分光光度计
可见分光光度计使用方法
可见分光光度计使用方法分光光度计是一种常用的实验仪器，用于测定溶液中物质的浓度，其原理是利用光的吸收和透射特性来测定溶液中物质的浓度。
下面介绍可见分光光度计的使用方法。
一、仪器准备1.开启分光光度计电源，确保仪器处于工作状态。
2.打开分光光度计条纹盖，并将溶液架放置在样品室上方。
3.打开分光光度计软件，并连接至计算机。
二、调整仪器1.调整参考光路径a.点击软件界面上的“参考”按钮，将光杆放置在溶液架上的空槽中。
b.调节光杆高度，使其与溶液架平齐。
c.点击软件界面上的“参考”按钮，将光杆移至参考槽中，然后点击“参考”。
2.调整样品光路径a.点击软件界面上的“样品”按钮，将光杆放置在溶液架上的空槽中。
b.在参考槽中加入去离子水，并将光杆放置在参考槽中。
c.点击软件界面上的“样品”按钮，将光杆移至样品槽中。
三、测量样品1.设置波长a.在软件界面上的波长选择栏中选择所需测量的波长。
b.点击软件界面上的“确定”按钮，确认波长设置。
2.校准基准值a.点击软件界面上的“样品”按钮，将光杆放入样品槽中。
b.在样品槽中加入去离子水，并将光杆放入样品槽中。
c.点击软件界面上的“校正”按钮，校正基准值。
3.测量样品a.将待测样品加入样品槽中，确保溶液填满槽。
b.将光杆放入样品槽中，避免气泡影响测量。
c.点击软件界面上的“测量”按钮，开始测量样品。
四、数据处理1.记录吸光度值a.在测量完成后，软件界面上会显示吸光度测量值。
b.记录并保存测量结果。
2.绘制标准曲线a.准备一系列已知浓度的标准溶液。
b.依次测量这些标准溶液，并记录吸光度值。
c.利用已知浓度和相应吸光度值绘制标准曲线。
3.计算未知浓度a.测量未知样品的吸光度值。
b.根据标准曲线，找到相应吸光度值对应的浓度。
c.计算得到未知样品的浓度。
五、结束测量1.关闭分光光度计软件。
2.将光杆从样品槽中取出，并将样品架取下。
3.关闭分光光度计电源。
以上就是可见分光光度计的使用方法，希望能对您有所帮助。
分光光度计
基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法，称为吸光光度法。
根据物质对不同波长范围的光的吸收，吸光光度法包括比色分析，可见与紫外分光光度法以及红外吸收光谱分析等。
包括比色分析和分光光度法的吸光光度法（简称光度法），历史悠久，应用十分广泛。
它是现代分析化学中的“ 常规武器” 。
其主要特点为：1 、灵敏度高：与滴定分析和重量法相比，光度法具有很高的灵敏度，测定物质的浓度下限（最低浓度）一般可达10-5～10-6 mol?L-1，相当于含量低于0.01 ～0.001 ％的微量组分。
2 、准确度较高：分光光度法的相对误差一般为2 ～5 ％，但对微量组分的测定是允许的。
例如测定试样中含量为0.02 ％的杂质，即使相对误差为±5 ％，则测定的结果为0.019 ～0.021 ％，这样的结果应该认为是很准确的。
3 、操作简便、快速、应用广泛：比色分析和分光光度法无需复杂，昂贵的仪器设备，操作也比较简便，分析速度快。
例如钢铁中Mn 、P 、Si 三元素的快速比色分析，一般在 3 －4min 内可报出结果。
几乎所有无机离子和许多有机化合物都可直接或间接地用光度法测定。
本章主要讨论比色分析和可见光区的吸光光度法。
1 物质对光的选择性吸收1.1 光的基本性质比色分析和分光光度法的依据是物质对光的选择性吸收。
为此，必须对光的基本性质有所了解。
我们知道，光是一种电磁辐射，具有波动性和微粒性。
光在传播时表现了它的波动性，例如光的折射、衍射、偏振和干涉等现象。
描述波动性的主要物理量是波长（λ ）、频率（ν ）和速度（с ），它们的关系是：λν ＝с式中с 为光速，在真空中约等于3×108 m ·s-1；ν 为光的频率，以Hz 表示；λ 为光的波长，在紫外和可见光区，以纳米（1nm=10-9 m ）为单位。
波长在400 ～760 nm 范围内的电磁辐射，人眼可以看见，称为可见光；波长在10 ～400 nm 是紫外光区。
分光光度计使用方法
分光光度计使用方法一、仪器准备1.打开分光光度计电源，并等待仪器进行自检和初始化。
2.根据需要选择合适的波长范围，并设置好光源的强度。
二、校准1.使用空白试剂（比如去离子水）进行校准。
2.将空白试剂放入样品池中，关闭池盖，通过界面上的按钮选择“空白”模式。
3.调节光源的强度，使得光学通道中没有样品的情况下，检测到的光强度为基准值。
三、样品处理1.准备好带有试剂的样品，将样品移至样品池或比色皿中。
2.确保所有试剂和样品都处于相同的温度和搅拌状态下。
3.注意避免样品与池壁或污染物接触，以免影响测量结果。
四、测量1.将样品池或比色皿插入光度计的样品槽中，并关闭池盖。
2.通过界面上的按钮选择所需测量的波长。
3.选择测量模式，通常有吸光度测量和浓度测量两种模式。
根据实际需求选择。
-吸光度测量模式：用于直接测量样品的光吸收情况，通常用于检测样品的纯度或含量检测。
-浓度测量模式：通过预先建立吸光度与浓度的标准曲线，来计算样品的浓度。
五、数据处理1.根据测量所得的吸光度值和浓度标准曲线，计算出样品的浓度。
2.将结果记录并保存，可以在计算机上进行进一步的数据分析和绘图。
六、维护和保养1.定期清洁光度计的样品槽，以确保准确测量。
2.注意定期校准仪器，校准周期可根据实验室标准进行调整。
总结：分光光度计是一种非常常用的实验仪器，可以用于各种领域的分析检测。
使用分光光度计时，需要准备好试剂和样品，并正确设置仪器的波长范围和光源强度。
在进行测量前需要进行校准，并注意样品的处理和池壁的清洁。
通过选择合适的测量模式和数据处理方法，可以得到准确的浓度或吸光度值。
使用完成后，需要定期进行维护和保养，以保证仪器的正常工作和准确性。
分光光度计
分光光度计一．分光光度计基本结构简介能从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离出来并测量其强度的仪器称为分光光度计。
分光光度计因使用的波长范围不同而分为紫外光区、可见光区、红外光区以及万用（全波段）分光光度计等。
无论哪一类分光光度计都由下列五部分组成，即光源、单色器、狭缝、样品池，检测器系统。
（1）光源要求能提供所需波长范围的连续光谱，稳定而有足够的强度。
常用的有白炽灯（钨比灯、卤钨灯等），气体放电灯（氢灯、氘灯及氙灯等），金属弧灯（各种汞灯）等多种。
钨灯和卤钨灯发射320－2000nm连续光谱，最适宜工作范围为360－1000nm，稳定性好，用作可见光分光光度计的光源。
氢灯和氘灯能发射150－400nm的紫外结，可用作紫外光区分光光度计的光源。
红外线光源则由纳恩斯特（Nernst）棒产生，此棒由ＺrＯ2:Ｙ2Ｏ3=17:3（Ｚr为锆，Ｙ为钇）或Ｙ2Ｏ3，ＧeＯ2（Ｇe为铈）及ＴhＯ2（Ｔh为钍）之混合物制成。
汞灯发射的不是连续光谱，能量绝大部分集中在253.6nm波长外，一般作波长校正用。
钨灯在出现灯管发黑时应及更换，如换用的灯型号不同，还需要调节灯座的位置的焦距。
氢粘及氘灯的灯管或窗口是石英的，且有固定的发射方向，安装时必须仔细校正接触灯管时应戴手套以防留下污迹。
（2）分光系统（单色器）单色器是指能从混合光波中分解出来所需单一波长光的装置，由棱镜或光栅构成。
用玻璃制成的棱镜色散力强，但只能在可见光区工作，石棱镜工作波长范围为185￣4000nm，在紫外区有较好的分辩力而且也适用于可见光区和近红外区。
棱镜的特点是波长越短，色散程度越好，越向长波一侧越差。
所以用棱镜的分光光度计，其波长刻度在紫外区可达到0.2nm，而在长波段只能达到5nm。
有的分光光系统是衍射光栅，即在石英或玻璃的表面上刻划许多平行线，刻线处不透光，于是通过光的干涉和衍射现象，较长的光波偏折的角度大，较短的光波偏折的角度小，因而形成光谱。
分光光度计名词解释
分光光度计名词解释
分光光度计是一种用于测量样品吸光度的仪器。
它利用可见光和紫外光等电磁波的原理，将光束分为不同波长，通过样品后，再通过检测器进行测量。
在分光光度计中，有许多名词需要解释。
首先是“吸光度”。
吸光度是指物质在光的作用下所吸收的光的量。
当我们通过分光光度计测量一个样品的吸光度时，其数值与样品中所含化学物质的浓度成正比。
其次是“波长”。
波长是指光的振动周期，通常用纳米（nm）为单位表示。
分光光度计可以选择不同波长的光来检测样品的吸光度，从而得到各种物质的分析结果。
另一个重要的名词是“光栅”。
光栅是一种光学元件，可以将白光分为不同颜色的光谱，同时可以选择特定波长的光进行检测。
分光光度计通常采用光栅来进行波长选择。
最后是“检测器”。
检测器是用于测量样品通过后的光强度的元件。
分光光度计通常采用光电二极管（photodiode）或光电倍增管（photomultiplier tube）等检测器。
综上所述，分光光度计是一种基于光学原理，用于测量样品吸光度的
仪器，其中涉及到许多关键的名词和元件。
它被广泛应用于化学、生物、制药等领域，是一种不可或缺的分析工具。
分光光度计
操作简便
测色分光度仪的使用注意事项
※进行校正（使用时要校正，还要定期校正） 波长标尺的校正：使用钕谱滤片对波长进行校正 光度标尺的校正：使用标准溶液或标准白板进行校正
（4-8小时校正一次） ※仪器的测量精度：要从色度和光度两方面来衡量 ※至少测量四次取平均值 ※按要求经常校正仪器
分光光度计在印刷中应用
②分光光度计光路简图
分光光度计跟眼睛不同，眼睛是 同时在感受的全部波长上评价接 受的光能，而反射曲线的测量必 须逐波长地进行。这就必须把光 源的光在各个波长上进行分解， 这既可以在照射样本之前分解成 单色光，也可以在从样本上反射 之后进行分解。几乎所有的新型 仪器都按后一种方式工作，只有 这样才能对具有荧光性质的样本 进行正确的测量。
分光光度定义
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一 定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定 量分析。 针对各个单色光进行度量
测色分光光度仪并不是直接测量颜色样品的三刺激值， 而是测量物体的光谱反射率或透射率再通过计算进而 得到三刺激值X、Y、Z及色差等颜色数据.
分光光度计的特点
测量物体的光谱反射或光谱透射特性，并不直接测量颜色的 三刺激值。选用CIE标准照明体和标准观察者，通过积分计算 求得颜色的三刺激值。
1 利用标准样品获得各单 色光的入射光能量 2 测量待测样品对各单 色光的反射光能量 3 计算样品的光谱反射 率并计k
100
S y
Z k S()z
式中: S 为照明体的光谱功率分布,为被测物体的光谱反射率, x y z 为标准观察者光谱三刺激值
满足条件：
分光光度计
金蒋 玉柳 婷敏
1、分光光度计
2、分光光度计的原理 3、分光光度计的用法
分光光度计
2.2.3 物质吸光度（A）与透射比（T）的关系 物质吸光度（ ）与透射比（ ）
为经过空白校正后入射光的强度； 为透过光的强度。 设 I0 为经过空白校正后入射光的强度；I 为透过光的强度。 根据实验得知 I = I0 ·10－εc l
式中， 表示吸收物质的摩尔浓度； 表示吸收物质的光径， 式中，c 表示吸收物质的摩尔浓度；l 表示吸收物质的光径， 表示； 表示吸收物质的摩尔消光系数 表示吸收物质的摩尔消光系数， 用 cm表示； ε表示吸收物质的摩尔消光系数， 它表示物质对光的 表示 吸收特性，不同物质的ε数值不同。 所以 数值不同。 吸收特性，不同物质的 数值不同 令 T（透射比） = I / I 0 （透射比） T = 10－εcl I / I0 = 10－εc l
检测器--检测器 光电倍增管
光电倍增管 它比普通的光 电管优越， 电管优越，它可将第一次发射出 的电子数目放大到数百万倍 。 当电子打在兼性阳极上时， 当电子打在兼性阳极上时，能引 起更多的电子自表面射出。 起更多的电子自表面射出。这些 射出的电子又被第二个兼性阳极 所吸引，同样再产生更多的电子。 所吸引，同样再产生更多的电子。
2.5 显色反应及其影响因素 显 色 反 应
显色 色 色反
显色反应
色
及
显色反应
其 影
显色
响 因 素
影响显色 反应因素
反应 反应 显色反应 影响 pH
2.5.1 显色反应一般要求
（1）选择性好：显色剂最好只与一种被测组分起显色反应； ）选择性好：显色剂最好只与一种被测组分起显色反应； （2）灵敏度高：灵敏度高有笪微量组分的测定； ）灵敏度高：灵敏度高有笪微量组分的测定； （3）有色化合物性质稳定：确保前后测定准确。 ）有色化合物性质稳定：确保前后测定准确。 （4）显色剂与有色物颜色反差大：两者最大吸收波长之差应 ）显色剂与有色物颜色反差大： 大于60nm； 大于 ； （5）显色反应要易于控制：结果的确保实验再现性。 ）显色反应要易于控制：结果的确保实验再现性。
分光光度计的使用方法
分光光度计的使用方法
分光光度计是一种实验室常用的仪器，用于测量溶液或气体的吸光度或透光度。
下面是分光光度计的使用方法。
1. 准备工作：
(1) 确保分光光度计已接通电源并预热至稳定状态。
(2) 校准光度计，使用已知浓度的标准溶液进行校准，确保
仪器准确度。
2. 准备样品：
(1) 准备待测样品，通常以溶液的形式存在。
如果需要测量
气体，需要将气体溶解或将光通过气体进行测量。
(2) 如果样品浓度较高，可以将其稀释至合适的浓度范围内，以避免出现过高的吸光度。
3. 调整仪器：
(1) 打开光程腔盖，确保光程腔内没有灰尘或杂质。
(2) 将光程腔盖关闭，并调整光程腔宽度，通常为1厘米。
(3) 根据实验需要选择合适的波长，并将仪器调整至该波长。
4. 设置基线：
(1) 选择空白试剂，如去离子水或溶剂，将其放入光程腔中。
(2) 将仪器调零，即设置光度计读数为零。
5. 测量样品：
(1) 将样品放入光程腔中，确保光通过样品。
(2) 记录光度计读数。
(3) 如果需要测量多个波长，则重复以上步骤。
6. 清洗仪器：
(1) 测量结束后，将样品取出并清洗光程腔。
(2) 关闭仪器并关闭电源。
以上就是分光光度计的使用方法。
使用时注意根据实际情况进行操作，并严格遵守操作规程，以确保实验结果的准确性。
分光光度计的种类以及适用范围
分光光度计的种类以及适用范围分光光度计是一种常用的光学仪器，用于测量物质溶液或气体中的光吸收或透过性。
根据其工作原理和适用范围的不同，可以分为紫外可见分光光度计、红外分光光度计和荧光光度计等多种类型。
1. 紫外可见分光光度计紫外可见分光光度计是最常见的一种分光光度计，用于测量可见光和近紫外光范围内的光吸收。
它可以测量溶液或气体中的物质浓度、反应速率等参数。
紫外可见分光光度计广泛应用于化学、生物、制药、环境监测等领域。
2. 红外分光光度计红外分光光度计主要用于测量红外光谱范围内的吸收。
红外光谱对于研究分子结构和化学键的性质非常重要。
红外分光光度计在有机化学、材料科学、环境监测等领域有着广泛的应用。
3. 荧光光度计荧光光度计是一种专门用于测量物质荧光性质的仪器。
荧光是物质在受到激发后发射出的特定波长的光，荧光光度计可以测量物质的荧光强度、寿命等参数。
荧光光度计在生物学、生物化学、医学等领域广泛应用，常用于DNA分析、蛋白质定量、细胞荧光成像等实验研究。
4. 偏振光分光光度计偏振光分光光度计可以测量物质对偏振光的吸收、透过和散射特性。
偏振光分光光度计在材料科学、液晶显示、生物医学等领域有着重要应用，可以用于分析材料的光学特性、研究液晶分子的取向行为等问题。
5. 激光光度计激光光度计是一种专门用于测量激光光谱的仪器。
激光光度计可以测量激光的功率、波长、光束质量等参数，广泛应用于激光器性能测试、激光光谱分析、激光器研发等领域。
分光光度计具有高灵敏度、高分辨率、广泛的测量范围和可靠的性能等优点，被广泛应用于科学研究、工业生产和环境监测等领域。
不同类型的分光光度计适用于不同的光谱范围和测量需求，可以满足不同领域的实验要求。
在实际应用中，根据需要选择合适的分光光度计类型，可以提高实验的准确性和效率。
分光光度计是一种重要的光学仪器，有着广泛的应用领域和多种类型。
不同类型的分光光度计适用于不同的光谱范围和测量需求，可以满足科学研究、工业生产和环境监测等领域的实验要求。
分光光度计基本原理
分光光度计基本原理分光光度计是一种用于测量物质浓度的仪器，它基于光的吸收原理，通过测量样品溶液对特定波长的光的吸收程度来确定样品中特定物质的浓度。
分光光度计的基本原理是将可见光或紫外光通过样品溶液，然后测量透过样品的光强度和未经样品的光强度之间的差异。
分光光度计的主要组成部分包括光源、单色器、样品室、检测器和信号处理器。
光源通常是一种白炽灯或氙气灯，它会发出连续的光谱，包括可见光和紫外光。
单色器的作用是将光源发出的连续光谱分解成单一波长的光线，以便进行测量。
单色器通常采用光栅或棱镜，它们可以将光线分散成不同波长的光线，并将所需波长的光线聚焦到样品室中。
样品室是分光光度计中最重要的部分之一，它是用于容纳样品溶液的容器。
样品室通常是一个长方形的玻璃或石英室，它的两端都有光学窗口，以便光线可以透过样品。
样品室中的样品溶液会吸收特定波长的光线，因此透过样品的光线强度会减弱。
检测器的作用是测量透过样品的光线强度和未经样品的光线强度之间的差异。
检测器通常是一个光电二极管或光电倍增管，它可以将光信号转换成电信号，并将其发送到信号处理器中进行处理。
信号处理器是分光光度计中的最后一个组成部分，它的作用是将检测器输出的电信号转换成可读的数字信号，并计算出样品中特定物质的浓度。
信号处理器通常是一个微处理器或计算机，它可以根据预先设定的标准曲线计算出样品中特定物质的浓度。
分光光度计的使用非常广泛，它可以用于测量水中污染物、食品中的添加剂、药品中的成分等。
分光光度计的优点是测量精度高、灵敏度高、可靠性高、操作简单、使用方便。
但是，分光光度计也有一些缺点，例如需要标准曲线、对样品的透明度要求高、对光源的稳定性要求高等。
分光光度计是一种非常重要的分析仪器，它基于光的吸收原理，可以测量样品中特定物质的浓度。
分光光度计的基本原理是将可见光或紫外光通过样品溶液，然后测量透过样品的光强度和未经样品的光强度之间的差异。
分光光度计的主要组成部分包括光源、单色器、样品室、检测器和信号处理器。
分光光度计的使用方法
分光光度计的使用方法分光光度计是一种用于测量物质溶液中特定化合物浓度的仪器。
它通过测量样品溶液对特定波长的光的吸收和透射来确定溶液中特定化合物的浓度。
以下是分光光度计的使用方法：1. 打开分光光度计，并确定所需的波长。
通常可以通过仪器上的旋钮或按钮来选择波长，或者通过输入波长来调节。
根据所需的测量物质选择适合的波长，因为每种物质在不同的波长下具有不同的吸收特性。
2. 做空白校正。
将分光光度计设置为所需的波长，并将净化水或溶剂添加到样品室中，然后将其作为空白参照。
这样可以消除仪器和试剂的吸收和散射。
3. 准备溶液。
将待测溶液分别加入两个试管中，分别作为样品和参考。
确保样品和参考中的试剂和浓度相同，以便比较它们的吸收。
4. 将参考试管放入分光光度计的参考槽中，然后将样品试管放入样品槽中。
确保试管的透明面完全与仪器的光源对准，以确保准确的读数。
5. 读取吸光度。
启动分光光度计，然后将样品的吸光度读数记录下来。
吸光度是指样品溶液吸收光的能力。
通常，空白校正吸光度值为零，因此通过减去空白吸光度可以得到纯净的样品吸光度。
6. 计算浓度。
使用所选的标准曲线或校准曲线，将样品的吸光度值转化为浓度。
标准曲线是一系列已知浓度的标准样品吸光度值，通过比较样品吸光度与标准曲线上的对应点，可以得到样品的浓度。
7. 清洗分光光度计。
在测量结束后，将仪器上的试管、样品槽和参考槽清洗干净，以防止交叉污染和反应残留。
总结：分光光度计的使用方法包括选择波长，空白校正，准备溶液，放置样品和参考试管，读取吸光度，计算浓度和清洗仪器。
这些步骤可以保证分光光度计的准确和可靠的测量结果。
分光光度计的种类
分光光度计的种类1. UV-Vis分光光度计（UV-Visible Spectrophotometer）UV-Vis分光光度计可用于测量物质在紫外光和可见光范围内的吸光度。
这种光度计在许多领域中得到广泛应用，如生物化学、分析化学、环境监测等。
它的工作原理是通过向待测溶液中通过的光线的吸收来测量溶液的吸光度，并将其转换为浓度或物质浓度。
2. 红外分光光度计（Infrared Spectrophotometer）红外分光光度计可用于测量物质在红外光谱范围内的吸光度。
这种光度计可用于分析有机物、化学成分的鉴定和溶剂的测定。
红外分光光度计通过测量待测物质与红外光的相互作用来测量吸光度。
3. 荧光分光光度计（Fluorescence Spectrophotometer）荧光分光光度计可用于测量物质在受激发后发射的荧光光谱。
荧光光谱是物质特异性的，并且可以用于定量和定性分析。
这种光度计可广泛应用于生物医学和药物研究，如细胞标记、药物代谢研究等。
4. 原子吸收光度计（Atomic Absorption Spectrophotometer）原子吸收光度计是一种专门用于测量元素浓度的仪器。
它基于原子光谱中元素特定吸收波长的原理。
原子吸收光度计可用于测定土壤、环境和食品中的微量金属元素。
它在环境科学、食品安全检测等领域中得到广泛应用。
5. 循环扫描光度计（Cyclic Scanning Spectrophotometer）循环扫描光度计是一种用于研究材料吸光度随波长变化的仪器。
它通过连续扫描不同波长范围内的吸光度，生成吸光度随波长变化的光谱图像。
循环扫描光度计可用于研究材料的光学特性、反应动力学等。
6. 共振光散射光度计（Resonance Light Scattering Spectrophotometer）共振光散射光度计是一种利用物质在特定波长下的散射性质进行定量分析的仪器。
它可用于分析高分子物质的浓度和分子量等。
分光光度计
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双光束分光光度计 经单色器分光后经反射镜分解为强度相等的两束光，一束通 过参比池，一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度，此比值即为试样的 透射比，经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。 双光束分光光 度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和样品池， 还能自动消除光源强度变化所引起的误差。 双波长分光光度计 由同一光源发出的光被分成两束，分别经过两个单色器，得 到两束不同波长1和2 的单色光；利用切光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸 收池，然后经过光电倍增管和电子控制系统，最后由显示器显示出两个波长处的吸 光度差值。对于多组分混合物、混浊试样（如生物组织液）分析，以及存在背景干 扰或共存组分吸收干扰的情况下，利用双波长分光光度法，往往能提高方法的灵敏 度和选择性。利用双波长分光光度计，能获得导数光谱。
六、紫外可见分光光度计的分析及应用
紫外可见分光光度计的定性分析 物质吸收不同波长的光的特性只与溶液中物质的结构有关，而与溶液的浓度无关不同的 物质，所得的吸收光谱曲线各不相同。因此，在分光光度法中，将吸收光谱曲线作为定性的依 据。 紫外可见分光光度计在定性分析上的应用
1,.用吸收谱图推测化合物的结构
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二、、不同类型分光光度计的特点
荧光分光光度计 荧光分光光度计的优缺点；
1.灵敏度高
个数量级。 2.定性更可靠
检测限可达10-10～10－12g/ml,比紫外可见分光光度法低3～4
荧光物质具有激发光谱和发射光光谱，可提供荧光强度、
荧光效率、荧光寿命、等多种物理参数，特征性强，较单一图谱定性更为可靠。 3.干扰因素较多 对试剂、环境等实验条件要求严格，测量精密度较差。 能产生荧光的物质相对较少，但许
分光光度计的种类
分光光度计的种类
1.双波长分光光度计：双波长分光光度计是最常见的分光光度计类型
之一，其主要特点是可以同时测量两个不同波长的光的吸光度。
这种光度
计常用于测量两种有关联的物质的含量，例如测量其中一种物质在一些固
定波长下的浓度，同时检测其它物质在不同波长下的吸收情况。
2.单波长分光光度计：单波长分光光度计是一种较为简单的光度计类型，它只能在一个固定波长下测量吸光度。
这种类型的光度计适用于需要
快速测量一些特定化合物浓度的情况。
3.可见光分光光度计：可见光分光光度计适用于在可见光范围内进行
吸光度测量。
它通常由可见光照射源、光栅、光谱器和检测器等部分组成，可以被用于分析可见光吸收、反射和透过样品的情况。
4.紫外-可见分光光度计：紫外-可见分光光度计是一种可以同时测量
紫外光和可见光的光度计。
它在分析化学、生物化学、环境科学等领域中
被广泛应用，可以用于测量有机和无机化合物的质量、浓度等性质。
5.荧光分光光度计：荧光分光光度计是一种可以测量荧光强度和荧光
光谱的仪器。
它在荧光检测、药物研究、生物学研究等领域中得到广泛应用。
6.傅里叶变换红外光谱仪（FTIR）：FTIR是一种可以测量物质吸收
红外光谱的光度计。
它在有机化学、高分子材料、制药等行业中被广泛使用。
除了以上常见的分光光度计类型，还有一些特殊用途的光度计，如石
英荧光分光光度计、旋光光度计等。
这些分光光度计类型在各自的应用领
域中有特殊的功能和优点。
分光光度计使用原理及操作方法
分光光度计使用原理及操作方法分光光度计使用原理及操作方法一、分光光度计的原理分光光度计是一种测量样品溶液中吸收或透射光强的仪器。
它的基本原理是通过将可见光或紫外光通过样品溶液后，测量出光强的变化，从而得知样品溶液中物质的浓度或其他性质。
分光光度计的原理可以分为下面几个步骤：1. 光源发射：分光光度计通常使用可见光或紫外光作为光源。
这些光经过滤波器减少杂散光，通过准直系统形成平行光束。
2. 样品测量：经过准直系统形成的平行光束通过样品溶液，样品中吸收或透射一部分光。
被吸收的光与未经样品的光进行比较，通过这种比较可以得到吸光度或透光度。
3. 光电传感器检测：被吸收或透射后的光通过光电传感器检测并转化为电信号。
光电传感器常用的有光电二极管或光电倍增管。
4. 信号处理和显示：光电传感器转化的电信号经过放大和滤波处理后，通过计算机或显示器显示出吸光度或透光度的数值。
二、分光光度计的操作方法1. 准备工作：在使用分光光度计之前，需要进行准备工作。
这包括检查仪器是否处于正常工作状态，校准仪器的零点，确认样品槽或比色皿是否清洁干净。
2. 设定波长：根据需要测量的物质，设定合适的波长。
分光光度计通常具有可以选择波长的旋钮或按钮，通过旋转或按键来设定所需的波长。
3. 参比校正：为了确保测量结果的准确性，需要进行参比校正。
这可以通过将参比溶液放入样品槽，并记录下参比物质的吸光度或透光度值。
然后将样品溶液放入样品槽中进行测量。
4. 测量样品：将待测样品溶液放入样品槽中，确保溶液填满槽，并将样品槽放入分光光度计中。
根据需要选择透射模式或吸收模式，开始测量。
5. 记录和分析：根据测量结果记录样品的吸光度或透光度值。
可以根据所测得的数值进行进一步的数据分析和计算。
6. 清洁操作：在使用完毕后，及时清洁分光光度计的样品槽和其他部件，以确保下次使用时的准确性和可靠性。
三、注意事项1. 避免阳光直射：分光光度计的使用需要避免阳光直射，以免影响测量的准确性。
分光光度计的操作方法
分光光度计的操作方法
1.准备工作：
-打开光源开关，预热分光光度计，一般需要预热10-15分钟。
-将分光光度计的光程调节控制旋钮调至最小位置。
-准备样品溶液。
2.调零：
-提前调零是为了保证准确测量样品的吸光度值。
将纯溶剂（作为空白）倒入比色皿中，将比色皿放置于分光光度计的样品槽中。
-打开分光光度计，调节光程旋钮，直到显示屏的数值稳定在0附近。
-可选择"调零"按钮进行自动调零。
3.设置波长：
-根据需要的波长，选择合适的滤光片或进入光纤。
-打开分光光度计，使用波长调节旋钮设置所需的波长。
波长调节旋
钮上通常有独立的目录盘，可直接选择波长。
-调节波长时，观察光束的响应，当显示屏上的数值稳定后即可。
4.测量样品吸光度：
-将样品溶液倒入比色皿，并将其放入样品槽中。
-关闭样品槽盖，并调节光程旋钮，直到显示屏上的数值稳定。
-将样品槽中的溶液吸光度读数记录下来，这个数值即为样品的吸光度。
-执行上述操作之前，最好将比色皿和样品槽进行清洁和干燥，以避
免外界因素对读数的干扰。
5.计算结果：
-根据测得的吸光度值，结合吸光度对应的摩尔吸光度，使用贝尔-朗
伯定律计算物质的浓度。
6.注意事项：
-在操作前注意检查仪器的光源是否正常，是否需要更换滤光片。
-避免直接用手触摸比色皿，以免污染样品。
-在进行波长选择时，应避免过多的频繁操作，以维持仪器的稳定性。
-操作完成后，及时关闭分光光度计，将光程旋钮调至最小位置。
分光光度计原理
分光光度计原理分光光度计是一种用于测量物质溶液中物质浓度或溶液中某种物质的浓度的仪器。
它利用光的吸收、透射、散射等特性，通过测量光的强度变化来确定溶液中物质的浓度。
分光光度计的原理是基于比尔-朗伯定律，即溶液中物质的浓度与其吸收光线的强度成正比。
在分光光度计中，光源首先发出一束宽谱的光线，经过光栅或棱镜的分光作用后，被分成不同波长的光线。
然后，这些不同波长的光线经过样品池中的溶液，被溶液中的物质吸收部分光线，其余光线通过样品池后被光电二极管或光电倍增管接收，最终转化为电信号。
通过测量吸收光线的强度变化，就可以确定溶液中物质的浓度。
分光光度计的原理还包括光路的设计和光学系统的构成。
光路的设计要求光线传输的稳定性和准确性，光学系统的构成要求光源、分光装置、样品池和检测器等部件的精密度和稳定性。
只有这样，才能保证测量结果的准确性和可靠性。
在使用分光光度计进行测量时，首先需要校准仪器，调整零点和100%T（透射率）点，保证仪器的准确性。
然后将待测溶液注入样品池中，通过调节波长和透射率，测量吸收光线的强度变化，从而得出溶液中物质的浓度。
分光光度计的原理和应用非常广泛，可以用于生物化学、环境监测、药物分析、食品安全等领域。
它不仅可以测量溶液中物质的浓度，还可以用于分析物质的结构和性质。
因此，分光光度计在科学研究和工业生产中具有重要的应用价值。
总的来说，分光光度计是一种基于光的吸收原理，用于测量溶液中物质浓度的仪器。
它通过光的分光、吸收和检测，实现了对溶液中物质浓度的准确测量，具有广泛的应用前景和重要的科研价值。
分光光度计的原理
分光光度计的原理
分光光度计是一种用于测量物质溶液中物质浓度、吸光度等参数的仪器，其原
理主要基于光的吸收和透射特性。
在分光光度计中，光源发出的光线通过样品后，被光电二极管或光电倍增管检测，然后将检测到的光信号转换成电信号，最终通过数据处理得到所需的测量结果。
在分光光度计中，光源发出的连续光谱经过单色器分解成单一波长的光，然后
通过样品后，光电二极管或光电倍增管检测到通过样品后的光信号，再将其转换成电信号。
当样品中的物质吸收了特定波长的光线后，通过光电二极管或光电倍增管检测到的光信号就会减弱，这种减弱的程度与样品中物质的浓度成正比。
因此，通过测量光线透射或吸收的变化，就可以得到样品中物质的浓度或吸光度。
分光光度计的原理可以用于分析物质的浓度、反应速率等参数。
通过测量样品
吸收或透射的光强，可以得到样品中物质的浓度，从而实现对物质浓度的快速准确测量。
同时，分光光度计还可以用于研究物质的反应速率。
在化学反应中，随着反应的进行，吸光度会随之变化，通过测量吸光度的变化，可以得到反应速率的信息。
除此之外，分光光度计还可以用于分析样品中的杂质。
在样品中存在多种物质时，各种物质对光的吸收特性不同，通过测量吸光度的变化，可以对样品中的杂质进行分析和检测。
总之，分光光度计是一种基于光的吸收和透射原理的测量仪器，通过测量样品
中光的吸收或透射变化，可以实现对物质浓度、反应速率等参数的快速准确测量，具有广泛的应用前景。
分光光度计的原理及使用方法
分光光度计的原理及使用方法一、分光光度计的原理。
1.1 基本概念。
咱先来说说啥是分光光度计。
这东西啊，就像是一个超级精密的眼睛，专门用来瞅那些咱们肉眼看不太清的光的奥秘。
它主要是根据物质对不同波长的光的吸收特性来工作的。
简单来说，不同的物质就像不同的人，对不同颜色（也就是不同波长的光）有着不同的喜好，有的特别爱吸收某种光，有的就不咋吸收。
1.2 光的吸收定律。
这里面有个很重要的定律，叫朗伯比尔定律。
这定律就像是分光光度计的灵魂。
打个比方，就像你把一块海绵放到水里，海绵能吸多少水是有一定规律的。
物质吸收光也是这样，光在通过溶液的时候，被吸收的光量和溶液的浓度以及光在溶液里走过的路程是有个定量关系的。
浓度越高，就像海绵越大，吸收的光就越多；光在溶液里走得越长，那吸收的光也越多。
这就是这个定律的大概意思，很神奇吧。
二、分光光度计的使用方法。
2.1 仪器预热。
在使用分光光度计之前啊，咱得先给它热热身，就像运动员上场前要做热身运动一样。
这预热是为了让仪器达到一个稳定的状态，这样测出来的数据才准确。
一般来说，按照仪器的说明书，预热个十几分钟到半小时不等。
这时候你就像在等待一个老朋友准备好，耐心点就对了。
2.2 样品准备。
接下来就是准备样品了。
这可不能马虎，就像做菜一样，食材准备不好，做出来的菜肯定不好吃。
样品的浓度啊、纯度啊都得合适。
如果浓度太高或者太低，就像炒菜盐放多了或者放少了，测出来的数据就会不准确。
而且样品要处理得干干净净，不能有杂质，不然就像饭里有沙子，会影响整个测量的结果。
2.3 波长选择。
波长的选择可是个技术活。
不同的物质在不同的波长下有最大的吸收峰，这就需要咱们像侦探一样去找到这个最佳波长。
这就好比你要找一个人的弱点，找到了就能一击即中。
一般是通过查阅资料或者做一些预实验来确定这个最佳波长。
2.4 测量操作。
一切准备就绪，就可以开始测量了。
把样品放到仪器里，然后按照仪器的操作步骤一步一步来。
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第一章：产品概述产品原理：分光光度计的原理是利用物质对不同波长的选择性吸收现象对物质进行定性和定量分析，通过对吸收光谱的分析，普安短物质的内部结构及化学组成。
光谱系列紫外/可见分光光度计就是根据以上原理，将传统的设计制造经验与现代精密光学和最新微电子等高新科学技术合理的结合在一起，研制开发的具有当代先进水平的新型分光光度计，是化工、药品、生化、冶金、轻工、材料、环保、食品、制药以及教学等行业的必备仪器。
产品特点：光谱系列紫外/可见分光光度计具有以下特点：采用经改良的低杂散光、高分辨率的单光束光路以及简捷、可靠的结构设计，使仪器具有良好的单色性、稳定性、重现性和精确的测量读数。
2-4nm的光谱带宽可满足大多数分析测试项目的要求。
新型微机技术的运用，使仪器具有自动设置0%T和100%T、浓度计算和数据处理、自动校正波长，自动切换滤光片，自动光源切换点、自动显示出错信息等功能。
科学的设计，新技术的运用，将光、机、电以及微机技术有机的结合在一起，使仪器的稳定性指标接近或达到高级紫外可见光光度计的水平。
一起选用2×20位大屏幕点阵式带背光显示器，可现实透射比、吸光度、浓度、波长等参数，还实现了仪器人机对话功能和连接PC等功能。
仪器安装了标准的RS—232C通讯接口，可向计算机输送测试参数，并可接受计算机发送的控制指令（需使用SPECTRUM用户应用软件），实现PC机对仪器进行直接操作。
外接打印机，可打印实时测试参数。
仪器附有可在视窗95（WIN95）操作平台运行的PC—SPECTRUM基本应用软件，可进行透射比、吸光度测试，浓度计算和直读，并可以打印，保存和调用测试参数，使使用者轻松、方便、准确、可靠地进行分析。
仪器各部件介绍1.“方式设定”键（MODE）：用于设置测试方式。
仪器可供选择的测试方式有：透射比方式；吸光度方式和浓度直读方式。
使用功能键（FUNC），根据提示可将标准样品的浓度值或K因子（FACTCR）输入仪器。
2.“100%/0ABS”键：用于自动调整100.0%T（100.0%透射比）或0ABS（零吸光度）。
当波长被改变时，请不要忘记重新调整100%T或0ABS。
3.“0%T”键：用于自动调整0%透射比。
仪器在开机后自检的过程中已经将0%T的参数保存在微机处理器中。
一般情况下，无需使用此键。
仪器长时间使用过程中，0%T可提高测试数据的精确度。
4.“波长设置”键（ρδ）：用于设置分析波长。
波长位置显示在显示器的左上角。
5.“功能”键（FUNC）：①.输入已知的标准样品浓度值：按功能键一次，仪器显示：Std/00NC=1000当您需要直读被测样品的浓度时，首先将标准样品的浓度值输入仪器中。
仪器会根据标准样品的吸光度与输入的浓度值自动计算出标准样品K的因子。
被测样品的浓度值符合公式：C=KA②.输入已知标准样品K因子：按功能键二次，仪器显示Std/FACTOR=1000当您需要直读被测样品的浓度时，首先将标准样品K因子输入仪器中。
仪器会自动将输入的K因子储存起来。
被测样品的浓度值符合公式：C=KA③.光源切换位置控制：（此功能只用于紫外可见分光光度计）按功能键三次，仪器显示LAMP EXCH…。
此功能可使被测样品在仪器能量许可的情况下，使用同一种光源进行测试，以提高测试数据的精确度。
光源切换位置在325nm—355nm范围内可任意选择。
钨卤素灯开关控制：（此功能只用于紫外可见分光光度计）按功能键四次，仪器显示W LAMP OFF?当钨卤素灯是关闭状态时，仪器显示W LAMP ON？氘灯开关控制：（此功能只用于紫外可见分光光度计）按功能键五次，仪器显示D2 LAMP OFF?当氘灯是关闭状态时，仪器显示D2 LAMPON？④.连接计算机：按功能键六次，仪器显示：CONNECT PC仪器与计算机连接时，仪器显示：PC CONNECTING仪器与计算机连接成功时，仪器显示：PC CONNECTED仪器与计算机联机操作时，仪器显示：PC CONN…仪器与计算机连接失败时，仪器显示：CONNECT PC？6.“确认”键（ENT）用于确认所设置的各种参数或仪器功能。
7.“打印、清除”键（P/C）:“打印”键（PRINT）：当仪器处于测试状态时，使用该键，可将测试参数通过RS—232C 串行口输送给外接打印机。
“清除”键（CLEAN）用于清除设置的参数或仪器功能。
8.RS—232C输出接口：用于连接个人的计算机或打印机。
串行输出接口的主要参数：波特率（Band rate）:9600 数据位（Data bit）：8停止位（Stop bit）：1奇偶检验位（Par ity）：无串行输出接口的连接方式：PIN2—发送数据PIN3—接收数据PIN5—信号接地9.模拟信号输出接口：用于连接记录仪。
科技路模拟信号在一定时间内的变化量。
此功能可用于动力学分析测试。
10.电源开关：用于控制仪器电源开或关。
仪器通电前，首先请检查仪器铭牌上表明的工作电压是否与您当地的供电电压相符。
光谱WFJ72系列可见分光光度计主要技术指标：光谱WFZ275系列紫外可见分光光度计主要技术指标：第二章：仪器安装与使用配件检查：光谱分光光度计采用坚固的产品包装以避免产品在运输中碰撞，请根据仪器所附的产品装箱单检视您的仪器附件和配件，倘若发现附件和配件有缺少或损坏现象，请尽快与当地光谱产品代理商联系。
工作环境及安装要求放置仪器的工作台应平坦牢固、结实，不应有震动或其他影响仪器正常工作的现象（强烈电磁场、静电及其他干扰，都可能影响仪器的正常工作，应尽快原理干扰源）。
仪器使用时，务必保持散热孔畅通，以利散热。
仪器应放置在室温在5-35℃，相对湿度不大于85%的环境中。
仪器放置应避开有化学腐蚀气体的地方，如：硫化氢、二氧化碳、氨气等。
仪器应避免阳光直射。
仪器的电源供给要求在一起额定电压的±10%范围内，并有良好的接地。
仪器通电前，首先请检查仪器铭牌上标明的工作电压是否与您当地的供电电压相符。
如何您安装的仪器首先，欲使用分光光度计，我们必须供给它电源。
取出随机所附的交流电源线，将电源线的一头接到分光光度计的电源插座上，将另一头插到墙壁上的插座上。
确认联接无误，电源线安装好之后，按下分光光度计后面的电源开关，即可开机。
仪器性能的检查：接通电源，让仪器预热至少二十分钟，使仪器进入热稳定工作状态。
有时仪器会因运输，存储环境因素而受潮产生诸如读数波动等不稳定现象，此时，请保持仪器周围有良好的通风环境，并连续开机数小时直到读数稳定为止。
仪器接通电源后，即进入自检状态。
显示器实时显示仪器的自检状态。
当仪器发生故障时，显示器会自动显示故障位置。
自检结束，仪器自动停留在546nm处，并自动调100%T 和0%T。
显示器上显示546nm和“100%T”。
仪器此时便进入测试状态。
显示器显示仪器各部分自检项目的符号为（以752型紫外可见分光光度计为例）：电源接通：仪器显示“WELCOME”和“SPECTRUM 752”电源切换器状态自检：仪器显示“SELFTESTING:LIGHT SOURCE”滤光片位置自检：仪器显示“SELFTESTING：FILTER”单色器状态自检：仪器显示“SELFTESTING：MONOCHROMATOR”自动调“0%T”“100.0%T”仪器显示：“546nm BLANK”进入测试状态：“546”“100.0%T”怎样使用您的仪器1.电源开关，使仪器预热20分钟；仪器接通电源后，仪器即进入自检状态，自检结束后波长停在546nm处，测量的方式自动设定在透射比方式（%T），并自动调100%T和0%T。
开机前，先确认仪器样品室内是否有东西挡在光路上。
光路上有东西将影响仪器自检甚至造成仪器故障。
如果您要获得被测样品的透射比参数事（透射比方式）：2.按“方式键”（MODE）将测试方式设置为透射比方式：显示器显示“XXXnm XXX.X%T”3.按“波长设置”键（ρδ）设置您想要的分析波长，如340nm;按波长设置键“ρ”或“δ”直到显示器显示340nm为止，此时显示器显示“340nm XXX.X%T”每当波长被重新设置后，请不要忘记调整100.0%T。
4.将您的参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中：比色皿内的溶液面高度不应低于25毫米，大约25毫升。
否则，会影响测试参数的精确度。
被测试的样品中不能有气泡和漂浮物，否则，会影响测试参数的精确度。
5.打开样品室盖，将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中，盖上样品室盖。
一般情况下，参比放在样品架的第一个槽中。
被测样品的测试波长在340nm-1000nm范围内时，建议使用玻璃比色皿，被测样品在190nm-340nm范围内时，建议使用石英比色皿。
的测试精度。
比色皿的透光部分表面不能有指印、溶液痕迹。
否则，将影响样品的测试精度。
6.将参比溶液推入光路中，按“100%T”键调整零ABS。
仪器在自动调整100%T的过程中，显示器显示“340nm Blank…”，当100.0%T调整完成后，显示器显示“340nm 100.0%T”。
7.将被测溶液推或拉入光路中，此时，显示器上所显示是被测样品的透射比参数。
如果你要获得被测样品的吸光度参数时（吸光度方式）：2.按“方式键”（MODE）将测试方式设置为吸光度方式：显示器显示“XXXnm X.XXXAbs”3.按“波长设置”键（ρδ）设置您想要的分析波长，如340nm;按波长设置键“ρ”或“δ”直到显示器显示340nm为止，此时显示器显示“340nm X.XXXAbs”每当波长被重新设置后，请不要忘记调整零Abs。
4.将您的参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中：比色皿内的溶液面高度不应低于25毫米，大约25毫升。
否则，会影响测试参数的精确度。
被测试的样品中不能有气泡和漂浮物，否则，会影响测试参数的精确度。
5.打开样品室盖，将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中，盖上样品室盖。
一般情况下，参比放在样品架的第一个槽中。
被测样品的测试波长在340nm-1000nm范围内时，建议使用玻璃比色皿，被测样品在190nm-340nm范围内时，建议使用石英比色皿。
仪器所附的比色皿，其透射率是经过测试和匹配的，未经匹配处理的，比色皿影响样品的测试精度。
比色皿的透光部分表面不能有指印、溶液痕迹。
否则，将影响样品的测试精度。
6.将参比溶液推入光路中，按“100%T”键调整零ABS。
仪器在自动调整100%T的过程中，显示器显示“340nm Blank…”，当100.0%T调整完成后，显示器显示“340nm 0.000Abs”。
7.将被测溶液推或拉入光路中，此时，显示器上所显示是被测样品的吸光度参数。
如果你要获得被测样品的浓度值参数时（浓度直读方式）：-已知标准样品浓度值：2.按“方式键”（MODE）将测试方式设置为浓度直读方式：显示器显示“XXXnm XXXXC”3.按“波长设置”键（ρδ）设置您想要的分析波长，如340nm;按波长设置键“ρ”或“δ”直到显示器显示340nm为止，此时显示器显示“340nm XXXXC”每当波长被重新设置后，请不要忘记按“100%T”调整零Abs。