透析后絮状沉淀
基于透析袋模式的药物释放行为研究
基于透析袋模式的药物释放行为研究胡平静;朱振铎;李祥子【摘要】目的:探索阿霉素(DOX)在透析袋中释放的影响因素,获得DOX的最佳缓释条件.方法:以DOX为药物模型,通过改变透析袋的规格、缓冲介质的pH值及缓冲介质的浓度,研究不同条件下DOX的累积缓释率和缓释平衡时间,利用扫描电子显微镜(SEM)对透析袋的显微结构进行表征,利用紫外-可见分光光度计(UV-Vis)检测释放到介质中的DOX吸光度.结果:1 000 kDa透析袋的实际平均孔径约为120 nm,3 500 Da透析袋的实际孔径＜10 nm;3 500 Da透析袋中,DOX在180 min 可达到释放平衡;在pH 2.0、pH5.0及pH 7.4时,0.001、0.01、0.025 mol/L PBS 介质对应的DOX累积释放率分别约为70％(pH 2.0)、86 ％(pH 2.0)、98 ％(pH 2.0)、67％(pH 5.0)、76％(pH 5.0)、94％(pH 5.0)、42％(pH 7.4)、44％(pH 7.4)、75 ％(pH7.4);1 000 kDa透析袋中,DOX在160 min以内可到释放平衡;0.001、0.010、0.025 mol/L PBS介质对应的DOX累积释放率分别约为88％(pH2.0)、93％(pH 2.0)、100％(pH2.0)、84％(pH5.0)、88％(pH 5.0)、98％(pH 5.0)、32％(pH 7.4)、38％(pH 7.4)、81％ (pH 7.4).结论:一定范围内,透析袋孔径越大、缓冲介质的pH值越小、缓冲介质的浓度越大,越有利于DOX的释放.本成果对透析袋模式研究纳米药物载体的体外释药性能具有重要的理论研究及实际借鉴意义.【期刊名称】《包头医学院学报》【年(卷),期】2019(035)001【总页数】4页(P53-55,58)【关键词】膜;纳米结构;优化;透析袋;阿霉素【作者】胡平静;朱振铎;李祥子【作者单位】皖南医学院医用材料合成应用研究所,生物活性大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖241002;皖南医学院医用材料合成应用研究所,生物活性大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖241002;皖南医学院医用材料合成应用研究所,生物活性大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖241002;江苏大学材料科学与工程学院【正文语种】中文随着纳米技术和生物医学的不断发展，纳米载体因具有低毒高效、靶向输药、智能释药等优点而备受人们关注[1]。
血液透析中机器报警常见的原因及处理
血液透析中机器报警常见的原因及处理摘要：目的：探讨血液透析常见的报警原因，并提出相应的处理对策。
方法：选取2022年3月至2023年3月该时间段本院血液透析过程中出现及其报警的病例80例，对其及其报警的类型及原因进行汇总分析。
结果：结果表明，导致患者血液透析治疗过程中报警原因主要有：静脉压低报警、空气报警、静脉压高报警、电导低报警、机器故障报警、漏血报警。
结论：针对上述报警原因提出针对性的解决措施，可以更好的提升和改善患者血液透析的效果。
关键词：血液透析；机器报警；原因；处理措施引言：血液透析是最安全有效的急性和慢性肾衰治疗手段，可有效改善尿毒症病人的多种病理生理学变化，对防止严重的合并症和治疗原发性疾病具有重要意义。
血液透析属于体外循环的一种，必须要保证绝对的安全，但是在进行血液透析的时候，由于种种原因会导致血液透析机发出警报，影响病人的正常治疗，所以要尽快解决及其报警的问题，才能让病人顺利完成透析[1]。
本文通过对80名病人在血透中出现机器警报的情况进行了详细的调查，并提出了解决问题的对策，从而使血透工作得以顺利进行。
一、资料与方法1.1一般资料选取2022年3月至2023年3月该时间段本院血液透析过程中出现及其报警的病例80例，患者男女比例为1:1，患者年龄为22-76（49.58±3.68）岁。
所选患者基本情况之间存在的差异较小，无统计学意义。
1.2方法本次研究主要采用德国费森尤斯4008B和4008S血液透析机进行治疗1.3观察指标对选取患者血液透析过程中的报警情况进行汇总分析。
二、结果研究显示，在选取的80例血液透析治疗过程中出现机器报警的患者中，导致患者血液透析治疗过程中报警原因主要有：静脉压低报警（26例）、空气报警（20例）、静脉压高报警（16例）、电导低报警（13例）、机器故障报警（4例）、漏血报警（1例）。
表一所选患者血液透析治疗中出现及其报警的原因汇总（例/%）静脉压低报警空气报警静脉压高报警电导低报警机器故障报警漏血报警例数802620161341百分比%32.5025.0020.0016.255.01.25三、结论原因及处理对策1.静脉压低报警的原因及对策原因：1、病人的血管状况差，或者是医护人员的操作不够娴熟，导致了血液流动不畅。
2021届高考化学大一轮核心突破：铁盐和亚铁盐【核心透析、核心训练】
——铁盐和亚铁盐【核心透析】1．亚铁盐含有Fe2＋的溶液呈浅绿色，既有氧化性，又有还原性。
(1)氧化性：Fe2＋与Zn反应的离子方程式：Zn＋Fe2＋===Fe＋Zn2＋。
(2)还原性：Fe2＋与Cl2反应的离子方程式：2Fe2＋＋Cl2===2Fe3＋＋2Cl－。
(3)特性：含有Fe2＋的盐溶液遇K3[Fe(CN)6]溶液生成蓝色沉淀。
2．铁盐含Fe3＋的溶液呈黄色，Fe3＋具有较强的氧化性。
(1)氧化性：①Fe3＋与Cu反应的离子方程式：2Fe3＋＋Cu===Cu2＋＋2Fe2＋。
②Fe3＋与I－反应的离子方程式：2Fe3＋＋2I－===2Fe2＋＋I2。
(2)特性：含有Fe3＋的盐溶液遇KSCN溶液变成红色。
(3)Fe2＋与Fe3＋的相互转化用离子方程式实现下列转化：①2Fe2＋＋Cl2===2Fe3＋＋2Cl－；②3Fe2＋＋4H＋＋NO－3===3Fe3＋＋2H2O＋NO↑；③2Fe 2＋＋H 2O 2＋2H ＋===2Fe 3＋＋2H 2O ；④5Fe 2＋＋MnO －4＋8H ＋===5Fe3＋＋Mn 2＋＋4H 2O ； ⑤2Fe 3＋＋Fe===3Fe 2＋； ⑥Cu ＋2Fe 3＋===Cu 2＋＋2Fe 2＋； ⑦2Fe 3＋＋H 2S===2Fe 2＋＋S ↓＋2H ＋。
3．Fe 3＋、Fe 2＋的检验 (1)Fe 3＋的检验方法一：取出少量被检验的溶液于试管中，滴加KSCN 溶液，溶液变红色，证明有Fe 3＋存在。
方法二：取出少量被检验的溶液于试管中，加入NaOH 溶液，产生红褐色沉淀，证明有Fe 3＋存在。
(2)Fe 2＋的检验方法一：取出少量被检验的溶液于试管中，滴加KSCN 溶液，无现象，再滴加氯水，若变成红色(或血红色)溶液，说明有Fe 2＋存在(鉴别时不能先滴加氯水)。
2Fe 2＋＋Cl 2===2Fe 3＋＋2Cl －， Fe 3＋＋3SCN －Fe(SCN)3(红色或血红色)。
实验十一 蛋白质脱盐
实验十一蛋白质脱盐(透析和凝胶过滤)在蛋白质的研究中，经常要进行蛋白质脱盐，即将蛋白质同其它盐类小分子分离开。
蛋白质脱盐的方法很多，各有优缺点。
以下仅介绍常用的透析和凝胶过滤方法，可根据实验条件和要求选用。
（一）蛋白质透析一. 目的学习透析的基本原理和操作。
二. 原理蛋白质是大分子物质，不能透过透析膜而小分子物质可以自由透过。
在分离提纯蛋白质的过程中，常利用透析的方法使蛋白质与其中夹杂的小分子物质分开。
三. 仪器、试剂、材料1.仪器烧杯；玻棒；离心机；离心管；冰箱；电炉。
2.试剂。
1％氯化钡溶液；硫酸铵粉末；1mol/L EDTA；2%NaHCO33.材料透析管（宽约，长12－15cm）或玻璃纸;皮筋；鸡蛋清溶液：将新鲜鸡蛋的蛋清与水按1：20混匀，然后用六层纱布过滤。
四. 操作方法1.透析管（前）处理：先将一适当大小和长度的透析管放在1mol/L EDTA溶液中，煮沸10分钟，再在2％ NaHCO溶液中煮沸10分钟，然后3再在蒸馏水中煮沸10分钟即可。
2.取5ml蛋白质溶液于离心管中，加4g硫酸铵粉末，搅拌使之溶解。
然后在4℃下静置20分钟，出现絮状沉淀。
3.离心：将上述絮状沉淀液以1000转/分的速度离心20分钟。
4.装透析管：离心后倒掉上清夜，加5ml蒸馏水溶解沉淀物，然后小心倒入透析管中，扎紧上口。
5.将装好的透析管放入盛有蒸馏水的烧杯中，进行透析，并不断搅拌。
6.每隔适当时间（5－10分钟），用氯化钡滴入烧杯的蒸馏水中，观察是否有沉淀现象。
五. 结果处理记录并解释实验现象。
六. 注意事项1. 硫酸铵盐一定要充分溶解，才能使蛋白质沉淀下来。
七. 思考题起何作用？在透析袋处理过程中， EDTA和NaHCO3（二）凝胶过滤一. 目的学习凝胶过滤的基本操作技术，了解凝胶过滤脱盐的原理和应用。
二. 原理凝胶过滤的主要装置是填充有凝胶颗粒的层析柱。
目前使用较多的凝胶有葡聚糖凝胶（Sephadex）、琼脂糖凝胶（Sepharose）和聚丙烯酰胺凝胶（Bio-gel-P）等。
血液透析中输液的注意事项
四、加强巡视，及时更换补液，预防空气栓塞
• 输液时，护士应根据患者的年龄，病情及药物性质而调节输液速度， 告知 患者不要自行随意调整滴速，如有需要请患者告知护士，让护士为其调节。一 般情况下，成人每分钟滴入40～60滴，儿童、年老体弱病人每分钟滴入20～ 40滴，患有心脏病及肺部疾病的病人，输液速度宜慢，以免造成病情加重。
定输液的先后。
•
3、根据病情需要，应有计划地按排输液顺序，使尽快达到治疗效果输液
瓶内加入药物时，应根据治疗原则，按急、缓和药物在血液中的有效浓度、时
间等情况，进行合理按排。
•
4、输液前，输液管内空气要排尽，输液过程中，及时更换输液瓶，溶液
滴尽前要及时关闭导管夹，严防空气进入，造成空气栓塞。
•
5,、观察有无输液反应。
• 操作前，严格检查药物及各种用物有无破损、变质等，检查有效期；输液 前严格检查输液器各部件连接是否紧密，有无松脱；连接补液口前排尽输液管 及针头内空气 。加强巡视，及时关闭补液口，预防空气栓塞。如不慎发生空 气栓塞，立即置病人于左侧头低足高位；立即给予高流量氧气吸入，严密观察 病人病情变化，遵医嘱给予对症处理。
一，严格执行无菌操作及查对制度
在输液前应执行严格的查对制度，认真核对药液（药名、浓度、剂量和有效 期），检查药瓶有无破裂，动瓶后对光检查药物质量，有无絮状物、沉淀、混浊、 变色）填写输液卡，核对手腕带及床头卡，询问是否有药物、食物过敏史，是否 有心肺疾病。
二、注意药物的配伍与禁忌及药物的分子量
• 血液透析中，首先应该考虑药物是在透析当中还是透析结束后输注，要根据药 物的分子量来决定，通常分子量大的药物可以在透析过程中输注，分子量小的 药物因为可以通过透析器膜，应该在透析后输注。 1.1 铁剂的使用血液透析患 者用口服铁剂是可以的，但很难保持转铁蛋白饱和度>20％，血清铁蛋白 >100ng/ml和Hgb/Hct在11-12g/dl/33%-36%。为了维持Hgb11-12g/dl，大多数 血液透析患者需要常规使用静脉铁剂治疗贫血。 输入静脉铁时的注意事项： 首先要进行静脉试验：配置方法：蔗糖铁100毫克/5毫升加入生理盐水100毫升 第一次输入应先静脉给予25毫克的试验剂量慢滴20分钟，如果没有即刻的过敏 反应发生，再将剩余的75毫克铁剂输入，以后可以每次给予常规剂量，输入时 间大于30分钟。 铁剂的分子量大，不能通过透析膜，可以在泵前补液口进行 输入。
沉淀蛋白质的常用方法(TCA、乙醇、丙酮沉淀蛋白操作步骤)
沉淀蛋白质的常用方法（TCA、乙醇、丙酮沉淀蛋白操作步骤）TCA-DOCFor precipitation of very low protein concentration1) To one volume of protein solution, add 1/100 vol. of 2% DOC (Na deoxycholate, detergent).2) Vortex and let sit for 30min at 4oC.3) Add 1/10 of Trichloroacetic acid (TCA) 100% vortex and let sit ON at 4oC (preparation of 100% TCA: 454ml H2O/kg TCA. Maintain in dark bottleat 4oC.Be4) Spin 15min 4oC in microfuge at maximum speed (15000g). Carefully discharge supernatant and retain the pellet: dry tube by inversion on tissue paper (pellet may be difficult to see). [OPTION: Wash pellet twice with one volume of cold acetone (acetone keep at –20oC). Vortex and repellet samples 5min at full speed between washes].5) Dry samples under vaccum (speed vac) or dry air. For PAGE-SDS, resuspend samples in a minimal volume of sample buffer. (The presence of some TCA can give a yellow colour as a consequence of the acidification of the sample buffer ; titrate with 1N NaOH or 1M TrisHCl pH8.5 to obtain the normal blue sample buffer colour.)Normal TCATo eliminate TCA soluble interferences and protein concentration1) To a sample of protein solution add Trichloroacetic acid (TCA) 100% to get 13% final concentration. Mix and keep 5min –20oC and then 15min 4oC; or longer time at 4oC without the –20oC step for lower protein concentration. Suggestion: leave ON if the protein concentration is very low.(preparation of 100% TCA: 454ml H2O/kg TCA. Maintain in dark bottleat 4oC.Be2) Spin 15min 4oC in microfuge at maximum speed (15000g). Carefully discharge supernatant and retain the pellet: dry tube by inversion on tissue paper (pellet may be difficult to see).3) For PAGE-SDS, resuspend samples in a minimal volume of sample buffer. (The presence of some TCA can give a yellow colour as a consequence of the acidification of the sample buffer ; titrate with 1N NaOH or 1M TrisHCl pH8.5 to obtain the normal blue sample buffer colour.)Acetone PrecipitationTo eliminate acetone soluble interferences and protein concentration1) Add to 1 volume of protein solution 4 volumes of cold acetone. Mix and keep at least 20min –20oC. (Suggestion: leave ON if the protein concentration is very low).2) Spin 15min 4oC in microfuge at maximum speed (15000g). Carefully discharge supernatant and retain the pellet: dry tube by inversion on tissue paper (pellet may be difficult to see).3) Dry samples under vaccum (speed-vac) or dry air to eliminate any acetone residue (smell tubes). For PAGE-SDS, resuspend samples in a minimal volume of sample buffer.Ethanol PrecipitationUseful method to concentrate proteins and removal of Guanidine Hydrochloride before PAGE-SDS1) Add to 1 volume of protein solution 9 volumes of cold Ethanol 100%. Mix and keep at least 10min.at –20oC. (Suggestion: leave ON).2) Spin 15min 4oC in microcentrifuge at maximum speed (15000g). Carefully discharge supernatant and retain the pellet: dry tube by inversion on tissue paper (pellet may be difficult to see).3) Wash pellet with 90% cold ethanol (keep at –20oC). Vortex and repellet samples5min at full speed.4) Dry samples under vaccum (speed vac) or dry air to eliminate any ethanol residue (smell tubes). For PAGE-SDS, resuspend samples in a minimal volume of sample buffer.TCA-DOC/AcetoneUseful method to concentrate proteins and remove acetone and TCA soluble interferences1. To one volume of protein solution add 2% Na deoxycholate (DOC) to 0.02% final (for 100 μl sample, add 1 μl 2% DOC).2. Mix and keep at room temperature for at least 15 min.3. 100% trichloroacetic acid (TCA) to get 10% final concentration (preparation of 100% TCA: 454ml H2O/kg TCA. Maintain in dark bottleat 4oC.Be careful, use gloves).4. Mix and keep at room temperature for at least 1 hour.5. Spin at 4oC for 10 min, remove supernatant and retain the pellet. Dry tube by inversion on tissue paper.6. Add 200 μl of ice cold acetone to TCA pellet.7. Mix and keep on ice for at least 15 min.8. Spin at 4oC for 10 min in microcentrifuge at maximum speed.9. Remove supernatant as before (5), dry air pellet to eliminate any acetone residue (smell tubes). For PAGE-SDS, resuspend samples in a minimal volume of sample buffer. 10. (The presence of some TCA can give a yellow colour as a consequence of the acidification of the sample buffer ; titrate with 1N NaOH or 1M TrisHCl pH8.5 to obtain the normal blue sample buffer colour.)Acidified Acetone/MethanolUseful method to remove acetone and methanol soluble interferences like SDS before IEF1) Prepare acidified acetone: 120ml acetone + 10μl HCl (1mM final concentration).2) Prepare precipitation reagent: Mix equal volumes of acidified acetone and methanol and keep at -20oC.3) To one volume of protein solution add 4 volumes of cold precipitation reagent. Mix and keep ON at -20oC.4) Spin 15min 4oC in microfuge at maximum speed (15000g). Carefully discharge supernatant and retain the pellet: dry tube by inversion on tissue paper (pellet may be difficult to see).5) Dry samples under vaccum (speed-vac) or dry air to eliminate any acetone or methanol residue (smell tubes).TCA-Ethanol PrecipitationUseful method to concentrate proteins and removal of Guanidine Hydrochloride before PAGE-SDS1) Dilute 10-25μl samples to 100μl with H2OAdd 100μl of 20% trichloroacetic acid (TCA) and mix (preparation of 100% TCA: 454ml H2O/kg TCA. Maintain in dark bottleat 4oC.Be careful, use gloves).2) Leave in ice for 20min. Spin at 4oC for 15 min in microcentrifuge at maximum speed.3) Carefully discharge supernatant and retain the pellet: dry tube by inversion on tissue (pellet may be difficult to see).4) Wash pellet with 100μl ice-cold ethanol, dry and resuspend in sample buffer.5) In case there are traces of GuHCl present, samples should be loaded immediately after boiling for 7 min at 95°C6) (The presence of some TCA can give a yellow colour as a consequence of the acidification of the sample buffer ; titrate with 1N NaOH or 1M TrisHCl pH8.5 to obtain the normal blue sample buffer colour.)PAGE prep TM Protein Clean-up and Enrichment Kit - PIERCEThe PAGEprep? Kit enables removal of many chemicals that interfere with SDS-PAGE analysis: guanidine, ammonium sulfate, other common salts, acids and bases, detergents, dyes, DNA, RNA, and lipids.PIERCE: #26800 - PAGE prep TM Protein Clean-up and Enrichment Kit (pdf) Chloroform Methanol PrecipitationUseful method for Removal of salt and detergents1) To sample of starting volume 100 ul2) Add 400 ul methanol3) Vortex well4) Add 100 ul chloroform5) Vortex6) Add 300 ul H2O7) Vortex8) Spin 1 minute @ 14,0000 g9) Remove top aqueous layer (protein is between layers)10) Add 400 ul methanol11) Vortex12) Spin 2 minutes @ 14,000 g13) Remove as much MeOH as possible without disturbing pellet14) Speed-Vac to dryness15) Bring up in 2X sample buffer for PAGEReference: Wessel, D. and Flugge, U. I. Anal. Biochem. (1984) 138, 141-143蛋白质浓缩——方法很全1130徐炉李2011-05-28 14:35楼主蛋白质浓缩——方法很全- 丁香园论坛-医学/药学/生命科学论坛蛋白质浓缩方法总结一个简便的方法你可以试试：找一透析袋，底部扎紧，袋口扎一去底的塑料或玻璃试管，将待浓缩的液体从管口灌入透析袋中，将整个装置挂在冰箱中，或者用电风扇吹，液体干后可再继续加入，直至样品浓缩至所需体积。
川芎嗪临床研究概况_刘丽娟
作用。
故红细胞免疫功能低下是导致慢性肾衰竭患者抗病能力低下、易发生感染和好发肿瘤等的重要因素之一。
另外,慢性肾衰竭患者红细胞免疫功能的这种改变所导致的免疫复合物堆积,还将进一步抑制红细胞的免疫功能[6]。
4调整红细胞免疫功能4.1透析透析疗法能明显改善红细胞的免疫功能,并且血液透析和腹膜透析在改善红细胞免疫功能方面作用相似。
其机制可能是:(1)慢性肾衰竭患者经过一段时间透析后,血液中的免疫复合物得到部分清除,使红细胞膜C3b受体空位增加,红细胞免疫黏附活性得到部分恢复。
(2)透析后红细胞C3b 受体花环率明显高于透析前,差异有统计学意义;红细胞免疫复合物花环率低于透析前,但无统计学意义。
表明透析后红细胞C3b受体的提高并不完全是由于透析消除免疫复合物的结果,还可能与透析清除了体内某些具有免疫抑制作用的物质或影响免疫复合物产生的物质有关。
然而,无论血液透析还是腹膜透析,红细胞C3b受体花环率均明显低于健康人。
表明透析患者仍存在红细胞免疫功能缺陷。
因此,透析只能恢复红细胞的部分免疫功能[7]。
4.2人参皂苷人参皂苷具有双向免疫调节作用,对细胞免疫和体液免疫均具有一定的影响。
有人发现,在开始治疗4周内红细胞免疫功能无明显变化,治疗6~8周后红细胞免疫功能较治疗前明显增强,且与贫血状态改善和尿素氮水平高低无明显关系。
其机制可能是:(1)肾衰竭患者长期低蛋白饮食或不能充分进食,机体内环境和内分泌处于紊乱状态,影响了红细胞的免疫功能。
人参皂苷可调整紊乱状态而恢复红细胞免疫功能。
(2)人参皂苷具有减少自由基产生、稳定红细胞膜的作用,并可解除某些不良因素对红细胞C3b受体的破坏,有利于红细胞免疫功能的恢复。
(3)人参皂苷尚可通过刺激骨髓造血细胞增生而增强红细胞的免疫活力[8]。
4.3重组人促红细胞生成素(r HuEpo)研究发现,红细胞生成素不仅能够促进红细胞生成,增加红细胞数量,而且可以提高红细胞免疫功能。
在接受红细胞生成素治疗的患者,随着血红蛋白的升高,红细胞C3b受体花环率明显上升,红细胞免疫复合物花环率下降,且患者治疗后抗感染能力增强。
包涵体复性
我用透析法复性蛋白,但出现了好多沉淀,后面我要用Ni柱来纯化,我现在不知道复性后怎么处理?把沉淀弃掉吗?谁来帮帮我吧!我用透析法复性蛋白,但出现了好多沉淀,后面我要用Ni柱来纯化,我现在不知道复性后怎么处理?把沉淀弃掉吗?谁来帮帮我吧!首先，可以再多加一点透析液看看能否将之溶掉，这样可以减少由于免疫共沉淀的原因而与杂质一起沉淀的蛋白。
再次如果你的蛋白已经复性，并且能很好的溶解的话，那么沉淀要么是杂质，要么是不能复性的蛋白，我认为可以离心去除。
出现絮状沉淀是很正常的现象，因为透析本身就是一个复性的过程，那些出现絮状的沉淀就是一些不能够复性成为天然结构的一些目的蛋白和一些杂蛋白，而这些都是我们所不需要的。
所以说出现絮状沉淀是正常的也是我们希望看到的。
至于出现沉淀的原因不外乎条件变化太剧烈了，建议不要让透析的条件变化太剧烈了，主要是PH的浓度的变化和样品中一些其他东西如尿素的浓度变化。
如果楼主透析样品中出现太多的沉淀，甚至于跑胶中基本没有带了，那么建议楼主换一种透析液来用，如用TGE也就是传说中的万金油来试试，我一直用的是这种透析液，效果很不错。
TGE配法如下：50mM Tris0.5mM EDTA50mM Nacl5%或10％甘油如果有条件加入1％的甘氨酸或精氨酸和谷胱甘肽会更好些。
沉淀可以拿来重溶，但是重溶的可行性不大，也就是重新溶解的可能性不大谢谢您们的回答,我再试试.我还想问一下是先过柱后复性还是先复性后过柱那种方法好?我查资料怎么都不一样.还有我纯化的蛋白浓度比较底,能不能浓缩一下,我后面作免疫动物实验,怎样保存蛋白较好?包涵体能放多久不出现问题?如透析液用TGE的话,一次透析,还是也要分步,要不要调PH或是浓度?046 wrote:谢谢您们的回答,我再试试.我还想问一下是先过柱后复性还是先复性后过柱那种方法好?我查资料怎么都不一样.还有我纯化的蛋白浓度比较底,能不能浓缩一下,我后面作免疫动物实验,怎样保存蛋白较好?包涵体能放多久不出现问题?先过柱後复性。
透析 抗体沉淀
透析 抗体沉淀
透析是一种分离和纯化生物分子的技术，通常用于去除溶液中的小分子杂质或盐类。
抗体沉淀是指抗体分子在特定条件下形成不溶性聚集物的现象。
在透析过程中，抗体可能会发生沉淀，这可能是由于以下原因导致的：
1. 蛋白聚集：抗体分子在溶液中可能会相互作用，形成聚合体或沉淀。
这可能是由于抗体分子之间的静电相互作用、疏水性相互作用或其他因素引起的。
2. 物理条件变化：透析过程中的物理条件（如温度、pH 值、离子强度等）的变化可能导致抗体不稳定并形成沉淀。
3. 溶液配方不合适：透析缓冲液的配方不合适，可能导致抗体失去稳定性并发生沉淀。
为了减少抗体沉淀的发生，可以采取以下措施：
1. 优化透析条件：选择适当的透析缓冲液，控制温度、pH 值和离子强度等物理条件，以维持抗体的稳定性。
2. 添加剂的使用：可以添加一些稳定剂、还原剂或蛋白酶抑制剂等，以提高抗体在透析过程中的稳定性。
3. 透析前处理：在进行透析之前，可以对抗体溶液进行预处理，如离心、过滤或使用亲和层析等技术，以去除可能导致沉淀的杂质。
如果抗体在透析过程中发生沉淀，可以尝试优化透析条件、改变溶液配方或使用其他纯化方法来解决问题。
对于特定的抗体和实验条件，可能需要进行一些试验和优化，以找到最佳的透析方案。
血透室首次透析观察要点
血透室首次透析的观察要点主要包括以下几个方面：
病情观察：观察患者的病情变化，包括生命体征、意识状态、尿量等。
特别注意有无头晕、乏力、恶心、呕吐、抽筋、低血压等不适症状，这些症状可能是透析过程中的并发症，需要及时处理。
血管通路观察：观察患者血管通路的情况，包括内瘘的震颤、杂音以及穿刺部位有无渗血、血肿等。
确保血管通路的通畅，避免血栓形成或感染。
透析器及管路观察：检查透析器及管路有无凝血、漏血、打折、扭曲等情况。
确保透析器及管路的正常运行，避免影响透析效果。
透析液观察：观察透析液的颜色、澄清度以及有无絮状物等。
透析液应该保持清澈透明，无杂质。
机器运转观察：检查透析机各部件的运转情况，包括血泵、肝素泵、动静脉压监测、空气监测等。
确保机器正常运转，及时处理故障。
并发症预防：在透析过程中，要密切关注患者的身体状况，预防可能出现的并发症，如低血压、失衡综合征、致热原反应、出血等。
一旦发现异常情况，应立即采取相应措施。
心理护理：对于首次接受透析的患者，可能存在恐惧、焦虑等情绪。
医护人员应给予关心和支持，解释透析的目的和过程，帮助患者建立信心，积极配合治疗。
总之，在血透室首次透析时，医护人员需要全面细致地观察患者的病情和透析情况，及时发现并处理问题，确保透析的顺利进行。
血清解冻后发现有絮状沉淀物出现
血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理？血清中沉淀物的出现有许多原因，但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性造成的；而血纤维蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血清解冻后，也会存在于血清中，亦是造成血清沉淀物的主要原因之一。
但这些絮状沉淀物，并不影响血清本身的质量。
若您欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管中，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。
我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞您的过滤膜。
支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染（某些支原体在人体是正常菌群）、培养基的污染、被污染细胞造成的交叉污染、实验器材的污染、制备细胞的原始组织或器官的污染，等等。
体外生长的细胞对微生物及一些有害有毒物质没有抵抗能力，因此培养基应达到无化学物质污染、无微生物污染（如细菌、真菌、支原体、病毒等）、无其他对细胞产生损伤作用的生物活性物质污染（如抗体、补体）。
对于天然培养基，污染主要来源于取材过程及生物材料本身，应当严格选材，严格操作。
对于合成培养基，污染主要来源于配制过程，配制所用的水，器皿应十分洁净，配制后应严格过滤除菌。
由于体外培养细胞自身没有抵抗污染的能力，而且培养基中的抗生素抗污染能力有限，因而培养细胞一旦发生污染多数将无法挽回。
支原体污染后，因为它们不会使细胞死亡可以与细胞长期共存，培养基一般不发生浑浊，细胞无明显变化，外观上给人以正常感觉，实则细胞手到多方面潜在影响，如引起细胞变形，影响DNA合成，抑制细胞生长等。
组织细胞培养工作中，可以从以下几方面来预防支原体的污染：控制环境污染；严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基冲加入适量的抗生素。
抗生素主要用于消毒培养液，是培养过程中预防微生物污染的重要手段，也是微生物污染不严重时的“急救”方法。
不同抗生素杀灭微生物不同，应根据需要选择。
在细胞培养过程中如果发现破碎的细胞甚多，培养细胞需要频繁改善营养环境才能支持长期传代培养时，应该怀疑支原体污染。
量子点在透析过程中出现沉淀的原因
量子点在透析过程中出现沉淀的原因量子点是一种具有优异光电性能的新型纳米材料，其在透析过程中出现沉淀，是因为其特殊的化学性质。
下面将分步骤对此进行阐述。
第一步：了解量子点的性质量子点是一种由几百到几千个原子组成的球形纳米粒子，其直径为1到10纳米左右。
量子点具有优异的荧光性能、压敏性能和电致变色性能，同时由于其特殊的结构和尺寸效应，还具有较强的催化性能和电化学性能。
第二步：了解透析的基本原理透析是一种用于治疗肾功能障碍的治疗方法，其基本原理是通过半透膜将血液中的有害物质分离出去，使血液中的有益物质不流失。
在透析过程中，血液通过透析器，在半透膜上形成一层压力差，使血液中的有益物质得以通过半透膜进入透析液中，从而达到治疗的目的。
第三步：分析量子点沉淀的原因在透析液中，由于量子点具有优异的分散性，很容易在透析过程中分散在透析液中，成为透析液中的一个成分。
然而，量子点具有一定的胶体稳定性，当其浓度超过一定阈值时，就容易出现沉淀现象。
这是因为透析液中的成分会对量子点表面产生吸附作用，形成一层覆盖层，导致量子点之间发生相互作用，从而形成沉淀。
第四步：解决量子点沉淀的方法为避免量子点的沉淀，可以采取以下措施：1. 在透析液中加入一定浓度的分散剂，以增加量子点的胶体稳定性。
2. 控制透析液中量子点的浓度，避免超过阈值。
3. 选择合适的透析器和半透膜，减小透析液中有害成分的浓度，从而减少量子点的沉淀。
总结：量子点的沉淀是由于其特殊的化学性质，在透析液中超过阈值后形成的现象。
为避免该现象，可以在透析液中加入分散剂，控制量子点的浓度，选择合适的透析器和半透膜。
量子点的出现为透析液的治疗效果提供了新的思路和方法。
透析后絮状沉淀
透析后絮状沉淀
蛋白透析时产生的絮状沉淀真的令不少人痛心不已，有时明明看了又看，都没发现哪里不对，那么，这其中可能是哪里出现问题，还有这些问题从哪些方面着手解决最合适呢?请看下文分析：蛋白透析产生沉淀可能有以下原因：
1.由高浓度的蛋白变性试剂(如8m尿素)，到低浓度，再到不含变性剂的buffer，如果条件变化剧烈，使得蛋白不正确折叠而沉淀，这种情况比较常见。
如果选择透析的方法，一定要多加几个中间浓度梯度，而且注意低温(4度)，这有利于蛋白正确折叠。
2.透析袋本身有一定的吸附，可以通过磁力搅拌来降低吸附。
3.透析液PH靠近等电点，像catzp说的，换buffer。
4.透析袋不干净?楼主不会范这种错误吧。
或者没认真处理，有杂质、金属离子
建议：
1 可以采用梯度浓度透析，先采用与你纯化后蛋白盐浓度相近的透析液透析，4-8小时后换更小浓度的盐溶液透析，最后采用生理盐水或PBS(pH 7.4)透析。
例如：用6M盐酸胍沉淀的目的蛋白，第一步透析可采用4M盐酸胍透析，4-8小时后采用2M盐酸胍透析，再之后可以使用PBS或生理盐水。
2 透析液的pH值不要和目的蛋白的等电点接近，这样目的蛋白可能会更容易沉淀。
3 保持蛋白浓度在mg/ml量级上面。
4 用20mM的醋酸透析也能降低沉淀
5 加一些保护剂，如蔗糖，甘油，巯基乙醇等。
6 减少脱盐时间。
可考虑用超滤或者G系列的凝胶脱盐，这样时间较快，减少蛋白质的变性。
7 增加蛋白质浓度也可在一定程度上减少透析过程中蛋白质的沉淀，不过效果不是特别好的。
8 最后，不排除是蛋白不稳定的可能性，可在提纯开始时加点甘油，浓度控制在10-25%左右。
透析法制胶束出现絮状物的原因
透析法制胶束出现絮状物的原因透析法制胶束是一种常用的方法，用于制备纳米级胶束。
然而，在制备胶束的过程中，有时会出现絮状物，影响胶束的质量和稳定性。
本文将探讨透析法制胶束出现絮状物的原因。
透析法制胶束是一种将表面活性剂和溶剂透析除去的方法，以获得纯净的胶束溶液。
透析法通常包括两个步骤：溶剂透析和溶剂交换。
在溶剂透析过程中，胶束溶液被置于半透膜中，通过膜的孔隙，使溶剂中的杂质透析出去。
在溶剂交换过程中，透析膜被更换，以去除溶剂中的残留活性剂。
然而，有时在透析法制备胶束的过程中，胶束溶液中会出现絮状物，这可能是由于以下原因导致的。
溶剂选择可能是引起絮状物形成的一个重要原因。
在透析法中，溶剂通常是水或有机溶剂。
如果选择的溶剂中存在杂质或固体颗粒，当溶剂透析时，这些杂质或固体颗粒可能会被带入胶束溶液中，从而导致絮状物的形成。
过高的溶液温度也可能导致絮状物的形成。
在透析法制备胶束的过程中，溶液温度应该控制在适当的范围内，以确保胶束的稳定性。
如果温度过高，活性剂分子可能会发生热失活，导致胶束解聚和絮状物的形成。
过高或过低的pH值也可能是絮状物形成的原因之一。
在透析法制备胶束的过程中，pH值应该控制在适当的范围内，以维持胶束的稳定性。
如果pH值过高或过低，活性剂分子可能会发生离解或反应，导致胶束解聚和絮状物的形成。
胶束溶液中的离子浓度也可能影响絮状物的形成。
透析法制备胶束时，溶液中的离子浓度应该控制在适当的范围内，以维持胶束的稳定性。
如果离子浓度过高，离子与活性剂分子之间的相互作用可能会导致胶束解聚和絮状物的形成。
制备过程中的搅拌速度和时间也可能对胶束的质量和稳定性产生影响。
搅拌速度和时间应该适当控制，以确保胶束的均匀分散和稳定性。
如果搅拌速度过快或时间过长，可能会导致胶束解聚和絮状物的形成。
透析法制备胶束出现絮状物的原因可能是溶剂选择不当、溶液温度过高、pH值过高或过低、离子浓度过高以及搅拌速度和时间不当。
为了获得高质量和稳定性的胶束溶液，制备过程中应该注意控制这些因素，并选择适当的操作条件。
血液透析血路管静脉壶堵塞的原因及其护理进展
血液透析血路管静脉壶堵塞的原因及其护理进展芦静;王薇【摘要】对血液透析静脉壶中白色颗粒物的国内外研究现状进行分析，从多角度分析血液透析静脉壶内血凝块堵塞滤网的原因，提出预防血液透析静脉壶内血凝块堵塞护理干预措施，重视白色颗粒物部分或全部堵塞滤网的问题。
【期刊名称】《护理研究》【年(卷),期】2016(030)031【总页数】4页(P3851-3854)【关键词】血液透析;血路管;静脉壶;堵塞;血凝块;颗粒物;原因;护理【作者】芦静;王薇【作者单位】310006，浙江大学医学院附属第一医院;310006，浙江大学医学院附属第一医院【正文语种】中文【中图分类】R473.57血液透析(hemodialysis,HD)是维持尿毒症病人生存的有效手段，是一种体外循环的过程[1]。
病人血液与穿刺针、管道和透析膜等接触可激活机体的凝血系统，导致血栓形成，堵塞透析器和血路管，致使体外循环难以进行[2]。
静脉壶在血路管中处于血液进入病人体内之前的位置，此处易发生凝血[3]。
国内对血液透析静脉壶堵塞问题集中在静脉壶血凝块堵塞滤网上，而对白色颗粒物部分或全部堵塞滤网的问题未引起重视。
在静脉壶中由于血凝块或颗粒物的形成阻碍了血流的前进，使滤网全部堵塞造成血液透析终止，这不仅严重影响治疗目标的完成，导致病人失血，还会因更换血路管和透析器，增加病人的经济压力。
除此以外，颗粒物的形成以及部分堵塞滤网对血液透析病人的影响有待研究。
因此，预防静脉壶堵塞对血液透析治疗目标的完成具有重要意义。
本研究从静脉壶的结构及病人抗凝方式、凝血状态和护理干预措施等方面综述了护理干预对预防静脉壶堵塞的重要作用。
在临床工作中，观察到部分病人血液透析结束后，血液透析血路管静脉壶中有1 mm～3 mm白色不透明的均匀颗粒附着在静脉壶内壁或滤网上。
查阅资料发现：Watnick等[4]学者在维持性血液透析病人的体外循环血路管中发现了1 mm～3 mm的均匀的白色不透明颗粒牢固地附着在管壁上，通过微观和生物化学分析定义为由血小板和纤维蛋白的聚集而形成的白色血栓,电镜扫描下可见血小板激活状态的改变，伴随纤维蛋白和少量的嵌入红细胞。
腹膜透析时引流出的腹膜透析液浑浊怎么办？
腹膜透析时引流出的腹膜透析液浑浊怎么办？
正常情况下腹膜透析引流出来的透析液为清亮、淡黄色液体，有时液体中有少许的絮状物，为蛋白质析出物。
术后早期亦可因术中血管结扎不彻底，导致血液进入腹腔而呈现血性腹透液，但长期腹膜透析的患者透析液浑浊很可能是发生了腹膜透析相关腹膜炎.
一旦出现腹膜透析液浑浊的情况，应观察有无其他腹部异常情况，并尽快就医。
可使用无菌容器留取混浊的引流液送医院进行细菌培养，以明确致病菌，并按照医生制订的治疗方案进行抗感染治疗。
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蛋白透析时产生的絮状沉淀真的令不少人痛心不已，有时明明看了又看，都没发现哪里不对，那么，这其中可能是哪里出现问题，还有这些问题从哪些方面着手解决最合适呢?请看下文分析：
蛋白透析产生沉淀可能有以下原因：
1.由高浓度的蛋白变性试剂(如8m尿素)，到低浓度，再到不含变性剂的buffer，如果条件变化剧烈，使得蛋白不正确折叠而沉淀，这种情况比较常见。
如果选择透析的方法，一定要多加几个中间浓度梯度，而且注意低温(4度)，这有利于蛋白正确折叠。
2.透析袋本身有一定的吸附，可以通过磁力搅拌来降低吸附。
3.透析液PH靠近等电点，像catzp说的，换buffer。
4.透析袋不干净?楼主不会范这种错误吧。
或者没认真处理，有杂质、金属离子
建议：
1 可以采用梯度浓度透析，先采用与你纯化后蛋白盐浓度相近的透析液透析，4-8小时后换更小浓度的盐溶液透析，最后采用生理盐水或PBS(pH 7.4)透析。
例如：用6M盐酸胍沉淀的目的蛋白，第一步透析可采用4M盐酸胍透析，4-8小时后采用2M盐酸胍透析，再之后可以使用PBS或生理盐水。
2 透析液的pH值不要和目的蛋白的等电点接近，这样目的蛋白可能会更容易沉淀。
3 保持蛋白浓度在mg/ml量级上面。
4 用20mM的醋酸透析也能降低沉淀
5 加一些保护剂，如蔗糖，甘油，巯基乙醇等。
6 减少脱盐时间。
可考虑用超滤或者G系列的凝胶脱盐，这样时间较快，减少蛋白质的变性。
7 增加蛋白质浓度也可在一定程度上减少透析过程中蛋白质的沉淀，不过效果不是特别好的。
8 最后，不排除是蛋白不稳定的可能性，可在提纯开始时加点甘油，浓度控制在10-25%左右。