云南农业大学硕士研究生培养计划(一)
云南农业大学草学学科博士研究生培养方案
云南农业大学草学学科博士研究生培养方案毕玉芬，罗富成，李元，黄必志，郭凤根，祖艳群，吴红芝，文亦芾，姜华（云南农业大学动物科技学院，云南昆明650201）摘要：云南农业大学草学学科博士研究生的培养目标是培养德、智、体、美全面发展，具有一定批判性思维和创新思维，能独立从事科学研究工作或独立承担专业技术或管理工作的高素质研究型人才。
关键词：草学；博士中图分类号：S81文献标识码：B 文章编号：2096－3971（2020）增刊－0032－05DOI ：10.3969/j.issn.2096－3971.2020.增刊.009收稿日期：2019－12－25作者简介：毕玉芬（1960－），女（蒙古族），教授，博士生导师，主要研究方向为草地植物资源与遗传育种。
1学科简介云南农业大学草业教育始于20世纪70年代，由饲草生产学课程逐步发展为完整专业。
草学专业创建于1999年；2000年联合云南省草地动物科学研究院申报获得草业科学硕士学位授予权；2001年学科被遴选为云南省省级重点学科，并于2007年通过验收；2011年学科获草学一级学科硕士和博士学位授予权，次年开始招收博士研究生；2016年学科被遴选为云南省一流建设学科，2019年入选云南省省级博士后科研流动站。
草学学科现有专任教师20名。
其中，博导8名，硕导14名，国家百千万人才1人，国务院和云南省政府特殊津贴专家2人，省市学术和技术带头人、教学科研带头人、技术创新及青年拔尖人才7人，云南省教学名师1人，云南农大百名青年学术技术带头人3人；具有博士学位者15人；11人为正高，5人为副高。
20名教师分别毕业于国内外11所高校或科研院所，14人具有国外留学经历。
草学学科已形成一支年龄、职称和学历结构合理，学缘结构较好，满足人才培养及学科发展需要的师资队伍。
此外，学科另有联合办学单位－云南省草地动物科学研究院牧草学兼职教师15名。
其中，正高8人，副高5人；博导1人，硕导4人；国务院和云南省政府特殊津贴专家4人；云南省学术和技术带头人5人；云岭学者、云岭产业技术领军人才各1人。
生长素输出载体蛋白ＰＩＮ１ 在作物根和胚中的亚细胞定位
㊀Ｇｕｉｈａｉａ㊀Ａｕｇ.２０２１ꎬ４１(８):１２１９－１２２５ｈｔｔｐ://ｗｗｗ.ｇｕｉｈａｉａ－ｊｏｕｒｎａｌ.ｃｏｍＤＯＩ:１０.１１９３１/ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０１９１２０２０武丽霞ꎬ韩丽ꎬ赵宜婷ꎬ等.生长素输出载体蛋白ＰＩＮ１在作物根和胚中的亚细胞定位[Ｊ].广西植物ꎬ２０２１ꎬ４１(８):１２１９－１２２５.ＷＵＬＸꎬＨＡＮＬꎬＺＨＡＯＹＴꎬｅｔａｌ.ＳｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｃａｒｒｉｅｒｐｒｏｔｅｉｎＰＩＮ１ｉｎｃｒｏｐｒｏｏｔａｎｄｅｍｂｒｙｏ[Ｊ].Ｇｕｉｈａｉａꎬ２０２１ꎬ４１(８):１２１９－１２２５.生长素输出载体蛋白ＰＩＮ１在作物根和胚中的亚细胞定位武丽霞１ꎬ２ꎬ３ꎬ韩㊀丽１ꎬ２ꎬ３ꎬ赵宜婷１ꎬ２ꎬ３ꎬ周㊀璇１ꎬ２ꎬ３ꎬ杜云龙１ꎬ２ꎬ３∗(１.云南农业大学植物保护学院ꎬ昆明６５０２０１ꎻ２.云南生物资源保护与利用国家重点实验室ꎬ云南农业大学昆明６５０２０１ꎻ３.云南农业大学农业生物多样性与病害控制教育部重点实验室ꎬ昆明６５０２０１)摘㊀要:生长素输出载体在植物发育中起非常重要的作用ꎮ然而ꎬ生长素输出载体蛋白ＰＩＮ１在农作物水稻㊁小麦㊁玉米和大豆的根和胚中的亚细胞定位尚不清楚ꎮ该研究首先分析了ＯｓＰＩＮ１ｂ和它的同源物的氨基酸序列特征ꎬ发现小麦(ＴａＰＩＮ１)㊁玉米(ＺｍＰＩＮ１ｂ)和大豆(ＧｍＰＩＮ１ｂ)中的ＰＩＮ１序列与水稻的ＯｓＰＩＮ１ｂ序列分别具有６１.５％㊁６２.５％㊁６１.９％的相似性ꎮ然后根据水稻 日本晴 ( Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ )的ＯｓＰＩＮ１ｂ的氨基酸序列ꎬ人工合成ＯｓＰＩＮ１ｂ多肽并注射健康的新西兰白兔获得了抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体ꎬ在通过免疫印迹方法检测抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体的有效性后ꎬ发现可以利用该抗体有效检测到水稻叶片及根中ＯｓＰＩＮ１ｂ的表达ꎮ为检测ＯｓＰＩＮ１及其同源物在不同作物胚根和胚中子叶细胞的定位ꎬ利用制备的抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体并通过免疫组化实验ꎬ发现水稻的ＯｓＰＩＮ１ｂ㊁小麦的ＴａＰＩＮ１和玉米的ＺｍＰＩＮ１ｂ非极性定位在早期的胚根和胚中子叶表皮细胞的细胞质膜上ꎬ大豆中的ＧｍＰＩＮ１ｂ非极性定位在胚根表皮细胞的质膜上ꎬ而在胚的子叶细胞中是胞质定位ꎮ为进一步检测水稻中ＯｓＰＩＮ１ｂ的亚细胞定位ꎬ对水稻根分生区表皮细胞用蛋白质转运抑制剂ＢＦＡ(ＢｒｅｆｅｌｄｉｎＡ)及抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体处理后ꎬ进行免疫组化实验ꎬ结果发现水稻中的ＯｓＰＩＮ１ｂ可以通过胞吞转运途径从水稻根表皮细胞膜进入细胞质中ꎮ该研究利用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体有效检测了ＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物在水稻㊁小麦㊁玉米和大豆的胚根表皮细胞及胚中子叶表皮细胞的亚细胞定位ꎬ这将有助于进一步揭示生长素输出载体ＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物通过调控生长素极性运输而参与作物发育的作用机制ꎮ关键词:生长素输出载体ꎬＰＩＮ１ꎬ水稻ꎬ小麦ꎬ玉米ꎬ大豆中图分类号:Ｑ９４３㊀㊀文献标识码:Ａ㊀㊀文章编号:１０００￣３１４２(２０２１)０８￣１２１９￣０７ＳｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｃａｒｒｉｅｒｐｒｏｔｅｉｎＰＩＮ１ｉｎｃｒｏｐｒｏｏｔａｎｄｅｍｂｒｙｏＷＵＬｉｘｉａ１ꎬ２ꎬ３ꎬＨＡＮＬｉ１ꎬ２ꎬ３ꎬＺＨＡＯＹｉｔｉｎｇ１ꎬ２ꎬ３ꎬＺＨＯＵＸｕａｎ１ꎬ２ꎬ３ꎬＤＵＹｕｎｌｏｎｇ１ꎬ２ꎬ３∗收稿日期:２０２０－０２－０５基金项目:国家自然科学基金(３１４６０４５３ꎬ３１６６０５０１ꎬ３１８６００６４)ꎻ云南省教育厅重大科研专项计划(ＺＤ２０１５００５)ꎻ教育部留学回国人员科研启动基金([２０１３]１７９２)ꎻ云南省应用基础研究计划的重点项目(２０１７ＦＡ０１８)[ＳｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ(３１４６０４５３ꎬ３１６６０５０１ꎬ３１８６００６４)ꎻＭａｊｏｒＳｐｅｃｉａｌＰｒｏｇｒａｍｆｏｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＲｅｓｅａｒｃｈꎬＥｄｕｃａｔｉｏｎＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＹｕｎｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ(ＺＤ２０１５００５)ꎻＰｒｏｊｅｃｔｏｆＳＲＦｆｏｒＲＯＣＳꎬＳＥＭ([２０１３]１７９２)ꎻＫｅｙＰｒｏｊｅｃｔｏｆＡｐｐｌｉｅｄＢａｓｉｃＲｅｓｅａｒｃｈＰｌａｎｏｆＹｕｎｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ(２０１７ＦＡ０１８)]ꎮ作者简介:武丽霞(１９９４－)ꎬ硕士研究生ꎬ研究方向为水稻根系发育ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)２４１６２０６２４８＠ｑｑ.ｃｏｍꎮ∗通信作者:杜云龙ꎬ博士ꎬ教授ꎬ博士研究生导师ꎬ研究方向为激素与根系发育ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｙｕｎｌｏｎｇｄｕ＠ａｌｉｙｕｎ.ｃｏｍꎮ(１.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎꎬＹｕｎｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＫｕｎｍｉｎｇ６５０２０１ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＣｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎａｎｄＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＢｉｏ￣ＲｅｓｏｕｒｃｅｓꎬＹｕｎｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＫｕｎｍｉｎｇ６５０２０１ꎬＣｈｉｎａꎻ３.ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＡｇｒｏ￣ＢｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｎｄＰｅｓｔＭａｎａｇｅｍｅｎｔｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＣｈｉｎａꎬＹｕｎｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＫｕｎｍｉｎｇ６５０２０１ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｃａｒｒｉｅｒｐｌａｙｓａｎｅｘｔｒｅｍｅｌｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｐｌａｎｔｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ.ＨｏｗｅｖｅｒꎬｔｈｅｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｃａｒｒｉｅｒＰＩＮ１ｉｎｔｈｅｒｏｏｔｓａｎｄｅｍｂｒｙｏｓｏｆｃｒｏｐｓｒｉｃｅꎬｗｈｅａｔꎬｍａｉｚｅａｎｄｓｏｙｂｅａｎｒｅｍａｉｎｓｕｎｃｌｅａｒ.ＩｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙꎬｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＯｓＰＩＮ１ｂａｎｄｉｔｓｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓａｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｑｕｅｎｃｅｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄꎬａｎｄｉｔｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅＰＩＮ１ｓｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆｗｈｅａｔ(ＴａＰＩＮ１)ꎬｍａｉｚｅ(ＺｍＰＩＮ１ｂ)ａｎｄｓｏｙｂｅａｎ(ＧｍＰＩＮ１ｂ)ｓｈａｒｅｄ６１.５％ꎬ６２.５％ａｎｄ６１.９％ｓｉｍｉｌａｒｉｔｉｅｓｗｉｔｈｒｉｃｅＯｓＰＩＮ１ｂꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.ＮｅｘｔꎬａｎａｒｔｉｆｉｃｉａｌＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｗａｓｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄｂａｓｅｄｏｎｔｈｅＯｓＰＩＮ１ｂａｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｒｉｃｅ Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ ａｎｄｉｎｊｅｃｔｅｄｉｔｉｎｔｏｈｅａｌｔｈｙＮｅｗＺｅａｌａｎｄｗｈｉｔｅｒａｂｂｉｔｓｔｏｏｂｔａｉｎａｎｔｉ￣ｒａｂｂｉｔＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ.ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓｏｆｔｈｅｐｒｅｐａｒｅｄｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙａｇａｉｎｓｔＯｓＰＩＮ１ｂｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｉｍｍｕｎｅｂｌｏｔｍｅｔｈｏｄꎬａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＯｓＰＩＮ１ｂｗａｓｆｏｕｎｄｔｏｂｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｄｅｔｅｃｔｅｄｉｎｒｉｃｅｌｅａｖｅｓａｎｄｒｏｏｔｓ.ＦｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅꎬｔｈｅｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＯｓＰＩＮ１ｂａｎｄｉｔｓｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｉｎｐｒｉｍａｒｙｒｏｏｔｓａｎｄｃｏｔｙｌｅｄｏｎｃｅｌｌｓｏｆｅｍｂｒｙｏｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｒｏｐｓｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈａｎｔｉ￣ｒａｂｂｉｔＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｓｓａｙ.ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｒｉｃｅＯｓＰＩＮ１ｂꎬｗｈｅａｔＴａＰＩＮ１ａｎｄｍａｉｚｅＺｍＰＩＮ１ｂａｐｏｌａｒｌｙｌｏｃａｌｉｚｅｄｏｎｔｈｅｐｌａｓｍａｍｅｍｂｒａｎｅｏｆｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓｏｆｐｒｉｍａｒｙｒｏｏｔｓａｎｄｃｏｔｙｌｅｄｏｎｏｆｅｍｂｒｙｏｉｎｒｉｃｅꎬｗｈｅａｔａｎｄｍａｉｚｅｇｒｏｗｎｉｎｅａｒｌｙｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓｔａｇｅｓꎬａｎｄｓｏｙｂｅａｎＧｍＰＩＮ１ｂａｐｏｌａｒｌｙｌｏｃａｌｉｚｅｄｏｎｔｈｅｐｌａｓｍａｍｅｍｂｒａｎｅｏｆｐｒｉｍａｒｙｒｏｏｔｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓꎬｂｕｔｗａｓｃｙｔｏｓｏｌｉｃｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｃｏｔｙｌｅｄｏｎｃｅｌｌｓｏｆｅｍｂｒｙｏ.ＴｏｆｕｒｔｈｅｒｄｅｔｅｃｔｔｈｅｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＯｓＰＩＮ１ｂꎬｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓｏｆｒｉｃｅｐｒｉｍａｒｙｒｏｏｔｍｅｒｉｓｔｅｍｒｅｇｉｏｎｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｐｒｏｔｅｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓＢＦＡ(ＢｒｅｆｅｌｄｉｎＡ)ａｎｄａｎｔｉ￣ｒａｂｂｉｔＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙａｎｄｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｓｓａｙ.ＩｔｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＯｓＰＩＮ１ｂｌｏｃａｌｉｚｅｄｏｎｃｙｔｏｐｌａｓｍａｍｅｍｂｒａｎｅｏｆｒｉｃｅｒｏｏｔｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓｃｏｕｌｄｅｎｔｅｒｉｎｔｏｔｈｅｃｙｔｏｐｌａｓｍｖｉａｅｎｄｏｃｙｔｉｃｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇｍａｎｎｅｒ.ＩｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙꎬｔｈｅｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＯｓＰＩＮ１ｂａｎｄｉｔｓｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｉｎｔｈｅｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓｏｆｐｒｉｍａｒｙｒｏｏｔｓａｎｄｃｏｔｙｌｅｄｏｎｓｏｆｅｍｂｒｙｏｓｏｆｒｉｃｅꎬｗｈｅａｔꎬｍａｉｚｅａｎｄｓｏｙｂｅａｎｗｅｒｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｄｅｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅａｎｔｉ￣ｒａｂｂｉｔＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙꎬａｎｄｉｔｗｉｌｌｆａｃｉｌｉｔａｔｅｕｓｔｏｒｅｖｅａｌｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｃａｒｒｉｅｒＯｓＰＩＮ１ｂａｎｄｉｔｓｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｂｙｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｐｏｌａｒａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｔｏｉｎｖｏｌｖｅｉｎｃｒｏｐｓｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｃａｒｒｉｅｒꎬＰＩＮ１ꎬｒｉｃｅꎬｗｈｅａｔꎬｍａｉｚｅꎬｓｏｙｂｅａｎ㊀㊀生长素输出载体蛋白在调节植物生长素极性运输中起重要作用ꎮ生长素极性运输参与胚胎形态发生(Ｂｌｉｌｏｕｅｔａｌ.ꎬ２００５)和侧生器官的形成(Ｃａｓｉｍｉｒｏｅｔａｌ.ꎬ２００１)ꎮ拟南芥基因组中的ＰＩＮ基因家族编码ＰＩＮ１－８的８种生长素输出载体蛋白(Ｆｒｉｍｌｅｔａｌ.ꎬ２００３ꎻＢｅｎｊａｍｉｎｓ＆Ｓｃｈｅｒｅｓꎬ２００８)ꎮＰＩＮ蛋白可以通过内吞作用转运到细胞质中ꎬ并形成循环小泡返回质膜(Ｇｅｌｄｎｅｒｅｔａｌ.ꎬ２００１)ꎮＡｔｐｉｎ１突变体植株表现出针状花序并且花和维管组织发育表现明显缺陷(Ｇäｌｗｅｉｌｅｒｅｔａｌ.ꎬ１９９８)ꎮＡｔＰＩＮ１的极性定位还影响胚胎的发育(Ｆｒｉｍｌｅｔａｌ.ꎬ２００３)ꎮＡｔＰＩＮ１分布于维管组织(Ｇäｌｗｅｉｌｅｒｅｔａｌ.ꎬ１９９８)㊁木质部薄壁组织(Ｇäｌｗｅｉｌｅｒｅｔａｌ.ꎬ１９９８ꎻＰａｌｍｅ＆Ｇäｌｗｅｉｌｅｒꎬ１９９９)㊁根表皮和皮层细胞(Ｂｌｉｌｏｕｅｔａｌ.ꎬ２００５)㊁分生组织表皮和原基表皮(Ｇｕｅｎｏｔｅｔａｌ.ꎬ２０１２)的细胞质中ꎮ但是ꎬ目前人们对单子叶植物和双子叶植物之间ＰＩＮ１蛋白的亚细胞定位差异仍不清楚ꎮＡｔＰＩＮ１的同源基因可以存在于水稻(Ｘｕｅｔａｌ.ꎬ２００５ꎻＬｉｅｔａｌ.ꎬ２０１９)㊁小麦(Ｓｉｎｇｈｅｔａｌ.ꎬ２０１８)㊁玉米(Ｇａｌｌａｖｏｔｔｉｅｔａｌ.ꎬ２００８)和大豆(Ｗａｎｇｅｔａｌ.ꎬ２０１５)的基因组中ꎮ在水稻的维管组织和根原基中可以检测到ＯｓＰＩＮ１的表达(Ｘｕｅｔａｌ.ꎬ２００５)ꎬＯｓＰＩＮ１以生长素依赖性的方式参与水稻根㊁茎㊁花序和分蘖的发育(Ｘｕｅｔａｌ.ꎬ２００５ꎻＬｉｅｔａｌ.ꎬ２０１９)ꎮＺｍＰＩＮ１ａ主要定位在玉米幼苗的上叶原基(Ｇａｌｌａｖｏｔｔｉｅｔａｌ.ꎬ２００８)㊁根中的中柱鞘细胞和内皮层细胞(Ｃａｒｒａｒｏｅｔａｌ.ꎬ２００６)㊁胚芽鞘(Ｋａｍａｄａｅｔａｌ.ꎬ２０１８)和叶片(Ｍｏｏｎｅｔａｌ.ꎬ２０１３)的表层细胞ꎮ此外ꎬＺｍＰＩＮ１ａ在根冠细胞中显示为胞质定位０２２１广㊀西㊀植㊀物４１卷(Ｆｏｒｅｓｔａｎｅｔａｌ.ꎬ２０１２)ꎬ在花序初生原基细胞中显示为非极性定位(Ｓｋｉｒｐａｎｅｔａｌ.ꎬ２００９)ꎮ但是ꎬ目前尚不清楚ＰＩＮ１在不同作物的根和胚中的亚细胞定位ꎬ包括水稻㊁小麦㊁玉米和大豆ꎮ在这项研究中ꎬ我们基于水稻 日本晴 ( Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ )的ＯｓＰＩＮ１ｂ氨基酸序列ꎬ制备了抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体ꎬ利用该抗体开展的免疫组化实验发现水稻的ＯｓＰＩＮ１ｂ及小麦和玉米中的同源蛋白可以非极性定位在根和胚中子叶表皮细胞的细胞质膜上ꎬ而大豆的ＧｍＰＩＮ１ｂ可以非极性地定位在根中表皮细胞的质膜上ꎬ但是ꎬ在胚的子叶表皮细胞中是细胞质定位ꎮ此外ꎬ水稻根表皮细胞质膜上的ＯｓＰＩＮ１ｂ可以通过内吞运输途径进入到细胞质中ꎮ这些ＰＩＮ１定位结果将有助于我们研究生长素极性运输在水稻㊁小麦㊁玉米和大豆作物发育中的作用ꎮ１㊀材料与方法１.１植物材料植物材料为水稻品种 Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ 和 丽江新团黑谷 ( ＬＴＨ )(Ｏｒｙｚａｓａｔｉｖａｓｕｂｓｐ.ｊａｐｏｎｉｃａ)㊁小麦(Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍ Ｃｈｕａｎｍａｉ１０７ )㊁玉米(Ｚｅａｍａｙｓ Ｂ７３ )和大豆(Ｇｌｙｃｉｎｅｍａｘ Ｗｉｌｌｉａｍｓ )ꎬ各作物种子置于２８ħ条件下水培萌发ꎬ使用生长了７ｄ的胚根分生区细胞和１ｄ的子叶胚来检测ＯｓＰＩＮ１ｂ及同源物的亚细胞定位ꎮ１.２抗体的制备和检测根据水稻 Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ 的生长素输出载体ＯｓＰＩＮ１ｂ(Ｏｓ０２ｇ０７４３４００)的氨基酸序列人工合成多肽ＱＳＳＲＮＰＴＰＲＧＳＳＦＮＣꎬ并将其注入新西兰兔体内ꎮ通过ＥＬＩＳＡ方法检测到纯化的抗兔ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体ꎬ其浓度为０.５１ｍｇ ｍＬ￣１(１ʒ２００００)(杭州华安生物技术有限公司)ꎮ１.３免疫杂交和免疫组化检测为检测ＯｓＰＩＮ１ｂ的表达ꎬ提取了水稻叶片和根的总蛋白ꎬ并用一抗[抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体(１ʒ２００)]和二抗[山羊抗兔的ＩｇＧ￣ＨＲＰ(１ʒ５０００)]进行了免疫杂交ꎮ为了检测蛋白亚细胞定位ꎬ使用或不使用５０ｍｍｏｌ Ｌ￣１ＢｒｅｆｅｌｄｉｎＡ(ＢＦＡ)(ｍｏｌｅｃｕｌａｒｐｒｏｂｅｓ)对不同农作物的根和胚处理９０ｍｉｎꎬ然后使用改良的免疫组织化学分析方法进行检测(Ｐａｃｉｏｒｅｋｅｔａｌ.ꎬ２００６)ꎮ具体如下:首先ꎬ将样品在２５ħ室温条件下用４％戊二醛溶液固定１ｈꎻ然后ꎬ３７ħ条件下用２％崩溃酶处理１ｈꎻ最后ꎬ用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体(１ʒ２００)和二抗[驴抗兔的ＩｇＧ(Ｈ＋Ｌ)￣Ａｌｅｘａｆｌｕｏｒ４８８抗体(１ʒ５００)](ＪａｃｋｓｏｎＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ)进行免疫组化检测ꎮ使用ＬｅｉｃａＳＰ５激光共聚焦显微镜(ＬｅｉｃａＭｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍｓ)观察ＯｓＰＩＮ１ｂ的定位ꎮ１.４生物信息学分析从ＮＣＢＩ(ｈｔｔｐｓ://ｗｗｗ.ｎｃｂｉ.ｎｌｍ.ｎｉｈ.ｇｏｖ/)获得ＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源蛋白的氨基酸序列ꎬ通过在线网站(ｈｔｔｐｓ://ｗｗｗ.ｕｎｉｐｒｏｔ.ｏｒｇ/)分析ＯｓＰＩＮ１ｂ的跨膜结构域ꎬ使用软件ＶｅｃｔｏｒＮＴＩＳｕｉｔｅ６进行氨基酸序列比对ꎬ所有图片均使用Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ软件处理ꎮ２㊀结果与分析２.１不同作物的ＰＩＮ１序列相似性分析为了检测不同作物中生长素输出载体蛋白ＰＩＮ１的亚细胞定位ꎬ首先ꎬ我们对拟南芥(ＡｔＰＩＮ１)㊁水稻(ＯｓＰＩＮ１ｂ)㊁小麦(ＴａＰＩＮ１)㊁玉米(ＺｍＰＩＮ１ｂ)和大豆(ＧｍＰＩＮ１ｂ)中ＰＩＮ１的氨基酸序列进行比对分析(图１)ꎮ结果表明:ＡｔＰＩＮ１㊁ＴａＰＩＮ１㊁ＺｍＰＩＮ１ｂ㊁ＧｍＰＩＮ１ｂ的序列与ＯｓＰＩＮ１ｂ分别具有５８.６％㊁６１.５％㊁６２.５％㊁６１.９％的相似性ꎬ在ＯｓＰＩＮ１ｂ的氨基酸序列中存在１０个跨膜区ꎮ２.２水稻中ＯｓＰＩＮ１ｂ的检测ＰＩＮ１序列在水稻㊁小麦㊁玉米和大豆之间显示出高度相似性(图１)ꎮ我们选择ＯｓＰＩＮ１ｂ中的序列ＱＳＳＲＮＰＴＰＲＧＳＳＦＮＣꎬ通过人工合成多肽免疫兔子制备了抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体ꎮ为检测抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体的有效性ꎬ我们提取了水稻叶片和根的总蛋白ꎬ并使用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体进行免疫杂交检测ꎮ结果表明ꎬ用ＯｓＰＩＮ１ｂ抗体可以检测到目标蛋白ＯｓＰＩＮ１ｂ(图２)ꎮ２.３ＰＩＮ１在不同农作物中的亚细胞定位通过免疫组织化学分析进一步检测了水稻㊁小麦㊁玉米和大豆根中ＰＩＮ１的亚细胞定位ꎬ发现１２２１８期武丽霞等:生长素输出载体蛋白ＰＩＮ１在作物根和胚中的亚细胞定位水稻ꎬ小麦ꎬ玉米ꎬ大豆和拟南芥之间的ＰＩＮ１氨基酸序列比对ꎬ红框中的氨基酸序列为水稻ＯｓＰＩＮ１ｂ的跨膜结构域ꎮＰＩＮ１ａｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｑｕｅｎｃｅｓａｒｅａｌｉｇｎｅｄａｍｏｎｇｒｉｃｅꎬｗｈｅａｔꎬｍａｉｚｅꎬｓｏｙｂｅａｎａｎｄＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓꎬａｎｄｒｅｄｂｏｘｅｓｓｈｏｗｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅｄｏｍａｉｎｓｏｆｒｉｃｅＯｓＰＩＮ１ｂａｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｑｕｅｃｅｓ.图１㊀ＰＩＮ１的氨基酸序列比对Ｆｉｇ.１㊀ＰＩＮ１ａｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｑｕｅｎｃｅａｌｉｇｎｍｅｎｔＰＩＮ１虽然可定位于根表皮细胞的细胞质膜上ꎬ但没有明显的极性分布(图３:Ａ－Ｄ)ꎮ在检测ＰＩＮ１在胚细胞中的定位时ꎬ发现ＰＩＮ１虽然可分布在水稻(图３:Ｅ)㊁小麦(图３:Ｆ)和玉米(图３:Ｇ)胚中子叶表皮细胞的细胞质膜上ꎬ但没有明显的极性分布ꎮ大豆中的ＧｍＰＩＮ１ｂ非极性分布在根表皮细２２２１广㊀西㊀植㊀物４１卷提取水稻 日本晴 叶片(Ａ)和根(Ｂ)中的总蛋白ꎬ用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体进行免疫杂交ꎮ箭头指示目标蛋白ＯｓＰＩＮ１ｂ的条带ꎮＴｏｔａｌｐｒｏｔｅｉｎｓｏｆｒｉｃｅｌｅａｖｅｓ(Ａ)ａｎｄｒｏｏｔｓ(Ｂ)ｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｒｉｃｅ Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ ａｎｄｂｌｏｔｔｅｄｗｉｔｈａｎｔｉ￣ｒａｂｂｉｔＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ.ＡｒｒｏｗｐｏｉｎｔｓｔｏｔｈｅｔａｒｇｅｔｐｒｏｔｅｉｎＯｓＰＩＮ１ｂ.图２㊀蛋白免疫杂交检测水稻叶片和根中的ＯｓＰＩＮ１ｂＦｉｇ.２㊀ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＯｓＰＩＮ１ｂｉｎｒｉｃｅｌｅａｖｅｓａｎｄｒｏｏｔｓｂｙｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｍｅｔｈｏｄ胞的细胞质膜上ꎬ而在胚的子叶表皮细胞中则分布于细胞质中(图３:Ｈ)ꎮ２.４水稻中ＯｓＰＩＮ１ｂ的胞吞检测由于ＯｓＰＩＮ１ｂ蛋白定位于细胞质膜上(图３:ＡꎬＥ)ꎬ因此ꎬ我们进一步检测了ＯｓＰＩＮ１ｂ是否可以通过胞吞的方式从细胞质膜转运入细胞质ꎮ用蛋白转运抑制剂ＢＦＡ处理水稻 Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ 和 ＬＴＨ 的根尖ꎬ用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体开展免疫组织化学实验ꎬ结果发现在细胞质中可以检测到ＯｓＰＩＮ１ｂ蛋白的聚集(图４)ꎮ这表明ＯｓＰＩＮ１ｂ可以通过胞吞途径从细胞质膜转移到细胞质中ꎮ３㊀讨论与结论生长素输出载体蛋白ＰＩＮ家族在植物发育中起着至关重要的作用ꎮ在这项研究中ꎬ我们利用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体有效检测了水稻㊁小麦㊁玉米和大豆的胚根分生区表皮细胞及胚中子叶表皮细胞的ＯｓＰＩＮ１及其同源物的亚细胞定位ꎬ结果发现ＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物分布在水稻㊁小麦㊁玉米和大豆的根和胚中子叶表皮细胞的细胞质膜及细胞质中ꎮ不同作物中的相同细胞定位表明ＰＩＮ１在不同植物发育中ꎬ其调节生长素分布功能是保守的ꎮ此外ꎬ我们也注意到与拟南芥ＡｔＰＩＮ１的极性定位相比(Ｆｒｉｍｌｅｔａｌ.ꎬ２００３)ꎬ在不同农作物的根表皮细胞中ꎬＯｓＰＩＮ１及其同源物的定位是非极性的ꎮＯｓＰＩＮ１ｂ的氨基酸序列与ＡｔＰＩＮ１具有５８.６％的相似性ꎬ因此ꎬ不同作物和拟南芥ＡｔＰＩＮ１蛋白的亚细胞定位模式存在的差异可能与不同植物中ＰＩＮ１蛋白结构差异有关ꎮ玉米中的ＺｍＰＩＮ１ａ在不同玉米组织中的定位存在极性定位(Ｃａｒｒａｒｏｅｔａｌ.ꎬ２００６ꎻＧａｌｌａｖｏｔｔｉｅｔａｌ.ꎬ２００８ꎻＭｏｏｎｅｔａｌ.ꎬ２０１３ꎻＫａｍａｄａｅｔａｌ.ꎬ２０１８)㊁非极性定位(Ｓｋｉｒｐａｎｅｔａｌ.ꎬ２００９)和胞质定位(Ｆｏｒｅｓｔａｎｅｔａｌ.ꎬ２０１２)ꎬ一些研究也发现ＡｔＰＩＮ１的极性分布与胚发育中的生长素动态相关(Ｆｒｉｍｌｅｔａｌ.ꎬ２００３)ꎮ在本研究中ꎬ用于ＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物细胞定位观察的胚根及子叶胚都处于植物发育的早期阶段ꎬ这表明不同作物中ＰＩＮ１的定位还与作物组织发育阶段有关ꎮ此外ꎬ利用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体可以检测到ＯｓＰＩＮ１ｂ蛋白ꎮ进一步分析结果发现ＯｓＰＩＮ１ｂ与ＯｓＰＩＮ１ａ氨基酸序列相似性为６２.４％ꎬＯｓＰＩＮ１ａ㊁ＯｓＰＩＮ１ｂ蛋白分子量分别为６４.７㊁５９.３ｋＤꎬ且ＯｓＰＩＮ１ａ氨基酸序列中含有用于制备抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体的序列ＱＳＳＲＮＰＴＰＲＧＳＳＦＮＣꎮ因此ꎬ不能完全排除所检测到的蛋白条带中含有ＯｓＰＩＮ１ａꎬ而这也可能部分解释了我们在根表皮细胞中所观察到的ＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物的非极性定位ꎮＰＩＮ蛋白由于胞吞作用而产生的细胞定位的改变可影响生长素的极性运输ꎬ从而进一步调控器官形成(Ｋｌｅｉｎｅ￣Ｖｅｈｎｅｔａｌ.ꎬ２００８)ꎮ本研究结果发现ＯｓＰＩＮ１ｂ可以通过胞吞途径进入到细胞质中ꎮ这显示由于细胞的胞吞作用ꎬＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物的细胞质膜及细胞质定位可能会发生变化ꎬ并参与调控植物内生长素的分布ꎮＰＩＮ蛋白的细胞定位可受到其他物质如水杨酸的调控(Ｄｕｅｔａｌ.ꎬ２０１３)ꎮ但是ꎬ我们观察到ＯｓＰＩＮ１ｂ的定位可由自身胞吞作用而改变ꎬ因此ꎬ不同作物中ＰＩＮ１蛋３２２１８期武丽霞等:生长素输出载体蛋白ＰＩＮ１在作物根和胚中的亚细胞定位水稻 日本晴 (ＡꎬＥ)ꎬ小麦(ＢꎬＦ)ꎬ玉米(ＣꎬＧ)和大豆(ＤꎬＨ)的根(Ａ－Ｄ)和胚(Ｅ－Ｈ)用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体开展免疫组化实验ꎮ标尺＝１０μｍꎮＲｏｏｔｓ(Ａ－Ｄ)ａｎｄｅｍｂｒｙｏｓ(Ｅ－Ｈ)ｏｆｒｉｃｅ Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ (ＡꎬＥ)ꎬｗｈｅａｔ(ＢꎬＦ)ꎬｍａｉｚｅ(ＣꎬＧ)ａｎｄｓｏｙｂｅａｎ(ＤꎬＨ)ｗｅｒｅｄｅｖｅｌｏｐｅｄｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｓｓａｙｗｉｔｈａｎｔｉ￣ｒａｂｂｉｔＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ.Ｂａｒｓ＝１０μｍ.图３㊀ＰＩＮ１在根和胚的子叶表皮细胞中的亚细胞定位Ｆｉｇ.３㊀ＳｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＰＩＮ１ｉｎｒｏｏｔａｎｄｅｍｂｒｙｏｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓ用２５μｍｏｌ Ｌ￣１ＢＦＡ处理水稻品种 丽江新团黑谷 (Ａ)和 日本晴 (Ｂ)的根尖９０ｍｉｎꎬ然后用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体通过免疫组化检测ＯｓＰＩＮ１ｂ的胞吞ꎮ箭头指示根表皮细胞胞质中ＯｓＰＩＮ１ｂ蛋白聚集体ꎮ标尺＝１０μｍꎮＲｏｏｔｓｏｆｒｉｃｅｌｉｎｅｓ ＬＴＨ (Ａ)ａｎｄ Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ (Ｂ)ｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ２５μｍｏｌ Ｌ￣１ＢＦＡｆｏｒ９０ｍｉｎꎬａｎｄｂｌｏｔｔｅｄｗｉｔｈａｎｔｉ￣ｒａｂｂｉｔＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｓｓａｙ.ＡｒｒｏｗｐｏｉｎｔｓｔｏｔｈｅＯｓＰＩＮ１ｂｉｎｔｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎｉｎｃｙｔｏｐｌａｓｍａｏｆｒｏｏｔｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓ.Ｂａｒｓ＝１０μｍ.图４㊀水稻根表皮细胞中ＯｓＰＩＮ１ｂ的胞吞检测Ｆｉｇ.４㊀ＥｎｄｏｃｙｔｏｓｉｓｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＯｓＰＩＮ１ｂｉｎｔｈｅｃｙｔｏｐｌａｓｍａｏｆｒｉｃｅｒｏｏｔｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓ４２２１广㊀西㊀植㊀物４１卷白的亚细胞定位是一个动态的过程ꎮ不同作物中ＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物可非极性定位于细胞质膜及细胞质中ꎬ这是一个动态的分布过程ꎬ并与植物所处的发育阶段密切相关ꎮＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物的亚细胞定位将有助于揭示生长素输出载体通过影响生长素极性分布而参与调控农作物中根和胚发育的分子机制ꎮ登录号㊀文章中相关蛋白在ＮＣＢＩ数据库中的登录号分别为ＡｔＰＩＮ１(ＮＰ＿１７７５００.１)㊁ＯｓＰＩＮ１ｂ(ＸＰ＿０１５６１６０１４.１)㊁ＴａＰＩＮ１(ＡＡＳ１９８５８.１)㊁ＺｍＰＩＮ１ｂ(ＡＢＨ０９２４３.１)㊁ＧｍＰＩＮ１ｂ(ＮＰ＿００１２３７５４６.２)ꎮ参考文献:ＢＥＮＪＡＭＩＮＳＲꎬＳＣＨＥＲＥＳＢꎬ２００８.Ａｕｘｉｎ:ｔｈｅｌｏｏｐｉｎｇｓｔａｒｉｎｐｌａｎｔｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ[Ｊ].ＡｎｎＲｅｖＰｌａｎｔＢｉｏｌꎬ５９(１):４４３－４６５.ＢＬＩＬＯＵＩꎬＸＵＪꎬＷＩＬＤＷＡＴＥＲＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２００５.ＴｈｅＰＩＮａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｆａｃｉｌｉｔａｔｏｒｎｅｔｗｏｒｋｃｏｎｔｒｏｌｓｇｒｏｗｔｈａｎｄｐａｔｔｅｒｎｉｎｇｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｒｏｏｔｓ[Ｊ].Ｎａｔｕｒｅꎬ４３３(７０２１):３９－４４.ＣＡＲＲＡＲＯＮꎬＦＯＲＥＳＴＡＮＣꎬＣＡＮＯＶＡＳꎬｅｔａｌ.ꎬ２００６.ＺｍＰＩＮ１ａａｎｄＺｍＰＩＮ１ｂｅｎｃｏｄｅｔｗｏｎｏｖｅｌｐｕｔａｔｉｖｅｃａｎｄｉｄａｔｅｓｆｏｒｐｏｌａｒａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔａｎｄｐｌａｎｔａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｍａｉｚｅ[Ｊ].ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌꎬ１４２(１):２５４－２６４.ＣＡＳＩＭＩＲＯＩꎬＭＡＲＣＨＡＮＴＡꎬＢＨＡＬＥＲＡＯＲＰꎬｅｔａｌ.ꎬ２００１.ＡｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｐｒｏｍｏｔｅｓＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｌａｔｅｒａｌｒｏｏｔｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ[Ｊ].ＴｈｅＰｌａｎｔＣｅｌｌꎬ１３(４):８４３－８５２.ＤＵＹＬꎬＴＥＪＯＳＲꎬＢＥＣＫＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１３.Ｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｉｎｔｅｒｆｅｒｅｓｗｉｔｈｃｌａｔｈｒｉｎ￣ｍｅｄｉａｔｅｄｅｎｄｏｃｙｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ[Ｊ].ＰＮＡＳꎬ１１０(１９):７９４６－７９５１.ＦＯＲＥＳＴＡＮＣꎬＦＡＲＩＮＡＴＩＳꎬＶＡＲＯＴＴＯＳꎬ２０１２.ＴｈｅｍａｉｚｅＰＩＮｇｅｎｅｆａｍｉｌｙｏｆａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ[Ｊ].ＦｒｏｎｔＰｌａｎｔＳｃｉꎬ３(１６):１６.ＦＲＩＭＬＪꎬＶＩＥＴＥＮＡꎬＳＡＵＥＲＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２００３.Ｅｆｆｌｕｘ￣ｄｅｐｅｎｄｅｎｔａｕｘｉｎｇｒａｄｉｅｎｔｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅａｐｉｃａｌ￣ｂａｓａｌａｘｉｓｏｆＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ[Ｊ].Ｎａｔｕｒｅ(Ｌｏｎｄｏｎ)ꎬ４２６(６９６３):１４７－１５３.ＧＡＬＬＡＶＯＴＴＩＡꎬＹＡＮＧＹꎬＳＣＨＭＩＤＴＲＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２００８.Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔａｎｄｍａｉｚｅｂｒａｎｃｈｉｎｇ[Ｊ].ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌꎬ１４７(４):１９１３－１９２３.ＧÄＬＷＥＩＬＥＲＬꎬＧＵＡＮＣꎬＭＵＬＬＥＲＡꎬｅｔａｌ.ꎬ１９９８.ＲｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｐｏｌａｒａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｂｙＡｔＰＩＮ１ｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｖａｓｃｕｌａｒｔｉｓｓｕｅ[Ｊ].Ｓｃｉｅｎｃｅꎬ２８２(５３９７):２２２６－２２３０.ＧＥＬＤＮＥＲＮꎬＦＲＩＭＬＪꎬＳＴＩＥＲＨＯＦＹＤꎬｅｔａｌ.ꎬ２００１.ＡｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｂｌｏｃｋＰＩＮ１ｃｙｃｌｉｎｇａｎｄｖｅｓｉｃｌｅｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ[Ｊ].Ｎａｔｕｒｅꎬ４１３(６８５４):４２５－４２８.ＧＵＥＮＯＴＢꎬＢＡＹＥＲＥꎬＫＩＥＲＺＫＯＷＳＫＩＤꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１２.ＰＩＮ１￣ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｌｅａｆｉｎｉｔｉａｔｉｏｎｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ[Ｊ].ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌꎬ１５９(４):１５０１－１５１０.ＫＡＭＡＤＡＭꎬＭＩＹＡＭＯＴＯＫꎬＯＫＡＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１８.ＰｒｏｃｅｄｕｒｅｓｆｏｒｃｈｅｍｉｃａｌｆｉｘａｔｉｏｎｉｎｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎａｌｙｓｅｓｏｆＰＩＮｐｒｏｔｅｉｎｓｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｐｏｌａｒａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔ:ｒｅｌｅｖａｎｃｅｔｏｓｐａｃｅｆｌｉｇｈｔｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ[Ｊ].ＬｉｆｅＳｃｉＳｐａｃｅＲｅｓ(Ａｍｓｔ)ꎬ１８:４２－５１.ＫＬＥＩＮＥ￣ＶＥＨＮＪꎬＤＨＯＮＵＫＳＨＥＰꎬＳＡＵＥＲＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２００８.ＡＲＦＧＥＦ￣ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｔｒａｎｓｃｙｔｏｓｉｓａｎｄｐｏｌａｒｄｅｌｉｖｅｒｙｏｆＰＩＮａｕｘｉｎｃａｒｒｉｅｒｓｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ[Ｊ].ＣｕｒｒＢｉｏｌꎬ１８(７):５２６－５３１.ＬＩＹꎬＺＨＵＪＳꎬＷＵＬＬꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１９.ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌｄｉｖｅｒｇｅｎｃｅｏｆＰＩＮ１ｐａｒａｌｏｇｏｕｓｇｅｎｅｓｉｎｒｉｃｅ[Ｊ].ＰｌａｎｔＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌꎬ６０(１２):２７２０－２７３２.ＭＯＯＮＪꎬＣＡＮＤＥＬＡＨꎬＨＡＫＥＳꎬ２０１３.Ｔｈｅｌｉｇｕｌｅｌｅｓｓｎａｒｒｏｗｍｕｔａｔｉｏｎａｆｆｅｃｔｓｐｒｏｘｉｍａｌ￣ｄｉｓｔａｌｓｉｇｎａｌｉｎｇａｎｄｌｅａｆｇｒｏｗｔｈ[Ｊ].Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔꎬ１４０(２):４０５－４１２.ＰＡＣＩＯＲＥＫＴꎬＳＡＵＥＲＭꎬＢＡＬＬＡＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２００６.Ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｔｅｃｈｎｉｑｕｅｆｏｒｐｒｏｔｅｉｎｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｉｎｓｅｃｔｉｏｎｓｏｆｐｌａｎｔｔｉｓｓｕｅｓ[Ｊ].ＮａｔｕｒｅＰｒｏｔｏｃｏｌｓꎬ１(１):１０４－１０７.ＰＡＬＭＥＫꎬＧÄＬＷＥＩＬＥＲＬꎬ１９９９.ＰＩＮ￣ｐｏｉｎｔｉｎｇｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｂａｓｉｓｏｆａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔ[Ｊ].ＣｕｒｒＯｐｉｎＰｌａｎｔＢｉｏｌꎬ２(５):３７５－３８１.ＳＫＩＲＰＡＮＡꎬＣＵＬＬＥＲＡＨꎬＧＡＬＬＡＶＯＴＴＩＡꎬｅｔａｌ.ꎬ２００９.ＢＡＲＲＥＮＩＮＦＬＯＲＥＳＣＥＮＣＥ２ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｗｉｔｈＺｍＰＩＮ１ａｓｕｇｇｅｓｔｓａｒｏｌｅｉｎａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｄｕｒｉｎｇｍａｉｚｅｉｎｆｌｏｒｅｓｃｅｎｃｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ[Ｊ].ＰｌａｎｔＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌꎬ５０(３):６５２－６５７.ＳＩＮＧＨＫꎬＳＩＮＧＨＪꎬＪＩＮＤＡＬＳꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１８.ＳｔｒｕｃｔｕｒａｌａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｅｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆａｎａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｃａｒｒｉｅｒＰＩＮ１ａｎｄｉｔｓｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｉｎｃｏｍｍｏｎｗｈｅａｔ[Ｊ].ＦｕｎｃｔＩｎｔｅｇｒＧｅｎｏｍｉｃꎬ１９(１):２９－４１.ＷＡＮＧＹＱꎬＣＨＡＩＣＬꎬＶＡＬＬＩＹＯＤＡＮＢꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１５.Ｇｅｎｏｍｅ￣ｗｉｄｅａｎａｌｙｓｉｓａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｆｉｌｉｎｇｏｆｔｈｅＰＩＮａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅｆａｍｉｌｙｉｎｓｏｙｂｅａｎ(Ｇｌｙｃｉｎｅｍａｘ) [Ｊ].ＢＭＣＧｅｎｏｍｉｃｓꎬ１６(１):９５１－９６３.ＸＵＭꎬＺＨＵＬꎬＳＨＯＵＨＸꎬｅｔａｌ.ꎬ２００５.ＡＰＩＮ１ｆａｍｉｌｙｇｅｎｅꎬＯｓＰＩＮ１ꎬｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎａｕｘｉｎ￣ｄｅｐｅｎｄｅｎｔａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓｒｏｏｔｅｍｅｒｇｅｎｃｅａｎｄｔｉｌｌｅｒｉｎｇｉｎｒｉｃｅ[Ｊ].ＰｌａｎｔＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌꎬ４６(１０):１６７４－１６８１.(责任编辑㊀周翠鸣)５２２１８期武丽霞等:生长素输出载体蛋白ＰＩＮ１在作物根和胚中的亚细胞定位。
云南农业大学研究生参考书目
3．有机化学实验，南京农业大学出版，2009年
二、考试大纲
有机化学考试内容主要包括：有机化合物的命名、结构、物理性质、化学性质、合成方法及其应用；有机合物各种类型的异构现象；有机化合物分子结构与理化性质之间的关系，典型有机化学反应机制；有机化学的实验基本内容。要求考生掌握有机化学的基础知识和基本理论，具有独立分析解决有关化学问题的能力。
1．有机化学概论
2．饱和脂肪烃
3．不饱和脂肪烃
4．芳香烃
5．旋光异构
6．卤代烃
7．醇、酚、醚
8．醛、酮、醌
9．羧酸、羧酸衍生物及取代酸
10. 胺
11. 杂环化合物
12. 糖类
13．脂类参考书如下：
参考书目
1、《微生物学》李阜棣,中国农业出版社,2007
微生物的营养需求、营养类型及代表性种群；微生物对营养物质各种运输方式的比较；培养基的概念及组成；微生物产能代谢方式；发酵；无氧呼吸；有氧呼吸、理解异养微生物的生物氧化、掌握生物固氮、巴斯德效应等概念；微生物生长特性与生长的测定；血球计数板的应用原理；单细胞微生物的生长曲线；连续培养；影响微生物生长的营养因素；影响微生物生长的环境因素；有害微生物的控制；灭菌、消毒和防腐；化学治疗与抗生素。
（2）《无机及分析化学》第三版，南京大学《无机及分析化学》编写组主编，高等教育出版社出版
考试大纲
《无机及分析化学》部分
无机及分析化学考试内容主要包括：化学热力学基础，化学反应速率理论，物质结构理论，溶液化学平衡；分析误差和数据处理的基本概念，滴定分析、分光光度分析等常用分析方法。要求考生掌握无机及分析化学的基本原理和基础知识，了解化学知识在各相关专业学科中的应用，具有独立分析和解决化学问题的能力。
农村与区域发展领域研究生培养方案(专业硕士)
全日制农业推广硕士专业学位农村与区域发展领域研究生培养方案一、培养目标农业推广是与农业技术推广和农村发展任职资格相联系的专业学位。
主要为农业技术研究、应用、开发及推广，农村发展，农业教育等企事业单位和管理部门培养具有综合职业技能的应用型、复合型高层次人才。
具体要求为：（一）农业推广硕士专业学位获得者应较好地掌握中国特色社会主义理论；拥护党的基本路线、方针、政策；热爱祖国，热爱农业，遵纪守法，品德良好，艰苦奋斗，求实创新，积极为我国农业现代化和农村发展服务。
（二）农业推广硕士专业学位获得者应掌握农业推广领域坚实的基础理论、系统的专业知识，以及相关的管理、人文和社会科学知识；具有较宽广的知识面，较强的专业技能和技术传授技能，具有创新意识和新型的农业推广理念，能够独立从事较高层次的农业技术推广和农村发展工作。
（三）基本掌握一门外国语，能够阅读本领域的外文资料。
二、学习方式及年限采用全日制学习方式，学习年限一般为2年。
最长年限不超过3年。
其中课程学习实践为1年，参加专业实践时间为1年。
三、培养方式（一）采用课程学习，实践教学和学位论文相结合的培养方式，实行多学科综合、宽口径培养。
课程学习与专业实践要紧密衔接，课程学习在校内完成，实践教学科研在实习单位或校外实践基地完成。
（二）故里建立校内外双导师制，实行学位论文导师负责制，以校内导师指导为主，聘请校外导师参与实践过程、研究项目、课程与论文等多个环节的指导工作，吸收本领域的专家、学着和时间领域有丰富经验的具有高级技术职称的专业人员，共同承担专业学位研究生的培养工作。
四、课程设置及学分要求（一）课程分类及学分要求课程学习实践环节实行学分制。
研究生课程总学分为30—32学分（含专业实践），所有课程应全部在一年内修完。
课程设置分为学位课和非学位课。
学位课程为必修课，研究生课程学习必须通过考试或考查，成绩合格方能获得学分，所有课程的成绩均采用百分制，60分为合格，不合格的课程必须按有关规定进行重修。
云南农业大学在职硕士专业学位研究生培养计划(二)
专业学位研究生个人培养计划（二）
（学位论文开题报告及计划）
题目：
专业学位名称：
领域：
入学年月：
研究姓名：
指导教师：
填表日期年月日
说明
1．开题报告由专业学位指导委员会举行，须请有关专家参加。
2．本表用钢笔填写或打印，字迹务必清楚。
3．本表在中期考核以前完成。一式三份（复印），交导师、专业学位指导委员会和研究生处。
职称
会议主持人签名：
年月日
八、导师意见
签名：年月日
九、专业指导委员会意见
负责人签名：年月日
十、备注
一、课题来源及选题依据（国内外研究动态、研究目的意义）注：本页可附加页二、来自究内容注：本页可附加页
三、研究材料、方法和手段
四、研究条件
五、研究进度安排（包括论文撰写）
六、预期结果
七、讨论意见
(选题指导思想及难易程度，研究内容、方法，可行性及修改建议。是否通过开题报告)
参加讨论人员姓名、职称
姓名
职称
姓名
云南大学研究生专业学位研究生培养方案
专业学位研究生培养方案云南大学研究生院编二〇一四年三月应用统计专业学位硕士研究生培养方案 (1)国际商务（MIB）专业学位硕士研究生培养方案 (5)资产评估专业学位硕士研究生培养方案 (8)审计（MAud）专业学位硕士研究生培养方案 (11)法律（非法学）专业学位硕士研究生培养方案 (14)法律（法学）专业学位硕士研究生培养方案 (19)在职攻读法律硕士专业学位研究生培养方案 (24)社会工作专业学位硕士研究生培养方案 (29)教育硕士（教育管理领域）专业学位研究生培养方案 (33)教育硕士（现代教育技术）专业硕士研究生培养方案 (36)汉语国际教育专业学位硕士研究生培养方案 (40)新闻与传播专业学位硕士研究生培养方案 (45)翻译硕士（英语笔译）专业学位研究生培养方案 (48)翻译硕士（法语笔译）专业学位研究生培养方案 (52)文物学与博物馆学专业学位硕士研究生培养方案 (56)工程硕士材料工程领域专业学位研究生培养方案 (59)工程硕士电子与通信工程领域专业学位研究生培养方案 (63)工程硕士控制工程领域硕士研究生培养方案 (67)工程硕士计算机技术领域研究生培养方案 (71)工程硕士软件工程领域硕士研究生培养方案 (75)工程硕士建筑与土木工程领域专业学位研究生培养方案 (80)在职攻读工程硕士建筑与土木工程领域研究生培养方案 (85)工程硕士化学工程领域专业学位研究生培养方案 (91)工程硕士制药工程领域硕士研究生培养方案 (95)工程硕士生物工程领域硕士研究生培养方案 (99)工程硕士项目管理领域专业学位研究生培养方案 (103)工商管理（MBA）硕士专业学位研究生培养方案......................................... 错误!未定义书签。
公共管理（MPA）专业学位硕士研究生培养方案 (113)会计（MPAcc）专业学位硕士研究生培养方案 (119)旅游管理（MTA）专业学位硕士研究生培养方案 (123)图书情报（MLIS）专业学位硕士研究生培养方案 (126)工程硕士工程管理领域专业学位研究生培养方案 (130)艺术硕士（MFA）专业学位研究生培养方案 (134)应用统计专业学位硕士研究生培养方案（专业代码：025200）一、培养目标（一）培养目标为政府部门、大中型企业、咨询和研究机构培养高层次、应用型统计专门人才。
云南农业大学-翻译
2013年增列硕士专业学位授权点申请表硕士专业学位类别：翻译申报单位名称：云南农业大学国务院学位委员会办公室制表2013年12月29日填目录一、申请翻译硕士专业学位授权点论证报告………………………（1-9）二、申请翻译硕士专业学位授权点培养方案……………………（10-27）三、申请翻译硕士专业学位授权点简况表………………………（28-59）一、申请翻译硕士专业学位授权点论证报告内容要求：参照《增列硕士专业学位授权点基本条件》，从人才需求和招生计划、培养目标定位、培养方案和培养方式、质量保障条件以及自身的优势与特色等方面就增列本硕士专业学位授权点的必要性和可行性进行论证，同时还须就与行（企）业合作的状况做出说明。
论证报告限5000字以内。
申请翻译硕士专业学位授权点论证报告云南农业大学外国语言文学专业多年来坚持“质量立院、彰显农科特色”的办学理念，积极对接国家“农业强国”的发展战略，通过13余年的专业发展和学科建设，已构建形成“多元化生源——特色化师资——个性化实训——多渠道就业”的产业化人才培养模式，分别在“农业科普知识翻译”、“南博会、农博会、花博会、旅交会实务口译”等方面凸显了学科特色和优势，拥有“同声传译实训室”、“云南省翻译协会”、“云南世博园艺有限公司”、“中国—东盟教育培训中心”等突出实践技能实训的基地群，实现了涉农行业需求与英语翻译人才培养有效对接，在围绕云南省桥头堡建设和服务地方经济涉农英语翻译领域树立了良好的专业品牌和形象。
本专业为了更具针对性地培养“翻译技能与农科特色结合”、“理论基础与实践应用结合”、“职业素养与市场需求结合”的高层次应用型涉农英语笔译翻译人才，拟申请增列翻译硕士专业学位授权点，其必要性和可行性具体阐述如下：一、申请增列翻译硕士专业学位授权点的必要性1、符合市场对高层次应用型专业英语翻译人才的客观需要在当今世界信息化时代，国际交流与合作日益频繁，中国与世界其他国家的交流与合作离不开语言的互译，英语作为一种世界性语言，翻译在经济社会的发展中扮演着愈来愈重要的角色，社会对翻译人才的需求已呈多元化态势。
农业硕士培养方案
农业硕士专业学位研究生培养方案研究生部2013年8月全日制农业硕士专业学位研究生培养方案为做好全日制农业硕士专业学位各领域研究生的培养工作，确保培养质量，根据教育部教研[2009]1号和国务院学位办[2009]23号文件有关要求，特制定《全日制农业硕士专业学位研究生培养方案》，以规范农业硕士专业学位研究生的培养目标、培养方式、课程学习、学位授予等环节。
一、培养目标和要求（一）培养目标农业硕士专业学位是与农业技术推广和农村发展相关职业要求相联系的专业学位，主要为农业技术研究、应用、开发及推广、农业教育等企事业单位和管理部门培养具有综合职业技能的应用型、复合型高层次人才。
（二）培养要求1. 农业硕士专业学位获得者应掌握中国特色社会主义理论；拥护党的基本路线、方针、政策；热爱祖国、热爱农业，遵纪守法，求实创新，勇于实践，树立科学发展观；具有为国家富强、民族振兴而奋斗的理想、事业心和责任感，自愿为我国农业现代化和农村发展服务。
2. 农业硕士专业学位获得者应掌握本领域坚实的基础理论、系统的专业知识、基本的专业技能以及相关的管理、人文和社会科学知识；具有较宽的知识面，较强的专业技能和技术传授能力，具有创新意识和良好的职业素养，能够独立从事本领域的研究或开发、管理等工作。
3. 基本掌握一门外国语，能够阅读本专领域的外文资料。
二、招生对象全日制农业硕士专业硕士研究生的招生对象主要为国民教育序列应届和往届大学本科毕业生（或本科同等学力）；相近专业大专毕业并从事2年以上相关领域的实际工作。
三、学习方式及年限采用全日制学习方式，学习年限一般为2年。
特殊情况不能超过4年。
四、培养方式（一）攻读农业硕士专业学位的研究生，课程学习实行学分制，实行多学科综合、宽口径的培养方式。
校外实践研究主要在相关实践基地进行，鼓励用顶岗实践的方式进行实践研究。
（二）学位论文实行双导师负责制，由具有高级专业技术职务和丰富实践经验的校内外导师联合指导。
在职攻读专业学位实践
在职攻读专业学位的探索与实践通过对在职攻读农业推广硕士专业学位的现状、管理模式，以云南农业大学为例介绍了其主要做法与措施，对成效与相关经验进行分析总结，并结合当前对其发展趋势提出建议，旨在为在职攻读农业推广硕士专业学位模式提供参考。
专业学位农业推广硕士研究生教育一、背景介绍为了适应我国社会发展的需要，我国1990年开始设置和试办专业学位教育，经过了20年的发展，到2011年硕士专业学位增至39个，招生人数累计已近百万。
1999年5月，为落实“科教兴国”和“可持续发展”战略，更好地适应我国农业现代化和农村发展对高层次专门人才的迫切需要，完善具有中国特色的学位制度，经国务院学位委员会批准，设置“农业推广硕士（暂定名）”专业学位。
经过十多年的发展，农业推广硕士专业学位教育取得了较好的发展，截至2011年，农业推广硕士专业学位授权单位近百个，年招生人数超过万人，为农业技术推广和农村发展培养了一批高层次、应用型人才，为我国农业现代化和农村发展做出了重要贡献。
现在各高校都在积极探索专业学位的发展模式和对策，本文以云南农业大学发展农业推广硕士专业学位为例，介绍其农业推广硕士专业学位的方法，并就相关模式提出相应的建议以供探讨。
二、云南农业大学农业推广硕士专业学位现状及特色近年来，云南农业大学结合自身实际和区位特点，努力探索适合于地处西南边疆、少数民族众多、农业人口比重大，农科专业学位教育相对滞后等省情的招生、培养、学位授予等教育规律，在专业学位培养模式构建等方面开展了积极的工作，对云南省实施人才强省战略和解决“三农”问题有重要的现实意义和深远的战略作用。
云南农业大学从2002年开始在职人员攻读硕士专业学位教育工作，现有农业推广硕士、兽医硕士和高校教师三种专业学位。
到2011年12月止已授予硕士专业学位641人，其中农业推广硕士专业学位557人、兽医硕士学位66人，高校教师18人。
到2011年12月，在读专业学位研究生1275人（在职攻读农业推广硕士学位1183人），在校科学学位硕士研究生人数1243，规模上与专业学位人数已超过科学学位研究生人数。
攻读全日制农业推广硕士专业学位研究生培养方案总则(试行)
湖南农业大学攻读全日制农业推广硕士专业学位研究生培养方案总则(试行)为更好地适应国家经济社会发展对高层次应用型人才的需要，加快研究生培养类型和模式的改革步伐，教育部于2009年启动了全日制专业学位硕士研究生招生工作，这是我国人才培养模式改革的重大步骤。
为做好全日制农业推广硕士专业学位研究生的培养工作，确保质量，根据教育部教研［2009］1号文件《关于做好全日制硕士专业学位研究生培养工作的假设干意见》以及全国农业推广硕士专业学位教育指导委员会颁发的《全日制农业推广硕士专业学位研究生指导性培养方案》〔试行〕，特制订我校《全日制农业推广硕士专业学位研究生培养方案总则》。
一、培养目标和要求1.培养目标农业推广硕士专业学位〔含农业、林业、牧业、渔业推广，下同〕是与农业技术推广和农村发展任职资格相联系的专业学位。
主要为农业技术研究、应用、开发及推广，农村发展，农业教育等企事业单位和管理部门培养具有综合职业技能的应用型、复合型高层次人才。
2.培养要求〔1〕较好地掌握马克思主义、毛泽东思想、邓小平理论和“三个代表”重要思想，深入学习实践科学发展观，拥护党的基本路线、方针、政策，热爱祖国，热爱农业，遵纪守法，品德良好，艰苦奋斗，求实创新，积极为我国农业现代化和农村发展服务。
〔2〕应掌握农业推广领域坚实的基础理论、系统的专业知识，以及相关的管理、人文和社会科学知识；具有较宽广的知识面，较强的专业技能和技术传授技能，具有创新意识和新型的农业推广理念，能够独立从事较高层次的农业技术推广和农村发展工作〔或独立从事相关领域的研究或开发、管理等工作的能力〕。
〔3〕基本掌握一门外国语，能够阅读本领域的外文资料。
二、入学条件招生对象主要为具有学士学位的应届、往届本科毕业生，或在职人员。
报考人员须参加全国统一入学考试和各培养单位组织的复试。
复试重点考察考生的职业素质，专业技能和实践能力。
三、培养方式及学习年限1．采取校内课程学习和校外实践研究相结合的学习方式。
云南农业大学茶学硕士培养方案
《茶艺》课程开发报告随着改革开放和经济的迅速发展，我国职业教育教学改革的目标十分明确，企业对职业技术教育人才培养提出了更高的目标与要求，即职业教育要面向市场，强调并注重学生创新精神和实践技能的培养，以培养学生的职业能力和基本素质作为改革的着眼点与归缩，在这种发展态势下，构建符合现代社会发展要求的职业教育专业课程，显得尤其重要和必要。
根据教育部的要求，中等职业学校培养人才的基本任务是以经济结构调整和企业用人需求预测为基本依据，坚持以就业为导向，把提高学生职业道德和职业能力放在突出的位置，加强实践教学，努力培养现代服务业一线迫切需要的高素质技能型人才。
一、开发《茶艺》课程的背景（一）企业发展需求为适应社会发展的需求，在职业教育培养目标的指导下，北京市劲松职高中国际酒店专业和导游专业茶艺教师通过走访企业专进行访谈，详细了解了酒店行业对一线服务人员职业能力的要求；通过对我校本专业已在酒店实习或正式工作的学生进行调查，了解学生所学专业课程在实际工作的应用情况，可以知道，茶艺知识作为学生的专业课，能提高学生的服务素质，增加个人的知识需求。
随着社会高素质的发展，中国茶文化已普遍被世人接受，甚至被广泛传播，酒店如有高素质的茶艺师为顾客提供五星级的服务更能体现酒店的星级标准。
因此，应该开发茶与茶文化项目课程拓宽学生的专业知识，提高学生的职业能力，使学生的就业选择更广泛。
（二）学生学习需求对于在校学生，教师改变传统的教学方式，采用项目式、茶单式、工作式的教学方法，更能激发学生的学习兴趣。
目前，根据调查所得，对于本课程，许多学生学习目的是因为本课程以实操学习为主，与以往学习知识的方式不同，可以在课堂上放松；教师的讲授总是先讲理论然后才进行实操，学生学习的效果一般，只能掌握茶艺表演的程序，而不能真正掌握茶文化的精髓，对茶叶、茶具运用意识薄弱，不能自行设计茶艺表演程序等等。
根据职业教育的人才培养目标要求，在教学实施中，不仅要求学生掌握一定的基础知识，更要注重学生的实践能力以及分析问题与解决能力的培养，以提高学生的综合职业能力。
农业经济管理硕士研究生培养方案
农业经济管理硕士研究生培养方案（2012年6月）一、培养目标培养适应我国社会主义现代化建设和北京现代化建设需要，德、智、体全面发展，品学兼优，具有创新和创业能力，能适应教学、科研和社会服务等多种岗位需求的高层次专门人才。
基本要求是：1、身心健康，爱国守法，热爱农业，并具备团结协作、管理的基本素质。
2、掌握农业经济管理学科系统知识。
3、了解所从事研究方向的国内外发展动态，掌握基本的调研技能，具有发现、分析、解决问题的能力和表达能力（包括书面、口头表达能力）。
能用一门外国语熟练地阅读专业文献，撰写论文摘要和进行一般的专业英文写作。
4、具备研究和应用新经济管理理论与方法的能力，能够独立地承担农业经济管理学科科学研究、教学等工作的能力。
5、力争多数毕业生能够考取博士生，从事科研、教学或管理等工作或出国继续深造。
二、入学条件、培养年限及培养方式入学条件：主要为具有国民教育序列大学本科学历、具备一定学科基础的人员。
硕士研究生教育基本年限一般为2-3年，实行弹性学制，累计修业年限不超过4年。
培养方式为全日制。
三、研究方向1、都市型现代农业方向：主要研究都市型农业发展的理论与政策。
2、农村社会发展方向：主要研究新农村社会发展的内在规律与变迁。
3、农（林）产品市场与贸易方向：主要研究大都市农产品高端市场的组织、功能与农产品贸易创新。
4、涉农（林）企业管理方向:主要研究涉农企业管理的理论、模式与运行机制。
四、课程教学（知识传授）总学分不少于28学分。
1、学位课（18学分）（1）公共课（9学分）（2）专业主干课（８学分）2、非学位课（1）选修课(不少于10学分)根据培养目标和研究方向，在导师指导下从研究生课程选修。
经批准可到校外学习，校外选修课程其学分计入总学分。
（2）导师自定课（1学分，20学时）（3）补修课跨专业考取或同等学力攻读者，必须补修大学本科专业2门主干课程，并跟随本科生上课。
补修成绩以60分为及格，并记入成绩档案，注明“本科”字样，但不计入总学分。
作物遗传育种(硕士培养方案)-2010-11
作物遗传育种学科研究生培养方案学科代码：090102一、学科简介作物遗传育种学科是云南省省级重点学科，于1983年获得作物遗传育种硕士学位授予权，是云南农业大学最先取得硕士学位授予权的学位点之一。
本学科点设立有云南省教育厅“作物种质创新及可持续利用重点实验室”、稻作研究所、薯类研究所、甘蔗研究所等，形成了独具特色和优势的四个研究方向：（1）作物遗传与品种改良；（2）农业生物技术与种质创新；(3)植物种质资源研究与利用；(4)药用植物资源评价与利用。
现有硕士生导师25人，其中教授19人、副教授7人，具有博士学位14人。
2006年以来累计承担国家级和省级项目260项，研究经费11000万元，发表学术论文487篇（其中SCI收录56篇），专著22部，并育成“滇杂”系列水稻品种、“云光”系列水稻品种、“云优”系列杂交玉米和其它作物品种在生产上推广应用。
一、培养目标本专业培养为我国社会主义现代化建设的德、智、体、美全面发展，能适应多种岗位需求的高层次专门人才。
具体要求是：1.努力学习马列主义、毛泽东思想、邓小平理论和“三个代表”重要思想；坚持四项基本原则，坚持科学发展观；热爱祖国，献身农业；具有集体主义观念，艰苦奋斗的作风，遵纪守法，品德优良；具有严谨的治学态度，良好的学术道德和科研作风；具有求实创新、开拓进取、团结合作的精神和坚持真理的科学品质，积极为社会主义现代化建设服务。
2.刻苦钻研，勤奋学习，掌握作物遗传育种学科坚实的基础理论和系统的专门知识；了解本学科现代理论和技术的发展水平以及所从事研究方向的国内外动态；具有独立从事科学研究或独立担负专门技术工作的能力，适应教学、科研、生产和管理等多种岗位的需求。
3.掌握一门外语，能熟练地阅读本专业的外文资料，具有一定的论文写作能力，能基本听懂本专业外语学术报告，并能进行初步的国际学术交流。
4.身心健康，符合所学专业对身体素质的基本要求。
二、研究方向根据国家和云南省的经济建设和本专业学科发展的要求，设置以下几个研究方向：1.作物遗传与品种改良；2.农业生物技术与种质创新；3.植物种质资源研究与利用；4.药用植物资源评价与利用。
“新农科”背景下农科院校师资队伍建设的若干思考
“新农科”背景下农科院校师资队伍建设的若干思考近期开展的新农科建设将扎根中国大地掀起一场高等农林教育的质量革命，以“开改革发展新路，育卓越农林人才，树农林教育新标”三大举措，为我国高等农业教育指明新方向。
高水平的师资队伍是建设高水平大学的重要保障，进一步加强师资队伍建设是涉农高校适应新农科建设的客观需求。
从师资队伍各项结构指标，系统分析云南农业大学农学与生物技术学院师资队伍建设过程中生师比、年龄结构、职称结构、学缘结构等方面存在的不足，并以新农科建设为背景提出4项对策，为新时期的师资队伍建设提供参考。
我国于2019年奏响了新农科建设的“三部曲”，安吉共识提出“四个面向”新理念[1]，北大仓行动推出“八大行动”新举措[2]，北京指南实施“百校千项”新项目[2]，系列改革实践措施已全面展开，为高等农业教育指明了发展方向。
2019年9月5日，习近平总书记给全国涉农高校的书记校长和专家代表的回信为新农科建设注入强大活力，对涉农高校更好地支撑和引领“三农”事业发展赋予了新的时代使命[3]。
教师作为新农科建设的主要力量，是培养农业高级专门人才的主要承担者，创新农业科技和传承文化的重要实践者，知识与技术应用的主要参与者，是教育教学、科学研究、社会服务水平的集中体现，在高校新农科专业建设、新型人才培养、新兴科技成果产出，以及科技成果的转化应用等方面都起到重要作用[4]。
因此，建设一支结构合理、素质过硬、高效精干的教师队伍是高校新农科建设的重要任务之一，也是人才培养质量提高的重要保证。
在此背景下，合理并有效地调整和优化师资队伍结构，完善和健全师资队伍建设机制，是实现农业高等教育由“量”向“质”飞跃的基本着力点，也是高校适应新农科建设的客观需求。
1 学院师资队伍现状云南农业大学农学与生物技术学院始建于1938年云南大学农学院农学系，以“开学养正，育四海英才;明理尚农，兴九州粮仓”为办学理念，至今已有80余年历程，是云南农业大学办学最早的学院。
云南农业大学硕士研究生培养计划(一)
云南农业大学硕士研究生个人培养计划（一）（课程设置、教学实践、社会实践等）学号2012210030姓名吴睿学科、专业农业机械化工程学院工程技术学院入学年月2012年09月04日填表日期2012 年9 月24 日填表说明一、本计划包括研究生培养的课程设置、教学实践、社会实践等部分。
二、本表必须在导师指下填写，一式四份（研究生处、学院、导师、硕士研究生本人各一份）。
三、表格用钢笔填写，字迹务必清楚；也可用A4纸双面打印或复印，不得改变原表格式。
四、入学后两个月内研究生交原件给学院，由学院把原件送交研究生处培养科存档（即第一学期第八周前）。
一、研究方向：机电一体化二、培养方式（包括方法和形式）：一：理论教学二：实践教学指导三：社会实践与调查四：指导本科生毕业实习三、导师姓名：朱云职称：副教授四、指导小组成员（3-4名，包括导师在内）姓名：职称：(要求具有讲师以上职称)朱云副教授杨文彩副教授黄云战教授木霖研究员五、该生入学情况：入学前最后学历：2012年 6 月毕业于安徽农业大学经济技术学院院校车辆工程专业，学制：4年年。
1、该生是否以同等学力考入：否2、该生是否跨学科专业考入（由学位点统一认定）：否注：跨学科专业（一般以二级学科划定）或以同等学力考入的研究生，由指导教师根据培养方向，在“六、课程设置……”中指定补修目前所攻读硕士学科专业的本科主要课程2－3门。
六、课程设置及学习进程安排注：1．课程设置和安排根据各学科专业最新的培养方案填写。
2．补修课程：指跨学科（一般以二级学科划定）专业或以同等学力考入的研究生，应补修目前所攻读硕士学科专业本科的主要课程2－3门（由指导教师根据培养方向指定）。
补修课程不计学分，60分为合格。
由各学院、硕士点安排硕士生跟本科班有关课程听课及考试；任课教师严格要求，最后把试卷及登记成绩表交给各院研究生教学秘书。
3．研究生课程学习总学分应达到各学科专业培养方案的要求，不超过规定学分的５分以上。
农业推广(专业)硕士基本情况介绍
【农业推广硕士】专业硕士设置方案一、培养目标农业推广（含农业、林业、牧业、渔业推广，下同）是与农业技术推广和农村发展任职资格相联系的专业学位。
主要为农业技术研究、应用、开发及推广，农村发展，农业教育等企事业单位和管理部门培养具有综合职业技能的应用型、复合型高层次人才。
具体要求为：（一）农业推广硕士专业学位获得者应较好地掌握中国特色社会主义理论；拥护党的基本路线、方针、政策；热爱祖国，热爱农业，遵纪守法，品德良好，艰苦奋斗，求实创新，积极为我国农业现代化和农村发展服务。
（二）农业推广硕士专业学位获得者应掌握农业推广领域坚实的基础理论、系统的专业知识，以及相关的管理、人文和社会科学知识；具有较宽广的知识面，较强的专业技能和技术传授技能，具有创新意识和新型的农业推广理念，能够独立从事较高层次的农业技术推广和农村发展工作。
（三）基本掌握一门外国语，能够阅读本领域的外文资料。
二、招生对象主要为具有国民教育序列大学本科学历(或本科同等学力)人员。
三、学习方式及年限采用全日制学习方式，学习年限一般为2年。
四、培养方式（一）采取校内课程学习和校外实践研究相结合的学习方式。
课程学习实行学分制，实行多学科综合、宽口径的培养方式。
培养单位应建立适合不同领域专业特征的校外农业推广实践基地，鼓励采用顶岗实践的方式进行实践研究，实践研究累计不少于12个月。
（二）学位论文实行导师负责制，鼓励由具有实践经验并有高级技术职称的校内外导师联合指导。
五、课程学习及必修环节农业推广硕士专业学位的课程应根据培养目标要求，按领域设置，突出专业技能及技术集成能力的培养。
教学内容应体现宽广性、综合性、实用性和前沿性。
加强案例教学和实践教学，在领域主干课中应有1门运用本领域的主要理论和技术解决农业推广实践问题的案例研究课程；在学期间必须保证不少于12个月的实习实践训练。
同等学力或跨专业攻读农业推广硕士专业学位的研究生，应补修相关领域本科阶段的主干课程2～3门，成绩不计入总学分。
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云南农业大学
硕士研究生个人培养计划（一）（课程设置、教学实践、社会实践等）
学号2012210030
姓名吴睿
学科、专业农业机械化工程
学院工程技术学院
入学年月2012年09月04日
填表日期2012 年9 月24 日
填表说明
一、本计划包括研究生培养的课程设置、教学实践、社会实
践等部分。
二、本表必须在导师指下填写，一式四份（研究生处、学院、
导师、硕士研究生本人各一份）。
三、表格用钢笔填写，字迹务必清楚；也可用A4纸双面打印
或复印，不得改变原表格式。
四、入学后两个月内研究生交原件给学院，由学院把原件送
交研究生处培养科存档（即第一学期第八周前）。
一、研究方向：
机电一体化
二、培养方式（包括方法和形式）：
一：理论教学
二：实践教学指导
三：社会实践与调查
四：指导本科生毕业实习
三、导师姓名：朱云职称：副教授
四、指导小组成员（3-4名，包括导师在内）
姓名：职称：(要求具有讲师以上职称)
朱云副教授
杨文彩副教授
黄云战教授
木霖研究员
五、该生入学情况：
入学前最后学历：2012年 6 月毕业于安徽农业大学经济技术学院院校车辆工程专业，学制：4年
年。
1、该生是否以同等学力考入：否
2、该生是否跨学科专业考入（由学位点统一认定）：否
注：跨学科专业（一般以二级学科划定）或以同等学力考入的研究生，由指导教师根据培养方向，在“六、课程设置……”中指定补修目前所攻读硕士学科专业的本科主要课程2－3门。
六、课程设置及学习进程安排
注：1．课程设置和安排根据各学科专业最新的培养方案填写。
2．补修课程：指跨学科（一般以二级学科划定）专业或以同等学力考入的研究生，应补修目前所攻读硕士学科专业本科的主要课程2－3门（由指导
教师根据培养方向指定）。
补修课程不计学分，60分为合格。
由各学院、
硕士点安排硕士生跟本科班有关课程听课及考试；任课教师严格要求，
最后把试卷及登记成绩表交给各院研究生教学秘书。
3．研究生课程学习总学分应达到各学科专业培养方案的要求，不超过规定学分的５分以上。
七、教学实践（参加本科教学，总工作量不低于120学时，其中讲课教学时数：硕士生
不少于4节，要求从第二学年起安排）
八、社会实践（社会调查、科技咨询服务等）要求有考核的不少于3周，管理型硕士生
不少于2个月。
计划安排在第研一下学期—研二下学期学期
九、劳动（要求有考核的公益劳动不少于3周）
计划安排在第研一下学期—研二下学期学期
十、其他（生产实践等）
计划安排在第研一下学期—研二下学期学期。