2020年全国卫生专业技术资格考试《临床医学检验学中级职称考试》考点手册-第一篇至第三篇(圣才出品)

第一篇临床检验基础

第一单元血液样本采集和血涂片制备

第一节血液生理概要

血液的组成及生理功能（掌握）

1．组成：血液由血细胞（红细胞、白细胞、血小板）和血浆组成。血清与血浆相比，血清缺少一部分凝血因子，如Ⅰ（纤维蛋白原）、Ⅱ（凝血酶原）、Ⅴ、Ⅷ等凝血因子。

2．血液性质：

（1）血量：血浆占55%，血细胞占比45%。

（2）酸碱度：pH7.35～7.45。

（3）血浆渗透压：290～310mOsm（kg·H2O）。

（4）健康成年人全血黏度为生理盐水的4～5倍。

（5）比密：1.050～1.060，男性：1.055～1.063；女性：1.051～1.060。

3．生理功能：运输功能、协调功能、维护机体内环境稳定和防御功能。

4．血液特性：红细胞的悬浮稳定性、黏滞性、凝固性。

第二节采血方法和采血管选择

采血方法（掌握）

1．静脉采血法：成年人静脉采血常选肘部静脉（压脉带捆绑不超过1分钟）。

2．真空采血法：真空采血法是一种新的静脉采血法，又称负压采血法。真空采血装置有套筒式、头皮静脉式两种。

3．皮肤采血法：通常选择耳垂或手指部位。WHO推荐血常规检查采集左手无名指指端内侧血液，婴幼儿可选择大拇趾或足跟内外侧缘血液，严重烧伤患者可选择皮肤完整处。

方法评价：真空采血法是ICSH推荐的采血方法，也是临床常用的采血方法。

第三节抗凝剂选择

常见抗凝剂原理及其用途（熟练掌握）

表1-1-1常用抗凝剂比较

第四节血液涂片制备

血涂片的制备（掌握）

1．手工推片法：涂片时，推片与载玻片保持25°～30°夹角。

2．厚血膜涂片法：临床上常用厚血膜法检查疟原虫与微丝蚴。

3．良好血涂片标准：厚薄适宜、头体尾分明、细胞分布均匀、血膜边缘整齐、两侧有一定空隙、血膜占玻片的2/3。

4．方法学评价：手工推片法用血量少、操作简单，是应用最广泛的方法。此外，疟原虫、微丝蚴等检查可采用厚血膜涂片法。

5．质量控制：血细胞比容增高，血液黏度较高时，应小血滴、小角度、慢推，反之亦然。新载玻片必须用1mol/L的盐酸清洗后才能使用。

第五节血液细胞染色

考点一、瑞氏染色（掌握）

瑞氏染色是血涂片最常用、最经典的染色方法，对细胞质和颗粒染色效果好。

1．染液组成：碱性亚甲蓝、酸性伊红、甲醇（作为溶剂及固定细胞形态）。

2．原理：物理吸附和化学亲和作用。

3．染色效果：最适pH为6.4～6.8。若缓冲液偏酸，则红细胞和嗜酸性粒细胞偏红，细胞核呈淡蓝色或不着色。若缓冲液偏碱，细胞染色染成灰蓝色，颗粒深暗；嗜酸性粒细胞可染成暗褐色，甚至棕黑色；中性颗粒偏粗，染成紫黑色。

4．注意事项：（1）在距玻片另一端2cm处结束涂抹为宜；（2）血涂片上有染料颗粒沉积，可滴加甲醇，然后立即用流水冲洗；（3）染色过淡，可复染，复染时先加缓冲液再加染液；（4）新鲜配制的染液染色效果差，应贮存一段时间，时间越久，染色效果好。

考点二、吉姆萨染色（掌握）

吉姆萨染色对细胞核和寄生虫着色较好。

1．染液组成：天青、伊红、甲醇、纯甘油。

2．原理：同瑞氏染色。

记忆方法：血红蛋白，嗜酸性颗粒（碱性蛋白质）：具有嗜酸性——伊红结合；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质（酸性蛋白质）：具有嗜碱性——亚甲蓝结合。

第二单元红细胞检测

第一节概要

红细胞生理（掌握）

红细胞（RBC）是血液中数量最多的细胞成分，成熟RBC的平均寿命为120天、白细

胞与血小板7～14天，衰老的RBC主要在脾破坏。

第二节红细胞计数

红细胞（RBC）计数（掌握）

1．红细胞计数常用稀释液

（1）Hayem稀释液：由NaCl（调节渗透压）、Na2SO4（提高比重防止细胞粘连）、HgCl2（防腐）和蒸馏水组成；

（2）枸橼酸钠稀释液：由NaCl（调节渗透压）、枸橼酸钠（抗凝作用）、甲醛（防腐）及蒸馏水组成。

2．牛鲍计数板计数RBC

（1）计数公式：红细胞/L＝N×25/5×10×200×106＝N（5个中方格的RBC总数）/100×1012。

（2）牛鲍计数板：中央5个中方格是红细胞和血小板计数区域，四角的4个大方格是白胞计数区域。

3．参考值：成年人：男性4.0～5.5×1012/L；女性3.5～5.0×1012/L；新生儿6～7×1012/L。

4．临床意义

（1）生理变化：①新生儿、精神刺激、剧烈运动、气压减低可导致红细胞增多；②妊娠期妇女和老年人红细胞常减低。

（2）病理变化：①急慢性失血、红细胞寿命缩短，造血原料不足，骨髓造血功能减退可引起贫血，造成红细胞（或血红蛋白）减少；②红细胞增多症、心血管疾病、肺部疾病、

呕吐、严重腹泻、大面积烧伤以及某些药物均可引起RBC增多。

第三节血红蛋白测定

血红蛋白（Hb）测定（掌握）

1．检测原理

（1）氰化高铁血红蛋白（HiCN）测定法：血液中除硫化血红蛋白（SHb）外的各种Hb均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白，在540nm处测定吸光度，再换算得到Hb的浓度。

（2）十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS）测定法：血液中SHb外的各种Hb均可与低浓度SDS形成棕红色化合物，在538nm处测定吸光度，再换算得到Hb的浓度。评价：HiCN 是目前国际推荐的参考方法，致命缺点是氰化钾有剧毒，SDS是次选方法。

（3）血红蛋白成分：HbA：α2β2，占95%，含量最多；HbF：α2γ2，胎儿血红蛋白，占1%；HbA2：α2σ2，占2%～3%。

2．参考值：成年人：男性120～160g/L；女性110～150g/L。新生儿：170～200g/L。

3．临床意义：Hb和RBC临床意义相似，但在临床判断贫血程度上，Hb测定优于RBC 计数。

4．HiCN法测定注意事项

（1）HiCN转化液应贮存在棕色有塞玻璃瓶中（不能用塑料瓶）；

（2）氰化钾有剧毒，测定后的废液应收集于广口容器中，稀释后加次氯酸钠混匀，敞开容器放置15小时以上再排入下水道；

（3）废液不能与酸性溶液混合，避免产生剧毒气体。