10012 5213 (2007) 0720955202
H PL C[4 ] 、褶合光谱分析[5 ] 等方法进行化学质量考察 ,或采用
体外行药敏实验测定最小抑菌浓度[6 ] 的方法进行药效学比
较 ,而将二者进行考察的实验尚无报道 。本实验首次运用两
种方法结合对临床新型抗生素哌拉西林/ 他唑巴坦复方制剂
进行质量考察 ,具有可行性和可信度 。
一般认为 ,包括未知杂质在内的总杂质含量 ,能够反映
在化学质量和体外抗菌活性方面有一定差异 ,因此产生的临 床效应可能也不相同 ,用药单位不应将某一品种的抗菌药物 的临床试验结果外推至其他厂家的化学结构同一的产品 ,而 应对各类产品进行监测 。
图 1 样品 1 色谱图 A. 他唑巴坦 ( t = 3 . 657 ) , 哌拉西林 ( t = 7. 211) ; B. 他唑巴坦 ( t = 3 . 650) ,哌拉西林 ( t = 7 . 203) ;C. 他唑巴坦 ( t = 3 . 650) ,哌拉西林 ( t = 7 . 208) ;D. 他唑巴坦 ( t = 3 . 528) ;哌拉西林 ( t = 7 . 090) Fig 1 chro matogram A. tazobactam ( t = 3 . 657) ,piperacillin ( t = 7 . 21) ;B. tazobactam ( t = 3 . 650) ,piperacillin ( t = 7 . 203) ; C. tazobactam ( t = 3 . 650) ,piperacil2 lin ( t = 7 . 208) ;D. tazobactam ( t = 3 . 528) ,piperacillin ( t = 7 . 090)
表 2 4 种样品对 60 株细菌的最小抑菌浓度 (mg·L - 1 ) Tab 2 The MIC of t he four p roduct to sixty st rains ( mg· L - 1)
在细菌药敏实验中 ,我们发现在铜绿假单胞菌和肺炎克 雷伯菌中有严重耐药菌株 ,对哌拉西林/ 他唑巴坦严重耐药 , 这是由于临床广泛使用该新型耐酶复方制剂所致 。因此 ,临 床上应注意抗菌药物的合理应用 ,防止滥用 ,从而降低细菌 耐药性的发生 ,提高新型抗菌药物的临床使用周期 。 参考文献 : [ 1 ] 黄海辉 ,张婴元. β2内酰胺类与β2内酰胺酶抑制剂复合制剂 —
新药杂志 ,1994 ,3 (4) :38241 . [ 4 ] 陈莹莹 ,陈云雷 ,王红琰. 复方制剂阿莫西林和舒巴坦钠含量
HPL C 测定法[J ] . 中国药学杂志 ,2001 ,36 (3) :1912192 . [ 5 ] 郑红 ,吴玉田 ,方慧生. 头孢哌酮和舒巴坦溶液稳定性的褶合光
他唑巴坦为新的β2内酰胺酶抑制剂 ,具有广谱的抑酶活 性 ,哌拉西林为对铜绿假单胞菌有效的广谱酰脲类青霉素 , 哌拉西林与他唑巴坦按 8∶1比例组成的复方制剂具有抗菌谱 广 、抗菌活性强 、对多种β2内酰胺酶稳定等特点 ,临床上广泛 用于治疗各种单纯和混合感染[1 ] 。目前 ,国内有多个药厂生 产哌拉西林/ 他唑巴坦复方制剂 ,这些不同厂家生产的制剂 在疗效和安全性方面是否相同 ,一直是临床比较关心的问 题 ,也是临床安全 、合理用药的重要内容 。对此 ,我们通过对 药物含量 、杂质含量及抗菌活性的检测 ,比较 4 种不同厂家 的哌拉西林/ 他唑巴坦制剂的质量 ,旨在为临床合理用药提 供理论依据 。
哌拉西林/ 三唑巴坦 [Baidu Nhomakorabea ] . 中国抗感染化疗杂志 , 2004 , 4 ( 3 ) :
1822185 . [ 2 ] 李影林. 临床微生物学及检验 [ M ] . 北京 : 人民卫生出版社 ,
1995 :77278 . [ 3 ] 金少鸿 ,胡昌勤.β- 内酰胺抗生素过敏反应研究进展[J ] . 中国
菌平板上部分挑取 4～5 个直径约 1 mm 左右的菌落接种于 3～5 mL M H 肉汤中 ,35 ℃培养 5 h ,再用 3～5 mL 生理盐水 校正到0 . 5麦氏单位 ,校正后的菌液用肉汤稀释 1∶10 (含菌量 约 1 ×107 CFU/ mL) ,用定量接种环挑取 1～2 μL 菌液对平
图 1 ;4 种产品的哌拉西林 、他唑巴坦含量和杂质峰数目 、百
分含量见表 1 。结果显示除样品 2 的他唑巴坦含量外 ,其它 样品含量均大于 90 % ,但是在杂质峰数目和含量方面差异较 大 ,样品 1 的杂质峰数目和含量最低 ,而样品 3 最高 。 表 1 4 种产品的含量测定及杂质分析
Tab 1 The determination of and imp urity of t he four p rod2
微生物 (数量) 克雷伯肺炎杆菌
(20)
大肠埃希菌 (20)
铜绿假单胞菌 (20)
抗菌药物
样品 1 样品 2 样品 3 样品 4 样品 1 样品 2 样品 3 样品 4 样品 1 样品 2 样品 3 样品 4
MIC MIC50
0 . 125～128 4 0 . 25～128 4
0. 25 - 256 4
2. 2. 2 细菌药敏方法 据文献[2] 采用琼脂稀释法测定最小
抑菌浓度 (MIC) 。 2. 2. 3 含药琼脂的制备 用3 . 9 mL 纯化水稀释 1 g 原药 粉 ,获得 A 药液质量浓度为 256 g·L - 1 ;再取 A 液 1 mL 加纯
化水 4 mL ,B 药液质量浓度达到51. 2 g·L - 1 ;最后取 B 药液
1 材料
1. 1 仪器 H P1050 型高效液相色谱仪 ; VWD 可变波长紫 外检测器 ; H P3365 化学工作站 。 1. 2 材料 哌拉西林对照品 (中国药品生物制品检定所 ,批 号 0419295027 ,含量为91. 3 %) ;他唑巴坦对照品 (珠海联邦 制药有限公司提供 ,含量为99 . 2 %) 。分别购置 4 个不同厂 家的哌 拉 西 林/ 他 唑 巴 坦 产 品 , 4 种 药 物 的 批 号 分 别 为 90825 ,0209069 ,020701 ,020813044 ,规格不同 ,但哌拉西林 与他唑巴坦的组成比例均为 8 ∶1 。按照双盲法分别编号为 1 ,2 ,3 ,4 号样品 。