-主管检验技师考试临床医学检验学基础讲义第4章血液分析仪及其临床应用

血液分析仪及其临床应用

要点1：

电阻抗法血细胞计数原理（库尔特原理）是将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器中，将小孔管（也称传感器）插进细胞悬液中。小孔管内充满电解质溶液，并有一个内电极，小孔管的外侧细胞悬液中有一个外电极。

如图：电阻抗原理示意图

当接通电源后，位于小孔管两侧的电极产生稳定电流，稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管壁上宝石小孔（直径＜100μm，厚度约75μm）向小孔管内部流动，使小孔感应区内电阻增高，引起瞬间电压变化形成脉冲信号，脉冲振幅越高，细胞体积越大，脉冲数量越多，细胞数量越多，由此得出血液中血细胞数量和体积值。

如图：血液分析仪计数原理示意图

要点2：

白细胞分类计数原理

根据电阻抗法原理，经溶血剂处理的、脱水的、不同体积的白细胞通过小孔时，脉冲大小不同，将体积为35～450fl白细胞，分为256个通道，其中，淋巴细胞为单个核细胞，颗粒少，细胞小，位于35～90fl 的fl小细胞区，粒细胞（中性粒细胞）的核分多叶，颗粒多，胞体大，位于160fl以上的大细胞区，单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始细胞、幼稚细胞等，位于90～160fl的单个核细胞区，又称为中间型细胞。

如图：三分类血球分析仪工作原理示意图

要点3：

光散射法白细胞计数和分类计数原理

容量、电导、光散射（VCS）法

1）利用电阻抗法原理测量细胞体积（V）。

2）利用电导（C）技术测量细胞内部结构：原理是利用高频电磁探针测量细胞内部结构，根据细胞核和细胞质比例、细胞内颗粒大小和密度来识别体积相同、但性质不同的两类细胞群体，如小淋巴细胞和嗜碱性粒细胞。

3）利用光散射（S）技术测量细胞形态和核结构：原理是利用激光照射进入计数区的每个细胞，根据散射光角度（10°～70°）的不同，提供每个细胞形态、核结构信息来鉴别中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞。

根据VCS原理，显示3种细胞散点图：DF1（体积和散射光）、DF2（体积和电导）、DF3（体积和电导，但只显示嗜碱性粒细胞群）。

如图：五分类血球分析仪原理示意图

要点4：

正常白细胞直方图，在35～450fl范围内将白细胞分为3群，左侧峰又高又陡为淋巴细胞峰，最右侧峰又低又宽为中性粒细胞峰，左右两峰间的谷区较平坦为单个核细胞峰。异常直方图意义见下表。

如表：白细胞直方图变化的部分原因

如图：急性淋巴细胞白血病时的白细胞直方图特点

如图：急性淋巴细胞白血病时的白细胞直方图特点

如图：急性非淋巴细胞白血病时的白细胞直方图特点

如图：慢性淋巴细胞白血病时的白细胞直方图特点

如图：单核细胞增多或嗜酸细胞增多症时的白细胞直方图特点

如图：异常淋巴细胞增多症时的白细胞直方图特点

如图：慢性粒细胞白血病时的白细胞直方图特点

要点5：

红细胞直方图正常红细胞直方图，在36～360fl范围内分布两个细胞群体，从50～125fl区域有一个两侧对称、较狭窄的曲线，为正常大小的红细胞，从125～200fl区域有另一个低而宽的曲线，为大红细胞、网织红细胞。当红细胞体积大小发生变化时，峰可左移或右移，或出现双峰。

如图：缺铁性贫血红细胞直方图

如图：轻型珠蛋白生成障碍性贫血红细胞直方图

如图：铁幼粒细胞性贫血红细胞直方图

要点6：

血小板直方图正常血小板直方图，在2～30fl范围内分布，呈左偏态分布，集中分布于2～15fl内。当有大血小板或小红细胞、聚集血小板时，直方图显示异常。

如图：受干扰的异常血小板直方图

（a）大量红细胞碎片

（b）多数血小板聚集

（c）小红细胞增多

要点7：

方法学评价

仪器性能的评价新仪器安装、每次仪器维修后须对仪器性能进行测试、评价。ICSH公布的血液分析仪评价方案，包括下列内容：可比性、准确性、总重复性、精密度、线性范围、携带污染。

要点8：

干扰血液分析仪检测的因素

要点9：

红细胞血红蛋白分布宽度（HDW）

反映红细胞内Hb含量异质性的参数，用单个红细胞Hb含量的标准差表示，正常参考范围为24～34g

／L。遗传性球形红细胞增多症时RDW、HDW明显增高，为小细胞不均一性高色素性贫血。

要点10：

血小板平均体积（MPV）

（1）鉴别血小板减低的病因：MPV增高，见于外周血血小板破坏过多所致血小板减低。MPV减低，见于骨髓病变所致血小板减低。

（2）评估骨髓造血功能恢复情况：局部炎症时，骨髓造血未抑制，MPV正常。败血症时，骨髓造血受抑制，MPV减低。白血病缓解时，MPV增高。骨髓造血衰竭，MPV和血小板计数持续减低。骨髓功能恢复时，MPV先上升，血小板计数随后上升。

要点11：

血小板分布宽度（PDW）

仪器测量一定数量血小板体积后，计算所得外周血血小板体积大小异质性参数。用血小板体积变异系数（CV）来表示。PDW增大见于急性白血病化疗后、巨幼细胞性贫血、慢性粒细胞白血病、脾切除后、巨大血小板综合征、血栓性疾病、原发性血小板增多症、再生障碍性贫血；PDW减低见于反应性血小板增多症。

要点12：

低荧光强度网织红细胞百分率（LFR）和高荧光强度网织红细胞百分率（HFR）

（1）骨髓移植：网织红细胞计数是监测骨髓造血恢复的重要参数，通常移植成功后网织红细胞比白细胞提前3～4d增高。HFR增高提示有较多未成熟细胞从骨髓进入外周血，故HFR变化比网织红细胞计数变化具有更重要意义。

（2）贫血：溶血性贫血时Ret、LFR、HFR明显增高；肾性贫血时HFR上升、LFR下降、Ret正常。

（3）放疗和化疗：长期化疗导致网织红细胞亚群发生变化，HFR、MFR减低早于LFR。骨髓恢复时，HFR、MFR又迅速上升。

点13：

网织红细胞成熟指数（RMI）

RMI＝（MFR＋HFR）／LFR×100。RMI增高，见于溶血性贫血、特发性血小板减少性紫癜（ITP）、慢性淋巴细胞白血病（CLL）、急性白血病、真性红细胞增多症、再生障碍性贫血、多发性骨髓瘤。RMI减低，提示骨髓衰竭和造血无效，见于巨幼细胞性贫血。

要点14：

未成熟网织红细胞指数（IRF）

指未成熟网织红细胞与总网织红细胞百分比。未成熟网织红细胞体积较大，含RNA的量多。

（1）监测骨髓移植后的情况：骨髓移植后，全血细胞计数、白细胞分类计数、网织红细胞计数是监测骨髓恢复造血的早期指标，其中，IRF是骨髓移植成功最早、最灵敏的指标。

（2）监测肾移植后的情况：IRF是肾移植成功较早、较灵敏的指标。

要点15：

红细胞直方图在贫血中的应用

1.小细胞性贫血

（1）RDW正常：红细胞主峰左移，分布在55～100fl，波峰在75fl处，基底较窄，为小细胞低色素均一性图形，见于轻型地中海贫血。

（2）RDW轻度增高：红细胞主峰左移，分布在55～100fl，波峰在65fl处，为小细胞低色素和细胞不均一性图形，见于缺铁性贫血。

（3）RDW明显增高：红细胞显示双峰，小细胞峰明显左移，波峰在50fl处，大细胞峰顶在90fl处，基底较宽，为小细胞低色素不均一性图形，见于铁粒幼细胞性贫血、缺铁性贫血经治疗有效时。