微生物实验复习提纲
微生物复习提纲(完整)
《应用微生物技术》复习提纲1、微生物学的发展史，重要人物所做的突出贡献史前时期：中国古代农民用谷物酿酒（8000年前至1676）初阶阶段：荷兰人列文虎克，准确地描述了微生物的形态。
奠基时期：1、巴斯德：微生物学的奠基人。
他把微生物学的研究从形态描述推进到生理学研究水平，并开创了寻找病原微生物的兴盛时期，使微生物学开始以独立的学科形成。
贡献：(1)曲颈瓶实验彻底否定了“自然发生”学说；（2）证实了发酵是由微生物引起的。
（3）将病原菌减毒，使其转变为疫苗。
（狂犬疫苗）2、科赫：（1）发明了固体培养基制备方法，并建立通过了固体培养分离纯化微生物的技术；（2）用自创的方法分离了许多病原菌，如炭疽芽孢杆菌、结核分枝杆菌等；（3）提出了“科赫法则”；（4）创立了许多显微镜技术，如细菌鞭毛染色法、悬滴培养法等。
发展阶段：1、布赫纳：用酵母菌无细胞压榨汁将葡萄糖进行酒精发酵获得成功，发现了微生物酶的重要作用，从此将微生物学推进到了生化研究的阶段。
此后，微生物生理、生化等研究得到了迅速的发展2、弗莱明：发现点青霉能抑制葡萄球菌的生长，揭示了微生物间的拮抗关系，并发现了青霉素。
2、细菌的形态、细胞结构功能和繁殖方式、生长曲线△细菌的形态与结构功能：细菌是具有细胞壁的一类单细胞原核微生物，形体微小，结构简单。
无成形细胞核，无核膜和核仁，除蛋白体外无其他细胞器，在适宜的条件下有相对稳定的形态与结构，分布广，种类多，与人关系密切。
细菌的形态：通常以微米(Micrometer,um;1um=1/1000mm)作为测量它们大小的单位按其外形主要有三类：1）、球菌：呈圆球形或近似圆球形，有的呈矛头状或肾状。
单个球菌的直径约在0.8~1.2um 左右。
又称化脓性球菌（1、双球菌，2、链球菌3、四联球菌和八叠球菌4、葡萄球菌）举例：肺炎双球菌，溶血性链球菌，藤黄八叠菌，金黄色葡萄球菌2）、杆菌：各种杆菌的大小，长短，弯度，粗细差异较大。
微生物学复习提纲
微生物学复习提纲一、绪论1、微生物学创立的年代〔19世纪50年代〕，主要奠基人〔巴斯德、科赫〕2、什么是微生物？微生物是指需借显微镜才能观察到的一群微小生物的总称，它是一大群种类各异独立生活的生物体。
3、微生物的主要类群有哪些？无细胞构造不能独立生活的病毒、亚病毒，原核细胞构造的真细菌、古生菌和有真核细胞构造的真菌。
4、微生物在生命世界中的位置？5、五界系统和三域学说细菌域，古生菌域，真核生物域二、微生物的形态与构造〔一〕原核微生物1、原核微生物：是指一大类不具有细胞核膜、只有核区的裸露DNA的原始单细胞生物，核区内一般只有闭合环状的DNA。
2、三菌三体：细菌、放线菌、蓝细菌；支原体、衣原体、立克次氏体支原体：没有细胞壁；衣原体：能量寄生〔不含产能系统〕3、细菌的大小：μm,长度约0.5-10 μm。
4、细菌的细胞壁：细胞壁是细菌外外表的一种坚韧而具有弹性的构造层。
构造与功能功能是保护细胞免受机械性或渗透压的破坏；维持细胞特定外形；协助鞭毛运动，为鞭毛运动提供可靠的支点；作为细胞内外物质交换的第一屏障，阻止胞内外大分子或颗粒状物质通过；为正常的细胞分裂所必需；决定细菌的抗原性、致病性和对噬菌体的特异敏感性；与细菌的革兰氏染色反响密切相关。
革兰氏阳性细菌与阴性细菌的区别：革兰氏阳性菌的细胞壁较厚，为20-80nm，主要成分肽聚糖有15-50层，占细胞壁干重的40%-95%。
还含有磷壁酸。
革兰氏阴性菌的细胞壁较薄，为10-15nm，分为内壁层和外壁层，其化学组成和构造比革兰氏阳性菌更复杂。
5、肽聚糖的构造6、革兰氏染色：步骤及原理书上：革兰氏染色反响与细菌细胞壁的化学组成和构造有着密切的关系。
经过初染和媒染后，在细菌的细胞膜或细胞质上染上了结晶紫-碘的复合物。
革兰氏阳性菌由于细胞壁较厚、肽聚糖网层次多、交联度高、构造较严密，故用95%乙醇脱色时，肽聚糖网孔会因脱水而明显收缩，加上革兰氏阳性菌的细胞壁根本上不含脂类，乙醇处理时不能在壁上溶出缝隙。
《微生物实验》复习提纲
1.显微镜的各部件的名称是什么，各有何作用？操作讲解。
2.显微镜物镜的几个镜头如何辨认？如何调节光线强弱？与哪些部件有关？边说边操作。
3.显微镜油镜的使用原理和注意事项是什么？请用显微镜找到标准片上的微生物，可能是什么菌？图示。
4.用油镜观察完细菌后显微镜应如何处理？5.细菌在染色前为何要固定？热固定有注意哪些问题？请做纯培养涂片固定。
制作细菌涂片，做美蓝染色。
6.为什么革兰氏染色后阳性菌和阴性菌呈现不同颜色？革兰氏染色法的步骤是什么？做革兰氏染色，涂片为什么不能过于浓厚？染色成败的关键一步是什么？请做革兰氏染色。
7.操作一下悬滴法制酵母美蓝染色片。
用显微镜找一下酵母菌细胞。
何以区别酵母菌的死活细胞？8.试述根霉与毛霉、青霉与曲霉的区别。
请在显微镜下找一下霉菌，图示。
请注明曲霉、青霉各部名称。
9.如何用目镜测微尺和镜台测微尺测定微生物的大小？操作。
10.用显微镜直接计数法测定酵母菌数时，应选择哪五个计数中格？若菌体位于格线上，则如何计数？若酵母菌上有芽体时，如何计数？11.比较显微镜直接计数法和平板菌落计数法的优缺点。
12.消毒灭菌的方法很多，其中（1）桌面和手如何消毒？（2）超净工作台如何灭菌？（3）接种环如何灭菌？（4）涂布棒如何灭菌？（5）空培养皿干热灭菌的条件是多少？13.适合用高压蒸汽灭菌的对象有什么？营养琼脂培养基的灭菌使用的温度和时间一般是多少？本实验用高压蒸气灭菌锅的操作注意事项有哪些？进行操作。
14.在实验中适合用干热灭菌箱来进行灭菌的对象是什么？其灭菌所需的温度和时间是多少？干热灭菌箱使用注意事项是什么？（干热灭菌温度不能超过多少？开箱取物温度有何要求？）进行操作。
15.微生物实验室常用的玻璃器皿有哪些？新玻璃器皿如何处理？16.在吸管的包装时，为什么要在其粗头端塞一小段棉花？包扎一支移液管。
17.包扎一组培养皿。
包扎三个试管。
制作一个棉塞。
18.什么叫培养基？制备培养基的一般程序有哪些？19.将配制好的牛肉膏蛋白胨培养基分装于试管和三角瓶，包扎。
微生物学实验复习提纲
微生物学实验复习提纲微生物学实验复习提纲1.研究微生物学的基本技术有哪些（显微镜技术、无菌技术、纯种分离技术和纯种培养技术）2.光学显微镜又称“复式显微镜”，由哪两部分组成？显微镜的什么最为关键？为什么？答：由机械装置和光学系统组成物镜的性能最为关键，因为它直接影响着显微镜的分辨率3.油镜的放大倍数为多少？与其他物镜相比，油镜的使用比较特殊，需在载玻片与镜头间滴加什么？其什么作用？答：10*100 需要滴加镜油增加照明亮度和增加显微镜的分辨率4.影响显微镜分辨率的因素有哪些？（光源的波长、物镜的镜口角和镜头间介质的折射率）5.油镜使用后应怎样处理？镜油擦拭的正确方法是怎样的？答：用擦镜纸拭去镜头上的镜油，然后用擦镜纸蘸少许二甲苯擦去镜头上残留的油迹，最后再用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯6.制造接种环、接种针的金属常用铂或镍,原因是软硬适度，能经受火焰反复灼烧，又易冷却.7.培养皿的包装一般以多少套作一包比较合适？5~8套。
8.灭菌吸管的包装的注意事项：（1）吸管必须干燥;(2)在距其粗头顶端约0.5cm处，塞一小段约1.5cm 长的棉花（不能用脱脂棉）。
作用是避免外界及口中杂菌吸入管内，并防止菌液等吸入口中。
9.空的玻璃器皿一般用干热灭菌，若用湿热灭菌。
则要多用几层报纸包扎，外面最好加一层牛皮纸或铝箔。
10.接种环在用前必须烧灼灭菌，用后也应立即烧灼。
11.简单染色的原理是什么？其主要操作步骤是什么？固定的作用是什么？染色过程中应注意哪些环节？答：原理及步骤健实验课本71页。
固定作用：使细胞质凝固，使细胞固定在载玻片上12. 革兰氏染的原理及步骤是什么？革兰氏染色后的正确结果是什么颜色？答：原理见实验课本82页步骤：初染、媒染、脱色、复染结果颜色：阳性：菌体保持原有的蓝紫色阴性：洗脱后菌体变为无色，用复染剂染色后又变为复染剂颜色13.你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？答：（1）涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性；（2）脱色，此环节最关键。
微生物复习大纲
微生物学复习提纲绪论微生物的定义、主要特点、研究微生物的重要意义、微生物学发展史上重要代表人物Anthony van leeuwenhoek\Louis Pasteur\Robert Koch\Edward Buchner的主要贡献。
第一章原核微生物细菌细胞的量度单位、大小、基本形态；细菌细胞的一般结构细胞壁：化学成分、肽聚糖的结构、革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌细胞壁的异同、溶菌酶和青霉素的作用机理、革兰氏染色的过程、原理和应用；细菌和古细菌细胞膜的特点；细菌细胞的重要内含物：核糖体、异染粒、聚β－羟丁酸；细菌细胞的特殊结构：芽孢(概念、结构特点、特性、抗热机制、伴胞晶体)、鞭毛(概念、结构、功能)、菌毛(特点和功能)和荚膜(概念、主要化学成分、特点和功能)；细菌的繁殖、培养特征(液体培养特征和菌落特征)；放线菌：形态、大小、细胞结构特点、繁殖、培养特征(液体培养特征和菌落特征)、支原体、立克次氏体和衣原体的主要特点第二章真核微生物酵母菌细胞大小、形态、细胞壁主要组成和结构、出芽生殖、培养特征霉菌细胞大小、形态、细胞壁主要组成和结构、繁殖方式、培养特征重要的霉菌如根霉、毛霉、曲霉和青霉的结构特征和特性。
第三章病毒病毒的定义和特点；病毒的形态大小、结构和化学组成；病毒繁殖的特点、过程；病毒与发酵工业；亚病毒的主要类型和特点概念：温和噬菌体、原噬菌体（或前噬菌体）、溶原性细菌、一步生长曲线第四章微生物的营养微生物的营养物质及其功能；微生物的营养类型：划分依据、各类型特点；设计和配制培养基的基本原则、琼脂的特性和浓度、各类培养基的用途、如何根据培养目的不同设计不同培养基第五章微生物的代谢发酵：概念、主要途径及其特点、主要发酵类型(乙醇发酵的各种方法和要点、甘油发酵和乳酸发酵)、发酵特点；呼吸：有氧呼吸的特点；无氧呼吸：硝酸盐呼吸；化能自氧型微生物的生物氧化与产能：氨的氧化-硝化作用；肽聚糖合成的主要步骤和特点、抗生素对肽聚糖合成的影响机理；生物固氮：固氮微生物类型、固氮的基本条件、固氮酶的特性；光合磷酸化的主要类型、结果和微生物类群；次级（生）代谢与次级（生）代谢产物；微生物代谢的特点、代谢流调节的方式、意义和应用第六章微生物的生长繁殖及其控制显微镜直接计数法、平板菌落计数法、浊度法和分光光度法测定微生物生长的优缺点和适用范围、微生物群体生长规律（各个时期特点，对生产实际的指导意义等）；连续生长和连续培养；温度、pH、氧对微生物生长的影响；常用的消毒防腐剂的机理和浓度、磺胺药物的作用机理、抗生素的作用机制第七章微生物的遗传变异与育种证明核酸(DNA or RNA)是遗传物质的三个经典实验;质粒的定义、性质和作用。
微生物检验复习提纲.doc
微生物复习提纲一、常用培养基的制备、消毒1、培养基的分类P902、培养基配制P211（1）计算根据配方计算出实验中各种药品所需要的量，然后再分别称量。
（2）称量准确称取各种成分。
一些不易称量的成分如牛肉膏，可用玻璃棒取出放称量纸（或小烧杯）称量。
（3）溶解向烧杯内加入合适的水量，将牛肉膏、蛋白腺、氯化钠等用水洗下后加热搅拌至全溶后，再加入琼脂进行溶解，最后补足水量。
（4）调pH值用酸度计或精密pH试纸测定其pH值，并用NaOH或HC1标准溶液调至所需pH值，必要时用滤纸或脱脂棉过滤。
一般比要求的pH 高出0.2,因为高压蒸汽灭菌后，pH常降低。
（5）分装根据不同需要，可将配好的培养基分装入配有棉塞的试管或三角瓶内。
注意分装时避免培养基挂在瓶口或管口上引起杂菌污染。
如液体培养基，应装试管高度的1/4左右；固体培养基装试管高度的1/5左右；装入三角瓶的量以三角瓶容量的一半为限。
（6）包扎试管扎成捆。
试管和三角瓶的棉塞外用硫酸纸或牛皮纸包扎，纸上标明培养基的名称、配制日期等。
（7）灭菌培养基用0.1Mpa（121摄氏度）高压蒸汽灭菌15〜20min。
3、消毒（高压蒸汽灭菌锅使用）灭菌方法：1、加水于灭菌器内到规定的水平面。
2、需灭菌的物品（分装在试管、三角烧瓶中的固、液体培养基），棉塞、硅胶泡沫塞等用防潮纸包好（防止锅内水汽把棉塞淋湿），放入灭菌锅内的套筒中。
摆放要疏松，不可太挤，否则阻碍蒸汽流通，影响灭菌效果。
3、将灭菌锅盖旋转，使锅盖向下紧压锅体，切勿漏气。
4、设定灭菌温度和时间:121摄氏度，20分钟；5、打开放气阀，加热，热蒸汽上升，以排除锅内冷空气，当温度到达100摄氏丿芟左右，关闭放气阀。
6、关闭放气阀后，整个灭菌锅成为密闭状态，而蒸汽又不断增多，这时压力和温度都上升，直至压力表指针达到所需压力时，温度达到121摄氏度，灭菌开始计时，通过调节热源，维持此压力到所需时间。
7、灭菌完毕，待压力自然降至0时，打开放气阀，注意不能打开过早，否则突然降压致使培养基冲腾，使棉塞、硅胶泡沫塞沾污，甚至冲出容器以外。
医学微生物学 复习提纲(精简版)
医学微生物学复习提纲1、简述细菌的基本结构和特殊结构的种类、概念、特点或功能及临床意义。
特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢③菌毛：普通菌毛（与大多G-菌和少量G+菌的黏附性有关）和性菌毛（与遗传变异有关）。
④芽孢：故应以杀灭芽胞作为可靠的灭菌指标。
2、细胞壁的结构与功能，G+ 及 G- 菌细胞壁结构有何区别？细胞壁革兰阳性菌革兰阴性菌肽聚糖组成聚糖骨架聚糖骨架四肽侧链四肽侧链五肽交联桥特殊成分磷壁酸脂蛋白、外膜、脂多糖LPS对数期细菌鉴定选用此期为最佳稳定期产生外毒素、抗生素、形成芽孢3. 毒性噬菌体的增殖周期及其噬菌现象和温和噬菌体的溶原性及溶菌性周期，溶原性转换。
毒性噬菌体的复制周期：吸附、穿入、生物合成、成熟与释放。
溶原性周期/温和噬菌体：噬菌体该过程前噬菌体：基因组溶原性细菌：细菌7、★★病原微生物的传播方式和感染类型㈠传播方式：按病原微生物进入机体方式：直接方式、间接方式、媒介方式按病原微生物在机体间的传播方式：水平传播、垂直传播(水平传播途径为皮肤、呼吸、消化、泌尿生殖、血液、多途径）㈡感染类型：显性感染：局部感染全身感染（毒血症、菌血症、败血症、脓毒血症、内毒素血症）隐性感染潜伏感染带菌状态8、抗胞外菌、胞内菌、外毒素感染免疫的特点。
胞外菌感染体液免疫为主胞内菌感染细胞免疫为主外毒素感染体液免疫为主2、金黄色葡萄球菌的致病物质及所致疾病。
㈠致病物质：凝固酶、葡萄球菌溶血素、杀白细胞素、肠毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素- 凝固酶：鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标，分类：①游离凝固酶②结合凝固酶1、链球菌属重要的生物学性状及其分类。
根据溶血性分类：甲型（草绿色溶血环、α溶血环、条件致病菌）乙型（全透明无色溶血环、β溶血环、致病菌A群多属此类）丙型（无溶血环、一般不致病）2、★A群链球菌的致病物质及所致疾病。
㈠致病物质：胞壁成分、链球菌溶血素、致热外毒素、侵袭性酶胞壁成分——使细菌侵入机体并在体内定居的首要条件㈡所致疾病：1、化脓性感染2、猩红热（致热外毒素）3、超敏反应性疾病（M蛋白等）1、肺炎链球菌重要的生物学性状。
微生物提纲
一，无菌操作技术1.无菌操作技术主要是指在微生物实验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施，其中包括无菌环境设施、无菌实验器材及无菌操作方法等。
2.纯种分离，纯种培养接种、灭菌操作？二．革兰氏染色1.革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：1）涂片固定2）草酸铵结晶紫染1分钟3）自来水冲洗4）加碘液覆盖涂面染约1分钟5）水洗，用吸水纸吸去水分6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分7）蕃红染色液（稀）染1分钟后，自来水冲洗。
干燥，镜检。
2.机理：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。
3.意义：1.鉴别细菌 2.选择药物 3.与致病性有关：：革兰氏阳性菌能产生外毒素，革兰氏阴性菌能产生内毒素，两者的致病作用不同。
三．纯培养1.把从一个细胞或一群相同的细胞经过培养繁殖而得到的后代,称纯培养.2. 选择培养分离平板划线分离法稀释摇管法用液体培养基分离纯培养单细胞(单孢子)分离四．1、4种液体0 固体1%-2%琼脂或5%-12%明胶半固体0.2%-0.7% 脱水2、液体：大规模培养微生物在科研或生产中通过发酵获得菌体或代谢产物固体：微生物菌种分离鉴定计数保藏半固体：观察微生物运动特征分类噬菌体效价滴定脱水：商品用五．高温灭菌1. 干热灭菌巴氏灭菌高压蒸汽灭菌煮沸消毒2.六．D值1.D值即微生物的耐热参数，系指一定温度下，将微生物杀灭90%（即使之下降一个对数单位）所需的时间。
微生物复习提纲(名词解释加部分问答)
复习题1绪论：概念:微生物:是一类肉眼看不见或者看不清的微小生物的总称、种:是一大群表型特征高度相似，亲缘关系及其接近，与同属内的其他物种有着明显差异的菌种的总称。
、新种：是指最新权威性的分类,鉴定手册中从未记载过的一种新分离并鉴定过的微生物.、菌株：表示任何由一个独立分离的单细胞繁殖而成的纯遗传型群体及其一切后代。
1、什么是微生物？微生物包括哪些种类?微生物：是一类肉眼看不见或者看不清的微小生物的总称，包括原核类的细菌，真核类真菌，非细胞类的病毒和亚病毒。
2、微生物五大共性及其对人类的利弊？体积小，面积大：由此产生的其他四大共性。
吸收多，转换快：提供充分的物质基础生长旺，繁殖快:科研周期缩短，空间减小，经费降低。
也会带来极大损失。
适应强,易变异：有益变异可以创造巨大的经济效益。
反之亦然。
分布广，种类多：为未来的研究提供广阔的前景。
3、巴斯德、科赫、列文虎克和李斯特分别对微生物学的发展有哪些贡献?列文虎克：制作了显微镜，开启微生物大门。
巴斯德：证实肉汤腐败原因产生大量细菌的原因只是接种了来自空气中的微生物配种。
科赫:配置培养基，分离纯化了菌种。
李斯特：2。
1细菌:概念：原核生物：广义细菌,指一大类细胞核无核膜包裹，只存在称作核区的裸露DNA的原始单细胞生物、肽聚糖：又称黏肽,胞壁质或黏质复合物，是真细菌细胞壁的中的特有成分、原生质体：在人为条件下，用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁合成后，所得到的仅有一层细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞，它们只能用等渗或高渗培养液保存或者维持生长。
、球状体：指还残留了部分细胞壁的圆球形原生质体、Ｌ型细胞：那些实验室或者宿主体内通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺损菌株.、拟核:指原核生物所特有的无核膜包裹,无固定形态的原始细胞核。
、糖被：包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物、鞭毛:生长在某些细菌表面的长丝状，波曲的蛋白质附属物。
、伴孢晶体：少数芽孢杆菌产生的糖蛋白昆虫毒素，成为X内毒素、菌毛:是一种长在细菌体表的纤细，中空的，短直且数量较多的蛋白质类附属物。
微生物学复习指导大纲
微生物学复习指导大纲第一章绪论微生物：是一切肉眼看不见或看不清的微小生物总称微生物学：研究肉眼难以看清的称之为微生物的生命活动的科学1.微生物以其独特的共性特征而区别于其他生物,归纳为五大共性:(1)体积小,结构简单,表面积/体积比值大; (2)代谢活力强,吸收多,转化快:(3)生长旺,繁殖快; (4)分布广,种类多(多样性); (5)适应性强,易变异。
2.微生物学发展过程中,做出重要贡献的代表人物和其成就。
开创者:列文虎克、他是第一个观察、描述细菌和原生动物的人，尊称为微生物的先驱者微生物学奠基人; 巴斯德,1）彻底否定了“自生说”（2）免疫学—预防接种（3）证实了发酵是微生物引起（4）巴氏消毒法（在60~65温度下做短时间的加热处理，杀死有害微生物的一种方法）细菌学奠基人:科赫3.微生物学发展前景的认识：1.微生物是由荷兰商人列文虎克首先发现的至今有300多年的历史。
微生物的主要特征是:个体小,结构简单,繁殖快,易培养,易变异,分布广。
它一方面具有其他生物不具备的生物学特性,另一方面也具有其他生物共有的基本生命特征。
2.微生物学是研究微生物在一定条件下的形态结构、生理生化、遗传变异以及微生物的进化、分类、生态等生命活动规律及其应用的一门学科。
它诞生于19世纪中期,其奠基人是法国的巴斯德和德国的柯赫。
20世纪获得全面发展,形成了许多分支学科。
特别是20世纪40年代以后,微生物学促进了整个生命科学的发展,跃居中心地位。
3.我国是最早利用微生物的少数国家之一但微生物学作为一门学科在我国发展始于20世纪初,我国学者曾在某些病原菌的研究和防治,以及微生物在工、农业上的应用和研究等方面,取得具国际先进水平的成绩。
近年来,微生物基因组的研究工作已与国际发展前沿接轨,在微生物应用方面也取得可喜成绩。
4.21世纪的微生物学和人体微生物组学将更加绚丽多彩。
多学科的交叉、基因组研究的深入和扩展将使微生物学的基础研究及其应用出现前所未有的局面。
微生物学基础复习提纲
一．名词解释芽孢：在某些细菌生长发育的后期，其细胞内可形成一个圆形或椭圆形的抗逆性休眠体。
菌落：细菌单个细胞经过一段时间培养后，在培养基上形成肉眼可见的细菌集团。
消毒：指杀死或灭活物体中除芽孢外的所有病源微生物。
灭菌：用物理或化学因子，杀死物体中所有活的微生物，包括芽孢。
遗传：子代与亲代之间生物学特征的相似性。
变异：子代与亲代之间生物学特征的差异性。
互生：两种可以单独生活的生物，当它们在一起时，通过各自的代谢活动而有利于对方，或偏利于一方的生活方式。
共生：两种生物共居在一起，相互分工工作、相依为命，甚至达到难舍难分、合二为一的极其紧密的一种相互关系。
大肠菌群：指一群好痒及兼性厌氧，在37℃经过24h能发酵乳糖产酸产气的革兰阴性无芽孢杆菌。
生长因子：微生物生长必不可少而需求量极微，本身不能合成或合成量不足以满足机体生长。
无菌技术：将微生物分离、转接及培养时防止被其他微生物污染的技术微生物的纯培养：实验室条件下由一个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代。
微生物定义：微生物多数为单细胞，是自然界中个体微小，结构简单，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大好几千倍至数几万倍才能使肉眼可见的一类低等生物。
食源性疾病：指通过摄食进入人体内的各种致病因子引起的，通常具有感染性质或中毒性质的一类疾病。
兼性厌氧菌：也称兼性好氧菌，适应范围广，在有氧或无氧环境都能生长，有氧时靠呼吸产能，无氧时通过发酵或无氧呼吸产能。
(大肠杆菌、酿酒酵母)营养缺陷突变型：某一野生型菌株因发生基因突变而丧失合成一种或几种生长因子、碱基或氨基酸的能力，因而无法在基本培养基上正常生长繁殖的变异类型。
细菌总数的定义：指每克或每毫升或每平方厘米面积食品上的细菌数目，用cfu表示。
微生物的初级代谢：指微生物从外界吸收各种营养物质，通过分解代谢和合成代谢生产维持生命活动所需要的物质和能量的过程。
微生物的次级代谢：指微生物在一定的生长时期，以初级代谢产物为前体物质，合成一些对微生物的生命活动无明确功能的物质的过程。
微生物学复习提纲
绪论1、微生物定义:微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。
所有形体微小、单细胞或结构较为简单的多细胞生物，甚至没有细胞结构的生物通称。
2、微生物的五大共性:①体积小，面积大②吸收多，转化快③生长旺，繁殖快④适应强，易变异⑤分布广，种类多3.科赫——微生物进行纯种分离，细菌学奠基人；巴斯德——胚种学说，微生物学奠基人第一章1.细菌:狭义指一类细胞细短、结构简单、胞壁坚韧、多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物，广义的细菌则是指所有原核生物。
2.细菌构造:一般构造：如细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体、核糖体等，是所有细菌都有的构造特殊构造：主要有鞭毛、菌毛、性菌毛、荚膜和芽孢等，并非所有细菌都有的构造3.形态:球状、杆状、螺旋状4.放线菌:一类主要呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的原核生物5.放线菌的结构:孢子丝，气生菌丝，营养菌丝6.放线菌的繁殖方式:①借孢子:分生孢子孢囊孢子②借菌丝:基内菌丝断裂任何菌丝片段7.放线菌群落特征:①在固体培养基上:小型，干燥，不透明，表面呈致密的丝绒状，上有一薄层彩色的‘干粉’，菌落和培养基连接紧密，难以挑取②在液体培养基上:液面和瓶壁交界处粘贴着一圈菌苔，培养液清而不混，悬浮着许多球状菌丝团8.革兰氏染色原理和应用革兰氏染色机制：革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分基础上的一种物理原因。
通过初染和媒染操作后，在细菌细胞的膜或原生质体上染上了不溶于水的结晶紫与碘的大分子复合物。
革兰氏阳性细菌由于细胞壁较厚、肽聚糖含量较高且分子交联度紧密，在乙醇洗脱时，肽聚糖网孔会因脱水而明显收缩，在加上它基本不含类脂，故乙醇处理不能在壁上溶出缝隙，因此结晶紫与碘的复合物仍牢牢阻留在其细胞壁内使其呈现紫色。
反之，革兰氏阴性细菌因其壁薄、肽聚糖含量低和交联度松散，故遇乙醇后肽聚糖网孔不易收缩，加上它的类脂含量高，所以当乙醇把只类溶解后，在细胞壁上就会出现较大的缝隙，这样，结晶紫与碘的复合物就极易被溶出细胞壁，因此，通过乙醇脱色后，细胞又呈无色，这时再经沙黄等红色染料复染时即呈现红色。
微生物学复习提纲（含答案）
微⽣物学复习提纲（含答案）微⽣物学复习提纲（只供参考，书还是要看滴！）第⼀章绪论1.什么是微⽣物？它包括哪些类群？微⽣物有哪些特点？答：所有形体微⼩、单细胞或个体结构较为简单的多细胞，甚⾄⽆细胞结构的低等⽣物的总称。
原核微⽣物：四菌（古细菌、真细菌、放线菌、蓝细菌）微⽣物三体(⽀原体、⾐原体、⽴克次⽒体)真核微⽣物：酵母菌、霉菌、藻类、原⽣动物⾮细胞⽣物：病毒、亚病毒（拟病毒、类病毒、朊病毒）体积⼩、结构简单、繁殖快、易培养、易变异、分布⼴2.简述微⽣物学的发展史及各个时期的代表⼈物。
答：微⽣物初创时期代表⼈物荷兰的业余科学家——微⽣物学先驱者列⽂虎克（Anthony Van Leeuwenhoek，1632-1723）。
微⽣物奠基时期：代表⼈物：Louise Pasteur(1822-1895)，Robert Koch(1843-1910)建⽴了⼀系列研究微⽣物所必须的独特⽅法和技术开创了寻找病原微⽣物的黄⾦时期把研究从形态描述推进到⽣理学研究⽔平开始以“实践-理论-实践”的思想⽅法指导科学实验微⽣物学以独⽴的学科形式开始形成微⽣物发展时期进⼊微⽣物⽣物化学研究⽔平——提出了酶的概念应⽤微⽣物的分⽀学科进⼀步扩⼤——出现抗⽣素等新学科出现寻找有益微⽣物代谢产物的热潮普通微⽣物学形成——美国M.Doudoroff各相关学科和技术相互渗透交叉促进，加速了微⽣物学的发展⑴青霉素：英国微⽣物学家弗来明发现青霉素，开创了⽤抗⽣素治疗病新纪元。
⑵摇瓶培养技术⑶深层发酵⼯艺⑷连续培养微⽣物成熟时期成为以应⽤为主的学科，前沿基础学科逐步进⼊分⼦⽣物学⽔平微⽣物已成为新兴的⽣物⼯程的主⾓3.⽤具体事例说明⼈类与微⽣物的关系。
答：微⽣物能为⼈类做发酵、酿酒、分解有机物等促进⼈类社会发展的好事，但也能带来疾病类如AIDS、霉变等不利的⽅⾯。
4.简述微⽣物学在⽣命科学发展中的地位和作⽤，并描绘其前景。
答：（1）促进许多重⼤理论问题的突破：⽣命科学由整体或细胞研究⽔平进⼊分⼦⽔平，取决于许多重⼤理论问题的突破，其中微⽣物学起了重要甚⾄关键的作⽤，特别是对分⼦遗传学和分⼦⽣物学的影响最⼤。
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实验一培养基的配置（一）牛肉膏蛋白胨培养基的配置（用于分离培养细菌以及测定其数目、天然培养基，）1、称量牛肉膏可以放在小烧杯、表面皿、称量纸中称量，热水溶解后倒入大烧杯。
蛋白胨极易吸潮，故称量时要迅速；滤纸不可称量牛肉膏。
2、溶解加水加热搅拌，药品完全溶解（若配置固体培养基，则加入1%~2%的琼脂，再加热融化，此过程需不断搅拌，以防止琼脂糊底或溢出）定容。
若偏酸，滴加1mol/L NaOH3、调pH 待培养基冷却至室温时检测其pH 不停搅拌并随时用pH试纸检测，若偏碱，滴加1mol/L HClpH调节通常放在加琼脂之前；应注意pH不要调过头，以免回调影响各离子浓度。
液体培养基：滤纸4、过滤固体培养基：4层纱布趁热过滤固体培养基：试管高度的1/5，灭菌后摆斜面、三角瓶的1/25、分装半固体培养基：试管高度的1/36、加透气膜7、包扎将三角瓶的棉塞外包双层报纸，以防灭菌时冷凝水沾湿透气膜。
8、灭菌上述培养基121.0℃湿热灭菌20min9、摆斜面斜面长度不超过试管总长1/210、无菌检查37℃温箱培养1-2d（二）高氏1号培养基的配制（放线菌、组合培养基）1、称量和溶解可溶性淀粉加冷水调成糊状，再加水加热溶解；微量成分FeSO4*7H2O 现配成高浓度的储备液后加入：100ml+1g=0.01g/ml 再在1000ml+1ml储备液。
2、同上（三）马丁氏培养基（霉菌、半组合培养基）1、称量和溶解土豆去皮切块煮开半小时，各成分溶解好后，将孟加拉红配成1%的水溶液，在1000ml培养液中加3.3ml，加入琼脂加热融化2、同上3、链霉素的加入它受热易分解，故临用前将培养基融化后待温度降至45℃左右才能加入。
可先将其配成1%溶液，在100ml培养基中加0.3ml，使每ml培养集中含其30μg。
注意事项：称药品时牛角匙不要混用，称完药品应及时盖紧瓶盖；谨慎调pH，避免多次回调影响各离子浓度；分装过程中注意不要使培养基沾在管上，以免引起试剂污染。
琼脂：凝固剂，无营养价值，不易分解，耐加压灭菌强，96-100度融化，46度凝固明胶：凝固剂+培养剂，Pr，做氮源，易分解，耐加压灭菌弱，25度融化，20度凝固半固体培养基：0.5%-1%琼脂固体培养基：1%-2%琼脂、5%-12%明胶问：培养剂完成后，为什么必须立即灭菌？细菌生长会消耗培养基，改变pH，释放代谢物，灭菌后细胞破碎产生杂志，增加了实验的不稳定因素。
实验二消毒和灭菌方法原理适用对象灭菌温度、时间高压蒸汽灭菌法利用高压蒸汽很高的温度和压力使菌体的酶、Pr等凝固变性培养基、玻璃器皿、水、缓冲液、金属用具、实验服、传染性标本0.1MPa、121℃、20min干热灭菌利用高温使微生物细胞内原生质干燥、细胞膜破坏、Pr凝固变性、细胞成分氧化变质玻璃器皿、接种环、接种针160-170℃、2h过滤除菌通过机械作用滤去液体或气体中的细菌或真菌孢子酶液、抗生素等不耐热溶液的灭菌（一）高压蒸汽灭菌法步骤1、加水内锅取出、向外锅中加水，水面与三角搁架相平。
2、装料放回内层锅，装入待灭菌物品，注意不要装的太挤，以免妨碍水蒸气流通影响灭菌效果，装有培养基的容器放置时要防止液体溢出。
3、加盖盖上的排气软管插入排气槽，旋紧螺栓，打开排气阀4、排气加热，当排除的气流很强并有嘘声时，表明锅内空气已排净（沸腾后约5min）5、升压关闭排气阀6、保压当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力。
0.1MPa、121℃、20min7、降压压力自然下降至08、无菌检查37℃培养1d（二）干热灭菌步骤1、装入物品至烘箱2、升温温度100℃关闭排气孔。
继续至160-170℃3、恒温2h4、取出待电温箱温度降到70℃以下取出。
未降至切勿打开箱门以免骤然降温导致玻璃器皿炸裂。
注意事项：1、高压时切勿忘记加水且水量不可过少，以防止灭菌锅烧干引起炸裂；必须待锅内冷空气排净后才能关上排气阀，不排净冷空气和蒸汽混合锅内压力达不到要求；灭菌完毕后要等到压力降到0才能打开排气阀，开盖取物。
否则由于锅内压力骤然下降使容器里的培养基由于内外压力不均匀而喷出试管，使棉塞污染甚至烫伤操作者。
2、干热灭菌物品不要摆放太拥挤，以免阻碍空气流通影响灭菌效果；灭菌物品不要接触电烘箱铁板，以防包装纸烤焦起火。
结果分析--灭菌不彻底原因：锅内温度压力达到要求值；锅内待灭菌物品过多；灭菌时间不够长；国内空气未排尽。
实验三土壤微生物的分离、纯化及无菌操作技术1、常用分离纯化方法：单细胞挑取法、平板划线法、稀释倒平板法2、原理：将含有各种微生物的土壤悬液稀释后涂布接种到选择培养基平板上，在不同条件下培养，从而使各类微生物在各自的培养基上形成单菌落（由一个细胞繁殖而成的集合体，即是一个纯培养体）。
（一）土壤稀释分离法分离纯化细菌、放线菌、霉菌1、取土壤表层以下5-10cm，放入无菌袋备用2、无菌操作制备土壤稀释液（1）制备土壤悬液：称土样5g，迅速倒入含有99mL无菌水的三角瓶中，震荡5-10min，加玻璃珠，使土样充分打散，即成为10^-2土壤悬液（2）稀释：用无菌移液管吸10^-2土壤悬液1mL，吹入9mL无菌水中即为10^-3稀释液，如此重复制备10^-3--10^-8稀释液。
注意操作时管尖不能接触到液面，每一个稀释度换用一只移液管，每次吸入土液后要将移液管插入液面，吹吸3次，每次吸上的液面要高于前一次，以减少稀释中的误差。
3、涂布法测定菌落数的方法（1）倒平板：操作在酒精灯火焰旁，左手拿住培养皿打开一条缝隙，右手拿三角瓶并将培养基迅速倒入培养皿（铺满皿底1/3），加盖轻摇（2）涂布法（无菌操作）：将200μL菌悬液滴在平板表面中央位置，右手拿无菌涂布器先沿一条直线轻轻来回推动，再沿另一垂直线来回推动。
（3）接种量和培养基：霉菌----- 取10^-2、10P^-3两管稀释液各0.2mL，分别接入两个土豆蔗糖培养基平板中（每100mL培养基+灭菌的乳酸1mL），涂布均匀。
放线菌--10^-4、10P^-5 两管稀释液（每管中加入10%酚液5~6滴，摇匀，静置片刻）各0.2mL，分别接入两个高氏1号培养基平板，涂布均匀。
细菌------10^-6、10P^-7 牛肉膏蛋白胨琼脂平板细菌1~2d 快4、培养将接种好的平板倒置，于28-30℃恒温培养霉菌3~5d 中放线菌5~7d 慢（二）划线分离法（目的：获得单个菌落）连续划线：挑取菌种在平板上划“之”字形划线方法分区划线：分区域划线注意事项：细菌10^7个细菌>放线菌>霉菌1、1g土壤中含霉菌10^5个而酵母菌主要见于果园和菜园土壤中放线菌10^6个故土壤分离细菌时要取较高的稀释度，否则菌落连成一片不能计数。
2、土壤稀释分离操作中，每稀释10倍最好更换一次移液管，使计数准确。
3、放线菌培养时间较长，故制平板的培养基用量可适当增多。
菌落的读数方法：计算相同稀释度的平均菌落数，选择平均菌落数在30~300之间的进行计数总菌数/5g=同一稀释度几次重复的菌落平均数X稀释倍数（10^-2即为10^2）1、为什么高氏1号培养基和土豆蔗糖固体培养基中要分别加入酚和乳酸？酚：显色乳酸：抑制细菌生长2、划线分离时为什么每次都要将接种环上剩余物烧掉？其目的是要获得单独生长的菌落,接种环上多余菌体、划线时重叠都可能使菌落长成片,所以应该避免.3、恒温箱中培养微生物时为何培养基均需倒置？①防止水分蒸发，导致培养基中水分不够②防止形成的冷凝水滴落在培养基上造成污染实验五显微镜油浸物镜的使用油镜的放大倍数可达100X,但其焦距和直径很小，需要很大的光照强度。
在低倍镜、高倍镜、油镜3物镜中，油镜的放大倍数和数值孔径最大，工作距离最短。
油镜头上常刻有OI/HI字样为什么加香柏油？①提高视野的照明度和分辨率。
它的折射率与玻璃相近，光线进入载玻片后可直接通过它进入物镜而不发生折射。
②可以增大数值孔径，便于观察到清晰的菌体结构操作步骤：（一）观察前准备1、显微镜平置于台面2、调节光源，聚光器升至与载物台相聚1mm。
观察染色装片，光线宜强；未染色宜弱（二）低倍镜找视野（三）高倍镜观察（四）油镜观察1、提起镜筒2cm，将油镜转至正下方，在玻片标本镜检部位滴一滴香柏油。
2、从侧面注视，下降镜筒，使油镜浸在油中至油圈不扩大为止3、调亮光线，先用粗调节器上升镜筒（切忌反向旋转），再调细调节器矫正焦距。
4、再次观察。
换装片，重复观察时可比第一次少加香柏油（五）镜检完毕后的工作1、清洁油镜，用擦镜纸擦去香柏油，在用擦镜纸沾少许二甲苯擦去残留香柏油，再用干净的擦镜纸擦干残留的二甲苯。
2、将接物镜呈“八”字形降下，不可使其正对聚光器。
实验八细菌的革兰氏染色原理：利用细菌的细胞壁组成成分和结构的不同。
革兰氏阳性菌的细胞壁肽聚糖层厚，交联而成的肽聚糖网状结构致密，经乙醇处理发生脱水作用，使孔径缩小，通透性降低，结晶紫与碘形成的大分子复合物保留在细胞壁内使细胞呈蓝紫色。
而革兰氏阴性菌的细胞壁肽聚糖层薄，网状结构交联少，且类脂含量较高，经乙醇处理后，类脂被溶解，细胞壁孔径变大，通透性增加，结晶紫与碘的复合物被溶出细胞壁，在经番红复染后细胞成红色。
阳性--紫色--金黄色葡萄球菌阴性--红色--大肠杆菌操作步骤：（一）制片1、涂菌在玻片中央滴一滴水，挑去少许金黄色葡萄球菌和大肠杆菌苔于水滴中2、干燥自然干燥，亦可至于火焰上部略加温加速干燥3、固定涂面向上，通过火焰三次，以热而不烫为宜。
其目的是使细胞质凝固，从而使细胞形态固定，并使细菌粘附在玻片上（二）染色1、初染结晶紫染液，2-3min后，水洗2、媒染卢戈式碘液，1min后水洗3、脱色95%乙醇脱色，摇动玻片至紫色不再为乙醇脱腿为止（30s至1min），立即用水冲洗4、复染石炭酸复红液复染，2-3min，水洗5、镜检滤纸吸干，油镜镜检注意事项：脱色时间过长或过短，会使阴阳颠倒。
实验十细菌芽孢荚膜的染色及观察1、芽孢是一些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体，壁厚、透性低、不宜着色。
2、原理：用着色力强的染色剂如孔雀绿或石炭酸复红在加热条件下才能进入菌体和芽孢内，进入菌体的染料经水洗后脱色，而芽孢内的染料难以洗脱。
从而对芽孢进行染色。
3、荚膜是一些细菌细胞外的一层胶状黏液物质，其成分为多糖、糖蛋白或多肽，与染料亲和力低。
4、载玻片上出现蒸汽时开始计算时间约4-5min5、芽孢呈绿色菌体呈红色6、荚膜自然干燥不可用火焰烘干，背景灰色菌体较暗，在其周围呈现一明亮的透明圈即荚膜7、问：为什么芽孢染色要加热？（待百度）基内菌丝细气生菌丝粗实验十七细菌的生理生化反应1、某些细菌产生色氨酸酶，能分解培养基蛋白胨中的色氨酸，产生吲哚，吲哚于对二甲基氨基苯甲醛反应生成红色的玫瑰吲哚，为吲哚反应阳性2、VP反应：微生物发酵葡萄糖产生丙酮酸，两分子丙酮酸脱羧形成乙酰乳酸，继续脱羧形成乙酰甲基甲醇，后者在碱性条件下与月瓜类、肌酸类物质反应形成红色化合物，为阳性3、有些细菌发酵糖类产生有机酸较多，使发酵液的PH下降到4.2以下，加入甲基红试剂，发酵液变红，为甲基红反应阳性4、某种微生物能以某种糖类为碳源，则判断为发酵状态大肠杆菌产气肠杆菌V-P反应（红/非红）—+甲基红反应（红/黄）+ —吲哚反应（红/非红）+ —糖发酵试验（产酸产气）+ +实验三七乳酸发酵与乳酸菌饮料1、许多种类的微生物（主要是细菌）在厌氧条件下分解己糖产生乳酸的作用称为乳酸发酵。