红细胞悬液的配制

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红细胞悬液的配制[精彩]

红细胞悬液的配制[精彩]

红细胞悬液的配制[精彩]红细胞悬液的配制1 目的配制合格的红细胞悬液。

2 使用范围适用于ABO血型鉴定、Rh血型鉴定、交叉配血试验及抗A和抗B血型定型试剂效价测定及稳定性和亲和力评价试验等。

3 职责血库专业人员及本科值班人员。

4 试剂及仪器4.1.1 生理盐水4.1.2 离心机5 操作规程5.1 取红细胞加入已标记的洁净小试管(内径10mm×60mm)中~3000r/min离心5min。

5.2 弃上清~加入适量生理盐水~用吸管轻轻吹散管底红细胞~3000r/min离心5min。

5.3 重复5.1.2操作2次以充分洗涤红细胞。

5.4 用吸管小心吸取上层生理盐水并弃去~取底部压实红细胞按下表1配成不同浓度的红细胞悬液。

表1 红细胞悬液配制悬液浓度,%, 压实红细胞,滴, 生理盐水,滴,2 1 2.0ml,40,4 1 1.0ml,20,3-5 1 0.8ml-1.3ml,16-26,5 1 0.8ml,16,10 1 0.4,8, 6.质量控制6.1 配制A型和B型5,试剂红细胞悬液时需随机选用经血液中心鉴定血型的3个以上健康成人同型标准红细胞~无溶血及脂血。

配制前需按[ABO血型手工鉴定]进行正反定型。

6.2 离心时严格按照转速要求~吹散管底红细胞时动作需轻柔~防止溶血。

6.3 试管和滴管必须清洁干燥~防止溶血。

6.4 A型和B型5,试剂红细胞悬液使用前需按[ABO血型手工鉴定]进行正定型。

7 红细胞悬液的保存7.1 配制好的5,的试剂红细胞悬液应在试管上注明红细胞血型及配制时间~并在[配制5,试剂红细胞悬液记录表]中按要求记录~加盖后2-8?避光保存~有效期3天。

7.2 用于血型鉴定的受检者3-5%红细胞悬液可不保存。

7.3 抗A和抗B血型定型试剂效价测定及稳定性和亲和力评价试验所需红细胞悬液需现用现配~使用后勿需保存。

8 参考文献叶应妩,王毓三~申子瑜主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司. 南京.第三版.附表:文件修改记录修改内容修改人修改时间批准人批准时间配制5,试剂红细胞悬液记录表配制时间血型浓度体积,ml, 失效时间配制人。

红细胞悬液的配制

红细胞悬液的配制

红细胞悬液的配制1 目的配制合格的红细胞悬液。

2 使用范围适用于ABO血型鉴定、Rh血型鉴定、交叉配血试验及抗A和抗B血型定型试剂效价测定及稳定性和亲和力评价试验等.3 职责血库专业人员及本科值班人员。

4 试剂及仪器4。

1.1 生理盐水4.1。

2 离心机5 操作规程5.1 取红细胞加入已标记的洁净小试管(内径10mm×60mm)中,3000r/min离心5min. 5。

2 弃上清,加入适量生理盐水,用吸管轻轻吹散管底红细胞,3000r/min离心5min。

5。

3 重复5。

1。

2操作2次以充分洗涤红细胞.5.4 用吸管小心吸取上层生理盐水并弃去,取底部压实红细胞按下表1配成不同浓度的红细胞悬液.表1 红细胞悬液配制悬液浓度(%) 压实红细胞(滴) 生理盐水(滴)2 1 2。

0ml(40)4 1 1.0ml(20)3—5 1 0.8ml—1.3ml(16-26)5 1 0.8ml(16)10 1 0。

4(8)6.质量控制6。

1 配制A型和B型5%试剂红细胞悬液时需随机选用经血液中心鉴定血型的3个以上健康成人同型标准红细胞,无溶血及脂血。

配制前需按[ABO血型手工鉴定]进行正反定型。

6。

2 离心时严格按照转速要求,吹散管底红细胞时动作需轻柔,防止溶血.6.3 试管和滴管必须清洁干燥,防止溶血.6.4 A型和B型5%试剂红细胞悬液使用前需按[ABO血型手工鉴定]进行正定型。

7 红细胞悬液的保存7.1 配制好的5%的试剂红细胞悬液应在试管上注明红细胞血型及配制时间,并在[配制5%试剂红细胞悬液记录表]中按要求记录,加盖后2—8℃避光保存,有效期3天。

7。

2 用于血型鉴定的受检者3-5%红细胞悬液可不保存。

7.3 抗A和抗B血型定型试剂效价测定及稳定性和亲和力评价试验所需红细胞悬液需现用现配,使用后勿需保存。

8 参考文献叶应妩,王毓三,申子瑜主编。

全国临床检验操作规程。

中华人民共和国卫生部医政司。

abo反定型红细胞悬液的配制方法

abo反定型红细胞悬液的配制方法

ABO反定型红细胞悬液的配制方法1. 简介ABO血型系统是根据人体红细胞膜表面的抗原而划分的,主要有A型、B型、AB型和O型四种血型。

在输血过程中,正确选择合适的血型是非常重要的,以避免发生血型不相容的严重反应。

ABO反定型红细胞悬液是一种用于血型鉴定、抗体筛查以及输血前交叉试验的实验试剂。

2. 材料准备为了制备ABO反定型红细胞悬液,我们需要准备以下材料:•柱层离心管•离心机•A型血液样本•B型血液样本•AB型血液样本•O型血液样本•生理盐水3. 配制步骤3.1. 血型鉴定试验步骤血型鉴定是确定一个人的血型的过程,在配制ABO反定型红细胞悬液之前,我们需要进行该测试。

1.将柱层离心管标记为A、B、AB、O,分别代表后续实验中不同血型。

2.取一定量的A型血液样本,加入一个标记为A的柱层离心管中。

3.取一定量的B型血液样本,加入一个标记为B的柱层离心管中。

4.取一定量的AB型血液样本,加入一个标记为AB的柱层离心管中。

5.取一定量的O型血液样本,加入一个标记为O的柱层离心管中。

6.将加入血液样本的柱层离心管放入离心机中,以1500 rpm离心10分钟,分离红细胞。

3.2. ABO反定型红细胞悬液配制步骤完成血型鉴定步骤后,我们可以开始配制ABO反定型红细胞悬液了。

1.取出离心机中的柱层离心管,将上清液倒入不同的干净离心管中。

2.分别向每个离心管中加入适量的生理盐水,用于稀释上清液。

3.轻轻摇匀离心管,确保红细胞充分分散在生理盐水中。

4.将离心管放入离心机中,以1500 rpm离心10分钟。

5.丢弃上清液,保留红细胞沉淀。

6.向红细胞沉淀中加入适量的生理盐水,用于洗涤红细胞。

7.轻轻摇匀离心管,离心3分钟,丢弃上清液。

8.重复步骤7,洗涤至少3次,以去除多余的血浆成分。

9.最后一次洗涤后,加入适量的生理盐水,使红细胞悬浮。

10.将悬浮的红细胞转移至一个干净的离心管中。

4. 结论通过以上配制步骤,我们成功制备了ABO反定型红细胞悬液。

红细胞悬液制备步骤

红细胞悬液制备步骤

红细胞悬液制备步骤咱就说这红细胞悬液的制备啊,那可真是个有意思的事儿呢!你想想,就好像是在给红细胞们搞一个特别的训练营。

先得有合适的原材料吧,这就好比做菜得有新鲜的食材呀!得从健康人的血液里把红细胞分离出来。

这可不是随随便便就能干的事儿,得小心翼翼的,就像对待宝贝一样。

然后呢,把这些红细胞放到一个特殊的容器里,就像是给它们安排了一个专属的房间。

这个时候呀,还得给它们加点特别的东西,让它们能更好地保持状态,就像给运动员补充营养一样。

接着就是关键的一步啦,要把那些不需要的东西给去掉,只留下纯净的红细胞。

这就好像是在一堆杂物里挑出最宝贵的东西一样,得有耐心,还得有技巧。

再之后呀,就是调整红细胞的浓度啦,不能太稀也不能太浓,这就像是调一碗恰到好处的汤,多一点少一点味道都不一样呢。

哎呀,你说这红细胞悬液的制备是不是挺神奇的?就这么一步步地,把普通的血液变成了可以拯救生命的红细胞悬液。

这就好像是一个魔法的过程,把不可能变成了可能。

制备红细胞悬液可真不是件容易的事儿啊,每一步都得特别仔细,稍有差错可能就前功尽弃啦。

这就好像盖房子,一砖一瓦都得放对地方,不然房子可就不结实啦。

你说要是在制备的时候不小心出了错,那可不得了啊!那不是白费力气了嘛,说不定还会耽误治病救人呢。

所以啊,干这个事儿的人可得特别认真负责才行。

咱平时可能觉得这红细胞悬液没什么了不起的,不就是点血嘛。

但你想想,在关键时刻,它能救人性命啊!这就像是一个默默无闻的英雄,平时不显眼,关键时候能发挥大作用。

你再想想,要是没有红细胞悬液,那些需要输血的病人该怎么办呀?那不是很危险嘛。

所以说呀,红细胞悬液的制备真的很重要,很有意义呢!这可不是开玩笑的事儿,是关乎生命的大事呀!反正我觉得红细胞悬液的制备是个特别了不起的事儿,能做这个工作的人都很厉害呢!。

绵羊红细胞悬液制备方法(2%,4%)

绵羊红细胞悬液制备方法(2%,4%)

南京森贝伽生物科技有限公司
绵羊红细胞制备方法
一、目的
规定绵羊红细胞制备方法,以及外购绵羊红细胞的管理办法,指导操作人员实验操作,保证检验结果的正确性。

二、适用范围
适用于实验使用的4%以及各浓度绵羊红细胞的制备。

三、材料和设备
3.1生理盐水:即0.85%氯化钠溶液,取氯化钠8.5g,溶解于1000ml纯化水即得。

3.21ml或2ml,5ml一次性注射器,冰箱等
3.3阿氏液:自配
四、操作流程
4.1绵羊血采集:采用颈动脉采血法。

4.1.1先将绵羊固定,剪去颈部位置的被毛。

4.1.2压迫绵羊,让其血管扩展以确定下针部位,对该部位使用75%酒精消毒。

4.1.3预先吸入约1~2ml阿氏液于5或10ml注射器中,实验者手持有针头的注射器,在血管凸起位置扎针,血液自动进入注射器。

4.1.4一般情况下,一只成年绵羊可采血250-500ml血,且注意抽血时一定要缓慢。

采完后要压迫止血。

4.2绵羊血保存:外购绵羊血按照供应商推荐的保存条件及有效期。

自采绵羊血与阿氏液混匀,置入15ml离心管中,在2~8℃保存,有效期二周。

4.3绵羊红细胞制备:使用前处理绵羊血,步骤如下:1500rpm离心5min,弃去上清液。

加生理盐水至15ml,摇匀,1500rpm离心5min,弃去上清液,重复两次,最后一次离心10分钟。

用无菌生理盐水配制成2%或实验所需绵羊红细胞悬液即得,置2~8℃备用,有效期7天。

标准红细胞配制简易规程

标准红细胞配制简易规程

5%红细胞悬液的配制简易规程
一、分别取血型A、B、O各3个样本,同血型样本分别取适量红细胞,用生
理盐水洗涤红细胞3次。

二、A血型的样本各取100ul洗涤后的压积红细胞加入标明A的试管混合;B
血型的样本各取100ul洗涤后的压积红细胞加入标明B的试管混合;O血型的样本各取100ul洗涤后的压积红细胞加入标明O的试管混合;
三、分别在以上“A”、“B”、“O”管取100ul压积红细胞,分别加入标明“5%A
标红C”、标明“5%B标红C”、标明“%O标红C”的三只试管里,根据下表进行红细胞悬液的配制。

悬液浓度(%)压积红细胞盐水
5 100ul 2ml
四、配制好后密闭存放2-8摄氏度冰箱保存,不得超过3天。

配制记录
配制日期5%A标红C 5%B标红C 5%O标红C 配制人。

红细胞悬液的配制

红细胞悬液的配制

红细胞悬液的配制1 目的配制合格的红细胞悬液。

2 使用范围适用于ABO血型鉴定、Rh血型鉴定、交叉配血试验及抗A和抗B血型定型试剂效价测定及稳定性和亲和力评价试验等。

3 职责血库专业人员及本科值班人员。

4 试剂及仪器4.1.1 生理盐水4.1.2 离心机5 操作规程取红细胞加入已标记的洁净小试管(内径10mm×60mm)中,3000r/min离心5min。

弃上清,加入适量生理盐水,用吸管轻轻吹散管底红细胞,3000r/min离心5min。

重复5.1.2操作2次以充分洗涤红细胞。

用吸管小心吸取上层生理盐水并弃去,取底部压实红细胞按下表1配成不同浓度的红细胞悬液。

表1 红细胞悬液配制悬液浓度(%)压实红细胞(滴)生理盐水(滴)21(40)41(20)3-51(16-26)51(16)101(8)6.质量控制配制A型和B型5%试剂红细胞悬液时需随机选用经血液中心鉴定血型的3个以上健康成人同型标准红细胞,无溶血及脂血。

配制前需按[ABO血型手工鉴定]进行正反定型。

离心时严格按照转速要求,吹散管底红细胞时动作需轻柔,防止溶血。

试管和滴管必须清洁干燥,防止溶血。

6.4 A型和B型5%试剂红细胞悬液使用前需按[ABO血型手工鉴定]进行正定型。

7 红细胞悬液的保存配制好的5%的试剂红细胞悬液应在试管上注明红细胞血型及配制时间,并在[配制5%试剂红细胞悬液记录表]中按要求记录,加盖后2-8℃避光保存,有效期3天。

用于血型鉴定的受检者3-5%红细胞悬液可不保存。

抗A和抗B血型定型试剂效价测定及稳定性和亲和力评价试验所需红细胞悬液需现用现配,使用后勿需保存。

8 参考文献叶应妩,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司. 南京.第三版.附表:文件修改记录配制5%试剂红细胞悬液记录表。

记录1%红细胞悬液配制的基本过程及操作过 程中的注意事项

记录1%红细胞悬液配制的基本过程及操作过 程中的注意事项

记录1%红细胞悬液配制的基本过程及操作过程中的
注意事项
百分之一鸡红细胞悬液是采用血凝和血凝抑制试验开展新城疫
和高致病性禽liu感抗体检测的重要试剂之一,正确配制红细胞悬液对试验结果的准确性至关重要。

产品名称:百分之一鸡红细胞悬液,规格:100ml无菌采血,阿氏液保存,储存:2摄氏度至8摄氏度保存。

1%鸡红细胞悬液制备方法:
1、准备好试验所需的所有材料,包括离心管、低速离心机、试管架、PBS缓冲液(生理盐水)、注射器、100ml大青瓶及塞子等等。

2、抗凝血第一次离心。

用注射器采集若干毫升抗凝鸡血,根据需要确定。

将抗凝血缓慢注入离心管内,盖好盖子后将离心管放入离心机,配平后每分钟1500r离心5min,离出抗凝剂及血浆等。

3、第一次离心结束后,将上层液体及白细胞层用注射器吸出,加入适量PBS缓冲液,配平后进行第二次离心,每分钟1500r离心
5min,进一步清洗红细胞。

4、第二次离心结束后,同样吸出上层液体及白细胞层,再加入适量PBS缓冲液,配平后进行第三次离心,,每分钟2000r离心10min,进一步清洗红细胞。

5、离心结束,后一次吸出上层清液。

量取99mlPBS缓冲液加入100ml大青瓶(或其他容器),用注射器(或其他,如吸管)吸取1ml 洗净的红细胞,缓慢加入99mlPBS缓冲液中,塞紧瓶塞。

6、百分之一红细胞制备好后,一般置于2摄氏度至8摄氏度冰箱保存,用时充分混匀即可。

红细胞悬液的配制

红细胞悬液的配制

红细胞悬液的配制 Hessen was revised in January 2021红细胞悬液的配制1 目的配制合格的红细胞悬液。

2 使用范围适用于ABO血型鉴定、Rh血型鉴定、交叉配血试验及抗A和抗B血型定型试剂效价测定及稳定性和亲和力评价试验等。

3 职责血库专业人员及本科值班人员。

4 试剂及仪器4.1.1 生理盐水4.1.2 离心机5 操作规程取红细胞加入已标记的洁净小试管(内径10mm×60mm)中,3000r/min离心5min。

弃上清,加入适量生理盐水,用吸管轻轻吹散管底红细胞,3000r/min离心5min。

重复5.1.2操作2次以充分洗涤红细胞。

用吸管小心吸取上层生理盐水并弃去,取底部压实红细胞按下表1配成不同浓度的红细胞悬液。

表1 红细胞悬液配制悬液浓度(%)压实红细胞(滴)生理盐水(滴)21(40)41(20)3-51(16-26)51(16)101(8)6.质量控制配制A型和B型5%试剂红细胞悬液时需随机选用经血液中心鉴定血型的3个以上健康成人同型标准红细胞,无溶血及脂血。

配制前需按[ABO血型手工鉴定]进行正反定型。

离心时严格按照转速要求,吹散管底红细胞时动作需轻柔,防止溶血。

试管和滴管必须清洁干燥,防止溶血。

6.4 A型和B型5%试剂红细胞悬液使用前需按[ABO血型手工鉴定]进行正定型。

7 红细胞悬液的保存配制好的5%的试剂红细胞悬液应在试管上注明红细胞血型及配制时间,并在[配制5%试剂红细胞悬液记录表]中按要求记录,加盖后2-8℃避光保存,有效期3天。

用于血型鉴定的受检者3-5%红细胞悬液可不保存。

抗A和抗B血型定型试剂效价测定及稳定性和亲和力评价试验所需红细胞悬液需现用现配,使用后勿需保存。

8 参考文献叶应妩,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司. 南京.第三版.附表:文件修改记录配制5%试剂红细胞悬液记录表。

实验一ABO及Rh血型鉴定2013.3

实验一ABO及Rh血型鉴定2013.3
临床检验诊断学实验室




一、5%红细胞悬液的配制 二、ABO血型鉴定(试管法、纸片法) 三、Rh血型鉴定
?
一、5%红细胞悬液的配制
原理:使用一定量的稀释液(生理盐水)稀释
压积红细胞,遵循抗原抗体结合的量比关系,
获出最佳结果。
器材: 小试管(玻璃及塑料皆可)、加样枪、
试管架、离心机、记号笔、显微镜。

正定型
反定型
注意事项
1.试剂 5.冷抗体 2.悬红 3.蛋白 4.溶血 7.污染 6.老年、儿童
三 、 Rh血型鉴定

目的 原理
掌握Rh血型鉴定的原理、方法。 Rh血型系统,包括四十几个抗原,通常使用相应
的抗C、抗c、抗D、抗E、抗e五种Rh分型血清来检查红
细胞抗原。 在临床输血中一般只做D抗原的鉴定,被检红细胞 和抗D血清凝集者为Rh阳性,不凝集者为Rh阴性。
1滴到5支试管中。
2.每管各加1滴3%~5%待检红细胞悬液。 3.充分混匀,以1000 g离心15秒。 4.观察结果:轻摇散开试管底部的细胞扣,用 肉眼观看凝集。 5.判定结果
注意事项
1.用抗D血清进行Rh血型鉴别时,结果为阴性,不能直 接报告Rh阴性,需进一步检测弱D型还是部分D型。 2.Rh血型鉴定应严格控制温度与时间,因Rh抗原、抗体 凝集反应块比较脆弱,观察反应结果时,应轻轻摇动 试管,不可用力振摇。 3.Rh血型系统的抗体多为后天免疫刺激产生,不需要做 反定型。
二、ABO鉴定
目的:掌握ABO正反定型的原理、方法。 原理:红细胞凝集试验,通过正、反定型鉴定ABO 血型。 正定型:用已知血型特异性抗体(抗-A、抗-B) 来测定红细胞上有无相应的抗原; 反定型:用已知血型试剂红细胞测定血清中有无 相应的抗体。

abo反定型红细胞悬液的配制方法

abo反定型红细胞悬液的配制方法

abo反定型红细胞悬液的配制方法
ABO反定型红细胞悬液是一种常用的血型鉴定试剂,其配制方法如下:
1. 材料准备
需要准备的材料包括:ABO血型鉴定试剂盒、生理盐水、A、B、O型红细胞悬液。

2. 悬液配制
将A、B、O型红细胞悬液分别加入生理盐水中,使其浓度为0.8%。

将A型红细胞悬液与B型红细胞悬液混合,制成A、B型红细胞悬液。

将O型红细胞悬液加入生理盐水中,使其浓度为0.4%。

将A、B型红细胞悬液与O型红细胞悬液混合,制成ABO反定型红细胞悬液。

3. 质量控制
配制好的ABO反定型红细胞悬液需要进行质量控制。

首先,需要对悬液进行外观检查,确保无明显沉淀和变色。

其次,需要进行质量控制
试验,如抗人球蛋白试验和抗人全血凝集试验,以确保悬液的质量符
合要求。

4. 储存和使用
配制好的ABO反定型红细胞悬液应储存在2-8℃的冰箱中,避免阳光直射和震动。

在使用前需要将悬液充分混匀,避免沉淀和凝集。

总之,ABO反定型红细胞悬液的配制需要严格按照操作规程进行,以确保悬液的质量符合要求。

在使用过程中,也需要注意质量控制和储存条件,以保证血型鉴定结果的准确性。

红细胞悬液制备

红细胞悬液制备

首先全血离心1000rpm 10min,(离心后加生理盐水,混匀,去掉上清液后再离心,可重复这个步骤,直至离心后上清液透亮)制备压积红细胞,然后取一滴压积红细胞和九滴生理盐水混匀,这是为10%的红细胞悬液,取此悬液5滴,加生理盐水5滴,混匀,应该就是5%的红细胞悬液。

制备红细胞悬液的程序一般是用生理盐水洗涤红细胞,除去其表面的附着物,然后配成所需要的浓度。

洗涤红细胞的具体方法是:
先将抗凝血以2000r/min离心5min,吸去血浆层。

在管中加2~3倍的生理盐水用毛细滴管轻轻地反复吹吸混匀,再以2000r/min离心5min,弃上清液,如此反复三次。

最后一次可适当延长离心时间至10min。

这样压积后的红细胞,上清液透明无色。

弃上清液后,用压积红细胞配成实验要求所需的浓度备用。

红细胞洗涤次数不宜太多,以三次为宜,否则红细胞脆性增加,影响试验结果。

若是用于制备溶血素的红细胞,应无菌操作。

取血后离心,弃上层血清,加入生理盐水洗2-3遍,离心,弃上清,取0.2ml红细胞稀释至10ml就可以了,原则上是低温操作(2-8度),但是离心的时间很短,我们一般常温离心,好像问题也不大。

1%鸡红细胞液的制备

1%鸡红细胞液的制备

1%鸡红细胞液的制备
①为避免有些鸡只的红细胞有自凝现象,因此配制1%红细胞悬液时应最好选择采取2-3只SPF鸡或未进行过任何免疫过的成年公鸡血液。

当然采血的前提条件是要按十分之一采血量比例在一次性注射器中加入抗凝剂,如肝素、枸椽酸钠、柠檬酸钠等。

②采血完毕后最好分装至2ml容量的圆底离心管中,因为通过2ml与1.5ml两种容量离心管相比较,放入1.5ml尖底离心管中的话,离心后,离心管底部红细胞不易与加入的PBS液混匀,易沉积在管底部,达不到洗脱干净的目的。

③经2000~3000r/min,5~10min,弃去上液和红细胞上层的白细胞薄膜,再加入十倍以上血量的PBS液,上下缓慢颠倒(切忌用力过大使红细胞破裂),使其充分混匀,再离心弃去上清液,反复几次直至上清液清亮透明为止。

④在加红细胞过程中还须不断轻摇以确保红细胞均匀,使其每孔加入相同数量的红细胞。

⑤制备好的红细胞液如果放置后上清液变红,说明有溶血,不可再使用。

ABO及Rh血型鉴定

ABO及Rh血型鉴定

14、抱最大的希望,作最大的努力。2021年5月15日 星期六 2021/5/152021/5/152021/5/15
15、一个人炫耀什么,说明他内心缺 少什么 。。2021年5月 2021/5/152021/5/152021/5/155/15/2021
16、业余生活要有意义,不要越轨。2021/5/152021/5/15May 15, 2021
17、一个人即使已登上顶峰,也仍要 自强不 息。2021/5/152021/5/152021/5/152021/5/15
谢谢大家
2021/4/26
30
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一、5%红细胞悬液的配制
原理:使用一定量的稀释液(生理盐水)稀释 压积红细胞,为了遵循抗原抗体结合的量比关 系,获出最佳结果。 器材: 小试管(玻璃及塑料皆可)、滴管、试 管架、离心机、记号笔、显微镜。 试剂: 生理盐水。 标本: 抗凝或非抗凝静脉血。
操作
1、全血2ml 1000g离心3min,分离上清(备用); 2、压积加生理盐水约2~3ml,充分摇匀或吸管轻轻吹打
试剂血清+受检红细胞 (正定型)
-A -B 受检血型
受检血清+试剂红细胞 (反定型)
Ac Bc Oc
+-
A
-+
B
--
O
++
AB
-+ - +-- ++- ---
红细胞凝集强度判断标准 4+ 红细胞凝集成一大块,血清清晰透明。 3+ 红细胞凝集成大小块,血清清晰。 2+ 红细胞凝块分散成许多小块,血清清晰。 l+ 肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞。 ± 镜下可见数个红细胞凝集在一起,周围有很多
14、抱最大的希望,作最大的努力。2021年5月15日 星期六 2021/5/152021/5/152021/5/15

交叉配血操作方法

交叉配血操作方法

交叉配血操作方法一、支持文件:参见《临床检验》2002年7月第一版二、核对配血标本必须复检患者ABO、Rh血型,将复检结果写入申请单并附签名。

三、交叉配血操作:凝聚胺配血法,具有不规那么血型抗体筛选作用。

1、3%—5%红细胞悬液配制:1毫升生理盐水中加30—50 微升压积红细胞,混匀(洗涤或不洗涤,盐水介质配血法最好洗涤3次)。

2、取试管两支,标记主、次侧:主侧:病人血清(浆)2滴,加供血者3%—5% 血球1滴。

次侧:献血者血清(浆)2滴,加病人3%—5% 血球1滴。

3、各加LIM(低离子强度盐溶液)0. 6ml,混合均匀.室温静置1分钟。

4、再各加2滴Polbrene Solution(凝聚胺)混合,静置15秒。

5、3400rpm(900g)离心15—30秒或1000r/min离心]分钟,然后把上清液倒掉,使壁管残留大约0.血1左右的液体。

6、轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集。

如无凝集,必须重做。

7、最后加2滴Resuspending (重悬液),并轻轻混合,观察结果。

如凝集30秒内不散开,那么为抗体结合的特异性反响, 为配血不相容;如凝集散开,那么为Polybrene引起的非特异性的凝集,为配血相容,进一步在显微镜观察有无凝集。

8、交叉配血报告方式:①同型交叉配血:“主、次管交叉配血无凝集、无溶血反响”,②异型交叉配血(不主张):“主管交叉配血无凝集、无溶血反响;次管交叉配血有凝集、无溶血反响”。

9、将交叉配血结果、ABO血型复定结果、不规那么抗体筛选结果等内容逐项填入《第二医院输血记录单》中,此“单” 为“交叉配血报告单”,经认真核对无误后与全血或成分血一起发往临床(入病历)。

并将“交叉配血结果”登记在《兴国县第二医院交叉配血结果记录本》上。

10、将交叉配血的“主、次管”、“送检标本(原瓶)”,“血袋剪下的辫子” 一同置试管中集中放冰箱(2-8°C)保存7天。

11、凡输注全血、浓缩红细胞、红细胞悬液、洗涤红细胞、冰冻红细胞、浓缩白细胞、手工别离浓缩血小板等患者, 应进行交叉配血试验。

红细胞悬液的配制

红细胞悬液的配制

红细胞悬液的配制 Document number:PBGCG-0857-BTDO-0089-PTT1998红细胞悬液的配制1 目的配制合格的红细胞悬液。

2 使用范围适用于ABO血型鉴定、Rh血型鉴定、交叉配血试验及抗A和抗B血型定型试剂效价测定及稳定性和亲和力评价试验等。

3 职责血库专业人员及本科值班人员。

4 试剂及仪器4.1.1 生理盐水4.1.2 离心机5 操作规程取红细胞加入已标记的洁净小试管(内径10mm×60mm)中,3000r/min离心5min。

弃上清,加入适量生理盐水,用吸管轻轻吹散管底红细胞,3000r/min离心5min。

重复5.1.2操作2次以充分洗涤红细胞。

用吸管小心吸取上层生理盐水并弃去,取底部压实红细胞按下表1配成不同浓度的红细胞悬液。

表1 红细胞悬液配制悬液浓度(%)压实红细胞(滴)生理盐水(滴)21(40)41(20)3-51(16-26)51(16)101(8)6.质量控制配制A型和B型5%试剂红细胞悬液时需随机选用经血液中心鉴定血型的3个以上健康成人同型标准红细胞,无溶血及脂血。

配制前需按[ABO血型手工鉴定]进行正反定型。

离心时严格按照转速要求,吹散管底红细胞时动作需轻柔,防止溶血。

试管和滴管必须清洁干燥,防止溶血。

6.4 A型和B型5%试剂红细胞悬液使用前需按[ABO血型手工鉴定]进行正定型。

7 红细胞悬液的保存配制好的5%的试剂红细胞悬液应在试管上注明红细胞血型及配制时间,并在[配制5%试剂红细胞悬液记录表]中按要求记录,加盖后2-8℃避光保存,有效期3天。

用于血型鉴定的受检者3-5%红细胞悬液可不保存。

抗A和抗B血型定型试剂效价测定及稳定性和亲和力评价试验所需红细胞悬液需现用现配,使用后勿需保存。

8 参考文献叶应妩,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司. 南京.第三版.附表:文件修改记录配制5%试剂红细胞悬液记录表。

标准操作规程(SOP)——1%鸡红细胞悬液制备

标准操作规程(SOP)——1%鸡红细胞悬液制备

一、目的该文件用以详细说明1%鸡红细胞悬液的制备过程和相关技术要求,用以确保鸡红细胞的采集、保存规范有效;确保鸡红细胞悬液的配制、保存质量良好,从而确保应用到该悬液的后续实验(流感病毒红细胞凝集及红细胞凝集抑制试验)的结果可靠准确。

二、范围适用于中国国家流感中心所有技术人员进行1%鸡红细胞悬液制备。

三、程序(一)生物安全要求BSL-1实验室。

(二)材料1.PBS pH 7.2~7.4(Sigma P3813)将1包PBS 粉剂溶于1000mL 去离子水中,121℃ 20min 高压灭菌。

2.0.85% NaCl0.85g NaCl 用蒸馏水配至100mL ,溶解,分装,121℃ 20min 高压灭菌,置室温保存。

3.Alsever’s 液葡萄糖 2.08g柠檬酸钠 0.80g柠檬酸 0.055gNaCl 0.42g加蒸馏水至 100mL121℃ 20min 高压灭菌,置4℃备用。

4.注射器(10mL 或20mL 或60mL )标准操作规程(SOP )——制备5.医用酒精棉签6.2%~5%碘酒棉签7.无菌棉签8.15 mL离心管9.标签(三)实验步骤1.鸡红细胞采集和保存(1)操作人员在实验前穿工作衣,戴手套、口罩。

助手负责绑定动物,将鸡侧面朝上放于操作台上,分别固定鸡翼和鸡腿,将翅膀展开,露出鸡翼根部,将羽毛拔去,即可见到明显的翼根静脉。

用碘酒或酒精消毒皮肤。

抽血时,左手拇指、食指压迫此静脉向心端,血管即怒张。

(2)操作者取10mL或20mL注射器吸入约3mLAlsever’s液,针头由翼根向翅膀方向沿静脉平行刺入血管内,采血至10mL。

(3)若需要大量鸡红细胞,可采用心脏采血法。

助手将鸡向右侧卧,左手扶鸡。

找出从胸骨走向肩胛部的皮下大静脉,心脏约在该静脉分支下侧;或由肱骨头、股骨头、胸骨前端三点所形成三角形中心稍偏前方的部位。

将采血部位用2%碘酒或75%酒精棉消毒,将注射器针头垂直向鸡的左侧心脏位置刺入(在60mL注射器中先吸入约15~20mLAlsever’s液),如刺入心脏可感到心脏跳动,稍回抽针栓可见回血,否则应将针头稍拔出,再更换一个角度刺入,直至抽出血液。

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红细胞悬液的配制
Pleasure Group Office【T985AB-B866SYT-B182C-BS682T-STT18】
红细胞悬液的配制
1 目的
配制合格的红细胞悬液。

2 使用范围
适用于ABO血型鉴定、Rh血型鉴定、交叉配血试验及抗A和抗B血型定型试剂效价测定及稳定性和亲和力评价试验等。

3 职责
血库专业人员及本科值班人员。

4 试剂及仪器
4.1.1 生理盐水
4.1.2 离心机
5 操作规程
取红细胞加入已标记的洁净小试管(内径10mm×60mm)中,3000r/min 离心5min。

弃上清,加入适量生理盐水,用吸管轻轻吹散管底红细胞,3000r/min 离心5min。

重复5.1.2操作2次以充分洗涤红细胞。

用吸管小心吸取上层生理盐水并弃去,取底部压实红细胞按下表1配成不同浓度的红细胞悬液。

表1 红细胞悬液配制
悬液浓度(%)压实红细胞(滴)生理盐水(滴)
2 1 (40)
4 1 (20)
3-5 1 (16-26)
5 1 (16)
10 1 (8)
6.质量控制
配制A型和B型5%试剂红细胞悬液时需随机选用经血液中心鉴定血型的3个以上健康成人同型标准红细胞,无溶血及脂血。

配制前需按[ABO 血型手工鉴定]进行正反定型。

离心时严格按照转速要求,吹散管底红细胞时动作需轻柔,防止溶血。

试管和滴管必须清洁干燥,防止溶血。

6.4 A型和B型5%试剂红细胞悬液使用前需按[ABO血型手工鉴定]进行正定型。

7 红细胞悬液的保存
配制好的5%的试剂红细胞悬液应在试管上注明红细胞血型及配制时间,并在[配制5%试剂红细胞悬液记录表]中按要求记录,加盖后2-8℃避光保存,有效期3天。

用于血型鉴定的受检者3-5%红细胞悬液可不保存。

抗A和抗B血型定型试剂效价测定及稳定性和亲和力评价试验所需红细胞悬液需现用现配,使用后勿需保存。

8 参考文献
叶应妩,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司. 南京.第三版.
附表:
文件修改记录
配制5%试剂红细胞悬液记录表。

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