分子生物学实验常用仪器
分子生物学实验室仪器使用说明书
分子生物学实验室仪器使用说明书一、引言分子生物学实验室仪器的使用是进行基因研究和分析的重要环节,正确的仪器操作和维护对于保证实验结果的准确性具有至关重要的作用。
本说明书旨在提供对分子生物学实验室仪器的正确使用方法和维护技巧的指导,以确保实验室工作的顺利进行。
二、常用仪器1. 基因扩增仪基因扩增仪是分子生物学实验室常用的仪器之一,其中最常见的是PCR仪。
以下是PCR仪的使用步骤:- 将待扩增的DNA模板、引物和试剂添加至PCR管或96孔板中;- 根据所需的扩增程序,在PCR仪面板上设置合适的温度和时间参数;- 启动PCR仪,开始扩增;- 扩增结束后,及时取出试管或孔板,并进行下一步实验操作。
2. 凝胶电泳仪凝胶电泳仪主要用于观察DNA、RNA或蛋白质的迁移情况以及分子大小的测定。
以下是凝胶电泳仪的使用步骤:- 准备所需的琼脂糖凝胶,并注入到电泳槽中;- 将待检测的样品混合液加入到电泳槽中的样品孔中;- 在电泳槽两侧连接正负极电源,并设置合适的电压和时间参数;- 启动电源,进行电泳;- 电泳结束后,取出凝胶,进行染色或进一步分析。
3. 离心机离心机用于分离混合物中的固体颗粒和液体,是分子生物学实验室必备的仪器之一。
以下是离心机的使用步骤:- 将待离心的样品均匀加入离心管中,并保持离心管的平衡;- 将离心管放入离心机转盘的相应位置,并注意转盘的平衡;- 根据离心速度和时间要求,设置合适的参数;- 启动离心机,开始离心过程;- 离心结束后,小心取出离心管,注意避免离心管的倾斜或颠倒。
三、常见问题及处理方法1. 仪器出现异常- 若仪器出现异常操作或显示异常,应首先检查是否按照正确的使用步骤进行操作;- 仔细阅读仪器说明书,查看是否存在使用特殊注意事项;- 若仍无法解决问题,及时联系仪器维修人员进行检修。
2. 仪器维护- 每次使用仪器后,应进行基本的清洁和消毒,保持仪器干净整洁;- 定期检查仪器是否正常,如电源是否接触良好,仪器表面是否有明显损坏等;- 根据仪器的要求,及时更换耗材和维护配件。
分子生物学实验室常用仪器及使用方法
实验指导目录实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取-碱裂解法实验三琼脂糖凝胶电泳实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化实验六动物组织细胞基因组DNA提取实验七DNA的定量实验八PCR基因扩增实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA实验十DNA重组实验十一动物组织细胞总RNA的提取实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明,在科学飞速发展的今天,无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外,还具有一些特殊用途的仪器,这些仪器一般较精密,价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内,有多个厂家生产冷冻离心机,本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型(上海安亭),落地式。
配有角式转头:6×50ml、12×10ml和12×。
极限转速20000rpm。
1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在0~30℃之间,相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关,再按运转键,转动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。
2. 操作程序(1)插上电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
现代生物仪器分析 (2)
现代生物仪器分析简介现代生物仪器分析是一种用于研究生物体结构、功能和相互作用的技术。
它通过利用各种仪器和技术的组合,使研究人员能够观察、测量和分析生物体中的各种分子和细胞过程。
这些仪器可以帮助科学家深入了解生物体的活动,并为治疗和诊断疾病提供新的思路和方法。
常用的现代生物仪器1. 分子生物学仪器分子生物学仪器是现代生物仪器分析中的重要组成部分,它们用于研究和操作生物体中的分子和基因信息。
以下是一些常用的分子生物学仪器:•PCR机:聚合酶链式反应(PCR)机是一种用于扩增DNA片段的仪器。
它能够通过不断重复的循环反应使DNA片段的数量指数增加,从而使其在实验中更容易被检测和分析。
•电泳仪:电泳仪用于分离DNA、RNA和蛋白质等生物分子。
电泳仪利用电场将带电的生物分子在凝胶中移动,从而实现对它们的分离和纯化。
•基因测序仪:基因测序仪能够对DNA序列进行高通量测序。
它采用不同的测序技术和方法,可以帮助科学家分析和理解基因组的结构和功能。
2. 细胞生物学仪器细胞生物学仪器用于观察和分析生物体中的细胞结构和功能。
以下是一些常用的细胞生物学仪器:•显微镜:显微镜是一种用于观察微小物体的仪器。
在生物研究中,透射电子显微镜(TEM)和扫描电子显微镜(SEM)是常用的工具,它们可以提供高分辨率的细胞和分子图像。
•流式细胞仪:流式细胞仪是一种用于快速分析和鉴定细胞的仪器。
通过将细胞悬浮于液体中并通过射流,流式细胞仪可以根据细胞的形态、大小和荧光信号等特征进行分类和鉴定。
3. 蛋白质分析仪器蛋白质分析仪器用于研究和分析生物体中的蛋白质结构和功能。
以下是一些常用的蛋白质分析仪器:•质谱仪:质谱仪是一种用于检测和分析分子和离子的仪器。
在蛋白质分析中,质谱仪可以帮助确定蛋白质的分子量、组成和结构。
•蛋白质电泳仪:蛋白质电泳仪通过电场将带电的蛋白质分子移动到凝胶中,从而实现对蛋白质的分离和纯化。
它可以帮助科学家分析和研究蛋白质的结构和功能。
生物实验室器材清单表
生物实验室器材清单表一、基本实验器材•称量仪器:电子天平、分析天平、移液器等。
•容器:试管、烧杯、量筒、离心管、培养皿等。
•温度控制设备:恒温水浴锅、恒温培养箱、恒温恶冷冻箱等。
•搅拌设备:磁力搅拌器、振荡器等。
•过滤设备:滤纸、滤液漏斗、滤膜、滤芯等。
•离心设备:高速离心机、台式离心机等。
•加热设备:电热板、电炉、燃气灶等。
•p H计:用于测量溶液的酸碱度。
•光学设备:显微镜、反射显微镜等。
二、分子生物学实验器材•离心管架:用于离心管的固定和摇晃。
•冻存管和冻存管盒:用于样品的长期保存和冷冻。
•培养皿和培养瓶:用于生物样品的培养和生长。
•PCR试管和PCR板:用于聚合酶链式反应(PCR)实验。
•电泳仪和电泳槽:用于DNA或蛋白质的分离和检测。
•转印设备:用于将DNA或蛋白质转移到膜上。
•半自动和全自动PCR仪:用于PCR反应的自动化控制。
•基因测序仪:用于测定DNA序列。
•真空泵和真空过滤器:用于快速过滤和生物样品的处理。
•超低温冰箱:用于存放生物样品和试剂。
三、细胞生物学实验器材•细胞培养器:细胞培养瓶、细胞培养皿等。
•色素和荧光标记试剂:用于细胞成像和染色。
•显微镜和显微摄像系统:用于观察和记录细胞结构和功能。
•细胞计数仪:用于计算细胞数量和密度。
•酶消解试剂:用于细胞的消化和分离。
•均质机和超声波颚化器:用于细胞的破碎和分散。
•细胞培养水浴锅和细胞培养箱:用于细胞培养的温度控制。
•细胞冻存液和细胞恢复液:用于细胞冻存和解冻。
四、免疫学实验器材•免疫试剂盒:用于免疫检测和定量。
•过滤膜和孔板:用于免疫试剂的过滤和固定。
•孵育箱和孵育器:用于免疫试剂的孵育和反应。
•光谱仪和荧光仪:用于测量光信号和荧光强度。
•干燥器和浓缩器:用于免疫样品的脱水和浓缩。
•凝胶电泳仪和蛋白质标记试剂:用于免疫印迹和蛋白质定量。
•细胞悬液和抗体标记试剂:用于免疫细胞的染色和标记。
五、遗传学实验器材•DNA提取试剂盒和RNA提取试剂盒:用于提取DNA和RNA。
分子生物学科耗材及仪器
分子生物学科耗材及仪器
以下是一些常见的分子生物学科耗材及仪器:
1. 实验耗材:
- 移液器和吸头:用于准确量取液体。
- 离心管和离心机:用于分离和沉淀细胞、核酸和蛋白质等。
- 培养皿和培养箱:用于细胞培养和微生物培养。
- PCR 管和 PCR 仪:用于聚合酶链式反应(PCR)实验。
- 电泳槽和电泳仪:用于核酸和蛋白质的电泳分离。
- 试剂瓶和移液器:用于储存和分配试剂。
- 一次性手套和实验服:用于保护实验人员的安全。
2. 实验仪器:
- 紫外可见分光光度计:用于测定核酸和蛋白质的浓度。
- 凝胶成像系统:用于观察电泳结果。
- 实时荧光定量 PCR 仪:用于定量检测基因表达。
- 离心机:用于分离和沉淀细胞、核酸和蛋白质等。
- 移液器:用于准确量取液体。
- 生物安全柜:用于处理危险的生物样本,提供安全的实验环境。
这些耗材和仪器是分子生物学实验中常用的工具,它们的选择和使用将取决于具体的实验需求和研究目的。
在进行分子生物学实验时,正确选择和使用合适的耗材及仪器是确保实验成功和结果准确性的重要因素。
分子生物学实验室常用仪器及使用方法
实验指导目录实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取-碱裂解法实验三琼脂糖凝胶电泳实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化实验六动物组织细胞基因组DNA提取实验七DNA的定量实验八PCR基因扩增实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA实验十DNA重组实验十一动物组织细胞总RNA的提取实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明,在科学飞速发展的今天,无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外,还具有一些特殊用途的仪器,这些仪器一般较精密,价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内,有多个厂家生产冷冻离心机,本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型(上海安亭),落地式。
配有角式转头:6×50ml、12×10ml和12×。
极限转速20000rpm。
1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在0~30℃之间,相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关,再按运转键,转动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。
2. 操作程序(1)插上电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
分子生物学实验室常用仪器及使用方法
实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明,在科学飞速发展的今天,无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外,还具有一些特殊用途的仪器,这些仪器一般较精密,价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内,有多个厂家生产冷冻离心机,本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型(上海安亭),落地式。
配有角式转头:6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。
极限转速20000rpm。
1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在0~30℃之间,相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关,再按运转键,转动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。
2. 操作程序(1)插上电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
(2)设定机器的工作参数,如工作温度,运转时间,工作转速等。
(3)将预先平衡好的样品放置于转头样品架上,关闭机盖。
(4)按控制面板的运转键,离心机开始运转。
在预先设定的加速时间内,其运速升至预先设定的值。
(5)在预先设定的运转时间内(不包括减速时间),离心机开始减速,其转速在预先设定的减速时间内降至零。
分子生物学实验常用仪器设备
磁力搅拌器
超净工作台
直流式 细菌增殖 质粒纯化
凝胶成像仪
印 及 分 析 结 果 的 保 存 、 打 泳 电 胶 凝
恒温循环仪
酶切 动物DNA 动物DNA 制备
微波炉
溶化琼脂和 琼脂糖
PCR 仪
凝胶电泳装置 --水平电泳仪ຫໍສະໝຸດ 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳
凝胶电泳装置 --垂直电泳仪
微量可调移液枪及枪头
微量离心管
又作:指管、 eppendorf管 eppendorf管 常用0.5ml 常用0.5ml 1.5ml 微量物质离心沉淀 PCR 标记探针 样品保存 菌种保存
电子分析天平
0.01mg0.01mg100g(左 100g(左 德国 美特勒) 美特勒) 0.1mg0.1mg-200g (右 上海奥 豪斯) 试剂配制 样品定量称量
紫外分光光度计
测定核酸含量 蛋白质含量 细菌生长密度
紫外透射仪
观测琼脂糖 凝胶电泳的 结果
台式高速冷冻离心机
德国effendorf 德国effendorf 最高转速 25000rpm 感受态细胞的制 备
台式高速离心机
德国 eppendorf 最高转速 12500rpm DNA样品制备 DNA样品制备
全温摇床(振荡器) 全温摇床(振荡器)
DNA 制备 细菌繁殖
恒温培养箱
菌 株 培 养
自动高压蒸汽灭菌器
器具灭菌 培养基灭菌
制冰机和纯水仪
冰箱和超低温冰柜
pH计和pH试纸 pH计和 试纸 计和pH
分子生物学常用仪器介绍2-文档资料
工作原理
• 电穿孔是功能强大的将核酸、蛋白及其它分 子导入多种细胞的高效技术。 • 通过高强度的电场作用,瞬时提高细胞膜的 通透性,从而吸收周围介质中的外源分子。 • 这种技术可以将核苷酸、DNA 与RNA、蛋 白、糖类、染料及病毒颗粒等导入原核和真 核细胞内。
绿荧光目标蛋白测定 ---监测细胞内蛋白位移
MAPKAP-k2
p38 途径 TGF-b 信号传导 细胞存活,细胞增殖 免疫反应, 前列腺素信号 传导途径 细胞因子传导, leptin signaling PI(3)P 传感途径
SMAD-2
AKT-1 NFAT-C1
STAT-3 FYVE domain
METTLER TOLEDO AG285 天平
天平种类
• • • • • 分析天平 电子天平 精密电子天平 托盘天平 砝码
工作原理
• 天平是称量物体质量的衡器。 • 常用天平都采用单杠杆结构,运用 “杠杆平衡时加在等力臂上的力相 等”这一原理制成。
• 电子天平是用电磁力平衡被称物体 重力的天平。
Fluorescence image, DNA in blue and Microtubules in green
细胞增殖试剂盒 Cy5-连接的抗-BrdU 来检测细胞增 殖
CypHer 5 荧光素 酸度敏感的荧光素,用于活细胞受体 激活/内陷测定
CyDye荧光-连接的二抗,用于固 定细胞测定
基本概念
• 全称量 天平所能称量的最大质量值(满载值),常以 “克”(g)为单位表示。 • 感量 使天平指针从平衡位置转到刻度盘一分度所需的 最大质量。 因此,感量也叫做“分度值”,常以“毫克” (mg)为单位表示。(e, d) 这一数值愈小,天平就愈灵敏。
分子生物学实验室的常规仪器设备
(一) 温度控制系统:1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱,最常使用的有:4℃、-20℃、-80℃冰箱。
4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。
-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。
-80℃适合某些长期低温保存的样品、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。
0-10℃的冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。
2.液氮罐:有些实验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯化的样品等,要求速冻和长期保存在超低温环境下,就需要一个液氮罐(-196℃)具有经济、省力和较好地保持细胞生物学特性的优点。
3.培养箱:37℃恒温箱用于细菌的固体培养和细胞培养。
CO2培养箱适用于培养各种细胞,可恒定地提供一定量的CO2(通常5%),用来维持培养液的酸度(pH值)。
37℃恒温空气摇床可进行液体细菌的培养。
4. 水浴锅:用于保温。
25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验,各种生物化学酶反应等试验的保温。
25-100℃水浴箱用于常规试验。
5.烘箱:主用于烘干实验器皿,有些需要温度高些,有些需要温度低些。
用于RNA方面的实验用具,需要在250℃烤箱中烘干,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。
(二)水的净化装置:随着分子生物学的飞速发展,许多实验对水纯度的要求越来越高。
1. 蒸馏水皿:单蒸水常难以满足实验要求。
双蒸水、三蒸水配液,许多实验要去离子水。
多次蒸馏水可除去水中挥发性杂质,不能完全除去水中溶解的气体杂质(Mn2 、Cu2 、Zn2 、Fe3 、Mo(Ⅵ))。
2. 离子交换器:去离子水—用离子交换法制取的水,称去离子水。
去离子效果好,但不能除去水中的非离子型杂质,其中常含有微量的有机物(树脂等)。
3.超纯水:用蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水,磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。
用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。
分子生物学实验室常用仪器设备简介
分子生物学实验室常用仪器设备简介一、实验目的熟悉分子生物学实验室常用仪器并熟练使用二、实验原理1、恒温气浴来靠:用作对温度和震荡频率存有较低建议的细菌培养,蒸煮,杂交,生化反应及酶和非政府研究等。
2、超净工作台:用于分子生物学无菌操作。
3、低温台式高速离心机:用作拆分提纯dna和蛋白质等,例如基因片段的拆分,蛋白酶的结晶和废旧等。
4、微量移液管:是连续可调的,计量和转移液体的专用仪器,其装有直接读数容量计。
有多种规格:①0.5-10μl②10-100μl③20-200μl④100-1000μl。
5、电泳仪:用作确认大分子物质的分子量以及鉴别物种亲缘关系的仪器。
6、pcr仪:用于目的基因的扩增,是一对寡糖核苷酸引物结合到正负dna链上的靶序列两侧,从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列dna片段。
主要用于基础研究和应用研究等领域。
7、杀菌锅:用作细菌和细胞培养及核酸等有关实验采用的试剂,器皿及实验用具的严苛杀菌。
三、实验仪器恒温气浴来靠、无尘室工作台、低温台式高速离心机、微量移液管、杀菌锅、pcr仪、电泳仪。
四、实验步骤(一)、恒温气浴必须穿着的采用:1、样品瓶稳固放进弹簧缠中2、接通电源开关,仪器进入准备状态3、参数设定,(设定温度、时间、转速等参数)4、按启动键仪器已经开始工作,按暂停键可以暂停纸盒的转动;5、按电源键,显示屏表明消失,关闭电源总开关(二)、无尘室工作台的采用1、使用工作台时,先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面,然后用消毒剂擦拭消毒。
2、接通电源,提前30分钟打开紫外灯照射消毒,处理净化工作区内工作台表面积辛苦的微生物,15分钟后,停用紫外灯,打开送风机。
3、工作台面上,不要存放不必要的物品,以保持工作区内的洁净气流不受干扰。
4、操作结束后,清理工作台面,收集各废弃物,关闭风机及照明开关,用清洁剂及消毒剂擦拭消毒。
5、最后打开工作台紫外灯,反射消毒30分钟后,停用紫外灯,阻断电源。
(三)、低温台式高速离心机的采用1、把离心机放置于平面桌或平面台上,目测使之平衡,用手轻摇一下离心机,检查离心机是否放置平衡。
分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作
分子克隆
总结词
分子克隆是一种将外源DNA片段插入到载体DNA中,并在宿主细胞中进行复制 和表达的过程。
详细描述
分子克隆的基本步骤包括载体DNA的制备、限制性酶切、连接、转化和筛选等。 所需的仪器设备包括研磨仪、离心机、PCR仪和电泳仪等。
基因表达分析
总结词
基因表达分析是一种检测特定基因在 不同条件下的表达水平的技术。
凝胶电泳仪利用电场作用驱动带电分子在凝胶介质中移动,从而实现分离。通过染色或放射自 显影等技术,可以检测到分子的大小、数量等信息。凝胶电泳仪广泛应用于分子物学实验室中用于观察细胞和组织的常规仪 器设备。
显微镜通过光学系统将样品放大并呈现于观察者眼前,可观 察细胞形态、结构以及染色后的染色体等。根据不同的观察 需求,可以选择光学显微镜、荧光显微镜、倒置显微镜等不 同类型的显微镜。
实验人员在实验过程中应穿戴个人防护装备,如 实验服、护目镜、手套等,以防止化学品和生物 危害物质的侵入。
03 废弃物处理
实验产生的废弃物应按照规定进行分类处理,避 免对环境和人体造成危害。
02
常规仪器设备
离心机
离心机是分子生物学实验室中常用的设备之一,主要用 于分离和纯化各种生物样品。
离心机通过高速旋转产生离心力,使样品中的不同组分 因质量不同而沉降到离心管的底部,从而实现分离和纯 化。常见的离心机有高速离心机和超速离心机,分别适 用于不同质量和转速的样品。
PCR仪
PCR仪是分子生物学实验室中必不可少的设备, 用于进行聚合酶链式反应(PCR),扩增特定的 DNA片段。
PCR仪通过控制温度和时间,实现DNA的变性、 退火和延伸等反应过程,最终得到大量所需的 DNA片段。PCR仪具有高精度和高自动化的特点 ,提高了实验的准确性和可重复性。
分子生物学实验室需要的仪器配置
分子生物学实验室需要的仪器配置(1)培养箱在分子生物学试验中,有很多反应都就是在特定温度下进行的,这时就需要一个控温的装置。
例如:用于细菌的平板培养,我们通常设定为37℃于培养箱倒置培养;其她分子生物学实验如酶切等需要25℃,30℃,37℃等条件。
(2)冰箱冰箱就是实验室保存试剂与样品必不可少的仪器。
分子生物学实验中用到的试剂有些要求就是4度保存,有些要求就是负20度保存,实验人员一定要瞧清试剂的保存条件,放置在恰当的温度下保存。
具体来说,不同温度下保存的物品如下:a、4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。
b、-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素与DNA、蛋白质样品等。
c、-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液,感受态等的保存。
d、0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。
(3)摇床摇床就是实验室常用仪器,一般有常温型与低温型两种。
对于分子生物学实验室,如果能配置低温型摇床,就可以适应不同的实验需求。
例如:用于大肠杆菌,酵母菌等生物工程菌种的振荡培养及蛋白的诱导表达,培养通常为28度与37度,诱导表达需要20-37度;在感受态的制备过程中,需要有18度的温度控制;用于蛋白凝胶的染色脱色时振荡,常温使用;用于大肠杆菌常规转化时振荡复苏,常为37度。
对于控制温度低于室温时,我们需要低温型摇床来控温。
(4)水浴锅水浴锅也就是一种控温装置,水浴控温对于样品来说比较快速且接触充分。
例如,用于42度的大肠杆菌转化时的热激反应;用于DNA杂交过程中水浴控温。
(5)烘箱烘箱就是用于灭菌与洗涤后的物品烘干。
烘箱有不同的控温范围,用户可以根据实验需求进行选择。
例如,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干;用于RNA方面的实验用具,需要在250℃烤箱中烘干。
(6)纯水装置纯水装置包括蒸馏水器与纯水机。
蒸馏水器的价格便宜,但在造水过程中需要有人值守;纯水机价格高些,但就是使用方便,可以储存一定量的纯水。
实验一分子生物学实验室的常规仪器设备和有关操作
❖ 3、实验过程中,注意节约药品试剂,节约水电。药品试剂 用后即盖上,废弃物品不能乱丢,需由值日生统一收集。
❖ 4、实验课后均要将用过的仪器试管进展清洗,并整理台面。
六、思考题
❖ 1.分子生物学实验室的常规仪器设备有哪几 大类?简单说明。
〔二〕灭菌消毒及净化设备
1.高压蒸汽灭菌器 2.紫外灯 3.超净工作台
〔三〕温控及枯燥设备
❖ 1.冰箱、冷柜 ❖ 2.液氮罐 ❖ 3.水浴锅 ❖ 4.恒温恒湿培养箱
〔四〕电泳及检测设备
1.电泳设备 电泳仪、电泳槽 2.凝胶成像分析系统 紫外分析仪
〔五〕其他设备
❖ 1.超纯水仪 ❖ 2.离心机 ❖ 3.基因扩增仪〔PCR仪〕 ❖ 4.微波炉 ❖ 5.制冰机 ❖ 全自动雪花制冰机
四、分子生物学实验本卷须知
〔一〕设备方面 1.可调式移液器
2.电子天平 3.PH计
4.分光光度计 5.高压蒸汽灭菌器
6.电泳仪 7.离心学实验室规那么
❖ 1、实验室、实验桌凳勿乱涂写刻画;上课须统一穿白大衣。 这也是为了同学门自身的卫生与平安,因为实验过程中会用 到一些有毒或危险试剂等。
❖ 2.分子生物学实验室的常见的有毒试剂有哪 些?
七、实验安排
❖ 全班55人,按照学号分组,每6人一组,共9 组,最后一组7人。
6人一组
八、实验报告
2021级生物技术专业
分子生物学实验报告
姓名:
学号:
实验工程:实验一
1.实验目的
2.实验原理
3.实验试剂
4.实验步骤
5.实验本卷须知
6.思考题
分子生物学常用仪器介绍
梯度PCR仪
• “摸条件”一度是让人很头疼的问题。 • 梯度PCR的出现部分解决了一些问 题——在反应过程中每个孔的温度 控制条件可以在指定范围内按照梯 度变化,根据结果,一步就可以摸 索出最适合的反应条件。
原位PCR扩增
• 在PCR仪上增加原位PCR模块就 可以在玻片上进行原位PCR扩增,
多槽式高通量PCR仪
医学领域
• 疾病基因检测 / 遗传病的产前诊断 • 致病病原体的检测 • 肿瘤治疗中癌基因的检测
会推广到大部分疾病治疗前的检测
• DNA指纹、个体识别、亲子关系鉴别、 法医物证 • 其他: 动、植物检疫(转基因动植物检测)
PCR具有极高的灵敏度
污染是PCR实验的常见问题。只要实验室里曾经扩增过某个 片段,就有可能以后的实验中发生污染。
样品 正对照 负对照 标准分子量
因此,做实 验的时候绝 对不要忘了 负对照。
用紫外灯破 坏污染物也 是一个办法
PCR仪器的变迁
• • • • • • • • 三个水浴锅, 用手移动 (Mullis等人当时用的) 电加热块 + 自来水冷却 (PE,1988) 电加热块 + 内置循环液冷却 (PE,1989) 三个加热块 + 机械手 (Stratagene,1994) 半导体制冷和加热 (MJ, PE, BioMetra, Eppendrof) 温度梯度, 荧光检测 (如 Roche的Lightcycler) 风加热 Lab-on-chip式的PCR仪(所谓的芯片PCR)
• 琼脂糖电泳,聚丙烯酰胺电泳,DNA、 RNA和蛋白质1D\2D电泳凝胶, Southern Northern和Western印迹膜; 点杂交膜;薄层层析板、TCL放射自 显影胶片、菌落等样品的图像采集和 分析,可对核酸、蛋白质的凝胶电泳 条带进行分子量大小及含量分析。
关于分子生物学实验室常用仪器及使用方法
实验指导目录实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取-碱裂解法实验三琼脂糖凝胶电泳实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化实验六动物组织细胞基因组DNA提取实验七DNA的定量实验八PCR基因扩增实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA 实验十DNA重组实验十一动物组织细胞总RNA的提取实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明,在科学飞速发展的今天,无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外,还具有一些特殊用途的仪器,这些仪器一般较精密,价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内,有多个厂家生产冷冻离心机,本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型(上海安亭),落地式。
配有角式转头:6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。
极限转速20000rpm。
1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在0~30℃之间,相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关,再按运转键,转动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。
2. 操作程序(1)插上电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
生物化学实验中的仪器与设备
生物化学实验中的仪器与设备生物化学实验中,仪器与设备的使用起着至关重要的作用。
通过科学而精确的操作,能够获得可靠的实验结果,进而推动生物化学研究的发展。
本文将介绍几种常见的生物化学实验仪器与设备,并探讨它们在实验中的应用。
一、分光光度计分光光度计是生物化学实验中常见的仪器之一。
它通过测量溶液对特定波长光的吸收或透过来确定溶液的浓度。
分光光度计的工作原理是通过将可见光或紫外光通过溶液中,利用光的吸收作用来计算溶液的浓度。
在DNA测定、蛋白质浓度测定等实验中,分光光度计被广泛应用。
二、离心机离心机是一种常见的生物化学实验仪器,它通过离心力将样品内的细胞、碎片或其他颗粒物质沉淀到管底,从而分离出上清液和沉淀物。
离心机在细胞培养、离心沉降、蛋白质提取等实验中发挥着重要的作用。
三、电泳仪电泳仪是生物化学实验中不可或缺的仪器之一。
它通过电场作用将带电的生物分子(例如DNA、蛋白质)在凝胶中移动,从而实现对这些分子的分离和分析。
电泳仪广泛应用于DNA分析、蛋白质分析等实验中。
四、pH计pH计是一种用于测量溶液酸碱性的仪器。
生物化学实验中,酸碱性的精确控制对于诸多实验至关重要。
pH计通过测量溶液中氢离子的浓度来确定溶液的酸碱性。
在酶活性研究、酸碱反应等实验中,pH计的使用是不可或缺的。
五、实时荧光定量PCR仪实时荧光定量PCR仪是分子生物学和遗传学研究中重要的仪器之一。
它通过荧光信号的检测来监测DNA的扩增过程,从而定量分析初始DNA的含量。
实时荧光定量PCR仪在基因表达分析、病原体检测等领域有着广泛的应用。
六、冷冻离心机冷冻离心机是一种用于生物样品冷冻离心的仪器。
在生物化学实验中,冷冻离心机被广泛用于富集样品中的蛋白质、RNA或DNA等。
冷冻离心机通过低温离心过程中控制冷却系统,可以防止样品中的目标分子被降解。
七、质谱仪质谱仪是一种用于分析复杂混合物成分的仪器。
它通过将分子样品分解成带电离子,并通过测量带电离子的质量和相对丰度来确定样品中各种成分的含量和结构。
分子生物学领域常用的实验室仪器介绍
分子生物学领域常用的实验室仪器介绍分子生物学领域是现代生命科学的重要分支之一,它研究的是生物分子层面的生命过程,旨在深入揭示生命的本质和机制。
而在分子生物学研究中,实验室仪器则是不可或缺的工具,它们不仅可以帮助研究者进行实验操作,还能够提高实验结果的可靠性和精度。
本文将为大家介绍分子生物学领域常用的实验室仪器。
一、PCR扩增仪PCR(聚合酶链式反应)扩增技术是分子生物学领域中最常用的实验技术之一,是通过对核酸单链进行不断反复的扩增,从而获得足够多的样品用于后续的实验研究。
PCR扩增仪是一种能够精确控制温度并产生稳定温度的设备,它可以通过快速升温和降温的方式对PCR反应的反应体系进行加热和冷却,以满足PCR反应各个步骤所需的不同温度条件。
根据不同的实验需求,PCR扩增仪通常有单块、双块和四块等不同规格型号。
二、电泳仪电泳是一个常见的探测和分离生物分子的方法,尤其在DNA和RNA分子的研究中应用广泛。
电泳仪则是进行电泳实验的设备。
电泳仪根据不同的实验需求、对样品大小和数量的要求,可以选择垂直电泳仪、平板电泳仪、毛细管电泳仪、聚丙烯酰胺凝胶等不同类型的电泳仪。
其中,聚丙烯酰胺凝胶电泳仪是目前应用最广泛的电泳仪之一,它可以以高效、稳定和可重复的方式对生物分子进行分离、检测和纯化。
三、荧光定量PCR仪荧光定量PCR(实时PCR)技术是PCR技术的一种延伸,它通过检测PCR反应过程中荧光信号的变化动态监测扩增产物的累积情况,从而实时定量测定PCR反应产物的含量。
荧光定量PCR仪是荧光定量PCR技术实验的核心设备,它通过荧光信号的强度或增长速率来定量PCR反应物质的含量。
荧光定量PCR仪可根据实验数量和复杂程度的不同分为单通道和多通道两种类型。
四、显微镜生物显微镜是分子生物学领域中经常使用的设备,它主要用于观察、研究和记录细胞和组织样品的结构和形态特征,以及细胞间和分子间的相互作用和动态过程。
在生物领域中广泛应用多种类型的显微镜如荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、超高分辨率显微镜等。
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编号
1
分子生物学实验常用仪器
品牌
名称
超低温冰箱 普通低温冰箱
液氮罐 制冰机 微量天平 分析天平 纯水器 超纯水器 高压灭菌器 灭菌箱 超声波清洗器 pH测定计 移液器 移液器 瓶口分配器 电动移液器 多道电动移液器 冷冻离心机 高速离心机 超速离心机 全自动密度梯度 分离系统 普通水浴 低温循环水浴 组织、植物研磨
机 超声波破碎仪
涡旋振荡 匀浆机
凝胶成像系统 恒床 冻干机
离心浓缩 超净台
分光光度计 常温水浴 电转化仪 电泳仪 电泳仪 干浴 培养箱
普通PCR/梯度 荧光定量PCR 半干转膜仪/半
干转印槽 原位杂交仪
型号
用途
样品储存
分子杂交箱 多色荧光系统
酶标仪 显微镜 体式显微镜 激光共聚焦显微