细菌生长繁殖与培养共41页
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微生物生长与繁殖
回本第31章页 目录
4.酸碱度
种类
细菌和放 线菌
最低生长 pH
5.0
最适生长 pH
7.0~8.0
最高生长 pH
10.
酵母菌
2.5
3.8~6.0
8.0
霉菌
微生物生长与繁殖
1.5
3.0~6.0
10.0
回本第32章页 目录
5.氧化还原电势 6.盐、碱和金属离子
对好氧菌影响较 大。
影响渗透压
微量金属离子对 微生物生命活动 有着主要作用。
微生物生长与繁殖
回本第45章页 目录
3.连续培养
连续培养：在一个恒定容积流动系 统中培养微生物，首先以一定速率不停 地加入新培养基，另首先又以相同速率 流出培养物(菌体和代谢产物)，以使培养 系统中细胞数量和营养状态保持稳定。
微生物生长与繁殖
回本第46章页 目录
微生物生长与繁殖
回本第47章页 目录
湿重或干重
（四）比浊法
依据菌体悬浊液透光度间接测量菌体数量。 使用光电比色计或分光光度计。
（五）生理指标法
测定呼吸强度、耗氧量、酶活性及生物热进行换算。
微生物生长与繁殖
回本第13章页 目录
第二节 微生物生长规律
微生物生长与繁殖
回本第14章页 目录
把一定微生物接种到一定液体
培养基中后，在一定条件下培养，
若是一个平衡生长，即各细胞组分是按恰当百 分比增加时，到达一定程度后就会发生繁殖。 从而引发个体数目标增加。伴随群体中各个个 体深入生长，就引发这一群体生长。
微生物生长与繁殖
回本第3页章目录
个体生长 → 个体繁殖 → 群体生长 群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖
实验四微生物的菌落形态观察平板菌落计数及菌种保藏(张理珉)
（保守估计只有1%）； 证据来源有两方面——分子生物学的探索； 和原位培养的比较。
当前第3页\共有70页\编于星期四\17点
实验内容一
——微生物菌落形态观察及区分
当前第4页\共有70页\编于星期四\17点
一、微生物的形态和菌落特征的比较表
单细胞微生物
细菌
酵母菌
菌 主落 要 特 征细
胞
含水状态 外观形态 相互关系 形态特征
当前第19页\共有70页\编于星期四\17点
实验内容二
——从分离平板上挑取单菌落
当前第20页\共有70页\编于星期四\17点
▪ 挑取细菌单菌落接种于牛肉膏蛋白 胨培养基斜面上——接种环
▪ 挑取放线菌单菌落接种于高氏1号培 养基斜面上——接种环、接种钩
▪ 挑取霉菌单菌落接种于马丁氏培养基 斜面上——接种环、接种钩
比值小于2，应采取两者的平均数；若大于2，则 取其中稀释度(倍数)较小的计算菌落总数（见下 表，例2及例3）。
当前第39页\共有70页\编于星期四\17点
4、若所有稀释度的平均菌落数均大于300， 则应按稀释度(倍数)最高的平均菌落数乘以稀释 倍数（见下表，例4）。
5、若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则 应按稀释度(倍数)最低的平均菌落数乘以稀释倍 数（见下表，例5）。
适用具有特殊生理功能的类群——存在但不 能人工培养形成单菌落，可以利用生化手段检 测出；利用统计学原理计算，结果粗放，只能 得到数量级（近似数）。
当前第27页\共有70页\编于星期四\17点
（3）菌体浊度的测定（只针对单细胞微生 物）； 利用分光光度计在600nm测定吸光度值。
（4）细胞干重和湿重的测定（有时湿重以 体积计量）；
当前第11页\共有70页\编于星期四\17点
当前第3页\共有70页\编于星期四\17点
实验内容一
——微生物菌落形态观察及区分
当前第4页\共有70页\编于星期四\17点
一、微生物的形态和菌落特征的比较表
单细胞微生物
细菌
酵母菌
菌 主落 要 特 征细
胞
含水状态 外观形态 相互关系 形态特征
当前第19页\共有70页\编于星期四\17点
实验内容二
——从分离平板上挑取单菌落
当前第20页\共有70页\编于星期四\17点
▪ 挑取细菌单菌落接种于牛肉膏蛋白 胨培养基斜面上——接种环
▪ 挑取放线菌单菌落接种于高氏1号培 养基斜面上——接种环、接种钩
▪ 挑取霉菌单菌落接种于马丁氏培养基 斜面上——接种环、接种钩
比值小于2，应采取两者的平均数；若大于2，则 取其中稀释度(倍数)较小的计算菌落总数（见下 表，例2及例3）。
当前第39页\共有70页\编于星期四\17点
4、若所有稀释度的平均菌落数均大于300， 则应按稀释度(倍数)最高的平均菌落数乘以稀释 倍数（见下表，例4）。
5、若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则 应按稀释度(倍数)最低的平均菌落数乘以稀释倍 数（见下表，例5）。
适用具有特殊生理功能的类群——存在但不 能人工培养形成单菌落，可以利用生化手段检 测出；利用统计学原理计算，结果粗放，只能 得到数量级（近似数）。
当前第27页\共有70页\编于星期四\17点
（3）菌体浊度的测定（只针对单细胞微生 物）； 利用分光光度计在600nm测定吸光度值。
（4）细胞干重和湿重的测定（有时湿重以 体积计量）；
当前第11页\共有70页\编于星期四\17点
微生物的生长繁殖和其控制
▪环境条件诱导法
氯霉素抑制蛋白合成；细菌芽孢发芽；藻类细胞光照黑 暗控制；EDTA或离子载体处理酵母菌；短期热休克(40度)
微生物的生长繁殖和其控制
第14页
A
同 步 培 养 方 法
微生物的生长繁殖和其控制
B
A：膜洗脱法 B：密度梯度离心
第15页
二、单细胞微生物经典生长曲线
▪定量描绘液体培养基中微生物群体生长规律试验曲线。 ▪经典生长曲线
同时生长Synchronous Growth：
经过同时培养使细胞群体处于分裂步调一致状态。 同时生长只能维持2-3个分裂周期(细胞个体差异)。
微生物的生长繁殖和其控制
第13页
取得同时生长方法
▪机械筛选法 ✓利用处于同一生长阶段细胞体积、大小一致性 ✓过滤法 ✓密度梯度离心 ✓膜洗脱法：硝酸纤维薄膜
2.1 专性好氧微生物
•必须在较高分子氧浓度下才能生长，含有完整呼吸链、
以分子氧为最终氢受体，含有SOD和过氧化氢酶活力。
•绝大多数真菌和许多细菌 •试验室经过震荡摇瓶给氧，工厂采取通入无菌空气和
搅拌等供氧
微生物的生长繁殖和其控制
第44页
2.2 兼性厌氧菌
▪Facultative anaerobe
✓合成代谢十分活跃
✓对外界不良条件反应敏感
微生物的生长繁殖和其控制
第18页
影响延滞期长短原因
▪菌种
细菌、酵母菌延滞期较短，霉菌次之， 放线菌最长
▪接种龄 ▪接种量大小 ▪培养基成份
微生物的生长繁殖和其控制
第19页
2、指数期exponential phase
▪特点
✓生长速率常数R最大，代时或倍增时间最短
G=(t2-t1)/n
氯霉素抑制蛋白合成；细菌芽孢发芽；藻类细胞光照黑 暗控制；EDTA或离子载体处理酵母菌；短期热休克(40度)
微生物的生长繁殖和其控制
第14页
A
同 步 培 养 方 法
微生物的生长繁殖和其控制
B
A：膜洗脱法 B：密度梯度离心
第15页
二、单细胞微生物经典生长曲线
▪定量描绘液体培养基中微生物群体生长规律试验曲线。 ▪经典生长曲线
同时生长Synchronous Growth：
经过同时培养使细胞群体处于分裂步调一致状态。 同时生长只能维持2-3个分裂周期(细胞个体差异)。
微生物的生长繁殖和其控制
第13页
取得同时生长方法
▪机械筛选法 ✓利用处于同一生长阶段细胞体积、大小一致性 ✓过滤法 ✓密度梯度离心 ✓膜洗脱法：硝酸纤维薄膜
2.1 专性好氧微生物
•必须在较高分子氧浓度下才能生长，含有完整呼吸链、
以分子氧为最终氢受体，含有SOD和过氧化氢酶活力。
•绝大多数真菌和许多细菌 •试验室经过震荡摇瓶给氧，工厂采取通入无菌空气和
搅拌等供氧
微生物的生长繁殖和其控制
第44页
2.2 兼性厌氧菌
▪Facultative anaerobe
✓合成代谢十分活跃
✓对外界不良条件反应敏感
微生物的生长繁殖和其控制
第18页
影响延滞期长短原因
▪菌种
细菌、酵母菌延滞期较短，霉菌次之， 放线菌最长
▪接种龄 ▪接种量大小 ▪培养基成份
微生物的生长繁殖和其控制
第19页
2、指数期exponential phase
▪特点
✓生长速率常数R最大，代时或倍增时间最短
G=(t2-t1)/n
微生物生长
细菌的生长曲线：将少量细菌接种到一定体积的 新鲜液体培养基中进行分批培养，定时取样，以细菌 数目的对数为纵坐标，培养时间为横坐标，可绘制出 细菌的生长曲线。
第28页/共72页
生长曲线可分： 停滞期 对数期 静止期 衰亡期
第29页/共72页
第30页/共72页
1、停滞期（迟滞期或适应期）（lag phase）: 将细菌接种到某一培养基后，细菌并不立即繁
以生物量为指标测定微生物的生长
比浊法
在一定波长下，测定菌悬液的光密 度，以光密度(optical density, 即 O.D.) 表示菌量。
实验测量时应控制在菌浓度与 光密度 成正比的线性范围内，否则不 准确。
第13页/共72页
5.比浊法
第14页/共72页
（二） 测定活菌数
1、液体稀释培养基计数： 将待测样品作连续10倍稀释，一直稀释到稀释液的少量接种到
10-4
10 -5
与温热液态固体培养基
混合冷却。
第三步：培养
每一个细菌会生成一个 菌落
稀 释 度 可以计数 过 低 ， ，但数量 菌 落 密 过多，费 集 无 法 时费力 计数
数量合 数 量 太 少 适，统 ， 误 差 因 计计算， 素 太 大 ， 作为结 不做计数 果
第17页/共72页
一般计数平板的细菌生长菌落数以30~300个为 宜。 平
第22页/共72页
2、薄膜计数法：如果测定量大而含菌浓度很低的样品 （如空气、水）中的活菌数，可将样品用微孔薄膜 （硝化纤维素薄膜）过滤，再与膜一起放到培养基或 浸透培养液支持物表面培养。
第23页/共72页
膜过滤培养法
当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样 品通过膜过滤器，然后将将膜转到相应的培养基上进行培养，对形 成的菌落进行统计。
第28页/共72页
生长曲线可分： 停滞期 对数期 静止期 衰亡期
第29页/共72页
第30页/共72页
1、停滞期（迟滞期或适应期）（lag phase）: 将细菌接种到某一培养基后，细菌并不立即繁
以生物量为指标测定微生物的生长
比浊法
在一定波长下，测定菌悬液的光密 度，以光密度(optical density, 即 O.D.) 表示菌量。
实验测量时应控制在菌浓度与 光密度 成正比的线性范围内，否则不 准确。
第13页/共72页
5.比浊法
第14页/共72页
（二） 测定活菌数
1、液体稀释培养基计数： 将待测样品作连续10倍稀释，一直稀释到稀释液的少量接种到
10-4
10 -5
与温热液态固体培养基
混合冷却。
第三步：培养
每一个细菌会生成一个 菌落
稀 释 度 可以计数 过 低 ， ，但数量 菌 落 密 过多，费 集 无 法 时费力 计数
数量合 数 量 太 少 适，统 ， 误 差 因 计计算， 素 太 大 ， 作为结 不做计数 果
第17页/共72页
一般计数平板的细菌生长菌落数以30~300个为 宜。 平
第22页/共72页
2、薄膜计数法：如果测定量大而含菌浓度很低的样品 （如空气、水）中的活菌数，可将样品用微孔薄膜 （硝化纤维素薄膜）过滤，再与膜一起放到培养基或 浸透培养液支持物表面培养。
第23页/共72页
膜过滤培养法
当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样 品通过膜过滤器，然后将将膜转到相应的培养基上进行培养，对形 成的菌落进行统计。
细菌的生理学
在高等生物里这两个过程能够显著分开，但在低等尤其 是在单细胞生物中，因为细胞小，这两个过程是紧密联
络又极难划分过程。
细菌的生理学
第25页
一个微生物细胞
适当外界条件，吸收营养物质，进行代谢 假如同化作用速度超出了异化作用
个体生长 原生质总量（重量、体积、大小）就不停增加
假如各细胞组分是按恰当百分比增加时，则到达一 定程度后就会发生繁殖，引发个体数目标增加。
营养吸收和代谢
细菌的生理学
第8页
三、细菌摄取营养物质机制
被动扩散 主动运转系统
细菌的生理学
第9页
1.被动扩散
单纯扩散 是一个最简单物质交换方式。细胞 膜两侧物质靠浓度差(浓度梯度)进行分子扩散，不 需要能量。此种方式无特异性或选择性，细胞内外 溶质浓度平衡时，扩散便停顿，不是物质运输主要 方式。如02、水、乙醇等。
细菌的生理学
第12页
单纯扩散与促进扩散比较
细菌的生理学
第13页
2．主动运输(Active transport)
主动运输是广泛存在于微生物中一个主要物质运 输方式。
细菌的生理学
第14页
（1）依赖于周浆间隙结合蛋白转运系统 （periplasmic-binding protein-dependent transport system）:
基本内容
细菌理化性状 细菌营养与生长繁殖 细菌新陈代谢和能量转换 细菌人工培养 细菌分类
细菌的生理学
第1页
第一节 细菌理化性状
一、细菌化学组成
成份
水、无机盐、蛋白质、糖类、脂质、核酸
元素
碳、氢、氧、氮、磷、硫
特有化学组成
肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、D型氨基酸、二氨基庚二酸、吡 啶二羧酸等
微生物农药
第二十一页，共41页。
4.5 原生动物杀虫剂
蝗虫微孢子虫（Nosema locustae）： 是目前唯一商 品化的原生动物杀虫剂，可以防治草原蝗虫，可使亚洲 小车蝗、宽须蚁蝗、白边痂蝗和皱膝蝗。
特点：既能在短时期内迅速压低虫口密度，又能引 起流行病，达到长期控制种群的目的。
昆虫病原斯氏属（Steinernema）和异小杆属 （Heterhabditis）线虫是目前国际上新型的生物杀虫剂。
白僵菌的分生孢子粉致病力强，不污染环境，易 于培养(péiyǎng)生产。白僵菌对多种农林害虫具有致 死作用，大面积用于防治第十九页松，共41毛页。 虫、玉米螟和水稻叶蝉
4.3.2 绿僵菌
金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)分类上属于 丛梗孢科，主要用于防治地下害虫、天牛、飞蝗(fēi huánɡ)、蚊幼虫等。另外，对蛴螬亦有明显的防治效 果，表现出较好的开发利用前景。
阿维菌素是十六元 大环内酯类抗生素
第十四页，共41页。
R1
R2
阿维菌素 A1a
Me
阿维菌素 A1b
Me
阿维菌素 A2a
Me
阿维菌素 A2b
Me
阿维菌素 B1a
H
阿维菌素 B1b
H
阿维菌素 B2a
H
阿维菌素 B2b
H
阿维菌素的结构
第十五页，共41页。
目标昆虫： 阿维菌素对螨类、线虫和昆虫有很高的杀虫活性，其中包括鳞 翅目、鞘翅目、半翅目、双翅目、膜翅目和同翅目等有害农作物 昆虫。
4.6.1食线虫真菌 是植物寄生线虫生物防治中极其有用(yǒu yònɡ)的生物资源。
1978年，法国的Cayrol用粗状节丛成功防治双孢蘑菌丝孢线虫 （Ditylenchus myceliophagus）
4.5 原生动物杀虫剂
蝗虫微孢子虫（Nosema locustae）： 是目前唯一商 品化的原生动物杀虫剂，可以防治草原蝗虫，可使亚洲 小车蝗、宽须蚁蝗、白边痂蝗和皱膝蝗。
特点：既能在短时期内迅速压低虫口密度，又能引 起流行病，达到长期控制种群的目的。
昆虫病原斯氏属（Steinernema）和异小杆属 （Heterhabditis）线虫是目前国际上新型的生物杀虫剂。
白僵菌的分生孢子粉致病力强，不污染环境，易 于培养(péiyǎng)生产。白僵菌对多种农林害虫具有致 死作用，大面积用于防治第十九页松，共41毛页。 虫、玉米螟和水稻叶蝉
4.3.2 绿僵菌
金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)分类上属于 丛梗孢科，主要用于防治地下害虫、天牛、飞蝗(fēi huánɡ)、蚊幼虫等。另外，对蛴螬亦有明显的防治效 果，表现出较好的开发利用前景。
阿维菌素是十六元 大环内酯类抗生素
第十四页，共41页。
R1
R2
阿维菌素 A1a
Me
阿维菌素 A1b
Me
阿维菌素 A2a
Me
阿维菌素 A2b
Me
阿维菌素 B1a
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阿维菌素 B1b
H
阿维菌素 B2a
H
阿维菌素 B2b
H
阿维菌素的结构
第十五页，共41页。
目标昆虫： 阿维菌素对螨类、线虫和昆虫有很高的杀虫活性，其中包括鳞 翅目、鞘翅目、半翅目、双翅目、膜翅目和同翅目等有害农作物 昆虫。
4.6.1食线虫真菌 是植物寄生线虫生物防治中极其有用(yǒu yònɡ)的生物资源。
1978年，法国的Cayrol用粗状节丛成功防治双孢蘑菌丝孢线虫 （Ditylenchus myceliophagus）
2---1-微生物的实验室培养
化碳、渗透压等的要求。
第6页，共48页。
典例精析 2015·广元期中不同的微生物对营养物质的需要各不相
同。下列有关一种以 CO2 为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不 正确的是( )
A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B．碳源物质也是该微生物的能源物质 C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D．水是该微生物的营养要素之一
第11页，共48页。
菌落
细菌的菌落特征因 种而异
第12页，共48页。
常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法： 1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min； 2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或
80℃下煮15min；
3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔
灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源； 4、紫外线消毒；
第3页，共48页。
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
第4页，共48页。
沉淀生长
固体培养基：菌落，菌苔
第5页，共48页。
2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方。
3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和 氮源、无机盐等营养物质，另外还需要满足微生 物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细 菌生长必需，而自身不能合成的化合物，如维生 素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧
内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）的过程。
2.灭菌： 用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物（包括
芽孢和孢子），而达到完全无菌之过程。
灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也 是最重要的技术。
第9页，共48页。
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽 孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例
第6页，共48页。
典例精析 2015·广元期中不同的微生物对营养物质的需要各不相
同。下列有关一种以 CO2 为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不 正确的是( )
A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B．碳源物质也是该微生物的能源物质 C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D．水是该微生物的营养要素之一
第11页，共48页。
菌落
细菌的菌落特征因 种而异
第12页，共48页。
常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法： 1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min； 2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或
80℃下煮15min；
3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔
灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源； 4、紫外线消毒；
第3页，共48页。
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
第4页，共48页。
沉淀生长
固体培养基：菌落，菌苔
第5页，共48页。
2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方。
3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和 氮源、无机盐等营养物质，另外还需要满足微生 物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细 菌生长必需，而自身不能合成的化合物，如维生 素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧
内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）的过程。
2.灭菌： 用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物（包括
芽孢和孢子），而达到完全无菌之过程。
灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也 是最重要的技术。
第9页，共48页。
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽 孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例
微生物的纯培养生长曲线及繁殖演示文稿
单个的微生物组成的群体。
微生物接种是群体接种，接种后的生长是微生物群体繁殖生长。
对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础
第19页，共112页。
第二节 细菌的群体生长繁殖 一、生长曲线
生长曲线(Growth Curve)：
细菌接种到定量的液体培养基中，定时取样测定细胞数量， 以培养时间为横座标，以菌数的对数为纵座标作图，得到的一条反映细菌在 整个培养期间菌数变化规律的曲线。
细菌代谢活性降低，细菌衰老并出现自溶，产生或释放出一些产物 ，如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。细胞呈现多种形态，有 时产生畸形，细胞大小悬殊，有些革兰氏染色反应阳性菌变成阴性 反应等。
该时期死亡的细菌以对数方式增加，但在衰亡期的后期，由于部分 细菌产生抗性也会使细菌死亡的速率降低，仍有部分活菌存在。
培养过程中不断的补充营养物质和以同样的速率移出培养物是 实现微生物连续培养的基本原则。
第42页，共112页。
二、连续培养
第二节 细菌的群体生长繁殖
控制连续培养的方法
恒浊连续培养
不断调节流速而使细菌培养液浊度保持恒定
恒化连续培养
第29页，共112页。
t1 – t0
G = ——————
n
(t1 – t0 )
= ————————————
3.322(lgNt-lgN0)
第30页，共112页。
影响微生物增代时间（代时）的因素：
1）菌种，不同的微生物及微生物的不同菌株代时不同；
2）营养成分，在营养丰富的培养基中生长代时短 3）营养物浓度，在一定范围内，生长速率与营养物浓度呈正比，
活菌计数：
采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数
第15页，共112页。
微生物接种是群体接种，接种后的生长是微生物群体繁殖生长。
对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础
第19页，共112页。
第二节 细菌的群体生长繁殖 一、生长曲线
生长曲线(Growth Curve)：
细菌接种到定量的液体培养基中，定时取样测定细胞数量， 以培养时间为横座标，以菌数的对数为纵座标作图，得到的一条反映细菌在 整个培养期间菌数变化规律的曲线。
细菌代谢活性降低，细菌衰老并出现自溶，产生或释放出一些产物 ，如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。细胞呈现多种形态，有 时产生畸形，细胞大小悬殊，有些革兰氏染色反应阳性菌变成阴性 反应等。
该时期死亡的细菌以对数方式增加，但在衰亡期的后期，由于部分 细菌产生抗性也会使细菌死亡的速率降低，仍有部分活菌存在。
培养过程中不断的补充营养物质和以同样的速率移出培养物是 实现微生物连续培养的基本原则。
第42页，共112页。
二、连续培养
第二节 细菌的群体生长繁殖
控制连续培养的方法
恒浊连续培养
不断调节流速而使细菌培养液浊度保持恒定
恒化连续培养
第29页，共112页。
t1 – t0
G = ——————
n
(t1 – t0 )
= ————————————
3.322(lgNt-lgN0)
第30页，共112页。
影响微生物增代时间（代时）的因素：
1）菌种，不同的微生物及微生物的不同菌株代时不同；
2）营养成分，在营养丰富的培养基中生长代时短 3）营养物浓度，在一定范围内，生长速率与营养物浓度呈正比，
活菌计数：
采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数
第15页，共112页。
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皮肽
葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌 丙酸杆菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
尿道
白色葡萄球菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
肠道
大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌 绿脓杆菌、葡萄球菌、厌氧性细 菌 真菌、乳杆菌，双歧杆菌等
正常菌群
正常人体的体表及与外界相通的腔 道中，存在着不同种类、数量和比例的 微生物。这些微生物在正常情况下对人 体无害称正常微生物群又称正常菌群。
查细菌的动力
（3）细菌在固体培养基中的生长现象
菌落：把细菌接种到固体培养基表面，一般经 37℃， 18～24小时培养，单个细菌就可以生长繁殖成肉眼可见细 菌集团，称之。不同细菌形成的菌落大小、形状、颜色不同， 即菌落特征，有利于鉴别细菌种类
细菌在各种培养基上的生长现象
人工培养基在医学领域中的应用
鼻咽腔 外耳道 眼结膜 胃 肠道
尿道 阴道
葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、类杆菌 葡萄球菌、类白喉杆菌、铜绿假单胞菌、非致病性分枝杆菌 葡萄球菌、干燥棒状杆菌、奈瑟菌
一般无菌 大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、葡萄球菌、粪链球菌、类 杆菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌、双歧杆菌、真细菌、乳杆菌、白假丝酵 母菌 葡萄球菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌 乳杆菌、大肠杆菌、类白喉杆菌、白假丝酵母菌
b)毒素 毒素是病原菌合成的对机体有毒害作用的物质，有内毒 素和外毒素两种。
c)侵袭性酶 某些细菌产生的能增强侵袭力的胞外酶。
（2）与治疗疾病有关的合成代谢产物
a) 抗生素 由某些微生物产生的，并能抑制或杀灭其他微生物 的物质称为抗生素。 广泛应用于感染性疾病的治疗。
b)维生素 某些细菌合成的维生素除供自身需要外，还可分泌 到细菌体外。如人体肠道的大肠埃希菌能合成B族维生素和 维生素K，供人体吸收利用。
（3）与鉴别细菌有关的代谢产物
a)色素 是细菌产生的有色物质。如金黄色葡萄球菌产生非水 溶性金黄色色素如铜绿假单胞菌产生水溶性绿色色素，在细 菌鉴别上有一定的意义。
b)细菌素 某些细菌可产生仅对有亲缘关系的细菌具有抗菌作 用的蛋白质或蛋白质与脂多糖的复合物，成为细菌素。
第4节 细菌的遗传与变异
1.细菌的常见变异现象
❖ 1 感染性疾病的病原学诊断和治疗 ❖ 2 细菌学研究 ❖ 3 生物制品的制备 ❖ 4 基因工程
第3节 细菌新陈代谢 1. 细菌的分解代谢产物及其临床意义
（1）
（2）
2.细菌的合成代谢产物及其意义
（1）与致病有关的合成代谢产物
a)热原质 细菌在代谢过程中产生的一种多糖，注入人和动物体 内能引起发热反应，故名热原质。多由革兰阴性菌产生，热原 质耐高温，不被高压蒸气灭菌（121℃ 30min）所破坏，常 通过滤过或吸附除去液体中大部分热原质，蒸馏法效果最好。
学习目的
1.掌握细菌生长繁殖的条件； 2.掌握细菌与医学相关的合成代谢 产物及其意义； 3.了解细菌的遗传与变异；
（一）
2.
1
2
细菌的生长曲线
迟缓期 对数期 稳定期 衰退期
活 菌 数 的 对 数
培养时间
（二） 细菌的人工培养
1．人工培养的意义 （1）传染病的诊断与治疗 （2）生物制品的制备 （3）细菌的鉴定与研究 2．培养基
眼结膜
白色葡萄球菌、干燥杆菌
人 体 内 正 常 菌 群 的 分 布
阴道
大肠杆菌、乳杆菌 白念珠菌、类白喉杆菌
非致病性分枝等
外耳道
葡萄球菌、类白喉杆菌 绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌
鼻咽腔
葡萄球菌、甲，丙型链球菌 肺炎球菌、奈氏菌、类杆菌等
表皮葡萄球菌 口腔
甲，丙型链球菌 类白喉杆菌、肺炎球菌 奈氏菌、乳杆菌、梭杆菌 螺旋体、放线菌、白念珠菌
用途及影响因素。 5、了解医院感染的概念。
细菌的分布
❖细菌在自然界的分布
土壤中的细菌 水中的细菌 空气中的细菌
❖细菌在正常人体的Байду номын сангаас布
正常菌群的概念及意义
人体常见的正常菌群
部位 主要菌类
皮肤 口腔
葡萄球菌 、类白 喉杆菌 、铜绿 假单胞 菌、非 致病性分 枝杆菌、 丙酸杆菌 、白 假丝酵母菌
葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、乳杆菌、类白喉棒状 杆菌、梭菌、放线菌、螺旋体
是由适合于细菌生存的各种营养物质配制而成的营养基质。 按用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选 择培养基和厌氧培养基等。 按物理性状可分为液体、固体和半固体培养基。在液体培 养基中加入一定量的凝固剂（多为琼脂）即成为固体或半固 体培养基。
3．细菌在培养基中的生长现象
（1）细菌在液体培养基中的生长现象
3. 注射液中出现哪种现象说明被细菌污染？ ()
A．沉淀 B.絮状物 C.混浊 D.菌膜 E.以上都是
三、 简答题 细菌有哪些合成代谢产物？与致病性和医药有关的各是哪
些？
第3节 细菌与外界环境
❖ 学习目标 1、简述细菌在自然界和正常人体的分布状况。 2、列出常用的热力消毒灭菌法及适用范围。 3、分析紫外线的杀菌原理、作用、特点及应用。 4、概述常用化学消毒剂的浓度、作用机制、
（1） 形态结构变异 ： 指细菌的形态结构在某些因素影响下发生的变异。
（2）菌落变异：S->R （3）毒力变异 ：
指细菌在一定条件下毒力的减弱或增强。 如卡介苗(BCG) （4） 耐药性变异 ： 指细菌对某一抗菌药物由敏感变为有抵抗力。
基因变异在医学实践上的意义
❖1 用来诊断疾病 ❖2 疾病治疗 ❖3 疾病预防 ❖4 基因工程方面
不同细菌在液体培养基中生长繁殖可出现均 匀混浊、沉淀和形成菌膜三种现象，临床应用 的澄清透明的注射液若发现上述任何一种现象， 均表明已被细菌污染，禁止使用。
（2） 细菌在半固体培 养基中的生长现象 经常用于做动力试验：
即将细菌穿刺接种于半 固体培养基中，经培养 后，无鞭毛的细菌沿穿 刺线生长，穿刺线清晰； 有鞭毛的细菌则沿穿刺 线向周围扩散生长，穿 刺线模糊不清，用于检
目标检测
一、 名词解释
耐药性变异
二、 选择题
1．多数细菌生长繁殖的最适pH是（ ）
A．pH 7.2~7.6 C．pH 8.0~8.8
B．pH 6.5~6.8 D．pH 4.4~4.6
E．pH 5~6
2．细菌生长繁殖的条件不包括（ ）
A．丰富的营养物质 C．合适的温度 E．充足的光线
B．必要的气体环境 D．合适的酸碱度
葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌 丙酸杆菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
尿道
白色葡萄球菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
肠道
大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌 绿脓杆菌、葡萄球菌、厌氧性细 菌 真菌、乳杆菌，双歧杆菌等
正常菌群
正常人体的体表及与外界相通的腔 道中，存在着不同种类、数量和比例的 微生物。这些微生物在正常情况下对人 体无害称正常微生物群又称正常菌群。
查细菌的动力
（3）细菌在固体培养基中的生长现象
菌落：把细菌接种到固体培养基表面，一般经 37℃， 18～24小时培养，单个细菌就可以生长繁殖成肉眼可见细 菌集团，称之。不同细菌形成的菌落大小、形状、颜色不同， 即菌落特征，有利于鉴别细菌种类
细菌在各种培养基上的生长现象
人工培养基在医学领域中的应用
鼻咽腔 外耳道 眼结膜 胃 肠道
尿道 阴道
葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、类杆菌 葡萄球菌、类白喉杆菌、铜绿假单胞菌、非致病性分枝杆菌 葡萄球菌、干燥棒状杆菌、奈瑟菌
一般无菌 大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、葡萄球菌、粪链球菌、类 杆菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌、双歧杆菌、真细菌、乳杆菌、白假丝酵 母菌 葡萄球菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌 乳杆菌、大肠杆菌、类白喉杆菌、白假丝酵母菌
b)毒素 毒素是病原菌合成的对机体有毒害作用的物质，有内毒 素和外毒素两种。
c)侵袭性酶 某些细菌产生的能增强侵袭力的胞外酶。
（2）与治疗疾病有关的合成代谢产物
a) 抗生素 由某些微生物产生的，并能抑制或杀灭其他微生物 的物质称为抗生素。 广泛应用于感染性疾病的治疗。
b)维生素 某些细菌合成的维生素除供自身需要外，还可分泌 到细菌体外。如人体肠道的大肠埃希菌能合成B族维生素和 维生素K，供人体吸收利用。
（3）与鉴别细菌有关的代谢产物
a)色素 是细菌产生的有色物质。如金黄色葡萄球菌产生非水 溶性金黄色色素如铜绿假单胞菌产生水溶性绿色色素，在细 菌鉴别上有一定的意义。
b)细菌素 某些细菌可产生仅对有亲缘关系的细菌具有抗菌作 用的蛋白质或蛋白质与脂多糖的复合物，成为细菌素。
第4节 细菌的遗传与变异
1.细菌的常见变异现象
❖ 1 感染性疾病的病原学诊断和治疗 ❖ 2 细菌学研究 ❖ 3 生物制品的制备 ❖ 4 基因工程
第3节 细菌新陈代谢 1. 细菌的分解代谢产物及其临床意义
（1）
（2）
2.细菌的合成代谢产物及其意义
（1）与致病有关的合成代谢产物
a)热原质 细菌在代谢过程中产生的一种多糖，注入人和动物体 内能引起发热反应，故名热原质。多由革兰阴性菌产生，热原 质耐高温，不被高压蒸气灭菌（121℃ 30min）所破坏，常 通过滤过或吸附除去液体中大部分热原质，蒸馏法效果最好。
学习目的
1.掌握细菌生长繁殖的条件； 2.掌握细菌与医学相关的合成代谢 产物及其意义； 3.了解细菌的遗传与变异；
（一）
2.
1
2
细菌的生长曲线
迟缓期 对数期 稳定期 衰退期
活 菌 数 的 对 数
培养时间
（二） 细菌的人工培养
1．人工培养的意义 （1）传染病的诊断与治疗 （2）生物制品的制备 （3）细菌的鉴定与研究 2．培养基
眼结膜
白色葡萄球菌、干燥杆菌
人 体 内 正 常 菌 群 的 分 布
阴道
大肠杆菌、乳杆菌 白念珠菌、类白喉杆菌
非致病性分枝等
外耳道
葡萄球菌、类白喉杆菌 绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌
鼻咽腔
葡萄球菌、甲，丙型链球菌 肺炎球菌、奈氏菌、类杆菌等
表皮葡萄球菌 口腔
甲，丙型链球菌 类白喉杆菌、肺炎球菌 奈氏菌、乳杆菌、梭杆菌 螺旋体、放线菌、白念珠菌
用途及影响因素。 5、了解医院感染的概念。
细菌的分布
❖细菌在自然界的分布
土壤中的细菌 水中的细菌 空气中的细菌
❖细菌在正常人体的Байду номын сангаас布
正常菌群的概念及意义
人体常见的正常菌群
部位 主要菌类
皮肤 口腔
葡萄球菌 、类白 喉杆菌 、铜绿 假单胞 菌、非 致病性分 枝杆菌、 丙酸杆菌 、白 假丝酵母菌
葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、乳杆菌、类白喉棒状 杆菌、梭菌、放线菌、螺旋体
是由适合于细菌生存的各种营养物质配制而成的营养基质。 按用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选 择培养基和厌氧培养基等。 按物理性状可分为液体、固体和半固体培养基。在液体培 养基中加入一定量的凝固剂（多为琼脂）即成为固体或半固 体培养基。
3．细菌在培养基中的生长现象
（1）细菌在液体培养基中的生长现象
3. 注射液中出现哪种现象说明被细菌污染？ ()
A．沉淀 B.絮状物 C.混浊 D.菌膜 E.以上都是
三、 简答题 细菌有哪些合成代谢产物？与致病性和医药有关的各是哪
些？
第3节 细菌与外界环境
❖ 学习目标 1、简述细菌在自然界和正常人体的分布状况。 2、列出常用的热力消毒灭菌法及适用范围。 3、分析紫外线的杀菌原理、作用、特点及应用。 4、概述常用化学消毒剂的浓度、作用机制、
（1） 形态结构变异 ： 指细菌的形态结构在某些因素影响下发生的变异。
（2）菌落变异：S->R （3）毒力变异 ：
指细菌在一定条件下毒力的减弱或增强。 如卡介苗(BCG) （4） 耐药性变异 ： 指细菌对某一抗菌药物由敏感变为有抵抗力。
基因变异在医学实践上的意义
❖1 用来诊断疾病 ❖2 疾病治疗 ❖3 疾病预防 ❖4 基因工程方面
不同细菌在液体培养基中生长繁殖可出现均 匀混浊、沉淀和形成菌膜三种现象，临床应用 的澄清透明的注射液若发现上述任何一种现象， 均表明已被细菌污染，禁止使用。
（2） 细菌在半固体培 养基中的生长现象 经常用于做动力试验：
即将细菌穿刺接种于半 固体培养基中，经培养 后，无鞭毛的细菌沿穿 刺线生长，穿刺线清晰； 有鞭毛的细菌则沿穿刺 线向周围扩散生长，穿 刺线模糊不清，用于检
目标检测
一、 名词解释
耐药性变异
二、 选择题
1．多数细菌生长繁殖的最适pH是（ ）
A．pH 7.2~7.6 C．pH 8.0~8.8
B．pH 6.5~6.8 D．pH 4.4~4.6
E．pH 5~6
2．细菌生长繁殖的条件不包括（ ）
A．丰富的营养物质 C．合适的温度 E．充足的光线
B．必要的气体环境 D．合适的酸碱度