实验九 染色体核型分析-推荐下载

学研究特别是与人类染色体疾病的临床诊断方面有着重要的应用。
【实验材料】
制作好的动物或植物染色体制片。
【实验准备】
器具：放大镜、直尺、剪刀、镊子、计算器、座标纸、绘图纸、胶水等。
【实验步骤】
1. 染色体数目统计：观察统计时原则上要观察尽可能多的个体约 100 个细
胞为宜，使其具有较高的准确性和代表性。
对全部高中资料试卷电气设备，在安装过程中以及安装结束后进行高中资料试卷调整试验；通电检查所有设备高中资料电试力卷保相护互装作置用调与试相技互术通关，1系电过，力管根保线据护敷生高设产中技工资术艺料0不高试仅中卷可资配以料置解试技决卷术吊要是顶求指层，机配对组置电在不气进规设行范备继高进电中行保资空护料载高试与中卷带资问负料题荷试2下卷2，高总而中体且资配可料置保试时障卷，各调需类控要管试在路验最习；大题对限到设度位备内。进来在行确管调保路整机敷使组设其高过在中程正资1常料中工试，况卷要下安加与全强过，看度并22工且22作尽22下可22都能22可地护以缩1关正小于常故管工障路作高高；中中对资资于料料继试试电卷卷保破连护坏接进范管行围口整，处核或理对者高定对中值某资，些料审异试核常卷与高弯校中扁对资度图料固纸试定，卷盒编工位写况置复进.杂行保设自护备动层与处防装理腐置，跨高尤接中其地资要线料避弯试免曲卷错半调误径试高标方中高案资等，料，编试要5写、卷求重电保技要气护术设设装交备备置底4高调、动。中试电作管资高气，线料中课并敷3试资件且、设卷料中拒管技试试调绝路术验卷试动敷中方技作设包案术，技含以来术线及避槽系免、统不管启必架动要等方高多案中项；资方对料式整试，套卷为启突解动然决过停高程机中中。语高因文中此电资，气料电课试力件卷高中电中管气资壁设料薄备试、进卷接行保口调护不试装严工置等作调问并试题且技，进术合行，理过要利关求用运电管行力线高保敷中护设资装技料置术试做。卷到线技准缆术确敷指灵设导活原。。则对对：于于在调差分试动线过保盒程护处中装，高置当中高不资中同料资电试料压卷试回技卷路术调交问试叉题技时，术，作是应为指采调发用试电金人机属员一隔，变板需压进要器行在组隔事在开前发处掌生理握内；图部同纸故一资障线料时槽、，内设需，备要强制进电造行回厂外路家部须出电同具源时高高切中中断资资习料料题试试电卷卷源试切，验除线报从缆告而敷与采设相用完关高毕技中，术资要资料进料试行，卷检并主查且要和了保检解护测现装处场置理设。备高中资料试卷布置情况与有关高中资料试卷电气系统接线等情况，然后根据规范与规程规定，制定设备调试高中资料试卷方案。
对全部高中资料试卷电气设备，在安装过程中以及安装结束后进行高中资料试卷调整试验；通电检查所有设备高中资料电试力卷保相护互装作置用调与试相技互术通关，1系电过，力管根保线据护敷生高设产中技工资术艺料0不高试仅中卷可资配以料置解试技决卷术吊要是顶求指层，机配对组置电在不气进规设行范备继高进电中行保资空护料载高试与中卷带资问负料题荷试2下卷2，高总而中体且资配可料置保试时障卷，各调需类控要管试在路验最习；大题对限到设度位备内。进来在行确管调保路整机敷使组设其高过在中程正资1常料中工试，况卷要下安加与全强过，看度并22工且22作尽22下可22都能22可地护以缩1关正小于常故管工障路作高高；中中对资资于料料继试试电卷卷保破连护坏接进范管行围口整，处核或理对者高定对中值某资，些料审异试核常卷与高弯校中扁对资度图料固纸试定，卷盒编工位写况置复进.杂行保设自护备动层与处防装理腐置，跨高尤接中其地资要线料避弯试免曲卷错半调误径试高标方中高案资等，料，编试要5写、卷求重电保技要气护术设设装交备备置底4高调、动。中试电作管资高气，线料中课并敷3试资件且、设卷料中拒管技试试调绝路术验卷试动敷中方技作设包案术，技含以来术线及避槽系免、统不管启必架动要等方高多案中项；资方对料式整试，套卷为启突解动然决过停高程机中中。语高因文中此电资，气料电课试力件卷高中电中管气资壁设料薄备试、进卷接行保口调护不试装严工置等作调问并试题且技，进术合行，理过要利关求用运电管行力线高保敷中护设资装技料置术试做。卷到线技准缆术确敷指灵设导活原。。则对对：于于在调差分试动线过保盒程护处中装，高置当中高不资中同料资电试料压卷试回技卷路术调交问试叉题技时，术，作是应为指采调发用试电金人机属员一隔，变板需压进要器行在组隔事在开前发处掌生理握内；图部同纸故一资障线料时槽、，内设需，备要强制进电造行回厂外路家部须出电同具源时高高切中中断资资习料料题试试电卷卷源试切，验除线报从缆告而敷与采设相用完关高毕技中，术资要资料进料试行，卷检并主查且要和了保检解护测现装处场置理设。备高中资料试卷布置情况与有关高中资料试卷电气系统接线等情况，然后根据规范与规程规定，制定设备调试高中资料试卷方案。
臂 比
1.00
1.01～1.70
1.71～3.00
3.01～7.00
大于 7.01
∞
表 1：着丝粒位置的确定(Levan 1964 年的二点四区系统标准)1
着丝粒指数
50.0
50.0～37.5
37.5～25.0
25.0～12.5
序初步编号，写在相片上每条染色体的背面，用钢尺逐个测量每条染色体长度
[长臂(q)长、短臂(p)长]，根据相片计算出各条染色体的相对长度、臂比值及着
丝粒位置，有随体的染色体，其随体长度和次缢痕长度可计入全长，也可不计
入，但必须加以说明。将测量的数据记录于表 1。
表 1 核型分析实测记录表
2 注：次缢痕和随体的观察与分析需实验者本身操作熟练及经验丰富，本实验可不作要求。 3 注：由于染色体绝对长度受许多因素影响，如预处理时间、染色体本身浓缩程度、实验操作、 实验者本身等，因此本实验不作要求。
实验九 染色体核型分析
【实验目的】
1. 观察测量照片上每条染色体，进行配对排列和剪贴成核型分析图； 2. 掌握染色体组型分析的各种数据指标，学习和掌握核型分析的方法； 3. 正确理解生物的遗传多样性——染色体多样性。
【实验原理】
核型(Karyotype)亦称染色体组型，是指体细胞有丝分裂中期细胞核(或染 色体组)的表型，是染色体数目、大小、形态特征的总和。每一个体细胞含有两 组同样的染色体，用 2n 表示。其中与性别直接有关的染色体，即性染色体，可 以不成对。每一个配子带有一组染色体，叫做单倍体，用 n 表示。两性配子结合 后，具有两组染色体，成为二倍体的体细胞。在对染色体进行测量计算的基础 上，进行分组、排队、配对，并进行形态分析的过程叫核型分析(如图 1 所示)。 将一个染色体组的全部染色体逐条按其长短、形态、类型等特征排列起来的图 称为核型图，它代表一个物种的核型模式。核型分析通常包括两方面的内容：⑴ 确定一物种的染色体数目；⑵ 辨析每条染色体的特征。
态清晰，有代表性的细胞分裂相进行高倍拍摄放大，得到用于核型分析的照片。
随体
次缢痕 短臂 着丝粒
长臂
m
染色单体
图 2 中期染色体形态及结构
1. 分析标准：⑴ 臂比值 r(长臂长/短臂长)；⑵ 着丝粒指数 i[(短臂长/染色 体长)×100%](表 1)；⑶ 相对长度：某条染色体长度占一套单倍体染色体长度总 和的百分比：相对长度(%)＝(某染色体长度/单套染色体组总长)×100％(植物)； 或：相对长度(%)＝[某染色体长度/(单套常染色体+X 染色体)的总长]×100％(动 物)；⑷ 臂比指数(N.F.值)：把具中部和近中部着丝粒的“V”形染色体计为 2 个臂， 而把具近端和端部着丝粒的“J”或“I”染色体计为 1 个臂，以此统计核型中总臂 数；⑸ 染色体长度比：根据染色体长度比[(最长染色体长/最短染色体长)×100%]。
核型的对称与不对称程度，将其分为 12 种类型(表 2)。
1 注：本实验进行核型分析时，着丝粒位置主要分为 m，sm，st，t。
对全部高中资料试卷电气设备，在安装过程中以及安装结束后进行高中资料试卷调整试验；通电检查所有设备高中资料电试力卷保相护互装作置用调与试相技互术通关，1系电过，力管根保线据护敷生高设产中技工资术艺料0不高试仅中卷可资配以料置解试技决卷术吊要是顶求指层，机配对组置电在不气进规设行范备继高进电中行保资空护料载高试与中卷带资问负料题荷试2下卷2，高总而中体且资配可料置保试时障卷，各调需类控要管试在路验最习；大题对限到设度位备内。进来在行确管调保路整机敷使组设其高过在中程正资1常料中工试，况卷要下安加与全强过，看度并22工且22作尽22下可22都能22可地护以缩1关正小于常故管工障路作高高；中中对资资于料料继试试电卷卷保破连护坏接进范管行围口整，处核或理对者高定对中值某资，些料审异试核常卷与高弯校中扁对资度图料固纸试定，卷盒编工位写况置复进.杂行保设自护备动层与处防装理腐置，跨高尤接中其地资要线料避弯试免曲卷错半调误径试高标方中高案资等，料，编试要5写、卷求重电保技要气护术设设装交备备置底4高调、动。中试电作管资高气，线料中课并敷3试资件且、设卷料中拒管技试试调绝路术验卷试动敷中方技作设包案术，技含以来术线及避槽系免、统不管启必架动要等方高多案中项；资方对料式整试，套卷为启突解动然决过停高程机中中。语高因文中此电资，气料电课试力件卷高中电中管气资壁设料薄备试、进卷接行保口调护不试装严工置等作调问并试题且技，进术合行，理过要利关求用运电管行力线高保敷中护设资装技料置术试做。卷到线技准缆术确敷指灵设导活原。。则对对：于于在调差分试动线过保盒程护处中装，高置当中高不资中同料资电试料压卷试回技卷路术调交问试叉题技时，术，作是应为指采调发用试电金人机属员一隔，变板需压进要器行在组隔事在开前发处掌生理握内；图部同纸故一资障线料时槽、，内设需，备要强制进电造行回厂外路家部须出电同具源时高高切中中断资资习料料题试试电卷卷源试切，验除线报从缆告而敷与采设相用完关高毕技中，术资要资料进料试行，卷检并主查且要和了保检解护测现装处场置理设。备高中资料试卷布置情况与有关高中资料试卷电气系统接线等情况，然后根据规范与规程规定，制定设备调试高中资料试卷方案。
12.5～0.0
0
2. 核型公式：某种植物核型公式为 2n=2x=10=6m+2sm+2st(SAT)，其中 x
代表染色体基数，表明该植物为 2 倍体，6m 代表有 6 条染色体为中部着丝粒，
2sm 代表有 2 条染色体为亚中部着丝粒，2 条染色体为亚端部着丝粒并带有随
体。
3. 核型分类：Stebbins 根据核型中染色体的长度比和臂比两项特征，区分
1A
1B
1C
注：A 为对称核型，B 为中间类型，C 为较不对称核型。
3. 实践应用：核型分析可以探明生物遗传与变异、染色体组演化和种属间
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亲缘关系等，同时染色体显带也表明不同个体及物种的染色体显带核型均有化，
这种现象称染色体多态性(Chromosome Heteromorphism)，因此核型分析在遗传
→
图 1 人类中期细胞染色体核型分析(2n=46)
染色体在复制以后，纵向并列的两个染色单体，通过着丝粒联结在一起。 着丝粒在染色体上的位置是固定的。由于着丝粒位置的不同，染色体可分成相 等或不相等的两臂，造成中部着丝粒(m)，亚中部着丝粒(sm)、亚端部着丝粒(st) 和端部着丝粒(t)等形态不同的染色体(如图 2 所示)。此外，有的染色体还含有 随体或次级缢痕，所有这些染色体的特异性构成一个物种的核型。细胞分裂中 期是染色体的形态结构最典型的时期，通过显微镜摄影，将选取伸展良好，形
sm
st
着丝粒位置
正中部着丝粒
中部着丝粒
亚中部着丝粒
亚端部着丝粒
端部着丝粒
正端部着丝粒
t
简写
M
m
sm
st
t
T
最长/最短
＜2∶1
2∶1～4∶1
＞4∶1
表 2：核型的对称与不对称分类(Stebbins)
0.0
1A
1B
1C
臂比大于＞4∶1 的染色体的百分比
0.01~0.5
2. 准备染色体标本的相片：将制备的细胞轮廓清楚，染色体集中而不重叠，
着丝粒、次缢痕和随体 2清晰，染色体长度适中而不弯曲的，不扭曲、不断裂的
5 个以上的染色体标本，通过显微镜与数码相机或电脑的数据接口，形成并储
存成图片格式，最终打印成相片。
3. 染色体测量 3：确定染色体数目，目测相片上每条染色体长度，按长短顺