维生素的测定
维生素测量方法
维生素测量方法
维生素的测量方法主要包括以下几种：
1. 高效液相色谱法（HPLC）：这是一种常用的维生素测量方法，具有高效、快速、灵敏度高、重复性好等优点，适用于多种维生素的测定。
2. 微生物法：根据维生素为细菌生长所必需的原理，以细菌繁殖程度或代谢产物定量该维生素含量，适用于检测多种衍生物的总和。
微生物法灵敏度高，结果准确，但整个实验周期长，批次检测结果重复性差，检测结果误差大。
3. 分光光度法：通过测定维生素在特定波长下的吸光度来测定其含量。
这种方法具有操作简便、快速、成本低等优点，但灵敏度较低，容易受到其他物质的干扰。
4. 荧光法：利用某些维生素在激发光照射下能发出荧光的特性来测定其含量。
这种方法灵敏度高，选择性好，但需要使用昂贵的荧光计。
5. 电化学法：通过测定维生素在电极上的氧化还原电位来测定其含量。
这种方法具有灵敏度高、选择性好等优点，但需要使用专门的电化学仪器。
需要注意的是，不同的维生素测量方法各有优缺点，应根据具体的样品类型、测量要求和实验室条件选择合适的方法。
同时，在进行维生素测量时，还需要注意避免干扰物质的影响，以确保结果的准确性。
检验科维生素测定操作流程
检验科维生素测定操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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18维生素的测定
（三）液相色谱分析 色谱推荐条件： 预柱：ODS 10μm,4mm×4.5cm 分析柱：ODS 5μm,4.6mm×25cm 流动相：甲醇：水＝98：2，混匀，临用
前脱气。
紫外检测器波长：300nm,量程0.02 进样量：20μL 流速：1.65～1.70mL/min
生物鉴定法：费时、费力、需要动物饲养场地 微生物法：仅限于水溶性维生素的测定 荧光法：用于硫胺素的测定 仪器法：快速、灵敏、有较好的选择性 HPLC：用于大多数维生素的测定，费用高
二、脂溶性维生素的测定
脂溶性维生素的理化性质
溶解性：脂溶性维生素不溶于水，易溶于苯、 乙 醚、 丙酮、三氯甲烷、乙醇等有机溶剂。
做空白试验
重复上述操作，将20ml维生素B1标准使用液加入 盐基交换管以代替试样提取液，即得到标准净化液。
4.氧化
将5ml试样 净化液分别加 入A、B两个 反应瓶；
同时将5ml 标准净化液分 别加入A1、B 1两个反应瓶 中。
Maizel-Gerson 反应瓶
氧化流程
A、A1瓶 15%NaO H (3 ml)溶液振摇
（一）原理
样品中维生素A 及维生素E 经皂化提取 处理后，将其从不可皂化部分提取至有 机溶剂中。用高效液相色谱法C18 反相 柱将维生素A 和维生素E 分离，经紫外 检测器，用内标法定量测定
（二）样品处理
1.皂化称取适量样品（含维生素A 约3μg， 维生素E 各异构体约40μg）于三角瓶中， 加30mL 无水乙醇，振摇使样品分散。加 入5mL100g/L 抗坏血酸溶液和2.00mL 苯 并[e]芘溶液（5μg/L，内标用），混匀， 加10mL 氢氧化钾溶液（50％浓度），混 匀，于沸水浴上回流30min，使皂化完全， 皂化后立即放入冰水中冷却。
维生素B1片的含量测定
维生素1B 片的含量测定
一．实验目的
1.掌握吸光系数法从测定药物含量的方法；
2.熟悉紫外—可见光光度计的原理和操作。
二．实验药品及仪器
实验药品：维生素1B 片10片，盐酸溶液（9—>1000）
实验仪器：紫外—可见光光度计
三．实验内容及步骤
1.取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（相当于维生素1B ），置50ml 容量瓶中；
2. 加盐酸溶液（9—>1000）约35mL ，振摇15分钟，使维生素1B 溶解，加盐酸溶液（9—>1000）稀释至刻度，摇匀。
3. 用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5mL ，置另一50mL 量瓶中，再加盐酸溶液（9—>1000）稀释至刻度，摇匀。
4. 照紫外—可见光光度计法，在246nm 波长处测定吸光度，按HCl OS ClN H C ⋅41712的
吸收系数（%11cm E ）为421计算，即得。
四．注意事项
1. 仪器的准备
（1）开启电源，使仪器预热20分钟；
（2）开机前，先确认仪器样品室内是否有东西挡在光路上，以免影响仪器的自检；
2. 仪器的操作步骤
（1）设置波长（246nm ）；
（2）测定；
（3）数据记录与处理。
3. 将比色皿洗净装盒，关机；
4. 填写仪器使用记录。
5. 维生素1B 的紫外吸收峰随溶液pH 的变化而不同，因此要严格控制溶液的pH 值。
6. 本品含维生素1B （HCl OS ClN H C ⋅41712）应为标示量的90.0%~110.0%。
五．数据记录与含量计算
六、结果与讨论。
维生素的检测方法
《维生素的检测》一、维生素E取样品0.18g，置于100mL的量瓶中，加无水乙醇稀释到刻度，摇30s，用干滤纸滤过，弃取初滤液，吸取50mL，置于回流瓶中，加硫酸3mL，摇匀，加热回流3小时放冷，移至于100mL量瓶中，用无水乙醇洗条容器，洗液并加入量瓶中，再加入无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取25mL/L，加乙醇(95%)20mL，水10mL/L，二苯胺硫酸溶液2滴(10g/L)，用0.01mol/L 硫酸铈标准液滴定结果用空白试验校正。
计算公式：(试样滴定数—空白滴定数)×标准液浓度×0.002364×8÷质量÷维生素E的标示量<如:50/100 33/100 25/100 20/100 等>×100二、维生素K3(亚硫酸氢钠甲苯酯含量测定)标准溶液配制：取甲萘醌对照品约0.05g，置于250mL的量瓶中，用三氯甲烷溶解，并稀释到刻度，摇匀。
吸取2mL置于100mL量瓶中，用无水乙醇稀释到刻度，摇匀。
样品溶液的配制：取样品1.3g，置于250mL量瓶中，用水稀释到刻度，摇匀。
吸取25mL 至于分液漏斗中，加三氯甲烷40mL/L，碳酸钠溶液5mL(1/100)，剧烈振摇30s，静止分层，分出的三氯甲烷层通过预先用三氯甲烷湿润的棉花过滤到250mL的量瓶中，再加三氯甲烷40mL迅速洗条滤器，洗液并加入量瓶中，水层用三氯甲烷萃取2次，每次约20mL，萃取液过滤，并用三氯甲烷20mL洗条滤器，洗液和全部滤并到量瓶中，用三氯甲烷稀释到刻度,摇匀.吸取2mL至于100mL量瓶中,用无水乙醇稀释到刻度,摇匀.(用分光光度计在250nm波长处平行测定吸收度,用2%三氯甲烷的无水乙醇溶液做空白).计算公式：样品溶液的吸光度×标准溶液的吸光度÷标准溶液的吸光度÷样品溶液的浓度×191.82三、维生素B1 (硝酸硫胺含量的测定)取样0.1g,加水50mL溶解后,加盐酸2mL,煮沸,立即滴加硅钨酸溶液10mL,继续煮沸2nim,用在80℃干燥至恒重有4号垂溶坩埚滤过,沉淀先用煮沸的盐酸溶液洗条2次,每次10mL,再用水10mL洗条一次,最后用丙酮洗条2次,每次5mL,沉淀物在80℃干燥至恒重.计算公式：干燥后沉淀的重量×0.1882÷样品重量÷(1－样品干燥失重,重量百分数)×100四、烟酸取样0.3g,加新沸过的冷水50mL溶解,加酚酞指示剂3滴(1g/L),用0.1monl/L氢氧化钠标准液滴定至粉红色.计算公式：滴定数×标准液的浓度×0.01231÷质量×100五、维生素B6取样0.15g,加冰乙酸20mL与乙酸贡溶液(5g乙酸贡研细加温热的冰乙酸溶解为100mL)5mL,温热溶解,放冷,加(5g/L)结晶紫指示剂1滴,用0.1monl/L高氯酸标准液滴定,至溶液显蓝紫色,并将滴定结果用空白实验校正.计算公式：(样品滴定数－空白滴定数)×高氯酸标准液的浓度×0.02056÷质量×100六、维生素B12(氰钴胺)粉剂外观及颜色：浅红色至棕色细微粒粉末状,具有吸潮性.取样品维生素B12 0.002克,置于100毫升的量瓶中.加水80毫升,充分振摇混合后稀释至刻度,摇匀,用干滤纸过滤(必要时离心),弃去初滤液作为样品测量溶液.取维生素B12(氰钴胺)对照品(干燥品)0.2克,置于1000毫升的量瓶中用水稀释至刻度,摇匀,作为对照品测定液,用水做空白对照,于1cm比色皿内,用分光光度计于361nm波长处测定样品溶液和标准液的吸收度。
食品分析理论第十章 维生素的测定_OK
• 1、微生物法：根据某种维生素是某种细菌生长所必需的原理，以细 菌繁殖程度或代谢产物定量该维生素含量，方法选择性较高，多用 于水溶性维生素检测，适用于检测多种衍生物的总和（如总叶酸）， 是经典方法。但微生物法操作繁琐、耗时过长，而且要求有特殊设 备和专门的训练人员。
• 2、比色法 可见分光光度、紫外分光光度
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(二)测定方法
• 维生素D的测定方法有：比色法、荧光法、紫外分光 光度法、气相色谱法、液相色谱法及薄层层析法等。
• 比色法灵敏度较高，但操作十分复杂、费时。
• 气相色谱法虽然操作简单，精密度也高，但灵敏度 低，不能用于含微量维生素D的样品。
• 液相色谱法的灵敏度比比色法高20倍以上，且操作简 便，精度高，分析速度快。是目前分析维生素D的最 好方法。
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• 胡萝卜素一般存在于植物性食品中，以含有胡萝卜为食物家 禽、兽类、水产动物及其加工产品，为着色而添加胡萝卜素 的食品，也含有胡萝卜素。
• 胡萝卜素对热及酸、碱比较稳定，但紫外线和空气中的氧可 促进其氧化破坏。用有机溶剂从食物中提取。
• 胡萝卜素本身是一种色素，在450nm波长处有最大吸收。胡 萝卜素常与叶绿素、叶黄素等共存，在测定前，必须将胡萝 卜素与其它色素分开。常用的方法有纸层析、柱层析和薄层 层析法，下面介绍的是纸层析法。
• ②、操作时加入乙酰氯可以消除温度的影响，可使 灵敏度比仅用三氯化锑提高约3倍。并可减少部分甾 醇的干扰。
• ③、此法不能区分D2和D3测定值是两者的总量。
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B、高效液相色谱法
• 1、原理 • 试样经皂化后，用苯提取不皂化物，馏去苯后，使用第一阶段的分
第九章维生素的测定ppt课件
维生素的结构复杂： 分为： 胺类（B1） 醛类（B6） 醇类（A） 酚 醌类等
萝卜素，主要是β-胡萝卜素）
维生素A的测定常用的方法有: 三氯化锑比色法 紫外分光光度法 荧光分析法 液相色谱法。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
比色法测定VA的含量 （GB/T 5009.82—2003中第二法） （一） 原理
维生素的分析方法
测定方法 生物鉴定法
微生物法 仪器分析（紫外法； 荧光法） 各种色谱法（柱、纸 、薄层层析）
现代高压液相色谱和 气相色谱
化学分析法（比色法
优点
不用详尽分离
选择性高，主要用于 水溶性V 灵敏、快速、有较好 的选择性 高分离效能，可分离 、纯人、定性、定量
缺点
费时（21天）费力（ 要动物饲料）
检查方法：三氯甲烷不稳定，放置后易受空气中氧的作用生 成氯化氢。检查时可取少量三氯甲烷置试管中加水振摇，使 氯化氢溶到水层。加入几滴硝酸银溶液，如有白色沉淀即说 明三氯甲烷中有分解产物。 （6） 25%三氯化锑-三氯甲烷溶液 用三氯甲烷配制25%三氯 化锑溶液，储于棕色瓶中（注意避免吸收水分） （7） 50%氢氧化钾溶液（KOH） W/V （8） 维生素A标准液 视黄醇（纯度85% Sigma）用脱醛乙 醇溶解维生素A标准品，使其浓度大约为1ml相当于1mg视黄 醇。临用前用紫外分光光度法标定其准确浓度。 （9） 酚酞指示剂 用95%乙醇配制1%溶液
维生素测定质谱法
维生素测定质谱法
维生素测定质谱法是一种利用质谱仪技术对维生素进行定量分析的方法。
质谱法是一种依据质量-电荷比（m/z）比较物质的质谱图和相应目标物质的质谱图之间的峰面积或峰高比来进行定量分析的方法。
维生素测定质谱法的优点包括高灵敏度、高选择性和准确性。
它可以在非常低浓度下对维生素进行定量分析，并可以区分不同的维生素类别。
此外，质谱法还可以通过多级质谱（MS/MS）技术对目标物质进行进一步的结构解析和定性分析。
然而，维生素测定质谱法也有一些限制。
首先，它需要精确的标准品或内标物质来建立定量分析的标准曲线。
其次，质谱仪设备和操作要求相对较高，需要专业人员进行操作和数据解析。
此外，维生素样品的前处理和样品制备也可能对分析结果产生影响。
实验四-维生素c的测定
实验四：维生素C含量测定一、实验目的1、了解生化组分含量定量测定的意义。
2、掌握维生素C定量测定的方法。
3、了解定量试验统计学数据分析方法。
二、实验原理滴定法是一些生理生化指标测定中比较常用的一种方法，一般可以分为两类：目前一般实验室滴定分析采用的是人工滴定法，它是根据指示剂的颜色变化指示滴定终点，然后目测标准溶液消耗体积，计算分析结果。
自动电位滴定法是通过电位的变化，由仪器自动判断终点。
维生素又名维他命，是维持人体生命活动必需的一类有机物质，也是保持人体健康的重要活性物质。
维生素在体内的含量很少，但在人体生长、代谢、发育过程中却发挥着重要的作用。
维生素不是构成机体组织和细胞的组成成分，它也不会产生能量，它的作用主要是参与机体代谢的调节。
大多数的维生素，机体不能合成或合成量不足，不能满足机体的需要，必须经常通过食物中获得。
人体对维生素的需要量很小，日需要量常以毫克(mg)或微克(μg)计算，但一旦缺乏就会引发相应的维生素缺乏症，对人体健康造成损害。
维生素C又叫L-抗坏血酸，是一种水溶性维生素。
分子式：C6H8O6，分子量：176.12，酸性，具有较强的还原性，加热或在溶液中易氧化分解，在碱性条件下更易被氧化。
其功能主要有：1、促进骨胶原的生物合成。
利于组织创伤口的更快愈合；2、促进氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代谢，延长肌体寿命。
3、改善铁、钙和叶酸的利用。
4、改善脂肪和类脂特别是胆固醇的代谢，预防心血管病。
5、促进牙齿和骨骼的生长，防止牙床出血。
6、增强肌体对外界环境的抗应激能力和免疫力。
维生素C在自然界分布广泛，在柠檬汁、绿色植物及番茄中含量很高。
维生素C是最不稳定的一种维生素,由于它容易被氧化，在食物贮藏或烹调过程中，甚至切碎新鲜蔬菜时维生素C都能被破坏。
微量的铜、铁离子可加快破坏的速度。
因此，只有新鲜的蔬菜、水果或生拌菜才是维生素C的丰富来源。
它是无色晶体，熔点190～192℃，易溶于水，水溶液呈酸性，化学性质较活泼，遇热、碱和重金属离子容易分解，所以炒菜不可用铜锅和加热过久。
《中国药典》维生素c的含量测定
《中国药典》维生素c的含量测定维生素C是一种重要的水溶性维生素，也是人体所必需的营养物质之一。
在《中国药典》中，对维生素C的含量测定方法进行了详细的规定，以确保维生素C产品质量的可靠性和一致性。
《中国药典》中关于维生素C含量测定主要参考内容如下：1. 原理：维生素C的测定主要采用氧化还原反应原理，以氧化剂作为指示剂，测定待测样品中维生素C的氧化还原能力。
2. 试剂：(1) 0.1mol/L碘液：通过溶解碘粉和氢碘酸制备。
(2) 10%硫酸：将浓硫酸与等体积的蒸馏水混合而成。
(3) 混合指示剂：将0.1mol/L的淀粉溶液与蒸馏水按1:100混合。
(4) 维生素C对照溶液：浓度为1.00mg/mL的维生素C溶液。
3. 仪器设备：(1) 滴定管：用于滴定过程中调节试液加入速度。
(2) 滴定管架：用于固定滴定管。
(3) 温度恒定水浴：用于控制滴定温度。
4. 操作步骤：(1) 取适量待测样品，加入10%硫酸溶液挤压提取维生素C。
(2) 将提取液过滤，并将滤液冷却至室温。
(3) 取适量的滤液和维生素C对照溶液，用0.1mol/L碘液逐滴滴定到产生淡蓝色终点。
(4) 加入混合指示剂，继续滴定到溶液变为无色。
(5) 计算样品中维生素C含量。
5. 计算公式：维生素C（mg/g）=（V-V0）×C×V1/m其中，V为滴定终点消耗的0.1mol/L碘液体积（mL），V0为滴定过程中滴定管中的0.1mol/L碘液消耗体积（mL），C为0.1mol/L碘液浓度（mol/L），V1为滴定取样体积（mL），m 为样品质量（g）。
以上是《中国药典》中关于维生素C含量测定的相关参考内容。
通过实验操作，并结合计算公式，可以准确测定维生素C 的含量。
这些规定的制定和执行可以保障维生素C产品的质量及安全，帮助人们获得足够的维生素C供给，维持身体健康。
维生素c测定含量测定方法
维生素c测定含量测定方法
维生素C含量的测定可以采用以下方法：
1.碘姜法：将待测物与加入了淀粉溶液的碘液加入姜汁中，根据被测物的浓度，溶液在一定时间内呈现不同颜色。
根据颜色的深浅即可推断维生素C的含量。
2.操作步骤：
（1）取0.1g测试物粉末，加入60ml蒸馏水，把瓶口用纸片盖好，放到90水浴中煮沸5min，连同剩余液体倒入定容瓶中，揉匀，装压滤器上，用蒸馏水再冲洗若干次，至50ml定容，得到的溶液为1%的Vc溶液。
（2）取Vc溶液4.0ml，加入1mol/L的FeSO4溶液10ml中，用10mol/L的H2SO4滴定至黄色漆黑色转化为粉红色后，即记录所滴入的体积。
（3）同时，取另一烧杯加入20ml的去离子水作空白，加入相同的含量的FeSO4和H2SO4，然后进行滴定，此滴定所需的体积就是空白滴定。
（4）根据维生素C的化学反应式和滴定结果计算出维生素C的含量。
3.较为简便的方法：同样使用该测试方法，单可用水激发器代替FeSO4溶液，从而避免了FeSO4溶液的制备。
维生素c含量的测定实验报告
维生素c含量的测定实验报告维生素 C 含量的测定实验报告一、实验目的1、掌握碘量法测定维生素 C 含量的原理和操作方法。
2、学会使用标准溶液进行滴定分析。
3、培养准确记录实验数据和处理实验结果的能力。
二、实验原理维生素 C 又称抗坏血酸，具有较强的还原性。
在酸性溶液中，维生素 C 可以与碘发生氧化还原反应。
反应式如下：C₆H₈O₆＋ I₂ → C₆H₆O₆＋ 2HI通过用已知浓度的碘标准溶液滴定维生素 C 溶液，当溶液中的维生素 C 完全反应后，溶液中出现蓝色即为终点。
根据碘标准溶液的用量和浓度，可以计算出维生素 C 的含量。
三、实验仪器与试剂1、仪器酸式滴定管（50mL）锥形瓶（250mL）容量瓶（100mL、250mL）移液管（25mL、50mL）电子天平玻璃棒烧杯（50mL、100mL）2、试剂碘标准溶液（005mol/L）淀粉指示剂（5g/L）稀醋酸溶液维生素 C 样品四、实验步骤1、碘标准溶液的标定准确称取基准物质三氧化二砷（As₂O₃）约 013g，置于 250mL 碘量瓶中。
加入 1mol/L 氢氧化钠溶液 5mL，微热使之溶解。
加入 2 滴酚酞指示剂，用 1mol/L 盐酸溶液中和至溶液红色褪去。
加入 50mL 水，20mL 1mol/L 碳酸氢钠溶液和 2mL 淀粉指示剂。
用碘标准溶液滴定至溶液呈蓝色，30s 内不褪色即为终点。
记录碘标准溶液的用量，平行测定 3 次，计算碘标准溶液的平均浓度。
2、维生素 C 样品溶液的配制准确称取维生素 C 样品约 02g，置于 100mL 容量瓶中。
用新煮沸并冷却的蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀。
3、维生素 C 含量的测定用移液管准确移取 2500mL 维生素 C 样品溶液于 250mL 锥形瓶中。
加入 50mL 新煮沸并冷却的蒸馏水和 5mL 稀醋酸溶液。
加入 2mL 淀粉指示剂，立即用碘标准溶液滴定至溶液呈蓝色，30s 内不褪色即为终点。
记录碘标准溶液的用量，平行测定 3 次。
第八章 维生素的测定
(3) 浓缩与定容
石油醚提取液→经无水硫酸钠(约5g)（脱 水） →与旋转蒸发器蒸发瓶； 用约l0ml石油醚冲洗分液漏斗及无水硫酸 钠3次，洗液→旋转蒸发器蒸发瓶；
于55℃水浴中减压蒸馏回收石油醚→待瓶 中剩下约2ml石油醚时→取下蒸发瓶，用氮气 冲干→加入2.00ml石油醚定容。
(4) 纸层析
第三节
水溶性维生索的测定
一、水溶性维生素的性质 1. 易溶于水，而不溶于苯、乙醚、氯仿等大多 数有机溶剂； 2. 在酸性介质中很稳定； 3. 在碱性介质中不稳定，易于分解；
4. 易受空气、光、热、酶、金属离子等的影响， 维生素B2 对光，特别是紫外线敏感，易被光 线破坏；维生素C对氧、铜离子敏感，易被氧 化。
将醚液经过无水硫酸钠滤入三角瓶中→用 约25m1乙醚冲洗分液漏斗和硫酸钠两次，洗 液并入三角瓶内→水浴蒸馏，回收乙醚→减 压抽干，立即准确加入一定量三氯甲烷(约 5m1左右)，使溶液中维生素A含量在适宜浓度 范围内(3—5ug／m1)。
(2)标准曲线的绘制
以维生素A含量为横坐标，以吸光度为纵坐标 绘制曲线。 准确吸取维生素A标准溶液0，0.1，0.2，0.3，0.4， 0.5mL于6个10mL容量瓶中，用三氯甲烷定容 制备标准系列使用液→制成标准比色系列→调节 光度法零点→将标准比色系列按顺序移到光路前，迅 速加入9mL三氯化锑一三氯甲烷溶液，于6s内测定吸 光度(每支比色杯都在临测前加入显色剂)。 取6个3cm比色杯顺次移入标准系列使用液各1m1， 每个杯中加乙酸酐 l滴，在620nm波长处，以 l0mL三氯甲烷加1滴乙酸酐。
(8)维生素C标准使用液：准确吸取适量标准维 生素C贮备液，于100mL容量瓶中，用10g/L草酸 溶液稀释定容，使1.0mL含0.02mg维生素C。 (9)2,6－二氯靛酚溶液：称取52mg碳酸氢钠， 溶解于200ml沸水中，然后称取50mg2，6一二氯 靛酚，溶解于上述碳酸氢钠溶液中，冷却后， 于250mL容量瓶中，用蒸馏水稀释定容，过滤于 棕色瓶内，贮存冰箱，每周至少标定1次。
《中国药典》维生素c的含量测定
《中国药典》维生素c的含量测定
《中国药典》中关于维生素C的含量测定的方法是使用二氧化碳挥发法。
具体步骤如下：
1. 取一定量的样品（通常为维生素C片剂或粉剂）。
2. 将样品溶解于水中，加入适量的稀盐酸。
3. 在含有样品溶液的烧瓶或烧杯中，设置双皮套装置，并通过瓶口通入氮气，以去除溶液中的氧气。
4. 在维持适当氮气流速的条件下，加入适量的氧化剂（例如碘化钾溶液）。
5. 用玻璃杆搅拌溶液，使溶液中的氧化剂与维生素C发生反应。
6. 经过一定时间的反应后，使用氨溴酚绿指示剂滴定剩余的氧化剂，直至颜色由蓝变黄绿。
7. 根据滴定所需的氨溴酚绿溶液的体积，计算出样品中维生素C的含量。
这种方法是基于维生素C在酸性条件下容易被氧化为脱氢抗坏
血酸的特性进行的。
通过控制反应条件和溶液中氧化剂的用量，可以准确测定维生素C的含量。
维生素c测定国标
维生素C的测定可以采用多种方法，国标方法包括荧光法和2，4－二硝基苯肼法。
此外，滴定法、分光光度法也可以用于维生素C的测定。
荧光法是测定食物中维生素C含量的第一标准方法，具有简便、快速等优点。
具体来说，荧光法依据待测样品中的维生素C在特定波长处被激发后产生荧光，通过检测荧光强度来计算维生素C的含量。
该方法具有较高的灵敏度和精度，适用于食物中维生素C的快速测定。
2，4－二硝基苯肼法是国标中的第二法，用于测定食物中的维生素C含量。
该方法基于维生素C与2，4－二硝基苯肼在碱性溶液中发生反应，生成红色的偶氮化合物，通过比色法测定该化合物的吸光度，进而计算维生素C的含量。
该方法操作简便，准确度高，适用于各类食物中维生素C的测定。
滴定法是一种传统和经典的测定维生素C含量的方法。
水果、蔬菜中维生素C含量的检测依据国标GB/T6195─1986，采用2，6-二氯靛酚滴定法。
在滴定过程中，还原型抗坏血酸还原2，6-二氯酚靛酚后被氧化生成脱氢抗坏血酸，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯酚靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。
该方法简便、快速，适用于大量样品的测定，但受色素类物质干扰较大，应用受到一定限制。
分光光度法也可以用于维生素C的测定。
其中，红外光谱法可以根据分子内部原子间的相对振动和分子转动等信息来确定物质分子结构和鉴别化合物。
羰基的伸缩振动吸收峰一般在1700 cm-1左右，可用于排除其他成分的影响。
维生素的测定方法
维生素的测定方法
维生素咋测定？嘿，那可有不少办法呢！比如化学分析法，就像侦探找线索一样，能把维生素给揪出来。
步骤嘛，先准备各种试剂，哇塞，那一堆小瓶子，看着就好专业。
然后小心操作，可不能马虎，不然就前功尽弃啦！注意事项呢，得严格按照要求来，剂量啥的不能搞错，不然结果可就不准喽。
这就像做饭放盐，多了少了都不行。
安全性咋样？放心吧！只要操作正确，一点问题都没有。
就像走在平坦的大路上，稳稳当当。
稳定性也不错哦，只要条件控制好，结果就靠谱。
就像盖房子，基础打好了就不会塌。
啥时候用这些方法呢？比如研究营养的时候呀，或者检测食品质量。
这可重要啦！优势也不少呢，能准确知道维生素的含量，就像有了个超级放大镜。
还能帮助我们合理补充维生素，多棒呀！
我就知道一个实际案例，有个科学家用这些方法检测了一批水果，哇，一下子就知道哪种水果维生素含量高。
这多厉害呀！就像有了魔法棒。
维生素的测定方法超有用，你还不赶紧试试？。
维生素的测定方法
维生素的测定方法
维生素的测定方法可以分为生物学法和物理化学法两种。
生物学法：
1.生物促进法：利用维生素对生物体生长和发育的促进作用，通过观察生物体的生长情况来判断维生素含量。
2.营养缺乏试验法：将生物体置于缺乏特定维生素的培养基中，观察生物体的表现，从而测定维生素的含量。
物理化学法：
1.比色法：利用维生素与某些试剂发生特定反应后形成彩色产物，通过测定产生的光吸收来定量测定维生素含量。
2.荧光法：维生素具有发荧光的性质，通过测定维生素发出的荧光强度来定量测定维生素含量。
3.高效液相色谱法（HPLC）：利用高效液相色谱技术对维生素进行分离和定量分析。
4.气相色谱法（GC）：通过气相色谱对维生素进行分离和定量分析。
5.质谱法：利用质谱仪对维生素进行分析，可以通过质谱图谱来鉴定和定量维生素。
维生素的具体测定方法要根据维生素的性质和要求选择合适的方法进行测定。
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维生素的测定17.2 维生素的测定17.2.1 概述[2,3]维生素广泛存在于各种生物体中，其种类繁多，化学结构与生理功能各异。
因此无法按照结构或功能分类，按其溶解性可分为脂溶性(V A、V D、V E、V K)和水溶性(V B1、V B2、V B6、V B12、V P、V PP 、V C)两大类。
维生素是人体生命活动不可缺少的营养物质，它们一般在动物和人体内不能合成或合成数量少，满足不了动物和人体的需要，必须依靠从食物中摄取。
在食物中缺乏了任何一种维生素，人和动物都会发生特有的缺乏症状，如缺乏维生素A、B和C 时，可分别引起夜盲症、脚气和坏血病等，严重时足以致命。
某些维生素含量的高低，是评价农产品品质的重要指标之一。
维生素的分析是一项比较复杂的工作。
其样品分析的一般程序是：①用酸、碱或酶分解样品，使其中的维生素游离出来；②用溶剂进行提取；③分离干扰物质，对样液进行分离提纯；④用适当的方法进行定量等。
维生素的测定方法，有微生物学测定法、生物学测定法等。
仪器分析的方法有分光光度法、荧光分析法、薄层层析法、高效液相色谱法等。
维生素的分析方法很多，选用方法时应根据样品的品种、类型、待测维生素的性质、含量以及干扰物质多少等因素来决定。
下面重点介绍维生素C、维生素B1和B2以及作为维生素A原的b-胡萝卜素的测定。
维生素C又称抗坏血酸，其纯品为白色无臭结晶，熔点为190~192℃，溶于水或乙醇中，不溶于油剂，在水溶液中易被氧化，在碱性条件下易分解，在弱酸条件下较稳定。
还原型(L-抗坏血酸)可被氧化为氧化型(L-脱氢抗坏血酸)，还有一定的生理作用，如果进一步水解则生成2,3-二酮古乐糖酸，失去生理作用。
总抗坏血酸包括还原型、氧化型抗坏血酸和2,3-二酮古乐糖酸。
根据它具有的还原性质可以测定V C的含量。
常用的测定方法有2,6-二氯靛酚法、2,4-二硝基苯肼法、铅-硫化氢法、碘酸法以及荧光分光光度法。
2,6-二氯靛酚法用于测定还原型V C，其它方法多用于测定总V C的含量。
17.2.2 还原性维生素C的测定17.2.2.1 方法原理抗坏血酸(V C)结构中有烯二醇结构存在，因此具有还原性，能将蓝色染料2,6-二氯靛酚还原为无色的化合物，V C则被氧化为脱氢V C，反应式如下：还原型V C 氧化型2,6-二氯靛酚脱氢V C 还原型2,6-二氯靛酚（无色）2,6-二氯靛酚具有酸碱指示及氧化还原指示的两种特性，在碱性介质中呈深蓝色，而在酸性介质中呈浅红色(变色范围pH4~5)，其氧化态时呈深蓝色(碱介质中)或浅红色(酸性介质)，还原态时为无色。
根据这个特性，用碱性蓝色染料的标准溶液滴定植物样品酸性浸出液中V C到刚变浅红色为终点，由染料的用量即可计算V C的含量。
滴定终点的红色是刚过量的未被还原的(氧化型)染料溶液在酸性介质中的颜色。
通常测定V C浸提和测定都是在20g·L-1的草酸溶液中进行的，目的是保持反应时一定的酸度，避免V C在pH高时易被空气氧化(注1)。
此染料不致氧化待测液中非V C的还原性物质，所以对V C的测定有一定的选择性。
本法适用于测定一般水果、蔬菜样品的还原型V C，不包括脱氢V C。
如样品中含有Fe2+、Sn2+、Cu2+、SO32-、S2O32-、SO2等还原性杂质，则有干扰。
17.2.2.2 主要仪器高速组织捣碎机(8000~12000r·min-1)；电动离心机(4000r·min-1)；半微量滴定管。
17.2.2.3 试剂1. 20g·L-1草酸溶液：称取草酸(化学纯)20g溶于水中，稀释至1L，贮于避光处(注2)2. 60g·L-1 KI溶液。
3. 10g·L-1淀粉指示剂。
4. 0.1000 mol·L-1(1/6 KIO3)标准液：称取在105℃烘过2h的碘酸钾(KIO3，优级纯)1.784g溶于水，定容至500mL 。
此为0.1000 mol·L-1(1/6 KIO3)贮备液。
使用时将此贮备液用煮沸并冷却的水稀释100倍，即成0. 0010 mol·L-1 (1/6KIO3)标准溶液。
大约每星期应稀释配制一次。
5. V C标准溶液：称取维生素C(C5H8O5，分析纯) 20.0mg溶于20g·L-1草酸溶液，并用20g·L-1草酸稀释至100mL，此液约含V C 0.2mg·mL-1，置于冰箱中保存。
临用前当天进行标定。
V C的标定：吸取V C液5.00mL于50mL三角瓶中，加入20g·L-1草酸溶液10mL，60 g·L-1KI溶液0.5mL，10 g·L-1淀粉溶液5滴，用0.1000 mol·L-1(1/6 KIO3)标准液滴定至溶液突变为浅蓝色为止(约需滴定11mL)，计算V C的准确浓度：V C溶液浓度，mg·mL-1= c V1×88/V2式中c—所用(1/6KIO3)标准溶液浓度(mol·L-1)；V1—所用(1/6KIO3)标准溶液的体积(mL)；V2—所用V C溶液的量(mL)；88—维生素C(1/2 C5H8O5)的摩尔质量(注3) (g·mol-1)；6. 2,6-二氯靛酚溶液：称取2,6-二氯靛酚(分析纯)50mg溶于约200mL含有NaHCO3(分析纯)52mg的温水中(< 40℃)，冷却后用水稀释至250mL。
用玻璃滤器或折迭滤纸滤于棕色瓶中，保存在冰箱中。
使用前，待溶液恢复至室温后，用V C标准溶液标定其准确浓度。
在冰箱中保存时，每周标定一次(注4)。
标定方法：吸取已标定的V C标准溶液5.00mL(含V C约1mg)于50mL三角瓶中，加入20 g·L-1草酸溶液10mL，摇匀，用2,6-二氯靛酚溶液滴定至溶液呈浅红色，约在15s不褪色为止(应用染料溶液约10mL)。
计算每毫升染料溶液相当于V C的mg数，即滴定度T(应约为0.1mg·mL-1 Vc)：T= c×V1/V2式中c—所用Vc标准液的浓度(mg·mL-1)；V1—所用Vc标准液的体积(mL)；V2—所用染料溶液的体积(mL)。
17.2.2.4 操作步骤1. 样品处理：(1) 新鲜果蔬样品：称取鲜样50.0~100.0g，放入组织捣碎机的杯中，加入等重量的20 g·L1草酸浸提剂，快速捣碎1min，将样品打成浆状。
样品处理的整个过程应在10min中内完成，以免Vc被空气氧化。
用小烧杯称取浆状物10~30.×g(含还原型Vc 1~5mg)，放入100mL容量瓶中，用20 g·L-1草酸溶液定容，若有泡沫可加2滴辛醇除去。
过滤，若滤液色深，影响滴定终点的判定时，可加1~2勺白陶土脱色(注5)不易过滤，可用离心机分离。
(2) 多汁果蔬样品：可用纱布压汁后脱脂棉花快速过滤，量取10~20mL汁液，立即用20 g·l-1草酸溶液定容至100mL。
(3) 干样品：称取1~4.×××g(含还原型Vc 1~5mg)放入研钵中，加入20 g·L-1草酸溶液研磨成浆状液，洗入100mL容量瓶中，用2 0g·L-1草酸定容。
(4) 含有还原性物质的样品：含有较多Fe2+的样品可用80mL ·L-1醋酸代替20 g·L-1草酸作为浸提剂。
亚硫化脱水样品，可于稀释至一定容量之前加入20mL丙酮，以除去SO2的干扰。
2. 样品的测定：吸取以上制得的无色滤液5.00~10.00mL(使含V C 约0.2~1mg范围)放入50mL三角瓶中，用棕色半微量滴定管中装的2,6-二氯靛酚标准溶液滴定至浅红色，约在15s内不褪色为终点(注6)。
同时以浸提剂做空白试验(空白值约0.08~0.10mL)。
17.2.2.5 结果计算还原型Vc含量 (mg·kg-1)=(V-V0)×1000×T / m式中V—滴定样品液所用染料溶液量(mL)；V0—滴定空白所用去染料溶液量(mL)；T—染料溶液的滴定度；m—滴定时样品溶液中样品的质量(g)。
两次测定结果允许误差：样品还原型Vc含量，mg·kg-1允许误差，mg·kg-1<100 5.0100~1000 10.017.2.2.6注释注1. 偏磷酸是Vc的最佳稳定剂，且具有沉淀蛋白质的作用。
但其价格较贵，在室温下放置易转化为正磷酸，降低对Vc的稳定性。
草酸廉价易得，有与磷酸相近的稳定性。
而醋酸适于浸提含有Fe2+的样品。
注2. 草酸不应置于日光下，以免产生过氧化物。
当有催化剂(如Cu2+)存在时，过氧化物能破坏Vc。
注3. KIO3与还原Vc的主要反应如下：IO3- + 5I- + 6H+ ===== 3I2 + 3H2OI2 + C6H8O8 ===== C6H6O8 + 2I- + 2H+从上述反应式可知1mol(1/6 KIO3)与1mol(1/2C6H8O8)完全反应，故1/2 C6H8O8的摩尔质量为88g·mol-1。
(注4) 2,6-二氯靛酚固体试剂有时含有分解产物，染料溶液长久贮存时也会生成分解主物，从而使滴定终点不敏锐，因此应在使用前检查。
检查方法：取15mL染料溶液加入过量的Vc溶液，若还原后的溶液带有颜色，表示此溶液已不能使用。
(注5) 使用白陶土时，要对每批新的白陶土测定对Vc的回收率。
(注6) 样品中可能有其它还原性物质也可使染料还原。
但其还原染料的速度较慢，故滴定终点以浅红色在15s不褪色为准。
17.2.3 维生素C总量的测定(2,4-二硝基苯肼比色法)17.2.3.1 方法原理维生素C总量包括还原型Vc、脱氢型Vc和二酮古乐糖酸，将样品中的还原型抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸，进一步水解为二酮古乐糖酸。
二酮古乐糖酸与2,4-二硝基苯肼偶联生成红色的脎。
其呈色的强度与二酮古乐糖酸浓度成正比，可以比色定量。
17.2.3.2 主要试剂1. 10 g·L-1草酸，20 g·L-1草酸；2. 酸处理活性炭：取活性炭200g，加入1∶9HCl 1000mL，煮沸后，抽气过滤，再用沸水1000mL煮沸过滤，重复用水洗至溶液中无Fe2+离子(用10 g·L-1KSCN溶液试验无红色)，放在100~120℃烘干。
3. 20 g·L-12,4-二硝基苯肼溶液：称取2,4-二硝基苯肼(分析纯)2.00g溶解于100mL4.5mol·L-1 H2SO4中。
4. 4.5mol ·L-1 H2SO4溶液：量取浓H2SO4(分析纯)250mL，慢慢倒入750mL水中，边加边搅拌。