酶电极
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S为待测物质。欲测定S的浓度,可以在离子选择电极上附着酶E,用 离子选择电极测定反应中能直接测定的消耗或成成物种的浓度变化, 从而得出S浓度的变化。消耗/生成物种可以是电子,离子,气体,光, 热等。
由米曼氏方程:
vm [S] v0 = k1 1 [S] [S] Ks k1
若控制浓度使[S]远小于Km,则方程简化为:
以电位型电极为例,其原理依然是由能斯特定理建立电位与活度(浓度很 低时近似于浓度)的关系。
g h .aH RT aG RT B EE ln a b E ln a B ZF aA .aB ZF B
构建适当的参比电极和指示电极,测定电位差即可换算出活度。
E S +C ES E P
其他类型的生物传感器
除了酶传感器外,还有一些其他类型的生物传感器: 酶传感器 组织传感器
组织传感器是以动植物组织薄片中的生物催化层与 基础敏感膜电极结合而成,该催化层以酶为基础,基 本原理与酶传感器相同. 一类是利用微生物在同化底物时消耗氧的呼吸作 用;另一类是利用不同的微生物含有不同的酶。
微生物传感器
电极的正常工作电压应在 X-Y区。此区域电压的波 动对电流的影响较小
其他类型电极
•
其他类型电极主要测量的信号包括光信号、热信号等。 固定化的生物材料与相应的被测物作用时常伴有热的变化.例如大多 数酶反应的热焓变化量在25-100kJ/mol的范围.这类生物传感器的工作原 理是把反应的热效应借热敏电阻转换为阻值的变化,后者通过有放大器的 电桥输入到记录仪中.
vm [S]
v0 =
vm [S] 1 dP 1 dC = 1 ν P dt ν C dt Ks
此时由酶促反应引起的浓度变化可以用不含酶的电极作为参比得出
以胆固醇氧化反应为例。
用包埋了酶和未包埋酶的电极作参比, 分别用氧电极测定两组的耗氧量,其差 值即为酶促反应的耗氧量。由耗氧量可 以得出参与反应的胆固醇的量。
wk.baidu.com
例:氨敏电极
NH3 H2O NH4 OH
氨气通过透气膜进入溶液,使反 应正向进行,电解质溶液pH升高, 导致玻璃膜膜电位的产生,并与 铵离子浓度相关联
电流型电极
在两极间施加电压,测定通过阴极的电流来实现测定。 例如:
利用耗氧量与电子转移数的关系测定养的消耗量或过氧化氢生 成量。
酶电极是由感受器(如固定化酶)和换能器(如离子选择性电极)所组 成的一种分析装置,用于测定混合物溶液中某种物质的浓度,其研究内 容包括:酶电极的种类、结构与原理;酶电极的制备、性质及应用等。 酶电极法同一般电极法的差别在于先经一个酶促反应过程,然后使离 子选择电极响应。如果测试底物迅速向酶膜方向扩散,并与酶层接触而发 生反应,则在电极周围必然引起底物或产物浓度的改变,从而使选择电极 产生特定的响应,在检测器(如光电记录系统)上就会反映这种浓度的变 化 。 在选择基础电极时可以根据待测物的性质进行选择,例如,若底物能 进行耗氧的酶促反应,可以选取氧气或过氧化氢电极;若底物进行产生 氢离子的酶促反应,那么可以选取pH电极。
免疫传感器 核酸传感器
免疫传感器就是利用抗原抗体的识别,结合能 力将抗体或抗原和换能器组合而成的装置。 依据生物体内核苷酸顺序相对稳定,核苷酸碱 基顺序互补的原理而设计出核酸探针传感器, 即基因传感器。基因传感器一般有单链核酸分 子,能够专一地与特定靶序列进行杂交从而检 测出特定的目标核酸分子。
Thank you for your attention
酶电极
主讲人:王鑫瑞 亲友团:DDB,XX,刘志昱
酶电极
在分析化学中,离子选择电极可以完成对某些离子浓度的监测。那 么是否可以将离子选择电极推广到有机物的检测中呢? 1962年Clark和Lyon s进行了尝试, 他们用 一种半透膜把液态葡萄糖 氧化酶与铂电极包 在一 起, 用于葡萄糖的分析 。
酶电极=固定化酶+基础电极
RT = ln(a H ) x ,out F o =玻璃 0.05916pH x
o 玻璃
以摩尔甘汞电极为参比电极,玻璃电极为指示电极:
E 甘 汞 玻 璃 甘 汞
o 玻璃
0.05916pH x
气敏电极
气敏电极的组成
复合离子选择电极、气透膜和内充液三部分组成 复合离子选择电极包括指示电极和参比电极 气透膜分为非均相微孔膜和均相塑料膜 内充液应含有两种基本成分
酶
底物
中间产物
产物
基础电极
电位型电极
基础电极
气敏电极
电流型电极
其他类型电极
电位型电极
是对特定离子产生选择性相应的一类电化学传感器通常是由敏感膜、 指示电极、参比电极和待测溶液构成原电池,直接测量电池电动势并 利用Nernst公式来确定物质含量的方法。 其电极电位产生的机制都是基于内部溶液与外部溶液活度不同而产 生电位差.其核心部分为敏感膜,它主要对欲测离子有响应,而对其它离 子则无响应或响应很小,因此每一种离子选择性电极都具有一定的选择 性.
例如,过氧化氢酶,能催化过氧化氢/鲁米诺体系发光,因此如设 法将过氧化氢酶膜附着在光纤或光敏二极管的前端,再和光电流测定 装置相连,即可测定过氧化氢含量. 还有很多细菌能与特定底物发生反应,产生荧光.也可以用这种方 法测定底物浓度
过氧化氢分解后生成的单氧氧化鲁米诺 使其发光。通过光信号到电信号的转化可以得 到浓度信息。
Ag+AgCl
0.1mol kg-1 HCl 待测 溶液 (pHx)
特殊玻璃膜
电极表达式: Ag-AgCl(s)|HCl(0.1mol/dm3)|膜 |H+(pH)x
玻璃=
o Ag , AgCl Cl
o 玻璃
RT (a H ) x ,out ' ln F (a H ) in
由米曼氏方程:
vm [S] v0 = k1 1 [S] [S] Ks k1
若控制浓度使[S]远小于Km,则方程简化为:
以电位型电极为例,其原理依然是由能斯特定理建立电位与活度(浓度很 低时近似于浓度)的关系。
g h .aH RT aG RT B EE ln a b E ln a B ZF aA .aB ZF B
构建适当的参比电极和指示电极,测定电位差即可换算出活度。
E S +C ES E P
其他类型的生物传感器
除了酶传感器外,还有一些其他类型的生物传感器: 酶传感器 组织传感器
组织传感器是以动植物组织薄片中的生物催化层与 基础敏感膜电极结合而成,该催化层以酶为基础,基 本原理与酶传感器相同. 一类是利用微生物在同化底物时消耗氧的呼吸作 用;另一类是利用不同的微生物含有不同的酶。
微生物传感器
电极的正常工作电压应在 X-Y区。此区域电压的波 动对电流的影响较小
其他类型电极
•
其他类型电极主要测量的信号包括光信号、热信号等。 固定化的生物材料与相应的被测物作用时常伴有热的变化.例如大多 数酶反应的热焓变化量在25-100kJ/mol的范围.这类生物传感器的工作原 理是把反应的热效应借热敏电阻转换为阻值的变化,后者通过有放大器的 电桥输入到记录仪中.
vm [S]
v0 =
vm [S] 1 dP 1 dC = 1 ν P dt ν C dt Ks
此时由酶促反应引起的浓度变化可以用不含酶的电极作为参比得出
以胆固醇氧化反应为例。
用包埋了酶和未包埋酶的电极作参比, 分别用氧电极测定两组的耗氧量,其差 值即为酶促反应的耗氧量。由耗氧量可 以得出参与反应的胆固醇的量。
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例:氨敏电极
NH3 H2O NH4 OH
氨气通过透气膜进入溶液,使反 应正向进行,电解质溶液pH升高, 导致玻璃膜膜电位的产生,并与 铵离子浓度相关联
电流型电极
在两极间施加电压,测定通过阴极的电流来实现测定。 例如:
利用耗氧量与电子转移数的关系测定养的消耗量或过氧化氢生 成量。
酶电极是由感受器(如固定化酶)和换能器(如离子选择性电极)所组 成的一种分析装置,用于测定混合物溶液中某种物质的浓度,其研究内 容包括:酶电极的种类、结构与原理;酶电极的制备、性质及应用等。 酶电极法同一般电极法的差别在于先经一个酶促反应过程,然后使离 子选择电极响应。如果测试底物迅速向酶膜方向扩散,并与酶层接触而发 生反应,则在电极周围必然引起底物或产物浓度的改变,从而使选择电极 产生特定的响应,在检测器(如光电记录系统)上就会反映这种浓度的变 化 。 在选择基础电极时可以根据待测物的性质进行选择,例如,若底物能 进行耗氧的酶促反应,可以选取氧气或过氧化氢电极;若底物进行产生 氢离子的酶促反应,那么可以选取pH电极。
免疫传感器 核酸传感器
免疫传感器就是利用抗原抗体的识别,结合能 力将抗体或抗原和换能器组合而成的装置。 依据生物体内核苷酸顺序相对稳定,核苷酸碱 基顺序互补的原理而设计出核酸探针传感器, 即基因传感器。基因传感器一般有单链核酸分 子,能够专一地与特定靶序列进行杂交从而检 测出特定的目标核酸分子。
Thank you for your attention
酶电极
主讲人:王鑫瑞 亲友团:DDB,XX,刘志昱
酶电极
在分析化学中,离子选择电极可以完成对某些离子浓度的监测。那 么是否可以将离子选择电极推广到有机物的检测中呢? 1962年Clark和Lyon s进行了尝试, 他们用 一种半透膜把液态葡萄糖 氧化酶与铂电极包 在一 起, 用于葡萄糖的分析 。
酶电极=固定化酶+基础电极
RT = ln(a H ) x ,out F o =玻璃 0.05916pH x
o 玻璃
以摩尔甘汞电极为参比电极,玻璃电极为指示电极:
E 甘 汞 玻 璃 甘 汞
o 玻璃
0.05916pH x
气敏电极
气敏电极的组成
复合离子选择电极、气透膜和内充液三部分组成 复合离子选择电极包括指示电极和参比电极 气透膜分为非均相微孔膜和均相塑料膜 内充液应含有两种基本成分
酶
底物
中间产物
产物
基础电极
电位型电极
基础电极
气敏电极
电流型电极
其他类型电极
电位型电极
是对特定离子产生选择性相应的一类电化学传感器通常是由敏感膜、 指示电极、参比电极和待测溶液构成原电池,直接测量电池电动势并 利用Nernst公式来确定物质含量的方法。 其电极电位产生的机制都是基于内部溶液与外部溶液活度不同而产 生电位差.其核心部分为敏感膜,它主要对欲测离子有响应,而对其它离 子则无响应或响应很小,因此每一种离子选择性电极都具有一定的选择 性.
例如,过氧化氢酶,能催化过氧化氢/鲁米诺体系发光,因此如设 法将过氧化氢酶膜附着在光纤或光敏二极管的前端,再和光电流测定 装置相连,即可测定过氧化氢含量. 还有很多细菌能与特定底物发生反应,产生荧光.也可以用这种方 法测定底物浓度
过氧化氢分解后生成的单氧氧化鲁米诺 使其发光。通过光信号到电信号的转化可以得 到浓度信息。
Ag+AgCl
0.1mol kg-1 HCl 待测 溶液 (pHx)
特殊玻璃膜
电极表达式: Ag-AgCl(s)|HCl(0.1mol/dm3)|膜 |H+(pH)x
玻璃=
o Ag , AgCl Cl
o 玻璃
RT (a H ) x ,out ' ln F (a H ) in