怎样申报国家自然科学基金项目(黄荣峰讲座)

在研究内容、目标、拟解决的关键问题这部分，一方面把前面说的面临的主要问题 和解决问题的关键总结一下；另一方面要强调要点，在研究内容部分、拟解决的关 键问题部分列出个1，2，3来，让人一目了然。并且简要说明你打算怎么解决这些问 题。
关键：1）明白面临的主要问题是什么，问题的关键在哪里；2）你有解决问题的方 法。这就是底气！有了这两条，并且写得条理清楚，其它都是细节了。
学功能； 2）探讨GmNAC2 和GmNAC5 在大豆种子发育过程中的调 控途径以及在作物育种中的潜在利用价值。
拟解决的关键问题： 1）目前对于NAC 基因家族的研究报道多集中在模式植物的胚胎发育 以及耐逆方面作用。对于大豆而言，由于其种子含有高蛋白和高油份 （其种子组成与拟南芥明显不同），NAC 基因在大豆种子发育过程 中具体作用还不清楚，因此，本项目拟解决的关键问题之一是阐明 NAC 基因在大豆种子发育过程中的生物学功能。
五、研究目标和内容
1、研究目标要明确，提法要准确；内容要详细。关键 的问题要重点突出，且要有一定难度。不要多目标。 2、可行性分析是评委关注的重要方面，可按成熟的理 论基础、研究目标在现有技术条件下的可实现性、本单 位现有技术设备实验材料的完备、课题组成员完成课题 能力等几方面分层论述。 3、创新点要切合实际，指出国际国内研究的先进性和 创新性。 4、研究内容要集中，与研究目标紧密一致。要有特色。 每一项研究内容达到一个具体的目的，可从不同角度、 不同层次的研究内容的综合来实现总体目标。 5、关键问题：选择要准确
因参与调节？目前还不清楚，需要进一步深入研究。
这部分与后面的工作基础不要重复
• 申请者进一步的研究内容及意义
• 本项目拟在现有的工作基础上，对GmNAC2 和GmNAC5 进行深入研究， 探讨它们在大豆种子发育过程中的功能。主要包括：通过酵母系统研 究GmNAC2 和GmNAC5 的转录激活活性；通过原位杂交分析GmNAC2 和GmNAC5 在种子不同发育阶段精确的时空表达特性；通过基因过量 表达或RNAi 干涉技术获得转基因大豆植株，进而通过表型鉴定和细 胞学分析等技术了解GmNAC2 和GmNAC5 的生物学功能；并进一步应 用基因芯片分析技术和蛋白质组分析技术，同时在基因和蛋白水平比 较转基因植株和非转化植株种子发育过程中的基因和蛋白表达的差异， 从而阐明NAC 转录因子在大豆种子发育中的调控机制及其作用网络， 为大豆种子产量和品质的遗传改良提供理论依据。
GmNAC2 过量表达、GmNAC5 过量表达以及双基因过量表达的转基 因植株, 对转基因植株种子发育过程开展形态学和细胞学鉴定；二是 通过RNAi 技术, 获得具有GmNAC2 表达抑制、GmNAC5 表达抑制以 及双基因表达抑制的转基因植株，对转基因植株种子发育过程开展形 态学和细胞学鉴定。明确这两个基因的生物学功能；
• 重点项目应当体现有限目标、有限规模、重点突出的原则， 重视学科交叉与渗透，有效利用国家和部门现有重要科学 研究基地的条件，积极开展实质性的国际合作与交流。
• 重点项目按照五年计划进行整体布局，每年确定受理申请 的研究领域或研究方向，发布指南引导申请
申请书的组成部分
申请书
一、基本信息 二、项目主要成员 三、经费申请表 四、报告正文 五、签字和盖章
要明白面临的主要问题是什么、问题的关键在哪里，需要对要研究的领域有一个全 面深入的了解。读文献、参加学术会议、请教、还要自己慢慢体会。而找到解决问 题的方案，则需要深入研究和思考，科学问题急不得，觉得考虑成熟了，有了要写 的冲动，才去写，才能写出好的申请。
注意：
在研究内容上，要避免研究内容过多或空泛的现象，强化内容之 间的有机联系.
申报国家自然科学基金的 注意事项
黄荣峰 中国农业科学院生物技术研究所
报告提纲
• NSFC • 基金申请的注意事项 • 项目评议
生命科学部
生命科学部 资助范围涉及到生物学、生物资源、生态环境、 农业科学、基础医学等相关研究领域。
生命科学部各处的受理范围
生命科学一处 包括微生物学与植物学两个学科。主要资助 以微生物和植物为研究对象的生物学及相关 交叉科学的基础研究。
• 项目的立项依据
•
种子是生产上多数农作物的收获器官，其产量和品质的改良一直
是育种家关注的问题。而对种子发育进程的有效调控，很可能是提高
作物生产能力及改善品质的重要新途径。但是，种子的发育过程是一
个复杂的基因表达网络调控的结果，有众多的基因参与。目前对这个
复杂系统的分子机制的了解还相当肤浅。尽管在模式植物-如拟南芥 上作了一些探索，但在重要农作物-如大豆上的研究却很少。大豆是 重要的粮油兼用作物，其产量低（我国平均亩产120公斤）、品质良 （平均包含40%的蛋白质和20%的油脂，但含硫氨基酸不足），深入 了解大豆种子发育的分子机理对于该作物产量和品质的遗传改良有重
生命科学二处 包括生态学学科和林学学科，长期实验数据 的积累是这两个学科开展科学研究的基础。
生命科学部各处的受理范围
生命科学三处 生物化学、生物物理学与分子生物学，免 疫学，生物力学与组织工程。
生命科学四处 神经科学与认知科学与心理学，生理学与 整合生物学。
生命科学部各处的受理范围
生命科学五处 遗传学与生物信息学，细胞生物学，发
一、资助对象
• 基础研究 选准科学问题，结合科学发展前沿
基础性 探索性 科学性
• 应用研究
选择国民经济和社会发展中迫切需要解决关键科技问题
二、选题
新颖,针对重大的带有普遍意义的关键性或前沿性的课 题。
注意： 在项目选题上，结合我国农业生产实际问题，把握相关领域的国 内外最新研究进展，结合已有的工作基础，围绕某一个关键科学 问题开展深入的研究，体现项目的科学价值和创新性.
2.研究内容、研究目标,以及拟解决关键问题 （此部分为重点阐述内容）
在现已克隆的GmNAC2 和GmNAC5 基因的基础上，进一步开展：
4) GmNAC2 和GmNAC5 基因与其他基因的关系研究 一是在基因表达水平上，应用基因芯片技术比较转基因植株和非转化植株
种子发育过程特定时期(开花后5 天,15 天,25 天,35 天,45 天)的基因表达差异, 鉴定差异表达的基因；
面上项目
面上项目是自然科学基金资助体系中的主 要部分，其资助经费占自然科学基金项目 总经费的60%以上，主要支持科技工作者在 国家自然科学基金资助范围内自由选题， 开展创新性的科学研究，资助期限为4年。
重点项目
• 重点项目是国家自然科学基金研究项目系列中的一个重要 类型，支持从事基础研究的科学技术人员针对已有较好基 础的研究方向或学科生长点开展深入、系统的创新性研究， 促进学科发展，推动若干重要领域或科学前沿取得突破。
注意研究工作的连续性和系统性，逐步形成自己的研究特色。
研究内容、研究目标,以及拟解决关键问题 （此部分为重点阐述内容）
在现已克隆的GmNAC2 和GmNAC5 基因的基础上，进一步开展：
3) GmNAC2 和GmNAC5 基因在种子发育中的生物学功能研究 从两个方面进行研究。一是通过基因过量表达技术,获得具有
要意义（Boerma & Specht , 2004）。
• 国内外研究进展
• 在模式植物拟南芥上，通过分离种子性状突变体已鉴定了一些与种 子发育相关的重要基因。比如，研究发现部分MADS-box类转录因子 在植物胚胎发育中起着重要作用，其中AGL15可能控制胚胎发育和启 动胚的分化，并在胚成熟时抑制种子萌发 (Perry et al.,1999; Wang et al. 2002)；而AP2(APETELA2)则可能在调控种子的大小方面发挥一定的 作用，因为ap2突变体的种子明显增大，但这种调节机制还不清楚， 据推测可能是该基因突变后，糖代谢途径发生了变化(Ohto et al., 2005)。
育生物学与生殖生物学。
生命科学部六处 农业基础与作物学，食品科学。分设两个 学科评审组。
生命科学部各处的受理范围
生命科学七处 植物保护学，园艺学与植物营养学。
生命科学八处 畜牧学与草地科学，兽医学，水产学，动 物学。
国家自然基金委项目
自然科学基金按照资助类别可分为: 面上项目：平均80万元/项，合作研究单位不得超过2个，资助期限为4年。 重点项目：200万～400万元/项，平均为300万元/项，资助期限5年 。 重大研究计划 国家杰出青年科学基金,年200项，200万元/项，申请人的年龄45周岁。 优秀青年科学基金：年400项，200万元/项，平均100万元/项 ，资助期限为3-4年。女性申请人的年龄40周岁；男性申 请人的年龄限制维持未满38周岁。 青年科学基金：预计平均25万元/项 ，合作研究单位不得超过2个，资助期限为3年。女性申请人的年龄限制推迟至未满 40周岁；男性申请人的年龄限制维持未满35周岁。 青年科学基金-面上项目连续资助项目 地区科学基金：50万元/项，合作研究单位不得超过2个，资助期限由3年延长为4年。 海外及港澳学者合作研究基金 创新研究群体科学基金，资助期限为3年，资助经费600万元/项 。 国家基础科学人才培养基金 专项项目 联合资助基金项目 国际（地区）合作与交流项目
三、项目的创新性,这是项目的重中之重
1. 思路——即学术思想，这是主要的创新，要仔细 研究以往的资助项目，要关注动向，有适度的超前 意识，避免雷同和重复，要“旁开一寸”。 2. 研究内容——和研究目的要一致，要有能支持新 思路相应的新内容，体现出创新点和特色。
四、 立项依据，这是标书的重头之一
1. 国内外研究进展：要充分掌握最新动态，千万不 要遗漏重要的参考文献，对于不同观点的参考文献 更不能避而不谈。 2. 理论假说：这是学术思想创新的基础，提出的假 说要能自圆其说，科学性要强，要有相关资料的支 持或工作基础。 3. 研究意义和科学价值：要会延伸研究目标，逐条 列出其理论意义的重要性，应用价值及其迫切性和 对学科发展的促进作用等。
二是在蛋白质水平上，应用蛋白质组技术比较转基因植株和非转化植株种 子发育过程特定时期(开花后5 天,15 天,25 天,35 天,45 天)的蛋白表达差异,鉴 定差异表达的蛋白。进一步分析差异表达基因与差异表达蛋白的关系。
研究内容、研究目标,以及拟解决百度文库键问题 （此部分为重点阐述内容）
研究目标： 1）明确GmNAC2 和GmNAC5 在大豆种子发育中的生物
写基金申请也好、写学术论文也好，最重要的一条，是你自己要有写的冲 动：觉得这个想法、这个工作我非写出来不可！没有这个，你写的申请也 好、文章也好，别人读起来，就觉得没有底气。你自己都没有底气，怎么 让别人相信你能做出来！
要有底气，首要的就是对你要研究的问题有一个全面的、深入的了解,即 “项目的立项依据”这一部分要写好。国内外研究的大概描述，你要研究 的问题的来龙去脉，现在面临的主要问题是什么，问题的关键在哪里等等， 一环扣一环，层次分明、逻辑清楚。让人读起来马上对这个领域和你要研 究的问题有一个清晰的图像，让人有一种急于要看你打算怎么解决这些问 题的想法。
2）我们的前期研究表明，GmNAC2 和GmNAC5 在种子中表达量较高， 而在其他组织中表达量相对较少，且在种子不同发育时期的表达量也 不同。但对这两个基因之间及它们与其他基因间的关系还一无所知。 因此，本项目拟解决的关键问题之二是在转基因研究的基础上，结合 基因芯片和蛋白质组技术，探明GmNAC2 和GmNAC5 以及它们与其 他基因间的关系。
• 申请者的研究前期工作进展及进一步的研究方向
•
我们的前期研究也发现，两个NAC 同源基因可能参与了大豆种子
发育的进程（Meng et al, in press）。本项目组应用生物信息学结合分
子克隆技术从大豆中分离了6 个NAC 同源基因(GmNAC1 -GmNAC6)。
组织表达分析表明，GmNAC1 主要表达于根和花芽， GmNAC2 主要
表达于叶片、茎和发育中的种子，GmNAC3 在花芽中强烈表达，在种
子中表达较弱。GmNAC4 和GmNAC6 则表现为组成型表达。GmNAC5
主要表达于发育中的大豆种子，在花芽和荚皮中也有微弱的表达。进
一步分析发现：GmNAC2和GmNAC5 都在大豆种子代谢旺盛时期即 30-35DAF 的表达量最高，表明这两个基因的表达可能与种子发育状 态 密切有关，但它们是如何参与调节大豆种子发育进程的？有哪些基