神经组织工程-副本
神经组织
细胞核圆形或卵圆形，较大，染色浅。 细胞质内含大量的胶质丝，由胶质原纤维酸性蛋白组成，是 其主要的细胞骨架成分。
功能：支持、营养、绝缘、修复、调节突触传递效率；在脑和脊髓 表面形成胶质界膜（glial limitation）；组成血脑/血脊屏障
细胞核
位于胞体中央，大而圆， 核膜明显，常染色质多， 染色浅，核仁也大而圆
细胞质
核周质（perikaryon）含特殊 结构：尼氏体和神经原纤维
细胞膜
有离子通道和神经递质的受体
（1）细胞核
位于胞体中央，大而圆，核膜明显，常染色质多， 染色浅，核仁也大而圆
（2）细胞质：又称核周质，除含有线粒体、溶酶体、中心粒和
锥体细胞 星形细胞 梭形细胞
三、突触的结构特征和功能 synapse
突触:神经元与神经元之间，或神经元与效应细胞之间传递信息
的结构
电流通过神经元之间，或与效应细胞之间的缝
电突触 隙连接传递神经信号。双向传导。
同步化程度高(一群相邻近的细胞进行同步活动)分化性 差。主要分布在心肌、肝、平滑肌细胞之间，以及脑内 突触 某些部位的神经元之间
化学突触 以神经递质作为传递信息的媒介。单向传导。
化学突触的结构
LM：球状、扣状膨大，称为突触小体(synaptic knob)
EM：
突触前膜（增厚）
突触前成分
（presynaptic element）
突触小泡（含神经递质/调质）
线粒体、微丝、微管
突触间隙
（synaptic cleft）
突触后成分
尼 氏 体
（3）细胞膜
属于可兴奋膜，具有接受刺激、处理信息、产生和传导神经冲动的
组织工程化神经修复周围神经创伤的应用
结 果 与结 论 ：现 阶段 组织 工程 方法 修复 周 围神 经损伤 的研 究 虽 已取得 很大 进展 ， 但 大 多停 留于 实验探 索 阶段 。 将 组织 工程 神 经应 用 于临床 尚存下 列 问题亟 待解 决 ：①种 子细 胞来 源 及伦 理 。② 细胞扩 增后 移植 的免疫排 斥 。 ③ 移植 细 胞稳 定 性 问题及 致 瘤性 。④ 神 经支 架材 料 的降解 速 度 、最佳 孔 隙率 、导 管 厚度 、形 状等 。⑤ 体 外神 经 构建 后 移植 修 复 时机 。⑥ 各种 神经 生物 因 子 的局部 释放 与 调控 等等 。随着 科技 的 发展 ，期 待上 述 问题 的解 决 ，从 而使 得 众 多临床 神经 损伤 患 者受益 。
中国组织工程研究
仃卷 第４ ７
２ ０１ ３—１ ０—０ ８出版
Ｗ Ｗ Ｗ ． Ｃ Ｒ Ｔ Ｅ Ｒ ． ｏ ｒ ｇ
Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅＪ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｔ ｉ ｓ ｓ ｕ ｅＥ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇＲ ｅ ｓ ｅ ａ ￣ｈ Ｏ ｃ ｔ ｏ ｂ ｅ ｒ ８ Ｊ ２ ０ １ ３ Ｖ ｏ Ｌ １ ７ ， Ｎｏ ． ４ １
方 法 ： 由第一 作者 在 ２ ０ １ ３年 ７月应 用 计算机 检 索 Ｐ ｕ ｂ Ｍｅ ｄ 数据 库及 ＣＮ Ｋ Ｉ 数据 库 ，英 文关键 词 为 “ ｔ ｉ ｓ ｓ ｕ ｅ ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ，ｐ ｅ ｒ ｉ ｐ ｈ ｅ ｒ ａ ｌ ｎ ｅ ｒ ｖ ｅ ｓ ，ｎ ｅ ｖｅ ｒ ｉ ｎ ｊ ｕ ｒ ｉ ｅ ｓ ，ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ，ｓ ｃ ｈ ｗａ ｎ ｎ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ，ｓ ｃ ａ ｆ ｏ ｌ ｄ ，ｇ ｒ ｏ ｗ ｔ ｈ ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ ”。 中文 关键 词 为 “ 组织 工程 ，周 围神经 ，神经 损伤 ，干 细 胞 ，许旺 细胞 ，支架 ，生 长 因子 ” 。选择 内容与 神经 组 织工 程 、周 围神 经损 伤修 复相 关 的文章 ， 同一领 域文 献 则选择 近 期发表 或 发表 在权 威杂 志文 章 ，共纳 入 ６ ３
组织工程试题解答
D fd1、组织工程的三要素是什么?基本原理是什么?三要素:a)种子细胞; b)支架材料; c)生长因子基本原理:a) 由人体取出细胞;b) 在体外将细胞培养到足够的数量;c) 将这些细胞填入、养在人工支架里;d) 有时需要再加一些化学物或生长因子促进细胞的分化;e) 将此人工组织移植到患者身上。
2、组织工程的生长因子有哪些分泌方式?为什么生长因子需要控制性释放?根据生长因子产生细胞与接受生长因子作用的细胞相互之间的关系,可概括为以下三种模式:(1)内分泌(endocrine),生长因子从细胞分泌出来后,通过血液运输作用于远隔靶细胞。
如:血小板源生长因子(PDGF)源于血小板,作用于结缔组织细胞。
(2)旁分泌(paracrine),细胞分泌的生长因子作用于邻近的其他类型细胞,对合成、分泌该生长因子的自身细胞不发生作用,因为它缺乏相应受体。
(3)自分泌(autocrine),生长因子作用于合成及分泌该生长因子的细胞本身。
生长因子以后两种作用方式为主。
生长因子优点诸多,但是也存在很多问题,主要是高扩散性和半衰期短,生物学活性难以长期保存。
局部直接应用生长因子可在较短的时间内发挥作用,但在生理环境下很容易使之迅速失活,不产生预期的生理效应。
因此,采用控制性释放技术,对生长因子进行保护,使之在有水环境下即能保持活性,又能持续释放或控制释放,是使生长因子得到有效应用的关键。
3、组织工程用支架材料的基本要求是什么?为什么需要多孔结构?良好的生物相容性良好的生物降解性具有三维多孔立体结构可加工性和有一定的机械强度良好的材料-细胞界面良好的消毒性能合适的孔尺寸、高的孔隙率和相连通的孔形态,以利于大量细胞的种植、细胞和组织的生长、细胞外基质的形成、氧气和营养的传输、代谢物的排泄以及血管和神经的内长入。
A4、组织工程种子细胞的基本要求是什么?5、组织工程皮肤和骨骼等器官构建路线是什么?所构建的人工器官优缺点各是什么?采用动物实验检测所构建的器官的大概步骤是什么?6、与组织工程密切相关的两项医学生理学奖的获得者的姓名,时间,发现内容是什么呢?1986年美国生物化学家斯坦利·科恩(Stanley Co-hen) 和意大利生物学家丽塔·莱维-蒙塔尔奇尼(Rita Levi-Mont.alcini)共同获得诺贝尔生理学或医学奖。
神经组织
周 及围 其神 超经 微纤 结维 构髓 模鞘 式形 图成
2.卫星细胞
位置：神经节内包裹神经元胞体。 形态：一层扁平或立方形细胞。 核：圆或卵 圆形，染色 质浓密
四、神经纤维和神经
（一）神经纤维
结构：
由神经元的长轴突及包绕它的神经胶质细 胞构成。
分类：
有髓神经纤维 无髓神经纤维
1.有髓神经纤维
1.构成神经纤维的髓鞘。 2.分泌神经营养因子，促进受损伤 的神经元存活及其轴突再生。 层扁平或立方形细胞。对神经 节细胞起保护作用。
神经节内包裹神经元胞体的一 卫星细胞：
中 枢 细神 胞经 模系 式统 图的 神 经 胶 质
中 枢 神 经 系 统 的 神 经 胶 质 细 胞
（一）中枢神经系统的神经胶质细胞 1.星形胶质细胞
周围神经系统有髓神经纤维
施万细胞核
郎飞结
轴突
结间体
髓鞘
有髓神经纤维束纵切面光镜图 (1轴突 2髓鞘 3施万细胞核 4郎飞节)
周围神经纤维
有髓神经纤维横断面
髓鞘
化学成分：
主要是类脂和蛋白质，称髓磷脂（myelin）。 常规染色中呈网状（类脂溶解而至）。
形成：
由施万细胞的细胞膜呈同心圆样反复环绕轴突。
三、神经胶质细胞
星形胶质细胞 中枢神经系统
1.支持和绝缘作用。 2.它们末端形成脚板。 3.合成和分泌神经营养因子等生 物活性物质。 4.修复作用:形成胶质斑痕。
构成中枢神经系统有髓神经纤维的髓鞘。 少突胶质细胞：
小胶质细胞：吞噬作用。
室管膜细胞：衬在脑室和脊髓中央管的腔面。 施万细胞 周围神经系统
结构：
明暗相间的板层样结构。 施-兰(Schmidt-Lantermann)切迹。
神经组织的实训报告模板
一、实训目的通过本次神经组织实训，旨在了解神经组织的基本结构、功能及其在生理活动中的作用，掌握神经组织的观察方法和技巧，提高对神经组织病变的认识，为后续相关医学知识的学习打下坚实基础。
二、实训时间XXXX年XX月XX日三、实训地点XXXX医学院解剖实验室四、实训器材1. 神经组织切片2. 显微镜3. 载玻片4. 染色剂（如苏木精、伊红）5. 实训记录本五、实训内容1. 神经组织的观察- 观察神经组织的横切片和纵切片，了解其基本结构。
- 注意神经元的形态、分布及神经纤维的走向。
2. 神经元的观察- 观察神经元的细胞体、树突和轴突。
- 比较不同神经元的形态特点。
3. 神经纤维的观察- 观察神经纤维的排列、走向及髓鞘的形成。
- 分析神经纤维的功能及其与神经元的关系。
4. 神经胶质细胞的观察- 观察神经胶质细胞的形态、分布及功能。
- 了解神经胶质细胞在神经组织中的作用。
5. 神经组织的病变观察- 观察神经组织的病变切片，如神经元变性、神经纤维脱髓鞘等。
- 分析病变原因及临床表现。
六、实训步骤1. 准备实训器材，确保显微镜、载玻片等干净、完好。
2. 取出神经组织切片，放置在载玻片上。
3. 使用苏木精和伊红染色，观察神经组织的基本结构。
4. 通过显微镜观察神经组织切片，记录观察结果。
5. 分析观察结果，与理论知识相结合，总结神经组织的特点及功能。
6. 完成实训报告，整理实训心得。
七、实训结果1. 成功观察到神经组织的基本结构，包括神经元、神经纤维和神经胶质细胞。
2. 掌握了神经组织的观察方法和技巧。
3. 对神经组织病变有了初步的认识。
八、实训心得1. 通过本次实训，加深了对神经组织结构的理解，提高了观察和分析能力。
2. 了解了神经组织在生理活动中的重要作用，为后续医学知识的学习奠定了基础。
3. 认识到实训的重要性，将理论知识与实际操作相结合，提高自己的综合素质。
九、实训总结本次神经组织实训取得了圆满成功，达到了预期目的。
组织工程在神经损伤修复中的研究
组织工程在神经损伤修复中的研究神经损伤是临床上常见且严重的健康问题，给患者带来了巨大的痛苦和生活不便。
传统的治疗方法在一定程度上能够缓解症状，但往往效果有限，难以实现完全的神经功能恢复。
近年来，组织工程技术的发展为神经损伤修复带来了新的希望。
神经损伤的类型多种多样，包括外伤性损伤、缺血性损伤、退行性疾病引起的损伤等。
外伤性神经损伤如切割伤、牵拉伤等，会导致神经纤维断裂，影响神经信号的传递；缺血性损伤常见于中风等疾病，会造成神经细胞死亡和神经功能障碍；而退行性疾病如帕金森病、阿尔茨海默病等，则是由于神经细胞的逐渐退化和死亡引起的。
这些不同类型的神经损伤，其发病机制和病理生理过程各有特点，但都对神经系统的正常功能造成了严重破坏。
组织工程是一门融合了生物学、工程学和医学原理的交叉学科，旨在通过构建生物替代物来修复或重建受损的组织和器官。
在神经损伤修复中，组织工程的核心策略包括三个方面：支架材料的选择与设计、种子细胞的获取与培养以及细胞与支架材料的复合。
支架材料在神经损伤修复中起着关键作用。
它需要为神经细胞的生长和迁移提供合适的物理支撑和微环境。
理想的支架材料应具有良好的生物相容性、可降解性、适当的孔隙结构和机械性能。
目前，常用的支架材料包括天然生物材料如胶原蛋白、壳聚糖等，以及合成高分子材料如聚乳酸、聚乙醇酸等。
这些材料可以通过各种技术制备成不同的形态，如纤维、薄膜、海绵等，以适应不同部位和类型的神经损伤修复需求。
种子细胞是神经组织工程的重要组成部分。
常见的种子细胞包括神经干细胞、施万细胞、间充质干细胞等。
神经干细胞具有自我更新和多向分化的能力，能够分化为神经元和神经胶质细胞；施万细胞则在神经再生过程中发挥着重要的支持和营养作用；间充质干细胞来源广泛，具有免疫调节和旁分泌等功能，也被应用于神经损伤修复的研究。
获取种子细胞后，需要进行体外培养和扩增，以获得足够数量的细胞用于修复。
细胞与支架材料的复合是神经组织工程的关键步骤。
神经组织实验报告小结(3篇)
第1篇一、实验背景神经组织是人体内最重要的组织之一，主要由神经元和神经胶质细胞组成。
神经元是神经系统的基本功能单元，负责信息的接收、处理和传递。
神经胶质细胞则起到支持和保护神经元的作用。
为了更好地理解神经组织的结构和功能，我们进行了神经组织实验。
二、实验目的1. 观察神经组织的微观结构，了解神经元和神经胶质细胞的基本形态。
2. 分析神经元和神经胶质细胞的生物学特性，探讨其在神经系统中的作用。
3. 掌握神经组织实验的基本技能，为后续实验研究奠定基础。
三、实验方法1. 实验材料：新鲜神经组织切片、显微镜、染色液等。
2. 实验步骤：（1）取新鲜神经组织切片，进行苏木精-伊红染色。
（2）将染色后的切片置于显微镜下观察。
（3）记录神经元和神经胶质细胞的基本形态和生物学特性。
四、实验结果1. 神经元：（1）神经元细胞体呈圆形或椭圆形，细胞核较大，位于细胞中央。
（2）神经元细胞质内有发达的树突和轴突，树突较短，轴突较长。
（3）神经元之间通过突触相互连接，实现信息的传递。
2. 神经胶质细胞：（1）神经胶质细胞细胞体较小，呈星形或多角形。
（2）神经胶质细胞无细胞核，细胞质内有丰富的线粒体、高尔基体等细胞器。
（3）神经胶质细胞在神经元周围形成包绕层，起到支持和保护神经元的作用。
五、实验结论1. 神经元是神经系统的基本功能单元，负责信息的接收、处理和传递。
神经元细胞体、树突和轴突的形态特点有利于实现神经信息的传递。
2. 神经胶质细胞在神经元周围形成包绕层，起到支持和保护神经元的作用，同时参与神经递质的代谢和调节。
3. 神经组织实验有助于我们更好地理解神经系统的结构和功能，为进一步研究神经系统疾病提供理论依据。
六、实验体会1. 实验过程中，我们掌握了神经组织实验的基本技能，如切片、染色、显微镜观察等。
2. 通过实验观察，我们对神经元的形态结构和神经胶质细胞的功能有了更深入的了解。
3. 实验过程中，我们体会到科学研究需要严谨的态度和细致的操作，这对于培养我们的科研素养具有重要意义。
血管、神经组织工程
三、组织工程化血管 （一）血液与植入材料之间的反应 1．蛋白吸附 一旦血液通过移植物，血浆蛋白（白蛋白、 一旦血液通过移植物，血浆蛋白（白蛋白、纤维 蛋白、免疫球蛋白IgG IgG等 立即吸附于移植物血管壁。 蛋白、免疫球蛋白IgG等）立即吸附于移植物血管壁。 在移植物表面发生重新分布。 在移植物表面发生重新分布。 2．血小板沉积 蛋白质/ 蛋白质/血小板复合物沉积后血小板构象发生改 变并释放颗粒，释放出一系列生物活性物质， 变并释放颗粒，释放出一系列生物活性物质，这些 物质可激活其他血小板并增加凝血酶的产生； 物质可激活其他血小板并增加凝血酶的产生；诱导 调节平滑肌细胞漂移和增殖； 调节平滑肌细胞漂移和增殖；控制单核细胞积聚到 移植物上。 移植物上。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
2、大动脉 管壁中有许多层弹性纤维，平滑肌较少， 管壁中有许多层弹性纤维，平滑肌较少，也称为 弹性动脉。 弹性动脉。 内皮外有较厚的内皮下层， ①内膜 内皮外有较厚的内皮下层，其中含胶原纤 弹性纤维和一些平滑肌。 维、弹性纤维和一些平滑肌。内皮下层之外为多层 弹性膜，与中膜的弹性膜相连， 弹性膜，与中膜的弹性膜相连，故内膜与中膜没有 清楚的分界。 清楚的分界。 ②中膜 主要由多层弹性膜和一些平滑肌组成。成人 主要由多层弹性膜和一些平滑肌组成。 40～70层弹性膜 各层弹性膜由弹性纤维相连。 层弹性膜， 有40～70层弹性膜，各层弹性膜由弹性纤维相连。 较薄，致密的结缔组织组成， ③外膜 较薄，致密的结缔组织组成，没有明显的外 弹性膜。外膜逐渐移行为周围较疏松的结缔组织。 弹性膜。外膜逐渐移行为周围较疏松的结缔组织。
3．中性粒细胞和单核细胞浸润 趋化因子将中性粒细胞吸引到移植体上， 趋化因子将中性粒细胞吸引到移植体上，被激活 的中性粒细胞释放出氧、自由基和各种酶， 的中性粒细胞释放出氧、自由基和各种酶，诱导基质 降解，控制整个内皮细胞分化的过程， 降解，控制整个内皮细胞分化的过程，控制移植血管 的组织整合。 的组织整合。 4．内皮细胞和平滑肌细胞的向内生长 移植物仅有有限的内皮细胞向内生长， 移植物仅有有限的内皮细胞向内生长，其生长不 超过吻合端l cm； 超过吻合端l～2 cm；吻合口区周围可以发现受损伤 或未融合的内皮细胞，但生化性质发生改变， 或未融合的内皮细胞，但生化性质发生改变，可能启 动血栓形成和平滑肌细胞生长。平滑肌细胞增殖， 动血栓形成和平滑肌细胞生长。平滑肌细胞增殖，产 生细胞外基质成分。 生细胞外基质成分。这种平滑肌细胞过度增生的反应 通常被认为是产生内膜肥厚的主要原因。 通常被认为是产生内膜肥厚的主要原因。
神经干细胞修复面神经损伤的组织工程学研究
神经干细胞修复面神经损伤的组织Ｔ程学研究３．５．３统计学分析组间差异显著分析用ｘ２检验，各代均与原代Ｇｏ进行组间比较。
检验水准ａ＝Ｏ．０５。
结果ｌ细胞培养１．１原代培养细胞观察原代培养第ｌｄ观察到细胞呈圆球状分散悬浮于培养液中；第２～３ｄ可见大部分细胞贴壁死亡，而少数圆形细胞存活；培养７ｄ后，在培养基中可见大小不一的悬浮生长的细胞团，其中较小的细胞团由数个至数十个细胞构成，而较大的细胞团由上百个细胞构成，并且开始出现细胞团相互融合成更大的细胞球的现象（图１．１）。
镜下观察细胞球边界清晰、折光性好，组成细胞圆润饱满、排列致密。
图１．１原代培养Ｎｓｃｓ团ｌｏｏｘ１．２传代培养细胞观察将原代培养形成的细胞球进行传代处理，并将处理后的单细胞悬液按ｌ×１０…／Ｌ的密度（活细胞数）接种培养，此即为第１代。
按照此方法，目前在本实验室条件下己传ｌＯ代（＞３个月）。
传代培养６～７ｄ后，单细胞悬液中再次观察到大小不一的悬浮生长的细胞团，光镜下细胞团形态特点与原代培养无明显差异。
随着传代次数的增加，可见到细胞贴壁分化现象，分化的细胞形态不规则，胞体多郑州大学２００６届博士研究生毕业论文呈圆形或不规则的多边形，突起长短不一（图１—２）。
图１．２传代培养１０代细胞２００ｘ１．３诱导分化细胞观察将神经球转入有血清培养基的２４孔板中培养，１ｄ后即可见大部分细胞球贴壁生长；２～３ｄ，可见有许多突起自神经球边缘长出，开始小而短，进一步伸长呈放射状；４～５ｄ，周围迁出更多细胞，细胞有较长的突起，相互间可发生联系；６～７ｄ，可以看到种类众多、形态各异的已分化神经组织细胞，主要有胞体呈圆形或椭圆形具有ｌ～２长突起神经元样细胞和具有多个粗长突起的星形胶质样细胞（图１．３）。
图ｌ一３诱导分化７ｄ细胞２００ｘ２Ｎｓｃｓ的鉴定虽然Ｎｓｃｓ是一类未成熟细胞，但它选择性地表达某些抗原标志。
如Ｎｅｓｔｉｎ（巢蛋白／巢素）。
Ｎｅｓｔｉｎ正式名为Ｒａｔ．４０１，位于胞浆，属中间丝蛋白。
神经组织学
第二部分神经组织学方法前言神经组织学(国外统称作"神经解剖学"neuroanatomy) 是对人体或动物体神经系统的微细结构进行观察,研究神经组织细胞的形态与构造(包括显微结构和亚显微结构),以及细胞间相互联系,它们发生与发展的科学.在过去几十年内,神经解剖学曾被认为一门僵老学科,但自从电子显微镜发明以后,神经解剖学已逐渐改变了过去的面貌,特别是二十世纪七十年代以来,由于神经生理学和神经化学为神经解剖学提供了一些新方法新概念(如萤光组织化学技术,利用轴突原理的双标记技术,突触概念,免疫酶标技术.....),使这个古老的学科获得了新的生机,尤其是神经生理学与神经解剖学更紧密地结合起来,探索神经系统的结构与功能以及它们的相互关系, 已成为神经生物学研究中最活跃的领域之一.神经解剖学研究的问题一般可分两大类,相对应的就有一些专门的技术(即神经组织学方法).一类是研究神经组织一般形态结构的，相对应的方法有:Golgi法,Nissel法，还有萤光组织化学等,另一类是研究神经系统中的联系的,相对应的方法有:Nauta( 纤维退化)法:利用轴突运输的HRP法,HRP───萤光双标记,HRP─放射自显影双标记, HRP─免疫酶双标记等:利用能量代谢的2DG法;体外组织培养方法.....等等, 近年来由于与电生理手段的结合, 同于电子计算机的引入对神经系统的描述开始进入新的阶段,例如三维图象的显示,利用CT技术直接观察活的实验动物和人的活体组织结构.二、神经组织的处理过程及应注意事项.神经组织学的基本方法和其它组织学方法相同,必须先把有待研究的组织制成很薄的切片标本,经过染色处理形成可供观察的图象在显微镜下进行观察,研究. 神经组织染色处理的一系列过程虽然有的和处理其它组织相似,但也有其特殊性,应引起相当的重视否则会得不到应有的结果.(一), 固定与固定剂中枢神经系统(脑,脑干与脊髓)的固定根据需要可采取两种形式─整体固定法,切块固定法.(1) 整体固定法当需要作整脑切片时,用整脑固定法.固定脑的容器要宽大(园缸较好), 用线扎住脑的基底动脉,使脑倒悬于固定容器内,各面都不应与容器壁接触,以免受压变形.脊髓的固定最好放在长形容器内,使脊髓伸直. 如果在开颅前先自左心室或颈内动脉将固定剂灌注,再取脑浸于固定剂内,可有助于固定组织均匀迅速,这种整体固定脑(连同小脑及脑干)常需两周,成人脑可长达1-2个月之久,才能使脑组织变硬及固定良好.(2) 切块固定法新鲜脑组织切取材时,应稍切厚些,以便以后切片时受当时刀切面的影响.现在采用的大部分新技术都先经固定液心脏灌流然后开颅取脑后切块再固定一或二天即可进行切片处理.固定剂的选择首先决定于所用的方法及固定剂配方.最常用的是10%甲醛( 福尔马林)液或10%甲醛生理盐水液,其它固定剂可见各种方法的具体要求.(二), 切片三种切片法(石蜡切片法,火棉胶切片法,冰冻切片法) 在神经组织技术上都较常用. 例如对一些神经末稍装置和溃变纤维的银染法和现采用的大部分新技术多用冰冻切片法;大片的脑组织染色或镀银(Nissel法或Golgi法)以及髓鞘染色等多用火棉胶切片(常规及快速色埋法);一些神经末稍装置多习惯用石蜡切片.脑组织用石蜡色埋时, 浸蜡时间应稍长,否则石蜡不易浸透. 用火棉胶色埋的脑组织,除Golgi镀银法及类似法以外，一般都需经充分的脱水和浸胶时间，Golgi法(包括COX法等)因只需火棉胶起暂时的支持作用,而且长时间的洒精脱水可致银(汞)沉淀分解,所以只要求火棉胶略浸入组织,能达到切片的目的即可( 一般这类切片都较厚,组织内部末浸透火棉胶也能切完整), 不需长时间在酒精或火棉内浸泡.冰冻切片一般不需要媒介物的支持色埋,但如需较大切片或松软易碎组织也可经明胶色埋后再切(组织经水洗后,入5%,10%或20%明胶,24小时/37℃, 然后装于组织托上,再浸入10%甲醛液内硬化,即可冰冻切片).除石蜡切片外,火棉胶切片,冰冻切片都无须贴于载破片上之后再操作染色. 较方便的办法是用直径10厘米玻璃培养皿盛装切片,用烧扁头的玻棒或新毛笔捞取,用吸水纸沾去多余水份或洒精等.三). 应注意事项1. 神经组织取材时动作要轻柔,一般不要切取大块,用洒精脱水时每级洒精的差度也不要太大.2. 神经切片不要切很薄(如薄于10u).如切薄片, 常会将要观察的结构切丢或分割成不成形的碎段.3. 任何玻璃器皿,尤其用于银染法的,都应经清洁液浸洗后再用.所有用过的玻璃器皿则应在未干的情况下立即洗净并浸泡于清洁液内.4. 配制溶液应用蒸馏水.配制硝酸银溶液最好用双重蒸馏水; 在溶解硝酸银后其溶液应清彻透明,出现任何轻度混浊都应弃去不用.5. 避免使用含金属离子(如铁筒盛装的)洒精,包括用无水硫酸铜脱水的无水洒精.6. 试剂、染料一般不必大量配制贮存留用,配制成溶液后以有色瓶盛装.7. 夹取作镀银处理的组织块时,避免用金属镊子,如用金属镊时,应在镊顶端沾溶蜡后再用.捞取切片时用玻璃棒或新毛笔.8. 准备一个小暗箱,作室温镀金、银用.9. 某些镀银或染色等过程要求在高于室温的恒温箱内进行几天;这种温箱的质量应注意选择,绝不能使用那种控制温度不稳定的产品.10. 多参阅别人的报导资料,吸取经验.自已在操作过程中也要随时记录工作情况(例如时间、温度、试剂浓度以至水洗次数等)。
02-4基本组织--神经组织
（四）、神经纤维与神经 ）、神经纤维与神经
• 神经纤维是由神经元的长的突起及其套在外面的膜鞘所 构成。膜鞘由神经胶质细胞形成又称为神经膜 神经膜。 构成。膜鞘由神经胶质细胞形成又称为神经膜。 • 根据其表面有无髓鞘可分为 • （１）有髓神经纤维：此类纤维在突起与神经膜之间包 有髓神经纤维： 有一层节段性的髓鞘，髓鞘主要含脂质和蛋白质， 有一层节段性的髓鞘，髓鞘主要含脂质和蛋白质，具有 绝缘作用。脑神经和脊神经中大多数为有髓神经纤维。 绝缘作用。脑神经和脊神经中大多数为有髓神经纤维。 • （２）无髓神经纤维：此种纤维在神经元的突起与神经 无髓神经纤维： 膜之间没有髓鞘。植物性神经的节后纤维， 膜之间没有髓鞘。植物性神经的节后纤维，嗅神经和部 分感觉神经，都是无髓鞘神经纤维。 分感觉神经，都是无髓鞘神经纤维。
突触后膜上具有特异性的蛋白质受体，受 体种类多，但有特异性。神经系统内突触传递 方式较为复杂。当神经冲动传至突触前膜时， 突触小泡可贴附于突触前膜上，形成开口，将 神经递质释放到突触间隙 ，然后作用于突触 后膜上的受体，使受体蛋白质构型发生变化， 改变膜对离子的通透性，即引起突触后膜发生 兴奋性或抑制性的变化，从而使突触后神经元 兴奋或受抑制。突触的传递都是单向的，不能 往返或逆向传递。
２ 细胞突
• 是细胞体的细胞膜连同细胞质向外 突出形成的突起，其数目和长短各 不相同，按其形状和功能分为树突 和轴突两种。 • （１）树突：从细胞体发出，每个 神经元有一至多个不等，每一树突 反复分支如树枝状， 借以扩大接受 刺激的面积。树突的功能主要是接 受从另一个神经元传来的神经冲动， 并传向神经细胞体。 • （２）轴突：从细胞体发出，每个 ： 神经元只有一个，细长而均匀，表 面光滑,常有侧支从轴突垂直发出， 轴突未端分支较多，形成轴突终末。 轴突的主要功能是将来自细胞体的 神经冲动传给其他神经元或效应器。
神经组织工程 PPT课件
骨髓
例
NTCSCs
神
经
组
脱细胞支架：
织
使用的脱细胞支架为犬神经的脱细胞支架，
工
其使用化学消化剂处理后，有效清除神经干内
程
携带的主要组织相容性抗原复合物的细胞及髓 鞘, 降低其免疫原性而不出现排斥反应, 且处
应
理后的神经基膜管保留了由糖蛋白组成的雪旺 细胞基底板层,具有与自体神经移植物近似的
用
引导神经再生的功能。H-E染色表明该支架已
织
管、聚氨酯等。
工
目前研究和使用的多为胶原和聚乳酸的杂化 材料。
程
如：胶原蛋白-硫酸肝素神经生物支架材料
简
介
神 经
神经营养素家族
组
1、CNTF：睫状神经营养因子
织
2、GDNF：胶质细胞源神经营养因子
工
3、NGF：神经生长因子（BDNF：脑源性神经 生长因子）
程 简
4、NT-3：神经营养素3（NT-4/5、NT-6） 5、MDNF：巨噬细胞源性神经生长因子 6、SDNF：纹状体源性神经生长因子
应
神经损伤中具有广阔的应用前景。
用
实
例
神
经
组
织
工 程
羊膜(包括羊膜基底膜和羊膜上皮细 胞)可以提供宿主神经元生长的特定环境,
应 用
阻止胶质疤痕形成,促进神经元轴突再生 发芽,引导再生神经纤维向失神经靶器官 生长,其中羊膜上皮细胞不仅有合成释放
实
神经递质的神经生物学功能,还可以分泌
例
神经营养因子及其他生物活性物质 。
织
质瘢痕。大多数再生的轴突支不能通过此胶质 瘢痕。
简
但近年来发现，一些单胺能纤维越过中枢
解剖学基础《神经组织》PPT课件
电镜下观察，化学性突触包括3部分：
1.突触前部 是轴突末端的球形膨大部分，该处的细胞膜为突触前膜，突触前膜侧胞 质中含有许多突触小泡和线粒体等，突触小泡内含神经递质。
2.突触后部 是与突触前部相对应的树突或胞体的部分，其中，与突触前膜相对的细 胞膜为突触后膜，膜上具有特异性的接受神经递质的受体。
3.突触间隙 是突触前膜和突触后膜之间的狭小间隙， 宽约15~30nm。 当神经冲动传至突触前膜时，突触小泡移向突触前膜并 与之融合，通过胞吐作用将神经递质释放到突触间隙内， 神经递质在突触间隙扩散，与突触后膜上相应受体发生 特异性结合后，引起突触后神经元的兴奋或抑制。 化学性突触神经冲动传导的特点是单向性的，即只能由 突触前神经元传到突触后神经元，不能逆向传导。
神经胶质细胞不具有神经元的功能，但对神经无起支持、保护、绝缘、营 养等作用。
一、神经元
神经元由胞体和突起两部分组成。
(一)神经元的结构 1.胞体大小不一,形态各异，有圆形、星形、梭形、锥体形等多种形态，是神经元的 代谢和营养中心。
(1) 细胞膜:具有接受刺激、产生并传导神经冲动和信息处理的功能。
二、神经胶质细胞
神经胶质细胞广泛分布于神经系统中，一般较神经细胞小，有突起但不分树突和轴突。 根据分布的位置，神经胶质细胞可分为中枢神经系统胶质细胞和周围神经系统胶质细 胞。
工程组织修复重建外科—21世纪神经外科研究的热点
千细胞 ． 能使后 者分化为神 经元。这种简单的化合
物 似乎 只激活 向神经 元 分 化 的一 组 基 因 ， 同时抑 制 细胞 向其 它路径 分 化 的 基 因 表达 ， 以诱 导 胚 胎干 细 胞 的定 向分化 。胚胎 干 细胞 分 化潜 能 如 此广 泛 ， 为
移植体内， 以重建组织结构 的缺陷和替代 衰竭 器官 之功能（ 暂且称之为工程组织修复重建外科 ）将在 ．
前 仍无 法将 干细胞定 向诱 导分 化成具 有 某一特定 功
、
组 织工 程的成就 和现 状
组织工程 是一 门新 兴学科 ， 其历 史不 过十年 ， 取 得 了惊 人的进 展 神 经组 织 工 程 ： 经 元 的变性 和坏 死 常导 致神 神 经递质 、 神经 营养 因子 及 细 胞新 陈代 谢 相 关 的酶 的 缺乏 目前 ， 类 中枢 神 经 退性 性 疾病 的 治疗 仍是 这
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立体
昶功 能 眭神经 外科杂 志 ２ ０ 『 ０２年第 １ ５卷第 Ｊ 期
Ｃｉ ＿ Ｓ 』 ｎ
ａ ｎＩ ｃ ｔ ｃ
・
综述 ・
工 程组 织修 复重 建 外科—— ２ １世 纪 神经 外 科研 究 的 热点
刘 斌 吴承远 焦力群
经元 的生存状 况 ， 同时 促进 胆 碱 能 神 经纤 维 的出芽 和改 善模 型动 物的行 为 。在 亨廷顿 病模 型上 进行 的
研究也取得 了类似的结果 还有应用微包囊包裹动 物的嗜铬细胞进行慢性疼痛治疗研究 ．这些都属组 ． 织工 程在 神经科 学领域 的应用研究 。
近 年 ， 关 干细胞 的研 究引人 注 目， 有 实验 室 已能 分 离和培 养胚 胎 干 细胞 、 髓 间质 干细 胞和 神 经干 骨 细胞等 ； 这些 干细 胞 在基 础 研 究 和 临床 应用 中具 有 重 要 的价值 。研究 发现 胚胎 干细胞 可 以分 化成所 有 的成体 组织 ， 一类 发 育全 能性 的细 胞 。Ｂ ［ 是 ａ ｎ及其 同事利用 维 生 素 Ａ 的衍 生 物视 黄 酸处 理 小 鼠胚 胎