第十四章 甾体激素类药物的分析
合集下载
甾体激素和维生素类药物分析
分类
根据结构和功能的不同，可以将甾体 激素类药物分为肾上腺皮质激素、雄 激素、雌激素等。
作用机制与用途
作用机制
甾体激素类药物通过与靶细胞上的受 体结合，影响基因表达、酶活性等细 胞内过程，从而调节机体的生理功能。
用途
主要用于治疗与内分泌系统相关的疾 病，如肾上腺皮质功能减退、甲状腺 疾病等。
甾体激素类药物的发展历程
质流失。维生素类药物如维生素C、E等具有抗氧化作用，对维持肌肉
和骨质健康有一定帮助。
03
脂肪代谢
甾体激素类药物对脂肪代谢的影响主要表现为促进脂肪合成和分布。而
维生素类药物如维生素B6、B12等有助于降低血脂水平，对心血管健康
有益。
对临床治疗效果的影响
疗效增强
疗效降低
不良反应
合理使用甾体激素和维生素类 药物可以增强治疗效果，提高 治愈率。例如，适量的维生素 D补充可以促进钙的吸收，有 助于骨折愈合。
免疫调节
甾体激素类药物具有免疫抑制作用，可用于自身免疫性疾病的治疗， 维生素类药物也可调节免疫功能。
代谢性疾病
甾体激素类药物可用于治疗糖尿病、肥胖症等代谢性疾病，维生素类 药物也可用于辅助治疗和预防相关并发症。
研究热点和发展趋势
药物作用机制研究
深入探讨甾体激素和维生素类药物的作用机制，为新药研发提供 理论支持。
早期发现
01
20世纪初期，科学家们开始发现内分泌器官分泌的化学物质对
机体的影响。
发展历程
02
随着研究的深入，人们逐渐认识到甾体激素类药物在医学领域
的重要作用，并开始研发人工合成的甾体激素类药物。
现代应用
03
目前，甾体激素类药物已经成为治疗多种内分泌相关疾病的必
根据结构和功能的不同，可以将甾体 激素类药物分为肾上腺皮质激素、雄 激素、雌激素等。
作用机制与用途
作用机制
甾体激素类药物通过与靶细胞上的受 体结合，影响基因表达、酶活性等细 胞内过程，从而调节机体的生理功能。
用途
主要用于治疗与内分泌系统相关的疾 病，如肾上腺皮质功能减退、甲状腺 疾病等。
甾体激素类药物的发展历程
质流失。维生素类药物如维生素C、E等具有抗氧化作用，对维持肌肉
和骨质健康有一定帮助。
03
脂肪代谢
甾体激素类药物对脂肪代谢的影响主要表现为促进脂肪合成和分布。而
维生素类药物如维生素B6、B12等有助于降低血脂水平，对心血管健康
有益。
对临床治疗效果的影响
疗效增强
疗效降低
不良反应
合理使用甾体激素和维生素类 药物可以增强治疗效果，提高 治愈率。例如，适量的维生素 D补充可以促进钙的吸收，有 助于骨折愈合。
免疫调节
甾体激素类药物具有免疫抑制作用，可用于自身免疫性疾病的治疗， 维生素类药物也可调节免疫功能。
代谢性疾病
甾体激素类药物可用于治疗糖尿病、肥胖症等代谢性疾病，维生素类 药物也可用于辅助治疗和预防相关并发症。
研究热点和发展趋势
药物作用机制研究
深入探讨甾体激素和维生素类药物的作用机制，为新药研发提供 理论支持。
早期发现
01
20世纪初期，科学家们开始发现内分泌器官分泌的化学物质对
机体的影响。
发展历程
02
随着研究的深入，人们逐渐认识到甾体激素类药物在医学领域
的重要作用，并开始研发人工合成的甾体激素类药物。
现代应用
03
目前，甾体激素类药物已经成为治疗多种内分泌相关疾病的必
甾体激素类药物的分析
炔雌醇
橙红
炔雌醚
橙红
泼尼松
橙
泼尼松龙
深红
荧光
无 黄绿 黄绿
无 无
加水稀释
褪色并澄清 絮状↓玫红
↓红色
黄→蓝绿 絮状↓灰
与四氮唑的呈色反应 1 C17 – α – 醇酮基还原性
A. 呈色反应
肾上腺皮质 激素药物
四氮唑盐 OHˉ
呈色
原理：肾上腺皮质激素类药物的C17-α -醇酮基具有还原性，在碱性条件下可 将四氮唑还原为有色的甲臜，常用的四氮唑盐有两种:氯化三苯四氮唑和二聚 体蓝四氮唑。两种试剂均无色，它们在碱性条件下与α -醇酮基发生氧化还原 反应，a-醇酮基在该反应中失去2个电子，其C21位上醇被氧化为醛。TTC和 BT的结构及还原产物如P279。
1.雄性激素母核有19个碳原子,蛋白同化激素 C10位上一般无角甲基, 母核有18个碳原子。
2. A环△4-3-酮基:UV、与羰基试剂反应
3.C17位上有β-羟基,或由它们形成的酯
雌激素
具有促进女性身体发育、促使皮下脂肪富集、体内 钠和水的深留以及骨中钙的沉积等活性。
雌二醇
炔雌醇
1. 母核有18个碳原子,C10无角甲基
注意事项：醋酸甲地孕酮分子结构中具有C6位双键，其最大吸收波长在 287nm,而C6位无双键的有关杂质的最大吸收波长在240nm。
(四)游离磷酸盐检 查磷 钼酸比色法
原理：磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵[(NH4)3MoO4] 反应，生成磷钼 酸铵（钼蓝）[(NH4)3PO4▪12MoO3],再经1-氨基-2萘酚-4-磺酸溶液 还原成磷钥酸蓝(钥蓝)后，在波长740mn处有最大吸收，通过比较供试 品溶液和对照品溶液的吸光度值大小来控制药物中游离磷酸盐的量。反 应原理如P285。
药物分析 课件 甾体激素类药物的分析
3 致突变性评价
评估甾体激素类物质的致 突变性可以了解其对遗传 物质的影响。
结论
通过本课件学习，我们可以深入了解甾体激素类药物的分析方法和质量控制， 以及对其安全性进行评估的重要性。还可以展望甾体激素类药物未来的发展 趋势。
甾体激素类药物的分类及常用药物
类固醇
类固醇是甾体激素类药物的 重要一类，具有抗炎、免疫 调节等作用。
雄激素与雌激素
雄激素和雌激素是甾体激素 的两个主要类型，它们在生 殖和激素替代治疗中起着重 要作用。
肾上腺皮质激素
肾上腺皮质激素是甾体激素 类药物的另一类，常用于抗 炎、免疫调节和治疗肾上腺 功能不足。
甾体激素类药物的分析方法
1
化学方法
高效液相色谱法、气相色谱法和薄层色谱法是甾体激素类药物分析的常用化学方 法。
2
生物方法
免疫分析法和生物反应器法是甾体激素类药物分析的重要生物方法。
甾体激素类药物的质量控制
1 纯度检测
甾体激素类药物的纯度可以通过物理性质分 析和化学性质检测进行评估。
2 含量测定
准确测定甾体激素类药物的含量是确保药物 质量重要步骤。
3 杂质检测
杂质检测有助于评估甾体激素类药物的纯度 和安全性。
4 物理和化学性质检测
通过物理性质和化学性质的检测，可以进一 步评估甾体激素类药物的质量。
甾体激素类物的安全性评价
1 急性毒性评价
评估甾体激素类药物的急 性毒性对于确保人体安全 至关重要。
2 慢性毒性评价
慢性毒性评价可以揭示甾 体激素类药物的长期使用 对人体的潜在危害。
药物分析 课件 甾体激素类药 物的分析
这是一份关于甾体激素类药物分析的课件。通过本课件，我们将深入探讨甾 体激素的概述、分类、分析方法、质量控制、安全性评价以及未来发展趋势。
药物分析甾体激素类药物的分析
（二）测定方法
分别制备供试品、对照品溶液，再分
别与异烟肼溶液反应，在420nm波长处分
别测定吸收度并计算结果。
（二）四氮唑比色法 反应原理 皮质激素C17-α-醇酮基具有还原性，
在强碱性溶液中能将四氮唑盐定量地还原
为有色甲鐕。生成的颜色随所用试剂和条 件的不同而定，多为蓝色或红色。
（三）Kober反应比色法 （一）方法原理 雌激素的含量测定，曾经广泛应用
（
C O
CH2OH
），并且多数还具α-羟基。
二、雄性激素及蛋白同化激素
（1）临床常用的雄性激素为睾丸素（睾酮） 的衍生物，如丙酸睾丸素、苯乙酸睾丸素。 （2）常用的蛋白固化激素有苯丙酸诺龙（苯 丙酸去甲睾酮）、康力龙、康复龙等。
OH
O
（1）结构特征（两种激素之共同点）：
① A环3位Δ4-3-酮基（又称α、β不饱和
CH3 C O
O
（四）雌激素
临床上常用雌二醇及其各种酯和炔雌醇 及其衍生物，以及活性的雌酮、雌三醇等。 ① A环为苯环，3位上有酚羟基，10位无角 甲基； ② D环17位上有羟基或羰基，有的还有乙炔 OH 基。
HO
C3
雄性激素与 肾上腺皮质激 蛋白同化激 雌激素 孕激素 素 素 C3 ＝ O C3 ＝O C3 －OH C3 ＝O Δ4-3=O Δ4-3=O A环为苯环 Δ43=O 或Δ1，4-3＝O 有的两个 有的一个 （ C13 ）
应。
3、掌握四氮唑盐比色法的原理。 4、掌握几种含量测定方法的特定及其应用。
四、游离磷酸盐的检查
本法系利用在酸性溶液中磷酸盐中磷酸盐与 钼酸铵作用生成磷钼酸铵，再经过还原形成磷钼 酸蓝（钼蓝）在740nm处有最大吸收。
第四节含Biblioteka 测定常用方法有容量法、比色法、紫外分
甾体激素类药物的分析
甲睾酮
白色或类白色结晶粉末 乙醇、丙酮或三氯甲烷中易溶，乙醚 中略溶，植物油中微溶，水中不溶 C20H30O2：302.46
C17位上加羟基（甲睾酮）或C9位加氟使药物作用更强。C17位羟基酯化，可使吸收减缓，作 用时间延长。
苯丙酸诺龙
白色或类白色结晶粉末 甲醇或乙醇中溶解，植物油中略溶， 水中几乎不溶，熔点93-99℃ C17H34O3：406.57
7
甾体激素类药物的分析
（二）雄性激素和蛋白同化激素
本类药物结构特征：
4
1、A环有Δ -3-酮基，具有紫外吸收
2、C17位上有羟基，部分药物的羟基被酯化
3、雄性激素的母核有19个碳原子，蛋白同化激素 在C10上一般无角甲基，母核只有18个碳原子
一、结构与分类
8
甾体激素类药物的分析
一、结构与分类
（三）孕激素
白色或类白色结晶粉末 三氯甲烷中极易溶解，乙醇、乙醚 或植物油中溶解，水中不溶 熔点128-131℃ C21H30O2：3类药物结构特征： 1、 A环有Δ4-3-酮基，具有紫外吸收
一、结构与分类
2、C17位有甲酮基（17α-羟孕酮类，如黄体酮、醋酸 甲地孕酮）或乙炔基（19-去甲睾酮类，如炔诺酮、左 炔诺孕酮）
11
甾体激素类药物的分析
（四）雌激素
本类药物结构特征：
1、A环为苯环，C3位上有酚羟基，有的药物酚羟 基成酯（如苯甲酸雌二醇）或成醚（如炔雌醚）
2、C17位上有羟基，有的药物C17位上羟基成 酯（如戊酸雌二醇）
3、有的药物在C17位上有乙炔基，构成19-去 甲孕甾烷母核（如炔雌醇、炔雌醚）
一、结构与分类
（多）2、可与氨制硝酸银反应生成银沉淀的药物有（ B、C ）
甾体激素类药物的分析详解
加速试验
在超常条件下进行加速试验，以 预测甾体激素类药物在短时间内 的稳定性。
长期试验
在接近实际储存条件下进行长期 试验，以确定甾体激素类药物的 有效期和储存条件。
05 甾体激素类药物的生物 活性评价
细胞水平评价方法
细胞增殖实验
通过检测药物对细胞增殖的影响，评估药物的抗增殖 或促增殖活性。
细胞凋亡实验
03 样品前处理技术
提取与纯化方法
液-液萃取法
利用样品与提取剂之间的溶解度 差异，将目标物从样品中提取出 来。常用的提取剂包括有机溶剂
、酸、碱等。
固相萃取法
利用固体吸附剂对样品中的目标 物进行选择性吸附，然后用适当 的溶剂洗脱，达到分离和纯化的 目的。常用的吸附剂包括硅胶、
氧化铝、活性炭等。
超临界流体萃取法
人体试验评价方法
临床试验
在人体中进行的药物疗效和安全性评价，包括I 期至IV期的临床试验。
生物等效性试验
比较创新药物与已上市药物的生物利用度和药 代动力学参数，以评估其生物等效性。
药物相互作用研究
探讨药物与其他药物或食物之间的相互作用，以指导合理用药。
06 甾体激素类药物的代谢 与排泄研究
吸收、分布和代谢过程
02 甾体激素类药物的分析 方法
色谱法
薄层色谱法（TLC）
利用不同物质在固定相和流动相之间的分配系数不同，实现对甾体激素类药物的分离和鉴别。该方法具有操作简 便、快速、成本低等优点，但分辨率和灵敏度相对较低。
高效液相色谱法（HPLC）
采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂等流动相泵入装有固定相的色谱柱，实现 对甾体激素类药物的分离和分析。该方法具有高分辨率、高灵敏度、分析速度快等优点，广泛应用于甾体激素类 药物的含量测定和有关物质检查。
甾体激素类药物的分析56860
对骨骼的影响 可出现骨质疏松
糖皮质激素 5抗5多和2少，神经兴奋骨疏松
5抗：炎、热、毒、免、休 5多：红、血红、中、板、纤维蛋白原 2少：淋巴、嗜酸
注意：激素用于严重感染时，必须和有效而足量的抗菌药物合用！ 激素无抗菌作用，又可降低机体防御功能，故必须联合抗菌素， 以免感染灶扩散。
糖皮质激素
O
NHNH2
C
+
N
O
O
NH N
C
-H2O
N
含量测定 比色法
异烟肼比色法 影响因素 （1）反应速度(专属性)
C3= O ＞ C17= O 、 C20= O
（2）溶剂的选择 无水
C11= O 不反应
异烟肼盐酸盐→甲醇、乙醇
（3）水分、O2与光线的影响
含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓
不挥发溶剂、不吸收水分时→ O2与光线无影响
黄体酮中有关物质检查
供试品溶液的杂质峰数不得 超过1个，其面积不得大于对 照液的主峰面积的3/4
对照溶液——0.02mg/ml
供试液——1 mg/ml
Company Logo
杂质检查
2、硒的检查
合成中用二氧化硒(SeO2)脱氢
剧毒
有 机 药 物 氧瓶燃烧 Se 6 盐酸羟胺 Se 4
桃红色
λ max 465nm
λ max 515nm
第一步
第二步
HSO
HSO
λ max 465nm
λ max 515nm
含量测定
Kober比色法 原理
465 A
比色法
515
第一步反应 第二步反应
450 500 550 nm
Kober 反应吸收光谱
甾体激素类药物的分析
（二）UV法
△４-3-酮 240nm（±）
肾上腺皮质激素
雄性激素和蛋白同化激素
苯环
孕激素、口服避孕药 280nm（±）
雌激素
示例：醋酸地塞米松片的含量测定 （1）配制供试液 （2）测定：240nm （3）计算
（三）比色法
1. 异烟肼比色法
C3－酮基
肾上腺皮质激素、 雄性激素和蛋白同
化激素、孕激素
雌性激素
18个C，A环为苯环，C3-酚羟基， C17为β-羟基
肾上腺皮质激素
O
O
H
O CH3
HO
OH
H HO
O CH2OH OH
CH3
H
FHOOHH Nhomakorabea氢化可的松
醋酸地塞米松
O HO H CH3
CH3 H
ONa
OP O OHH ONa
OH
FH
O
地塞米松磷酸钠
雄性激素
OH CH3 CH3 CH3 H
HH O
以氢氧化四甲基铵的结果最佳 加入顺序：
皮质激素溶液 四氮唑盐 碱试液
E. 温度与时间
3. Kober反应比色法 雌激素
（1）原理
雌激素
HSO 乙醇
△
黄色
HO
△
桃红
λmax=465
λmax=515
雌二醇-3-甲醚
OH HSO
CH3
CH3O CH3O
CH3O CH3
λmax=465
HO HSO
λmax=515
苯丙酸诺龙
盐酸氨基脲 △
缩氨基脲衍生物
m.p.约180℃（分解）
2. 酯的水解
丙酸睾酮 碱性条件 睾酮 m.p.为150℃~ 156℃
甾体激素类药物分析
HPLC法和TLC法
谢谢观赏！
谢谢大家！
蓝紫色
间二硝基苯、芳香醛
亚硝基铁氰化钠
这是什么？
Fehlings solution
黄体酮
蓝紫色
化学鉴别法
2、官能团反应
（4）、酚羟基呈色反应
红色偶氮染料
雌激素类药物
重氮苯磺酸
（5）、炔基的沉淀反应
化学鉴别法
F-
有机氟
Fˉ
有机破坏
有机氯
Clˉ
茜素氟蓝 硝酸亚铈
硝酸—硝酸银
AgCl↓
呈色
（6）、卤素的反应
汇报人姓名
202X年12月20日
A
B
C
1、Δ4-3-酮，C20酮基
2、C11：
3、C17：
4、A环上的酚羟基
以下主要基团可供分析：
01
单击添加内容文本
02
单击添
3、吸收系数
化学鉴别法
睾酮
异烟腙（黄色）
1、与强酸的呈色反应 众多甾体激素能与硫酸、盐酸、磷酸、高氯酸等强酸反应呈色
衍生物测定熔点
1、缩氨基脲的生成 2、脂的水解
UV法
苯环 280nm △4-3-酮 240nm a b
IR法
3300～3000cm-1 3000～2700cm-1 1900～1650cm-1 1650～1450cm-1 1000～650cm-1 3750～3300cm-1 指纹区 功能区
2、官能团反应
（7）、酯的反应
化学鉴别法
官能团呈色反应
(1) C17--醇酮基的呈色反应：具还原性、能与氧化剂碱性酒石酸铜试液、氨制硝酸银试液、碱性四氮唑试液反应而呈色。
(2) 酮基的呈色反应：C3-酮基和C20-酮基均能与异烟肼、2,4-二硝基苯肼、硫酸苯肼等羰基试剂呈色。
谢谢观赏！
谢谢大家！
蓝紫色
间二硝基苯、芳香醛
亚硝基铁氰化钠
这是什么？
Fehlings solution
黄体酮
蓝紫色
化学鉴别法
2、官能团反应
（4）、酚羟基呈色反应
红色偶氮染料
雌激素类药物
重氮苯磺酸
（5）、炔基的沉淀反应
化学鉴别法
F-
有机氟
Fˉ
有机破坏
有机氯
Clˉ
茜素氟蓝 硝酸亚铈
硝酸—硝酸银
AgCl↓
呈色
（6）、卤素的反应
汇报人姓名
202X年12月20日
A
B
C
1、Δ4-3-酮，C20酮基
2、C11：
3、C17：
4、A环上的酚羟基
以下主要基团可供分析：
01
单击添加内容文本
02
单击添
3、吸收系数
化学鉴别法
睾酮
异烟腙（黄色）
1、与强酸的呈色反应 众多甾体激素能与硫酸、盐酸、磷酸、高氯酸等强酸反应呈色
衍生物测定熔点
1、缩氨基脲的生成 2、脂的水解
UV法
苯环 280nm △4-3-酮 240nm a b
IR法
3300～3000cm-1 3000～2700cm-1 1900～1650cm-1 1650～1450cm-1 1000～650cm-1 3750～3300cm-1 指纹区 功能区
2、官能团反应
（7）、酯的反应
化学鉴别法
官能团呈色反应
(1) C17--醇酮基的呈色反应：具还原性、能与氧化剂碱性酒石酸铜试液、氨制硝酸银试液、碱性四氮唑试液反应而呈色。
(2) 酮基的呈色反应：C3-酮基和C20-酮基均能与异烟肼、2,4-二硝基苯肼、硫酸苯肼等羰基试剂呈色。
甾体激素类药物的分析——含量测定
第四节含量测定 容量法、⽐⾊法、紫外分光光度法、荧光法、⽓相⾊谱法、⾼效液相⾊谱法等，本章重点讨论四氮唑⽐⾊法、异烟肼⽐⾊法、Kober反应⽐⾊法、紫外分光光度法、⾼效液相⾊谱法等。
⼀、四氮唑⽐⾊法 （⼀）四氮唑的种类两种：2，3，5-三苯基氯化四氮唑（缩写为TTC），其还原产物为不溶于考，试⼤收集整理⽔的深红⾊三苯甲簪，λmax在480~490nm，也称红四氮唑（缩写为RT）。
蓝四氮唑（缩写BT），其还原产物为暗蓝⾊的双甲簪，λmax在525nm左右。
TTC和BT的结构式如下： （⼆）反应原理 ⽪质激素C17-α-醇酮基具有还原性，在强碱性溶液中能将四氮唑盐定量地还原为有⾊甲簪。
可能路线为α-醇酮基，失去2个电⼦氧化为20-酮基-21醛基，在碱催化下，分⼦内部重排；有部分形成20-羟基-21-醛基，C20-C21键断裂形成甾基甲酸衍⽣物和甲醛，以前者为主。
四氮唑盐得到2个电⼦，开环形成甲簪显⾊。
（三）测定⽅法 USP（23）采⽤蓝四氮唑；中国药典（1995版）和BP（1993）采⽤红四氮唑。
中国药典收载地醋酸泼尼松龙软膏的含量测定⽅法如下： 1.对照品溶液制备：精密称取醋酸泼尼松龙对照品20mg，置100ml量瓶中，加⽆⽔⼄醇振摇使溶解，并稀释⾄刻度，摇匀，即得。
2.供试品溶液的制备：精密称取本品4g（约相当于醋酸泼尼松龙20mg），置烧杯中，加⽆⽔⼄醇约30ml，置⽔浴上加热，充分搅拌，使醋酸泼尼松龙溶解，在置冰浴中放冷后，滤过，滤液滤⼊100ml量瓶中，同法提取3次，滤液并⼊量瓶中，加⽆⽔⼄醇稀释⾄刻度，摇匀，即得。
3.测定法：精密量取对照品溶液及供试品溶液各1ml，分别置⼲燥具塞试管中，各精密加⽆⽔⼄醇9ml与氯化三苯四氮唑试液2ml，摇匀，再精密加氢氧化四甲基铵试液1ml，摇匀，在25℃暗处放置40~45min，照分光光度法，在485nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得。
甾体激素类药物的分析、维生素类药物的分析
甾体激素类药物的分析、维生素类药物的分析一、最佳选择题1. 可与具有C17-α-醇酮基的甾体激素药物作用显色的试剂是A.四氮唑盐B.重氮盐C.亚硝基铁氰化钠D.三氯化锑E.异烟肼答案：A[解答] 本题考查重点是肾上腺皮质激素中的C17-α-醇酮基具有还原性，在强碱性溶液中能将四氮唑盐定量地还原有色甲腊。
采用不同的四氮唑盐和在不同的反应条件下，产生不同的颜色，多为红色或蓝色。
《中国药典》采用氯化三苯四氮唑(TTC)。
肾上腺皮质激素(含有C17-α-醇酮基)能将四氮唑盐定量地还原成红色三苯甲腊，三苯甲腊在485nm的波长处有最大吸收，可用于定性定量分析。
2. 可用四氮唑比色法测定含量的药物A.硫酸阿托品B.丙酸睾酮C.黄体酮D.雌二醇E.醋酸地塞米松注射液答案：E[解答] 本题考查重点是对醋酸地塞米松结构特点的掌握。
甾体激素类药物中只有肾上腺皮质激素的结构中含有C17-α-醇酮基，具有还原性，在强碱性溶液中能将四氮唑盐定量地还原有色甲腊，可用比色法测定含量。
以上药物中只有醋酸地塞米松属于肾上腺皮质激素类药物，《中国药典》中醋酸地塞米松注射液采用该法测定含量。
3. 醋酸地塞米松中硒的检查方法A.氧瓶燃烧有机破坏后的茜素氟蓝比色法测定B.氧瓶燃烧有机破坏后的四氮唑比色法测定C.氧瓶燃烧有机破坏，加盐酸羟胺还原，与2，3-二氨基萘缩合，紫外法测定D.氧瓶燃烧有机破坏，加过氧化氢氧化，与2，3-二氨基萘缩合，紫外法测定E.用湿法有机破坏，加过氧化氢氧化，与2，3-二氨基萘缩合，紫外法测定答案：C[解答] 本题考查重点是对醋酸地塞米松中特殊杂质硒检查方法的掌握。
检查方法是根据含硒的有机药物经过氧瓶燃烧破坏，使有机硒游离并转变为Se6+，在吸收液中加盐酸羟胺，使Se6+还原为Se6+。
然后在pH2.0±0.2的条件下，与2，3-二氨基萘反应，生成4，5-苯并苯硒二唑，用环己烷提取后，于378nm波长处测定吸光度，按对照品比较法测定硒含量。
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
示例1：尿中违禁同化激素的SPME/LC–MS检查
对受试对象 给药，一定 时间后采集 尿样
加内标物， 调节PH，加 酶进行水解 一段时间， 离心，取上 清液。
用上述制的 的样品，进 行SPME处 理，分离纯 化后经LCMS分析
图：志愿受试者尿样中睾酮等七种违禁甾体激素药物的LC-MS测定
左炔诺孕酮血浆药代动力学和生物等效性研究 • 左炔诺孕酮是一种高效的孕激素，作为速效 避孕药，广泛应用于临床和计划生育。有文献报 道，建立LC-MS/MS法检测血浆中左炔诺孕酮的 方法，研究左炔诺孕酮分散片在健康自愿受试者 体内的药动学和相对生物利用度，并评价生物等 效性，为临床用药提供依据[5, 6]。
第五节 体内甾体激素类药物分析
1 2 3
药物代 谢研究
生物利用 度研究
违禁药物 监测
此类分析的特点：
1
方法的专属性强 给药剂量很小 药物浓度低
2
3
4
分析方法的灵敏度较高
竞技运动员体内违禁甾体激素药物的分析
在线固相微萃取 (solid-phase microextraction, SPME) 技 术[3]
5. Li-Zi Zh, Guo-Ping Zh, et al. Determination of levonorgestrel in human plasma by liquid chromatography –tandem mass spectrometry method: application to a bioequivalence study of two formulations in healthy volunteers. Biomed Chromatogr, 2008, 22: 519–526. 6. 李健和，徐平声，戴智勇，等. 左炔诺孕酮分散片在健康人体中药动学和生物等效性.中国现代应用药学杂志， 2009, 28(8): 644-648.
方法
LC-MS测定法[3]
HPLC- UV测定法[4]
[3] Saito K, Yagi K, Ishizaki A, Kataoka H. Determination of anabolic steroids in human urine by automated in-tube solid-phase microextraction coupled with liquid chromatography–mass spectrometry. J of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2010, 52: 727–733 [4] Konieczna L, Plenis A, Oledzka I, Kowalski P, B˛Aczek T. Optimization of LC method for the determination of testosterone and pitestosterone in urine samples in view of iomedical studies and anti-doping esearch studies. Talanta, 2011, 83: 804-814
示例2：左炔诺孕酮分散片的人体药动学研究
受试者随机 分成两组， 分别服用实 验制剂和参 比制剂
分别于服 药前和服 药后的一 段时间采 血，并对 血液进行 前处理
对处理好 的血浆样 品经LCMS分析
对上述结果进行方法学考查
专属性
稳定性
准确取回收率
结果表明:
1
Cmax,，AUC0−t 和AUC0→∞差异无显著性意 义,表明左炔诺孕酮分散片（试验制剂)和参比 制剂在人体的吸收速度和吸收程度方面差异 无显著性意义
2
Tmax，Ka（吸收速率常数）和MRT（平均 滞留时间）差异有显著性意义,是由于分散 片有缓慢释放和缓慢吸收的特点