五日生化需氧量作业指导书
五日生化需氧量(BOD5)的测定
五日生化需氧量（BOD 5）的测定1.用BOD 营养盐缓冲剂粉枕包2.选择样品体积。
详见样品容量3.用移液管轻轻搅匀样品。
向第4.向另一个BOD 瓶中加入稀释水。
这瓶就是稀释水空白。
准备稀释水。
详见稀释水准备。
选择。
一个BOD 瓶中加入最小采样量 注：如果最小采样量在3mL 左 的样品。
右，不需稀释直接测溶解氧。
再向另外4个BOD 瓶中加入不当测生活污水或沉降后的污水 同体积的样品。
做好标记，并等溶解氧浓度约为0mg/L 的样记录下每瓶水样的体积。
品时，这一步可以省略。
5.如果测试CBOD ，向每个瓶中6.向每个瓶中倒稀释水至瓶口7.小心地盖上瓶塞防止气泡。
按8.测试每个瓶中最初的溶解氧浓度。
使用电极、仪器或滴定 法。
若使用滴定法则需准备2套BOD 瓶。
记得测量稀释水空白的溶解氧 浓度。
加入2管硝化抑制剂（约 边缘，沿着瓶壁倒入以防产生 住瓶塞并上下颠倒瓶子数次以 0.16g ）。
阻止氮化合物的氧化， 气泡。
混匀液体。
结果是CBOD 。
9.小心地盖上瓶塞防止气泡。
10.在每个BOD 瓶上置一个塑 料盖。
将BOD 瓶置于20（±1）°C 的培养箱内培养5天。
11.5天后测每瓶中剩余溶解氧 12.计算BOD 值。
（详见计算方法——标准方法） 向每个 BOD 瓶内倒入稀释水作的浓度。
每瓶中剩余溶解氧的浓度至少 为水封。
应为1.0mg/L 。
稀释水准备•为了得到最好的结果，使用经过碱性高锰酸盐蒸馏的水。
•不要使用经离子交换柱所得的去离子水。
柱中的树脂(尤其是新柱)有时会释放有需氧量的有机物。
另外，细菌会在柱中滋生污染稀释水。
•在20°C条件下将蒸馏水储存在干净的容器里并放在培养箱中。
向容器中倒入蒸馏水至3/4体积，并摇晃容器使得空气进入水中饱和，或者较松地盖住容器并放置 24 小时或更久，以使氧气溶解。
•使用小型玻璃抽水泵或者气体压缩机使水中的空气饱和。
确保空气是经无菌过滤器过滤的。
五日生化需氧量作业指导书11
文件类型：作业指导书第01 版第0 次修改文件名称：BOD5的作业指导书文件编号：DLJCB/BOD5-201409-01 五日生化需氧量的测定（稀释法）指导书1 方法依据水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法HJ 505—20092 适用范围2.1 本标准规定了测定水中五日生化需氧量的稀释与接种的方法。
2.2 本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量的测定。
2.3 方法的检出限为0.5 mg/L，方法的测定下限为2 mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6 mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000 mg/L。
3 试剂和仪器3.1 试剂3.1.1 水：实验用水为符合 GB/T 6682 规定的3级蒸馏水，且水中铜离子的质量浓度不大于0.01 mg/L，不含有氯或氯氨等物质。
3.1.2 盐溶液3.1.2.1 磷酸盐缓冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）、21.8g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g七水合磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）和1.7g氯化铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至1000ml，此溶液在0~4℃可稳定保存6个月。
此溶液的pH值为7.2。
3.1.2.2 硫酸镁溶液，ρ(MgSO4）=11.0g/L：将22.5g七水合硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至1000ml，此溶液在0~4℃可稳定保存6个月，若发现任何沉淀或微生物生长应弃去。
3.1.2.3 氯化钙溶液，ρ(CaCl2）=27.6g/L：将27.6g无水氯化钙（CaCl2）溶于水中，稀释至1000ml，此溶液在0~4℃可稳定保存6个月，若发现任何沉淀或微生物生长应弃去。
3.1.2.4 氯化铁溶液，ρ(FeCl3）=0.15g/L：将0.25g六水合氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于水中，稀释至1000ml，此溶液在0~4℃可稳定保存6个月，若发现任何沉淀或微生物生长应弃去。
水中五日生化需氧量(BOD5)测定(标准操作规程作业指导书).doc
1.适用范围本测定规程规定了测定水中五日生化需氧量（BOD5）的稀释与接种的方法。
2.测试原理在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。
通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20+1） °C的暗处培养5d±4h或（2+5） d±4 h[先在0~4°C的暗处培养2 d, 接着在（20±1） °C的暗处培养5 d,即培养（2+5） d],分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5的形式表示。
3.仪器设备3.1生化培养箱：20±l°C。
3.2 溶解氧仪：0~20 mg/Lo3.3曝气装置。
3.4溶解氧瓶：300 mLo3.5滤膜：孔径为1.6呻。
3.6 一般实验室常用仪器和设备，玻璃容器需符合国家A级标准。
4.试剂除非另有说明，分析时均用符合国家标准的分析纯试剂。
4.1 一级水，文中所说的水均指一级水。
4.2接种液：可购买接种微生物用的接种物质，接种液的配制和使用按说明书的要求操作。
也可按以下方法获得接种液。
4.2.1未受工业废水污染的生活污水：化学需氧量不大于300mg/L，总有机碳不大于100 mg/Lo4.2.2含有城镇污水的河水或湖水。
4.2.3污水处理厂的出水。
4.2.4分析含有难降解物质的工业废水时，在其排污口下游适当处取水样作为废水的驯化接种液。
也可取中和或经适当稀释后的废水进行连续曝气，每天加入少量该种废水，同时加入少量生活污水，使适当该种废水的微生物大量繁殖。
当水中出现大量的絮状物时，表明微生物已繁殖，可用作接种液。
一般驯化过程需3~8do 4.3盐溶液4.3.1磷酸盐缓冲溶液：将8.5 g磷酸二氢钾、21.8 g磷酸氢二钾、33.4 g七水合磷酸氢二钠和1.7 g氯化铉溶于水，稀释至1000 mL,此溶液在0~4°C可稳定保存6个月。
化学需氧量 作业指导书
化学需氧量作业指导书化学需氧量（COD）作业指导书一、任务背景化学需氧量（COD）是衡量水体中有机物含量的重要指标，对于评估水质和确定废水处理工艺具有重要意义。
本次作业旨在通过实验测定水样的COD值，并掌握COD的测定原理和方法。
二、实验原理COD是指在强氧化剂的作用下，有机物被完全氧化所需的化学氧化剂的量。
COD测定常用的方法有氧化剂法和氧化还原法。
本实验采用氧化剂法，其中常用的氧化剂是高锰酸钾（KMnO4）。
三、实验步骤1. 实验前准备a. 准备所需试剂和仪器设备：高锰酸钾溶液、硫酸、试剂瓶、烧杯、移液管等。
b. 清洗试剂瓶和烧杯，确保无杂质残留。
c. 校准分析仪器：使用标准溶液进行仪器的零点和量程校准。
2. 样品处理a. 采集水样：选择代表性的水样，避免表面污染和杂质的干扰。
b. 过滤水样：使用滤纸或滤膜过滤水样，去除悬浮物和固体颗粒。
3. COD测定a. 取一定体积的过滤后的水样，加入已知浓度的硫酸溶液，使其酸化。
b. 加入适量的高锰酸钾溶液，使溶液呈现粉红色。
c. 将溶液倒入反应瓶中，加入少量氯化银催化剂。
d. 将反应瓶密封，放入预热的消解仪中，进行加热消解。
e. 消解结束后，取出反应瓶，冷却至室温。
f. 使用紫外分光光度计测定溶液的吸光度，记录吸光度值。
4. 数据处理a. 利用标准曲线法，根据吸光度值计算COD浓度。
b. 计算样品的COD值：COD浓度 = （吸光度值 - 空白吸光度值）/ 标准曲线斜率。
四、实验注意事项1. 实验操作时要佩戴防护眼镜和实验手套，避免化学品直接接触皮肤和眼睛。
2. 实验过程中要注意安全，避免发生溅洒和烧伤等意外事故。
3. 实验仪器设备要保持干净和整洁，避免杂质的干扰。
4. 实验前要校准仪器，确保测量结果的准确性。
5. 实验结束后，要妥善处理废液和废弃物，遵守环保规定。
五、实验结果分析根据实验测得的COD值，可以评估水样中有机物的含量。
较高的COD值表明水样中有机物含量较高，水质较差；较低的COD值则表示水样中有机物含量较低，水质较好。
五日生化需氧量作业指导书
五日生化需氧量作业指导书( 依据标准: GB/T7488-1987 )1含义及有关质量或排放标准1.1 五日生化需氧量含义五日生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。
条件为20±1°C 培养5天，分别测定样品培养前后的溶解氧，两者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升表示。
)的地表水质量1或污水排放标准2-31.2 五日生化需氧量(BOD5注：1-地表水环境质量标准（GB3838-2002）2-中华人民共和国污水综合排放标准（GB8978-1996）3-上海市污水综合排放标准(DB31/199-1997)2分析方法稀释接种法 (GB7488-87) 2.1 适用范围本方法适用于BOD5大于或等于2mg/L并且不超过6000 mg/L的水样。
BOD5大于6000 mg/L的水样仍可用本方法，但由于稀释会造成误差，有必要要求对测定结果做慎重的说明。
本试验得到的结果是生物化学和化学作用共同产生的结果，它们不象单一的、有明确定义的化学过程那样具有严格和明确的特性，但是它能提供用于评价各种水样质量的指标。
本试验的结果可能会被水中存在的某些物质所干扰，那些对微生物有毒的物质，如杀菌剂、有毒金属或游离氯等，会抑制生化作用。
水中的藻类或硝化微生物也可能告成虚假的偏高结果。
2.2 定义生物化学需氧量（BOD）：在规定条件下，水中有机物和无机物氧化作用下所消耗的溶解氧（以质量浓度表示）。
2.3 原理将水样注满培养瓶，瓶盖塞好后应不透气，将瓶置于恒温条件下培养5天。
培养前后分别测定溶解氧浓度，由两者的差值可算出每升水消耗掉氧的质量，即BOD5值。
由于多数水样中含有较多的需氧物质，其需氧量往往超过水中可利用的溶解氧（DO）量，因此在培养前需对水样进行稀释，使培养后剩余的溶解氧（DO）符合规定。
只包括含碳物质的耗氧量和无机还原性物质的耗氧一般水质检验所测BOD5量。
BOD5实验作业指导书
水质五日生化需氧量（BOD5）的测定1、方法依据水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法，HJ505-20092、适用范围本标准规定了测定水中五日生化需氧量（BOD5）的稀释与接种的方法。
本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD5）的测定。
方法的检出限为0.5 mg/L，方法的测定下限为2 mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6 mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6 000 mg/L。
3、测定原理生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。
通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4 h或（2+5）d±4 h［先在0～4℃的暗处培养2 d，接着在（20±1）℃的暗处培养5 d，即培养（2+5）d］，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5形式表示。
若样品中的有机物含量较多，BOD5的质量浓度大于6 mg/L，样品需适当稀释后测定；对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化处理等的废水，在测定BOD5时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。
当废水中存在难以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微生物引入水样中进行接种。
4、试剂本标准所用试剂除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯化学试剂。
4.1 水：实验用水为符合GB/T 6682规定的3级蒸馏水，且水中铜离子的质量浓度不大于0.01 mg/L，不含有氯或氯胺等物质。
4.2 接种液：可购买接种微生物用的接种物质，接种液的配制和使用按说明书的要求操作。
也可按以下方法获得接种液。
4.2.1 未受工业废水污染的生活污水：化学需氧量不大于300 mg/L，总有机碳不大于100 mg/L。
五日生化需氧量的测定
五日生化需氧量的测定一、原理生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在于水中的某些可氧化物质，主要是有机物质所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。
分别测定水样培养前的溶解氧含量和在20±1℃培养五天后的溶解氧含量，二者之差即为五日生化过程所消耗的氧量（BOD5）。
二、仪器1．恒温培养箱。
2．5—20L细口玻璃瓶。
3．1000—2000mL量筒。
4．玻璃搅棒：棒长应比所用量筒高度长20cm。
在棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并带有几个小孔的硬橡胶板。
5．溶解氧瓶：200—300mL，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。
6．虹吸管：供分取水样和添加稀释水用。
三、试剂1．磷酸盐缓冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4），21.75g磷酸氢二钾(K2HPO4)，33.4g 磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)和1.7g氯化铵(NH4Cl)溶于水中，稀释至1000mL。
此溶液的pH 应为7.2。
2．硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁(MgSO4·7H2O) 溶于水中，稀释至1000mL。
3．氯化钙溶液：将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释至1000mL。
4．氯化铁溶液：将0.25g氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水，稀释至1000mL。
5．盐酸溶液(0.5mol/L):将40mL(ρ=1.18g/mL)盐酸溶于水中，稀释至100mL。
6．氢氧化钠溶液(0.5mol/L)：将20g氢氧化钠溶于水，稀释至1000mL。
7．亚硫酸钠溶液(c1/2Na2SO3=0.025mol/L)：将1.575g亚硫酸钠溶于水，稀释至1000mL。
此溶液不稳定，需每天配制。
8．葡萄糖-谷氨酸标准溶液：将葡萄糖(C6H12O6)和谷氨酸(HOOC－CH2－CH2－CHNH2－COOH)在103℃干燥1h，各称取150mg溶于水中，移入1000mL容量瓶内并稀释至标线,混合均匀。
此标准溶液临用前配制。
化验室测定水质五日生化需氧量操作规程
化验室测定水质五日生化需氧量操作规程一、实验目的测定水样的五日生化需氧量（BOD5），了解水样的有机物污染程度。
二、实验原理五日生化需氧量（BOD5）是指一定温度下，在条件适宜的细菌作用下，有机物被生物氧化所需的氧量。
实验中，将水样与添加细菌的琼脂糖培养液混合并置于恒温器内，五天后再测定混合液中的溶解氧浓度，根据溶解氧浓度差计算得到水样的BOD5值。
三、实验仪器和试剂1.恒温器：可控制温度为20±1℃。
2.恒温水浴槽：用于调节实验所需恒定温度。
3.溶解氧电极：用于测量水样中溶解氧浓度。
4.密封玻璃瓶：容量为300mL，用于混合水样和琼脂糖培养液。
5.搅拌器：用于溶解氧的均匀分布。
6.pH计：用于测量水样的酸碱度。
7.琼脂糖培养液：配制培养细菌的营养液。
四、实验步骤1.准备实验设备并调节恒定温度为20±1℃。
2.选取适当的密封玻璃瓶，并清洗干净。
3.取300mL水样并过滤，以去除不溶物。
4.在过滤的水样中测量初始溶解氧浓度，并记录。
5.在密封玻璃瓶中加入200mL过滤的水样和100mL琼脂糖培养液。
6.用搅拌器均匀混合水样和琼脂糖培养液。
7.将密封玻璃瓶置于恒温器内，保持20±1℃的温度。
8.在五天后取出密封玻璃瓶，使用溶解氧电极测量溶解氧浓度。
9.计算BOD5值：BOD5=初始溶解氧浓度-五天后溶解氧浓度。
五、实验注意事项1.实验环境应保持清洁，避免外界有机物污染。
2.水样和琼脂糖培养液的配制要准确，避免对实验结果产生干扰。
3.实验过程中应严格控制温度，以确保实验条件一致。
4.混合水样和琼脂糖培养液时要充分搅拌，确保溶解氧均匀分布。
5.溶解氧电极的使用要准确、标定和校准，以获得准确的溶解氧浓度值。
6.实验过程中应注意个人安全，避免接触有害物质。
六、实验结果记录和分析1.记录水样的初始溶解氧浓度和五天后的溶解氧浓度。
2.计算水样的BOD5值，并用于分析水样的有机物污染情况。
化学需氧量 作业指导书
化学需氧量作业指导书化学需氧量（Chemical Oxygen Demand，简称COD）作业指导书一、任务背景化学需氧量（COD）是评价水体有机物污染程度的重要指标之一，也是衡量废水处理效果的关键参数。
本次作业旨在通过实验测定水样中的COD值，并掌握COD测定的基本原理、方法和操作步骤。
二、实验原理COD是水样中有机物氧化所需的化学氧化剂的量，常用高锰酸钾（KMnO4）作为氧化剂。
在酸性条件下，KMnO4与水样中的有机物发生氧化反应，KMnO4被还原为Mn2+离子，根据KMnO4消耗的量可以计算出水样中的COD值。
三、实验步骤1. 实验前准备：a. 准备所需试剂和仪器设备，包括高锰酸钾溶液、硫酸、石英消解管、恒温水浴等。
b. 根据实验要求，取适量水样并记录样品编号。
c. 根据实验要求，将水样进行预处理，如过滤、稀释等。
2. COD测定操作：a. 取适量经过预处理的水样，加入石英消解管中。
b. 加入适量硫酸，使水样酸化。
c. 在恒温水浴中加热水样，使其保持适宜的温度（一般为148℃）。
d. 在加热过程中，向水样中滴加预先标定好的高锰酸钾溶液。
e. 持续滴加高锰酸钾溶液，直到水样颜色由粉红色变为无色。
f. 记录滴加的高锰酸钾溶液的体积，计算COD值。
四、实验注意事项1. 实验过程中要注意安全，避免接触高锰酸钾溶液和浓硫酸，避免发生意外事故。
2. 水样的取样和预处理要按照实验要求进行，确保实验结果的准确性。
3. 加热水样时要控制好温度，避免温度过高或过低对实验结果的影响。
4. 滴加高锰酸钾溶液时要缓慢且均匀，避免溶液溅出或滴加过多导致结果误差。
五、实验结果处理1. 计算COD值的公式：COD（mg/L）= (V1 - V0) × C × 8000 / V其中，V1为滴定过程中高锰酸钾溶液的体积（mL），V0为滴定前高锰酸钾溶液的体积（mL），C为高锰酸钾溶液的浓度（mol/L），V为取样的体积（L）。
化学需氧量 作业指导书
化学需氧量作业指导书化学需氧量（Chemical Oxygen Demand, COD）作业指导书一、实验目的本实验旨在通过测定水样中的化学需氧量，了解水体中有机物的含量，评估水质污染程度。
二、实验原理化学需氧量是指水样中可被氧化剂氧化的有机物的总量。
实验中，首先将水样与含有强氧化性的高浓度钾二氧化铬（K2Cr2O7）溶液反应，有机物被氧化成二氧化碳和水。
然后，用铁氰化钾（K4Fe(CN)6）作为指示剂，在酸性条件下，剩余未反应的钾二氧化铬与铁氰化钾反应生成蓝色络合物。
通过测定蓝色溶液的吸光度，可以确定化学需氧量的含量。
三、实验步骤1. 准备工作：a. 清洗实验器材，确保无杂质。
b. 校准分光光度计，设置波长为420 nm。
c. 配制0.25 mol/L硫酸溶液和0.2 mol/L铁氰化钾溶液。
2. 样品处理：a. 取适量水样，过滤除去固体颗粒。
b. 将100 mL水样倒入250 mL锥形瓶中。
c. 加入2 mL硫酸溶液，使水样酸化。
d. 加入2 mL铁氰化钾溶液，混合均匀。
3. COD测定：a. 取一空白锥形瓶，加入2 mL硫酸溶液和2 mL铁氰化钾溶液。
b. 用分注器将0.2 mol/L硫酸溶液滴加到刻度线上，作为空白试剂。
c. 取一含有水样的锥形瓶，加入2 mL硫酸溶液和2 mL铁氰化钾溶液。
d. 用分注器将0.2 mol/L硫酸溶液滴加到刻度线上，与空白试剂体积相同。
e. 用玻璃棒搅拌试剂，使反应充分进行。
f. 将试剂放置在室温下静置2小时。
4. 吸光度测定：a. 打开分光光度计，设置波长为420 nm。
b. 用吸光度计读取空白试剂的吸光度值，并记录。
c. 用吸光度计读取含有水样的试剂的吸光度值，并记录。
5. 计算化学需氧量：a. 根据吸光度值，计算水样中的化学需氧量。
b. 使用标准曲线法或计算公式，将吸光度值转换为化学需氧量的浓度。
四、实验注意事项1. 实验过程中应佩戴实验手套、护目镜等个人防护装备。
五日生化需氧量BOD5的测定作业指导书
五日生化需氧量BOD5的测定作业指导书生活污水与工业废水含有大量有机物,这些有机物在水体中分解时要消耗大量溶解氧,从而破坏水体中氧的平衡,使水质恶化。
生化需氧量是属于利用水中有机物在一定条件下所消耗的氧,用来表示水体中有机物的含量的一个重要指标。
生化需氧量的经典测定方法,是稀释接种法。
稀释接种法：1、方法原理生化需氧量是指在一定条件下,微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程消耗溶解氧的量。
于恒温培养箱内在20 1℃培养5天,分别测定样品培养前后的溶解氧,二者之差既为BOD5值,以氧的mg/L表示。
本方法适用于测定BOD5范围:2mg/L<C BOD5<6000mg/L,当>6000时,会因稀释带来误差。
仪器：(1)恒温培养箱(2)5—20L细口玻璃瓶(3)1000—2000ml量筒(4)玻璃棒:50ml,棒的底端固定一个10号的带有几个小孔的橡胶塞。
(5)溶解氧瓶(碘量瓶)：250—300ml试剂：(1)磷酸盐缓冲溶液将8.5g磷酸二氢钾(KH2PO4),21.75g磷酸氢二钾(K2HPO4),33.4g七水合磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O),和1.7g 氯化铵(NH4Cl)溶于水中,稀至1000ml。
此溶液PH值为7.2(2)硫酸镁溶液将22.5g七水合硫酸镁(MgSO4·7H2O)溶于水中,稀至1000ml(3)氯化钙溶液将27.5g无水氯化钙溶于水中,稀至1000ml。
(4)氯化铁溶液将0.25g六水合氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水,稀至1000ml。
(5)盐酸溶液(0.5mol/L)将40ml浓盐酸溶于水, 稀至1000ml。
(6)氢氧化钠溶液(0.5mol/L)将20g氢氧化钠溶于水, 稀至1000ml。
(7)葡萄糖—谷氨酸标准溶液将葡萄糖和谷氨酸在103干燥1小时后,各称取150mg 溶于水中,移入1000ml容量瓶中稀至标线,临用前配制。
化学需氧量 作业指导书
化学需氧量作业指导书化学需氧量（Chemical Oxygen Demand，简称COD）是评估水体中有机物含量的重要指标之一。
本文将为您提供化学需氧量的作业指导书。
一、实验目的通过测定水样中的化学需氧量，了解水体中有机物的含量，评估水质的污染程度。
二、实验原理化学需氧量是指在强氧化剂存在下，有机物被完全氧化所需的氧化剂的量。
实验中常用的氧化剂为高锰酸钾（KMnO4）。
KMnO4在酸性条件下与有机物反应，被还原为无色的Mn2+离子，根据KMnO4的消耗量可以计算出水样中的化学需氧量。
三、实验步骤1. 准备工作：a. 清洗实验用具，保证无杂质。
b. 配制适量的硫酸，用于酸化水样。
2. 取样：a. 使用无菌瓶收集待测水样。
b. 尽量避免空气接触，以免有机物氧化。
3. 实验操作：a. 取适量水样，加入硫酸酸化，使水样酸性适宜。
b. 加入适量的高锰酸钾溶液，开始反应。
c. 在恒温条件下，反应2小时。
d. 反应结束后，用铁氰化钾溶液滴定剩余的高锰酸钾，直至溶液颜色变为浅粉色。
e. 记录滴定所需的铁氰化钾溶液体积。
四、数据处理1. 计算化学需氧量（COD）的浓度：COD（mg/L）= (V1 - V2) × C1 / V × 1000其中，V1为滴定所需的铁氰化钾溶液体积（mL），V2为空白试验所需的铁氰化钾溶液体积（mL），C1为铁氰化钾溶液的浓度（mol/L），V为取样体积（L）。
2. 根据国家相关标准，评估水质的污染程度：a. 优良：COD < 20 mg/Lb. 良好：20 mg/L ≤ COD < 50 mg/Lc. 一般：50 mg/L ≤ COD < 100 mg/Ld. 差：COD ≥ 100 mg/L五、实验注意事项1. 实验过程中要注意安全，避免接触高锰酸钾和酸性溶液。
2. 严格控制实验条件，保持恒温。
3. 实验用具要干净无杂质，以免影响实验结果。
4. 实验中的试剂用量要准确，避免误差。
化学需氧量 作业指导书
化学需氧量作业指导书化学需氧量（Chemical Oxygen Demand，COD）作业指导书一、实验目的：通过测定水样中的化学需氧量，了解水体中有机物的含量，评估水体的污染程度。
二、实验原理：化学需氧量是指水样中可被氧化剂（如高锰酸钾）氧化的有机物的总量。
实验中，将水样与过量的高锰酸钾溶液在酸性条件下反应，高锰酸钾消耗的氧量与水样中的有机物含量成正比。
通过测定高锰酸钾溶液的初始浓度和终点浓度的差值，计算出水样中的化学需氧量。
三、实验步骤：1. 准备工作：a. 清洗实验仪器和玻璃仪器，确保无杂质。
b. 校准高锰酸钾溶液的浓度。
c. 准备所需的水样，如河水、湖水等。
2. 实验操作：a. 取一定量的水样，加入适量的稀硫酸进行酸化处理，使水样的pH值降至2以下。
b. 取一定量的高锰酸钾溶液，加入水样中，使高锰酸钾的浓度略高于水样中的化学需氧量。
c. 根据高锰酸钾溶液的初始浓度和终点浓度的差值，计算出水样中的化学需氧量。
3. 数据处理：a. 记录高锰酸钾溶液的初始浓度和终点浓度。
b. 根据高锰酸钾溶液的消耗量，计算出水样中的化学需氧量。
c. 根据水样的体积，计算出单位体积的化学需氧量。
四、实验注意事项：1. 实验过程中要注意个人安全，避免接触到有毒或者刺激性物质。
2. 实验仪器和玻璃仪器要保持清洁，以避免杂质对实验结果的影响。
3. 高锰酸钾溶液要根据实验需要进行浓度的校准，确保浓度准确。
4. 水样的采集和处理要遵循相应的规范，以保证实验结果的准确性。
五、实验结果及分析：根据实验数据计算出的化学需氧量可以反映水样中有机物的含量，进而评估水体的污染程度。
化学需氧量越高，说明水体中的有机物含量越多，污染程度越严重。
根据实验结果，可以采取相应的措施进行水体的管理和保护。
六、实验总结：通过本次实验，我们学习了化学需氧量的测定方法，并了解了其在水体污染评估中的应用。
实验过程中，我们掌握了实验仪器的使用和数据处理方法，提高了实验操作和数据分析的能力。
化验室测定水质五日生化需氧量操作规程
化验室测定水质五日生化需氧量操作规程一、引用标准HJ505-2009水质五日生化需氧量(B0D5)的测定稀释与接种法标准二、方法原理生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。
通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在(20±1)o C的暗处培养5d±4h或((2+5)d±4h(先在0〜4℃的暗处培养2d,接着在(20±1)°C的暗处培养5d即培养((2±5)d),分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以B0D5形式表示。
三、试剂和材料1、水：实验用水为符合GB/T6682规定的3级蒸储水，且水中铜离子的质量浓度不大于0∙01mg∕1,不含有氯或氯胺等物质。
2、溶液配制(1)磷酸盐缓冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾(KH2P04)、21.8g磷酸氢二钾(K2HP04)、33.4g七水合磷酸氢二钠(Na2HP04.7H20)和17g氯化钱(NH4C1)溶于水中，稀释至IOOOnI1,此溶液在0〜4℃可稳定保存6个月。
此溶液的PH值为7.2o(2)硫酸镁溶液，P(MgS04)=11.0g∕1:将22.5g七水合硫酸镁(MgSO4.7H20)溶于水中，稀释至IOOOnI1,此溶液在0~4℃可稳定保存6个月，若发现任何沉淀或微生物生长应弃去。
若样品中的有机物含量较多，B0D5的质量浓度大于6mg∕1,样品需适当稀释后测定。
(3)氯化铁溶液，P(FeC13)=0.15g∕1:将0.25g六水合氯化铁(FeC13.6H20)溶于水中，稀释至IOOOm1,此溶液在0~4℃可稳定保存6个月，若发现任何沉淀或微生物生长应弃去。
3、盐酸溶液，C(HC1)=O.5mo1∕1:将40m1浓盐酸溶C1)溶于水中,稀释至IOOOm1o4、氢氧化钠溶液，C(NaOH)=O.5mo1∕1:将20g氢氧化钠溶于水中，稀释至IOOOm1o5、亚硫酸钠溶液,c(Na2S03)=0.025mo1∕1:将1575g亚硫酸钠c(Na2S03)溶于水中，稀释至IOOOnI1。
五日生化需氧量作业指导书(I)
五日生化需氧量的测定（稀释法）指导书1 方法依据水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法HJ 505—20092 适用范围2.1 本标准规定了测定水中五日生化需氧量的稀释与接种的方法。
2.2 本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量的测定。
2.3 方法的检出限为0.5 mg/L，方法的测定下限为2 mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6 mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000 mg/L。
3 试剂和仪器3.1 试剂3.1.1 水：实验用水为符合 GB/T 6682 规定的3级蒸馏水，且水中铜离子的质量浓度不大于0.01 mg/L，不含有氯或氯氨等物质。
3.1.2 盐溶液磷酸盐缓冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）、21.8g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g七水合磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）和1.7g氯化铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至1000ml，此溶液在0~4℃可稳定保存6个月。
此溶液的pH值为7.2。
硫酸镁溶液，ρ(MgSO4）=11.0g/L：将22.5g七水合硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至1000ml，此溶液在0~4℃可稳定保存6个月，若发现任何沉淀或微生物生长应弃去。
氯化钙溶液，ρ(CaCl2）=27.6g/L：将27.6g无水氯化钙（CaCl2）溶于水中，稀释至1000ml，此溶液在0~4℃可稳定保存6个月，若发现任何沉淀或微生物生长应弃去。
氯化铁溶液，ρ(FeCl3）=0.15g/L：将0.25g六水合氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于水中，稀释至1000ml，此溶液在0~4℃可稳定保存6个月，若发现任何沉淀或微生物生长应弃去。
3.1.3 稀释水：在5~20L的玻璃瓶中加入一定量的水，用曝气装置曝气2~8小时，使稀释水中溶解氧接近饱和。
曝气后静置至1小时，临用前每升水中依次加入磷酸盐缓冲溶液、硫酸镁溶液、氯化钙溶液、氯化铁溶液各1ml，并混合均匀。
化学需氧量 作业指导书
化学需氧量作业指导书化学需氧量（Chemical Oxygen Demand，COD）作业指导书一、任务背景化学需氧量（COD）是评估水体或者废水中有机物含量的重要指标。
本次作业旨在通过实验测定水样中的COD值，并了解COD的定义、测定方法和影响因素。
二、实验目的1. 掌握COD的定义和测定方法；2. 了解COD值的影响因素；3. 学会使用COD测定仪器和操作步骤；4. 分析实验结果并提出结论。
三、实验器材和试剂1. COD测定仪器：包括反应器、显色管、比色计等；2. 试剂：包括硫酸铜溶液、硫酸钾高锰酸钾溶液等。
四、实验步骤1. 样品处理：将待测水样进行预处理，如过滤、稀释等，以消除干扰物质的影响。
2. 反应器设置：将处理后的样品倒入反应器中，加入适量的硫酸铜溶液和硫酸钾高锰酸钾溶液，使溶液中的COD能够彻底反应。
3. 反应过程：将反应器放入COD测定仪器中，设定合适的温度和反应时间，使反应进行到尽可能彻底。
4. 显色管测定：取出反应器中的样品，将其倒入显色管中，使用比色计测定样品的吸光度。
5. 计算COD值：根据测得的吸光度值，使用标准曲线或者计算公式计算出样品的COD值。
五、实验注意事项1. 实验过程中应注意安全，避免接触有毒或者腐蚀性试剂；2. 操作仪器时要子细阅读使用说明书，按照要求进行操作；3. 样品处理过程中要注意避免样品的二次污染；4. 反应器和显色管等仪器要保持清洁，避免污染影响实验结果；5. 实验结束后要及时清洗仪器，保持其良好的使用状态。
六、实验结果分析1. 根据测得的COD值，可以判断水样中的有机物含量，评估水质的好坏；2. COD值的高低与水体或者废水中有机物的浓度成正比；3. COD值的变化还受到其他因素的影响，如温度、pH值、氧气浓度等；4. 通过对不同样品的COD值进行比较，可以得出有关水质的结论。
七、实验结论通过本次实验，我们成功测定了水样中的COD值，并了解了COD的定义、测定方法和影响因素。
五日生化需氧量
五日生化需氧量（BOD5）测定稀释与接种法1、原理：将水样注满培养瓶，塞好后应不透气，将瓶颈置于恒温条件下培养5天。
培养前后分别测定溶解氧的浓度，由两者之差可算出每升水消耗掉氧的质量。
即BOD5值。
由于多数水样中含有较多的需氧氧物质，其需氧量往往超过水中可利用的溶解氧（DO）量，因此在培养前，需对水样进行稀释，使培养后剩余的溶解氧符合规定。
（本方法适用于测定BOD5≥2mg/L 最大不超过6000mg/L的水样）2、仪器：培养瓶、培养箱（能控制在20±1℃）、测定溶解氧仪。
（所有玻璃器皿均需消毒并防止沾污）3、试剂：分析时，只采用用公认的分析纯试剂和蒸馏水或同等纯度的水（全玻璃装置中蒸馏的水或去离子水）水中含铜不应高于0.01mg/L，并不应有氯、氯胺、苛性碱、有机物和酸类。
（1）盐溶液：下述溶液至少可稳定一个月,应贮存在玻璃瓶内,置于暗处。
一旦发现有生物滋长迹象,则应弃去不用。
A：磷酸盐缓冲溶液：将8.5克磷酸二氢钾、21.75克磷酸氢二钾、33.4克七水磷酸氢二钠和1.7克氯化铵溶于约500ml水中,稀释至1000ml并混合均匀。
此缓冲溶液的PH应为7.2。
B：22.5g/L硫酸镁溶液：将22.5g七水硫酸镁溶于水，稀释至1L。
C：27.5g/L氯化钙溶液：将27.5g无水氯化钙溶于水稀释至1L。
(若用水合氯化钙,要取相当的量)D：0.25g/L氯化铁溶液：将0.25g六水氯化铁溶于水，稀释至1L。
（2）接种水：污水处理厂出水。
（3）稀释水：取每种盐溶液1ml,加入约500ml水中,然后稀释至1000ml并混匀,将此溶液置于20℃下恒温,曝气1h以上,采取各种措施,使其不受污染,特别是不被有机物质、氧化或还原性物质或金属污染,确保溶解氧浓度不低于8mg/L。
此溶液的5日生化需氧量不得超过0.2mg/L。
此溶液应在8小时内使用。
（4）接种的稀释水：根据需要和接种水的来源，向每升稀释水中加1.0-5.0 ml接种水,接种的稀释水pH应为7.2，BOD5值以在0.3～1.0mg/L之间。
五日生化需氧量测定
硫酸镁溶液。称取22.5g硫酸镁（MgSO4·7H2O）,溶 于水中，稀释至1000mL。
磷酸盐溶液。称取8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）、 21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g磷酸氢二钠 （NaHPO4·7H2O）和1.7g氯化氨（NH4Cl），溶于约 500mL水中，稀释至1000mL并混合均匀，此缓冲溶 液的pH应为7.2。
用同样方法配置另两份稀释比水样。
3、对照样的配置 另取两个有编号的碘量瓶加入稀释水或接种稀释
水作为空白。
4、培养 将各稀释比的水样，稀释水（或接种稀释水）空
白各取一瓶放入20+1℃的培养箱内培养5d，培养 过程中需每天添加封口水。
5、溶解氧的测定 参见实验 “水中溶解氧的测定”。
用碘量法测定未经培养的各份稀释比的水样和空白 水样中的剩余溶解氧。
葡萄糖-谷氨酸溶液。分别称取150mg葡萄糖和谷 氨酸（均于130℃烘过1h），溶于水中，稀释至 1000mL。
盐酸溶液，0.5mol/L。
氢氧化钠溶液，0.5mol/L。
稀释水。在20L玻璃瓶内加入18L水，控制水温在 20℃左右，用抽气或无油压缩机通入清洁空气 2~8h，使水中溶解氧饱和或接近饱和（20℃时溶 解氧大于8mg/L）。使用前，每升水中加入氯化钙 溶液、三氯化铁溶液、硫酸镁溶液和磷酸盐溶液各 1mL，混合均匀。稀释水pH值应为7.2，其BOD5值 应小于0.2mg/L。
四、实验步骤
1、水样的采集、存储和预处理 采集水样于适当大小的玻璃瓶中（根据水质情况而定），
用玻璃塞塞紧，且不留气泡。采样后，需在2h内测定；否 则，应在4℃或4℃以下保存，且应在采集后10h内测定。 用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调节pH值接近7。 游离氯大于0.10mg/L的水样，加亚硫酸钠或硫代硫酸钠除 去[见注意事项1]。 确定稀释倍数[见注意事项2]。
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五日生化需氧量作业指导书( 依据标准: GB/T7488-1987 )1含义及有关质量或排放标准1.1 五日生化需氧量含义五日生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。
条件为20±1°C 培养5天，分别测定样品培养前后的溶解氧，两者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升表示。
1.2 五日生化需氧量(BOD5)的地表水质量1或污水排放标准2-3注：1-地表水环境质量标准（GB3838-2002）2-中华人民共和国污水综合排放标准（GB8978-1996）3-上海市污水综合排放标准(DB31/199-1997)2分析方法稀释接种法(GB7488-87)2.1 适用范围本方法适用于BOD5大于或等于2mg/L并且不超过6000 mg/L的水样。
BOD5大于6000 mg/L的水样仍可用本方法，但由于稀释会造成误差，有必要要求对测定结果做慎重的说明。
本试验得到的结果是生物化学和化学作用共同产生的结果，它们不象单一的、有明确定义的化学过程那样具有严格和明确的特性，但是它能提供用于评价各种水样质量的指标。
本试验的结果可能会被水中存在的某些物质所干扰，那些对微生物有毒的物质，如杀菌剂、有毒金属或游离氯等，会抑制生化作用。
水中的藻类或硝化微生物也可能告成虚假的偏高结果。
2.2 定义生物化学需氧量（BOD）：在规定条件下，水中有机物和无机物氧化作用下所消耗的溶解氧（以质量浓度表示）。
2.3 原理将水样注满培养瓶，瓶盖塞好后应不透气，将瓶置于恒温条件下培养5天。
培养前后分别测定溶解氧浓度，由两者的差值可算出每升水消耗掉氧的质量，即BOD5值。
由于多数水样中含有较多的需氧物质，其需氧量往往超过水中可利用的溶解氧（DO）量，因此在培养前需对水样进行稀释，使培养后剩余的溶解氧（DO）符合规定。
一般水质检验所测BOD5只包括含碳物质的耗氧量和无机还原性物质的耗氧量。
有时需要分别测定含碳物质耗氧量和硝化作用的耗氧量。
常用的区别含碳和氮的硝化耗氧的方法是向培养瓶中投入硝化抑制剂，加入适量硝化抑制剂后，所测出的耗氧量即为含碳物质的耗氧量。
在5天培养时间内，硝化作用的耗氧量取决于是否存在的足够数量的能进行此种氧化作用的微生物，原污水或初级处理的出水中这种微生物的数量不足，不能氧化显著量的还原性氮，而许多二级生化处理的出水和受污染较久的水体中，往往含有大量硝化微生物，因此测定这种水样时应抑制其硝化反应。
在测定BOD5的同时，需用葡萄糖和谷氨酸标准溶液完成验证试验。
2.4 试剂分析时，只采用公认的分析纯试剂和蒸馏水或同等纯度的水（在全玻璃装置中蒸馏的水或去离子水），水中含铜不应高于0.01mg/L,并不应有氯、氯胺、苛性碱、有机物和酸类。
2.4.1接种水如试验样品本身不含有足够的合适性微生物，应采用下述方法之一，以获得接种水：a. 城市废水，取自污水管或取自没有明显工业污染的住宅区污水管。
这种水在使用前，应倾出上清液备用。
b. 在1L水中加入100g花园土壤，混合并静置10min。
取10ml上清液用水稀释至1L。
c. 含有城市污水的河水或湖水。
d. 污水自理厂出水。
e. 当待分析水样为含难降解物质的工业废水时，取自待分析水排放口下游约3～8km的水或所含微生物适宜于待分析水并经实验室培养过的水。
2.4.2 盐溶液下述溶液至少可稳定一个月，应贮存在玻璃瓶内，置于暗处。
一旦发现有生物滋长迹象，则应弃去不用。
2.4.2.1磷酸盐：缓冲溶液。
将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）、21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g 七水磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）和1.7g氯化铵（NH4Cl）溶于约500ml水中，稀释至1000ml并混合均匀。
此缓冲溶液的pH应为7.2。
2.4.2.2七水硫酸镁：22.5g/L溶液。
将22.5g的七水硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至1000ml并混合均匀。
2.4.2.3氯化钙：27.5g/L溶液。
将27.5g的无水氯化钙（CaCl2）（若用水合氯化钙，要取相当的量）溶于水，稀释至1000ml并混合均匀。
2.4.2.4六水氯化铁（Ⅲ）：0.25g/L溶液。
将0.25g六水氯化铁（Ⅲ）（FeCl3·6H2O）溶解于水中，稀释至1000ml 并混合均匀。
2.4.3 稀释水取每种盐溶液（2.4.2.1、2.4.2.2、2.4.2.3和2.4.2.4）各1 ml，加入约500ml 水中，然后稀释至1000ml并混合均匀，将此溶液置于20℃下恒温，曝气1h以上，采取各种措施，使其不受污染，特别是不被有机物质、氧化或还原性物质或金属污染*，确保溶解氧浓度不低于8mg/L。
*建议采用压缩空气瓶或采用空气不与任何润滑油接触的压缩机（隔膜泵压缩机）。
空气在用前应过滤和洗涤。
此溶液的5日生化需氧量不得超过0.2mg/L。
此溶液应在8h内使用。
2.4.4 接种的稀释水根据需要和接种水的来源，向每升稀释水（2.4.3）中加1.0～5.0ml接种水（2.4.1），将已接种的稀释水在约20℃下保存，8 h后尽早应用。
2.4.5 盐酸（HCl）溶液：0.5mol/L。
2.4.6 氢氧化钠（NaOH）溶液：20g/L。
2.4.7 亚硫酸钠（Na2SO3）溶液：1.575g/L，此溶液不稳定，需每天配制。
2.4.8 葡萄糖-谷氨酸标准溶液将一些无水葡萄糖（C6H12O6）和一些谷氨酸（HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH）在103℃下干燥1h，每种称量150±1mg，溶于蒸馏水中，稀释至1000ml并混合均匀。
此溶液于临用前配制。
2.5 仪器使用的玻璃器皿要认真清洗，不能吸有毒的或生物可降解的化合物，并防止沾污。
常用的实验室设备如下：2.5.1 培养瓶：细口瓶的容量在250～300ml之间，带有磨口玻璃塞，并具有供水封用的钟形口，最好是直肩的。
2.5.2 培养箱：能控制20±1℃。
2.5.3 测定溶解氧仪器*。
*溶解氧的测定可采用碘量法（GB 7489-87）。
2.5.4 用于样品运输和贮藏的冷藏手段（0～4℃）。
2.5.5 稀释容量：带塞玻璃瓶，刻度精确到毫升，其容积大小取决于使用稀释样品的体积。
2.6 样品的贮存样品需充满并密封于瓶中，置于2～5℃保存到进行分析时。
一般应在采样后6h之内进行检验。
若需远距离转运，在任何情况下贮存皆不得超过24h。
2.7 操作步骤2.7.1 样品预处理2.7.1.1样品的中和如果样品的pH不在6～8之间，先做单独试验，确定需要用的盐酸溶液（2.4.5）或氢氧化钠溶液（2.4.6）的体积，再中和样品，不管有无沉淀形成。
2.7.1.2含游离氯或结合氯的样品加入所需体积的亚硫酸钠溶液（2.4.7），使样品中自由氯和结合氯失效，注意避免加过量。
2.7.2 试验水样的准备将试验样品温度升至约20℃，然后在半充满的容器内摇动样品，以便消除可能存在的过饱和氧。
将已知体积样品置于稀释容器（2.5.5）中，用稀释水（2.4.3）或接种稀释水（2.4.4）稀释，轻轻地混合，避免夹杂空气泡。
稀释倍数可参考下表。
时建议稀释的倍数测定BOD5E：生物净化过的污水；S：澄清过的污水或轻度污染的工业废水；C：原污水；I：严重污染的工业废水。
若采用的稀释比大于100，将分两步或几步进行稀释。
若需要抑制硝化作用，则加入ATU或TCMP试剂。
若只需要测定有机物降解的耗氧，必需抑制硝化微生物以避免氮的硝化过程，为此目的，在每升稀释样品中加入2ml浓度为500mg/L的烯丙基硫脲（ATU）（C4H8N2S）溶液或一定量的固定在氯化钠（NaCl）上的2-氯代-6-三氯甲基吡啶（TCMP）（Cl-C5H3N-Cl），使TCMP在稀释样品中浓度大约为0.5mg/L。
恰当的稀释比应培养后剩余溶解氧至少有1mg/L和消耗的溶解氧至少2mg/L。
当难于确定恰当的稀释比时，可先测定水样的总有机碳（TOC）或重铬酸盐法化学需氧量（COD），根据TOC和COD估计BOD5可能值，再围绕预期的BOD5值，做几种不同的稀释比，最后从所得测定结果中选取合乎要求条件者。
2.7.3 空白试验用接种稀释水（2.4.4）进行平行空白实验测定。
2.7.4 测定接采用的稀释比（见2.7.2）用虹吸管充满两个培养瓶至稍溢出。
将所有附着在瓶壁上的空气泡赶掉，盖上瓶盖，小心避免夹空气泡。
将瓶子分为二组，每组都含有一瓶选定稀释比的稀释水样和一瓶空白溶液（见2.7.3）。
放一组瓶于培养箱（2.5.2）中，并在暗中放置5天。
在计时起点时，测量另一组瓶的稀释水样和空白溶液中的溶解氧浓度。
达到需要培养的5天时间时，测定放在培养箱中那组稀释水样和空白溶液的溶解氧浓度。
2.7.5 验证试验为了检验接种稀释水、接种水和分析人员的技术，需进行验证试验。
将20ml葡萄糖-谷氨酸标准溶液（2.4.8）用接种稀释水（2.4.4）稀释至1000ml，并且按照2.7.4的步骤进行测定。
得到BOD5应在180～230mg/L之间，否则，应检查接种水。
如果必要，还应检查分析人员的技术。
本试验同试验样品同时进行。
2.8 结果的表示2.8.1 被测定溶液若满足以下条件，则能获得可靠的测定结果。
培养5天后：剩余DO≥1mg/L；消耗DO≥2mg/L。
若不能满足以上条件，一般应舍掉该组结果。
2.8.2 五日生化需氧量（BOD5）以每升消耗氧的毫克数表示，由下式算出：BOD5 =[( c1- c2)-( V t- V e)*( c3- c4)/ V t]* V t / V e式中：c1-在初始计时时一种试验水样的溶解氧浓度，mg/L；c2-培养5天时同一种水样的溶解氧浓度，mg/L；c3-在初始计时时空白溶液的溶解氧浓度，mg/L；c4-培养5天时空白溶液的溶解浓度，mg/L；V e-制备该试验水样用去的样品体积，ml；V t-该试验水样的总体积，ml。
若有几种稀释比所得数据皆符合2.8.1所要求的条件，则几种稀释比所得结果皆有效，以其平均值表示检测结果。
3方法指南3.1 稀释操作技术3.1.1稀释操作要求稀释水的质量对BOD5测定有重要意义。
生化反应因所含有机物的浓度及微生物的种类的不同而异。
因此，用稀释水进行空白试验加以校正是困难的，为此，要求其5日耗氧量小于0.2mg/L，并最好能控制在小于0.1mg/L。
为保证稀释水时应注意：自来水中常可含有某些挥发性有机物，从而残留在蒸馏水中，遇此情况时，应在蒸馏前作预处理除去。
离子交换树脂处理的水中常含有从树脂中分出的有机物而影响水的质量，不宜于作稀释水用。