Biometra梯度PCR仪使用说明
PCR仪使用手册
选择/取消热盖预热
输入温度和时间设置
设置温度梯度
查看模块的温度梯度值
设置循环次数
冷却到环境温度以下
储存程序
6浏览/编辑程序数据
删除/插入程序档
拷贝程序
删除程序
7其他选项的设置
设置时间增量
设置“触地”(touch down)PCR
调节加热和冷却坡度
8运行程序
选择和开始程序
操作过程中的显示
PCR仪使用手册
Biometra T
用户手册
型号
050-810 Tgradient48
050-811 Tgradient96
Biometra
biomedizinische Analytik GmbH
Rudolf-Wissell-Str. 30, D-37079 Goettingen
Tel.: 0551/50 686-0; Fax: 0551/50 686-66
Tgradient控制板(图形见英文说明书)
(由左向右)
图形显示
电源开关:背光=电源打开
功能键:相应的具体功能在屏幕上指示
光标键:用来在设置程序的时候自由移动。用来在列表中滚动。
容易清洁的键盘
初始自检
启动Tgradient之后,会显示设备的序号和软件版本。
Tgradient
Serial No 1234567
盖子卡在顶部:
按住金属针,顺时针小心的旋转转轮,直到您可以感觉到正常的阻力(不再有咔哒声,离合器已经放开了)。把金属针松开,把盖子放下,直到离合器装置启动(咔哒声,施加理想压力)
盖子卡在底部:
按住金属针,逆时针小心的旋转转轮,直到您可以感觉到正常的阻力(不再有咔哒声,离合器已经放开了)。把金属针松开,逆时针旋转转轮,直到压力全部放出。打开盖子。
梯度型基因扩增仪仪安全操作及保养规程
梯度型基因扩增仪仪安全操作及保养规程1. 前言梯度型基因扩增仪(Gradient PCR)是一种在分子生物学实验室中广泛使用的设备,用于放大DNA序列和基因。
准确而安全的操作和保养梯度型基因扩增仪对实验结果的可靠性和持久性至关重要。
本文将介绍梯度型基因扩增仪的安全操作规程以及保养规程,以帮助用户正确并长期保持设备的稳定运行。
2. 安全操作规程2.1 仪器放置•将梯度型基因扩增仪放置在平坦、干燥且通风良好的实验室台面上。
•确保仪器周围无堆积物和杂物,以免干扰设备的正常工作。
•不要将其他电子设备放置在梯度型基因扩增仪附近,以防止干扰。
2.2 电源连接•将梯度型基因扩增仪正确插入适配器,并将适配器插座插入电源插座。
•在连接和关闭电源时,务必保持手干燥,以防止触电。
2.3 温控系统•在使用梯度型基因扩增仪进行实验之前,务必等待温控系统稳定至设定温度。
•禁止将液体或其他物质直接放置在温控系统上,以免影响设备的稳定性和易损性。
•在打开和关闭温控系统时,应缓慢操作,以免对设备和试剂产生不必要的机械冲击。
2.4 盖板和试管•在使用梯度型基因扩增仪前,必须确保盖板安装正确并紧固。
•使用耐高温的试管,以防止热失焦等不良情况的发生。
•不要将试管放置在盖板之外或超过设备容量,以确保热散发均匀。
2.5 安全操作•在操作梯度型基因扩增仪时,应按照设备的说明书进行操作,并熟悉设备的各项功能和参数。
•注意观察显示屏上的温度、时间和其他相关参数,确保实验条件正确设定。
•在实验过程中,不要随意打开设备的盖板,以免对实验产生干扰或带来安全隐患。
3. 保养规程3.1 清洁•定期关闭电源,使用柔软且干燥的布清洁设备的外部表面。
•不要使用含酸性、碱性或有机溶剂的清洁剂,以避免损坏外壳材料。
•如果试剂溢出或设备表面有液体残留物,应立即使用干燥布擦拭干净。
3.2 维护•定期检查梯度型基因扩增仪的电源线和连接器是否磨损或损坏,如有问题应立即更换。
梯度pcr仪器操作流程
梯度pcr仪器操作流程
梯度PCR仪器是一种用于DNA扩增的仪器,通过在反应管中设
置不同温度梯度,可以在同一反应中同时进行多个不同的PCR反应。
梯度PCR仪器的操作流程如下:
1. 准备反应体系:首先,准备PCR反应所需的试剂和模板DNA。
根据实验设计,确定需要进行的PCR反应数量和反应条件,包括引
物浓度、模板DNA浓度等。
将这些试剂按照配方加入到反应管中。
2. 设置PCR程序:打开梯度PCR仪器,根据实验设计设置PCR
程序。
在程序中设置不同的温度梯度,通常从低温到高温逐渐增加,以确保在不同温度下进行PCR反应。
3. 放置反应管:将装有反应体系的反应管放入梯度PCR仪器中。
确保反应管的位置正确,以免影响PCR反应的进行。
4. 启动PCR程序:关闭仪器的盖子,启动PCR程序。
仪器会根
据设置的程序自动进行PCR反应,在不同温度下进行循环加热和降温,以完成DNA扩增过程。
5. 监控PCR反应:在PCR反应过程中,可以通过仪器上的显示
屏监控反应的进行。
可以观察到PCR曲线的变化,以判断反应是否
正常进行。
6. 收集PCR产物:在PCR反应结束后,取出反应管,可以进行PCR产物的分析和检测。
根据实验设计,可以进行凝胶电泳、测序等操作,以验证PCR反应的结果。
总的来说,梯度PCR仪器的操作流程相对简单,只需要准备好反应体系和设置好PCR程序,仪器会自动完成PCR反应的进行。
通过梯度PCR仪器,可以同时进行多个不同的PCR反应,提高实验效率和准确性,是分子生物学研究中常用的实验工具之一。
BIO-RAD MyCycler梯度PCR仪操作规程
潍坊医学院医学研究实验中心仪器简明操作规程汇编
BIO-RAD MyCycler梯度PCR仪操作规程
1、接通电源,启动PCR仪。
2、从左下方的程序库进入,出现一程序界面。
在右侧栏里是随机匹配的程序通用模式,实验者可按照自己的具体需要编辑程序,最后save as 保存为自命名程序,自命名程序出现在程序库界面的左侧。
3、选取自己的程序run,之后出现一个界面提示你定义管内的样本量,按实际填写;再选择是否用hot start。
4、以上全部完成后运行程序。
使用注意事项:
1、此型号PCR仪为96反应模块,用0.2ml平顶管或96孔PCR板;
2、反应模块的温度变化如上图所示;
3、如果在扩增过程中出现突然停电的情况,请立刻向实验室工作人员报告(突发停电情况有损设备);
4.程序中最终的保温温度请设置为12-18 °C,反应结束后尽快将样品取出,以免影响设备半导体的寿命。
BIO-RAD 梯度PCR仪
BIO-RAD梯度PCR仪文章来源: 发布时间:2009-4-29 16:46:08 阅读:1452次BIO-RAD梯度PCR仪一、仪器名称:Bio-Rad梯度PCR仪仪器型号:BIO-RAD mylyder生产厂家:BIO-RAD PACIFIC LTD,USA二、操作规程1.插上电源,等机器完成自检后,就会显示主菜单。
2.在主菜单中,按F2-Creat键。
就可以进入编辑程序画面。
3.选择“Custom”选项,来完成客户编程。
按Enter键确认。
4.编辑程序参数:* 机器默认的客户程序包括三步:95度,30秒;55度,30秒;72度,0秒。
此时你可以用移动光标和数字来修改温度和时间。
* 如果你想增加或减少一个步骤、一个循环。
请在此时按F4-Add/Del键,来进行相应的选择。
此时,你可以用移动光标和数字键来修改温度和时间。
* 如果你想在某一个循环(这个循环必须包括两个步骤以上,且这个循环运行的次数必须大于一次)的某一步骤,增加或减少时间、温度,(即:每完成一个循环后,再次运行该循环到该步骤时,程序自动增加或减少时间、温度)请将光标移到时间栏,按F3-Option,选择是增加还是减少时间,然后再用数字键输入具体要变化的时间即可。
同理,将光标移到温度栏,再按F3-Option,选择是增加还是减少温度,最后再用数字键输入要变化的温度值就可。
温度变化精度值:0.1度;时间变化精度:1.0秒。
温度控制范围:4.0度-100.0度;时间控制范围:0秒-99分59秒。
* 本机还可以运行温度梯度程序。
你可以在任意一个程序的任何一个循环中的任一个步骤编辑温度梯度。
运行温度梯度程序的条件为:程序的温度控制范围:30-99度;温度梯度编辑范围:1-25度。
温度梯度的表示方法:在样品反应架上从前往后分别表示A—H行。
根据你编辑的温度梯度,机器自动分配每行温度。
编辑温度梯度方法如下:将光标移到你想要编辑的温度栏处,按F3-Option,然后选择TempGradient选项,此时就会显示最小、最大值都是1度的温度梯度。
PCR仪使用说明及注意事项
PCR仪使用说明及注意事项开机:PCR仪的开关在仪器的背面将开关打开后仪器显示如下界面F1(Run)选择一个程序并开始运行;F2(Create)F3(Edit)建立一个新程序或修改已有程序;F4(Util) 查看仪器最后运行的程序;F5(User)建立、编辑或删除新用户。
建立新用户:选择F5选择F2用户名可以用字母、数字或它们的组合命名,通过方向键选择字母、通过数字键选择数字。
命名完成后选择F1,用户名建立完成。
程序设置:1、新建程序选择用户名后,选择F2通过光标移动及数字键设定程序的各个参数(包括各反应阶段的事件、温度及循环数),完成后选择F2储存程序,出现以下界面,选择F3为程序命名选择F1保存。
2、编辑程序:在主菜单的界面下选择F2,选择需要编辑的程序选择F1编辑编辑完成后,选择F2保存程序信息。
运行程序:在主菜单下选择F1,然后选择运行的程序选择F1在此界面下需确定样品的体积,选择F1开始运行。
程序运行结束后出现以下界面退出到主菜单,取出样品并关闭电源。
注意事项:1、使用PCR仪需提前预订,预订的程序要标明退火温度和延伸时间:如果不用要及时取消或通知接下来要做的人。
2、不得无故拖延反应开始的时间,如无故拖延超过半小时,该时间段即刻取消,其他同学可协商使用。
3、PCR反应结束后请及时收取PCR产物,或交代同学及时帮忙收取。
若后续反应不能及时跟上,请务必关机!因为开机状态下,热盖将持续工作,长此以往,热盖容易损坏。
4、PCR反应最后一步请务必设置为:16℃,2 min。
(切忌4℃,∞,避免压缩机过度耗损!)5、PCR仪不能同一温度设置较长时间,16℃3小时。
6、PCR仪不能开机运行过夜。
BIO-RAD MYCYCLER PCR 操作步骤
BIO-RAD MyCycler PCR仪操作步骤(一)接通电源,打开开关,如果仪器处于备用状态,可直接按显示屏上的standby键,在通过一个快速自动诊断程序后,初始界面将会出现。
(二)按F2键,初始界面上将会出现选择菜单。
(三)选择“Custom”项,并按Enter键以建立新的运行程序。
如果菜单已有的程序与你需要的程序相近,那么你也可以在选择菜单对已有的模板程序进行编辑。
(四)编辑运行程序(1)仪器默设的运行程序有3个简单的步骤组成。
95℃30秒,55℃30秒,72℃30秒。
你将根据需要按如下步骤更改。
(2)按F4键增加或删除部分步骤,注意竖线把不同的循环周期搁开,正在运行的循环次数在第一次循环的左下脚标出。
(3)采用方向键在不同的步骤之间转换,调定点温度将显示在温度曲线上方。
相反运行时间将显示在温度曲线下方。
循环次数将在每一个循环最后一步的右下角,后跟随“x”符号。
(4)在用方向键选择要更改的温度调定点以及运行时间后,按F3,选择要更改的操作,此时会弹出一个新的界面,在此界面下,可以输入所需的时间或温度。
(5)程序编辑完成后按F5。
(五)在选择菜单中点“Sae Protocol As…”保存编辑程序,以字母与数字组合命名。
然后按Enter键完成操作。
(六)此时初始界面会出现,按F1键进入程序储存库,用箭头键选择你新编辑的程序,随后按Enter键,将会出现一个选择菜单。
选择“Run Protocol”(七)随之出现运行方案界面。
提示是否想热启动(如果你选择“YES”将会进一步提示你所需要的热启动温度),如果你选择“Algorithmic Measurement”,界面上还会让你选择温度标准以及取样容积标准。
(八)按F5开始运行程序。
(九)运行完毕后按Stop键完成操作。
Biometra PCR仪使用说明及注意事项
Biometra PCR仪使用说明及注意事项一、编辑一个程序按[C programs]进入编辑模式。
要在主目录中创建一个程序请按[D enter]。
要进入一个子目录,用→键将光标向右移动,然后用↑↓键选择一个子目录。
选择的目录会以强光突出出来。
按[D enter]进入选择的子目录。
按[A list]浏览该目录下所有已建立文档和空文档的列表。
用↑↓键在列表中滚动,然后用[D enter]确认其中一个记忆库您现在可以输入热盖的温度了。
一般来说,盖子的温度应该比程序中的最高温高10 ℃。
完成了所有的预先设置之后,按[Denter]打开设置页。
在这个设置页中,您可以输入您的循环中需要的所有参数。
设置页:Temp[ ℃] time ← # gradient optio →1:2:3:4:A? B iert/delete C gm ok D enter每一个设置都用[D enter]来确认。
光标将自动移动到下一个区域。
您也可以通过向前移动光标键来确认一个数值。
现在输入协议中第一档的温度:用[D enter]确认温度。
为其输入时间,用小数点来间隔。
顺序为h.m.s。
用[D enter]确认时间设置,或者用光标键移动到下一个区域。
在Gradient下输入梯度的范围,最大梯度为40℃循环是通过选择返回循环的目标和返回循环的次数来定义的。
在用←标记的列中,您可以选择返回循环的目标档。
#表示循环的次数。
设定循环值=总循环值-1,即,总循环数为30时应输入“29”。
用[C pgm ok]来储存一个完整的程序。
程序数据永久的储存在记忆中:二、运行程序按[B start/stop]选择一个程序。
用→↑↓键选择一个子目录,或者用[D enter]进入主目录。
输入您想要启动的程序的号码。
或者,按[A list]在该子目录中的所有程序的列表中选择一个程序。
用↑↓键在列表中滚动选择。
用[D enter]确认用强光突出的程序。
按[D start]启动程序。
梯度PCR仪标准操作程序
梯度PCR仪标准操作程序
ABI 9902 Veriti TM 96-well thermal cycler 梯度PCR仪标准操作程序
1.使用前打开电源,预热20分钟。
2.待机器自检完成后,进入主界面。
3.点击“Browse/New Methods”按键,进入试验程序设置。
4.可在下面列表单中选择最近用户保存的试验程序,然后点击
“View/Edit”,进行编辑使用;也可直接点击“New”按键,进行新的试验程序设置。
5.点击“Add”“Delete”按键,可增删试验步骤。
6.点击“Save”按键可保存当前试验程序,方便下次试验使用。
7.待所有试验程序设置完毕后,打开热盖,加入样品,应尽量使样
品集中在样品槽中央部位,点击“Run”按键,进入试验状态。
8.试验完成后,取出样品,关闭电源。
PCR仪使用说明书
PCR 仪使用说明书步骤:1、开机:打开开关,视窗上显示“SELF TEST ”,显示10秒中后,显示RUN-ENTER准备执行程序。
2、放入样本管,关紧盖子。
3、如果要运行已经编好的程序,则直接按《Proceed 》,用箭头键选择已储存的程序,按《Proceed 》,则屏幕显示:按《Proceed 》选择ENABLE ,则开始执行4、如果要输入新的程序,则在RUN-ENTER 菜单上用箭头键选择ENTER PROGRAM,按《Proceed 》,屏幕显示按《Proceed 》,1)选择NEW,按《Proceed 》确认(如何输入字母、数字2)输入程序步骤:名字输入后,显示 按《Proceed 》则可以输入温度(0~100℃),按《Proceed 》确认后,则可以输入孵育时间,用《Select 》键移动光标,输入数字,完成后按《Proceed 》确认,跳到下一步,输入方式同上。
3)选择GOTO ,输入循环步骤时链接到第几步(循环数最多可达9999次)(为实际循环数-1)。
4) 选择option,显示 再选择increment,按《Proceed 》Proceed 》确认,然后输入每个循环增加或减少的温度,增加用正值,减少用负值(-0.1℃~6℃),按《Proceed》确认。
选择extend, 按《Proceed》确认,输入每个循环增加或减少的时间(-60~60秒),按《Proceed》确认。
选择slop(指温度上升或下降的速率),输入温度的改变值(-0.1~1.5℃)按《Proceed》确认,然后输入加热或致冷的速度,按《Proceed》确认。
4)选择End,输入结束步骤。
5、输入完成的程序后,到RUN-ENTER菜单,选择新程序,开始运行。
6、其它:用《pause》可以暂停一个运行的程序,再按一次继续程序。
用《stop》或《Cancel》可停止运行的程序。
编辑程序:1、可以用《Cancel》键删除输错的值,输入新的值后按《Proceed》确认。
Biometra TGRADIENT PCR 仪操作说明
Biometra TGRADIENT PCR 仪操作说明
1.将PCR仪的电源线连接到墙上的插座上。
2.将PCR仪的开机键打到接通的位置。
3.进入操作界面后按C键(programs)进入程序主干(main direct),主干有10个分支(subdirect),每个分支可储存100个程序。
4.利用光标移动键进入分支(subdirect),按D键(enter)进入编程界面。
5.利用光标移动键和数字键设置程序号(program no)和程序名称(name),程序名称用数字或者英文命名都可。
接着设置热盖温度(lid temp),一般设置一个固定值103℃。
预热选项(preheating)设置为ON。
以上参数设置每设置好一项参数按D键(enter)方可进入下一个参数设置。
6.
7.按下C键(pgm ok),程序设置成功。
8.将PCR仪上盖的旋钮逆时针方向拧松,将开盖键往左掰并将盖子提起。
9.放入PCR样品,关上PCR仪的盖子并顺时针方向拧紧旋钮。
10.按B键(start/stop)进入程序主干,再进入分支,选择刚才编好的程序,按D键(enter)运行程序。
11.PCR运行结束后先不要关机,待机半个小时后等热盖温度降下来后再关机。
12.做好PCR仪的清洁工作,并做好使用人姓名、使用时间、仪器运行的状况的记录。
梯度PCR仪标准操作程序
ABI 9902 Veriti TM 96-well thermal cycler 梯度PCR仪标准操作程序
1.使用前打开电源,预热20分钟。
2.待机器自检完成后,进入主界面。
3.点击“Browse/New Methods”按键,进入试验程序设置。
4.可在下面列表单中选择最近用户保存的试验程序,然后点击
“View/Edit”,进行编辑使用;也可直接点击“New”按键,进行新的试验程序设置。
5.点击“Add”“Delete”按键,可增删试验步骤。
6.点击“Save”按键可保存当前试验程序,方便下次试验使用。
7.待所有试验程序设置完毕后,打开热盖,加入样品,应尽量使样
品集中在样品槽中央部位,点击“Run”按键,进入试验状态。
8.试验完成后,取出样品,关闭电源。
Biometra PCR仪操作说明
屏幕显示
输入数据
输入键
说明
Edit sto:
1
改
Pgm 1 step No: 3
temp 3: 72℃
stope 3:2.00ª/S
tmpInc 3:0.00℃
timeInc 3:OS
1
1
temp 3:72℃ lid temp:100℃
Edit/END ENTER
需对第一程序作一延时修
spee.Fonct ENTER
间
time 2:
30
cycle 2 to:
temp 3: ℃
72
间
time 3:
1.
cycle 3 to:
1
步
No. of cycles:
29
temp 4: ℃
4
time 4:
0
cycle 4 to
lid temp:off ℃ 100
Enter Enter Enter
输入第三步骤的温度和时
Enter Enter
编 程 步 骤:
以 30 个循环(94℃:1 分钟,52℃:30 秒,72℃:1 分钟),最后保持在 4℃的状态为例:
屏幕显示
输入数据 输入键
说明
22.0 off clear program 1 new? Enter=yes
stored 22.0 off Edit sto: temp 1: ℃ time 1:
生物秀论坛——资源共享、学术交流、互助社区 3
/bbs/
生物学仪器频道——仪器选购、使用与维修指南
/instrument
在 UNO 热传导板中更换 40 孔模板或 96 孔模板 1、 拔掉仪器主机电源。未拔掉主电源之前绝对不要打开机壳。 2、 将仪器倒放在软表面上。 3、 取下六个黑色螺钉(3mm 的 AllenKey),四个在金属底板的角上,另两个
PCR仪使用说明书
PCR仪使⽤说明书PCR 仪使⽤说明书步骤:1、开机:打开开关,视窗上显⽰“SELF TEST ”,显⽰10秒中后,显⽰RUN-ENTER准备执⾏程序。
2、放⼊样本管,关紧盖⼦。
3、如果要运⾏已经编好的程序,则直接按《Proceed 》,⽤箭头键选择已储存的程序,按《Proceed 》,则屏幕显⽰:按《Proceed 》选择ENABLE ,则开始执⾏4、如果要输⼊新的程序,则在RUN-ENTER 菜单上⽤箭头键选择ENTER PROGRAM,按《Proceed 》,屏幕显⽰按《Proceed 》,1)选择NEW,按《Proceed 》确认(如何输⼊字母、数字2)输⼊程序步骤:名字输⼊后,显⽰按《Proceed 》则可以输⼊温度(0~100℃),按《Proceed 》确认后,则可以输⼊孵育时间,⽤《Select 》键移动光标,输⼊数字,完成后按《Proceed 》确认,跳到下⼀步,输⼊⽅式同上。
3)选择GOTO ,输⼊循环步骤时链接到第⼏步(循环数最多可达9999次)(为实际循环数-1)。
4) 选择option,显⽰再选择increment,按《Proceed 》Proceed 》确认,然后输⼊每个循环增加或减少的温度,增加⽤正值,减少⽤负值(-0.1℃~6℃),按《Proceed》确认。
选择extend, 按《Proceed》确认,输⼊每个循环增加或减少的时间(-60~60秒),按《Proceed》确认。
选择slop(指温度上升或下降的速率),输⼊温度的改变值(-0.1~1.5℃)按《Proceed》确认,然后输⼊加热或致冷的速度,按《Proceed》确认。
4)选择End,输⼊结束步骤。
5、输⼊完成的程序后,到RUN-ENTER菜单,选择新程序,开始运⾏。
6、其它:⽤《pause》可以暂停⼀个运⾏的程序,再按⼀次继续程序。
⽤《stop》或《Cancel》可停⽌运⾏的程序。
编辑程序:1、可以⽤《Cancel》键删除输错的值,输⼊新的值后按《Proceed》确认。
biometre PCR仪中文说明
到压力全部放出。打开盖子。
重要:在离合器装置启动的状态下(施加理想压力时),千万不要使用金属针继续增加压力。这会导
致试管和设备的损坏!
5 创建一个程序
5.1 选择一个目录 在 T1 中,程序既可以储存在主目录中,也可以储存在 9 个单独的子目录中。在每个子目录中,最多
可以储存 100 个程序。为了方便的识别选择的储存位置,子目录可以被命名。(见 5.3) 由主菜单开始。
一旦名称输入完成了,用[C name ok]确认。
Directory: 5
Program no: 0
name:
TEST 1
Lid temp: °C
preheating: on
Edit
A?
B files C pgm OK D enter
5.5 输入热盖的温度
您现在可以输入热盖的温度了。一般来说,盖子的温度应该比协议中的最高温高 10°C。例如:如果
| -6. subdirect.:
| -7. subdirect.:
A?
B
C quit D enter
现在您位于主目录中。屏幕显示出子目录的结构。
5.2 选择一个程序储存库 程序可以储存在主目录或者子目录中。
要在主目录中创建一个程序请按[D enter]。
要进入一个子目录,用光标键→将光标向右移动,然后用光标键↑ ↓选择一个子目录。选择的目录会
你继续旋转转轮,压力不会再增加了。
注意:盖子的压力在满槽的时候达到最佳。如果槽中的试管很少,你应该在四个角的位置上放置一
些空薄壁管,以避免压力过大使试管损坏。
打开热盖:
逆时针旋转转轮释放压力。不再有阻力的时候就说明压力已经释放了。现在您可以打开盖子。
德国WhatmanBiometra公司温度梯度PCR仪(Tgradient)
德国Whatman Biometra公司温度梯度PCR仪(Tgradient)温度梯度PCR仪(Tgradient)梯度PCR仪特别适用于最适PCR反应条件的摸索,在单次PCR反应中可检验多个反应温度,温度梯度。
同一台仪器同样也可用于高效PCR扩增反应,原位PCR,酶切和连接反应等。
Tgradient温度梯度热循环仪,采用镀金银槽,具有极高的热传导性和热均一性,最快升温速度4℃/秒,最快冷却速度3.0℃/秒,15秒内温度均一性 0.5℃,温控精度 0.1℃,可选配离心管内温度探头,镀金银槽温控范围:-3~99℃,温度梯度最大可达40℃,可调式热盖,控制温度范围从30℃~110℃,6行LCD显示屏:图表式,人机界面友好,易学易用,特别功能:加热/冷却速度可调(0.01到4℃/秒),温度和时间随循环次数递增,暂停和自启动。
程序最多可有100个,最多99步/程序,总步骤可达2000步。
有打印机接口(Centronics)和计算机接口(RS232)。
降落PCR(touch down PCR):指的是每一个(或n个)循环退火温度逐步降低1度,直到达到一个较低的退火温度,该温度称为:“touchdown"退火温度,然后在该温度下继续循环10个左右循环。
退火温度的起始温度高于计算的TM15度左右(我觉得高于10度也可),在接下来的循环中,退火温度每个循环降低1-2度(一般为1度),直到低于TM5度。
该策略的目的在于确保第一个引物-模板杂交事件发生在最互补的反应物之间,即特异行扩增的反应物之间,当退火温度降低到非特异性扩增发生的水平时,特异产物在此时已经有一个几何数的起始优势,在剩余的反应中,特异产物会竞争非特异产物,特异产物始终优先扩增,从而产生单一的占主导地位的扩增产物。
该方法主要用于避免非特异性PCR产物的出现,尤其是当使用复杂的基因组DNA模板,非特异性退火易发生时。
例子:94度预变性3分钟,94度变性30秒,65度(计算退火温度55度)退火30秒,72度延伸1分钟。
biometra_pcr仪器如何设置循环
biometra pcr仪器如何设置循环引言PCR(聚合酶链式反应)是一种广泛应用于分子生物学实验室中的技术,可用于扩增特定的DNA片段。
biometra pcr仪器是一种高质量的PCR仪器,具有可靠的性能和稳定的结果。
本文将介绍biometra pcr仪器如何设置循环,并给出一些实际操作的建议。
1. 准备工作在开始设置PCR循环之前,需要进行以下准备工作:•检查仪器和试剂的完整性和有效期。
•准备样品和引物。
样品可以是DNA或RNA,引物是用于扩增特定DNA片段的寡核苷酸序列。
•准备PCR试剂,包括PCR反应体系中所需的缓冲液、酶和dNTPs。
2. 设置PCR参数在biometra pcr仪器上,可以通过以下步骤设置PCR参数:步骤1:打开仪器将biometra pcr仪器连接电源,并按照操作手册上的指示打开仪器。
步骤2:选择PCR程序biometra pcr仪器通常有预设的PCR程序,可以根据实验需要选择合适的程序。
常见的PCR程序包括标准PCR、荧光定量PCR和逆转录PCR等。
步骤3:设置温度参数根据引物的要求,设置PCR循环的温度参数。
常见的PCR温度参数包括:•退火温度(Annealing Temperature):扩增目标DNA片段的退火温度通常由引物的碱基序列决定,可以根据引物的Tm值(两条引物的Tm值的平均值)设置退火温度。
•延伸温度(Extension Temperature):在PCR循环的延伸步骤中,DNA聚合酶会在此温度下将引物结合到DNA模板上。
•热变性温度(Denaturation Temperature):通过高温使DNA模板的双链结构解开,在PCR循环的变性步骤中,DNA双链会解开成两条单链。
步骤4:设置循环次数根据实验需要,设置PCR循环的次数。
通常情况下,PCR循环次数会根据扩增目标的要求来确定。
一般建议进行25-35个PCR循环。
步骤5:保存设置在设置完PCR参数后,通过biometra pcr仪器上的保存功能保存设置。
Whatman Biometra 梯度PCR仪手册中文版
WhatmanT Manual梯度PCR仪手册中文版Software Version 5.00grTGRADIENT 是Biometra 系列产品中的最新高端温度循环仪。
它是我们大力发展的一款可快速优化反应参数的高性能常规分析设备。
采用了全新模块材料及最新的珀尔帖技术。
温度是提高反应特异性的关键因素之一。
使用新TGRADIENT可在单次运行中实现不同温度设置。
任一步骤中设置温度梯度范围可达40℃。
我们为使梯度变化尽可能线性相关做了大量工作,同时保证每排内温度均一性亦尤为重要。
各排温度数据可从帮助目录中查阅。
新TGRADIENT性能优良,其先进的温度梯度技术可为快速准确进行常规分析提供帮助。
银质模块的高热导性可快速升温并达平衡。
新TGRADIENT可在优化新的反应及常规分析中节省时间从而加快您的实验工作。
2 开始前准备2.1 安全预防措施请在开始操作梯度温度循环仪之前仔细阅读本手册。
·使用梯度温度循环仪时遵守实验室的普通安全预防措施。
·警惕高温样品,勿接触或打开样品管、小盘,高温流体可能溅出。
·在确保关闭热盖之前勿开始升温。
·开盖之前,释放盖压(见3.6)。
·开启、关闭热盖时勿将手置于热盖、外罩之间。
·勿触摸高温热盖。
·若仅有少量样品置于模块中时,请将样品管分布于模块四角,这样可以使各样品管平均受压防止单个样品管受压过重而损坏样品管。
·使用匹配塑料制品。
样品管、盘必须适合于加热模块,且适用于高温条件。
·梯度温度循环仪不包含用户自拆卸部分,请不要擅自打开外罩。
相关服务及维修由Biometra售后部门及技术人员提供。
·外罩、模块、导线或任何部分损坏情况下请勿使用设备。
·不可使用易燃、易爆、易挥发液体。
·工作中使用到易感染及特殊材料时请遵守相应的防护规则。
设备工作中模块及热盖会产生高温,谨防烫伤。
梯度PCR热循环仪简单操作步骤
梯度PCR热循环仪简单操作步骤1、连接电源,打开开关,让仪器在待机状态保持10分钟左右。
2、在待机状态下,按“exit”键直接进入编辑文件状态。
设置第1个程序单元Unit 1,先设置循环数Cyc.,此时循环数框格处的“0”在闪烁,按“数字健”输入所需循环数,按“enter”键确认。
3、接下来进入第1程序单元的第1节温度和时间设置,此时温度栏内的数字“0”在闪烁,按“数字键”输入所需温度后并按“enter”确认;温度设置好后,光标自动跳到时间栏内,并且时间栏内的数字“0”在闪烁,按“数字键”输入时间并按“enter”确认。
4、接着进入第1程序单元的第2节温度时间设置,此时温度栏内的数字0在闪烁,按“数字键”输入所需温度后并按“enter”确认;温度设置好后,光标自动跳到时间栏内,并且时间栏内的数字“0”在闪烁,按“数字键”输入时间并按“enter”确认。
5、如果要终止第1程序单元的设置,将第3节的温度和时间都设置为0并按“enter ”键。
6、第1程序单元各节温度和时间设置完成后,仪器将提示您是否选择温度和时间修饰功能。
用键和键,选择“Yes”或“No”。
选择“Yes”,则仪器将执行温度和时间自动递增或递减。
选择“No”,则关闭此功能。
7、进入温度和时间修饰功能以后,按“+/-”键和“数字键”输入每次循环第一节递增或递减的温度和时间(其中“+”表示递增,显示时省略;“-”表示递减)。
如第1节每次循环温度增加0.2C,时间增加2S。
按“+/-”键和“数字键”输入每次循环第二节递增或递减的温度和时间(其中“+”表示递增,显示时省略;“-”表示递减)。
如第2节每次循环温度减少0.3C,时间减少3S. 进入第2程序单元的设置,按“数字键”,输入循环次数,再按“enter”键. 进入第2程序单元的第1节温度时间设置,此时温度栏内的数字0在闪烁,按“数字键”输入温度后并按“enter”确认;温度设置好后,光标自动跳到时间栏内,并且时间栏内的数字0在闪烁,按“数字键”输入时间并按“enter”确认。