简述发酵罐连续生产液体菌种工艺(1)
发酵罐生产平菇液体菌种技术
菌一 料一 上 料一 灭 菌一 冷 却 、 瓶一 接种 一 培 养 。 一配 并
２ 发 酵 罐 深 层 培 养 相 关 设 备 的配 置
在 利 用 发 酵 罐进 行 食 用 菌 液 体 菌 种 生 产 的 过程 中 ，需要
较少 ， 萌发 均 匀迅 速 。
文章 编 号 １ ｏ 一 ３ ７ ２ １ ） ３ ｏ ５ — ２ ｏ ｏ ８５ （ｏ ０ ｏ 一 ｏ ｌ ｏ
随着 工 厂 化 和 标 准 化 生产 的呼 唤 ，液 体 菌 种 逐 渐 被 应用
到 食 用 菌领 域 。 同 菌种 要 求 的发 酵 工 艺 参 数有 所不 同 ， 目 不 且 前 国内 开 发 的食 用 菌 专 用 发 酵 罐不 同 于工 业 微 生 物 发 酵 用 的
１ 平 菇 液体 菌 种 生产 工艺 流 程
发 酵 罐 的 清 洗 和 检 查一 煮 罐 、空 气 过 滤 器 及 无 菌 水 灭
５ 接 种 及 培 养 参数 的设 定
当培养 液冷 却 到 ２ ℃时 ， ６ 调整 放气 阀至罐 压降 到 ０ ５Ｍ ａ ． Ｐ ， ０ 在 火 焰 保 护 下 将 已 并 瓶 的液 培专 用 种 投 入 发 酵 罐 ，接种 量 为 ４ （／） ％ ｖ ｖ 。设 置 发 酵 温度 为 ２ ℃ ， 压 ００ ａ 调 整 空 气 流 ５ 罐 ．３ＭＰ ，
培 养 。 种 方 法 制成 的菌 种 ， 球 大小 不一 ， 不 容 易 打散 。 这 菌 且 现
７ 发 酵 液 质 量检 查项 目
７１ 菌 液颜 色和 气 昧 的检 查 正 常 情 况 下 ， 液 初 期 略 显 浑 ． 菌
液体菌种发酵罐生产工艺流程
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木耳液体菌种制作规程讲解
液体菌种制作规程工艺流程：斜面菌种→初级摇瓶种→二级摇瓶种→发酵罐深层发酵种→接种一、摇瓶种的制作1斜面菌种准备：马铃薯200克（去皮切块煮沸过滤取滤液），蔗糖20克，麸皮30克（煮汁过滤取滤液）二氢钾2克，硫酸镁1克，琼脂20克，VB1 10毫克，水1000毫升。
25度培养7天备用。
2、初级摇瓶制作①配方土豆200克葡萄糖20克酵母膏2克蛋白胨3克磷酸二氢钾2克硫酸镁1克V B110毫克水1000毫升。
（配方2：玉米粉4%，蔗糖3%，麸皮2%，酵母膏0.5%，2氢钾0.25%，硫酸镁0.1%，VB1 0.01%，豆油0.05%）。
②制作：土豆去皮切成薄块，煮沸后保持20分钟，四层纱布过滤后取滤液，补足1000毫升水，称取其他成份，与土豆液充分搅匀然后装入三角瓶。
初级摇瓶采用500ml三角瓶，装入200ml,放入玻璃球5粒（0.5cm 直径）用二层纱布包裹制作棉塞，塞紧棉塞后再用二层纱布外层加报纸做罩，扎紧瓶胫，防止摇动时棉塞活动。
③灭菌：把三角瓶放入立式高压锅，加足水紧好盖，开启放气阀，接通电源，有蒸汽冒出时关闭放气阀，待压力表达到0.05MPa时,断掉电源,打开放气阀,放冷空气至压力表回0，再关闭放气阀，接通电源，当压力表显示0.11 MPa，温度达到121℃后开时计时，保持45min。
断电使其自然降至0.02 MPa时放气归0，趁热微开盖，使剩余蒸汽烘干棉塞，然后出锅降温至25℃即可接种。
④接种：首先，封闭接种室，用开启紫外线灯30分钟，再用臭氧灭菌器灭菌60分钟或用烟雾剂每立方5克熏蒸30分钟，进行接种环境灭菌。
把灭菌后的三角瓶放入超净台（或接种箱）,把斜面母种、工具、酒精灯、75%的酒精棉球瓶同时放入，母种用灭过菌的报纸遮盖，打开紫外线灯和无菌风开关，保持15min后，关闭紫外线灯进行接种。
操作人员应着干净的隔离衣，带好卫生帽、口罩，手洗净，用75%酒精擦拭手、母种试管、工具，点燃酒精灯，灼烧工具及试管口20秒，在严格无菌操作程序下，把斜面菌种切割成0.5厘米小块（不带培养基），移入三角瓶中，使其浮在液面，一般接入5-6块，塞好棉塞，接完后重新封好棉塞罩，放到25℃恒温环境净置培养72小时。
食用菌液体菌种生产方法(发酵罐法)
食用菌液体菌种生产方法（发酵罐法）传统菌种生产工艺，一般是由试管母种扩繁成二级种、三级种，生产周期长、污染率高、成本高、需大量人工、管理困难。
液体菌种生产具有纯度高、活力强、繁殖快的特点，接种到培养料内有流动性好、萌发点多，发菌迅速等特种点。
应用于生产与固体菌种相比有以下优点：1．菌种生产周期短。
固体种一般需25—40天，而液体种仅需3—7天。
2．接种后，萌发点多萌发点多、发菌快、出菇周期短。
接种24小时菌丝布满料面，3—15天长满菌袋，一般品种10天左右可出菇。
3．接种方便、成本低。
用液体菌种接种一般每袋成本是1—3分，每人每小时可接800袋以上，提高效益4—5倍。
4．适宜工厂化生产。
可直接用于栽培料进行出菇，大批量生产菌袋。
为食用菌集约化、标准化生产创造了条件。
因此，适宜我国国情的液体菌种设备的出现，必将在食用菌生产领域引发一场新的革命。
液体菌种具有固体（颗粒）菌种无可比拟的优势，但是液体菌种生产设备是近几年刚发展起来并逐渐成熟的，因此很多人对此很陌生。
在这里我们对此进行简单介绍一、液体菌种设备基本原理任何一种食用菌自身的生长必须满足其对温度、湿度、需氧量、养分等的需要，同时必须避免杂菌感染。
在深层发酵技术上称之为选择性发酵技术，如啤酒生产技术当属此例，而白酒生产则是生物菌群发酵技术。
液体菌种发酵设备（包括四大系统，温控系统由控制器、电热管等组成；供气系统由空气压缩机、输送管道、空气过滤器等组成；冷却系统由热交换器、进出水管道组成；搅拌系统由射流器、提升管等组成。
二、液体菌种生产的关键技术1、溶氧量液体菌种生产中最关键的是培养液中氧的溶解量，因为在菌丝生长过程中，必须不断的吸收溶解其中的氧气来维持自身的新陈代谢，氧气在液体（水）中的溶解量与压力、温度有关，同时与培养液的接触面积、渗透压有很大的关系。
因此我们设计发酵设备时有效地解决了这些问题，如安装射流器使气泡细碎度增加等。
2、空气过滤技术的关键就是保证进入的空气无菌度高，因此必须选择孔径小、材料先进的过滤膜。
液体菌肥生产工艺
液体菌肥生产工艺
液体菌肥的生产工艺一般包括以下几个步骤：
1. 菌种培养：选择适合的菌种，进行菌种的培养和繁殖。
常用的菌种有免疫活性菌、氮固定菌、腐生菌等。
2. 发酵培养：将培养好的菌种接种到发酵罐中，添加适当的培养基，控制好温度、酸碱度、通气量等条件，进行真菌发酵培养。
3. 调控发酵过程：根据菌肥生产的需求，可以进行一些调控，如添加适宜的碳源和氮源，调整酸碱度和营养元素等。
4. 发酵液分离：经过一段时间的发酵，菌体和培养液混合在一起。
需要将发酵液分离出来，常用的方法有离心法、滤液法等。
5. 液体菌肥的后处理：将分离出来的发酵液进行适当的处理，如调节一些指标，控制菌体浓度等。
可以根据不同的需求进行进一步的处理，例如添加营养元素、调整PH值等。
6. 包装和贮存：将经过处理的液体菌肥进行包装和贮存。
一般采用塑料瓶等无菌容器进行包装，然后进行密封和贮存。
以上是液体菌肥的一般生产工艺，具体工艺流程可能会因生产厂家和产品类型的不同而有所差异。
液体深层培养方法生产发酵产品主要工艺过程
液体深层培养方法生产发酵产品主要工艺过程液体深层培养是一种常用的发酵工艺，用于大规模生产各种发酵产品，如酒精、乳酸、酱油等。
它通过在液体培养基中添加适量的发酵菌种，控制温度、氧气供应和pH值等条件，使菌种在液体中快速繁殖和产生目标产物。
液体深层培养的主要工艺过程包括菌种接种、发酵培养、收获和提取等环节。
首先是菌种接种。
选择适宜的菌种，并在无菌条件下将菌种接种到预先配制好的液体培养基中。
菌种接种后，必须严格控制接种量，以确保发酵过程中的菌种数量适宜。
接下来是发酵培养。
在菌种接种后，将培养基装入发酵罐中，并控制好温度、氧气供应和pH值等条件。
温度的控制是非常重要的，不同的菌种对温度有不同的要求。
氧气供应也是必不可少的，因为很多发酵过程需要氧气来进行代谢和生长。
此外，pH值的控制也非常重要，过高或过低的pH值都会对发酵过程产生不利影响。
发酵过程中，菌种会快速繁殖，并在培养基中产生目标产物。
为了保证发酵效果，还需要控制好发酵罐内的搅拌速度和培养基的通气量等参数。
此外，还需要定期对发酵罐进行采样分析，以监测发酵过程中的菌种数量和产物浓度等指标。
当发酵过程达到一定的时间后，就可以进行收获和提取。
收获时，将发酵液从发酵罐中取出，并进行初步的固液分离。
然后，通过离心、过滤、浓缩等步骤，将目标产物从发酵液中提取出来。
最后，对提取得到的产物进行纯化和检测，以确保产品的质量和纯度。
总结起来，液体深层培养方法是一种常用的发酵工艺，它通过在液体培养基中添加适量的菌种，控制好温度、氧气供应和pH值等条件，使菌种在液体中快速繁殖和产生目标产物。
主要的工艺过程包括菌种接种、发酵培养、收获和提取等环节。
通过严格控制这些环节，可以获得高质量的发酵产品。
液体菌种的制作及使用方法
液体菌种的制作及使用方法液体菌种的制作及使用方法随着食用菌生产的发展,食用菌制种方法在传统固体制作的基础上在不断的改进和提高,其中液体菌种的制作便是其中之一。
液体发酵技术是现代生物技术之一，起源于美国。
它是指在生化反应器中，模仿自然界将食药用菌在生育过程中所必需的糖类、有机和无机含有氮素的化合物、无机盐等一些微量元素以及其它营养物质溶解在水中作为培养基，灭菌后接入菌种，通入无菌空气并加以搅拌，提供食用菌菌体呼吸代谢所需要的氧气，并控制适宜的外界条件，进行菌丝大量培养繁殖的过程。
工业化大规模的发酵培养即为发酵生产，亦称深层培养或沉没培养。
液体菌种由于具有生产规模化、控制自动化、生长无菌化、发菌高速化的生产应用优势,为食用菌产业化的发展提供了良好的种源条件,是食用菌产业化发展的必然方向,已被业内人士所看好。
液体菌种是用液体培养基培养而成的菌种。
近年来，国内外正积极研究液体菌种的培养与利用。
与固体菌种相比，它具有菌种生产周期短、菌龄整齐一致、接种方便、接于固体菌料发酵快、适宜于工厂化生产等优点，因而受到了广大栽培者的欢迎。
目前我国已能进行深层发酵的食用菌有：香菇、平菇、凤尾菇、美味侧耳、鲍鱼菇、金针菇、黑木耳、猴头、草菇、蜜环菌、茯苓、滑菇和冬虫夏草等。
一、液体菌种的培养方法常见的有采用摇床来生产的摇瓶培养法和采用发酵罐来生产的深层培养法。
若少量生产，可以用摇瓶培养法。
深层培养需要一整套工业发酵设备，如锅炉、空气压缩机、空气净化系统、发酵罐等，故投资大，只适用于工厂化的大规模生产。
而摇瓶培养投资少，设备技术简单，适合一般菌种厂生产使用。
本节主要介绍摇瓶培养的技术方法。
1、食用菌液体发酵的培养基根据培养基中组成的不同，可分为天然培养基和合成培养基。
天然培养基的组成均为天然有机物。
合成培养基则是采用—些已知化学成分的营养物质作培养基。
在生产上，还根据工艺将培养基分为孢子培养基、种子培养基及发酵培养基。
但无论如何划分，每一种培养基的组成中都离不开碳、氮、无机盐、微量元素、维生素和生长素等。
秀珍菇液体菌种制备技术
秀珍菇液体菌种制备技术一、工艺流程母种→原种（液体摇瓶）→生产种（罐体发酵）→料棒接种二、母种的制备1、母种培养基配方马铃薯（去皮）20％，葡萄糖2％，琼脂2％，水1000毫升，pH值5.5～6。
2、母种的制备及注意事项按配方准确称取原料，加热煮沸最后定容，分装试管，装入量约为试管长度的1／4～1／5，塞好棉塞。
使用高压灭菌锅灭菌，在温度121℃、压力0.11Mpa下灭菌半小时，注意一定要放净高压灭菌锅内的冷空气。
灭菌后，待培养基温度下降至60℃时，将成把的试管摆成斜面。
注意，不要让培养基粘湿棉塞。
要严格按照无菌操作规程进行接种，然后置于恒温箱中25℃左右恒温培养10～15天。
三、原种的制备1、原种培养基配方马铃薯（去皮）２０％、麦麸３％、葡萄糖２％、蛋白胨３‰、磷酸二氢钾２‰、硫酸镁１‰。
2、原种的制备及注意事项马铃薯去皮切片后与麦麸一起煮沸20分钟，过滤定容，加入其它原料，全部溶解后装入三角瓶。
三角瓶在使用前除清洗之外，还要进行空灭，灭菌方法与常规灭菌试管培养基相同。
每个瓶中放入5～10粒玻璃球（直径0.5cm），用棉塞塞紧瓶口，再用牛皮纸包裹后扎紧。
使用高压灭菌锅灭菌，在温度121℃、压力0.11Mpa下灭菌45分钟。
冷却后进行无菌接种，然后置于25℃恒温培养箱中静置培养72小时。
摇床培养时，温度25℃，转速140转/分钟，培养时间72～96小时。
四、生产种的制备1、生产种培养基配方马铃薯（去皮）２０％、麦麸２％、蛋白胨３‰、葡萄糖２％、磷酸二氢钾１‰、硫酸镁0.5‰、石膏0.5‰、琼脂２～３ｇ、酵母膏0.5‰、消泡剂１‰。
2、生产种的制备（1）清洗罐体发酵罐在每次使用后都必须进行彻底的清洗，去除罐内残存的菌球、菌块料液等杂物，保证罐内洁净。
（2）配制原料按照生产种培养基配方准确称取各种原料。
马铃薯去皮切片后与麦麸一起煮沸20分钟，过滤定容，再加入其它原料及消泡剂。
（3）灭菌将盛有培养基质的发酵罐推进灭菌仓，通入蒸汽进行灭菌，控制温度在121℃左右、压力为0.11Mpa，灭菌1个小时。
食用菌液体发酵罐制种技术
食用菌液体发酵罐制种技术食用菌制种主要有液体和固体两种制种方式。
液体制种是目前国际上通用的、先进的方法。
液体菌种具有生产周期短、用工成本低、菌丝活力强、接种后萌发吃料快、菌种在培养基中的流动性和分散性好、菌龄一致、出菇整齐、可缩短栽培时间等优点。
在对液体制种与固体制种经济效益分析比较中指出，液体菌种发育时间可以减少24d，接栽培袋菌丝满菌时间缩短约10d，污染率可以降低1.5%，成本利润率可提高42%。
液体菌种作为食用菌基料工厂化生产发展过程中的重要环节，具有重要意义。
而现在食用菌产业受资金和技术的限制，其规模化、工厂化生产仍然以固体菌种为主，液体菌种的应用只有少数较大规模工厂化生产的企业及少数栽培品种工厂化栽培中获得应用，液体菌种的优势完全没有发挥出来。
液体菌种在制作过程中对设备、技术的要求较高，液体菌种发酵罐的操作技术流程复杂，增加了使用者的生产难度。
我们将对食用菌液体菌种发酵罐的生产工艺、操作流程进行技术总结，为食用菌项目的液体菌种提供参考。
1、研发液体菌种发酵罐的构造液体菌种在发酵培养过程中需要充足的氧气，属好氧性发酵。
满足于好氧性发酵的生化反应器主要有两大类即机械搅拌通风发酵罐和气流搅拌发酵罐。
前者利用通风装置和搅拌装置将氧溶入发酵液中，因机械搅拌剪切力而对菌丝产生破坏作用，因此不适于栽培型菌种的应用。
而后者则利用外部供气装置将气体通入发酵罐内形成环流将氧溶入发酵液中，其特点是基质溶液分布均匀、具有较高的溶解氧速率和溶解氧效率、结构简单、易于加工和操作。
而气流搅拌发酵罐的构造主要由电控系统、气体输送系统、发酵培养系统三部分组成。
1.1电控系统。
由控制箱体、微型电脑、集成传感器、报警器、数码显示屏、控制开关等组成，可调控灭菌温度、时间、压力及培养温度等。
1.2气体输送系统。
由无油隔膜泵、气水分离器、空气过滤器、滤芯、止回阀、压力表、硅胶管等组成，可为发酵罐提供纯净、无菌的气源。
1.3发酵培养系统。
液体菌种生产的工艺流程
液体菌种生产的工艺流程液体菌种与固体菌种在生产工艺流程有着很大的差别，液体菌种对无菌操作要求更严，对技术人员的要求更高。
而且菌龄短、菌龄整齐一致，并且菌种生产量大，可以大规模生产菌种或栽培袋。
液体菌种的生产工艺流程专用试管母种→发酵罐专用母种→发酵罐液体菌种1.专用试管母种生产：液体菌种对试管的纯度要求很高。
生产前,先要将试管种进行纯化,不然很难生产出液体种。
纯化的方法有二种：固体生产法和菌种提纯法。
二者可任选其一。
2.专用母种生产：工艺流程培养基的配制→装瓶→灭菌→接试管种→专用母种专用母种分固体和液体两种。
从生产技术上看，液体专用母种要难一些，是用电磁搅拌器（当然也可以用摇瓶机）进行生产。
整个过程要3-5天时间，生产的液体种稍经加工就可以直接使用。
固体种生产时间要长些，约20天，保存的时间也长，运输方便。
二者的接种效果都是一样的。
3.发酵罐生产：工艺流程空气压缩→过滤↓配料→装罐→灭菌→冷却→接种→培养→液体种↑试管斜面种→三角瓶液体专用母种生产时要先进行培养料的配制。
配料时先将土豆去皮切片，与麸皮混合后用不锈钢锅煮后取汁，再将辅料KH2PO4、MgSO4等溶入，混匀后装入罐中加热，至125℃并维持40分钟左右进行灭菌，灭菌结束后用冷水冷却至培养温度，而后将并瓶后的三角瓶专用母种接上进行培养，培养时根据不同的菌种，设定适宜的温度。
培养期间应注意观察，并做好记录。
包括温度、压力、气流量、排出气体的气味等。
如遇到停电，排气阀自动关闭或人工关闭来保持罐中处于正压状态。
来电后重新启动，并打开排气阀继续培养。
培养过程中，可随时无菌操作采样分析，几天后待菌球密度合适（从视镜观察）即可接种。
2-6液体菌种制作简介
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液体发酵的主要作用
工业上液体发酵有着重要作用，是 食品工业、医药工业及国名经济的重 要组成部分；
1、生产液体菌种； 2、制备药物或提取生化制品； 3、制作食品或畜禽饲料等。
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摇床
种子罐和发酵罐
空气净化设备
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模块三
2-6
液体菌种简介
液体菌种特点 液体菌种制作工艺
一、液体菌种特点
概念 步骤 液体菌种 制备工艺 流程
无菌 空气 斜面 菌种
增加培养基 溶氧量
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状态 培养基呈液体状态 实质 培养基不添加琼脂等凝固剂
摇瓶 种子罐 培养 培养
1、培养条件易于控制，管理方便；
2、营养成分分布均匀，与菌丝 接触面大，菌丝生长整齐；
主要内容
1.液体菌种主要特点及作用
2.液体菌种制作工艺流程
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思考、讨论题
1、液体发酵有何意义？ 2、制作液体菌种有何作用？工艺 流程与固体菌种有何不同？
课外学习资源
1.黄毅.食用菌栽培. 北京：高等教育出社1998 2.中国食用菌菌种网
液体菌种制作过程
液体菌种的的制作过程一、母种纯化1、配方：1000ml为例（1）小麦（麦夫或豆芽）50克，土豆200克，葡萄糖20克，蛋白胨2克，琼脂18-20克，KH2 PO4 1.5克，MgSO4 0.75克，PH自然（6左右）（2）蔗糖24g，蛋白胨2g，酵母膏1g，2、制作小麦煮开花，土豆煮酥而不烂；琼脂剪碎，放入溶解，加入其他配料，总体积称到标准量，装入试管，进行常规灭菌（121℃，40分钟）。
3、接种将所用母种及新制的试管放入接种箱，灭菌20分钟后将手用75%的医用酒精擦洗（消毒），伸入接种箱等待5-10分钟再开始接种（接种前所有接种工具都要在酒精灯火焰上匀烧灭菌），在酒精灯火上方切取0.3cm²一小块菌丝，放入新培养基上，塞好试管口；放在该菌最适合的温度下培养。
4、培养在培养过程中，每天都要仔细逆光观察，发现有任何疑常现象都要淘汰不要。
二、摇瓶种子制作1、配方：1000ml为例a.可以用母种纯化配方（不加琼脂）b.土豆200克，黄豆8克（需打凝浆）或脱脂豆奶8克，葡萄糖30克，蛋白胨2克，KH2PO41.5克，MgSO4 0.75克。
c.玉米小麦各50克，蔗糖20克，葡萄糖10克，蛋白胨2克，酵母膏2克，KH2PO41克，MgSO4 0. 5克。
d．蔗糖24g，蛋白胨2g，酵母膏1g，KH2PO42g,MgSO4 1g, 豆浆50ml.2、制作将以上配方任选一种用类似母种的方法制成液体培养基，装入摇瓶，塞好瓶口，包上放潮纸，放入灭菌锅，封好锅口，打开放气阀，当有大量蒸气排出时关闭放气阀，温度升至121℃后，计时40分钟，让其自然冷却，压力归零时，打开灭菌锅盖，将一边掀起3-5cm，利用余热将棉塞烘干。
3、接种将摇瓶及纯化好的母种一起放入接种箱，灭菌后，去掉防潮纸，扭松棉塞，在酒精灯火焰上方，挑取0.3cm²的菌丝皮左手拿起棉塞,右手迅速将菌丝接入,然后立刻盖上棉塞,用同样的方法一个摇瓶接入15-20块,让其均匀地分布在液体表面。
用发酵罐生产食用菌液体菌种的流程揭秘
用发酵罐生产食用菌液体菌种的流程揭秘发酵罐是食用菌液体菌种生产流程的主要设备，发酵罐为液体菌的生长提供均匀、恒定的营养条件，主要包括提高溶氧浓度，对培养基进行充分混匀。
食用菌发酵过程中，菌丝体相互纠结成球状，所以在食用菌液体菌种发酵生产流程上发酵罐需保持干净，清洁，没有污染物。
食用菌液体发酵罐的发酵设备包括：温度控制系统、供气系统、冷却系统、搅拌系统组成。
食用菌液体菌种的生产流程是：发酵罐的清洗检查—发酵罐的消毒—配料—上料—灭菌—降温—发酵—培养—装瓶。
使用发酵罐注意事项1、当发酵罐的各个设备都能正常工作时，必须使用该系统。
2、对过滤器进行消毒时，流经空气过滤器的蒸汽压力不得超过0.17mpa，否则会损坏滤芯，造成过滤器容量损失。
3、发酵过程中，罐内压力不得超过0.17mpa。
4、在实际消耗过程中，当夹套被蒸汽预热时，进汽压力必须控制在设备工作压力范围内（不超过0.2mpa），否则会对发酵罐造成损坏。
5、在排空和实际排空时，必须将剩余的水排尽在发酵罐的护套内。
否则，发酵罐内筒可能被压缩，造成设备损坏。
此外，过多的冷凝水会导致培养基稀释，不能满足工艺要求。
6、发酵罐内的负压严禁在清除空罐和实际清除后的冷却过程中产生，以免对设备造成污染甚至损坏。
7、在发酵过程中，发酵罐的压力应保持在0.03-0.05mpa之间，以避免污染。
8、每次操作时，气管内的压力必须保持高于发酵罐内的压力，否则发酵罐内的液体会回流到过滤器内，堵塞滤芯或使过滤器失效。
9、如果遇到自己无法解决的问题，请直接联系发酵罐售后服务部。
切勿强行拆卸或修理发酵罐。
食用菌液体菌种生产流程上发酵罐的清洗：发酵罐在每次使用后或者再次使用前都必须进行彻底的清洗，除去发酵罐罐壁的菌球、料液及其他的污染物。
清洗后的发酵罐应达到罐内壁没有悬挂物，无残留的菌球、清洗后排放的水清澈没有污染物。
发酵罐的消毒：发酵罐的消毒就是对罐体进行高温的煮罐，新的发酵罐罐体在使用时必须进行煮罐消毒。
液体菌种生产流程
EM等菌种培养技术流程
一、液体菌种培养
1、一、二级种培养基配方：白糖 1.5L
糖蜜0.5L
磷酸二氢钾50g
轻质碳酸钙50g
味精下脚料1kg
甲壳素100g
水55L
2、菌种分别是：EM菌、枯草杆菌、硝化菌等。
3、制作方法：将55L水煮沸，加入培养基各组分，再次煮沸后，分装至25L 的塑料桶（每桶约19L），待冷却后分别接种1L，分别扩繁培养，一般3-7天即可用。
注：1）接种比例1：20。
2）枯草杆菌（是耐热菌）需趁热接入菌种培养。
3）用发酵罐培养菌种效果更佳。
二、菌种扩繁成1吨
1、培养基配方：白糖20kg
碳酸钙2kg
过磷酸钙2kg
味精下脚料10kg
糖蜜4-5L
甲壳素1L
在98L大不锈钢桶加入55L水煮沸，加入培养基物料组分，煮沸后趁热倒入2吨大桶中；连续煮2锅；放置30min，以达杀菌目的。
另外准备若干个大桶，装满水，用臭氧处理器消毒，静止放置1h后待用；向2吨大桶中倒入臭氧处理的无菌水，至半桶时，接种（8种菌之一,其中枯草杆菌最好用热水），接种比例1：80（约1.5%）。
乳酸菌和光合菌可以不用打气，其它6种菌接种2天后要补充新鲜空气，培养5天后可用。
玉木耳液体菌种生产技术规程
玉木耳液体菌种生产技术规程1．液体菌种生产工艺流程摇瓶空灭→摇瓶培养基的制作→灭菌→冷却→接种→培养→摇床培养→发酵罐清洗→发酵罐空灭→发酵罐培养基的生产→灭菌→冷却→接种→菌丝培养→接栽培袋→栽培袋培养2．摇瓶液体菌种的制备（1）摇瓶空灭使用1000毫升、耐126℃高温的无色或近无色的玻璃抽滤瓶，在压力0.15兆帕，温度121℃条件下灭菌30分钟。
（2）摇瓶培养基配方配方1：去皮马铃薯300克，葡萄糖20克，蛋白胨2克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁1克，消泡剂5毫升，水1000毫升，pH自然。
配方2：去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾3克，硫酸镁1.5克，蛋白胨2.5克，VB11毫克，水1000毫升，pH自然。
（3）摇瓶培养基的制备按培养基配方称取原料，先将去皮马铃薯切成小块，加热至沸腾维持20～30分钟，用纱布过滤定容后，将滤液放入锅中，加入其他原材料小火加热至溶解蒸煮至溶解，待培养基冷却后分装放入摇瓶，摇瓶液体种培养基装量应为容器体积的1/4，在摇瓶中放入一粒转子。
将瓶口和胶皮管口用棉塞塞紧，棉塞外要加盖4层纱布，灭菌时纱布外加盖牛皮纸防潮。
（4）灭菌、冷却与接种将摇瓶放入高压灭菌锅中，在压力0.15兆帕，温度121℃条件下灭菌30分钟，灭菌完毕后，应自然降压，灭菌时应防止棉塞被冷凝水打湿。
待培养基冷却后接种，在接种箱或者超净工作台中接种，接种前先用75%酒精或新洁尔灭溶液进行表面擦拭消毒，然后开紫外灯灭菌30分钟，在液体培液表面接4块黄豆大的母种菌种块，使菌丝面朝上，菌种块必须漂浮在液体上，接种结束后塞紧棉塞。
（5）培养将接种后的摇瓶先放入恒温箱中在25℃下静止培养2～3天，待接种块在培养液上长到1厘米时放入摇床培养，温度26℃，转速以调至有一分钱硬币大小的旋涡为基准，摇30分钟，停10分钟，自动控制，维持3～4天。
判断标准：摇瓶摇动后菌丝挂壁，培养液浑浊度达90%以上，如有臭味，则表明有杂菌污染，不可使用。
液体菌种制作
6.酸碱度
不同种类的食用菌都有一个最适酸碱度，例如，黑木耳的
最适pH为6.0-6.5、金针菇为6.3、香菇为4.5-6.5。
7.罐压 在发酵过程中罐压通常为0.2-0.7Kg/cm。 8.泡沫控制 在发酵过程中泡沫过多不利于发酵，目前大多数是加入
0.006%的泡敌做消泡剂消除泡沫。
9.发酵特点
发酵终点是否准确，应参考产物浓度、过滤浓度、氨基酸
六、液体菌种制作的主要参数
1.菌龄 菌龄与种子的活力密切相关。通常，摇瓶种子菌龄控制在 4-10d，一级种子和二级种子菌龄为48-96H。 2.接种量 一般地，食用菌深层发酵时的接种量为10-20%。 3.温度 通常在22-30℃生长最快，得率最高。
4.通气量 食用菌深层发酵的通气量以0.2-1.5通气体积/培养液体积 /min为宜。 5.搅拌速度 食用菌深层发酵的搅拌速度一般是180-500r/min。
食用菌为需氧菌，液体菌种培养需要增加氧 气的供应，因此，不断振荡有利于菌丝体的 快速生长。摇床是液体菌种生产常用的设备。
往复式播床：振荡方式为来回振荡 旋转式摇床：振荡方式为旋转
四、液体菌种制作的主要设备
2.种子罐和发酵罐 许多食用菌种类，其深层发酵培养的菌丝体可作为提取药 物成分或生化制品的材料。
四、液体菌种制作的主要设备
3.空气净化设备 4.培养基连续灭菌设备 包括配料罐、连消塔、维持塔、喷淋冷却器等。 5．供气设备 主要是蒸气锅炉及附属设备
五、液体菌种制作的主要工艺
1.种子制备 种子制备的目的是大量繁殖足够数量的、健壮的、高纯度 的种子 ①斜面菌种制备 。制备方法（培养基配方和操作步骤） 同试管斜面母种的制备一样。 ②摇瓶种子制备 主要操作步骤：称量→煮制→分装→灭菌→无菌检验→ 接种→振荡培养管理 ③一级、二级种子制备 一级种子罐通常为50-100L，二级种子罐为500-1000L。
木耳液体菌种制作规程
液体菌种制作规程工艺流程：斜面菌种→初级摇瓶种→二级摇瓶种→发酵罐深层发酵种→接种一、摇瓶种的制作1斜面菌种准备：马铃薯200克（去皮切块煮沸过滤取滤液），蔗糖20克，麸皮30克（煮汁过滤取滤液）二氢钾2克，硫酸镁1克，琼脂20克，VB1 10毫克，水1000毫升。
25度培养7天备用。
2、初级摇瓶制作①配方土豆200克葡萄糖20克酵母膏2克蛋白胨3克磷酸二氢钾2克硫酸镁1克V B110毫克水1000毫升。
（配方2：玉米粉4%，蔗糖3%，麸皮2%，酵母膏0.5%，2氢钾0.25%，硫酸镁0.1%，VB1 0.01%，豆油0.05%）。
②制作：土豆去皮切成薄块，煮沸后保持20分钟，四层纱布过滤后取滤液，补足1000毫升水，称取其他成份，与土豆液充分搅匀然后装入三角瓶。
初级摇瓶采用500ml三角瓶，装入200ml,放入玻璃球5粒（0.5cm 直径）用二层纱布包裹制作棉塞，塞紧棉塞后再用二层纱布外层加报纸做罩，扎紧瓶胫，防止摇动时棉塞活动。
③灭菌：把三角瓶放入立式高压锅，加足水紧好盖，开启放气阀，接通电源，有蒸汽冒出时关闭放气阀，待压力表达到0.05MPa时,断掉电源,打开放气阀,放冷空气至压力表回0，再关闭放气阀，接通电源，当压力表显示0.11 MPa，温度达到121℃后开时计时，保持45min。
断电使其自然降至0.02 MPa时放气归0，趁热微开盖，使剩余蒸汽烘干棉塞，然后出锅降温至25℃即可接种。
④接种：首先，封闭接种室，用开启紫外线灯30分钟，再用臭氧灭菌器灭菌60分钟或用烟雾剂每立方5克熏蒸30分钟，进行接种环境灭菌。
把灭菌后的三角瓶放入超净台（或接种箱）,把斜面母种、工具、酒精灯、75%的酒精棉球瓶同时放入，母种用灭过菌的报纸遮盖，打开紫外线灯和无菌风开关，保持15min后，关闭紫外线灯进行接种。
操作人员应着干净的隔离衣，带好卫生帽、口罩，手洗净，用75%酒精擦拭手、母种试管、工具，点燃酒精灯，灼烧工具及试管口20秒，在严格无菌操作程序下，把斜面菌种切割成0.5厘米小块（不带培养基），移入三角瓶中，使其浮在液面，一般接入5-6块，塞好棉塞，接完后重新封好棉塞罩，放到25℃恒温环境净置培养72小时。
简述发酵罐连续生产液体菌种工艺(1)
简述发酵罐连续生产液体菌种工艺连续发酵使用的发酵罐一般有电控箱，空气压缩机，煮料罐（带夹层），发酵罐（带夹层），过滤器（两套，四级），降温器，热交换器，接种枪及（空气、蒸汽、过料、出种）管道连接组成，各个管道一般用橡胶管、硅胶管、或不锈钢管连接，发酵罐大小一般为煮料罐的3倍，其使用制种技术过程以杏鲍菇为例介绍如下：1、空消1.1、洗罐新购的发酵罐或者使用过的发酵罐，在生产之前，都必须进行彻底的清洗后方可使用。
用过的发酵罐在罐体的内壁和管内所有接触液体菌种的管件表面都有可能粘附污物，洗罐的目的就是清除罐内的污垢和菌苔及培养料的残余物，疏通进气口，排料口等。
1.2、利用高温高压蒸汽进行发酵系统灭菌1.2.1、清洗干净后将其密闭完成向煮料罐加水至总容积的70%-80%，打开电源开关，将温度设定到121度，在发酵罐内加水至总容积的40%，将温度设定到118-120度。
1.2.2、达到设定温度后，关闭进入二级过滤器的空气总阀门，打开蒸汽总阀门，让蒸汽依次进入2、3、4级过滤器，最后进入发酵罐，对过滤器及无菌空气管道等部位进行灭菌，这时每隔五分钟左右排一次过滤器下面的冷凝水。
1.2.3、30分钟后，将煮料罐出料口阀门打开少许将其灭菌。
然后，打开进入过料管道的蒸汽总阀门，用蒸汽将过料管道灭菌，40分钟后（总时间）关闭进入二级过滤器的蒸汽阀门，打开空气总阀门，并将发酵罐的进气阀门关闭，打开空气压缩机，通入无菌空气吹干滤芯。
1.2.4、然后，打开接种枪开关，将发酵罐出种口阀门打开少许，对其预热，然后打开进入接种枪管道的蒸汽阀门，用蒸汽对出种管道及接种枪进行灭菌，30分钟后关闭接种枪开关，用75%酒精袋密闭备用，后将灌顶接种口及呼吸器打开少许对其灭菌30分钟后关闭灌顶所有阀门，用75%酒精棉球密封接种口。
1.2.5、最后，将罐内高温高压水从排污口，取样口不少于30分钟排出，当罐内压力低于0.05MPa后，打开进气阀门，通入无菌空气待罐体吹凉后保压备用。
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简述发酵罐连续生产液体菌种工艺连续发酵使用的发酵罐一般有电控箱，空气压缩机，煮料罐（带夹层），发酵罐（带夹层），过滤器（两套，四级），降温器，热交换器，接种枪及（空气、蒸汽、过料、出种）管道连接组成，各个管道一般用橡胶管、硅胶管、或不锈钢管连接，发酵罐大小一般为煮料罐的3倍，其使用制种技术过程以杏鲍菇为例介绍如下：1、空消1.1、洗罐新购的发酵罐或者使用过的发酵罐，在生产之前，都必须进行彻底的清洗后方可使用。
用过的发酵罐在罐体的内壁和管内所有接触液体菌种的管件表面都有可能粘附污物，洗罐的目的就是清除罐内的污垢和菌苔及培养料的残余物，疏通进气口，排料口等。
1.2、利用高温高压蒸汽进行发酵系统灭菌1.2.1、清洗干净后将其密闭完成向煮料罐加水至总容积的70%-80%，打开电源开关，将温度设定到121度，在发酵罐内加水至总容积的40%，将温度设定到118-120度。
1.2.2、达到设定温度后，关闭进入二级过滤器的空气总阀门，打开蒸汽总阀门，让蒸汽依次进入2、3、4级过滤器，最后进入发酵罐，对过滤器及无菌空气管道等部位进行灭菌，这时每隔五分钟左右排一次过滤器下面的冷凝水。
1.2.3、30分钟后，将煮料罐出料口阀门打开少许将其灭菌。
然后，打开进入过料管道的蒸汽总阀门，用蒸汽将过料管道灭菌，40分钟后（总时间）关闭进入二级过滤器的蒸汽阀门，打开空气总阀门，并将发酵罐的进气阀门关闭，打开空气压缩机，通入无菌空气吹干滤芯。
1.2.4、然后，打开接种枪开关，将发酵罐出种口阀门打开少许，对其预热，然后打开进入接种枪管道的蒸汽阀门，用蒸汽对出种管道及接种枪进行灭菌，30分钟后关闭接种枪开关，用75%酒精袋密闭备用，后将灌顶接种口及呼吸器打开少许对其灭菌30分钟后关闭灌顶所有阀门，用75%酒精棉球密封接种口。
1.2.5、最后，将罐内高温高压水从排污口，取样口不少于30分钟排出，当罐内压力低于0.05MPa后，打开进气阀门，通入无菌空气待罐体吹凉后保压备用。
2、液体培养基制作及灭菌2.1、配方杏鲍菇发酵罐常用配方：黄豆1%，淀粉0.5%，葡萄糖1%，蔗糖2%，蛋白胨0.15%，磷酸二氢钾0.15%，硫酸镁0.075%，消泡剂0.15%。
2.2、配制及灭菌2.2.1、培养基装量视煮料罐大小装入总容量的70-80%。
首先，将煮料罐内加水至淹没加热管3-5厘米后开始加热（水质太差需处理），黄豆提前浸泡后打浆与淀粉其他原料混合在一起，放在不锈钢或铝锅内熬成糊状母液。
2.2.2、当水加热至90度时加入消泡剂，并打开供氧机吹少量无菌空气后，加入母液，并用清水冲洗进料口。
2.2.3、当加热至95度时关闭供氧机，进料口向外排出大量蒸气时关闭灌顶所有阀门，将温控仪表设定到121度，将灭菌继电器设定到2400秒，打开计时开关。
2.2.4、在计时期间将降温器内加满冷水降温循环管道连接好，热交换器通入循环水，当温度升到121度后，将煮料罐顶部排气阀门及进料口阀门打开一点，让蒸汽排出一些对其灭菌。
2.2.5、灭菌计时结束，关闭顶部所有阀门，从罐底排污口以5-10分钟内排除300-500毫升培养基，然后打开煮料罐出料口阀门，让无菌液，通过降温器，热交换器进入发酵罐，无菌液打完后打开发酵罐进气阀门，通入无菌空气，压力调整到0.03-0.05MPa，过料管道要保持正压。
当罐内培养料温度达到杏鲍菇最适生长温度24度时即可接种。
3、接种及发酵培养3.1、无菌液打入发酵罐后要进行取样，检测培养料，灭菌系统是否达标，能否接种，接种前向发酵罐内通入12-24小时的无菌空气后取样，检测过滤系统是否达到无菌状态，能否接种。
3.2、经检验合格后开始接种，将培养好的杏鲍菇摇瓶种子在接种前(若是低温保藏菌种要先解冻）,用75%医用酒精将其出种铜管口浸泡10分钟以上，在火焰保护下打开接种口将摇瓶种子接入，接种时门窗要关闭以减少空气流通增加成功率。
3.3、接种操作一般二人配合进行，首先，用95%酒精浸湿的火环套在接种口上，打开排气阀门，然后，用镊子拿掉接种阀门口的酒精棉球打开接种阀门，第二人手扶摇瓶，将铜管口放入火焰内，第一人用镊子拔掉管头内的棉塞，第二人将铜管插入接种口内，斜提摇瓶接入菌种，接完后拔出铜管，关闭阀门去掉火环，接种口重新用75%酒精棉球封好。
3.4、完成后，打开供氧机，通入无菌空气，将温控仪温度设定到杏鲍菇最佳生长范围24度，罐压保持在0.03-0.04MPa，通气量前期1：0.3-0.5，后期按1：0.5-0.8进行深层发酵培养。
培养期间要定时观察及取样检测。
4、取样检测4.1、制取样培养基杏鲍菇取样培养基制作工艺流程为：A、配方（木屑79%，麦麸20%，葡萄糖1%）→拌料（将木屑与麦麸拌匀后，将葡萄糖加水融化均匀拌入，含水量55%。
）→装瓶（装入250毫升盐水，料面整平压实后3-5厘米，一般200克装8瓶）→擦瓶身、瓶口→ 塞棉塞→ 包防潮纸→高压灭菌2.5-3小时→风干棉塞→冷却→检验合格后收起备用；B、250毫升空盐水→擦瓶身、瓶口→ 塞棉塞→ 包防潮纸→高压灭菌40分钟→风干棉塞→冷却→检验合格后收起备用。
4.2、取样杏鲍菇液体菌种连续发酵取样检测，一般接种前及接种当天与补料当天，取到空瓶内后转接到PDA培养基上进行细菌检测，接种后第1天及补料后第1天开始取到木屑取样培养基上检测菌种活力及纯度。
其取样工艺流程为：将取样瓶用75%酒精浸湿棉塞，然后用10%以上双氧水或0.25%新洁尔灭溶液在处理一次，20分钟后二人配合取样，第一人手持火环点燃，第二人在火焰内从新洁尔灭瓶内拔出取样管，在火焰保护下放掉管内的残留菌液，第一人将火环套在待取样的瓶口上，用钳子拔掉棉塞，第二人将取样管插入瓶内打开取样阀放入适量液体菌种，动作要快要准，第一人迅速用棉塞封住瓶口，火环移入下一瓶，（一般每次每罐取两瓶）整个取样过程，取样管口不能离开火焰中心，取完后，把取样管口插入新洁尔灭瓶内，放回原处。
4.3、培养、检测细菌检测：把空瓶内取出的样液用无菌操作技术流程接入三支空白PDA试管后，放在30-33度条件下培养48小时后没有任何异常现象及细菌污染即为合格；菌种活力及纯度检测：将取完样的杏鲍菇取样瓶放在25度条件下，培养10小时后表面菌丝发白，24小时后菌丝开始吃料，48小时后吃料0.2厘米以上，表面菌丝洁白，生长有力，72小时后没有其它杂菌，即可使用。
5、补料因培养液中含有大量的颗粒状物质，在培养前期菌液较浑浊，但随着培养时间的延长，营养物质逐渐被利用，菌液变得越来越清澈。
菌种培养时，在发酵罐排气口可闻到杏鲍菇的香味，而染杂菌的培养液则散发出霉臭、酒精等异味。
经检测内菌丝纯度、活力、菌丝球多少和出菇能力等合格后即可补料。
补料量为加料至发酵罐容积的70%-80%。
补料后继续取样检测（补料方法同2）。
6、发酵培养6.1、待补料完成后，打开发酵罐进气阀门，通入无菌空气，将温控仪温度设定到24度，罐压保持0.03-0.04MPa，通气量前期1：0.3-0.5，后期按1：0.5-0.8进行深层发酵培养。
6.2、亦可根据生产需要通过调节温度高低，通气量大小控制培养时间的长短，培养期间要认真观察菌种的生长速度，菌液、PH值的变化及发酵罐是否正常工作等生产细节。
6.3、当罐内菌丝球密度达到视镜70-80%左右时，且培养液清澈，菌丝球较小并均匀，在发酵罐排气口可闻到杏鲍菇的香味无霉臭、酒精等酸臭异味即可用于接种生产。
7、不接种连续发酵培养7.1、连续发酵培养是在培养好的液体菌种接种生产时，在罐内留下5-15%左右液体菌种，作为母种，用补料的方法打入新的液体培养基，继续培育新的液体菌种。
7.2、经生产验证一次接种后如不染菌，不换品种连续发酵培育3-6个月不用再次接种，培育出的依旧是优质菌种。
7.3、为确保连续发酵成功率，最好每3-5天过滤器、10-15天接种管道，接种枪灭一次菌，具体方法与【空消】类似、空气压缩机2-3天、一级过滤器1天排污一次。
7.4、若几个发酵罐生产的是同一个品种，它们的菌种或料液是可以相互补充的，如需更换品种，用同【空消】一样的方法，对发酵系统进行灭菌，然后打入新的培养料，接入新的菌种即可。
8、个人观点8.1、液体菌种使用应注意8.1.1、液体菌种是悬浮在发酵罐内液体培养基中的单个菌丝球组成，具有菌龄一致，渗透性强，萌发早，吃料快等优点，但它不能长期存放，不适应异地运输，现做现用效果最好。
8.1.2、其接入料袋后菌丝与固体料直接接触，适宜的环境能加快吃料速度，提高成品率；反之影响菌丝生长；一般PH值偏高或偏低，培养料含水量过大都会影响菌丝生长，所以接液体菌种的培养料含水量比常规要低5-10%，PH值要在最适范围。
8.1.3、接种后要在最佳温度下培养，以利于菌丝尽快萌发定置，增强其抗杂能力，降低污染几率。
8.1.4、接种后每个菌丝球都暴漏在固体培养料表面，没有任何缓冲保护，所以搬动时要轻拿轻放，不要损伤菌丝，以免影响萌发。
8.2、选择液体培养基时应注意8.2.1、注意碳氮比的协调，氮源过多会引起菌丝生长过于旺盛，不利于代谢产物的积累。
碳源不足，又容易引起菌体衰老和自溶，碳、氮比不当，会影响菌丝按比例地吸收营养物质。
8.2.2、同一种原料因产地不同其营养成分有差异，这在氮源表现得较明显，如大豆、玉米浆、蛋白陈等，必须记下每一种原料的产地、批号、生产厂等，并对原料进行化学成分分析。
8.2.3、水质对发酵生产的影响也很大，自来水、地表水、河水、井水、雪水等，其中所含溶解氧、金属离子及酸碱度等均有差异。
另外，有的水中还含有较多的氯离了。
因此应对水质进行化学分析，以饮用水质为标准进行选择。
8.2.4、高温(或高压)灭菌会引起某些营养成分的破坏，特别是还原糖、氨基酸和肽类等共同加热时，会形成与—羟甲基糠醛及类黑精等物质。
赖氨酸最容易与糖发生反应，形成棕色物。
8.3、工厂化应用液体菌种应注意8.3.1、要选用专门适合食用菌菌丝生长的发酵设备，另外空气导管要便于拆卸清洗，最好采用耐高温透明塑料来替代钢管，便于发现污渍，罐体内的可视性尽可能强些。
8.3.2、在液体菌种生产上思想要高度重视，不抱侥幸心理，需制定严格的食用菌菌丝液体发酵无菌操作规程，并配备发酵所要求的环境设施，同时，摈弃液体菌种生产很简单、谁都可以操作的错误认识，必须配备具有较高专业素质的操作人员来进行生产。
8.3.3、运用液体菌种接种时，要制定适当的接种量，并严格控制接种量。
接种量大或小了在培养阶段液体菌种的优势体现将受到影响，甚至会转化为劣势。
8.3.4、食用菌菌丝与发酵工业的大多数微生物相比较，生长势更弱，对养分的竞争力差，许多工业发酵菌种相对于食用菌菌种来说，都是具有强势竞争力的杂菌，在同样发酵条件下，食用菌发酵更易污染。