(完整版)Agilent1260液相色谱系统操作规程
Agilent1260液相色谱仪操作规程
Agilent 1260 液相色谱仪操作规程一、准备工作a)启动计算机:打开计算机,登陆windows操作系统。
b)启动工作站:开启Agilent 1260各模块电源,待Agilent 1260各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色),点击LC1260(联机)。
c)开启工作站:进入工作站,点击“方法和运行控制”或者在“视图”中选择“方法和运行控制”。
打开仪器控制视图:选择“视图->系统视图”,即可显示仪器控制视图。
d)配置流动相:将流动相装入溶剂瓶中。
设置溶剂瓶参数,在溶剂瓶图形上单击鼠标左键,点击“溶剂瓶填充量”设置溶剂瓶中流动相实际体积,也可设定低体积关泵;溶剂要求:色谱级纯或优级纯乙腈或甲醇,二次蒸馏水。
e)冲洗流动相管路:反时针旋开泵模块上的溶液排空阀。
右键单击泵视图的空白处,选择“方法”,设置“流速”为5ml/min。
对于G1311X(四元泵)分别将A,B,C,D 四个通道设置“溶剂”为100%,冲洗至管线内无气泡为止; 设置溶剂比例为初始比例,“流速”为1ml/min,关闭Purge阀。
f)开启模块:开启模块:鼠标右键点击每个模块的空白处都会弹出提示框,选择“控制”即可在新的窗口中选择打开或者关闭各个模块。
也可在仪器视图中选择“打开”。
g)监视基线:点击“视图->在线信号”打开“在线图谱”。
h)平衡色谱柱、进样分析:监视压力和信号基线等待平稳后,可以进样采集分析。
二、数据采集方法编辑a)方法编辑:在“方法和运行控制”状态下,单击“方法”菜单,选择菜单中“新建方法”,调用化学工作站的默认方法DEF-LC.M ,选择“方法”菜单下的“编辑完整方法”,设置好泵参数、进样方式、柱箱温度、波长、积分参数等,即可开始编辑一个完整地方法。
b)方法存贮:在“方法和运行控制”状态下,单击“方法”菜单,选择菜单中“方法另存为”选项,方法以检测项目名存贮。
三、样品信息编辑a)运行单个样品:在“方法和运行控制”状态下,单击“运行控制”菜单,选择“样品信息”进行样品信息编辑。
(完整word版)Agilent1260安捷伦高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程
Agilent 1260(四元泵)高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程Agilent 1260(四元泵)高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程1目的建立1260(四元泵)高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程,规范人员操作。
2 适用范围适用于Agilent(四元泵)高效液相色谱仪的使用与维护。
3 责任与监督检验人员负责执行本规程,部门负责人监督本规程的实施。
4 规程细则4.1仪器原理高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱,对供试品进行分离测定的色谱方法。
注入的供试品,由流动相带入色谱柱内,各组分在柱内被分离,并进入检测器检测,由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。
4.2仪器操作4.2.1系统组成:本系统由四元梯度泵、VWD检测器、自动进样器、柱温箱及Openlab Chemstation工作站和台式电脑等组成。
4.2.2操作前准备:4.2.2.1流动相的选择分类:组成分——单组分和多组分极性-极性、弱极性、非极性常用溶剂:甲醇、水、乙腈、乙醇、乙酸乙酯、四氯化碳等。
(溶剂最好为HPLC级,水为纯化水)其中多采用二元或多元组合溶剂作为流动相,通过调节各组分的比例改变流动相的极性,已达到最佳的分离效果,对于部分情况还可以加入缓冲盐,调节出峰时间和达到改善峰型的效果。
4.2.2.2流动相的选择为了除去流动相中的杂质,保护系统和色谱柱,在流动相使用完,装入新的溶剂前应使用抽滤瓶对溶剂进行过滤。
4.2.2.3流动相的超声与脱气为了除去溶解在流动相中的气泡,降低基线噪音,在HPLC开机前应把各溶剂瓶在超声机中超声10-15min左右。
对于溶解在流动相中的极微气体,安捷伦1260HPLC四元泵中集合了脱气机,可以进一步对混合后的流动相进行脱气处理。
4.2.2.4流动相冷却流动相在超声机中长时间超声后,由于水分子振动摩擦,使水温上升,因此流动相瓶中的溶剂也会被加热。
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、仪器介绍二、前期准备1.打开仪器电源,待仪器自检完成后,确保所有指示灯都亮起。
2.检查溶剂瓶的液位,确保足够的溶剂供给。
3.清洁好色谱柱并连接到系统中。
三、仪器启动1.打开色谱软件,选择相应的方法。
2.点击“系统”菜单,选择“启动系统”命令,系统开始进行初始化。
3.在系统初始化完成后,点击“准备”菜单,选择“准备系统”命令,系统开始进行一系列的自动化准备工作,比如冲洗和平衡柱子。
4.检查系统的压力和温度,确保在正常范围。
四、样品进样1.准备好待测样品和标准品。
2.将样品装入进样瓶中,注意不要超过瓶口。
3.将进样瓶插入样品进样系统中,按照方法设置的条件进行进样。
4.点击软件界面上的“进样”按钮,开始进样。
五、色谱柱选择1.根据待测样品的性质和分离特点,选择合适的色谱柱。
2.将色谱柱连接到色谱仪系统中。
3.检查色谱柱的压力和温度,确保在正常范围。
六、色谱条件设置根据分析方法的要求,设置好色谱条件,包括流量、温度、柱温等参数。
七、检测器设置1.根据需要选择合适的检测器,比如紫外检测器、荧光检测器等。
2.设置检测器的工作参数,如波长、增益、基线噪声等。
八、开始分析1.在样品进样后,点击软件界面上的“开始”按钮,开始进行色谱分析。
2.监控检测器输出的信号,根据需要可以对信号进行放大或调整。
九、结果解析1.根据所用方法的要求,对分析结果进行解析。
2.可以通过软件导出结果并进行后续处理。
十、仪器关机1.关闭色谱仪软件。
2.关闭色谱柱进样系统。
3.关闭色谱仪电源。
此为安捷伦1260高效液相色谱仪的操作规程,希望能对使用者提供一定的参考和帮助。
在操作过程中,应严格按照安全操作规范进行,并及时进行维护和保养,以保证仪器的正常运行。
Agilent1260高效液相色谱仪操作规程
Agilent1260⾼效液相⾊谱仪操作规程1、⽬的确保Agilent 1260⾼效液相⾊谱仪的正确使⽤及管理。
2、范围研发分析中⼼实验室Agilent 1260⾼效液相⾊谱仪。
3、责任仪器使⽤者对本标准的实施负责。
4、内容4. 1 开机4.1.1打开计算机,进⼊Windows 画⾯。
4.1.2⾃下⽽上打开1260LC各模块电源,待各模块⾃检完成后,双击电脑桌⾯上LC1260-1(Online)图标,化学⼯作站⾃动与1260LC通讯,进⼊⼯作站画⾯。
4.1.3单击【View】菜单选择【Method and Run control】项,也可单击⼯作站画⾯左下⾓【Method and Run control】项,进⼊⽅法和运⾏控制窗⼝。
4.2 安装⾊谱柱正确安装实验所需的⾊谱柱,注意⾊谱柱流速箭头⽅向,试验过程中需检查是否存在漏液。
4.3 溶剂瓶体积设置把事先配好的流动相倒⼊相应的溶剂瓶中,单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下【Bottle filling】,在参数设置处输⼊各溶剂瓶(A、B、C、D)内溶液实际体积和停泵体积,单击【OK】键,即可。
4.4 设置【Seal wash】单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在seal wash这栏中选择“On”, 清洗功能开始运⾏,并设置清洗时间,每隔5min清洗0.1min。
4.4 脱⽓逆时针旋开Purge阀,单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在“pump”这栏中选择“On”,泵开始运⾏。
设置“solvents”⼀栏中相应参数,将试验中所⽤到的管道逐⼀脱⽓,直⾄管内(由溶剂瓶到泵⼊⼝)⽆⽓泡为⽌所需时间,3ml/min冲洗⼤约需5min~10 min ,,完成后选择“off” , 单击OK键关泵,顺时针旋紧Purge阀。
安捷伦1260操作规程
安捷伦1260操作规程安捷伦(Agilent)1260操作规程一、仪器概述安捷伦1260高效液相色谱仪是一种用于液相色谱分析的仪器,具有高灵敏度、高分辨率和高效率的特点。
该仪器由进样器、色谱柱、色谱泵、检测器等组成。
二、仪器准备1. 确保仪器的电源已连接并接通。
2. 检查进样器、色谱柱和检测器是否安装正确。
3. 检查液相色谱仪的液相系统是否已进行适当的液相填充,以及是否有足够的溶剂。
三、方法设置1. 打开色谱软件,并选择合适的方法模板。
2. 根据分析需求,在方法设置中输入样品信息、进样量、流速等参数。
3. 设置检测器的波长、增益和测量范围。
四、进样操作1. 打开进样器的盖子,将待测样品加入样品瓶中。
2. 点击软件中的进样按钮,设置样品名称和进样量。
3. 将样品瓶放入进样器,并关闭盖子。
4. 点击软件中的进样按钮,开始进样。
5. 进样完成后,从进样器中取出样品瓶,并将它放入垃圾桶中。
五、色谱柱操作1. 打开色谱柱的阀门,并将柱端与色谱柱连接。
2. 检查色谱柱是否没有泄漏,如果有泄漏,则需重新连接。
3. 检查色谱柱的温度,确保它处于合适的温度范围内。
六、液相泵操作1. 打开液相泵的电源,并连接到电脑上。
2. 设置合适的流速和梯度梯度。
3. 点击软件中的启动按钮,开始进行分析。
七、数据分析1. 使用色谱软件进行数据采集和分析。
2. 根据需要选择适当的数据处理方法,如峰面积计算、定量分析等。
3. 导出分析结果并保存。
八、仪器维护1. 分析结束后,关闭液相泵、进样器、色谱柱和检测器等设备的电源。
2. 清洗色谱柱和进样器,保持其清洁。
3. 定期检查仪器的连接线和电源线是否有松动或损坏。
九、安全操作1. 在操作仪器时,注意安全,避免接触到有害化学品。
2. 在操作过程中,严禁随意触摸仪器或移动连接线。
3. 在操作过程中,如遇到异常情况,请及时停止分析并向管理员报告。
通过以上操作规程,可以有效地使用安捷伦1260高效液相色谱仪进行样品分析。
Agilent 1260 HPLC高效液相色谱仪操作规程
3.3 上述技术指标检查正常后,进行样品测试分析。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。
3.4 测试完成后,在HPLC工作站的交互式图谱中对检测结果进行分析和计算,打印出结果报告。
4关机。
4.1 依次关闭泵、检测器、HPLC工作站、计算机、通风设备。
4.2切断电源。
4.3 对检测过程中的废液应按相关的要求处理。
4.4 填写仪器使用记录,清洁整理工作现场。
5 注意事项
在测试过程中,仪器设备出现异常情况,应立即停止测试,并关机,上报单位处理。
Agilent 1260 HPLC高效液相色谱仪操作规程
1 开机前的准备
1.1 查看“仪器使用记录”,检查电源、环境条件。
1.2 根据检测项目,连接泵、分离柱、检测器的流动相管道,用排气阀对管路进行排气。
1.3 长时间未使用或者换了新的流动相,应对泵和进样阀进行冲洗。
2 开机
接通电源。依次打开计算机、HPLC工作站。检查流动相管道连接,看有无漏液等现象。进入HPLC控制界面主菜单。
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注意事项安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注意事项安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注意事项一、操作规程? 开机1(把经过滤、脱气的各流动相装入贮液瓶中。
2(打开计算机,打开主机各模块电源(从上至下),再双击桌面“LC1260(联机)”图标,进入化学工作站。
3(旋开排气阀(逆时针),右键单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”选项进入泵编辑画面。
将泵流量设为“5mL/min”,溶剂A设为“100%”,打开泵,排出管路中的气体,直到由贮液瓶到泵入口整个管路中无气泡为止,此过程约需要5min。
4(依次切换到溶剂B、C、D,分别排气。
? 数据采集1. 编辑样品信息:由“运行控制”进入“样品信息”,设定操作者姓名,样品数据,文件名等。
2. 编辑完整方法:从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项,单击“确定”进入“方法注释”,编辑好单击“确定”。
在“选择进样源”中选择“手动进样”单击“确定”,在“设置方法”中进行参数设定。
3. 四元泵参数设定:在“流速”处输入流量,如1mL/min,在“溶剂”处依据需要选中B、C、D并输入相应的百分数,在右侧注释栏中标明各溶剂的名称;设置“停止时间”和“后运行时间”,在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子,在“时间表”添加编辑梯度。
4. TCC(柱箱)参数设定:在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度,并选中它,右侧选中“与左侧相同”,使柱箱的温度左右一致。
5. VWD检测器参数设定:在“波长”右侧的空白处输入所需的检测波长,在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间,再设置“停止时间”和“后运行时间”。
6. 仪器曲线设置:默认即可。
7. 关闭排气阀(顺时针),冲洗色谱柱20~30min,待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情况。
8. 将进样器转动手柄逆时针转到LOAD位置,在环路全量进样时(定量环体积为20uL),用50~100 uL的液相进样针将2~5倍定量环体积的样品缓慢注入进样器中,再将进样器转动手柄顺时针方向迅速转到INJECT位置,将定量环中样品引入系统中。
Agilent1260液相色谱仪器操作规程(新)
Agilent1260液相色谱仪器操作规程一.生产厂家:美国Agilent二.到货日期:2011年1月三.附件:电脑、打印机四.使用范围:用于三聚氰胺,维生素A、D、E,β-胡萝卜素,牛磺酸,山梨酸、苯甲酸,乳糖、蔗糖等的检测五.工作环境:温度15℃~30℃,湿度20%~80%六.操作步骤:1.开机前准备:1.1.打开仪器室的空调。
1.2.配制流动相(按国标),准备好蒸馏水、乙腈和甲醇。
2.开机:2.1.打开1260液相色谱仪器的进样器、泵、柱温箱和检测器的电源。
2.2.打开计算机。
2.3.打开“仪器1联机”图标,各模块完成自检。
2.4.点击“打开”图标,进入化学工作站。
3.设置运行模块和方法3.1.进样器(自动进样器)3.1.1.设置进样量,在“进样器”的模块中,点击鼠标右键,在“方法”中,按照国标,检测不同物质,设定不同的进样量。
反相:最大进样量为100ul,抽取速度一般设定200ul/min。
正相:最大进样量为500ul,抽取速度一般设定200~500ul/min。
3.1.2.设置进样器停止时间,在“进样器”的模块中,点击鼠标右键,在“方法”中,如标样的出峰时间为7分钟,停止时间可以设置为8分钟以上。
3.2.泵(四元泵或单泵)3.2.1.泵的流速:在“泵”的模块中,点击鼠标右键,点击“方法”,按照国标要求,如设置1.00ml/min。
3.2.2.如果是四元泵,可选择溶剂瓶,输入需要使用的各溶液的比例,如B 蒸馏水90%,C乙腈10%,点击“确认”。
3.2.3.在“泵”的模块中点击鼠标右键,点击“控制”,选择“泵”(打开),确认。
3.2.4. 设置泵停止时间:在“泵”的模块中,点击鼠标右键,点击“方法”,一般选择“与进样器一致/无限制”。
3.2.5. 压力限值:最小值一般设0bar,最大值一般设100bar。
3.3.柱温箱3.3.1.设置柱温箱的温度:在“柱温箱”模块中,点击鼠标右键,点击“方法”,左边按照国标要求可设置,比如35度,一般右边设置同左边。
agilent 1260高效液相色谱仪标准操作规程
标准操作规程STANDARD OPERATING PROCEDURE的准确性,特制定此规程。
2 范围:本规程适用于Agilent 1260高效液相色谱仪的使用、维护和保养。
3 责任者:化验员4 程序:4.1 开机4.1.1 打开计算机,输入用户名和密码,进入Windows 7画面。
4.1.2 打开1260 LC 各模块电源(不分先后)。
待各模块自检完成后,双击“仪器1联机”图标,化学工作站自动与1260 LC通讯,进入工作站。
(注意:在“仪器1脱机”关闭的情况下,“仪器1联机”方能打开。
)4.1.3 从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,来调用所需的界面,正常情况会默认进入此界面。
4.1.4 保对应溶剂瓶装入所要使用的流动相,左击“四元泵”模块下的“溶剂瓶”图标或右击“四元泵”下选择“瓶填充”,输入溶剂的实际体积和瓶总体积,可输入停泵的体积。
单击“确定”。
(注意:此操作很重要,以免气泡进入系统)。
4.1.5 轻轻旋开泵上的冲洗阀(缓缓旋开约1/4即可,不可用力太过)。
右击“四元泵”图标,出现参数设定菜单,单击“方法”选项,进入泵编辑画面。
设流量,从0 ml/min 逐渐变为3ml/min,溶剂A设到100%;单击“确定”。
右击“四元泵”图标,选择“控制”选项,选中“打开”,单击“确定”,则系统开始排气,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止;切换到通道同法继续排气,直到所有要用通道无气泡为止(只需排所用到的通道即可)。
4.1.6 右击“四元泵”图标,出现参数设定菜单,单击“方法”选项,进入泵编辑画面。
设流量为:0ml/min,单击“确定”,轻轻关闭排气阀(旋紧即可)。
4.2 数据采集方法、系列编辑:4.2.1 编辑完整方法:4.2.1.1 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项,选中除“数据分析”外的三项,单击“确定”,进入下一界面“方法注释”。
4.2.1.2 方法信息:在“方法注释”中写入方法的相关信息。
Agilent 1260液相简明操作规程
1260液相色谱仪操作规程
一. 仪器的操作
1.开机:电脑→液相→工作站图标
2.新建方法(或调用已有方法)
3.设置参数:
自动进样器:进样量、标准进样/洗针进样(洗针位) 泵:流速→溶剂比例(等度/梯度)→采集时间→打开泵 柱温箱:温度→打开柱温箱
检测器:波长→打开紫外灯
4.等待系统平衡:(打开系统)→系统就绪→基线平
5.设置单针进样:
操作者→子目录→前缀/计数器→样品位置→运行方法 6.设置序列进样:
序列参数:操作者→子目录→前缀/计数器
序列表:样品瓶→方法名称→进样次数→(数据文件)→运行序列
7.冲柱:
10%有机溶剂(甲醇或乙腈)+90%水 20分钟→100%有机有机溶剂(甲醇或乙腈)20分钟
8.关机:
关闭模块→关闭仪器电源→关闭工作站→关闭电脑
二. 数据的分析
1.调用方法
2.调用信号
3.图形优化:
信号选项→范围(时间范围、响应范围)
4.积分优化:
积分事件→积分开/关→斜率灵敏度、峰宽→最小峰面积、最小峰高→保存退出
5.校正:
新建校正表→化合物→含量→确定
6.报告:
设定报告→定量结果(百分比法/外表法)→报告类型
(简短报告/性能报告)→色谱尺寸(时间80,响应20)→预览报告→打印
7.保存方法:方法另存为
三. 仪器的维护
1.泵 :
过滤白头、被动阀、泵杆和密封圈
2.脱气机 :
冲洗、保存在有机相、交替使用AD路
3.自动进样器 :
洗针进样、更换针、更换针座、更换密封垫
4.检测器:
更换氘灯、流通池
5.溶剂:需要抽滤
6.样品:需要过滤。
Agilent1260高效液相色谱仪标准操作规程
文件内容:1、目的 (1)2、范围 (1)3、职责 (1)4、内容 (1)5、变更记载和原因 (4)颁发部门:质量部发放范围:□质量部□生产部□物流部□人事行政部□设备动力部1.目的:能正确使用仪器,确保化验结果的准确度、精密度,延长仪器使用寿命。
2.范围:适用于Agilent1260高效液相色谱仪及色谱数据工作站的操作。
3.职责:质量控制检验员。
4.内容:4.1 开机:4.1.1 打开计算机,登陆windows操作系统。
4.1.2 打开主机各模块电源(从上至下),待各模块完成自检后,再双击桌面“仪器1联机”图标,进入化学工作站,从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。
4.1.3 把各流动相放入溶剂瓶中。
4.1.4 旋开排气阀(逆时针),右单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”选项进入泵编辑画面。
将泵流量设到5ml/min,溶剂A设到100%,打开泵,排出管线中的气体2—3分钟,直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力。
4.1.5 依此切换到B、C、D溶剂分别排气。
4.1.6 将泵的流量设到0.5ml/min,多元泵则再设定溶剂配比,如A=80%,B=20%;关闭排气阀(顺时针)。
4.1.7 再将泵的流量设到0.8ml/min,2分钟后将泵的流量设到1ml/min,冲洗色谱柱20—30分钟。
4.1.8 把缓冲液换成流动相,待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情况。
4.2 数据采集方法编辑:4.2.1编辑样品信息:由“运行控制”进入“样品信息”,设定操作者姓名,样品数据文件名等。
4.2.2编辑完整方法:从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项.选中项单击“确定”进入下一画面“方法注释”,编辑好单击“确定”进入下一画面“选择进样源”,选中Als单击“确定”进入下一画面“设臵方法”进行参数设定。
4.2.3四元泵参数设定:在“流速”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂”处输入比例,如:B:80%(A=100-B-C-D),在右面注释栏中标明各溶剂的名称;设臵“停止时间”和“后运行时间”,在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子如:250bar,在“时间表”添加编辑梯度。
Agilent 1260高效液相色谱仪操作规程
1、目的确保Agilent 1260高效液相色谱仪的正确使用及管理。
2、范围研发分析中心实验室Agilent 1260高效液相色谱仪。
3、责任仪器使用者对本标准的实施负责。
4、内容4. 1 开机4.1.1打开计算机,进入Windows 画面。
4.1.2自下而上打开1260LC各模块电源,待各模块自检完成后,双击电脑桌面上LC1260-1(Online)图标,化学工作站自动与1260LC通讯,进入工作站画面。
4.1.3单击【View】菜单选择【Method and Run control】项,也可单击工作站画面左下角【Method and Run control】项,进入方法和运行控制窗口。
4.2 安装色谱柱正确安装实验所需的色谱柱,注意色谱柱流速箭头方向,试验过程中需检查是否存在漏液。
4.3 溶剂瓶体积设置把事先配好的流动相倒入相应的溶剂瓶中,单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下【Bottle filling】,在参数设置处输入各溶剂瓶(A、B、C、D)内溶液实际体积和停泵体积,单击【OK】键,即可。
4.4 设置【Seal wash】单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在seal wash这栏中选择“On”, 清洗功能开始运行,并设置清洗时间,每隔5min清洗0.1min。
4.4 脱气逆时针旋开Purge阀,单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在“pump”这栏中选择“On”,泵开始运行。
设置“solvents”一栏中相应参数,将试验中所用到的管道逐一脱气,直至管内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止所需时间,3ml/min冲洗大约需5min~10 min ,,完成后选择“off” , 单击OK键关泵,顺时针旋紧Purge阀。
4.5 平衡色谱柱单击【instrument】菜单,选择【Set up Instrument Method】项下“Quat Pump”, 在“solvents”一栏将试验中要用到的有机相通道(甲醇/乙腈)设置为100%,并将“Flow”从低流速逐级设为1ml/min,在“pump”这栏中选择“On”,泵开始运行,冲洗约10min钟后,设定与测试方法相同的柱流速和流动相比例平衡色谱柱(梯度采用起始流动相比例),冲洗色谱柱,直至基线走平,一般需要30 min ~60 min。
Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程
Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程一、目的:建立Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程,保证正确使用。
二、适用范围:适用于Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作。
三、职责:研发部对本标准的实施负责。
四、正文:1 仪器组成及电源:1.1 仪器组成:本仪器由四元泵、真空脱气机、DAD检测器、安捷伦化学工作站组成。
1.2 电源:泵为110V稳压电源,检测器为220V稳压电源,工作站为220V稳压电源。
1.3开机运行前,更换溶剂瓶中的流动相,若管道为第一次使用,先用针管排空各管道中的气泡。
2 仪器硬件开启:自上而下或自下而上顺序开启各模块(真空脱气机、四元泵、自动进样器、VWD检测器、荧光检测器),打开电源指示灯,指示灯亮,显“绿色”;状态指示灯指示当前的状态,各模块进行自检(自动进样器的门板必须关上)。
3安捷伦化学工作站的操作:3.1开机运行步骤3.1.1 待各模块自检完成后,双击“仪器1联机”图标,化学工作站自动与1260LC通讯,进入工作站画面,各模块的软件图标均为绿色。
3.1.2从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,点击”视图”菜单中的”样品视图”、”系统视图”、“命令行”,来调用所需界面(或直接从“视图”菜单中选择“全部菜单”来调用全部界面。
3.1.3把流动相放入溶剂瓶中。
3.1.4打开“Purge”阀,点击泵图标,点击“设置泵”,进入泵编辑画面,设置流速为3-5ml/min,点击“确定”,则系统开始排空管道内的气泡,切换通道继续排空,直至所有要用的通道无气泡为止。
3.1.5点击泵图标,选“控制”选项,选中“关闭”关泵,关闭“Purge”阀。
3.1.6点击泵图标,设置流速冲洗柱子。
3.1.7点击泵下面的瓶图标,输入溶剂的实际体积和瓶体积,点击“确定”。
3.2数据采集方法编辑3.2.1从“方法”菜单中选择“编辑完整菜单”项,选中除“数据分析”外三项,点击“确定”,进入下一画面。
标准安捷伦1260液相色谱仪操作规程
安捷伦1260液相色谱仪操作规程一、 仪器开机1、更换流动相(水需要超纯水,有机试剂需要色谱纯),其中水需要每次使用时更换,有机试剂长时间不用也需要更换2、开机:打开电脑、打开液相所有模块电源、点击电脑桌面上的工作站联机图标3、打开工作站上的所有电源,待其就绪(所有灯变绿)4、拧开排空阀,四元泵里设置流速5 ml/min,A 100%;3分钟后,设置B 100%;3分钟后设置流速至合适流速,关闭排空阀二、 运行样品1、新建方法或调用已有方法2、设置方法参数四元泵:设置流速、流动相比例、采集时间,若需梯度则设置梯度,确定自动进样器(ALS):设置进样量,确定柱温箱(TCC):设置柱子温度,确定紫外检测器(VWD):设置紫外波长,确定设置好后保存方法3、在线信号中点击“改变”,可添加泵的压力,以及VWD的信号4、等待系统平衡,所有灯变绿,泵的压力稳、VWD的信号稳定(约20分钟)5、进样:(1)单针进样:运行控制—样品信息,设置进样位置,保存路径等后运行方法(2)序列进样:序列—序列参数,编辑保存路径;序列—序列表,编辑序列表,然后运行序列6、待仪器自动停止分析(四元泵中已设置采集时间)或手动点击“停止”图标(四元泵中未设置采集时间)三、 关机1、冲柱流动相中含缓冲盐:先用10%甲醇、90%水冲30分钟,再用90%甲醇、10%水冲30分钟(四元泵里设置比例)后关机流动相中不含缓冲盐:用90%甲醇、10%水冲30分钟(四元泵里设置比例)后关机2、关机关闭各模块,关闭仪器电源,关闭工作站,关闭电脑四、 数据处理1、调用需要处理的信号2、自动积分,或者手动积分,删除不要的峰3、打印面积百分比结果,记录每个峰的峰面积、保留时间,在excel中用已知浓度(标准样品)的峰面积作工作曲线,得到工作曲线方程4、未知样品的峰面积来算得其浓度。
(完整版)Agilent1260液相色谱系统操作规程
在柱温箱上手动输入规定的温度即可。
6.3.2.5紫外检测器(VWD G1314F)参数设定
在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在“峰宽 (响应时间)”下方点击下拉式箭头,选择合适的响应时间, 如>0.1min (2s)。 在“时间表” 中可以“插入”一行,输入随时间切换的波长,如1min ,波长=300nm。点击“确定”,进入下一参数设定。
6.3.1.6右键点击四元泵下面的空白处,选择“方法”选项,进入泵编辑画面,设置使用的流动相比例和流速或选择已有方法开始系统平衡。
6.3.1.7点击四元泵下面的瓶图标,输入溶剂的实际体积和瓶体积。 也可输入停泵的体积,点击“确定”。
6.3.2方法编辑
若已创建方法,可在“方法”菜单选择“调用方法”,选择相应的方法。若无,需按下面步骤建立:
手动进样针:取样前应用试样润洗3次以上,使用后应用甲醇/乙腈清洗3次以上。
废液处理:及时清理废液瓶,以防废液溢出。
6.8仪器安全保障
6.8.1每天使用仪器之前,要打开Purge阀将各个通道冲洗4~5min左右;
6.8.2及时更换Purge Valve内的过滤芯(当打开Purge Valve,流速为5ml/min压力高于10bar时)。Purge阀在关闭状态时,不宜过紧。
从专用包装盒内取出色谱柱,松动并取下色谱柱出入口的止动塞;
将与进样器相连的管线一端插入色谱柱入口端,拧紧螺帽;
(注意:安装时色谱柱上的流向标志应与管路的流动相流向一致。)
将与检测器相连的管线一端插入色谱柱出口端,拧紧螺帽。
6.2开机
6.2.1通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
6.3.5打印报告
(完整word版)Agilent1260高效液相色谱仪操作规程
四川中安检测有限公司作业指导书Agilent1260高效液相色谱仪操作规程1.目的正确使用仪器,确保化验结果的准确度、精密度,延长仪器使用寿命。
2.范围适用于Agilent1260高效液相色谱仪及色谱数据工作站的操作。
3.职责3.1操作人员:按照本操作规程操作仪器,对仪器进行自检,作使用登记。
3.2负责人:负责监督仪器操作是否符合规程,对仪器进行定期自检、仪器综合管理。
4.要求4.1开机4.1.1溶剂准备按要求准备所需流动相,每瓶均超声10min排气,将原来浸泡在甲醇中的滤头取出对应放在各个流动相中(A:二次蒸馏水;D:缓冲溶液;B:色谱纯甲醇C:色谱纯乙腈)。
4.1.2开启工作站4.1.2.1启动计算机打开计算机电源,登陆windows 操作系统。
4.1.2.2启动工作站打开Agilent 1260 各模块电源,待Agilent 1260 各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色),点击屏幕桌面图标“HPLC -1260(联机)”,则进入工作界面。
模块右上角状态灯颜色说明:无色:未开电源或者模块准备就绪;黄色:模块未准备就;绿色:正在进样分析;红色:模块出错;所有模块红色:仪器有漏液工作站图形颜色说明:绿色:模块准备就绪;黄色:模块未准备就绪;蓝色:正在进样分析;红色:出错或者不能联机;灰色:此模块没启用。
将鼠标移至系统或各个模块的状态指示栏,系统会自动显示未就绪或出错的原因。
4.1.3冲洗流动相管路反时针旋开泵模块上的溶液排空阀,右键单击泵视图的空白处,选择“方法”,设置“流速”为5ml/min。
将实验中需要的各个通道分别设置“溶剂”为100%,点击确定开始冲洗,每个通道冲洗3-5分钟,若冲洗通道时压力显示超过10 bar,则可换过滤白头。
4.1.4平衡柱子冲洗完柱子,按要求调整流动相速率及流动相比例,顺时针旋转排空阀,关闭溶液排空阀(确认泵流量为1ml/min),然后右键点击需用检测器模块视图的空白处,选择“方法”进入检测器的参数设置界面,按要求设置参数(停止时间与泵一致),后点击右键,选择“控制”,在弹出的窗口选择打开,开始平衡柱子,监视信号基线和压力,等待平稳后即可进样(若用缓冲溶液和有机相作为流动相,先用水和有机相平衡30 min,比例与所要求的缓冲溶液和有机相比例一致),待基线平稳后换用所要求的缓冲溶液和有机相按比例混合平衡柱子30 min)。
Agilent液相色谱仪1260基本操作步骤
Agilent 1260型高效液相色谱仪操作规程
一、仪器型号
美国Agilent公司生产,Agilent 1260型HPLC-UVD。
二、仪器用途
主要进行农药常量分析、残留分析及环境监测。
三、仪器操作规程
1、打开USP电源开关,再依次检测器、进样器、高压泵各模块电源,仪器自检;
2、打开色谱工作站联机,流动相管路排气;
3、根据实验要求,设置四元泵参数、自动进样器参数、紫外检测器波长、柱温箱参数;
4、设置序列参数,进行样品分析;
5、打开脱机工作站,进行校正设置,制作校准曲线;
6、报告设置,打印样品分析报告;
7、关机
关机前,用甲醇0.5~1 mL/min充分冲洗系统20分钟,四元泵流速调为0,点击“运行控制”的“关闭”按钮,退出化学工作站,依提示关泵及其它窗口,关闭计算机,关闭Agilent 1260各模块电源开关。
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程一、开机1、开机前准备:流动相使用前必须过0.45um的滤膜(有机相的流动相必须为色谱纯;水相必须用新鲜注射用水,不能使用超过3天的注射用水,以防止长菌或长藻类);把流动相放入溶剂瓶中。
A瓶:为水相B瓶:为有机相。
2、打开电脑,选Win 2000,进入Win 2000界面。
3、双击CAG Boodp server图标,放大CAG Boodp server小图标,出现窗口,5min 内打开液相各部件电源开关,等待1100广播信息后,表示通讯成功连接,关闭CAG Boodp serve窗口。
4、双击online图标,仪器自检,进入工作站。
该页面主要由以下几部分组成:——最上方为命令栏,依次为File,Run Control,Instrumen…等;——命令栏下方为快捷操作图标,如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等;——中部为工作站各部件的工作流程示意图;依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告;——中下部为动态监测信号;——右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。
二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法:从“Method”菜单中选择“New method”,出现DEF-LC.M,从“Method”菜单中选择“Edit entire method”,选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项,单击OK,进入下一画面。
2、方法信息:在“Method Comments”中加入方法的信息,如方法的用途等。
单击OK,进入下一画面。
3、泵参数设定:进入“Setup pump”画面,在“Flow” 处输入流量,如1ml/min;在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0,(A=100-B),也可在Insert 一行“Timetable”,编辑梯度;输入保留时间;在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。
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1目的规范Agile nt 1260系列高效液相色谱的日常使用和维护保养,保证仪器的正常运转,确保检测工作的顺利进行。
2适用范围适用于Agile nt 1260系列高效液相色谱系统的日常使用和维护。
3职责实验室分析人员负责Agile nt 1260系列高效液相色谱系统的日常使用和维护。
4系统组成4.1 Agile nt 1260 系列四元泵(G1311C)和脱气机;4.2可变波长紫外检测器(VWD G1314F ;4.3 Chemstation A.01.04 色谱工作站4.4国产柱温箱(AT-550)色谱柱;4.5电脑、打印机等辅助设备。
5定义无6操作程序6.1开机前的准备6.1.1检查仪器校验标识,确认仪器处于校验周期内。
6.1.2检查上次《实验室仪器设备使用记录表》和仪器状态,确认仪器处于正常状态;6.1.3流动相的制备:6.1.3.1按《高效液相色谱法流动相配制标准操作规程》配制需要的流动相。
6.1.3.2用前超声脱气(一般10〜20min)。
6.1.4更换流动相:6.1.4.1将泵的吸滤器从旧流动相中取出,用新流动相冲洗后放入新流动相的储液瓶中,并盖好瓶盖;6.1.4.2将排液管的出口端放入废液瓶中,并盖好瓶盖。
6.1.5供试溶液的配制:6.1.5.1供试品用规定溶剂配制成供试品溶液。
6.1.5.2定量测定时,对照品溶液和供试品溶液均应分别配制 2份。
6.1.5.2如有必要,样品需预处理,如过滤等,以免对色谱系统产生污染和色谱干扰。
6.1.6选择色谱柱: 6.1.6.1根据待检供试品的检测方法确定所需的色谱柱;6.1.6.2检查仪器上安装的色谱柱是否与其相同,若不同则需进行更换。
6.1.7更换色谱柱6.1.7.1拆卸原色谱柱:先握住色谱柱,再松动色谱柱出口端螺帽,取下出口端的管线;松动色谱柱入口端螺帽,取下入口端的管线;用止动塞将色谱柱的进出口塞住拧紧后,将色谱柱放回原专用包装盒内6.1.7.2安装新色谱柱:从专用包装盒内取出色谱柱,松动并取下色谱柱出入口的止动塞;将与进样器相连的管线一端插入色谱柱入口端,拧紧螺帽;(注意:安装时色谱柱上的流向标志应与管路的流动相流向一致。
)将与检测器相连的管线一端插入色谱柱出口端,拧紧螺帽。
6.2开机6.2.1通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
6.2.2接通电源,打开计算机和打印机开关6.2.3等待计算机自检完毕后,进入 Windows 桌面,依次打开泵、进样器、检测器各模块电源。
打开柱温箱开关。
6.2.4待各模块自检完成后,点击 6.2.5确定仪器与工作站已连接,若未连接,需关闭工作站,重新连接。
注意必须先打开检测器, 再连接工作站。
6.2.6从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面 ,也可单击工作站画面左侧的“方法和运行 控制”项,进入方法和运行控制窗口。
6.3 操作6.3.1泵的开启和设置6.3.1.1打开Purge 阀(逆时针),右键点击四元泵下面的空白处,选择“方法”选项,进入泵 编辑画面。
Win dows 桌面 lc ”图标进入化学工作站画面631.2 设流速:0ml/min,点击“确定”。
右键点击四元泵下面的空白处,选择“控制…”选项,选中“启动”,点击“确定”,泵开始启动。
631.3待泵启动完毕,泵的图标变绿色后,右键点击四元泵下面的空白处,选择“方法”选项,进入泵编辑画面。
设“流量”逐步增大流速至5ml/min , A通道设到100%单击“确定”。
则系统开始冲洗,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止,切换通道继续冲洗,直到所有要用通道无气泡为止(一般需要5min左右)。
6.3.1.3 注意:为保护泵,不宜直接设置过高流速或直接将高流速降为低流速,宜缓慢梯度提高或降低流速;6.3.1.4看柱前压力,若大于10Bar,则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。
6.3.1.5右键点击四元泵下面的空白处,选择“方法”选项,进入泵编辑画面,将流速设为0ml/min,点击“确定”,关闭Purge阀(顺时针)。
6.3.1.6 右键点击四元泵下面的空白处,选择“方法”选项,进入泵编辑画面,设置使用的流动相比例和流速或选择已有方法开始系统平衡。
6.3.1.7 点击四元泵下面的瓶图标,输入溶剂的实际体积和瓶体积。
也可输入停泵的体积,点击“确定”。
6.3.2方法编辑若已创建方法,可在“方法”菜单选择“调用方法”,选择相应的方法。
若无,需按下面步骤建立:6.3.2.1从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”,钩选“方法信息”、“仪器/采集”、“运行时选项表”三项,点击确定;6.3.2.2出现“方法信息”对话框,如有需要可将方法的描述信息输入,也可选择不输入任何信息,点击确定;6.3.2.3 泵参数设定在“流量”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂B ”处输入80.0,(A=100-B-C-D),也可“插入”一行“时间表”,编辑梯度。
在“压力限”处输入柱子的最大耐高压,如300bar,以保护柱子。
点击“确定”进入下一参数设定。
6.3.2.4 柱温箱参数设定在柱温箱上手动输入规定的温度即可。
6.3.2.5紫外检测器(VWD G1314)参数设定在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm,在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式箭头,选择合适的响应时间,如>0.1min (2s )。
在“时间表” 中可以“插入”一行,输 入随时间切换的波长,如1min ,波长=300nm 点击“确定”,进入下一参数设定。
6.326 在“运行时选项表”中选中“数据采集”,点击“确定”。
6.327完整方法编辑完毕。
点击“方法”菜单,选中“方法另存为…”,输入一方法名称,点 击“确定”。
6.3.3运行样品6.3.3.1从菜单“视图”中选中“在线信号”,选中“信号窗口 T ,然后点击“改变…”钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点击“确定”。
6.3.3.2 从“运行控制”菜单中选择“样品信息”选项,输入操作者名称;在“数据文件”中选 择“手动”或“前缀/计数器”。
(区别:手动--每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次 的数据覆盖掉。
Pr —在前缀/计数器----“前缀”框中输入前缀,在“计数器”框中输入计数器的 起始位,仪器会自动命名,如 vwd 数据0001, vwd 数据0002……。
)6.3.3.3点击“确定”,从“仪器”菜单选择“系统开启”。
6.3.3.4 手动进样6.3.4数据处理双击电脑桌面的 或点击屏幕左下方的“数据分析”,进行数据处理。
6.3.4.1调用需要处理的数据:从“文件”菜单中选择“调用信号”,或者点击屏幕左上方的图 标“H ”,跳出一个对话框,选择相应文件夹里的数据文件名称,单击“确定”即可。
6.3.4.2调用方法:从“方法”菜单里选择“调用方法”,或者点击屏幕左上方的图标“■ 跳出一个对话框,选择相应的方法名称,单击“确定”即可6.3.4.3 积分:6.3.4.3.1从“积分”菜单中选择“积分”,当前数据被积分。
若积分不是很理想,则从“积分”菜单中选择“积分事件”,选择合适的“斜率灵敏度”、“最小峰面积”、“最小峰高”等。
从“积分”菜单中选择“积分”,则当前数据被重新积分。
图标,进入脱机工作站,从“视图”菜单中选择“数据分析”, 6.3.4.3.2 6.3.4.3.3如积分不理想,则重复 6.3.4.3.1和6.3.4.3.2 ,直到满意为止,此时点击图标|fcl ”进行积分参数的保存并退出积分参数设定界面。
6.343.4 如果部分谱峰 基线并积分;点击图标“一 ”,切线撇去 积分不是很理想,也可选择手动积分。
点击图标“手动分裂已积分的峰(适合未基线分离的峰的处理);点击“个峰并积分(适合拖 ”,删除已积分的峰;点击图 笔的处理);点击图峰,将当前手动积分事件保存到数据文件中。
其他数据处理方式详见工作站说明书。
6.3.5打印报告635.1打开打印机电源开关,从“报告”菜单中选择“设定报告”,或点击屏幕中间的图标跳出一对话框,选择相应的定量方法和报告格式,单击确定后退出。
6.3.5.2 从“报告”菜单中选择“打印报告”,或点击屏幕中间的图标“ 占爲”,则可预览到报告。
若报告中显示的时间范围及响应范围不合适,贝冋点击“关闭”退出预览。
进入“报告版面设计”界面,选择相应的报告格式,双击图谱,点“自定义量程”,输入合适的时间范围和响应范围,并选择“全部使用相同量程”,点击“确定”并保存当前模版后退出,再重新进入“数据分析”界面,重新预览报告,若时间范围和响应范围均合适,单击“打印报告”,即可。
6.4宏命令的使用6.4.1在“视图”下拉单中调出“化学工作站工作日程表”;6.4.2输入日期时间、命令并选好执行命令的模式,点击保存图标;6.4.3各宏命令代表意思及输入方法:开泵:pumpall on关泵:pumpall off开灯:lampall on关灯:lampall off载入一个方法:loadmethod xxx.M开始一个方法:startmethod xxx.M停止一个方法:stopmethod xxx.M关闭整个系统:standby。
6.5.4注意事项:日程表编辑完毕后,一定要保存,并且不能关闭;宏命令不区分大小写6.6关机6.6.1样品测试完毕后,关机前,先关灯,用相应的溶剂充分冲洗系统。
5聽腈/甲醇-水冲洗大约20min;(若使用了无机盐流动体系,则冲洗约30-60min.)50聽腈/甲醇-水冲洗大约20min;80聽腈/甲醇-水冲洗大约20min。
6.6.2退出化学工作站,依次提示关泵及其它窗口,关闭计算机。
关闭Agile nt 1260 各模块电源开关。
6.6.3做好仪器使用登记,并填写《实验室仪器设备使用记录表》。
6.7系统日常维护和保养6.7.1色谱柱使用前仔细阅读色谱柱的说明书,注意适用范围,如pH值范围、压力范围、温度范围、流动相类型等。
6.7.2流动相:5汇腈/甲醇-水应用棕色玻璃瓶存放,避免光照,防止长菌。
6.7.3试样配制尽量用流动相配制试样。
必要时使用超声波处理试样,确保试样完全溶解并混合均匀。
若试样中有肉眼可见的机械杂质,则必须用针头过滤器对试样进行过滤(根据试样的性质选择有机相或水相针头过滤器)。
对含有颗粒的固体样品,经研磨均匀后方可取样。
手动进样针:取样前应用试样润洗3次以上,使用后应用甲醇/乙腈清洗3次以上。
废液处理:及时清理废液瓶,以防废液溢出。
6.8仪器安全保障6.8.1每天使用仪器之前,要打开Purge阀将各个通道冲洗4〜5min左右;6.8.2及时更换Purge Valve内的过滤芯(当打开Purge Valve,流速为5ml/min压力高于10bar 时)。