医学微生物学实验报告

微生物实验报告

盐水或血清内，混合均匀。

四、结果与讨论

（一）实验结果

1.洗手前后对比：

图1.1甲乙洗手前后图1.2 丙丁洗手前后

空气的细菌学检查结果（实验室内，暴露在手机下）：

图1.3 空气的细菌学检查结果

CFU/m3 ＝ 50000N÷AT=50000×13×(3.14×3.5cm2)×40/m3=1118/m3

2.细菌的分离培养结果：

(1 )脓汁标本在普通平板上有黄色、白色两种菌落，菌落的色素是脂溶性的，是细菌本身的颜色。菌落直径2mm左右、圆形、隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不透明。

(2 )粪便标本在伊红美蓝平板上，有紫黑色、淡粉红色两种菌落，菌落色素是水溶性的，不是细菌本身的颜色，紫黑色菌落具有金属光泽、大而隆起、不透明的菌落，菌落直径2〜3mm；粉红色菌落淡粉红色，半透明，直径1〜2mm.

（3）从四张平板画线的结果上来看，四张均有不足，得不到特别典型的菌落。第一二张脓汁的营养琼脂平板，前面两区涂抹太密集，而板的其他部位未充分利用，得不到十分明显的菌落。第三粪便的平板涂布时，用力过大划破平板，而第四张粪便的平板第一区太稀疏，未充分利用平板，故在培养后未见到数量较少的粉红菌落，原因是初次划线时，力度与划线的密度均未能很好地掌握，动作不熟练，不能连续划线。

图2.1甲，乙→脓汁标本→营养琼脂平板

图2.2丙，丁→粪便标本→伊红美蓝平板

3.细菌的纯培养：

在斜面培养基上得到四种菌体的纯培养标本，从普通平板上挑取的金黄色或白色菌落接种的斜面，菌苔的颜色，还是原来菌落的颜色，金黄色或白色。

从伊红美蓝平板上挑取的紫黑色或粉红色菌落接种的斜面，菌苔已经没有原来菌落的颜色。菌苔灰白色、表面湿润、光滑、前者不透明，后者透明。

图3.1四种菌落在斜面培养基上生长情况

右左向右依次为金黄，白色，紫黑，粉红菌苔

4.细菌的形态学检查:

图4.1脓汁菌苔（左边为金黄色菌苔，右图为白色菌苔）

图4.2粪便菌苔（左图为紫黑色菌苔，右图为粉红菌苔）

镜下观察：

用普通平板，从浓汁标本中分离得到黄色、白色两种菌落，这两株细菌，显微镜油镜下均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌。结合菌落色素，这两株葡萄球菌可能是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌。

用伊红美蓝平板，从粪便标本分离、获得紫黑色和粉红色半透明两种菌落。紫黑色菌落可能是能分解乳糖的非致病菌大肠埃希菌。粉红色菌落是不能分解乳糖的致病菌。显微镜下，均为G-杆菌，散在排列，从形态上不能鉴别是什么细菌。

5、液体培养基接种

图5.1液体培养基接种结果从左至右分别为：（①黄色细菌②白色细菌③紫黑色细菌④粉红色细菌）

6.细菌的生化试验等:

（1）半固体穿刺接种法

图6.1半固体穿刺

图6.2糖发酵实验结果图.从左至右分别为：（①紫黑→葡萄糖②紫黑→乳糖③粉红→葡萄糖④粉红→乳糖）

编号菌苔糖发

酵管

反应现象结果描述符

号

甲紫黑①糖发酵管变黄色有气泡分解X糖产酸又产气⊕乙紫黑②糖发酵管变黄色有气泡分解X糖产酸又产气⊕丙粉红③糖发酵管变黄色无气泡分解X糖产酸不产气+ 丁粉红④糖发酵管仍紫色无气泡分解X糖不产酸不产气- +：产酸或阳性⊕：产酸产气 -：阴性

紫黑细菌微型发酵关内液体变黄，产生气泡，气泡的高度分别为10mm和17mm，说明紫黑色菌苔既分解葡萄糖也分解乳糖，产酸产气；粉红细菌只分解葡萄糖，不产气，不分解乳糖。

(3)抗菌素敏感试验结果:

图6.3抗菌素敏感试验结果

表3各菌抑菌圈直径（mm）表

菌苔青霉素头孢曲松庆大霉素

金黄色 35 42 32

白色 28 21 34

紫黑— 30 27

粉红— 35 30

表4.药敏试验结果分析

青霉素头孢曲松庆大霉素金黄色 + + +

白色±± +

紫黑 - + +

粉红 - + +

-：耐药±：中度敏感 +：敏感

金黄细菌对青霉素敏感，对头孢曲松敏感，对庆大毒素敏感

白色细菌对青霉素中度敏感，对头孢曲松中度敏感，对庆大毒素敏感

紫黑细菌对青霉素耐药，对头孢曲松敏感，对庆大毒素敏感

粉红细菌对青霉素耐药，对头孢曲松敏感，对庆大毒素敏感

（4）血浆凝固酶实验结果：

图6.4白色（左）与金黄色（右）菌苔

1、白色菌苔不发生凝块，容易涂抹。呈均匀乳白状态。

2、黄色菌苔能产生血浆凝固酶，可使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,附着于菌体表面,形成凝块，涂抹不开。说明黄色细菌为致病菌。

7.细菌的血清学试验结果：

图6.5粉红菌苔（右）凝集结果（左侧为对照）

1、由实验结果图可看到，生理盐水一端不出现凝集，福氏志贺菌诊断血清一端菌液浑浊，少量絮状，为阳性。说明粉红菌为福氏志贺菌。

8.结论：

肠道杆菌科各菌属生化反应鉴别表

(二）实验综合讨论

1.分析：

（1）、用普通平板，从脓汁标本中分离得到黄色、白色两种菌落，油镜下均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌。结合菌落色素，这两株葡萄球菌分别是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌。致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶，可使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,附着于菌体表面,形成凝块。通过血浆凝固酶实验，金黄色葡萄球菌实验结果阳性，为致病菌。

用伊红美蓝平板，从粪便标本中分离出紫黑色具有金属光泽和粉红色半透明菌落，显微镜下均为G-杆菌，散在排列。紫黑色金属光泽的产生是因为乳糖被分解产酸，酸使伊红美和蓝紫结合，产生紫黑金属光泽菌落。紫黑色菌落是能分解乳糖的大肠埃希菌。致病菌不能分解乳糖，菌落呈现伊红的颜色。粉红色菌落是不能分解乳糖的致病菌。从形态上不能鉴别是什么细菌。经糖发酵试验（紫黑色菌落菌种分解葡萄糖和乳糖，产酸产气；粉红色菌落菌种只能分解葡萄糖，产酸不产气）半固体动力试验（紫黑色菌落菌种半固体动力试验结果阳性，有鞭毛；粉红色菌落菌种半固体动力试验结果阴性，无鞭毛）。对照常见肠道感染细菌主要生化反应特征，判定它们分别是大肠埃希菌和福氏志贺菌。通过血清学实验，粉红色菌落菌种与福氏志贺菌诊断血清发生凝集反应，进一步确定其为福氏志贺菌。综上所述，紫黑色的细菌为大肠埃希菌，粉红色的为福氏志贺菌。

2.实验的不足之处：

我们的实验在操作上也产生了许多错误和不足。