药学基础实验-细胞和免疫学技术实验部分思考题
医学免疫学课后思考题
医学免疫学课后习题1、简述中枢免疫器官和外周免疫器官的组成和功能(1)中枢免疫器官:骨髓和胸腺骨髓的功能:髓样祖细胞→粒细胞、单核、DC、①血细胞和免疫细胞发生的产所:骨髓多能造血干细胞→红细胞和血小板淋巴样祖细胞→B、T、NK细胞②B细胞和NK分化发育的产所③再次体液免疫应答发生的主要产所:抗原再次刺激记忆B细胞(在外周)→活化B细胞随血液或淋巴返回骨髓→B细胞在骨髓分化为浆细胞→产生大量IgG,释放入血。
(注:外周免疫器官如脾脏和淋巴结也是再次应答产所,但其产生抗体速度快而持续时间短,不是血清抗原主要来源——主要来自骨髓。
)胸腺的功能:①T细胞分化成熟的产所:经过阳性选择获得MHC限制性、经过阴性选择获得自身耐受性②免疫调节:胸腺基质细胞产生多种细胞因子和胸腺肽类分子,促进胸腺和外周免疫器官的发育,促进免疫细胞(特别是T细胞)的发育。
③自身耐受的建立与维持:阳性选择后的T细胞的TCR若与胸腺基质细胞表面的自身pMHC 高亲和力则被消除。
(2)外周免疫器官:淋巴结、脾、肠粘膜相关淋巴结淋巴结、脾和肠粘膜相关淋巴结的功能淋巴结:T细胞和B细胞定居的主要产所(T 75%,B25%)初次免疫应答发生产所过滤作用——有利于巨噬细胞清除抗原参与淋巴细胞再循环:淋巴结深皮质区的HEV脾脏(胚胎时期造血器官、人体最大外周免疫器官):T细胞和B细胞定居的主要产所(T 60%,B 40%)初次免疫应答发生产所过滤作用——有利于巨噬细胞清除抗原合成某些生物活性物质,如补体MALT :参与粘膜局部免疫应答其中的B-1细胞产生分泌IgA,抵御病原微生物。
2、淋巴细胞再循环?其生物学意义?淋巴细胞再循环:淋巴细胞在血液、淋巴液、淋巴器官或组织间反复循环的过程。
生物意义:(1)使体内淋巴细胞在外周免疫器官和组织的分布更合理,有助于增强整个机体的免疫功能;(2)增强免疫细胞与抗原及抗原提呈细胞接触机会,有利于适应性免疫的产生;(3)使机体所有免疫器官和组织联系成为一个有机整体,并将免疫信息传递给全身各处的淋巴细胞和其他免疫细胞,有利于动员各种免疫细胞和效应细胞迁移至病原体、肿瘤或其他抗原性异物所在部位,从而发挥免疫效应。
免疫学思考题
免疫学思考题第二章免疫球蛋白1. Ig的基本结构,功能和水解片段答:组成:由一对较长的和一对较短的多肽链组成长链。
重链(Heavy Chain,H 链),450-550 aa,55-57 KD;短链:轻链(Light Chain, L链),214 aa,24 KD。
二硫键:H链和L链之间,两条H链之间,由二硫键连接,呈Y型。
命名:H链:分五类δ、μ、γ、ε、α链,IgD、IgM、IgG、IgE、IgA ; L链:分两型κ型和λ型。
分区:1)可变区(Variable region,V区)近N端:V区= 1/2 L链+ 1/4(1/5H)链;2)恒定区(Constant region, C区)近C端:C区= 1/2 L链+ 3/4(4/5)H链;3)铰链区功能:IgV区的功能:1.特异性识别、结合抗原;2.免疫调节;3.超抗体活性IgC区的功能:1.激活补体 IgM,IgG1,IgG2,IgG3-------经典途径;凝聚的IgA,IgG4,IgE --------旁路途径;2.结合Fc受体 1)介导I型超敏反应;2)介导调理作用,增强吞噬细胞的活性;3)ADCC作用,发挥岁靶细胞直接杀伤作用;4)胞饮作用。
3.通过胎盘IgG:唯一通过胎盘的免疫球蛋白。
水解片段:IgG 木瓜蛋白酶 2Fab段 + Fc段(抗原结合片段)(可结晶片段)IgG 胃蛋白酶 F(ab’)2段+ pFc’段(抗原结合片段)碎片意义:F(ab’)2段保持了与抗原结合的生物学活性,又减少了Fc段的生物学活性。
可应用于生物制品研究,如精致抗毒素等。
2. Ig多样性形成的机制答:(1)组合造成的多样性;(2)连接造成的多样性;(3)体细胞高频突变造成的多样性。
3.小分子抗体的特点答:1.仅含V区结构,免疫原性较弱。
2.分子量小,易通过血管壁,可有效克服肿瘤灶组织对抗体的生理阻抗。
3.无Fc段,不与非靶细胞的FcR结合,易达肿瘤病灶,适合临床诊断,肿瘤的导向治疗。
医学免疫学复习思考题
免疫学复习题第一部分选择题(选择一个最佳答案)1.免疫的概念是()A.机体对病原微生物的防御功能 B.机体识别和排除抗原性异物的功能C.机体抗感染的过程 D.机体清除损伤或衰老细胞的功能E.机体清除突变细胞的功能2.抗原特异性决定于()A.异物性 B.分子量 C.化学组成 D.抗原表位 E.分子结构3.关于补体系统的生物学活性哪点错误()A.溶菌和细胞溶解 B.调理吞噬 C.免疫粘附 D.炎症介质 E.结合特异性抗原4.小鼠新生期摘除胸腺()A.体液免疫功能正常B.细胞免疫功能正常C.体液免疫功能正常,细胞免疫功能受损D.细胞免疫功能正常,体液免疫功能受损E.体液与细胞免疫功能均受损5.关于抗体产生的规律正确的是()A.初次应答:抗体产生快 B.初次应答:抗体含量高C.再次应答:抗体以IgG为主 D.再次应答:抗体以IgM为主E.初次应答:抗体维持时间长6.交叉反应的产生是由于()A.抗原的分子量一致 B.抗原来源同一个体或种系C.存在共同抗原 D.均是蛋白质成分E.均是多糖成分7.TD抗原免疫应答特点()A.只能引起体液免疫 B.只能引起细胞免疫C.无免疫记忆 D.只能诱导产生IgM类抗体E.可诱导产生免疫记忆8.不同种属间的共同抗原称为()A.异种抗原 B.异嗜性抗原 C.同种异型抗原 D.自身抗原 E.移植抗原9.T细胞分化成熟的场所()A.淋巴结 B.脾脏 C.骨髓 D.胸腺 E.法氏囊10.T细胞抗原受体是()A.PHA受体 B.ConA受体 C.TCR D.SmIg E.Fc受体11.引起同种异体移植排斥反应的主要抗原是()A.异嗜性抗原 B.人类白细胞抗原(HLA)C.异种抗原 D.ABO血型抗原E.Rh血型抗原12.T细胞的表面标志不包括()A.TCR B.mIg C.CD2 D.CD3 E.CD4 13.B7(CD80)分子的受体是()A.CD2 B.CD3 C.CD4 D.CD8 E.CD28 14.具有特异性杀伤靶细胞功能的细胞()A.NK细胞 B.Mφ细胞 C.中性粒细胞 D.CD8+ Tc细胞 E.CD4+ Th细胞15.NK细胞杀靶细胞机制不包括())A.ADCC作用 B.杀伤作用可依赖抗体C.杀伤作用依赖补体 D.非特异性杀伤E.IL-2可增强其杀伤活性16.巨噬细胞功能不包括()A.非特异性吞噬 B.呈递抗原C.特异性识别抗原 D.产生IL-1E.免疫调节17.抗原呈递细胞不包括()A.辅助性T细胞 B.巨噬细胞C.树突状细胞 D.B细胞E.郎罕氏细胞18.抗原呈递细胞不包括()A.辅助性T细胞 B.巨噬细胞 C.树突状细胞 D.B细胞 E.郎罕氏细胞19.抗体与抗原结合的部位是()A.VH和VL B.CH1 C.CH2 D.CL E.CH320.机体受到抗原刺激后最先出现的抗体类别()A.IgG B.IgM C.IgA D.IgE E.IgD21.血清中含量最多的Ig是()A.IgG B.IgM C.IgA D.IgE E.IgD22.粘膜局部抗感染的主要抗体是()A.IgG B.IgM C.SigA D.IgE E.IgD23.抗体的独特型位于Ig分子的()A.VH/CH B.VH/VL C.CH/CL D.CH/VL E.VL/CL24.关于人工制备的单克隆抗体哪点错误()A.由单一B细胞克隆产生 B.由B淋巴细胞杂交瘤产生C.分子结构单一 D.能识别多种表位E.重链、轻链均相同25.抗体的生物学活性不包括()A.与相应抗原特异性结合 B.激活补体C.介导迟发型超敏反应 D.介导ADCCE.调理吞噬26.具有过敏毒素作用的补体成份()A.C3b B.C4b C.C3a D.C2b E.C1q27.下列疾病不属于Ⅰ型超敏反应的是()A.初次注射血清病B.支气管哮喘C.过敏性鼻炎D.荨麻疹E.青霉素过敏性休克28.具有免疫粘附作用的补体成份()A.C3b、C4b B.C3a C.C5a D.C4a E.C2a29.MHC限制性表现在()A.NK细胞的杀伤作用 B.ADCC效应C.补体依赖细胞毒作用 D.T细胞与其它细胞相互作用E.LAK的杀伤作用30.HLA配型可采用()A.直接凝集反应 B.间接凝集反应C.微量补体依赖细胞毒试验 D.沉淀反应 E.中和反应31.免疫应答过程不包括()A.识别抗原 B.T、B增殖、分化为效应细胞C.T细胞在胸腺内成熟 D.抗体参与 E.细胞因子参与32.参与体液免疫应答的细胞()A.Tc细胞 B.Tc与B细胞 C.Tc与Mφ细胞 D.Th、Mφ、B细胞 E.Th与Tc 33.免疫耐受是指()A.对所有抗原不应答 B.对外来抗原不应答C.对自身抗原不应答 D.接触某抗原后的特异性不应答E.先天性免疫缺陷34.细胞免疫现象应除外()A.抗胞内寄生菌感染 B.抗肿瘤C.免疫复合物病 D.同种移植排斥E.迟发型超敏反应35.Ⅳ型超敏反应机制除外()A.致敏T细胞介导 B.巨噬细胞浸润C.细胞变性坏死 D.IgG抗体参与 E.淋巴细胞浸润36.T细胞抗原受体是()A.PHA受体 B.ConA受体 C.TCR D.SmIg E.Fc受体37.参与Ⅲ型超敏反应的物质除外()A.IgG、IgM B.补体 C.IgE D.中性粒细胞 E.抗原抗体复合物38.Ⅱ型超敏反应机制除外()A.巨噬细胞参与 B.有致敏T细胞参与C.NK细胞参与 D.补体参与E.IgG、IgM参与39.PHA能引起何种细胞分裂()A.Mφ细胞 B.T细胞 C.B细胞 D.浆细胞 E.NK细胞40. TD抗原免疫应答特点()A.只能引起体液免疫 B.只能引起细胞免疫C.无免疫记忆 D.只能产生IgM类抗体E.可诱导产生免疫记忆41. 在粘膜局部发挥抗感染作用的Ig 是()A.IgG B.IgA C.IgM D.SigA E.IgE 42. 独特型存在的部位是()A.VH和VL B.CH1 C.CH2 D.CL E.CH343.于()A.抗原的分子量一致 B.抗原来源同一个体或种系C.存在共同抗原 D.均是蛋白质成分E.均是多糖成分44.人类中枢免疫器官是()A.脾 B.骨髓与胸腺 C.淋巴结 D.扁桃体 E.阑尾45.Ig的C区不具有的功能是()A.结合补体 B.结合抗原 C.结合细胞 D.同种型 E.通过胎盘46.参与Ⅰ型变态反应的抗体是()A.IgEB.IgGC.IgMD.IgDE.IgA 47.具有特异性杀伤靶细胞功能的细胞()A.NK细胞 B.Mφ细胞 C.中性粒细胞 D.CD8+ Tc细胞 E.CD4+ Th细胞48.巨噬细胞功能不包括()A.非特异性吞噬 B.呈递抗原 C.特异性识别抗原 D.产生IL-1 E.免疫调节第二部分名词解释1.DC 2.自身免疫 3.单克隆抗体 4.细胞因子5.人工被动免疫 6.NK细胞 7.人工自动免疫 8.抗原9.独特型10.抗体11.抗原表位12.基因工程抗体13.免疫耐受 14.白细胞分化抗原 15.粘附分子 16.适应性免疫17. MHC 18.HIV 19.ADCC 20.LAK21.HLA 22.AIDS 23.APC 24.GVHR 25.HVGR 26.ELISA 27.IFN 28.TNF 28.IL-2 30.SCID 31.TI-Ag 32.TD-Ag 33.BCR 34.TCR第三部分问答题1、简述同种异型抗原的种类及意义。
免疫学复习思考题 原题
免疫学复习思考题一、名词概念免疫原性、反应原性抗原抗体完全抗原半抗原抗原表位抗原决定簇被动免疫主动免疫被动免疫母源抗体单克隆抗体多克隆抗体APC ADCC作用调理作用二、问答题1、免疫的概念、特点及功能是什么?2、免疫功能低下、过强、异常会发生那些疾病?3、构成抗原的条件是什么?4、如何理解共同抗原和交叉反应?5、抗体与免疫球蛋白有何区别?6、免疫球蛋白的基本结构。
7、五类免疫球蛋白的特性与功能是什么?8、抗体的功能有哪些?9、什么是多xx抗体和xx抗体?10、什么是免疫系统?11、哺乳动物、禽类免疫器官的组成。
12、T、B细胞的来源与分化。
13、细胞因子的概念及生物学活性。
14、细胞因子的种类有哪些?15、干扰素概念与作用。
16、免疫应答的概念及基本过程。
17、细胞免疫的构成因素及作用。
18、体液免疫的作用。
19、非特异性免疫的概念、特点及构成因素20、机体如何抵抗病毒感染的?21、被动免疫、主动免疫的概念、特点及作用。
22、引起免疫失败的原因有哪些?23、如何制备多xx抗体?24、如何制备xx抗体?25、xx抗体技术的原理是什么?三、单项选择题1、关于免疫球蛋白与抗体的关系,以下哪一种说法是正确的?()A.免疫球蛋白就是抗体B.抗体不等于免疫球蛋白C.抗体就是免疫球蛋白,而免疫球蛋白也就是抗体D.所有抗体都是免疫球蛋白,但免疫球蛋白不一定都是抗体E.免疫球蛋白与抗体无关2、免疫球蛋白的基本结构是由()A. 2条多肽链组成B. 4条多肽链组成C.由铰链区连接1条H链和L链D.二硫键相连的1条H链和1条L链组成E.二硫键相连的2条H链和2条L链组成3、用木瓜蛋白酶处理IgG后,能分解成为(A. 2个Fab片段和1个Fc片段B. 2条H链和2条L链C.三个大小不等的片段D. 2个F(ab’)2片段和1个Fcʹ片段E. 2个Fab片段和1个Fcʹ片段4、抗体与抗原结合的部位是()A. VL和VH区B. CH1区C.铰链区D. CH2区E. CH3区5、免疫球蛋白超变区的位置在()A. Fab片段B. Fc片段C. VL区D. VL和VH区E. CL和CH区)6、五种免疫球蛋白的划分是根据()A. H链和L链均不同B. V区不同C. L链不同D. H链不同E.连接H链的二硫键位置和数目不同7、ABO血型抗体属于()A.免疫抗体B.异种抗体C.自身抗体D.天然抗体E.不完全抗体8、动物机体的血清中含量最高,且持续时间最长的抗体是(A. IgMB. IgGC. IgAD. IgDE. IgE9、分泌型IgA是()A.由J链连接的五聚体B.由淋巴结中的浆细胞合成和分泌C.主要存在于血清中D.参与粘膜免疫的主要抗体E.一种高效能的抗体10、能在HAT选择培养基中长期生长的细胞是()A.小鼠骨髓瘤细胞B.小鼠腹腔巨噬细胞C.骨髓瘤细胞与B细胞的融合细胞D.小鼠脾细胞E.两个融合的骨髓瘤细胞11、关于脾脏的叙述下列哪一项是错误的:())A.贮存血液器官B.淋巴细胞定居场所C.抗原刺激产生抗体的场所D.中枢免疫器官E.是合成吞噬细胞增强激素的主要场所12、实验动物新生期切除胸腺后:()A.细胞免疫功能正常,体液免疫功能受损B.细胞免疫功能受损,体液免疫功能正常C.细胞免疫功能缺乏,体液免疫功能受损D.细胞免疫功能及体液免疫功能均正常E.细胞免疫功能及体液免疫功能均丧失13、B细胞识别特异性抗原,因其表面有:()A. Fc受体B. C3受体C. TCRD. mIg受体14、关于免疫细胞,错误的叙述是:()A. B淋巴细胞具有抗原递呈功能B. TH细胞具有免疫调节功能C.单核吞噬细胞具有吞噬杀菌和抗原递呈功能D.树突状细胞具有吞噬杀菌和抗原递呈功能15、具有抗病毒作用的细胞因子是:()A. IL-2B. IFNC. CSFD. GF16、即属于中枢免疫器官,又属于外周免疫器官的是:(A.骨髓B.胸腺C.淋巴结D.脾脏)E.xx17、有杀伤靶细胞作用的T细胞亚群是:()A.诱导性T细胞B.抑制性T细胞C.辅助性T细胞D.细胞毒性T细胞E.迟发型超敏反应性T细胞四、判断题1、所有种类免疫球蛋白的单体分子结构都是相似的()2、所有的免疫球蛋白都是由单体分子组成的()3、抗体分子的补体结合位点在CH1区()4、IgM和IgA的重链有5个功能区()5、巨噬细胞、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞等表面有IgG的Fc受体(6、分泌型IgA是由J链和分泌成分连接两个Ig单体分子而形成的(7、动物机体初次接触抗原时最先产生的抗体是IgM()8、单克隆抗体是由一个B细胞产生的针对单一抗原决定簇的抗体(9、免疫球蛋白即具有抗体活性,又具有抗原活性()10、五类免疫球蛋白都可通过胎盘到达胎儿体内()11、免疫系统由免疫器官、免疫细胞和细胞因子组成()12、中枢免疫器官是免疫细胞产生和成熟的场所()13、切除仔猪的外周免疫器官影响机体的免疫功能()14、骨髓是所有动物B细胞成熟的场所()15、脾脏可以过滤清除淋巴液和血液中的病原体()16、NK细胞可以特异性杀伤靶细胞()17、B细胞的Fc受体是B细胞成熟的表面标志之一()18、嗜中性粒细胞的特点是有高度移动性和吞噬功能()19、细菌是最好的干扰素诱生剂()20、细胞因子的主要生物学活性是免疫调节作用())))。
免疫学思考题汇总
免疫学思考题汇总第一章:1.免疫系统如何区分“自己”和“非己”?2.免疫系统的三大功能是什么?异常时有何表现?3.简述免疫应答的基本类型及其特点。
第二章:免疫系统的组成免疫器官的组成及其功能淋巴细胞再循环的概念和意义第三章:抗原的概念、特性决定免疫原性的因素有哪些?表位交叉反应的机理异嗜性抗原佐剂、超抗原、丝裂原第四章:简述免疫球蛋白的结构简述免疫球蛋白的功能各类免疫球蛋白的生物学特性及功能第五章:补体的激活有哪些途径?各有何主要特点?补体有何生物学功能?第六章:结合细胞因子及其共同特点,简述你认为最熟悉的一类细胞因子的来源、作用特点。
细胞因子的分类。
细胞因子的功能。
第七章:白细胞分化抗原的概念粘附分子的概念第八章:MHC概念MHC多态性试比较MHC -Ⅰ类、MHC -Ⅱ类分子MHC分子的功能第九章:B细胞的胚系基因结构及基因重排机制。
b细胞主要表面分子及其功能关系b细胞的不同分类标准和该分类下b细胞的亚群组成第十章:T细胞有哪些重要的表面分子,它们的作用是什么?CTL的杀伤机制有哪些?第十一章:MPS的生物学功能。
成熟与未成熟DC的生物学特征及DC 的生物学功能。
试述胞质溶胶抗原递呈途径的过程。
试述溶酶体抗原递呈途径的过程。
第十二、十三章:体液免疫初次应答再次应答有何特点?b细胞对TD\TI抗原的免疫应答有何异同?Th细胞如何辅助B细胞的免疫应答?试述B细胞在生发中心的发育和成熟。
第十四章:简述模式识别受体及其识别的配体试述巨噬细胞表面受体、分子及其介导产生的生物学作用试述NK细胞不能杀伤正常组织细胞而能杀伤病毒感染或肿瘤靶细胞的作用机制。
试述中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、B1细胞的主要特征和生物学作用。
试述固有免疫应答的作用时相和主要作用特点。
第十五章:黏膜免疫系统的组成结构和特征是什么?肠道免疫系统为什么对我们每天摄入的大量食物抗原不产生免疫反应?黏膜免疫系统的耐受和稳态是如何维持的?黏膜免疫系统是如何对全身免疫系统产生影响的?第十六章:简述免疫耐受的特点及生物学作用免疫耐受形成的机制有哪些?简述建立和打破免疫耐受常用的策略第十七章:1.简述固有免疫有哪些特点?固有免疫在适应性免疫应答过程中发挥哪些重要作用。
医学实验复习思考题201306
医学实验技术复习思考题1.简述细胞培养的定义是什么?请叙述成功的细胞培养技术的关键和要素。
答:从生物体内取出组织或细胞,在体外(in vitro)模拟体内生理环境,在无菌、适当温度和一定营养条件下,对这些组织或细胞进行孵育培养,使之保持一定的结构和功能,以便于我们观察研究,这种方法就是细胞培养(cell culture)。
有时细胞培养也称为组织培养(tissue culture),二者可作为同义语使用。
1)要保证无菌,包括无菌操作,无菌环境。
枪头等要及时灭菌,培养瓶,移液管最好使用一次性的,如果你的细胞比较不好养,最好使用一次性的。
2)要传代的时候细胞传代的数量不能太少,否则细胞不容易养活。
另外,传代不要过度频繁,即使是肿瘤细胞。
3)不要经常用胰酶消化细胞,且消化时间不要过长。
4)根据细胞生长情况,即使更换新鲜培养基。
5)血清一般要冻存在-20摄氏度,用的时候在4摄氏度融化,不要反复冻存,最好用10ml的离心管分装使用。
2.细菌的遗传物质有哪些?简述其特性及其临床应用。
答:染色体:细菌染色体为一环状双股DNA链,呈超螺旋形式缠绕成团,构成核质,内含细菌主要的遗传信息。
原核细胞染色体存在于细胞质中,以单倍体或环状形式存在;一定比例的甲基化碱基,不受自身限制性内切酶的作用;基因结构呈连续性,无内含子,转录后的RNA不需加工剪切即为成熟的RNA。
遗传物质的复制、转录和翻译质粒:自我复制-可与染色体同步/不同步;可转移性-可以各种方式转移到其它菌;可自行丢失及消除-不影响细菌存活;决定细菌某些生物学性状;相容性与不相容性-几种质粒可存在于同一菌体内,称质粒相容性。
而两种结构相似密切相关的质粒不能稳定共存于同一宿主菌称质粒不相容性。
质粒携带有遗传信息,控制某些特定的遗传性状,可独立复制,与细菌的遗传变异有关。
转座因子:是一类在细菌染色体、质粒或噬菌体DNA分子内或两个DNA分子之间以低频率移动的DNA片段。
免疫学思考题
免疫学复习思考题、名词概念免疫原性:指抗原能刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞的特性。
反应原性:抗原与相应抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合反应的特性。
抗原(Ag):凡是能刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞,并能与之结合引起特异性免疫反应的物质,称为抗原。
抗体(Ab):抗体是由抗原致敏的B细胞分化为浆细胞产生的能与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。
完全抗原:具有免疫原性和反应原性的物质称为完全抗原。
(免疫原)半抗原(不完全抗原):只有反应原性而无免疫原性的物质称为半抗原。
抗原结合价:每个抗原分子上抗原决定簇的数目称为抗原结合价。
抗原决定簇(抗原表位):抗原分子表面具有特殊立体构型和免疫活性的化学基团称为抗原决定簇。
被动免疫:人或动物机体依靠输入其他机体产生的抗体或细胞因子而产生的免疫力称为被动免疫。
主动免疫:人或动物受到某种病原体刺激后,自身产生针对该抗原的免疫力,称为主动免疫母源抗体:胎儿、幼龄动物从母体获得的抗体称为母源抗体。
单克隆抗体(McAb): 是指由一个B细胞分化增殖的子代细胞(浆细胞)产生的针对单一抗原决定簇的抗体。
多克隆抗体(PcAb): 由多种抗原决定簇刺激多种细胞克隆合成分泌的各种不同抗体,称为多克隆抗体APC(抗原提呈细胞):是指能摄取、加工和处理抗原,并将处理后的抗原肽提呈给淋巴细胞而使淋巴细胞活化的一类免疫细胞。
ADC(作用:抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用调理作用:抗体-抗原或抗原-抗体-补体复合物与吞噬细胞结合后,能够增强吞噬细胞的吞噬、杀伤功能, 抗体的这种作用称为免疫调理作用。
二、问答题1、免疫的概念、特点及功能是什么?概念:免疫是指动物(或人)机体识别自己和非自己,并清除非己大分子物质,从而保持机体内、外环境稳定的一种生理学反应。
免疫的基本特点:识别自己与非自己、特异性、免疫记忆免疫的基本功能:免疫防御、免疫稳定、免疫监视2、免疫功能低下、过强、异常会发生那些疾病?功生理表现(有利)病理表现(有害)能名3.构成抗原的条件是什么?①异源性(异物性)②大分子物质③分子结构复杂④物理性状⑤适当的进入机体途径4如何理解共同抗原和交叉反应?答:带有共同抗原决定簇的抗原叫共同抗原。
免疫学思考题
免疫学思考题思考题1.回顾免疫学的发展与免疫概念的演进,你能否根据自身体会,给出一个更恰当的免疫定义?2.构成机体免疫力的因素主要有哪些?是否能够为其勾勒出一个清晰的轮廓?3.你对免疫“既是阻止疾病形成的因素,也是疾病形成的原因”,这一论述持何种看法,并请展开论述。
1、什么是抗体?从抗体的结构特点,阐述抗体如何发挥特异性免疫学防御功能?2、当机体发生细菌感染,可以通过哪些途径激活补体系统,并且补体系统如何发挥对感染细菌的清除作用?3、从MHC分子的结构特点,阐明其如何发挥抗原提呈功能,如何参与T细胞对抗原的识别及活化过程?1.B细胞识别表位和T细胞识别表位有何不同?它们与半抗原、完全抗原、TD-Ag、TI-Ag有何联系?2.交叉反应现象是对抗原抗体特异性结合的否定还是肯定?为什么?1.T、B淋巴细胞及抗原提呈细胞表面膜分子都赋予了这些细胞的哪些能力?2.参与固有免疫的细胞有哪些类型?有何共同特点?3.同样是T、B细胞,为什么要被归入固有免疫细胞与适应性免疫细胞两个群体?这样的归类有何意义?4.你认为T细胞的异质性主要体现在哪些方面?其异质性的存在具有哪些生物学意义?1.试从两类免疫应答的特点与构成上探讨其互补性以及形成进化的意义。
2.试比较固有免疫细胞激活与T、B细胞激活间的异同。
3.与T、B细胞介导的应答过程有何区别?这种区别之意义何在?4.出现临床症状的免疫损伤有哪些类型?与免疫应答的效应机制有何联系?1.主动免疫与被动免疫的分界点在何处?有没有非人工的主动免疫与被动免疫?试举例。
2.比较一下你和你的长辈们都接种过哪些疫苗,看看建国以来我国的计划免疫都经历了哪些变化。
你知道这些疫苗的种类吗?3.举身边之例,说明你了解的免疫治疗。
4.在所知的临床实验室诊断中,例举数种应用了免疫学原理的诊断方法。
选择题一、选择题的类型与示例1.“疾病是变异条件下的生命”一语出自A、BurnetB、Virchow BehringC、JennerD、BehringE、Leeuwenhoek 2.选出一组正确的组合A、Pasteur—牛痘、Ehrlich—侧链学说、Burnet—克隆选择学说B、Jenner—免疫网络学说、Burnet—克隆选择学说、von Behring—抗血清治疗C、von Behring—抗血清治疗、Ehrlich—侧链学说、Jerne—克隆选择学说D、Doherty—MHC限制性、Jerne—免疫网络学说、von Behring—抗血清治疗E、Jenner—牛痘、Burnet—免疫网络学说、Jerne—克隆选择学说3.参与ADCC效应的主要物质是A、NK细胞和补体B、B细胞和抗体C、NK细胞和抗体D、T细胞和补体E、T细胞和抗体4.抗体与抗原结合的部位是A、重链的C区B、重链和轻链的V区C、重链的V区D、轻链的V区E、重链和轻链的C区5.正常人血清中,可通过胎盘屏障的免疫球蛋白是A、IgMB、IgGC、IgAD、IgEE、IgD6.补体活化经典途径中C3转化酶的组成是A、C3bB、C4b2bC、C5bD、C3bBbE、C3bnBb7.下列哪一种分子不是由MHC基因编码A、HLA-I类分子B、C4C、B因子D、β2mE、HLA-Ⅱ类分子8、B细胞抗原识别受体是A、CD79aB、CD79bC、CD79aCD79bD、CD4E、SmIg9.下列哪一组合不存在关联A、CD3—TCRB、MHC I类分子—TCRC、MHC I类分子—CD4D、CD79a/b—SmIgE、CD28—CD8010.参与免疫应答的细胞都带有A、MHC分子B、SmIgC、丝裂原结合蛋白D、SRBC受体E、抗原受体(该选哪个呢,是E么,感觉有些难)能直接特异性杀伤靶细胞的细胞是A、NK细胞B、B细胞C、巨噬细胞D、中性粒细胞E、Tc细胞(可否改为此题)11.对肥大细胞和嗜碱性粒细胞有高亲和力的抗体是A、IgAB、IgDC、IgED、IgGE、IgM12.具有MHC限制性的是A、吞噬细胞吞噬抗原B、NK细胞杀伤病毒感染细胞C、TCRγδT细胞识别抗原D、CD8+细胞杀伤肿瘤细胞E、肥大细胞脱壳粒13.半抗原是A、只有免疫原性的物质B、只有免疫反应性的物质C、有免疫原性和免疫反应的物质D、被T淋巴细胞识别的物质E、不能与抗体结合的物质14.Th细胞对B细胞活化的辅助作用A、不需要细胞的直接接触B、不需要细胞因子的作用C、不需要共刺激分子的相互作用D、不需要CD4分子的参与E、不需要CD8分子的参与15.TI与TD抗原的区别点在于A、是否引起细胞免疫、是否产生IgM、是否诱导不同的T细胞亚群B、是否产生IgM、是否引起免疫记忆、是否诱导不同的B细胞亚群C、是否需要T细胞的辅助、是否引起细胞免疫、是否产生除IgM 之外的抗体D、是否需要T细胞的辅助、是否产生IgM、是否引起免疫记忆E、是否引起免疫记忆、是否产生除IgM之外的抗体、是否诱导不同的T细胞亚群BCR可选择性结合A、MHC-肽复合物B、MHC分子C、未经APC加工处理的抗原D、经APC加工处理的抗原E、CD79aCD79b16.B细胞作为APC,是因为A、能形成大量IL-2受体B、可表达MHCⅡ类分子C、有一定的吞噬能力D、SmIg有特异性结合抗原的能力E、其数量多于巨噬细胞1、牛痘接种的发明者是A、JerneB、BurnetC、JennerD、BehringE、Pauling2、半抗原是A、只有免疫原性的物质B、只有免疫反应性的物质C、有免疫原性和免疫反应的物质D、被T淋巴细胞识别的物质E、不能与抗体结合的物质3、免疫监视功能是A、抵抗病原微生物感染的能力B、清除自身衰老细胞的能力C、识别、排斥异物的能力D、清除突变细胞的能力E、调节免疫应答的能力4、先天性免疫的特点是A、习得性B、特异性C、效应递增性D、非特异性E、非遗传性5、最大的外周免疫器官是A、骨髓B、胸腺D、淋巴结E、脾脏6、T细胞分化成熟的场所是A、骨髓B、胸腺C、腔上囊D、淋巴结E、脾脏7、合成和分泌抗体的细胞是A、T细胞B、B细胞C、浆细胞D、巨噬细胞E、NK细胞8、属于中枢免疫器官的是A、淋巴结B、骨髓C、脾脏D、黏膜相关淋巴组织E、扁桃体9、激活补体能力最强的免疫球蛋白是A、IgGB、IgAC、IgDD、IgEE、IgM10、分子量最大的免疫球蛋白是A、IgGB、IgAC、IgDD、IgEE、IgM11、IgM与抗原的实际结合价是A、一价B、二价C、三价D、五价12、sIgA不具有的特性是A、黏膜免疫中起重要作用B、有分泌片C、有J链D、均为二聚体E、均为单体13、抗原不具有的基本特性是A、免疫原性B、免疫反应性C、异物性D、小分子物质E、抗原决定簇14、抗体与抗原结合的部位是A、重链的C区B、轻链的V区C、重链的V区D、重链和轻链的V区E、重链和轻链的C区15、免疫球蛋白的Fab段的效应是A、通过胎盘B、激活补体C、结合抗原D、与细胞结合E、引起过敏反应16、补体结合的位置是 IgG 的A、VHB、CH1C、CH2D、CH3E、CL17、具有4个CH功能区的抗体是A、IgD、IgMB、IgA、IgMC、IgM、IgED、IgA、IgEE、IgG、IgD18、血清中补体含量最高的是A、C4B、C3C、C8D、C6E、C119、补体膜攻膜复合物的组成是A、C423B、C3bBbC、C56789D、C421E、C4b2b20、下述哪一项关于TCR的描述是正确的A、只能出现在CD4+细胞表面B、由α、β、γ、δ等四条肽链组成C、识别由CD8分子与抗原肽形成的复合物D、与天然抗原的决定簇形成空间互补E、是APC与T细胞之间相互接触的一个环节21、经典途径中C3转化酶的组成是A、C3bB、C4b2bC、C5bD、C3bBbE、C3bnBb22、下列细胞哪一个应不属于APCA、辅助性T细胞B、巨噬细胞C、朗罕氏细胞D、B细胞E、树突状细胞23、抗原特异性取决于抗原分子的A、物理性状B、分子量大小C、异物性D、结构的复杂性E、分子中的特殊化学基团24、胸腺依赖性抗原是指A、蛋白质抗原B、相应抗体在胸腺中产生的抗原C、仅刺激T细胞的抗原D、只能诱导细胞免疫的抗原E、刺激B细胞产生抗体需要T细胞辅助的抗原25、下列哪一过程不能列入免疫应答活动A、APC对抗原的处理、递呈B、T细胞对抗原的特异性识别C、T细胞由双阳性细胞转为单阳性细胞D、B细胞活化、增殖形成浆细胞E、Tc对靶细胞的特异性杀伤26、1分子IgG可被木瓜蛋白酶水解为A、1Fab+2FcB、1Fc+2FabC、1F(ab,)2+2FcD、1F(ab,)2+pFc,E、1F(ab,)2+1Fc27、补体经典激活途径激活的顺序是A、C123456789B、C132456789C、C142356789D、C124356789E、C12354678928、哪个补体组分能刺激肥大细胞释放组胺A、C2bB、C3bC、C5bD、C4bE、C5a29、介导I型超敏反应的免疫球蛋白类型是A、IgGB、IgMC、IgAD、IgDE、IgE30、能通过胎盘的免疫球蛋白是A、IgGC、IgAD、IgDE、IgE31、能直接特异性杀伤靶细胞的细胞是A、NK细胞B、B细胞C、巨噬细胞D、中性粒细胞E、Tc细胞32、在人类的哪一对染色体上编码MHCA、第17对B、第15对C、第6对D、第9对E、第20对33、哪种细胞上不出现HLA I类抗原A、T细胞B、B细胞C、巨噬细胞D、红细胞E、NK细胞34、HLA II类分子的抗原肽结合区位于A、α1和β 1B、β2mC、α1和α 2D、β1和β 2E、α1和α335、可与TCR组合,转导T细胞活化信号的分子是A、CD3C、CD11D、CD19E、CD2536、在抗原诱导的T H细胞活化过程中,下列哪些分子是必须的A、TCR—CD3B、TCR—CD3、MHC分子C、TCR—CD3、MHC分子、CD4D、TCR—CD3、MHC分子、CD4、CD28、CD80(B7)E、TCR—CD3、MHC分子、CD4、CD8、CD2837、免疫细胞的概念是A、参与免疫应答活动的细胞B、T,B淋巴细胞C、巨噬细胞D、NK细胞E、枯否细胞38、属于T细胞的表面标志是A、CD3B、CD79C、CD5D、CD18E、CD8039、辅助性T细胞一般是指A、CD4+ T细胞B、CD8+ T细胞C、CD4+ CD8+ T细胞D、CD4- CD8- T细胞E、CD3+ T细胞40、B细胞起源于A、骨髓C、脾脏D、扁桃腺E、淋巴结41、具有特征性的B细胞表面分子是A、CD80B、SmIgC、CD32D、CD86E、CD2142、BCR选择性结合A、MHC肽复合物B、MHC分子C、未经APC加工处理的抗原D、经APC加工处理的抗原E、抗原抗体复合物43、Th细胞对B细胞活化的辅助作用A、不需要细胞的直接接触B、不需要CD8分子的参与C、不需要细胞因子的作用D、不需要共刺激分子的相互作用E、不需要CD4分子的参与44、T细胞活化的第I信号来自A、CD4与MHC II分子间的相互作用B、CD8与MHC I分子间的相互作用C、IL-1与相应受体间的相互作用D、抗原肽-MHC与TCR/CD3间的相互作用E、CD80与CD28分子间的相互作用45、下列哪种情况可以满足T H细胞活化的条件A、HLA—A3+的感染细胞接触HLA—A3-的CD4+细胞B、HLA—A3+的感染细胞接触HLA—A3+的CD4+细胞C、HLA—A3+的感染细胞接触HLA—A3+的CD8+细胞D、HLA—DR4+的巨噬细胞接触HLA—DR4+的CD4+细胞E、HLA—DR4+的巨噬细胞接触HLA—DR4+的CD8+细胞46、再次应答时,抗体形成的特征是A、IgM显著增高B、IgG显著增高C、IgA显著增高D、抗体特异性改变E、抗体亲和力下降47、B细胞作为APC,是因为A、能形成大量IL-2受体B、SmIg有特异性结合抗原的能力C、有一定的吞噬能力D、其数量多于巨噬细胞E、可表达MHCⅡ类分子48、关于免疫耐受的概念正确的是A、是机体的一种病理过程B、是机体的一种特异性免疫不应答状态C、是机体的一种非特异性免疫不应答状态D、是一种只针对自身抗原产生的无应答状态E、是一种正免疫应答过49、防止Rh溶血,可通过A、给孩子输入母亲的红细胞B、用抗Rh血清给孩子被动免疫C、用过量的抗原中和母亲的抗Rh抗体D、婴儿出生后,使用类固醇制剂E、及时给母亲输入抗Rh血清50、III型超敏反应是由哪种细胞浸润为主的血管壁炎症反应A、T细胞B、肥大细胞C、中性粒细胞D、嗜碱性粒细胞E、嗜酸性粒细胞。
药用植物学观察细胞组织实验报告及思考题答案
药⽤植物学观察细胞组织实验报告及思考题答案实验⼆植物组织实验⽬的1.掌握各种组织的细胞形态特征、结构、分布特点。
2.了解不同组织的⽣理功能。
3.学习植物临时玻⽚的制作技术。
实验步骤⼀、分⽣组织(⼀)初⽣分⽣组织取洋葱根尖纵切⾯制⽚,先置于低倍镜下观察,可以看到根尖的先端⼀个帽状的结构,由许多排列疏松的细胞组织,叫根冠。
在根冠的内⽅就是根的顶端分⽣组织。
转换⾼倍镜,观察细胞形态特征:近等径,⽆细胞间隙,细胞壁薄,细胞质稠密,细胞核所占⽐例较⼤,且位于细胞中央,液泡很⼩或⽆。
⼆、基本组织(⼀)贮藏基本组织取马铃薯块茎⼀⼩块,⽤双⾯⼑⽚进⾏徒⼿切⽚,选取薄的切⽚置于载玻⽚上,制成⽔装⽚。
显微镜观察,可见贮藏细胞呈类圆形或类椭圆形,壁薄,内含⼤量的淀粉粒。
(⼆)同化基本组织将马铃薯块茎修成⼀长柱(⾼2cm,横截⾯5mm×5mm),在横截⾯处切出⼀深约5mm 的切⼝,取任⼀绿⾊的植物叶,加⼊切⼝中,⽤徒⼿切⽚法制作切⽚,选取好的切⽚,做成⽔装⽚。
观察叶⾁细胞的形态、结构特征。
(三)吸⽔基本组织取洋葱根尖的纵切⽚,观察根⽑的结构。
三、分泌组织(⼀)分泌细胞取姜根茎,徒⼿切⽚,⽤⽔装置,置显微镜下观察,可见散布着⼀些椭圆形的细胞,细胞内充满黄⾊液体,该细胞即为油细胞,黄⾊容易即为挥发油。
滴加苏丹Ⅲ试液,油液呈红⾊。
(⼆)乳汁管⽤⼑⽚切取蒲公英根纵向薄⽚于载玻⽚上,滴加20%醋酸1滴,微热后,加苏丹Ⅲ试液数滴,再微微加热,然后加盖玻⽚,在显微镜下观察,由于乳汁管内的乳汁被染成红⾊,因此可以观察乳汁管的类型和分布。
四、机械组织(⼀)厚壁组织1.纤维取⾁桂粉末少许,⽤⽔合氯醛装置,于显微镜下观察,可见有些细胞呈长梭型,两端细尖,壁厚,胞腔⼩,或看不见胞腔,这种细胞即为纤维。
⽤吸⽔纸吸出玻⽚中的⽔合氯醛液,滴加间苯三酚和浓盐酸各⼀滴,放置⽚刻,加盖玻⽚,置显微镜观察,可见纤维细胞呈红⾊(⽊质化)。
取黄柏粉末少许,⽤⽔合氯醛装置,于显微镜下观察,可见许多晶鞘纤维,注意观察其结构。
免疫学技术复习思考题及答案.doc
免疫学技术复习思考题及答案复习思考题:1.免疫细胞分离的基木原理(密度、黏附吞噬、表面标志、生长因子)应用于哪些细胞?2.细胞因子检测的三大基本方法(原理、优缺点)3.FACS法测CD分子的基本原理4.MACS法分离细胞的原理5.ELISA和ELISPOT实验原理6.T细胞增殖试验的基木原理、基本方法7.细胞凋亡的测定原理和方法8.概括免疫学技术主要内容9.单克隆抗体制备的原理和基木过程10.凝集、沉淀反应的主要方法(名称和基本原理)11.各种免疫标记技术的标记物及示踪原理12.免疫荧光技术的各种实验策略13.ELISA的基木原理利各种实验策略14.Western blot的基本原理1.E LISA技术原理和实验策略ELISA全名为酶联免疫吸附试验。
原理是将抗原或抗体包被在固相载表面,并保留其免疫活性,然后再与前标抗体(或酶标抗原)联结,并保留酮活性.洗去游高的酶标抗体(或酶标抗原),然后加入酶反应的底物,底物被酶催化变成石色产物。
反映颜色深浅与相应的抗原或抗体的量相关,据此进行定性和定量分析°主要的实验策略有:双抗体夹心法:此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原。
将待分析物的特异性抗体与固相载体连接形成固相抗体,经封闭和洗涤后加受检标本(抗原)形成固相抗体一抗原复合物,洗涤后再加前标抗体生成抗体-待测抗原-酶标记抗体的复合物,洗涤利底物显色。
根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量测定双位点一步法:在双抗夹心基础上,改为应用针对抗原分子上两个不同决定簇的两种单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体。
其优点是测定时标木可与酶标抗体同时加入进行结合反应,两种抗体互不干扰。
省时简便。
但是当待测抗原浓度过高时,可出现假阴性结果。
间接法:检测抗体最常用的方法,其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。
用已知抗原包被固相载体,加待检标木与固相抗原结合,洗涤后加酶标抗抗体与固相载体上抗原抗体复合物结合,经洗涤,底物显色,根据颜色反应的程度进行该抗体的定性或定量测定竞争法:此法可用于抗原和半抗原的定量测定,也可用于测定抗体。
免疫部分思考题整理
简述佐剂的作用机制及应用。
答:作用机制:1改变抗原的物理性状,延缓抗原在体内存留时间,从而更有效刺激抗原免疫系统。
2引发炎症反应,刺激单核-巨噬细胞系统,增强其处理抗原和呈递抗原的能力。
3刺激淋巴细胞增殖和分化,从而增强和扩大免疫应答的效应。
应用:1增强特异性免疫问答,用于预防接种及制备动物抗血清。
2作为非特异性免疫增强剂,用于抗肿瘤和抗感染的辅助治疗。
青霉素是半抗原,本身无免疫原性,为什么可以引起过敏性休克?答:只具有反应原性而没有免疫原性的物质,称为半抗原,如青霉素、磺胺等。
半抗原没有免疫原性,不会引起免疫反应。
但在某些特殊情况下,如果半抗原和大分子蛋白质结合以后,就获得了免疫原性而变成完全抗原,也就可以刺激免疫系统产生抗体和效应细胞。
在青霉素进入体内后,如果其降解产物和组织蛋白结合,就获得了免疫原性,并刺激免疫系统产生抗青霉素抗体。
当青霉素再次注射人体内时,抗青霉素抗体立即与青霉素结合,产生病理性免疫反应,出现皮疹或过敏性休克,甚至危及生命。
试述决定抗原免疫原性的因素。
答:1)抗原分子的理化性质:①化学性质:一般蛋白质抗原的免疫原性强,核酸和多糖的抗原性弱,脂质一般没有抗原性②分子量大小:一般分子量大于 10KD免疫原性较强,在一定范围内分子量越大免疫原性越强。
③结构的复杂性:苯环氨基酸能增强抗原的免疫原性。
④分子构象和易接近性:BCR易接近的抗原决定基免疫原性强⑤物理状态:一般聚合状态的蛋白质较其单体免疫原性强,颗粒性抗原强于可溶性抗原。
2)宿主方面的因素:遗传因素、年龄、性别和健 3)免疫方法:免疫抗原的剂量、途径、次数以及免疫性剂的选择。
试述Ig的基本结构。
Ig分子的基本结构是由四肽链组成的。
即由二条相同的分子量较小的肽链称为轻链和二条相同的分子量较大的肽链称为重链组成的。
轻链与重链是由二硫键连接形成一个四肽链分子称为Ig分子的单体,是构成免疫球蛋白分子的基本结构。
Ig单体中四条肽链两端游离的氨基或羧基的方向是一致的,分别命名为氨基端(N端)和羧基端(C端)。
医学免疫学思考题
1.阐述免疫球蛋白的基本机构及各个功能区的意义:功能区是不连续,由重链和轻链经链内二硫键连接而成的球状结构。
轻链:VL,CL;重链:VH,CH1,CH2,CH3,CH4.1.VL和VH是抗原结合的部位(FV区)。
2.CL和CH上具有同种异型的遗传标记。
3.IgG的CH2和IgM的CH3具有补体固有成分C1q的结合点,参与激活补体系统。
4.CH3/CH4具有结合包括单核细胞、巨噬细胞、粒细胞、B细胞、NK细胞等细胞的Fc段受体的功能。
5.IgG的CH2+CH3具有介导IgG通过胎盘的特性。
2.阐述免疫球蛋白的水解片:1.木瓜蛋白酶(Papain)(将重链于近氨基端切断)Fab段(fragmentofantigen-binding-,抗原结合片段)Fab段可以与抗原结合,具有抗体的活性。
Fc段(fragmentcrystalizable,可结晶片段)Fc段不能与抗原结合,但可执行Ig的其他生物学功能。
2.胃蛋白酶(Pepsin)(将重链于近羧基端切断)F(ab)2:可结合2个抗原表位。
pFc:无生物学活性。
3.意义:阐明Ig分子生物学作用。
2.简述五大类免疫球蛋白具有不同的理化特性和生物学功能一IgG①含量高,衰期长,唯一通过胎盘的Ab③激活补体④调理作用、ADCC;结合SPA二IgA①血清型和分泌型(二聚体)抗部部感染(sIgA)激活补体替代途径三、IgM①分子量最大②产生旱四、IgD①含量低(003mg/m)②mIgD:B分化发育成熟的标志;末成熟B细胞--mIgM:成熟B细胞--mIgM和mIgD;活化B细胞和记忆B细胞--mIGD逐渐消失五,IgE①介导型起敏反应:抗寄生虫感染:③含量极低(5×10-5mg/ml)4.同种型、同种异型和独特型的概念:同一种每个个体都具有的免疫球蛋白的抗原特异性,其抗原决定簇主要存在于Ig的C区;同一种属不同个体之间免疫球蛋白也具有的差异性,主要反映在分子的CH和CL上的一个或数个氨基酸的差异。
免疫学思考题
1.免疫的概念及其三大功能2.免疫学的发展简史3.科学家在免疫学领域作出的重要贡献(二)1.中枢免疫器官组成及功能2.外周免疫器官组成与功能3.淋巴细胞归巢4.淋巴细胞再循环及生物学意义(三)1.抗原2.免疫原性3.抗原性4.抗原表位5.TD-Ag6.TI-Ag7.异嗜性抗原8.影响抗原免疫应答的因素(四)1.抗体、免疫球蛋白的概念2.Ig的结构、Ig的功能、Ig的水解片段、五类Ig的特性(五)1.补体概念2.补体三条激活途径过程及异同点比较3.补体的生物学意义(六)1.掌握:细胞因子的概念、种类和共同特征2.了解:细胞因子的生物学作用(七)1. 白细胞分化抗原、CD分子和黏附分子的概念2.黏附分子的分类(八)1.掌握经典HLA I类和II类基因的定位和结构2.掌握HLA I类和II类分子的结构、组织分布及功能特点;3.熟悉MHC概念,抗原加工提呈相关基因:PSMB基因、TAP基因、HLA-DM基因4.掌握多态性、单体型的概念5.熟悉抗原肽与MHC分子相互作用的分子基础及特点6.了解MHC的生物学功能,HLA与临床医学(九)名词解释:APC、抗原提呈1.专职APC包括哪些?试述它们的主要生物学功能。
2.试述MHC-I类分子提呈内源性抗原的简要过程。
3.试述MHC-II类分子提呈外源性抗原的简要过程。
4.试比较抗原提呈的两条途径。
1.中性粒细胞的特点2.巨噬细胞表面受体及其识别的配体3.巨噬细胞杀伤病原体的机理4.NK细胞杀伤作用的机制5.NK细胞是如何识别自己和非己的6.固有免疫分子的种类7.固有免疫应答作用的时相(十二)1.简述T细胞的阳性选择和阴性选择过程及生物学意义2.T细胞表面有哪些重要分子?其功能是什么?3.T细胞有哪些亚群?各自的功能是什么?(十三)1.简述T细胞识别抗原过程中APC与T细胞的相互作用2.简述T细胞活化的信号传导途径3.简述CTL如何发挥效应功能(十四)1.体液免疫再次应答的特点2.简述B细胞在生发中心的分化成熟过程(十六)1.免疫耐受形成的主要机制2.免疫耐受的特点及其生物学作用3.简述抗原、抗体及免疫复合物的免疫调节作用4.简述独特型网络和活化诱导的细胞死亡在特异性免疫应答中的作用 (二十一)1.同种异型移植排斥反应的本质是什么?2.防治同种异型排斥反应的措施包括哪些?(二十二)1.检测未知抗体可应用哪些免疫学方法2.试述外周血中T淋巴细胞分离方法3.简述细胞毒试验的基本原理4.治疗性细胞疫苗有哪些5.简述免疫治疗的分类及特点。
药用植物学观察植物细胞实验报告及思考题答案
1. 单纹孔 取制好的洋葱鳞叶内表皮细胞,置于高倍镜下观察,发现相邻两细胞间的壁
上,有许多极小的凹陷,即单纹孔。 2. 胞间连丝
取辣椒的表皮于载玻片上,用水装置,制成临时标本片,在显微镜下观察可 看到细胞连接处有细小连丝,即为胞间连丝。
四、植物细胞后含物
(一)淀粉粒 取马铃薯块茎一小块,用刀刮取少许混浊汁液,用水装置,制成临时标本片,
(为核质中 1 个~3 个发亮的小颗粒)。有时在撕裂表皮时,细胞已经破裂,细胞 核与细胞质流出,因此细胞中无细胞核。 4. 液泡
在细胞质中较透明的部分即液泡,幼嫩的细胞内能看到多个小液泡,成熟细 胞仅有一个大的液泡,占据了细胞的绝大部分。 (二)果肉细胞的形态与结构
用解剖针挑取成熟的番茄果肉或西瓜果肉,于载玻片中分散,制成水装片, 在显微镜下观察,可见圆形或椭圆形的细胞,并观察其细胞结构。
钙针状结晶析出。
讨论
在观察洋葱鳞叶内表皮细胞时,在高倍镜下观察到细胞壁,细胞质和细胞核。 但由于由于液泡较透明,并未观察到。
思考题
(1)为何细胞的各个部分遇碘液后会染色深浅或不染色的反应? (2)在你的周围还能看见哪些形态的植物细胞? (3)为什么说淀粉粒、草酸钙结晶在生药鉴别中具有鉴定价值? (4)结晶体除草酸钙结晶外还有哪一种?两者如何鉴别? (5)你能说出已学过的植物细胞后含物的种类吗?
置显微镜下观察。可见有许多大小不等呈卵圆形、类圆形的颗粒即淀粉粒。注意 观察单粒、复粒、半复粒的形态结构,观察淀粉粒的层纹、脐点的位置和形状。
观察后,于盖玻片的一侧滴加稀碘液 1 滴,并在盖玻片相对的一侧,用吸水
纸吸水,使稀碘液逐渐引入盖玻片内,注意观察淀粉粒颜色的变化。 (二)草酸钙结晶
免疫学各章思考题
免疫学各章思考题一1、本章所用抗原的定义与一般材料、参考书有什么不同之处?采用这种定义的意义是什么?2、试将医学上重要的抗原按几个项目列表归纳,这将有助于对这一部分作一系统复习。
3、澄清半抗原的概念,对于理解和区分它与抗原的异同及一些相关概念是有帮助的。
下面四组多种概念的组合,能否从各组中明确指出何者为正确的。
(1)a、具有特异反应性与免疫原性;b、无特异反应性与免疫原性,需与蛋白载体结合后方具有;c、只有免疫原性而无特异反应性;d、只有特异反应性而无免疫原性。
(2)a、大分子物质;b、具有免疫原性和免疫反应性;c、小分子物质,具有免疫反应性,在与蛋白质结合后才具有免疫原性;d、具有免疫原性,但不能与相应抗体起反应;e、可刺激机体产生免疫反应。
(3)a、有免疫原性,无免疫反应性;b、可与抗体结合,但不一定出现可见反应;c、动物血清对人来说是半抗原;d、化学性质均为蛋白;e、有佐剂作用。
(4)a、具有抗原特异性;b、刺激T细胞增生;c、刺激B细胞增生;d、只诱发产生IgM 4、ABO血型系统基因型父方为A/A,母方为A/O,他们共生三个孩子,孩子中可能有几种ABO基因型?输血时父亲能否作为全家孩子的供血者而不会引起ABO血型不符的输血反应?5、(1)抗原有多种分类方法,就每一种分类方法,试将下述抗原分别归类。
(2)用下列抗原免疫小鼠后,能否产生抗体?说明理由。
a.DNPb.DNP-HASc.大剂量BSAd.适量BSAe.多聚L-赖氨酸f.HASg.DNP-MGGh.小剂量BSAi.去聚合BGGj.去聚合BGG+佐剂k.人BBCl.Ia抗原m.(T,G)-A-Ln.MGGo.TNP-KLHp.H-2抗原q.Gm因子r.HLA 抗原思考提示:1、最大不同点是新定义既融合了克隆选择学说要点,同时概括了传统的抗原、变应原合耐受原。
它强调能引起免疫应答(包括负免疫应答)而不强调其产物。
这样避免了旧抗原定义中无法概括引起耐受性的抗原的矛盾。
免疫学复习思考题
免疫学复习思考题本页仅作为文档封面,使用时可以删除This document is for reference only-rar21year.March免疫学复习思考题考试题型:Ⅰ名词解释(每小题4分,共24分)Ⅱ、单项选择题(每小题2分,共30分)Ⅲ、简答题(每题3分,共24分)Ⅳ、问答题(共两题,共22分)考试时间:第12周,周三2:00-4:00。
一、名词解释1.免疫(immunity)是机体识别“自己”, 排除“异己(非己)”过程中所产生的生物学效应的总和,正常情况下是维持内环境稳定的一种生理性防御功能。
2.抗原(antigen,Ag)凡能刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答,并能与相应的免疫应答产物(抗体或效应性T淋巴细胞)在体内或体外发生特异性结合的物质称为抗原。
3.抗原决定簇 (antigenic determinant) 又称表位(epitope),指存在于抗原分子表面,决定抗原特异性的特殊化学基团。
它是TCR/BCR及抗体特异结合的基本单位。
其性质、数目和空间构象决定抗原的特异性。
4.半抗原(hapten)又称不完全抗原(incomplete antigen)仅有免疫反应性,不具免疫原性,但与大分子蛋白质或非抗原性的多聚赖氨酸等载体交联或结合后可获得免疫原性,诱导免疫应答。
5.超抗原(superantigen,SAg)是一类可直接结合抗原受体,激活大量T细胞或B细胞克隆,并诱导强烈免疫应答的物质。
它所诱导的细胞应答并非针对超抗原本身,而是通过非特异性激活免疫细胞分泌大量炎症性细胞因子,导致中毒性休克、多器官衰竭等严重病理过程的发生。
它分为外源性超抗原:如金葡菌肠毒素;内源性超抗原:如病毒蛋白等。
6.异嗜性抗原(heterophile antigen)又称Forssman抗原,指在不同种属动物,植物,微生物细胞表面上存在的共同抗原。
例如,溶血性链球菌的表面成分与人肾小球基底膜及心肌细胞组织存在共同抗原,故链球菌感染机体产生的抗体可与具有共同抗原的心、肾组织发生交叉反应,导致肾小球肾炎或心肌炎;大肠埃希菌O14型脂多糖与人结肠粘膜有共同抗原,可导致溃疡性结肠炎的发生。
实验免疫学思考题
免疫学思考题汇总
免疫学思考题汇总第一章:1.免疫系统如何区分“自己”和“非己”?2.免疫系统的三大功能是什么?异常时有何表现?3.简述免疫应答的基本类型及其特点。
第二章:免疫系统的组成免疫器官的组成及其功能淋巴细胞再循环的概念和意义第三章:抗原的概念、特性决定免疫原性的因素有哪些?表位交叉反应的机理异嗜性抗原佐剂、超抗原、丝裂原第四章:简述免疫球蛋白的结构简述免疫球蛋白的功能各类免疫球蛋白的生物学特性及功能第五章:补体的激活有哪些途径?各有何主要特点?补体有何生物学功能?第六章:结合细胞因子及其共同特点,简述你认为最熟悉的一类细胞因子的来源、作用特点。
细胞因子的分类。
细胞因子的功能。
第七章:白细胞分化抗原的概念粘附分子的概念第八章:MHC概念MHC多态性试比较MHC -Ⅰ类、MHC -Ⅱ类分子MHC分子的功能第九章:B细胞的胚系基因结构及基因重排机制。
b细胞主要表面分子及其功能关系b细胞的不同分类标准和该分类下b细胞的亚群组成第十章:T细胞有哪些重要的表面分子,它们的作用是什么?CTL的杀伤机制有哪些?第十一章:MPS的生物学功能。
成熟与未成熟DC的生物学特征及DC 的生物学功能。
试述胞质溶胶抗原递呈途径的过程。
试述溶酶体抗原递呈途径的过程。
第十二、十三章:体液免疫初次应答再次应答有何特点?b细胞对TD\TI抗原的免疫应答有何异同?Th细胞如何辅助B细胞的免疫应答?试述B细胞在生发中心的发育和成熟。
第十四章:简述模式识别受体及其识别的配体试述巨噬细胞表面受体、分子及其介导产生的生物学作用试述NK细胞不能杀伤正常组织细胞而能杀伤病毒感染或肿瘤靶细胞的作用机制。
试述中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、B1细胞的主要特征和生物学作用。
试述固有免疫应答的作用时相和主要作用特点。
第十五章:黏膜免疫系统的组成结构和特征是什么?肠道免疫系统为什么对我们每天摄入的大量食物抗原不产生免疫反应?黏膜免疫系统的耐受和稳态是如何维持的?黏膜免疫系统是如何对全身免疫系统产生影响的?第十六章:简述免疫耐受的特点及生物学作用免疫耐受形成的机制有哪些?简述建立和打破免疫耐受常用的策略第十七章:1.简述固有免疫有哪些特点?固有免疫在适应性免疫应答过程中发挥哪些重要作用。
免疫学复习思考题及答案
复习思考题及答案第一讲总论第一章绪论1名词解释:免疫:从狭义上讲,免疫就是人体对病原体(病菌、病毒)与有害物质得抵抗力.从广义上讲,免疫就是机体识别“自身”与“非己”抗原,对自身抗原形成免疫耐受,对非己抗原产生排斥反应得一种生理功能。
2.机体免疫系统识别与清除突变细胞得功能称为(C)A、免疫耐受B、免疫自稳C、免疫监视D、免疫防御E、免疫调节3。
最早提出克隆选择学说得科学家就是(D)A、Jenner B、Border C、PorterD、BurnetE、Pasteur4。
最早用牛痘预防天花得科学家就是(D)A、BurnetB、BorderC、PorterD、JennerE、Pasteur5。
免疫指(ABCDE)A、机体排除病原微生物得功能.B、机体清除损伤与衰老细胞得功能。
C、机体识别与排除抗原性异物得功能。
D、机体抗感染得防御功能E、机体识别与清除自身突变细胞得功能。
第二章免疫器官1、简述淋巴细胞再循环得概念及其意义淋巴细胞再循环:定居在外周免疫器官得淋巴细胞,由输出淋巴管进入胸导管,经上腔静脉进入血液循环,在毛细血管后微静脉处穿越血管内皮细胞表面(HEV),重新分布于全身淋巴器官与组织。
淋巴细胞在血液、淋巴液、淋巴器官与组织间周而复始循环得过程即为淋巴细胞再循环。
淋巴细胞再循环得意义:(1)淋巴细胞在淋巴组织与器官中分布更为合理(2)淋巴组织不断从循环池中补充新得淋巴细胞有助于增强整个机体得免疫功能(3)有利于淋巴细胞与抗原与抗原递呈细胞接触(4)有利于动员效应淋巴细胞迁移至炎症部位;(5)定居在外周免疫器官得记忆性细胞也参与再循环,其接触相应抗原后进入淋巴组织,并迅速发生活化、增殖与分化,产生再次免疫应答。
2。
骨髓得主要功能包括(ABDE)A.各类血细胞与免疫细胞发生得场所B.B细胞分化成熟得场所C.T细胞分化成熟得场所D.再次体液免疫应答发生得场所E.既就是中枢免疫器官,又就是外周免疫器官3.T细胞分化成熟得场所就是(B)A、骨髓B、胸腺C、腔上囊D、淋巴结E、脾4。
药学基础实验-细胞与免疫学技术实验部分思考题
以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×10四次方×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×10四次方×稀释倍数思考题:试验43:动物细胞的原代培养1.如何提高原代细胞培养的成功率?(就是注意事项)1.培养材料的选择,尽量选取胚胎或幼小的生物体组织或者繁殖能力较强的组织,如肿瘤组织等。
2.要注意无菌操作,其要求应高于外科手术。
3.整个取材操作要迅速,尤其孕鼠浸泡酒精时间不能过长,以保证胚胎细胞活性。
4.运用消化法时胰酶温度应低于37~C,浓度只需平时消化细胞浓度的一半。
因为此过程不像消化培养细胞时的1-10 min,而是至少20 min,先消化下来的细胞在此胰酶消化液中可存活10 min以上。
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以计数酵母菌为例
(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.
(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5
个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.
(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻
片.
(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌
液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血
球计数室内.
(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.
(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).
(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.
3.计算公式
(1)16格×25格的血球计数板计算公式:
酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×10四次方×稀释倍数
(2)25格x16格的血球计数板计算公式:
酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×10四次方×稀释倍数
思考题:
试验43:动物细胞的原代培养
1.如何提高原代细胞培养的成功率?(就是注意事项)1.培养材料的选择,尽量选取胚胎或幼小的生物体组织或者繁殖能力较强的组织,如肿瘤组织等。
2.要注意无菌操作,其要求应高于外科手术。
3.整个取材操作要迅速,尤其孕鼠浸泡酒精时间不能过长,以保证胚胎细胞活性。
4.运用消化法时胰酶温度应低于37~C,浓度只需平时消化细胞浓度的一半。
因为此过程不像消化培养细胞时的1-10 min,而是至少20 min,先消化下来的细胞在此胰酶消化液中可存活10 min以上。
如果胰酶作用过强,则这些细胞易被损伤不易生存。
5.如使用组织块法,则应待组织块略干燥,能粘附于瓶壁时再使之与培养基接触,勿使组织块漂浮起来。
如果组织块没有贴壁,则细胞不易生长,即使生长也因没有贴在瓶壁上而无法收集到。
2.为克服微生物污染采取了哪些措施?1.器皿准备中的预防:用于细胞培养的器皿应该严格消毒,做到真正洁净;应该无菌的物品,要做到消毒严格、真正无菌2操作过程中的预防;主要包括:超净台内放置的所有培养瓶瓶口不能与风向相逆,不允许用手触及器皿的无菌部分,如瓶口和瓶塞内侧;在安装吸管冒、开启或封闭瓶口操作时要经过酒精灯烧灼,并在火焰附件工作;吸取培养液、细胞悬液等液体时,应专管专用,防止污染扩大或造成培养物的交叉污染;使用培养液前,不易较早开启瓶口;开瓶后的培养瓶应保持斜位,避免直立;不再使用的培养液应立即封口;培养的细胞在处理之前不要过早的暴露空气中;
实验44 传代细胞的培养
1 细胞传代培养的目的是什么:
是组织培养常规保种方法之一,可以获得大量实验所需的细胞。
2 如何保证在传代过程中不被微生物污染
尽量靠近酒精灯火焰。
每次最好只进行一种细胞的操作。
每一种细胞使用一套器材。
培养用液应严格分开。
如发现污染,一般弃置污染细胞,如必须挽救可加含有抗生素的培养基反复清洗,随后培养基中加入大量的抗生素,并经常更换培养基。
实验46 动物细胞的冻存与复苏
1 如何运用“缓慢冻存,快速复苏”的原理保存细胞
冻存管在4℃冰箱中存放30分钟,转放-20℃冰箱中1.5~2h,再转入-80℃冰箱中 4~12h后转移到液氮中(-196℃)保存。
复苏时直接放进37℃水浴锅中。
2 冻存液的作用:保护细胞,可是溶液冰点降低,加之在缓慢冻结下,细胞内水分透出,减少了冰晶形式,避免细胞损伤。
实验50 淋巴细胞转化实验
1 试比较淋巴细胞转化实验的优缺点
╮(╯▽╰)╭我不知道
2 淋巴细胞转化试验有何意义?
淋巴细胞转化率的高低反映机体的细胞免疫水平可作为测定机体免疫功能的指标之一。
淋巴细胞转化试验不但可作为变态反应性疾病和免疫缺陷性疾病的辅助诊断,还可用于自身免疫性疾病和肿瘤病因的研究以及预后判断。
一般情况下新生儿淋巴细胞转化率稍高,老年人偏低。
实验51 琼脂免疫扩散实验
1 双向免疫扩散试验主要用于哪些方面。
双向免疫扩散可根据沉淀线的位置、数量、形状以及对比关系,对抗原或抗体进行定性分析,常用于抗原和抗体的纯度鉴定以及抗体效价测定。
该方法简便易行,结果稳定可靠,临床曾用于诊断和分析某些疾病,如检测AFP、HBsAg等。
但敏感度较低,试验所需时间较长,只能定性,不能定量,仅适用于大量普查项目。
2 为什么抗原、抗体要选择适当比例?
抗原抗体反应有一个平衡,浓度不合适,影响免疫复合物的形成。
在比例适当处可形成可见的沉淀线。
53 酶联免疫吸附试验 ELISA
1 ELISA有哪些类型,其原理各是什么?
(1)双抗体夹心法。
原理:利用连接于固相载体上的抗体和酶标抗体分别与样品中被检测抗原分子上两个抗原决定簇结合,形成固相抗体-抗原-酶标抗体免疫复合物。
由于反应系统中固相抗体和酶标抗体的量相对于待测抗原是过量的,因此复合物的形成量与待测抗原的含量成正比(在方法可检测范围内)。
测定复合物中的酶作用于加入的底物后生成的有色物质量(OD值),即可确定待测抗原含量。
若固相载体上的抗体和酶标抗体分别与样品中被检测抗原分子上两个不同的抗原决定簇结合,则属于双位点夹心法。
若采用固相载体上的抗原和酶标抗原
分别与样品中被检测抗体分子结合,则是双抗原夹心法。
(2)间接法原理是将抗原连接到固相载体上,样品中待测抗体与之结合成固相抗原-受检抗体复合物,再用酶标二抗(针对受检抗体的抗体,如羊抗人IgG 抗体)与固相免疫复合物中的抗体结合,形成固相抗原-受检抗体-酶标二抗复合物,测定加底物后的显色程度,确定待测抗体含量。
(3)竞争法可用于抗原和小分子半抗原的定量测定,也可对抗体进行检测。
已测抗体为例,使待测抗体和酶标抗体竞争与固相抗原结合,结果如待测抗体含量越多,与固相抗原结合的酶标抗体就越少,显色越浅,二者呈负相关。
(4)捕获法(亦称反向间接法)ELISA,主要用于血清中某种抗体亚型成分(如IgM)的测定。
原理设计为:先将针对IgM的第二抗体(如羊抗人IgMμ链抗体)连接于固相载体,用以结合(“捕获”)样品中所有IgM(特异或非特异),洗涤出去IgG等无关物质,然后加入特异抗原与待检IgM结合;再加入抗原特异的酶标抗体,最后形成固相二抗- IgM-抗原-酶标抗体复合物,加酶底物作用显色后,即可对样品中待检IgM是否存在及其含量进行测定。
2 可能影响ELISA 试验结果的因素有哪些?
(1)试剂的选择(2)加样,可能原因:1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
(3)孵育,可能原因:
1)孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗彻底;
2)孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。
(4)洗板,可能原因:1)采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉2)采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不彻底;洗板针堵塞,抽吸不完全;洗板不畅,导致洗板效果差。
3)反应板过多造成洗板等待时间长。
(5)显色,可能原因:1)显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。
(6)终止,可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。
所以在加终止液时应避免产生气泡。
((7)读板,如读板时板底不清洁等。
应保证酶标板清洁。
3 试述ELISA技术的应用
ELISA应用的范围很广,而且正在不断地扩大,原则上ELISA可用于检测一切抗原、抗体及半抗原,可以直接定量测定体液中的可溶性抗原。
酶免疫试验(EIA)结合光学显微镜或电子显微镜可进行抗原定位与结构的研究,用酶标记抗原或抗体结合免疫扩散及免疫电泳可提高试验的敏感性。
在实际应用方面可作疾病的临床诊断、疾病监察、疾病普查、法医检查、兽医及农业上的植物病害的诊断检定等。
因此,它和生物化学、免疫学、微生物学、药理学、流行病学及传染病学等方面密切相关。
54 T淋巴细胞E-玫瑰花形试验
1 简述E-玫瑰花形试验原理
由于人和动物的T细胞表面有绵羊红细胞受体,因此红细胞可以附到T细胞的周围,形成玫瑰花样的细胞团,而B细胞表面没有绵羊红细胞受体,不能形成玫瑰花环,因此可以用该方法鉴别T、B淋巴细胞,以及从血液中分离纯化T细胞。
2 常用的淋巴细胞的分离方法有哪些?
1.纯淋巴细胞群的采集:①粘附贴壁法;②吸附柱过滤法;③磁铁吸引法。
2.淋巴细胞亚群的分离原则①E花环沉降法;②尼龙毛柱分离法;③亲和板结合分离法;④磁性微球分离法及荧光激活细胞分离仪分离法。