植物生理综合实验答案
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综合设计实验1矿质元素对植物的作用(红色的问题见后附照片) 1、本次实验名称?分为哪两部分?
诱导产生NR,增强其活性
2、NR有何特性?何谓诱导酶?
NR为诱导酶,不供应硝酸根之前,不会产生。诱导酶
3、针对上述特性实验中采取何措施?“真空渗入法”在步骤中何处体现?
措施:提前一天用硝酸盐叶面喷施,增强活性
体现:反应时,将三角瓶放在真空干燥器中,用真空泵抽气放气,直至叶片沉入瓶底
4、实验中NO3-所起作用?
诱导产生NR,增强其活性
5、何谓磺胺比色法?
亚硝态氮在酸性溶液中与对氨基苯磺酸形成重氮盐,再与a-萘胺定量生成红色偶氮化合物,在520nm有最大吸收峰.
6、NR活力以什么表示?步骤中何处有关键作用?
用产生的亚硝态氮的量表示。关键作用就是21页的注意事项。
7、标准曲线操作顺序如何?两人如何配合?
制备标准溶液、制备显色液、绘制标准曲线。要默契地配和,一人在做实验的同时,另一人要负责记录。
8、为何标准溶液用NaNO2溶液不用NaNO3?标准溶液浓度是多少?
因为硝酸还原酶活性可由产生亚硝态氮的量表示,而不是用NO3-表示,所以用NaNO2表示。标准溶液浓度是1微克每毫升。
9、标准溶液和谁在什么条件下显色多久?比色波长是多少?
在硝酸还原酶活性的测定实验中,三角瓶30度下置于黑暗处(恒温箱、水浴锅等)保温30min,在520nm波长下比色;硝态氮含量测定实验中,常温下放置20min,再加入8%NaoH溶液9.5ml,摇匀冷却至室温,在410nm波长下比色
10、如何获得标准曲线或回归方程?
通过使用标准溶液得到的实验数据,确立好横竖坐标运用电脑软件制作。11、取样应注意什么?
第一、仪器不能混用,严格按照组别及标签按要求使用;第二、材料(叶片)要用湿纱布擦拭干净,用蒸馏水冲洗,滤纸(或干纱布)吸干。
12、植物材料如何净化?
采回来的材料(叶片)要用湿纱布擦拭干净,用蒸馏水冲洗,滤纸(或干纱布)吸干。
13、叶圆片如何获得,需要多少个叶圆片?
14、如何确保叶片等重?为何要等重?每份重量是多少?
15、两个三角瓶中为何一个加入H2O,另一个加KNO3?
16、三角瓶中为何放入PH7.5缓冲液?
17、为何要用真空泵抽气?使用中应注意什么?
真空泵抽气影响NO2-的浸出量。防止液态水进入泵腔
18、抽气时有何现象发生?抽气到何时(何种程度)为止?
(1)因为反复抽气放气,溶液可渗入叶组织取代叶片空气,叶片便沉于溶液底部,酶促反应可以相对完全的进行。
(2)抽气到叶片沉淀
19、抽气后三角瓶置于何处?什么条件?多长时间?
显色反应在黑暗处(恒温箱、水浴锅等)进行30分钟
20、三角瓶取出后显色反应在何容器中进行?为何先加磺胺,后加苯胺?
21、上述溶液显色反应时间多长?波长?空白?
30min,520nm,空白组一样
22、若三角瓶取出后显色反应不立刻进行,对实验结果有无影响?更高还是
更低?
有影响,更高还是更低我也不知道,我个人觉得更低
23、请演算(板书)NR活性计算公式
硝酸还原酶活性(μg·g-1·h-1) ﹦(N02-含量-N02-含量)×10/W×t
24、NR活性计算公式中t为多少?公式中×10是何用意?
0.5h;因取反应液的十分之一做后面实验,恩大概就这意思吧
25、如何获得②NO2-、①NO2-含量?
26、NO3-测定中,与其反应的物质为什么?试剂中酸的作用?
27、该反应产物有无颜色?如何才能显色?应加入何物?
28、该曲线操作为何与前述不同?区别在哪?比色波长为多少?
29、实验材料如何处理?称重多少?
处理:将材料用湿纱布擦拭干净,用蒸馏水冲洗,滤纸吸干。称取:酶活性测定称取0.3-0.5,硝态氮含量测定准确称取2g
30、用何试剂在何处多少摄氏度下提取?管口如何处理?
酶活性测定:0.1mol/L,ph7.5磷酸缓冲液在30度水浴
硝态氮含量测定:无机离子在沸水浴中处理,管口用玻璃泡封口
31、提取结束为何要冷却?定容至多少?如何确保不损失?
因为要在室温下进行实验,定容至25ml容量瓶,反复冲洗几次确保不损失3
32、取样品液多少?与何试剂(多少)反应?
取样品液0.1ml,与5%水酸—硫酸溶液0.4ml反应,再与9.5ml8%氢氧化钠反应
33、多长时间后加入多少8%NaOH溶液?
取样加入水酸_硫酸后,静止20分钟加入
34、该测定空白为什么?波长为多少?
进行对比,410波长
35、请演算NO3--N含量计算公式。
氮含量=C*V/W
36、上述计算公式其中C,V,W分别代表什么?
硝态氮含量(mg·g-1FW) = (C×V)/W
C为标准方程计算得NO3--N浓度(ug·ml)
V为提取样品液总量(ml);
W为样品鲜重(g) 。
37、以上公式中C如何获得?
C为标准方程计算得NO3--N浓度(ug·ml)
综合设计实验2 植物利用光能的生理基础
1、叶绿素在红光区和蓝光区都有吸收峰,能否用蓝光区的吸收峰波长进行叶绿素的定量分析?为什么?
不能,因为叶绿素a和叶绿素b在百分之96乙醇中最大洗手峰的波长不同,用分光光度计测定各种叶绿体色素的含量时,对分光光度计的波长精确度要求较高,如果波长与原吸收峰波长相差1nm,则叶绿素a的测定误差为百分之二,叶绿素b为百分之十九,因此,在使用前必须严格种植不同叶绿素的最大吸收峰波长。。。
2、选择80﹪丙酮提取叶绿体色素时,叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的吸收峰值分别是多少纳米?
663nm,645nm,470nm
3、选择96﹪乙醇提取叶绿体色素时,叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的吸收峰值分别是多少纳米?
665nm,649nm,470nm
4、选择不同试剂提取叶绿体色素时,叶绿体色素计算公式有无不同?请板书用96﹪乙醇提取时的三个公式。