傅立叶变换_离子回旋共振质谱法在蛋白质分析中的应用
傅立叶变换-离子回旋共振-质谱(FT-ICRMS)
超导磁体-傅立叶变换-离子回旋共振-质谱技术系统（FT-ICR MS）是目前所知的具有最高分辨率的质谱系统，目前的分辨率可达到100万（FWHM）以上，可用于原油极性组分、环境有机污染物及其代谢产物、海洋天然有机质、蛋白质及其他生物大分子等的精确质量测定、分子式计算、结构推算等。
该技术能够非常有效运用于一些复杂体系中有机化合物的分子表征，已经在原油组学与石油化工、油田化学、有机地球化学、海洋科学、生命科学、环境科学和材料科学等研究领域得到了广泛的应用。
傅立叶变换-离子回旋共振-质谱（FT-ICR MS）主要研究对象石油生物油天然水体气溶胶石油酸、氮化物硫化物、烃类多氧化合物腐殖酸类腐殖质生物医药生物大分子2016年有机地球化学国家重点实验室在中科院修购专项资金1000万的支持下购入了该质谱系统（型号：Bruker solariX XR 9.4T FT-ICR MS），配套液相色谱一台。
该系统配备的离子源有集成的MALDI和ESI双源，以及大气压化学离子源（APCI II ），能够与液相色谱联用。
目前该设备由科研人员1名、仪器管理人员1名以及流动人员（在读研究生）共同管理和运行。
实际样品检测结果20160715_JB_Neg_test_naphthenic acid_low concentration_ best_4M_cal_000002.d: -MS 20160721_JB_Neg_solvent_SRNOM_best_4M_64_cal_000002.d: -MS 20160830_LWM_neg_FM_2_bitumen_noon_final_000001.d: -MS20160726_JB_neg_Venezuela crude oil_low concentration_4M_cal_000002.d: -MS 200300400500600700m/z 环烷酸腐殖酸油砂沥青委内瑞拉原油R=450000。
几种天然中药材的光谱分析
几种天然中药材的光谱分析中药材作为一种独特的医药资源，具有广泛的治疗作用和药用价值。
然而，中药材的种类繁多，其品质和成分也因种类、生长环境、采摘时间等因素而异。
因此，中药材分析成为了一个重要的研究领域。
通过分析中药材的化学成分和光谱特征，可以有效地鉴别中药材的真伪优劣，提高中药材使用的安全性和有效性。
本文将介绍几种天然中药材的光谱分析及其应用。
光谱分析是一种通过分析物质对光线的吸收、反射和散射等特性，推断物质成分和结构的方法。
中药材的光谱特征主要包括吸收峰和指纹图。
吸收峰是指中药材在特定波长下对光线的吸收达到最大值的现象，可以反映中药材中特定成分的含量。
指纹图则是指中药材在多个波长下对光线的吸收、反射和散射等特性的图形表示，可以用来鉴别中药材的种类和真伪。
丹参是一种常见的中药材，具有活血化瘀、消肿止痛等作用。
通过对丹参进行光谱分析，可以发现其具有明显的紫外吸收峰和红外指纹图。
紫外吸收峰可以反映丹参中黄酮类成分的含量，而红外指纹图则可以用来鉴别丹参的真伪和质量。
黄芪是一种常用的中药材，具有补气固表、利水退肿等作用。
通过对黄芪进行光谱分析，可以发现其具有多个紫外吸收峰和红外指纹图。
紫外吸收峰可以反映黄芪中多种成分的含量，而红外指纹图则可以用来鉴别黄芪的品种和质量。
中药材光谱分析的应用主要表现在以下几个方面：通过分析中药材的光谱特征，可以有效地鉴别中药材的种类、真伪和质量。
例如，可以利用红外指纹图对中药材进行“形谱比对”，判断其是否为同一品种；利用紫外吸收峰可以反映中药材中特定成分的含量，判断其质量优劣。
通过对中药材的光谱特征进行分析，可以深入了解中药材的化学成分和结构，为新药开发和天然药物研究提供理论依据。
例如，可以利用光谱分析方法研究中药材中新的活性成分，发现新的药用价值。
农药残留是影响中药材质量和安全性的重要因素之一。
利用光谱分析技术可以快速、准确地检测中药材中农药残留量。
例如，可以利用气相色谱-质谱联用（GC-MS）方法对中药材中的有机氯农药残留进行检测和分析。
傅里叶变换离子回旋共振质谱技术简述及其在化工领域的应用
傅里叶变换离子回旋共振质谱技术简述及其在化工领域的应用杨秋霞，李雪莹，杨熙，林晨，潘云山，肖丽珊，叶绮云，王李平*(广东省测试分析研究所，广东省化学危害应急检测技术重点实验室，广东广州510070)Introduction and Application Progress of Fourier Transform Ion Cyclotron Resonance Mass Spectrometry in the field of Chemical IndustryYang Qiuxia,Li Xueying,Yang Xi,Lin Chen,Pan Yunshan,Xiao Lishan,Ye Qiyun,Wang Liping*(Guangdong Provincial Key Laboratory of Emergency Test for Dangerous Chemicals,Guangdong Institute of Analysis,Guangzhou510070,China)Abstract:The introduction and advantage of Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry(FT-ICR MS)were introduced firstly,and the application progress of FT-ICR MS in the field of chemical industry was described.The prospect of this technology was summarized in the finally.Keywords:fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry；petrochemical industry；accessory ingredient傅立叶变换离子回旋共振质谱(FT-ICR MS)是根据给定磁场中的离子回旋频率来测量离子质荷比的质谱仪，是现今分辨率最高的质谱仪器。
蛋白质分析技术之质谱法
蛋白质分析技术之质谱法蛋白质是生物体内最为重要的有机大分子，既是构成细胞组织的基本单位，也是参与细胞代谢的重要分子。
而被称为“生命之光”的DNA也仅仅是蛋白质的编码者。
因此，全面了解蛋白质结构和功能对于深入理解细胞运作以及生命科学的研究都有着重要的作用。
而质谱法则是一种非常重要的蛋白质分析技术。
质谱法是一个非常灵敏、快速、高分辨率的蛋白质分析技术。
通过将样品通过质量分析器，分离样品中的离子，获得不同质量的信号，进而对分子进行分析。
质谱法对于蛋白质的结构分析、动态过程分析以及定量分析都有着非常重要的作用。
本文将从以下三个方面对质谱法进行深入讲解：一、质谱法基础质谱法有很多种不同的分析方法，比如MALDI-TOF、ESI-MS、Q-TOF等。
这些不同的质谱法对应着不同的离子化方式、分离模式和检测方式，都有各自的优缺点。
但无论哪种方法，都有一些基本的操作流程。
在质谱分析中，最根本的就是质量分析。
该过程要求先要将样品中的分子离子化，然后进行分离和检测。
常见的离子化方式有电子喷射（EI）、化学离子化（CI）、电喷雾（ESI）和基质辅助激光解吸飞行时间质谱（MALDI-TOF）。
此外，质量分析器也有不同的类型，先进的FTICR（傅立叶转换离子回旋共振质谱仪）可以对不同的离子进行分析，从而获得对应的质量谱峰。
二、蛋白质质谱分析质谱技术对于研究蛋白质分析十分重要。
具有相同分子量的蛋白质因为其各自的氨基酸组成不同而形成不同的质谱图。
通过质谱技术能够获得蛋白质分解物、多肽、蛋白质的修饰、蛋白质结构以及可解析计算蛋白质分子量。
相比于传统的蛋白质分析技术来说，质谱法的高灵敏度、高效率使得人们能够从低浓度的复杂蛋白质样品中分析出较小的蛋白质分子，拓宽了分析范围，获得了更多重要分析信息。
相对于其他的质谱分析方法，MALDI-TOF和ESI-MS技术在确定多肽组成和质量等信息方面表现出较大的区别。
基于MALDI-TOF的分析技术，样品的制备过程较为简单，允许大分子物质直接在样品板上进行脱离，加速了整个分析过程。
磷酸化蛋白质组学常用分析和定量方法
蛋白质的磷酸化修饰是生物体内重要的共价修饰方式之一。
蛋白质的磷酸化和去磷酸化这一可逆过程几乎调节着包括细胞的增殖、发育、分化、信号转导、细胞凋亡、神经活动、肌肉收缩及肿瘤发生等过程在内的所有生命活动。
目前已知有许多人类疾病是由于某些异常的磷酸化修饰所引起，而有些磷酸化修饰却是某种疾病所导致的后果。
在哺乳动物细胞生命周期中，大约有1/3的蛋白质发生过磷酸化修饰；在脊椎动物基因组中，有5%的基因编码的蛋白质是参与磷酸化和去磷酸化过程的蛋白激酶和磷酸（酯）酶。
磷酸化修饰本身所具有的简单、灵活、可逆的特性以及磷酸基团的供体ATP的易得性，使得磷酸化修饰被真核细胞所选择接受而成为一种最普遍的调控手段。
鉴于磷酸化修饰在生命活动中所具有的重要意义，探索磷酸化修饰过程的奥秘及其对细胞功能的影响已成为众多生物化学家及蛋白组学家所关心的内容。
用蛋白质组学的理念和分析方法研究蛋白质磷酸化修饰，可以从整体上观察细胞或组织中磷酸化修饰的状态及其变化，这对以某一种或几种激酶及其产物为研究对象的经典分析方法是一个重要的补充，同时提供了一个全新的研究视角，并由此派生出磷酸化蛋白质组学（phosphoproteomics）这一新概念。
在蛋白质组学水平进行磷酸化蛋白质的分析定量研究已引起人们广泛关注，各种技术也相应地发展起来.1.1 免疫亲和色谱富集磷酸化蛋白质最简单的方法就是用识别磷酸化氨基酸残基的特异抗体进行免疫共沉淀，从复杂混合物中免疫沉淀出目标蛋白质。
目前，仅有酪氨酸磷酸化蛋白质的单克隆抗体可以用来进行有效的免疫共沉淀。
这是因为该抗体具有较强的亲和力和特异性，可以有效地免疫沉淀酪氨酸磷酸化的蛋白质。
Imam-Sghiouar等人从B-淋巴细胞中通过免疫沉淀获得酪氨酸磷酸化的蛋白质，然后再用二维电泳分离技术并结合质谱分析方法，鉴定出多个与斯科特综合症相关的酪氨酸磷酸化的蛋白质。
由于抗磷酸化丝氨酸和苏氨酸抗体的抗原决定簇较小，所以令抗原抗体的结合位点存在空间障碍，特异性较差。
超高分辨率傅立叶变换离子回旋共振质谱简介及对DOM有机分子表征的应用
四级杆 Heated Glass Capillary 玻璃毛细管
碰撞室
ICR 离子回旋室 High Tesla 磁体
Collision Cell
举例
Bruker Daltonics 12 Tesla Apex Qe FTICR-MS
主机
进样，ESI喷嘴
Bruker Daltonics 12 Tesla Apex Qe FTICR-MS
UPLC-纳电喷雾源 静电场 轨道阱 组合式质谱
UPLC-纳电喷雾源 线性离子阱质谱仪
ABI API QTRAP 5500
线性离子阱质谱仪
Bruker APEX 9.4 Tesla ESI FT-ICR MS System 9.4 T傅立叶变换离子回旋 共振质谱仪 Waters CapLC-ESI QTOF Micro MS System 毛细管色谱-电喷雾电离TOF 质谱
Kendrick Mass Defect（KMD）经常用来表征含相同系列分子片段组成，而其他 原子相同，如含有系列的CH2，H2，O2，N2，SO2等的分子。 以CH2系列为例： 将 CH2的质量数定义为14Da, 而不是（IUPAC）14.01565Da, 将一个化合物的IUPAC实际质量数转成CH2的Kendrick质量数. 转换 =IUPAC mass/1.0011178
几种不同的质谱
Various Forms of MS instruments
电喷雾
基质辅助激光解吸电离MALDI
反射式(Reflector)TOF检测器
四级杆TOF
串联飞行时间质谱仪
离子阱质谱
三重四级杆质谱/ 线性离子肼
傅立叶变换 离子回旋共振 质谱仪（超导磁体）
Aebersold and Mann (2003) Nature 422, 198-207
傅里叶变换离子回旋共振质谱的发展
傅里叶变换离子回旋共振质谱的发展
傅里叶变换离子回旋共振质谱（FourierTransformIonCyclotronResonanceMassSpectrometry,FT-ICRMS）是质谱技术中的一种高分辨率、高精度的分析方法。
该技术利用磁场中的离子回旋频率与外加电场的频率匹配，使离子在磁场中做匀速圆周运动，从而实现精确质量测量。
该技术的发展经历了多个阶段。
最初，FT-ICR MS仅用于离子化学反应动力学研究。
随着仪器性能的不断提高，该技术被越来越多地应用于生物医学、环境科学、材料科学等领域。
近年来，FT-ICR MS 在蛋白质组学和代谢组学等领域的应用得到了广泛关注，并且成为了探索生命科学的重要工具。
随着FT-ICR MS技术的不断发展，其灵敏度、分辨率和质量精度都得到了显著提高。
同时，该技术还结合了其他分析技术，如液相色谱（LC）和气相色谱（GC），进一步提高了分析的有效性和可靠性。
相信在未来，FT-ICR MS技术将在更广泛的领域得到应用，为探索复杂化学和生命现象提供更为强大的支持。
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质谱在蛋白质分析中的应用
质谱在蛋白质分析中的应用导读蛋白质组学是基因组研究的继续，以基质辅助激光解吸附飞行时间质谱和电喷雾质谱为代表的现代生物质谱技术，为蛋白质组的研究提供了必要的技术手段。
主要通过获取蛋白质、多肽的分子量以及修饰片段的信息，研究蛋白-蛋白间相互作用、翻译后修饰乃至基因表达水平的变化等方面的情况，从而扩充和完善蛋白质组学的研究。
蛋白质组学的科学研究之所以能够取得蓬勃的发展，主要依赖于生物质谱技术的飞速发展以及高通量分离和分析技术的突破性进步。
一些新的构造的具有高潜能的质谱仪被引入到蛋白质组学研究中并产生深刻影响。
首先是质谱技术尤其是“软电离源”技术——电喷雾和基质辅助激光解析离子源的发展，使之成为检测微量甚至是痕量蛋白质分子的重要手段。
高通量、高效的分离技术和大规模、高效率、高准确性地鉴定一个组织或细胞乃至亚细胞中的全部蛋白质以及利用稳定同位素标记方式与多维分离-串级质谱实现大规模的蛋白质定量分析也已经使得生物质谱成为实现这一目标的核心分析技术。
生物信息学的建立形成了国际性的科学大协作。
蛋白质组学研究的进一步深入，将对了解疾病的发生和药物的筛选起到决定性的作用。
蛋白质的分析鉴定01蛋白质分子量测定随着质谱技术的发展，分子量的测定已从传统的有机小分子扩展到了生物大分子。
MALDI-MS技术以及极高的灵敏度、精确度在蛋白质分析中得到了广泛的应用。
该技术不仅可测定各种疏水性、亲水性和糖蛋白的分子量，还可以测定蛋白质混合物的分子量。
这可认为是蛋白质分析领域的一项重大突破。
02肽指纹图谱质谱技术作为蛋白质组研究的三大支撑技术之一，除了用于多肽，蛋白质的分子量测定外，还广泛的应用与肽指纹图谱测定及氨基酸序列测定。
肽指纹图谱（Peptide Mass Fingerprinting PMF）测定是对蛋白酶解或降解后所得多肽混合物进行质谱分析的方法。
质谱分析所得肽断与多肽蛋白数据库中蛋白质的理论肽断进行比较，判断出所测蛋白是已知还是未知。
傅里叶变换-离子回旋共振质谱与核磁共振
傅里叶变换-离子回旋共振质谱与核磁共振一、引言傅里叶变换是一种数学工具，可以将函数在时域和频域之间进行转换。
离子回旋共振质谱（IRMS）和核磁共振（NMR）是利用傅里叶变换原理的仪器，在化学、生物学、药物研发等领域有重要应用。
本文将探讨傅里叶变换在离子回旋共振质谱和核磁共振中的应用，介绍其原理和技术特点。
二、离子回旋共振质谱离子回旋共振质谱是一种测定元素同位素比例的分析方法，主要用于地球科学、天文学和核物理等领域。
该技术利用离子在磁场中受到的洛伦兹力和外加交变电场引起的振荡来分析样品中同位素的含量。
离子回旋共振质谱仪的关键部分是储存环和检测系统，其中傅里叶变换在信号处理中起到重要作用。
离子回旋共振质谱仪通过加速器将样品中的原子或分子离子化，并将离子注入到一个磁场中。
离子在磁场中绕轴线做匀速回旋运动，并在外加的交变电场作用下产生振荡。
这种振荡会导致离子围绕轴线做径向运动，最终被探测器捕获。
离子的运动轨迹可以用复数表示，而复数的频谱可以通过傅里叶变换得到。
离子回旋共振质谱仪利用傅里叶变换将时域信号转换为频域信号，从而可以得到样品中同位素的含量信息。
三、核磁共振核磁共振是一种通过核自旋共振现象来研究物质结构和性质的方法，广泛应用于化学、生物学、医学等领域。
核磁共振仪利用傅里叶变换原理进行信号处理，从而得到样品中核自旋共振频率的信息。
核磁共振仪的工作原理是利用样品中核自旋在外加磁场中的共振现象来获取样品信息。
当样品置于外加静磁场中时，核自旋会沿外加磁场的方向取向。
施加射频脉冲后，核自旋将发生共振现象并产生幅度衰减的自旋回波信号。
这个信号随时间变化，可以通过傅里叶变换将其转换为频谱信号，从而得到样品中核自旋共振频率的信息。
四、傅里叶变换在IRMS和NMR中的应用1. 信号处理傅里叶变换在离子回旋共振质谱和核磁共振仪中起着至关重要的作用。
离子回旋共振质谱仪通过傅里叶变换将时域信号转换为频域信号，从而得到样品中同位素的含量信息。
蛋白质纯化后的评价标准
蛋白质纯化后的评价标准在评价样品纯度之前，首-先需要鉴定待测杂质的类型，如核酸、碳水化合物、脂质、无关蛋白质、同工酶类、失活蛋白质，进而确定在特定溶液条件中, 能够区分假定杂质和目标蛋白质的理化特性(化学分析或物理特征）。
而纯度则是指待测杂质含量低于某个特定水平。
需要注意的是，上述说明中并没有要求描述杂质的性质。
纯化过程可能已将某一杂质的浓度降低到检测下限以下，但色谱峰中还有残留。
毫无疑问，表观纯度取决于所选择的测定方法及其灵敏度。
由于大多数分离方法都能够有效地去除非蛋白质类杂质，因此本文将主要介绍蛋白质样品中蛋白质类杂质的检测方法。
目前有一些高灵敏度的方法可用于检测样品中的杂质。
其中每种方法测定分子的一种特定物理特性。
方法的选择依赖于以下标准:①可用于检测的蛋白质的量；②待测杂质的性质;③所需的检测精度;④所需的检测灵敏度;⑤可能干扰到该方法的蛋白质及其溶剂特性。
蕞为简单和常用的方法是，经一次或多次分离后证实只有一种组分可被检测到。
若纯度标准为只可以存在一种可检测物质，则需用多种分离手段检测杂质。
当所选择的某种检测方法无法从主要分析物中分辨出一种未知杂质时，推荐使用正交的方法(orthogonal)。
蕞后，谨慎处理样品非常重要，这样可以防止在制备分析所用的样品过程中改变其杂质谱。
并且，洁净的环境、适宜的温度及适当材质的容器都会为分析提供帮助。
一、蛋白质的组成和活性分析一些方法能够量化氨基酸、特定辅基团或活性位点的摩尔数，可以用来评价蛋白质样品的纯度。
如果已知纯蛋白质的活性，那么单位活性测量可以用来检测相对纯度。
这些方法是间接的，因为总要将分析物假设为不含杂质的纯品，并将该假设纯品的量作为参照。
这些方法主要适用于纯化过程早期的多相系统，或适用于需要特殊环境来保持活性的分子(如膜蛋白）。
一般需要检测两项: 第1项是分析所用样品中蛋白质(或原料）的总量; 第二项是定量已知的活性对象或其他特殊的分析对象。
傅立叶变换离子回旋共振质谱分析与鉴定骨桥蛋白的多肽片段
傅立叶变换离子回旋共振质谱分析与鉴定骨桥蛋白的多肽片段作者：蒋鑫萍程舸于雷王韶刘晓梅石磊【摘要】采用高效液相色谱(HPLC)SCX及C4色谱柱从人乳样品的乳清部份分离与纯化出骨桥蛋白(Osteopontin, OPN)，在必然条件下将其用胰蛋白酶酶解后，利用高分辨傅立叶变换离子回旋共振质谱(FT ICR MS)，结合微喷雾(Nano spray)技术，并借助Mascot 软件数据库，取得了OPN相关多肽片段GDSVVYGLR和QNLLAPQTLPSK的质谱结构信息，分析了其裂解机理。
研究表明，利用FT ICR MS并结合HPLC等化学方式，能够高效、快速地分离与纯化人乳样品中的OPN，借助Mascot软件数据库进行质谱分析，能够简练、准确地鉴定相关多肽片段的结构信息，为OPN多肽片段不同翻译后修饰位点的肯定与其生物学活性关系的研究提供了理论依据。
【关键词】傅立叶变换离子回旋共振质谱，人乳，骨桥蛋白，多肽片段1 引言随着现代生物技术的进步和生命科学的进展，多肽在生物体内的生理功能愈来愈受到重视，从天然产物中取得具有生物活性多肽类物质的方式也不断进展。
骨桥蛋白(Osteopontin, OPN)是一种重要的多功能细胞外基质蛋白[1]，能在骨组织细胞、巨噬细胞、上皮细胞等多种细胞上表达[2]，在介导细胞的趋化、粘附、增殖和迁移，和骨组织的矿化与重建、免疫调节、信号传导等方面起着重要作用[3,4]。
OPN 是一种含精氨酸甘氨酸天冬氨酸(Arg Gly Asp, RGD)带负电荷的分泌型糖基化磷蛋白，其中包括16个氨基酸的信号肽，剪切后形成298个氨基酸的成熟蛋白，理论分子量约为33 kDa。
但由于高度的糖苷化及磷酸化，其分子量能够达到75 kDa[5,6]。
OPN含有多个与整合素结合的功能域，磷酸化后的OPN主如果以RGD结构与细胞表面的整合素受体(αγβ1，αγβ3)结合，SVVYGLR多肽位点能够结合α4β1，α4β7和α9β1，而未磷酸化的OPN则不依赖于RGD结构与某些CD44的变异体结合，OPN和细胞表面受体彼此作用能诱导信号传导，从而增进细胞的粘附和迁移[7～10]。
质谱法蛋白质测序
质谱法蛋白质测序一、样品制备样品制备是质谱法蛋白质测序的第一步，其目的是将蛋白质样品转化为可被质谱仪分析的形式。
通常采用的方法包括酶解、化学裂解和激光解吸等。
酶解是目前应用最广泛的方法，通过特定的蛋白酶将蛋白质裂解为多个肽段，以便后续的质谱分析。
二、电离和离子化电离和离子化是将样品转化为带电粒子束的过程。
在质谱法中，通常采用电子轰击、激光解吸、化学电离等方法将样品离子化。
这些方法能够将样品中的原子或分子转化为带电粒子，形成离子束。
三、质量分析质量分析是质谱法蛋白质测序的关键步骤之一。
通过质量分析器，如四极杆、双曲面离子阱或傅里叶变换离子回旋共振等，对离子束进行质量和能量的分析。
通过这种分析，可以得到每个离子的质量和能量的精确信息。
四、数据解析数据解析是将质量分析器得到的数据转化为可读的信息，即鉴定蛋白质中的氨基酸序列和修饰情况。
这一步通常采用计算机算法对数据进行解析，包括峰识别、噪声过滤、背景扣除等。
通过数据解析，可以得到每个肽段的分子量、电荷态和可能的修饰情况等信息。
五、数据库搜索数据库搜索是将解析得到的数据与已知的蛋白质数据库进行比对，以确定蛋白质的身份和氨基酸序列。
常用的数据库包括Uniprot、NCBI等。
通过比对，可以找到与实验数据匹配的蛋白质，进而确定其氨基酸序列。
六、肽指纹图谱分析肽指纹图谱是蛋白质在质谱仪中裂解后产生的肽段的分子量和电荷态的图谱。
通过肽指纹图谱分析，可以鉴定蛋白质的修饰情况，如磷酸化、糖基化等。
此外，肽指纹图谱还可以用于鉴定蛋白质的剪接变异体和基因多态性等。
七、蛋白质鉴定蛋白质鉴定是利用质谱法对未知蛋白质进行鉴定的过程。
在蛋白质鉴定中，首先需要将蛋白质裂解为多个肽段，然后对这些肽段进行质谱分析。
通过比对已知数据库中的肽指纹图谱，可以确定未知蛋白质的氨基酸序列和修饰情况。
此外，蛋白质鉴定还可以用于研究蛋白质的结构和功能，以及寻找疾病标记物和治疗靶点等。
蛋白质分析中的质谱技术应用
蛋白质分析中的质谱技术应用在生物科学领域中，蛋白质扮演着至关重要的角色。
蛋白质是由氨基酸组成的生物分子，它们能够完成细胞内的大量生命活动，并且直接或间接地参与了多种疾病的发生和发展。
为了深入研究蛋白质，科学家们需要掌握一些高端技术工具。
其中，质谱技术应用是检测蛋白质的核心技术之一。
一、蛋白质分析中的质谱技术介绍质谱技术是一种能够快速分析物质结构和性质的高端分析方法，它能够将物质的分子转化为离子，并利用质谱仪来检测离子的质量和它们之间的相对丰度比。
通过对不同离子的分析，我们可以确认样品中的化合物种类和基本骨架，从而对样品的性质和结构有所了解。
在蛋白质分析领域，主要有两种质谱技术：基质辅助激光解析电离质谱（MALDI-TOF MS）和液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）。
前者主要应用于蛋白质的大规模鉴定和定量，后者则应用于蛋白质的序列识别和构象分析。
二、MALDI-TOF MS在蛋白质定量领域的应用MALDI-TOF MS可以用来鉴定和定量蛋白质，在科学家的研究工作中扮演着至关重要的角色。
在蛋白质的定量领域，MALDI-TOF MS应用非常广泛。
它主要通过样品酶解得到的多肽进行蛋白质定量。
这种方法具有快速、准确的特点，并且能够检测到特定的肽段。
使用MALDI-TOF MS来鉴定和定量蛋白质的过程中，仪器精确地识别了不同蛋白质的质量，并且能够以非常快的速度完成相应的分析任务。
三、LC-MS/MS在蛋白质结构分析中的应用液相色谱串联质谱分析技术可以帮助科学家更好地了解蛋白质的结构，帮助了解蛋白质的功能表现。
它通过液相色谱将待测蛋白质样品进行分离，并在质谱的支持下将其进行定量分析。
这种技术能够很好地应用于蛋白质结构方面的分析，能够得到比较准确的结构信息。
除了分析单一的蛋白质分子之外，液相色谱串联质谱分析技术还可用于分析蛋白质复合物。
通过使用LC-MS/MS技术，科学家可以了解到蛋白质复合物相互组装和相互作用的内部细节，从而更好地了解蛋白质表现形态的相关信息。
傅立叶变换离子回旋共振质谱在兽药未知物筛查中的应用
傅立叶变换离子回旋共振质谱在兽药未知物筛查中的应用郭国贤，王丽娜，兰雨 ，高 铎，孙玉飞（辽宁省检验检测认证中心，辽宁沈阳１１００３６）中图分类号：Ｏ６５７．６３ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００５－７３０７（２０２３）０６－００１５－００３ 近年来，随着国家对食品安全的重视，兽药检测行业飞速发展，越来越多的检测设备及分析仪器应用于兽药监察系统。
但要面对越来越复杂的兽药违法添加物的结构确证及定量，就需要高灵敏度、高分辨率、高准确度的要求。
而傅立叶变换离子回旋共振质谱（ＦＴ ＩＣＲＭＳ）的发展，为兽药未知物的筛查及确证提供了一种途径。
１ 兽药中非法添加物的近况兽药非法添加，极易造成药物滥用的情况，存在动物源性食品的药物残留和耐药性的生物安全风险［１］，依据农业农村部的《农业农村部办公厅关于２０２３年第一期兽药质量监督抽检情况的通报》，兽药非法添加仍屡禁不止，省级监督抽检发现改变组方非法添加其他药物成分的产品４批，涉及３家生产企业，非法添加药物为双氯芬酸钠和乙酰甲喹。
而现有关于兽药非法添加的检测方法共５０余种，其中大部分检测设备都为高效液相色谱 二极管阵列检测器。
面对越来越复杂的兽药非法添加现状，如何建立一种高适应性、高效的检测方法，具备定量定性特性，并有较高的准确度与灵敏度，来提升兽药检测行业水平，是亟待破解的问题。
２ ＦＴ ＩＣＲＭＳ在兽药未知物筛查中的应用前景要想解决目前兽药非法添加乱相，就需要引入高通量、高分辨率、谱图特性强、易定性定量的检测设备。
目前具备以上特点的检测仪器主要包括飞行时间质谱、拉曼光谱、傅立叶变换离子回旋共振质谱。
飞行时间质谱主要通过检测信号开始与离子撞击到检测器产生脉冲之间的时间差，来测量不同物质产生的碎片离子以及产生的时间差；拉曼光谱是采用激光激发被测样品，通过高效光信号采集及处理系统获得拉曼散射信号，从而反映物质分子振动光谱和微观结构。
但由于飞行时间质谱及拉曼光谱对未知物的定性较多依赖于已知对照品或者质谱数据库光谱图库的参照，在未知物筛查过程中存在较多不确定性，而傅立叶变换离子回旋共振质谱具有超高的宽带检测分辨率（ｍ／ ｍ５０％＞１０６，ｍ／ｚ＝４００）和质量准确度（外标法，＜１．０ｐｐｍ）、高分辨检测模式下可获得化合物的同位素精细结构从而将分子量极其接近的物质很好地分开等优势。
质谱在肽和蛋白分析中的应用
质谱在肽和蛋白分析中的应用（发布时间： 2005-12-7 9:29:00 来自：）质谱已成为肽和蛋白分析的重要工具，主要归功于一些软电离技术的应用，如电喷雾(ESI)和基体辅助激光解吸电离(MALDI)。
生物大分子多为极性、难挥发化合物，不易气化，用传统质谱无法测定。
但随着新的离子化技术的广泛应用，现已能高效地电离一些完整或片断的大分子生物聚合物，从而进行质谱测定。
本文对质谱在肽和蛋白分析的几个领域中的应用进展进行评述。
1 软电离技术1.1 电喷雾电离(ESI)［1］电喷雾电离利用位于一根毛细管和质谱仪进口间的电势差生成离子，在电场的作用下产生以喷雾形式存在的带电液滴，当使用干燥气或加热时，溶剂蒸发，液体体积缩小，最终生成去溶剂化离子。
电喷雾电离的特征之一是可生成高度带电的离子而不发生碎裂，这样可将质荷比降低到各种不同类型的质量分析仪都能检测的程度。
通过检测带电状态，可计算离子的真实分子量。
同时，解析分子离子的同位素峰也可确定带电数和分子量，因同位素峰间的质荷比差与带电数相对应(如，2+离子碳同位素峰间质荷比差为0.5)。
尽管ESI容许使用少量缓冲液和盐，但这些物质可能与待测物形成加合物，导致产生难以指认的分子量或抑制待测物离子的形成。
当样品中不含盐类和缓冲液时检测情况较好。
ESI的一大优势是可方便地与分离技术联用，例如在使用ESI离子化前使用HPLC和毛细管电泳(CE)可方便地除去待测物中的杂质。
1.2 基体辅助激光解吸电离(MALDI)［2］以有紫外吸收的小分子晶体为基体，将待测物与基体相结合，可检测带电生物分子的离子。
在所采用的激光波长下，基体对激光有较强吸收，而待测物对激光只有弱吸收。
当激光打在基体晶体时，聚集的能量加热晶体，快速加热导致基体晶体升华而将非挥发性待测物释放到气相中。
基体在待测物离子化过程中还起着质子化或去质子化试剂的作用。
基体引进激光解吸技术前，只有低分子量化合物能被完整引入气相；对于高分子量化合物，则无法解决其气化问题。
质谱数据分析技术在细胞膜蛋白研究中的应用研究
质谱数据分析技术在细胞膜蛋白研究中的应用研究细胞膜蛋白是一类重要的蛋白质，它们存在于生物细胞膜上并起着重要的生理功能。
细胞膜蛋白的研究对于深入理解生物学的许多方面都具有十分重要的意义。
现代科学技术中，质谱技术被广泛应用于生物化学和生物学领域，成为细胞膜蛋白研究的热门技术之一。
一、细胞膜蛋白及其生理功能细胞膜蛋白是位于生物细胞膜上的一类重要蛋白质，其重要性不容忽视。
细胞膜蛋白参与了生物细胞的许多生理过程，例如：1.传递信息：一些细胞膜蛋白质可以接收外界的信号，从而在细胞内部传递信息。
2.物质转运：许多细胞膜蛋白负责物质的转运，例如许多离子通道。
3.结构支撑：细胞膜蛋白可以支撑细胞膜的结构，保持细胞形态的稳定。
4.细胞粘附：细胞膜蛋白有助于细胞的粘附，维持组织及器官的完整性。
二、质谱技术在细胞膜蛋白研究中的应用质谱是一种广泛应用于生物化学和生物学等领域的技术，它能够高效、准确地检测和分析生物分子。
在细胞膜蛋白研究中，质谱技术被广泛应用，并取得了一系列重要成果。
1.质谱能够帮助识别细胞膜蛋白从细胞膜提取蛋白质，肯定会包含许多不同种类的蛋白质。
通过质谱技术，可以在蛋白质混合物中识别出特定的细胞膜蛋白。
2.质谱可帮助测量细胞膜蛋白的质量通过质谱技术，可以精确测量细胞膜蛋白的质量。
细胞膜蛋白的质量对于了解其结构和功能都至关重要。
3.质谱可帮助研究蛋白质相互作用在生物细胞中，不同蛋白质之间可能会相互作用，并发挥生物学效应。
利用质谱技术，可以分析蛋白质之间的相互作用关系，帮助理解各种细胞膜蛋白的功能及相互作用机制。
4.质谱可帮助研究细胞膜蛋白修饰质谱技术可以帮助检测和分析不同的蛋白质修饰，例如磷酸化、乙酰化、甲基化等。
这些修饰在细胞膜蛋白的功能中起到至关重要的作用。
5.质谱可用于分析药物与细胞膜蛋白的相互作用药物与细胞膜蛋白之间的相互作用是很多药物研究的重点之一。
利用质谱技术，可以分析药物与细胞膜蛋白之间的相互作用、研究药物的作用机制。
FTMS原理及应用
布鲁克公司solariXsolariX超高分辨四极杆串联傅立叶变换质谱仪（FT-ICR-MS）目录一、基本原理简介二、solariX 仪器特点和技术革新布鲁克solariX主要技术革新概括低运行成本、高稳定性——制冷型高强度主动屏蔽式磁体实现真正的全谱高分辨——32MB高速数据采集处理系统离子产生即捕获——双重离子漏斗 + 一体化线性捕获模式MALDI or/and ESI一键式切换——DualSource TM双通道离子源高速、稳定、长寿、可调——SmartBeam TM激光系统“鸡立鹤群”，弱势离子群体的福音——CASI TM离子选择性富集Data Dependent CID、ECD、ETD或组合解析——蛋白质组在线解决方案三、相关应用及解决方案小分子未知物及结构研究气相化学反应的研究代谢组学蛋白质组学其它复杂体系：如石油组学，请参见所附文献综述离子回旋共振（ICR）质谱技术出现于上世纪五十年代，Marshall 和Comisarow [1]首次把傅立叶变换（FT）技术用于离子回旋共振质谱，1980 年开始，FT-ICR MS 技术采用超导磁体，大大提高了仪器的分辨率和稳定性，同时扩展了仪器的检测范围。
电喷雾电离技术（ESI）以及基质辅助激光解吸电离（MALDI）技术出现后，很快就成功地与FT-ICR MS 联用，并在蛋白质组学研究领域取得十分引人注目的成果，FT-ICR MS 已经成为生物大分子研究的基本手段之一[2]。
FT-ICR MS 以其独特的工作原理使它具有非凡的性能，越来越受到人们的极大关注，无论在仪器技术方面，或者是应用研究方面均取得十分迅速的发展[3]。
一、基本原理简介质谱仪是测定离子“质量”的仪器，根据电离方式和质量分析器不同，可以分为多种类型。
傅立叶变换离子回旋共振（FT-ICR）质谱的分析器是一个置于均匀（超导）磁场中的空腔，如图1-1所示。
离子沿平行于磁场的方向进入分析室并被拘禁在室内，在磁场的作用下，离子在垂直于磁场的圆形轨道上作回旋运动，回旋频率（ω）仅与磁场强度（B）和离子的质荷比（m/z）有关（式1）：ω=2πν=q B/m ……式1图1-1. ICR分析器在垂直磁场方向上设置互相垂直的两组电极，一组电极激发离子使其以较大半径产生回旋运动，另一组则接收由周期性运动于两极之间带电离子产生的感应电流，感应电流周期与离子的回旋运动周期相同。
傅里叶磁回旋共振质谱
傅里叶磁回旋共振质谱
傅里叶磁回旋共振质谱（Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry，FT-ICR MS），是一种高分辨质谱分
析技术。
该技术基于离子在磁场中的寿命为毫秒，可以用超导磁体产
生的强磁场控制离子在空间中的运动轨迹，利用离子的质荷比在外加
射频电场下形成一个稳定的圆周轨道，并测量离子在该轨道上偏转的
频率。
在外加反转的直流电场的作用下，离子还将进一步沿着相反方
向进行祖母前进，通过判断离子回旋的频率和信号附加的幅度的变化，可以获得准确的分子式、分子量和结构信息。
该技术具有高分辨率、
高灵敏度、高分离能力等优点，已经广泛应用于生物大分子、天然产物、有机化合物等复杂样品的分析和检测。
傅利叶变换离子回旋共振质谱在团簇化学中的应用(Ⅰ)第一过渡系金属离子与丙烯腈的吸附和反应
傅利叶变换离子回旋共振质谱在团簇化学中的应用(Ⅰ)第一过
渡系金属离子与丙烯腈的吸附和反应
佚名
【期刊名称】《质谱学报》
【年(卷),期】2000(21)3
【摘要】无
【总页数】1页(P1)
【正文语种】中文
【相关文献】
1.傅里叶变换离子回旋共振质谱的地球化学意义及其在油气勘探中的应用前景
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4.过渡金属离子与乙腈团簇的反应
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收稿日期:2002211204基金项目:国家自然科学基金资助项目(20175034)作者简介:作者简介:刘晗青(1979～),女(汉族),江苏省常州市人,硕士研究生,分析化学专业3通讯作者:郭寅龙(1962～),男(回族),博士,研究员,分析化学专业,E 2m ail :ylguo @pub .si oc .ac .cn第24卷第2期2003年5月质谱学报Jou rnal of Ch inese M ass Spectrom etry SocietyV ol .24 N o .2M ay 2003傅立叶变换-离子回旋共振质谱法在蛋白质分析中的应用刘晗青,郭寅龙3(中国科学院上海有机化学研究所,上海 200032)[作者简介]:刘晗青,2001年毕业于中国药科大学,2001级中科院上海有机化学研究所分析化学专业硕士研究生。
主要进行生物质谱方向的研究。
在郭寅龙研究员的指导下,进行生物样品微量分析的高灵敏间歇电喷雾方法学研究,在《化学学报》等刊物上发表论文两篇。
摘要:对傅立叶变换2离子回旋共振质谱(FT I CRM S )的仪器特点及FT I CRM S 在研究蛋白质结构鉴定、蛋白质翻译后修饰和蛋白组学中的应用等方面进行了综述和讨论。
给出参考文献45篇。
关键词:质谱学;蛋白质分析;综述;傅立叶变换2离子回旋共振质谱(FT I CRM S )中图分类号:O 657163;Q 51217 文献标识码:A 文章编号:100422997(2003)0223632071 傅立叶变换-离子回旋共振质谱的仪器特点傅立叶变换2离子回旋共振质谱法(FT I CRM S )是离子回旋共振波谱法与现代计算机技术相结合的产物。
傅立叶变换2离子回旋共振质谱法是基于离子在均匀磁场中的回旋运动,离子的回旋频率、半径、速度和能量是离子质量和离子电荷及磁场强度的函数,当对离子施加与其回旋频率相同的射频场作用时,离子将同相位加速至一较大的半径回旋,从而产生可被接受的类似电流的信号。
傅立叶变换2离子回旋共振质谱法所采用的射频范围覆盖了欲测定的质量范围,所有离子同时被激发,所检测的信号经过傅立叶变换,转换为质谱图。
傅立叶变换2离子回旋共振质谱仪的优点十分突出[1],主要优点如下:(1)容易获得高分辨率。
FT I CRM S 的分辨率在一个较宽的质荷比范围内极高,远远超过其它类型的质谱仪[2]。
在一定的频率范围内,只要在足够长的时间内进行采样,均可获得高分辨数据,这样就能获得高的质量准确性[3～5]。
用FT I CRM S 可得到精度很高的精确质量数,这对于得到离子的元素组成是很重要的。
Schu rch 等[6]用N 2羧基苯邻二甲酰亚胺标记,鉴于FT I 2CRM S 的高分辨率,鉴定肽段时质量误差仅为0.003D 。
Kelleher 等[7]根据FT I CRM S 的高分辨率,设计不用色谱分离直接鉴定出CH 3 CD 32标记的肽的方法;(2)便于实现串极质谱分析。
可完成多级(时间上)串联质谱的操作,由于它可提供高分辨的数据,因而信息量更丰富。
多级串联质谱中采用碰撞诱导解离(Co llisi on 2induced dissociati on ,C I D )技术,将待分析的多肽离子在碰撞阱中分离,选中合适的离子碎成碎片,并记录片段的离子谱图。
理论上,任何一个多肽的C I D 谱包含了鉴定该蛋白质足够的信息[8,9](主要指低碰撞能的C I D)。
这种技术不仅可以用于纯蛋白的分析,而且可用于多种蛋白质的酶解混合物分析,理论上每个蛋白质如果至少能有一个多肽离子产生C I D谱,就能鉴定出该蛋白质。
因此,可能简化蛋白质水解前繁复的纯化步骤,并且可以直接分析蛋白质的混合样品,这就恰好满足了蛋白组计划分析大量蛋白质的需要。
但到目前为止,C I D谱图的解析仍是蛋白组工作的一个瓶颈。
(3)便于使用外电离源并与色谱仪器联用。
FT I CRM S一般采用外离子化源,便于与各种色谱仪器联用。
除此之外,灵敏度高[10]、质量范围宽、速度快、性能可靠等也是FT I CRM S的优点。
许多研究证明了质谱成功用于蛋白质四种结构的研究,即一级结构(氨基酸的线性序列)、二级结构(氨基酸折叠成定义好的形状)、三级结构(全部的三维折叠)及四级结构(多蛋白复合物中折叠多肽的空间安排)。
但是到目前为止,质谱在蛋白组学中的应用主要还是集中于一级结构的研究。
2 傅立叶变换2离子回旋共振质谱在蛋白质一级结构分析中的应用传统上,蛋白质的鉴定是从头测序,多数是自动的,逐步的化学降解(Edm an降解)蛋白质,然后分离多肽片段[11]。
这些局部顺序依靠重叠的片段拼装组合出整个蛋白质的顺序,但是更多的用于探针从基因库分离出编码该蛋白的基因。
随着序列数据库的增大,很明显,即使相对较短或不完善的序列(缺口,模糊的残基)对蛋白质的鉴定都是很有用的。
当意识到质谱能比较理想的产生期望的数据时,用从蛋白质或多肽提取的信息和序列数据库相关联的方法,而不是从头测序进行蛋白质鉴定的观念已经逐渐地深入人心[12]。
2.1 准确质量测定对蛋白质结构分析的应用价值氨基酸顺序测定的第一步就是蛋白质分子量的确定,这能为测定蛋白质分子中多肽链的数目和用质谱方法测定各个肽段的氨基酸顺序提供最基础的数据。
质量准确性的提高不仅能提高数据库搜索的速度,还能大大提高鉴定的可信度[13～15]。
用丰度为99%的13C标记物培养基培养细菌,使磷脂中的12C被13C所取代,一旦C原子数已知,有n个碳原子质量数就会增加n,比较分别用ES I FT I CRM S和(C I D)FT I CRM S 测得的天然和99%丰度的13C标记物培养基中磷脂的谱图,准确质量测定使其元素组成为唯一的可能[16]。
D em irev等[17]组合使用完整蛋白质的准确质量测定和蛋白组数据库,显著提高了鉴定微生物的特异性。
H e等[18]最近组合使用了高的磁场(9.4T),大的Penn ing阱的直径(101.6 mm)及低的离子浓度,用Λ2ES I FT I CRM S检测两种肽时质量分辨能力很高,这有可能成为蛋白组学研究的新突破点。
ES I FT I CRM S的准确质量测定还能可信的证实不确定的离子组成[19]。
2.2 蛋白质分子中氨基酸序列的测定蛋白质一级结构测定的一个最灵敏和最普遍的方式就是先用二维聚乙酰胺凝胶电泳分离蛋白质混合物,以胰蛋白酶消解,质量分析(分辨和分离一个特别的肽段)并最终用质谱方法产生一个至少是部分的氨基酸一级结构。
肽质量图谱(Pep tide m ass m app ing)是蛋白质一级结构测定一种最常用的手段。
肽质量图谱是基于序列特异性蛋白酶水解蛋白质衍生出来的肽的一个基团的准确质量的测定,是蛋白质鉴定的一个高效的方法。
不同氨基酸序列的蛋白质用序列特异性的蛋白酶水解后将会产生一系列该蛋白独特的质量指纹。
因此,如果用选择好的质量数(观察到的肽质量指纹)在一个包含有该特异蛋白的序列数据库中搜索,该蛋白就能依赖这个数据库正确的鉴定了。
采用纳流量液相色谱与傅立叶变换2离子回旋共振质谱联用,提供了一系列的胰蛋白酶消解后的母离子和子离子的质量,质量的准确性达到了10-6数量级,从而进一步确证了人肝的三种二乙酰基还原酶[20]。
另外采用n2ES I FT I CRM S在pm o l数量级的灵敏度上获得了蛋白质消解物的准确的质量指纹图谱,缩小了数据库的搜索范围并降低了搜索的噪声,测得了该种乙醛氧化酶的序列[21]。
应用ES I FT I CRM S和红外多光子解离(I R m u lti p ho ton dissociati on, I RM PD)可对一种糖激酶进行分子量和肽的一级结构的精确测定[22]。
2.3 蛋白质分子中二硫键位置的确定蛋白质分子中常有二硫键作为共价键交联463质谱学报 第24卷 一条多肽链链内或多条多肽链链间的两个半胱氨酸,确定二硫键的位置对于鉴定蛋白质一级结构有着重要意义。
近来Ge Y ing等[23]用电子捕获解离(E lectron cap tu re dissociati on,ECD)技术成功地对大肠杆菌的细胞抽提物中催化维生素B1生物合成的几种酶进行了二硫键等全面的结构鉴定。
2.4 在分析蛋白质表达上的应用获得蛋白质表达程度方面的信息是很有价值的,因为这是一个给定细胞的特征状态,直接反映了该细胞的生理功能,并且和信使核糖核酸(M essager ribonucleic acid,m RNA)表达的程度不直接相关。
常用的方法是用稳定性同位素标记(如2H,13C,15N等)。
样品中所有的肽以相同的序列对出现,但是质量不同。
因为这些肽对有相同的物化性质,它们在分离和离子化时就能表现相同的性质。
因此,低质量和高质量成分的信号强度的比就能提供一个可信的准确的这两种肽的相对比例。
Sm ith等[24]用贫化天然丰度极低的同位素(如贫化13C,15N,2H)标记的培养基和普通培养基培养细胞,为所有待检测的蛋白质提供了“内标”。
将用普通的细胞与标记的细胞在样品处理过程前混合,这样就排除了细胞裂解、分离和质谱分析引入的实验误差。
最后,用FT I CRM S 检测并比较了200种不同的蛋白质。
后来发展了更高效方便的定量方法——同位素编码亲和标记法(Iso top e2coded affin ity tags,I CA T)[25]。
这种方法是用重的同位素试剂(d8)和一般试剂(d0)对半胱氨酸选择性烷基化。
混合两种蛋白质的混合物,用胰蛋白酶水解,通过一个单体抗生物素蛋白的琼脂糖柱子,富集有生物素标记的蛋白质。
用微毛细管液相色谱2电喷雾电离串级质谱(L C2ES I2M S M S)选择性分离,I CA T2标记的肽对的离子信号强度就可以精确的提供两种蛋白的定量信息,随后的M S M S可以用来鉴定该种蛋白质。
I CA T试剂的使用同时实现了蛋白质的定性和相对定量[26]。
3 傅立叶变换2离子回旋共振质谱在研究蛋白质翻译后修饰中的应用生物活性的肽要表达它们的生物活力,就要在细胞中通过一系列的生物过程来合成,这一系列的过程起始于转录,然后翻译成前体蛋白。
新生的前体蛋白再通过内质网,高尔基复合体等转运时发生蛋白水解和翻译后修饰生成有活力的肽。
重要的翻译后修饰包括蛋白质水解、酰基化、羧基化、糖基化、脂化、胺化、磷酸化和硫酸化。
蛋白质经过这样的修饰,在结合、催化、调节以及物理性质等方面都被赋予了新的功能。
3.1 蛋白质分子中磷酸化肽的序列的分析仅次于蛋白质水解,蛋白质磷酸化是最重要和独特的一种翻译后修饰。
能进行磷酸化的氨基酸有丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸。
蛋白质磷酸化和去磷酸化的重要性在于在细胞信号传递过程中的作用及对许多蛋白质、激素、神经递质和肽等保持生物功能的关键性作用。