临床微生物标本处理及操作流程
临床微生物学检验的标本采集
临床微生物学检验的标本采集一、血液和骨髓细菌学检验标本的采集（一）适应症菌血症、败血症和感染性骨髓炎等感染菌的培养鉴定和药物敏感试验。
（二）病人准备1．凡怀疑菌血症和败血症的患者，采血培养时，应尽量在未使用抗菌素前采血，如已使用过抗菌素，应尽量选择抗菌素在体内浓度最低时采血，或在病人第二次使用抗菌素之前采集血培养标本。
2．应在病人发热期或寒颤时采集（三）标本采集1．血培养瓶领取：凭医嘱和检验申请单到检验科细菌室领取。
按照实际情况选择相应类型的血培养瓶：如灰色瓶盖为普通成人培养瓶；粉红色盖为儿童需氧菌培养瓶；紫色盖为厌氧菌培养瓶。
2．将患者信息录入相应的血培养瓶条码中，并在作好病人姓名、科别、床号等标识。
2．采集方法：严格消毒病人采血部位和血培养瓶口，抽一定量血液或骨髓后，无菌注入血培养瓶内，轻轻摇匀。
3．标本量：成人每次采血5~10ml，小儿采血3~5ml，骨髓2~3ml，采血量足够则阳性率高，反之阳性率减低。
（四）注意事项1．抽血、抽骨髓和接种时，须严格注意无菌操作，避免污染杂菌。
2．从抽血、抽骨髓到接种入瓶，动作要快，防止血液凝固。
3．成人不明原因发热、怀疑血流细菌感染时宜在不同部位抽血2套，每套2瓶（需氧、厌氧各一瓶）。
4．怀疑伤寒、亚急性细菌性心内膜炎及布鲁氏菌病的病人等，一般一日抽血三次培养，必要时需追加次数。
（五）标本送检和保存1．标本采集后应及时送检，一般不超过1h送交细菌室。
2．送检过程中应注意防止培养瓶打破或其它潜在性污染可能。
二、痰液或下呼吸道分泌物细菌学检验标本的采集（一）适应症肺炎、肺气肿、支气管炎、鼻窦炎、肺结核等感染菌的培养鉴定、药物敏感试验和抗酸菌检查。
（二）病人准备1．尽量在未使用抗菌素前留取标本。
准备好无菌标本容器，贴上条码、标明标识。
2．住院病人应留取清晨起床第一口痰。
为减少正常菌群的污染，嘱患者早上起床后用清水或生理盐水漱口，不要刷牙，除去鼻咽分泌物。
（三）标本采集1．一般病人用力咳出气管深处或肺部痰液，留于无菌标本容器内。
临床微生物检验标准化操作
临床微生物检验标准化操作临床微生物检验是临床诊断的重要组成部分，其结果直接关系到患者的治疗方案和预后评估。
因此，标准化操作在临床微生物检验中显得尤为重要。
本文将从标本采集、实验操作、结果判读等方面介绍临床微生物检验的标准化操作。
1. 标本采集。
标本采集是临床微生物检验的第一步，也是至关重要的一步。
不规范的标本采集可能会导致检验结果的误差，影响临床诊断。
因此，在进行标本采集时，需要注意以下几点：（1）标本采集时间，标本采集的时间应符合临床需要，并且应在医生的指导下进行。
不同的微生物在不同的时间段内的检出率可能会有所不同，因此需要根据临床情况选择合适的标本采集时间。
（2）标本采集部位，标本采集部位应选择合适的部位，并且在采集前要进行充分的消毒处理，以避免外部微生物的干扰。
（3）标本容器，不同的微生物需要不同类型的容器进行采集，因此需要选择合适的标本容器，并且在采集后要及时送至实验室进行检验。
2. 实验操作。
实验操作是临床微生物检验的核心环节，其准确性和规范性直接关系到检验结果的准确性。
在进行实验操作时，需要注意以下几点：（1）实验操作环境，实验操作应在符合微生物检验要求的环境下进行，避免外部环境对实验结果的干扰。
（2）实验操作流程，实验操作应按照标准化的操作流程进行，严格控制每一个操作步骤，避免操作失误。
（3）实验操作记录，实验操作过程中需要做好详细的记录，包括标本信息、操作步骤、操作人员等信息，以便后续的结果分析和追溯。
3. 结果判读。
结果判读是临床微生物检验的最后一步，也是决定临床诊断的关键环节。
在进行结果判读时，需要注意以下几点：（1）结果解读标准，对于不同的微生物检验结果，需要根据相应的标准进行解读，避免主观因素对结果的影响。
（2）结果报告准确性，结果报告应准确无误，包括微生物的种类、数量、药敏信息等内容，以便医生进行合理的临床诊断和治疗。
（3）结果保存与追溯，检验结果需要进行有效的保存和追溯，以便后续的质控和审查。
临床微生物标本处理及操作流程PPT
鉴定&药敏
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清 洁标本
1-2种机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的以上相同注释
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛； 重新采集清洁标本.
进行鉴定和药敏，若数量< 104CFU/ml， 仍然对可能的致病菌进行操作
若为腐生葡萄球菌， 则处理与其他致病菌相同； 其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污 染
1.
在孕期35～37周时的普查培养
a. b. c. d. 阴道和直肠拭子 肉汤过夜增菌 接种于血平板上 再孵育过夜和鉴定可疑菌落
2. 3.
任何有GBS菌尿的患者需要在分娩期做好预 防 分娩时快速检测敏感性不够
男性生殖道标本送检
男性的生殖道致病菌与女性绝大部分一致； 尿道炎通常由淋病奈瑟氏菌或非淋病奈瑟氏菌引起； 可能并发于生殖器溃疡；
血培养 Blood Culture
严格无菌操作
soap
脑脊液
CEREBROSPINAL FLUID
无菌操作，腰椎穿刺采样
最少1 mL，最好>5 mL
打入3个小管中，以第二根小管送检培养 分枝杆菌培养标本需要2 mL以上，置于4℃保存 即时送检 绝对不能冷藏！
如何看待CSF的培养结果？
上呼吸道标本
Upper Respiratory Tract Specimens
下呼吸道标本
Lower Respiratory Tract Specimens
下呼吸道感染
Lower Respiratory Tract Infections
急性支气管炎
社区获得性肺炎 院内获得性肺炎 免疫妥协患者肺炎
吸入性肺炎标本革兰氏染色的典型形式，培养只 会培养出正常菌群，所以革兰氏染色是用于诊断 的方法。 成双革兰氏阳性球菌，短链=肺炎链球菌 革兰氏阳性菌成群排列=金黄色葡萄球菌 革兰氏阴性球杆菌（小）=流感嗜血杆菌 革兰氏阴性杆菌大且肥厚=肺炎克雷伯菌或其他 肠道菌 革兰氏阴性双球菌=卡他莫拉菌 可能是肺结核，抗酸杆菌不能被革兰氏染色所染 色。
临床微生物标本的采集,储存和转运
临床微生物标本的采集，储存和转运微生物检验的基本原则1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送检5.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂6.送检标本应注明来源和检验目的标本采集1.尽早采集2.无菌操作3.合适部位4.适量标本5.适当方法6.安全采集1-尽早采集标本“采集重在时效性”1.1最好是病程早期、急性期1.2尽量在抗生素使用之前采集1.3对已用抗生素又不能停药者，可在下次用药前采集2-合适部位“背景干扰”2.1无菌标本:注意局部及周围皮肤的消毒，严格进行无菌操作与外界相通的腔道:避开腔道口区标本，以免皮肤表面正常菌群的污染，造成混淆和误诊。
2.2正常菌群寄生部位：采集时应特别小心；应明确检查的目的菌在进行分离培养时，采用特殊选择性培养基2.3血标本采集:应避免输液的影响。
3-无菌操作采集标本时应尽量减少或避免感染部位附近皮肤或粘膜常居菌群污染和防止外源性细菌污染标本。
3.1.在采集血液、脑脊液、胸腔积液、关节液等无菌标本时，应注意对局部及周围皮肤的消毒，严格进行无菌操作；3.2.对于采集与外界相通的腔道标本时，如窦道标本，应从窦道底部取活组织检查，而非从窦道口取标本，以免受皮肤表面正常菌群的污染，造成混淆和误诊；3.3.采集的标本均应盛于无菌容器内送检。
盛装标本的容器须先经高压灭菌、煮沸、干热等物理方法灭菌，或使用一次性无菌容器，不能用消毒剂或酸类处理。
标本中也不得添加防腐剂，一面降低病原菌的分离率。
4-适量标本4.1标本采集应足量。
标本量过少，可能会导致假阴性结果。
4.1.1血液标本:通常成人采血量每瓶8-10ml,儿童每瓶1-5ml;脑脊液、骨髓、4.1.2脓肿、穿刺液、引流液、痰液等标本：三1ml尿液标本：＞3ml4.1.3粪标本：1-3g 或 1-3ml4.2结核标本采集量要求特殊：4.2.1痰、肺泡灌洗液或支气管冲洗液：>5ml;4.2.2清晨中段尿：5-10ml;4.2.3粪标本：>1g;4.2.4穿刺液(胸水、腹水、关节液等)：5- 10ml。
临床微生物标本采集与运送标准操作流程
临床微生物标本采集与运送标准操作流程下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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微生物标本操作流程
微生物标本操作流程一、采集标本1.根据需要使用的微生物种类，选择采集适当的标本类型，如血液、尿液、呼吸道分泌物、伤口分泌物等。
2.采集前洗手，戴好手套，保证操作无菌。
3.根据标本类型选择适当的采集方法，如穿刺、切开、吸引等。
4.采集标本时避免污染和损伤，采集的标本量要充足，确保后续实验的需要。
5.采集后立即将标本放入合适的容器中，并用合适的保存液固定标本。
二、保存标本1.封闭保存a.无菌标本应尽快处理。
b.根据需要，选择适当的保存方式：常温、4℃、-20℃，-80℃等。
c.使用密封标本袋、离心管等避免样本污染。
d.根据需求添加保存液，如生理盐水、甘油、琼脂糖等。
2.运输保存a.标本运输前应按照需要将标本进行适当保存。
c.标本运输时需要严格遵守相关的运输规定和防护措施，避免标本在运输过程中受到污染或损坏。
三、处理标本1.无菌条件下进行标本处理。
2.打开封闭的标本容器时，应尽量减小环境污染。
3.首先进行外部检查，检查标本是否完整，有无明显破损或渗漏。
4.根据需要，将标本分为不同的试管或培养皿中，避免不同菌种相互干扰。
5.针对具体需求，对标本进行不同的处理，如离心、稀释、加酶处理等。
四、传递标本1.打开封闭的标本容器时，应尽量减小环境污染。
3.准备适当的传递容器和传递材料，避免标本在传递过程中受到损坏或污染。
4.标本传递时应尽快送至指定的实验室，避免标本在传递过程中受到温度变化、时间延误等因素的影响。
五、清洗操作区域和工具1.实验完成后，需要对操作区域进行清洁2.清洗操作区域可以使用含有消毒剂的清洁剂，如含有氯己定的漂白粉或消毒液。
3.清洗使用过的工具，如采集器具和传递容器等，使用适当的清洁剂和消毒液进行清洗和消毒，保证无菌状态。
微生物标本操作流程的重点是保持标本的无菌状态，避免标本的污染和损伤。
在每一步操作中，都要严格遵守操作规程和消毒措施，以确保标本的质量和准确性。
此外，还需要根据具体实验需求，选择适当的保存液、保存条件和传递方法。
临床微生物实验室标本处理流程详细
微生物实验室标本处理流程涂片革兰染色，其他形
态：1.弧形菌属根据标本种类标本接种后油镜下观察染色 2.弯
曲菌3.酵母菌上显板挑选可疑菌落，35°C培养，情况和细菌形
态4其他菌：鉴定参照《全国必要时可做18~24h 检验操作规
程3版》） CO2，厌氧培养 G+球菌G-球菌：主要奈瑟G-杆菌 G+
杆菌（分芽菌属和布兰汉菌属（多为污为主孢和无染，结合
临芽孢）床）触酶（+）触酶试验氧化酶触酶（-）：链球菌属
氧化酶（+）：氧化酶(-): 血浆凝固酶非发酵菌（不动，嗜肠杆
菌属麦除外）血浆凝固酶血浆凝固酶（+）（-）参照《全国
检验操作规一般采用肠杆菌属鉴定板程3版》鉴定，并做链条，
沙门志贺加做血清学球菌属药敏鉴定葡萄糖O/F F（+）：金F （-）：新生霉新生霉素参照《全国检验操作规程按照肠杆菌属
做药敏微球菌试验并报告黄色葡萄素（+）：（-）：腐生3版》
鉴定按照非发酵菌球菌葡萄球菌属做药敏试验并报告表皮葡萄
球菌备注：此图为粗略图，以全国检验操作规程3版为准按照
葡萄球标本处理：1.痰液：血板+麦康凯（插管痰注明）菌属做
药敏 2.大便：血板+麦康凯+SS平板（稀便注明）试验，报
告 3.尿：血板+麦康凯（中段尿注明，用大环取样）
4.棉签取样的标本: 血板+麦康凯(最好以生理盐水湿润后接种)
5.带菌量少的标本：需要增菌处理注意事项：接种标本后平板
注意注明接种时间和标本编号，性病衣原体筛查要留标本于冰
箱中。
支原体标本避免干燥和高温，及时处理为宜。
临床微生物标本采集和送检指南
二、临床微生物标本采集和送检的挑战
在临床微生物标本采集和送检过程中，可能会遇到以下挑战和问题： 1、如何正确采集微生物标本
二、临床微生物标本采集和送检的挑战
2、如何妥善保存标本，避免污染和交叉感染 3、如何及时、安全地将标本运送至实验室 4、如何与实验室保持密切，确保检测结果的准确性
三、临床微生物标本采集和送检 的具体方法和步骤
三、标本运送
2、防止污染：在运送过程中，应确保标本不受污染。使用清洁、干燥的容器 存放标本，并封闭容器以防止细菌、病毒等微生物的侵入。
三、标本运送
3、及时送达：标本应在采集后尽快送至实验室进行检测，以确保检测结果的 准确性。如有特殊情况需延迟送检，应告知实验室技术人员并妥善保存标本。
三、标本运送
四、临床微生物标本采集和送检的建议
3、建立有效的沟通渠道，加强与实验室、医生之间的协作和信息共享，及时 调整治疗方案。
四、临床微生物标本采集和送检的建议
4、针对具有传染性的标本，应严格遵守相关规定，确保运输、处理等过程的 安全性。
5、借助信息化手段，如电子病历、远程诊断等，提高临床微生物标本采集和 送检的效率和质量。
4、记录信息：在运送过程中，应记录标本的相关信息，包括采集时间、送检 时间、接收人员等，以便实验室技术人员对标本进行跟踪和管理。
四、常见问题及处理方法
四、常见问题及处理方法
1、采血困难：如遇采血困难，可适当调整采血部位或改变采血方式，如更换 采血针或调整患者体位。如仍无法采血，可咨询医生或实验室技术人员寻求帮助。
四、常见问题及处理方法
4、标识错误：如遇标识错误，应立即纠正并重新标识标本。同时，对可能造 成标识错误的原因进行分析和总结，以避免类似错误再次发生。
微生物标本的核收和接种程序
微生物标本的核收和接种程序1 目的对微生物检验的标本制定验收和评估程序，以保证检验前的质量控制，并对合格的标本进行规范的接种，有针对性的分离出有临床意义的致病菌。
2 适用范围适用于所有的微生物检验标本。
3 职责微生物室所有工作人员均应执行本程序。
4 程序内容4.1 标本的交接程序标本转运人员将微生物检验标本送至微生物室后，由微生物室工作人员进行电脑签收，确认接收时间。
检验申请单或条码信息应包括标本来源和临床诊断，必要时说明感染类型和/或目标微生物。
4.2 标本的评估与处理4.2.1 标本的验收处理：当标本出现以下情况时，应按不合格标本处理，同时在《不合格检验标本记录表》上登记。
a)化验单与标本上病人姓名不符，退回原送检单位，化验单未注明标本来源及培养项目，查询正确情形。
b)送检容器不当或标本类别错误，在 LIS 系统中将条码退回，注明原因，建议重新留取。
c)条码信息不完整，应电话联系临床科室查询正确情形。
d)采集容器有破损或标本有泄漏、污染时，应在 LIS 系统中将条码退回，注明原因，建议重新留取。
e)标本未注明身体部位者，进一步查询。
f)拭子样本要求厌氧培养，退回条码，并注明标本留取不合格，建议用运送转运培养基运送。
g)痰液采取不当（如唾液）或干燥拭子，退回条码，并注明标本留取不合格，建议重新留取。
h)尿液置室温超过 2 小时，退回条码，并注明标本留取不合格，建议重新留取。
i)一支无菌拭子有多项培养目的（如细菌培养、支原体培养、衣原体检测等），联系临床补送标本。
j)进行 G 试验检测项目的血标本有凝块，或离心后发现有溶血、脂血、黄疸时，退回条码，并注明标本留取不合格，建议 1 周后重送。
k) 以上不合格标本的条码在 LIS 系统退回后，半小时内相应临床科室无人确认此事时，应立即电话联系，告知并敦促确认，并在《不合格检验标本记录表》上登记标本信息、退回原因及临床科室确认人信息。
4.3 标本的电脑签收4.3.1 有条码标本（无论是门诊标本还是住院标本）进入 LIS 系统“微生物”软件程序，点击“接收登记”按钮，将光标移至“申请单号”，扫描标本容器上的标本条码，系统根据已设定的编号规则，自动生成该标本的编号，如为急诊标本，在生成标本号的同时可弹出急诊字样，提醒优先处理。
微生物检验流程及操作标准
微生物检验流程及操作标准微生物检验的流程包括以下步骤：1. 标本采集：根据患者的症状和规章制度正确采集标本，及时将采集到的标本送至检验科进行接种处理。
在运送标本的过程中，需要保持相应的温度和氧气，以防止标本干燥。
2. 镜检：检验人员运用显微镜直接观察标本，辨别相关致病菌的形态与数目，并进行初步判断。
必要时，还需要对标本进行染色后再观察，以对致病菌的性质和来源进行鉴别，更能排除污染因素，使标本致病菌的检出率得到大幅度提升。
3. 分离培养：采集的标本中不可避免地会吸附细菌，如果在镜检环节发现标本上吸附的细菌，就需要对标本实施分离纯化，并将其接种于适宜的培养基上，如显色培养基、血平板培养基、营养琼脂培养基等。
再将空气和温度调整至适合细菌生长的数值，获得便于进一步鉴定的细菌。
4. 细菌鉴定：检验人员通过细菌形态、菌落特点、酶类检测、血清学试验、生化反应等方式鉴定分析分离获得的标本，明确致病原因。
微生物检验的操作标准如下：1. 尽量在病程早期、症状典型以及在使用抗生素之前采集标本。
2. 标本应使用无菌容器盛放。
3. 血液为无菌液体，因此在采集时要避免皮肤的正常菌群污染。
多采用血培养瓶运送，随后放入血培养系统自动培养。
如有报阳则进行下一步检验：涂片镜检报给临床初步结果；需氧和厌氧瓶分别转种血平板，巧克力平板与厌氧血平板等；随后进行菌种鉴定以及药敏试验。
4. 脑脊液标本一般需要进行离心，以富集细胞。
一般检验流程为进行涂片镜检，包括革兰染色，抗酸染色与墨汁染色等。
增菌管进行增菌，分离培养转至血平板，巧克力平板，沙保弱平板等。
5. 痰液镜检一般包括革兰染色与抗酸染色，分离培养多用巧克力平板和血平板。
6. 尿液常做定量检测，取10微升尿液进行连续划线。
7. 粪便常用革兰染色做菌群比检测；分离培养多用麦康凯与SS平板。
8. 各类微生物标本应通过传递窗进行传递。
以上信息仅供参考，建议咨询专业人士获取准确信息。
临床微生物检验标本的采集、运送及接种要点
检查采集器具和试剂的有效期
在采集前，检查采集器具和试剂的生产日期和有 效期，确保采集过程中使用的物品符合质量要求。
无菌操作技术规范培训
01
02
03
培训采集人员
对采集人员进行无菌操作 技术规范的培训，确保他 们掌握正确的采集方法和 注意事项。
报告审核
由经验丰富的专业人员对报告进行审核，确 保报告的准确性和可靠性。
报告存档
对出具的报告进行存档管理，以备后续查询 和追溯。
07 注意事项与常见问题解答
采集过程中注意事项
严格无菌操作
采集标本时应避免污染，确保无菌操作，以免影响检验 结果。
采集适量标本
采集标本量应适中，过多或过少均可能影响检验结果。
定期监测
定期对保存条件进行监测和记录，确保标本保存环境稳定可靠。
超出保存期限处理
对于超出保存期限的标本，应按照相关规定进行处理，避免误用 或浪费。
05 标本接种操作要点
接种前培养基准备工作
选择合适培养基
根据待检微生物种类选择合适的培养基，确保能 够提供其生长所需的营养物质和环境条件。
培养基灭菌
对培养基进行高压蒸汽灭菌或干热灭菌，以消除 杂菌和污染。
将拭子插入鼻腔至鼻咽部，轻轻旋 转后取出。
03
02
咽拭子
用无菌拭子擦拭咽后壁及两侧扁桃 体，避免触及舌部。
采集容器
应使用无菌、有盖、干燥的容器， 痰标本也可使用无菌痰杯。
04
其他类型标本采集
脑脊液标本
由医生进行腰椎穿刺采集，过程中需严格无 菌操作。
穿刺液标本
临床微生物标本采集和运送规范
脓液或伤口分泌物标本 采集运送标准
❖ 本卷须知 ❖ 迅速送往实验室，1小时内不能培养应将标本冷藏。 ❖ 皮肤消毒对培养结果至关重要。 ❖ 不要仅送检脓液。脓液不能代表伤口特点，应在病灶
活动区域或基底部采集标本。 ❖ 除非有渗出物，枯燥、结痂伤口一般不做培养 ❖ 标记：不要只写“伤口〞标记标本，应有专门的描述
5
二、临床各类标本的采集、 运送及保存标准
6
血培养的采集、运送标准
❖ 采集程序: ❖ 皮肤消毒程序：推荐三步法 〔酒精→碘伏→酒精〕 ❖ 培养瓶消毒程序：75%酒精消毒 ❖ 静脉穿刺和培养瓶接种程序
❖ 采血量：成人8-10ml，儿童1-3ml。 骨髓采集量1-2ml ❖ 采血时间和数量: ❖ 采血时间:在寒战或体温顶峰到来之前0.5-1h，或于寒战
储存 环境
标本来源
4℃冰 箱
痰、尿液、粪便、气管冲洗物、导尿管、静脉导管、脓液和伤口分泌物 细菌或真菌培养；无菌体液（胸腹水、心包液、关节液、鞘膜积液、胆 汁）真菌培养；支原体培养；衣原体检查；血清学检查（包括ASO、RF、 肥达反应）
室温 脑脊液、生殖道、眼、耳、鼻、喉、血培养、血管导管尖、活检组织细
❖ 注意：从静脉取血；不要与血气和血沉标本一起采血； 不推荐血入瓶前换针头；不推荐静脉血直接入瓶；不宜 在静脉导管或静脉留置口采血〔除非疑心导管相关性血 流感染〕。
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血培养的采血量
❖ 成人采血量5-10ml〔最好8-10ml〕，儿童采血量1-3ml 〔不超过总血量的1％〕。血液和肉汤之比为1：5~1： 10。骨髓采集量1-2ml。
❖ 应注明具体标本来源如眼标本注明是眼睑、结膜 还是角膜，并注明左眼还是右眼。
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脓液或伤口分泌物标本 采集运送标准
微生物标本采集操作规程
微生物标本采集操作规程基本原则1.发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查，三级医院微生物标本送检率不应低于60%。
2.尽量在抗菌药物使用之前采集标本。
3.标本采集时应严格无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其它杂菌污染。
4.标本采集后应立即送至细菌室。
床旁接种可提高病原菌检出率。
5.以棉拭子采集的标本如咽拭子、肛拭或伤口拭子，宜插入运送培养基送检。
6.送检标本应注明姓名、床号、标本来源、检验目的和标本采集具体时间，使细菌室能准确及时接种相应的培养基和适宜的培养环境，提高阳性检出率。
一、血液与骨髓的送检方法1.一般原则:在出现临床症状后应尽快抽血样作培养，最好在发热初期、高热或寒战时，原则上应选择在抗菌药物应用之前，对已应用药物而病情不允许停药的患者应在下一次用药前采血。
2.采血部位：肘静脉。
疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。
3.采血最佳时间与频率：急性败血症应在治疗前24小时内抽血3次或者更多次，并在不同部位，如左右手臂或颈部，分别做厌氧、需氧培养以及内毒素、降钙素原检测；急性心内膜炎在治疗前1-2小时内分别在3个不同部位抽血样；怀疑伤寒病人，在病程第1-2周内采静脉血液；肺炎链球菌在寒战、高热或者休克时；布鲁杆菌感染除在发热期采血，还要多次采血，一般是24小时抽3-4次；分枝杆菌感染早期采血样阳性率高。
怀疑菌血症因尽早采血，体温上升阶段采血可提高阳性率，但要防止因等待而延误时机，对已用抗菌药物而不能停药者，可在下次用药前采血。
对疑为伤寒病人，在第1-3周内采集骨髓是最佳时间，在病灶或髂前（后）上棘处严格消毒后抽取骨髓1ml 作细菌培养。
4.采血部位的局部皮肤应严格消毒。
将采集的血液注入血培养瓶前，认真识别相应颜色的瓶，并仔细检查培养瓶有无变色或混浊。
过火消毒针头，血培养瓶撕掉塑料盖后，瓶口不是无菌部位必须消毒。
消毒不能用碘酒消毒而是75%酒精消毒。
2024版临床微生物标本采集规范
临床微生物标本采集规范•微生物标本采集意义与原则•临床常见微生物标本采集方法•微生物标本采集注意事项与操作规范•微生物标本运输、保存和处理流程目录•临床微生物实验室检测技术应用与进展•总结回顾与拓展思考01微生物标本采集意义与原则准确诊断指导治疗监测病情变化预防和控制感染通过采集微生物标本，可以对病原体进行准确鉴定和分类，为医生提供准确的诊断依据。
通过对微生物标本的连续检测，可以及时了解患者病情的变化情况，为医生调整治疗方案提供依据。
根据微生物标本的检测结果，医生可以选择针对性的治疗药物和方法，提高治疗效果。
通过对微生物标本的检测和分析，可以及时发现和控制感染源，防止感染的扩散和传播。
无菌操作正确选择采集部位采集足量标本及时送检01020304在采集微生物标本时，必须严格遵守无菌操作原则，避免污染标本和引入外源性微生物。
根据不同的病原体和感染类型，选择正确的采集部位，以提高标本的阳性率和准确性。
采集足够量的标本，以保证检测的准确性和可靠性。
采集后的微生物标本应及时送检，避免延误诊断和治疗。
血液标本通过静脉采血或末梢采血获得，用于检测血液中的病原体和抗体等。
尿液标本通过患者自行排尿或导尿获得，用于检测泌尿系统感染等。
粪便标本通过患者自行排便或灌肠获得，用于检测肠道感染和寄生虫病等。
呼吸道标本通过鼻咽拭子、喉拭子、痰液等获得，用于检测呼吸道感染和肺部感染等。
生殖道标本通过阴道分泌物、宫颈分泌物、前列腺液等获得，用于检测生殖道感染和性传播疾病等。
其他标本如脑脊液、穿刺液、组织活检等，用于检测相应部位的感染和病变情况。
微生物标本类型及来源02临床常见微生物标本采集方法血液及骨髓标本采集建议在患者寒战或发热初起时采集，同时在使用抗生素之前采集。
成人一般选择肘静脉，新生儿和婴儿选择颈静脉或股静脉。
成人一般采集8-10ml，儿童采集3-5ml，婴儿采集1-2ml。
严格无菌操作，避免污染，同时防止溶血。
采集时间采集部位采集量注意事项一般建议清晨第一次尿，即晨尿。
微生物实验室标本处理程序
微生物实验室标本处理程序
1.目的
规范标本处理标准操作规程，
2.范围
临床微生物标本
3.职责
微生物检验人员严格执行本程序
4.程序
4. 1血液标本
接收标本后，立即对标本进行编号、登记。
门诊病人要同时登记住址、联系电话等信息。
将血培养瓶置于全自动血培养仪中培养。
4.2痰标本
4.2. 1接收编号、登记后的痰标本，加入痰消化剂或无菌生理盐水处理。
用无菌棉签挑取标本分别涂布于血琼脂平板、巧克力琼脂平板、中国蓝平板的第一区，然后用接种环划第二、第三区..…
4.2 3同时做痰涂片镜检
4.3咽拭子标本涂布于血琼脂平板、巧克力琼脂平板、麦康凯平板的第一区，然后用
接种环划第二、第三区..…
4.4脑脊液、胸腹水等穿刺液
床边抽取体液标本1〜2ml注入多功能体液培养瓶或需氧血培养瓶，即送实验室。
接收标本后，立即对标本进行编号、登记，置孵育箱培养。
脑脊液标本需涂片检查。
4.5粪便或肛拭标本
接收标本后，立即对标本进行编号、登记，取粪便脓血部位标本根据检验申请单要求选择平板，立即接种。
4.6尿标本
接收标本后，立即对标本进行编号、登记，将尿标本混匀，用10^1定量接种环立即接种血琼脂平板、中国蓝平板，分离细菌和菌落计数。
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WBC － PRO －
WBC >+ PRO >+ WBC >+ PRO >+ WBC >+ PRO >+ WBC <++*/－ PRO －
计数 < 105
计数 < 105
无泌尿系统感染
重复送检，检查取样和保存条件 是否符合要求，通知实验室为重 复检查。 预示患者泌尿系统感染。按药敏 结果选择性用药。 患者泌尿系统可能感染，但标本 可能被污染，应重复送检。 标本污染
你看见多少种形态？
呼吸道标本中未被染色的，有折射的杆菌=抗酸杆菌
呈链排列的革兰阳性球菌？或革兰阳性分枝杆菌？
肺中的结节吸出物，不规则“球菌”，分叉，无短链，链的末端的呈尖状，都 证明是分枝状的革兰阳性杆菌，可能是放线菌或诺卡菌（通常来自脑或肺组织 的标本）
呼吸道标本的涂片评估模式
肺炎-可接受的 很少的鳞状上皮细胞 <10个每低倍视野 很多的中性粒细胞 不合格标本 许多鳞状上皮 >10个/低倍视野 很少有或没有中性粒细胞 免疫抑制的病人也会出现 中性粒细胞减少 评述 可以在玻片上看到许多鳞状上皮细胞，说明在 采集时受到了上呼吸道分泌物的污染或口水的 污染。 中性粒细胞和上皮细胞都很少的标本需要培养
微生物鉴定（2）
• 奈瑟菌属、莫拉菌属 • 不动杆菌属 • 布氏杆菌属、巴斯德菌属 • 芽胞杆菌属 • 产单核李斯特菌 • 酵母菌属
药敏试验
• 纸片扩散法药敏试验 • 特殊药敏试验
MRSA 克林霉素耐药的葡萄球菌 VISA或VRSA 青霉素耐药的葡萄球菌 超广谱β-内酰胺酶
早发B群链球菌病
1%的新生儿因母亲定植 （10-30%的孕妇）发展为 EOD 50%病死率 25%的美国女性在L&D期间 得到IV预防 长期病症包括：在30%以上的 新生儿中产生严重精神运动 发展障碍
Adriaanse et al. Neonatal early onset group B streptococcal infection: a nine-year retrospective study in a tertiary care hospital. J Perinat Med. 1996;24:531–538
下呼吸道标本
Lower Respiratory Tract Specimens
下呼吸道感染
Lower Respiratory Tract Infections
急性支气管炎
社区获得性肺炎 院内获得性肺炎 免疫妥协患者肺炎
下呼吸道标本
Lower Respiratory Tract Specimen
纸片扩散法-测量抑菌圈（1）
使用透射光观察 ：
Staphylococcus spp. 葡萄球菌属 linezolid利奈唑烷 oxacillin苯唑西林 vancomycin万古霉素 任何生长均有意义 Enterococcus spp.肠球菌属 vancomycin万古霉素
Light光线
纸片扩散法-测量抑菌圈（2）
细胞内细菌
柱状纤毛上皮细胞
肺泡巨噬细胞
滑石颗粒
见于迁延长时间的呼吸道疾病
淀粉样小体
弹性纤维
库什曼螺旋体
呈链排列的革兰阳性球菌和革兰阴性球杆菌。缺乏鳞状上 皮细胞提示混合厌氧菌感染
几种细菌的混合形态，缺乏鳞状上皮细胞=混合厌氧菌感染。 如果是呼吸道标本可能是吸入性肺炎。报告临床医生“提示 吸入性肺炎”
任何人 任何人 任何人 任何人 不同人
内置导尿管
通过直接导管获得 外科手术从肾脏获得 经皮穿刺膀胱吸取 任意标本 有争议
100,000任意数量机会致病菌
100任意数量机会致病菌 任意数量（肉汤增菌，厌氧菌） 任意数量（肉汤增菌，厌氧菌） 任何数量金黄色葡萄球菌 任何数量的酵母菌
出现如下情况时，怎样判断？
导管尿
是
过夜培养
否
继续培养； 随后观察；发送初步的培养阴性报告
> 104 CFU/ml
< 104 CFU/ml
24小时后仍不生长则发出 最终的生长阴性报告
纯培养的机会致病菌 （查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释）
一种以上细菌生长
检出三种或以上的机会致病菌包括酵母菌 （病人的首份尿标本显示如此的培养结果 ，若重复的尿标本仍然培养出相同的细菌 ，则需要对菌株进行操作）
自然咳痰
诱导痰 气管内吸取物 肺部组织
支气管肺泡灌洗液 保护性毛刷
支气管灌洗液
标本质量
脓痰
粘液样痰
唾液or诱导痰 (?)
带血痰
用革兰氏染色来评估 呼吸道标本是否合格
痰标本>10鳞状上皮细胞/每低倍视野=拒收
有PMN的痰标本，中性粒细胞多，且鳞状上皮细胞特别少 = 接受，进行培养
粘液丝
胞内细菌 ——提示感染
（孕妇，婴儿，全膀胱）
微导管尿（内部导管和外部导管）-老年人
中段尿，清洁留取——急诊成年人
留置导尿管中采集的标本（经常被三种以上细菌污染）
尿液标本
采集中段尿时要先用肥皂清洗女性的外阴和男性的外
生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗
长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取尿标本。
做厌氧培养时应耻骨上膀胱穿刺采集尿。
细胞内微生物 成块的小的灰白的染色不规则的阳性成链的球菌 很细小的革兰氏阴性杆菌
微生物鉴定
微生物鉴定（1）
• • • • • • • • • •
血平皿上的菌落形态 革兰阳性细菌 所有的链球菌 β-溶血链球菌 α-溶血链球菌与肺炎链球菌 葡萄球菌属 肠道革兰阴性杆菌 沙门菌属，志贺菌属 假单胞菌属 嗜血杆菌属
1.
在孕期35～37周时的普查培养
a. b. c. d. 阴道和直肠拭子 肉汤过夜增菌 接种于血平板上 再孵育过夜和鉴定可疑菌落
2. 3.
任何有GBS菌尿的患者需要在分娩期做好预 防 分娩时快速检测敏感性不够
男性生殖道标本送检
男性的生殖道致病菌与女性绝大部分一致； 尿道炎通常由淋病奈瑟氏菌或非淋病奈瑟氏菌引起； 可能并发于生殖器溃疡；
实验室
直接检测
EQA标本
环节四
培养
环节五
培养基、冰箱 温箱、气体
分 析 中
检测 报告
仪器设备、试剂 环节六
分 析 后
对每个环节进行控制，构成质量保证体系
内 容
标本处理 微生物鉴定
药敏试验
标本处理
• 血培养 • 脑脊液培养 • 呼吸道标本 (痰标本、咽部标本） • 尿培养 • 生殖道标本培养 • 抽吸物和组织标本的培养（需氧、厌氧培养） • 粪便培养
严格无菌操作
soap
脑脊液
CEREBROSPINAL FLUID
无菌操作，腰椎穿刺采样
最少1 mL，最好>5 mL
打入3个小管中，以第二根小管送检培养 分枝杆菌培养标本需要2 mL以上，置于4℃保存 即时送检 绝对不能冷藏！
上呼吸道标本
Upper Respiratory Tract Specimens
使用反射光观察： 所有其他药物/菌株组 合
Light光线
纸片扩散法-测量抑菌圈（3）
变形杆菌属…. 忽略迁徙性生长
纸片扩散法-测量抑菌圈（4）
测量完全抑菌的圈
Linezolid 利奈唑烷
纸片扩散法-测量抑菌圈（5）
大肠埃希菌混杂有肠球菌；用纯培养 重复试验
铜绿假单胞菌耐药亚群 ；测量无 菌区域
评价尿培养的标准
病人 无症状者 有症状者，不固定的 有症状，性活跃女性 男性 标本特征 清洁留取 清洁留取 清洁留取 清洁留取 有意义菌落形成单位/ml（非皮肤污染） 100,000 10,000 1-2种机会致病菌。若多于2种则认为尿 液被污染 100个纯菌落肠杆菌科菌 1000个，机会致病菌
任何人
鉴定&药敏
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清 洁标本
1-2种机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的以上相同注释
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛； 重新采集清洁标本.
进行鉴定和药敏，若数量< 104CFU/ml， 仍然对可能的致病菌进行操作
若为腐生葡萄球菌， 则处理与其他致病菌相同； 其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污 染
临床微生物室标本处理及检验流程
Infection Control Team
The Role of the Clinical Bacteriology Lab
临床微生物检验流程示意
分 析 前
门诊 病房 诊所
不合格
留取
临床标本
SOP
环节一 环节二 环节三
+
SOP
运送
合格
IQ
标本合格 判定
标本合格？ 接种
尿液运输方法
如不能及时送检，需冷藏。
4小时延迟送检，须废弃标本。
自然排尿 是 过夜培养 否
继续培养； 随后观察；发送初步的培养阴性报告
> 105 CFU/ml
< 105 CFU/ml
24小时后仍不生长则发出 最终的生长阴性报告
纯培养的机会致病菌 （查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释）
1 organism 一种以上细菌生长
拭子吸附细菌，难于释放到平板培养 尽可能抽吸或将拭子深入伤口，紧贴伤口前沿取样深部 伤口和特殊原因造成的伤口，如动物咬伤，应考虑厌氧培 养；
组织和抽吸物涂片检查
发现 出现鳞状上皮细胞 大量的中性粒细胞 大量的中性粒细胞染色多样染色阳性和阴性，小的细 菌 出现少量破碎的中性粒细胞和比较大的面包车样的染 色不定的杆菌 很少有中性粒细胞，但是有其他体细胞 评述 提示标本采集技术不过关；培养出来的可能是 皮肤正常菌群 如果查见细胞内的细菌，则更有意义。 混合有厌氧或兼性厌氧菌感染 可能是梭菌引起的组织坏死，紧急外科手术， 产气荚膜梭菌引起的气性坏疽 患者不能产生足够的免疫反应或微生物不能趋 化中性粒细胞（如球菌）。仍然高度怀疑细菌 病因。 细菌感染 如果分离自脓肿，提示咽峡炎链球菌（米勒链 球菌）感染。 特别是从淋巴结或组织中分离的，可能是生物 恐怖试剂（布鲁氏杆菌，耶尔森，弗朗西斯） 要在风厨中操作。平板用胶条密封在生物安全 柜中操作，不可以嗅标本。