常用玻璃仪器及清洗、包扎与灭菌-电子图片.
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培训：常见玻璃器皿基本常识-种类、使用及清洁ppt课件
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左 右
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滴定类☆滴定管
注意事项：
（1）酸式、碱式滴定管不能混用。 （2）25mL、50mL滴定管的估计读数为±0.01mL。 （3）装液前要用洗液、水依次冲洗干净，并要用待装的溶
液润洗滴定管2-3次。 （4)调整液面时，应使滴管的尖嘴部分充满溶液，使液面保
持在“0’或 “0”以下的某一定刻度。读数时视线与管内液 面的最凹点保持水平。 (5)完毕滴定管中滴定液要倒掉，洗涤后注入蒸馏水。长期 不用还要将玻璃活塞和胶皮管取下，防止黏住。
③吸耳球轻轻吸取液体，当液 面上升至刻度标线1cm时，迅速 用右手食指堵住管口，松动食指 调整液面使其与标线相切；
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常用量器☆ 移液管
移液管的使用
④释放液体时，将移液管插 入接受容器中，使尖端接触 器壁， 使容器微倾斜，移 液管直立，然后松开手指使 溶液顺壁流下。
⑤当把液体由移液管释放出来时，由 于水分子的附着力，会有部份液体依 附在管尖，这是正常现象，若移液管 标有“吹”字，则应将管内剩余的溶 液吹出，若无则。
常见玻璃器皿的种类、使用及清洁
1
三 实验室常用玻璃仪器
一、容器类（试管、烧杯、锥形瓶、滴瓶 ）
二、量器类（吸量管、容量瓶、滴定管、 量筒）
三、特殊用途器皿类（玻璃漏斗）
2
（一）容器类☆ 试管
主要作用
试 管 1、在常温或加热时，用作少量物质的
反应容器； 2、盛放少量固体或液体； 3、用作收集少量气体。
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常用量器☆ 移液管
13
常用量器☆ 移液管
移液管移液操作关键步骤： 1、调整液面与视线平行 2、调整液面时，吸管提出液面 3、放出液体时，管尖贴壁15~30秒 4、尖端余液处理 一定要 依吸管的种类和标 识
常用玻璃器皿的洗涤、包装及灭菌
2016
三角烧瓶
常用器具
100 ml 250 ml 500 ml 1000 ml
• 盛无菌水、培养基 • 振荡培养微生物
载玻片与盖玻片
常用器具
75 mm × 25 mm
接种工具
• 接种环 • 接种针 • 接种钩
• 接种铲
常用器具
微量吸管
常用器具
试管
• 大试管
18mm×180mm
• 中试管
技能训练2
2016
实验室常用玻璃器皿洗刷、 消毒和包装
一、 实训目的Leabharlann 认识常用玻璃器皿的名称及规格， 熟
悉各种玻璃器皿的洗刷、包装和消毒
二、 仪器材料
试管、刻度吸管、培养皿、三角 烧瓶、烧杯、量筒、量杯、漏斗、乳 钵、普通棉花、脱脂棉、纱布、牛皮 纸、旧报纸、新洁尔灭、来苏儿、石 炭酸、肥皂粉、重铬酸钾、粗硫酸、 盐酸、橡胶手套、橡胶围裙等；
（3）载玻片 : 用后立即浸泡于消毒液中，经1～2d取出， 用洗衣粉液煮沸5min，再用毛刷刷去油脂及污垢，然后用 清水冲洗，晾干或将洗净的玻片用蒸馏水煮沸，趁热把玻 片摊放在干毛巾或干纱布上，稍等片刻，玻片即干，保存 备用或浸泡于95％酒精中备用。
（4）细菌培养用过的试管、平皿等
须高压蒸气灭菌后，倒去内容物，用热肥皂水刷去污 物，然后用清水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2～3次，晾干 或烘干。
一般160℃，维持2h。
也可用高压蒸汽灭菌，即121.3℃ ，103.42千帕 经30分钟。
练习（每人）：
1. 包装一包平皿（5套） 2. 包装一支吸管 3. 制作两个棉塞（试管2个）
课后作业
写出实习报告
13~15mm×100~180mm
常用的玻璃仪器及其清洗
有机化学实验常用的玻璃仪器及其清洗一. 常用玻璃仪器化学实验中的玻璃仪器分为普通玻璃仪器和标准磨口仪器。
1. 普通玻璃仪器常见的普通玻璃仪器有试管、烧杯、烧瓶等，见图1-1所示。
图示中的分液漏斗的非标准磨口部件(如旋塞、活塞)，不能分开存放，应在磨口间夹上纸条，系上橡皮圈，整套存放。
2. 标准磨口仪器标准磨口玻璃仪器是具有标准磨口、磨塞的玻璃仪器。
由于口塞尺寸的标准化、系列化，磨砂密合，凡属于同类型规格的接口，均可任意互换，各部件能组装成各种配套仪器，这样一来，可免去选配塞子和钻孔等繁琐手续。
有时两种玻璃仪器因规格不同无法直接组装时，可使用变径(口)接头(大小接头)使之连接起来。
表1-1 标准磨口系列编号与其大端直径的对照表编号10 14 19 24 29 34 40 大端直径(mm) 10.0 14.5 18.8 24.0 29.2 34.5 40.0标准磨口仪器均按国际通用的技术标准制造。
标准磨口仪器的口、塞径大小用编号表示，常用的有10、14、19、24、29、34等。
有的标准磨口仪器标有两个数字，如10/30，10表示磨口大端直径为10mm，30表示磨口长度为30mm。
图1-1 常用普通玻璃仪器化学实验中常用的标准磨口仪器如图1-2所示。
使用标准磨口仪器时应注意：(1)磨口必须清洁，不得沾有固体物质，使用前宜用软布或卫生纸揩试干净，否则会使磨口对接不密合，甚至损坏磨口。
(2)一般使用时，磨口无需涂润滑剂，以免沾污反应物或产物。
若反应物中有强碱，则应涂凡士林，以免磨口连接处因碱腐蚀沾牢而无法拆开。
另外在进行减压蒸溜时，标准磨口仪器必须涂真空脂。
从内磨口涂有润滑剂的仪器中倾出物料前，应先将磨口表面的润滑剂用有机溶剂擦拭干净(用脱脂棉或滤纸蘸石油醚、乙醚、丙酮等易挥发的有机溶剂)，以免物料受到污染。
(3)用后应立即拆卸洗净，散件存放。
否则对接处常会沾牢，很难拆卸。
(4)安装磨口仪器时注意相对角度，不能在角度有偏差时硬性装拆。
常用玻璃器皿的洗涤、包装及灭菌
2016
三角烧瓶
常用器具
100 ml 250 ml 500 ml 1000 ml
• 盛无菌水、培养基 • 振荡培养微生物
载玻片与盖玻片
常用器具
75 mm × 25 mm
接种工具
• 接种环 • 接种针 • 接种钩
• 接种铲
常用器具
微量吸管
常用器具
试管
• 大试管
18mm×180mm
• 中试管
（5）对污染有病原微生物的吸管
用后投入盛有消毒液（2％～3％来苏儿或5％石炭酸） 的玻璃筒内（筒底必须垫有棉花，消毒液要淹没吸管）， 经1～2d后取出，浸入2％肥皂粉液中1～2h（或煮沸）取 出，再用一根橡皮管，使一端接于自来水龙头，另一端 与吸管口相接，用自来水反复冲洗 ，最后用蒸馏水冲洗。 （6）如遇玻璃器皿用上述方法不能洗净者，可用下列清 洗 液 浸 泡 后 洗 刷 。 重 铬 酸 钾 （ 工 业 用 ） 8 0 g， 粗 硫 酸 100ml，水1000ml。
（3）载玻片 : 用后立即浸泡于消毒液中，经1～2d取出， 用洗衣粉液煮沸5min，再用毛刷刷去油脂及污垢，然后用 清水冲洗，晾干或将洗净的玻片用蒸馏水煮沸，趁热把玻 片摊放在干毛巾或干纱布上，稍等片刻，玻片即干，保存 备用或浸泡于95％酒精中备用。
（4）细菌培养用过的试管、平皿等
须高压蒸气灭菌后，倒去内容物，用热肥皂水刷去污 物，然后用清水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2～3次，晾干 或烘干。
三、方法步骤
1．玻璃器皿的洗刷 2．玻璃器皿的包装 3．玻璃器皿的灭菌
1．玻璃器皿的洗刷
（1）新购入的玻璃器皿: 用1％～2％盐酸溶液浸泡数小时 或过夜,再用清水反复冲刷，最后用蒸馏水冲洗2～3次， 倒立使之自然干燥或烘干。
实验室常用玻璃器皿洗刷消毒和仪器使用图文ppt
打开高效液相色谱仪电源，检查仪器各部件是否 正常工作。
系统适用性试验
按照仪器说明书进行系统适用性试验，确保仪器 性能正常。
样品准备
将样品处理成适合上机的溶液。
进样
将样品溶液注入进样针中，根据色谱图上的峰进行定性 和定量分析。
数据处理
根据色谱图上的峰高或面积计算样品中待测物的浓度 或含量。
清洁
关闭仪器电源，用干净的布擦拭仪器外部，保持清洁干燥 。
烧杯类
烧杯
用于溶解、加热、沉淀等实验 操作。
三角烧杯
用于加热、冷却、沉淀等实验 操作
01
02
03
圆底烧瓶
用于加热、蒸馏、浓缩等 实验操作。
蒸馏烧瓶
用于蒸馏、分离、浓缩等 实验操作。
分馏烧瓶
用于分馏、精制等实验操 作。
锥形瓶类
锥形瓶
用于加热、冷却、沉淀等 实验操作。
载气准备
准备好所需的载气，如氮气、氢气等。
样品准备
将样品处理成适合上机的溶液。
进样
将样品溶液注入进样针中，根据色谱图上的峰进行定性 和定量分析。
数据处理
根据色谱图上的峰高或面积计算样品中待测物的浓度或 含量。
清洁
关闭仪器电源，用干净的布擦拭仪器外部，保持清洁干 燥。
高效液相色谱仪的使用方法
仪器准备
其他常用仪器的使用方法
电导仪的使用方法
按照电导仪说明书进行操作，测量样品的电导率 。
酸度计的使用方法
按照酸度计说明书进行操作，测量样品的pH值 。
离心机的使用方法
按照离心机说明书进行操作，分离样品中的不同 组分。
04
实验室安全注意事项
实验室电器安全使用注意事项
系统适用性试验
按照仪器说明书进行系统适用性试验，确保仪器 性能正常。
样品准备
将样品处理成适合上机的溶液。
进样
将样品溶液注入进样针中，根据色谱图上的峰进行定性 和定量分析。
数据处理
根据色谱图上的峰高或面积计算样品中待测物的浓度 或含量。
清洁
关闭仪器电源，用干净的布擦拭仪器外部，保持清洁干燥 。
烧杯类
烧杯
用于溶解、加热、沉淀等实验 操作。
三角烧杯
用于加热、冷却、沉淀等实验 操作
01
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03
圆底烧瓶
用于加热、蒸馏、浓缩等 实验操作。
蒸馏烧瓶
用于蒸馏、分离、浓缩等 实验操作。
分馏烧瓶
用于分馏、精制等实验操 作。
锥形瓶类
锥形瓶
用于加热、冷却、沉淀等 实验操作。
载气准备
准备好所需的载气，如氮气、氢气等。
样品准备
将样品处理成适合上机的溶液。
进样
将样品溶液注入进样针中，根据色谱图上的峰进行定性 和定量分析。
数据处理
根据色谱图上的峰高或面积计算样品中待测物的浓度或 含量。
清洁
关闭仪器电源，用干净的布擦拭仪器外部，保持清洁干 燥。
高效液相色谱仪的使用方法
仪器准备
其他常用仪器的使用方法
电导仪的使用方法
按照电导仪说明书进行操作，测量样品的电导率 。
酸度计的使用方法
按照酸度计说明书进行操作，测量样品的pH值 。
离心机的使用方法
按照离心机说明书进行操作，分离样品中的不同 组分。
04
实验室安全注意事项
实验室电器安全使用注意事项
常用玻璃器皿的清洗、包扎及灭菌技术
实验五常用玻璃器皿的清洗、包扎及灭菌技术一、实验目的1.熟悉微生物实验常用玻璃器皿的名称、规格及配套使用物品；2.掌握实验室常用玻璃器皿的清洗和包扎方法；3.了解干热灭菌、蒸汽灭菌原理，掌握玻璃器皿干热灭菌及高压蒸汽灭菌操作技术。
二、实验原理（一）微生物常用器皿、物品微生物实验常用玻璃器皿的名称、规格及配套使用物品介绍，见表2-1。
表2-1微生物实验常用玻璃器皿的名称和规格名称常用规格及配套使用物品烧杯50mL，100mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL，3000mL，5000mL配套烧杯刷：大号，中号，小号三角瓶100mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL，3000mL配套三角瓶刷：大号，中号，小号容量瓶无色：25mL，50mL，100mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL棕色：25mL，50mL，100mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL量筒5mL，10mL，25mL，50mL，100mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL移液管1mL（分度0.01mL），2mL（分度0.02mL），5mL（分度0.05mL），10mL（分度0.1mL），20mL（分度0.1mL），50mL（分度0.5mL）配套洗耳球：大号，中号，小号培养皿35mm，75mm，90mm，120mm，150mm配套封口膜：12*12mm，16*16mm 酒精灯150mL配套：火柴漏斗60mL，80mL配套滤纸、漏斗架定性滤纸：7cm，9cm，11cm，12.5cm，15cm 定量滤纸：7cm，9cm，11cm，12.5cm，15cm滴定管酸式滴定管：50mL碱式滴定管：50mL 配套滴定台、蝴蝶夹滴瓶（小口瓶）无色：30mL，60mL，120mL 棕色：30mL，60mL，120mL广口瓶无色：125mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL棕色：125mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL试管10*100mm，12*100mm，15*100mm，15*150mm，18*180mm，20*200mm 配套试管刷：大号，中号，小号配套试管架：12.5mm，15.5mm，18.5mm，20.5mm载玻片25*75mm，30*60mm，100*100mm，500*500mm，900*600mm盖玻片18*18mm，20*20mm，22*22mm，24*24mm，24*32mm，24*50mm温度计0-100℃，0-200℃，0-300℃坩埚30mL，50mL配套坩埚钳研钵80mm，100mm，120mm，150mm（二）常用玻璃器皿用途：1.烧杯：用于盛装、转移、配制、加热培养基及试剂。
实验室常用玻璃仪器基本操作及注意事项ppt课件
5
其他器皿类
其他器皿包括具有特殊用途的玻璃器皿， 如冷凝管、分液漏斗、干燥器、分馏柱、 砂芯漏斗、标准磨口玻璃仪器等。瓷质类 器皿包括蒸发皿、布氏漏斗、瓷柑锅、瓷 研钵等。
6
ห้องสมุดไป่ตู้
常用仪器介绍
7
常用仪器介绍
8
二、玻璃仪器的洗涤、干燥和保存
玻璃仪器内任何一点沾污，都可能影响到 实验结果。因此，玻璃仪器要始终保持干 燥洁净，每次实验前要检查是否洁净，实 验后要及时清洗、晾干。分析化学实验中 所使用的器皿应洁净，其内外壁应能被水 均匀地润湿，且不挂水珠。
37
5、分析实验室常用的洗涤剂种类
应注意安全， 绝对不能用口吸，只能用吸 耳球。具体操作如下： ①使用洗液前，必须先将仪器用自来水和毛 刷洗刷，倾尽水，以免洗液稀释后降低洗 液的效率。 ②用过的洗液不能随意乱倒，应倒回原瓶， 以备下次再用。当洗液变绿而失效时，绝 对不能倒入下水道，只能倒回废液缸内， 另行处理；
4、常用玻璃仪器的清洗
d、可根据具体情况采用针对性洗液进行清洗。 如MnO2可采用亚铁盐溶液或过氧化氢加酸 溶液等进行清洗。无论用哪种清洗方法清 洗后，都必须用自来水冲洗干净，再用蒸 馏水荡洗三次，每次10~15ml。将管外壁擦 干后，酸管内壁应完全被水均匀润湿而不 挂水珠。如内壁不是均匀润湿而挂了水珠， 则应重新洗涤。
内的量杯均为左执式，500mL以上者，则 属于右执式。量杯的分度不均匀，上密下 疏，最大容积值刻于上方，最低标线也是 最大容积值的1/10，无零刻度。它是量器中 精度最差的一种仪器。其规格以容积区分， 常用20mL和250 mL几种。
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1、计量类仪器
使用注意事项： a、量取液体应在室温下进行。读数时，视 线应与液体弯月面底部相切。 b、量杯不能加热，也不能盛装热溶液，以 免炸裂。 c、当物质溶解时，其热效应不大者，可将 其直接放入量杯内配制溶液。
其他器皿类
其他器皿包括具有特殊用途的玻璃器皿， 如冷凝管、分液漏斗、干燥器、分馏柱、 砂芯漏斗、标准磨口玻璃仪器等。瓷质类 器皿包括蒸发皿、布氏漏斗、瓷柑锅、瓷 研钵等。
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ห้องสมุดไป่ตู้
常用仪器介绍
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常用仪器介绍
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二、玻璃仪器的洗涤、干燥和保存
玻璃仪器内任何一点沾污，都可能影响到 实验结果。因此，玻璃仪器要始终保持干 燥洁净，每次实验前要检查是否洁净，实 验后要及时清洗、晾干。分析化学实验中 所使用的器皿应洁净，其内外壁应能被水 均匀地润湿，且不挂水珠。
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5、分析实验室常用的洗涤剂种类
应注意安全， 绝对不能用口吸，只能用吸 耳球。具体操作如下： ①使用洗液前，必须先将仪器用自来水和毛 刷洗刷，倾尽水，以免洗液稀释后降低洗 液的效率。 ②用过的洗液不能随意乱倒，应倒回原瓶， 以备下次再用。当洗液变绿而失效时，绝 对不能倒入下水道，只能倒回废液缸内， 另行处理；
4、常用玻璃仪器的清洗
d、可根据具体情况采用针对性洗液进行清洗。 如MnO2可采用亚铁盐溶液或过氧化氢加酸 溶液等进行清洗。无论用哪种清洗方法清 洗后，都必须用自来水冲洗干净，再用蒸 馏水荡洗三次，每次10~15ml。将管外壁擦 干后，酸管内壁应完全被水均匀润湿而不 挂水珠。如内壁不是均匀润湿而挂了水珠， 则应重新洗涤。
内的量杯均为左执式，500mL以上者，则 属于右执式。量杯的分度不均匀，上密下 疏，最大容积值刻于上方，最低标线也是 最大容积值的1/10，无零刻度。它是量器中 精度最差的一种仪器。其规格以容积区分， 常用20mL和250 mL几种。
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1、计量类仪器
使用注意事项： a、量取液体应在室温下进行。读数时，视 线应与液体弯月面底部相切。 b、量杯不能加热，也不能盛装热溶液，以 免炸裂。 c、当物质溶解时，其热效应不大者，可将 其直接放入量杯内配制溶液。
《玻璃仪器的清洁》PPT课件
玻璃仪器清洗方法
➢研磨器具的清洗
• 先用自来水冲洗，去掉肉眼可见异物；然后用 0.5%的去污剂浸泡2小时以上，再用软毛刷刷洗， 最后用大量自来水冲洗，至倒置不挂水珠，且手 用力触摸内壁，无残留粉末，最后用纯化水冲洗 三遍。
• 当研磨物中含有水不溶性活性成分时，应先用 95%乙醇浸泡半小时，再按上述步骤清洗。
19
11
玻璃仪器清洗方法
➢液相样品瓶的清洗方法
先倒干瓶内试液，将其全部浸入95%乙醇，超声 清洗2次，每次30分钟，倒干乙醇，加入超纯水， 再超声清洗2次，每次30分钟。倒干瓶内洗液，再 用超纯水冲洗2次，于80℃烘2小时，绝对不能于 高温下烘烤。冷却，保存
12
玻璃仪器清洗方法
➢顶空瓶的清洗方法
倒干瓶内溶液，全部浸入95%乙醇，超声 清洗2次后倒干，再加入超纯水，煮沸并沸 腾30分钟后倒干，再加入超纯水超声清洗2 次，倒干瓶内洗液，于150℃烘2小时，冷 却，保存
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玻璃仪器清洗方法
➢带有微孔的玻璃砂滤器的清洗 方法
新的滤器在使用之前要经酸洗（如：热的盐酸） 抽滤，再用自来水反复抽滤，最后用纯化水抽滤3 次，再晾干或烘干。使用后的滤器为防止残留堵 塞微孔，应及时清洗。清洗的原则是选用能溶解 或分解残留物的洗涤液进行浸泡，抽滤，直到残 渣全部溶解或分解，最后用水洗净
7Leabharlann 玻璃仪器清洗方法石英和玻璃比色皿的清洗
绝不可用强碱清洗，因为强碱会侵蚀抛光的比 色皿。一般用0.5%的去污剂浸泡，必要时使用一 支绸布包裹的小棒或棉花球棒刷洗，然后用自来 水冲洗，清洗干净的比色皿内外壁不挂水珠。如 果遇难清洗的有机物，可先用无水乙醇浸泡，用 自来水冲洗，再按上述方法清洗，同时可延长去 污剂的浸泡时间
玻璃器皿的清洗包扎、培养基的制备及灭菌 18页PPT文档
玻璃器皿的清洗包扎 培养基的配制及灭菌
基本原理
（一）实验室中使用的玻璃器皿简介
微生物学实验所用的玻璃器皿，大多要进行消毒、灭菌 和用来培养微生物，因此对其质量、洗涤和包装方法均有一 定的要求。玻璃器皿的质量一般要求硬质玻璃，才能承受高 温和短暂灼烧而不致破坏；玻璃器皿的游离碱含量要少，否 则会影响培养基的酸碱度；对玻璃器皿的性状和包装方法的 要求，以能防止污染杂菌为准；洗涤玻璃器皿的方法不当也 会影响实验的结果。目前微生物学实验室中，有些玻璃器皿 （如培养皿、吸管等）已被一次性塑料制品所代替，但玻璃 器皿仍是重要的实验室用具。
• 清洗 • 包装 • 灭菌
洗涤剂、试管刷等 报纸、牛皮纸、专用塑料袋或器皿等 干热灭菌 湿热灭菌 紫外灭菌 过滤
玻璃器皿的清洗 器皿包扎
二、基本原理
（二）培养基简介
培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积 累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定、 保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样， 加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很 多。
培养基的成分和pH
不同种类的培养基中，一般应含有水分、碳源、 氮源、无机盐和生长因子等。不同微生物对pH要求 不一样，霉菌和酵母的培养基的pH一般是偏酸性的， 而细菌和放线菌培养基的pH一般为中性或微碱性的 （嗜碱细菌和嗜酸细菌例外）。所以配制培养基时， 都要根据不同微生物的要求将培养基的pH调到合适 的范围。
此外，为了加强紫外线灭菌效果，在打开紫外线 灯以前，可在无菌室内（或接种箱内）喷洒3—5％ 的石炭酸溶液，一方面使空气中附着有微生物的尘 埃降落，另一方面也可以杀死一部分细菌。无菌室 内的桌面，凳子可用2—3％的来苏尔擦洗，然后再 开紫外线灯照射，即可增强杀菌效果，达到灭菌目 的。
基本原理
（一）实验室中使用的玻璃器皿简介
微生物学实验所用的玻璃器皿，大多要进行消毒、灭菌 和用来培养微生物，因此对其质量、洗涤和包装方法均有一 定的要求。玻璃器皿的质量一般要求硬质玻璃，才能承受高 温和短暂灼烧而不致破坏；玻璃器皿的游离碱含量要少，否 则会影响培养基的酸碱度；对玻璃器皿的性状和包装方法的 要求，以能防止污染杂菌为准；洗涤玻璃器皿的方法不当也 会影响实验的结果。目前微生物学实验室中，有些玻璃器皿 （如培养皿、吸管等）已被一次性塑料制品所代替，但玻璃 器皿仍是重要的实验室用具。
• 清洗 • 包装 • 灭菌
洗涤剂、试管刷等 报纸、牛皮纸、专用塑料袋或器皿等 干热灭菌 湿热灭菌 紫外灭菌 过滤
玻璃器皿的清洗 器皿包扎
二、基本原理
（二）培养基简介
培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积 累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定、 保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样， 加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很 多。
培养基的成分和pH
不同种类的培养基中，一般应含有水分、碳源、 氮源、无机盐和生长因子等。不同微生物对pH要求 不一样，霉菌和酵母的培养基的pH一般是偏酸性的， 而细菌和放线菌培养基的pH一般为中性或微碱性的 （嗜碱细菌和嗜酸细菌例外）。所以配制培养基时， 都要根据不同微生物的要求将培养基的pH调到合适 的范围。
此外，为了加强紫外线灭菌效果，在打开紫外线 灯以前，可在无菌室内（或接种箱内）喷洒3—5％ 的石炭酸溶液，一方面使空气中附着有微生物的尘 埃降落，另一方面也可以杀死一部分细菌。无菌室 内的桌面，凳子可用2—3％的来苏尔擦洗，然后再 开紫外线灯照射，即可增强杀菌效果，达到灭菌目 的。
玻璃器皿的清洗包扎,培养基的配制及灭菌(共13张PPT)
分离纯化方法很多，基本原理相似，即将待分离样品进行 一定的稀释，并使微生物的细胞（或孢子）尽量以分散状态存 在，然后使其长成一个个纯种单菌落。上述工作又离不开接种， 即将一种微生物移接到另一灭菌培养基上的过程。
第3页，共13页。
Hale Waihona Puke 分离纯化常用的方法有：（1）简易单细胞挑取法
（2）平板分离法
选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养成分、酸碱度、 温度和氧等要求,或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制
马丁、高氏培养基板于28 ℃倒置培养5d，肉汤 培养基于37 ℃倒置培养28h后观察
第11页，共13页。
第12页，共13页。
作业：
1.在三种不同的平板上你分离得到哪些类群的微生物？
简述它们的菌落特征。
2 .如何确定平板上某个菌落是否为纯培养？请写出试验 的主要步骤。 3如果一项科学研究内容许从自然界中筛选到能产生 高温蛋白酶的菌株，你将如何完成？请写出简明的实 验方案。
培养后可观察有无孤立菌落生长，每一孤立菌落即为一纯种细菌。 一般病原菌的菌落数少于杂菌，故在分离培养时，应力求出现较多的 孤立菌落，以提高病原菌检出率。
第10页，共13页。
5.稀释混合倒平板
肉汤培养基融化备用；1ml无菌吸管加菌悬液于 空皿中；无菌操作将冷却至50℃左右的培养基倒入 上述平板内，旋转混合均匀。 6.恒温培养箱培养
第6页，共13页。
四.实验内容及方法
1.采集土样，制备土壤悬液：1g土稀释 到10-7；
倒平板→划线→培养→挑单菌落→接种移植→保存
第7页，共13页。
2.倒平板 : 右手持盛培养基的三角瓶置火焰旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻
轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后左手拿培养皿并将皿盖在 火焰附近打开一缝，迅速倒人培养基约15ml，加盖后轻轻摇动培养皿， 使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平 板。 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落，通常是由一个细胞繁殖而成的集合体。
第3页，共13页。
Hale Waihona Puke 分离纯化常用的方法有：（1）简易单细胞挑取法
（2）平板分离法
选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养成分、酸碱度、 温度和氧等要求,或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制
马丁、高氏培养基板于28 ℃倒置培养5d，肉汤 培养基于37 ℃倒置培养28h后观察
第11页，共13页。
第12页，共13页。
作业：
1.在三种不同的平板上你分离得到哪些类群的微生物？
简述它们的菌落特征。
2 .如何确定平板上某个菌落是否为纯培养？请写出试验 的主要步骤。 3如果一项科学研究内容许从自然界中筛选到能产生 高温蛋白酶的菌株，你将如何完成？请写出简明的实 验方案。
培养后可观察有无孤立菌落生长，每一孤立菌落即为一纯种细菌。 一般病原菌的菌落数少于杂菌，故在分离培养时，应力求出现较多的 孤立菌落，以提高病原菌检出率。
第10页，共13页。
5.稀释混合倒平板
肉汤培养基融化备用；1ml无菌吸管加菌悬液于 空皿中；无菌操作将冷却至50℃左右的培养基倒入 上述平板内，旋转混合均匀。 6.恒温培养箱培养
第6页，共13页。
四.实验内容及方法
1.采集土样，制备土壤悬液：1g土稀释 到10-7；
倒平板→划线→培养→挑单菌落→接种移植→保存
第7页，共13页。
2.倒平板 : 右手持盛培养基的三角瓶置火焰旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻
轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后左手拿培养皿并将皿盖在 火焰附近打开一缝，迅速倒人培养基约15ml，加盖后轻轻摇动培养皿， 使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平 板。 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落，通常是由一个细胞繁殖而成的集合体。
玻璃器皿的清洗包扎及高压蒸汽灭菌课件
04
开始灭菌操作，并观察 灭菌过程，确保温度和 压力达到设定值。
灭菌后处理
灭菌操作完成后，应等待一段时 间让高压蒸汽完全排出，然后打
开灭菌器门，取出玻璃器皿。
检查玻璃器皿是否完好无损，如 有问题应及时处理。
将玻璃器皿放在干燥通风处晾干， 然后根据需要储存或使用。
05
灭菌效果的检测与评价
CHAPTER
而死亡。
灭菌效果
高压蒸汽灭菌的灭菌效果受温度、 压力和时间的影响。在一定的压 力下，温度越高、时间越长，灭 菌效果越好。
影响高压蒸汽灭菌的因素
压力 温度 时间
04
高压蒸汽灭菌操作流程
CHAPTER
灭菌前的准备
确认高压蒸汽灭菌器的性能 清洗玻璃器皿 包扎玻璃器皿
装载物品
将清洗干净的玻璃器皿放入灭菌器内， 尽量将大小不同的器皿分开摆放，以 免小的器皿被大的器皿遮挡而影响灭 菌效果。
冲洗
晾干
清洗后处理
检查
存放
记录
02
玻璃器皿的包扎
CHAPTER
包扎材料的选择
纸
布
适用于一般情况，成本低，但易破损。
吸水性好，透气，适用于需要保温或 柔软包裹的物品。
牛皮纸
强度高，防水，适用于重物和需要防 水处理的物品。
包扎方法
直线式包扎
井字式包扎 三角式包扎
注意事 项
03
高压蒸汽灭菌原理
对于易燃、易爆、易腐蚀的物 品，应单独存放并采取相应的 安全措施。
意外情况的应急处理
如发生意外情况，如灭菌器故障、泄漏等，应立即停止使用，并采取相应的应急措施。 对于泄漏、火灾等紧急情况，应按照相关应急预案进行处理。
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌培训课件
7．降压 达到所需灭菌时间后，关闭热源，让压力自然下 降到零后，打开排气阀。放净余下的蒸汽后，再打开锅 盖，取出灭菌物品，倒掉锅内剩水。
8注．长意无，事菌即项检可：查待使用将用。已灭灭菌菌锅培应养严基格于按3照7℃操培作养程2序4进h，行无，杂避菌免生发 生事故；灭菌时，操作者切勿擅自离开，务必待压力下降
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌
28
斜面划线法（a） 不同细菌直线接种长出的菌苔形态（b）
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌
29
穿刺接种 （a）水平穿刺接种；（b）垂直穿刺接种
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌
30
四、实验报告
列表比较各种接种方法及注意事项。
五、问题和讨论
1、斜面接种取菌前为什么要将灼烧过的接种针在 无菌培养基上沾一下？
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌
18
一、实验目的：
了解各种微生物接种方法。
二、实验材料和用具：
已灭菌培养基、接种环、接种针、酒精灯、 移液管、记号笔
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌
19
三、实验步骤：
1、斜面接种技术 斜面接种是从已生长好的菌种斜面上挑取少量
菌种移植至另一新鲜斜面培养基上的一种接种方法 。具体操作如下： (1)贴标签 接种前在试管上贴上标签，注明菌名、
5
(3)操作步骤：
1）称药品 按实际用量计算后，按配方称取各种药品放入大烧 杯中。牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶解后 倒入大烧杯；也可放在称量纸上称量，随后放人热水中，牛 肉膏便与称量纸分离，立即取出纸片。蛋白胨极易吸潮，故 称量时要迅速。
2）加热溶解 在烧杯中加入少于所需要的水量，小火加热，并 用玻棒搅拌，待药品完全溶解后再补充水分至所需量。若配 制固体培养基，则将称好的琼脂放入已溶解的药品中，再加 热融化，此过程中需不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，最后 补足所失的水分。
8注．长意无，事菌即项检可：查待使用将用。已灭灭菌菌锅培应养严基格于按3照7℃操培作养程2序4进h，行无，杂避菌免生发 生事故；灭菌时，操作者切勿擅自离开，务必待压力下降
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌
28
斜面划线法（a） 不同细菌直线接种长出的菌苔形态（b）
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌
29
穿刺接种 （a）水平穿刺接种；（b）垂直穿刺接种
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌
30
四、实验报告
列表比较各种接种方法及注意事项。
五、问题和讨论
1、斜面接种取菌前为什么要将灼烧过的接种针在 无菌培养基上沾一下？
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌
18
一、实验目的：
了解各种微生物接种方法。
二、实验材料和用具：
已灭菌培养基、接种环、接种针、酒精灯、 移液管、记号笔
实验一玻璃仪器的清洗和包扎干热灭菌
19
三、实验步骤：
1、斜面接种技术 斜面接种是从已生长好的菌种斜面上挑取少量
菌种移植至另一新鲜斜面培养基上的一种接种方法 。具体操作如下： (1)贴标签 接种前在试管上贴上标签，注明菌名、
5
(3)操作步骤：
1）称药品 按实际用量计算后，按配方称取各种药品放入大烧 杯中。牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶解后 倒入大烧杯；也可放在称量纸上称量，随后放人热水中，牛 肉膏便与称量纸分离，立即取出纸片。蛋白胨极易吸潮，故 称量时要迅速。
2）加热溶解 在烧杯中加入少于所需要的水量，小火加热，并 用玻棒搅拌，待药品完全溶解后再补充水分至所需量。若配 制固体培养基，则将称好的琼脂放入已溶解的药品中，再加 热融化，此过程中需不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，最后 补足所失的水分。
器皿的洗涤包扎灭菌ppt课件
1、培养皿的包扎 一般以5-8套培养皿做一包
2、吸管的包扎
准备好干燥的吸管，在距其粗头顶端约0.5cm处 ，塞一小段1.5cm长的棉花，然后将吸管尖端斜 放在旧报纸条的近左端，与报纸成30度角，并将 左端多余的一段纸覆折在吸管上，再将整根吸管 卷入报纸，右端多余的报纸打一小结。
3、试管和三角瓶等的包扎
（6）开锅。当锅内蒸汽完全排尽时即压力表指针降
到零时，打开锅盖，取出灭菌物品： （7）排水。最后将高压灭菌器内的剩余水排出。 （8）观察灭菌效果。把灭菌培养基放入25℃温箱 中，培养48小时观察灭菌效果。 48小时后不见杂
菌生出，便证明培养基已达到灭菌目的，可以使
用。
器皿的洗涤包 扎灭菌
一、实验目的
1、掌握玻璃器皿的洗涤和包扎方法；
2、了解玻璃器皿的灭菌方法和原理
二、实验原理
为确保实验顺利地进行，要求把实
验所用的玻璃器皿清洗干净。
为保持灭菌后和无菌状态，需要对
培养皿、吸管等进行包扎，
三、实验器材 高压蒸汽灭菌锅、试管、三角瓶、培养 皿和吸管、棉线、纱布、棉花、报纸等
四、操作步骤
（一）、玻璃器皿的洗涤方法
1、新玻璃器皿的洗涤
在2%的盐酸溶液中浸泡数小时，用自来水冲洗干 净（本次实验不要求）
2、旧玻璃器皿的洗涤 试管、培养皿、三角瓶：
洗衣粉和去污粉洗刷，自来水冲洗
装有固体培养基：
刮掉，洗涤
带病原菌培养物的器皿：
先高压蒸汽灭菌，倒去培养物后再洗涤
Байду номын сангаас
（二）玻璃器皿的包扎
（3）通电加温，排冷空气
通常当压力表指针升至0.05MPa时，打开排气阀
放气，待压力表指针降至零点一小段时间后，再
2、吸管的包扎
准备好干燥的吸管，在距其粗头顶端约0.5cm处 ，塞一小段1.5cm长的棉花，然后将吸管尖端斜 放在旧报纸条的近左端，与报纸成30度角，并将 左端多余的一段纸覆折在吸管上，再将整根吸管 卷入报纸，右端多余的报纸打一小结。
3、试管和三角瓶等的包扎
（6）开锅。当锅内蒸汽完全排尽时即压力表指针降
到零时，打开锅盖，取出灭菌物品： （7）排水。最后将高压灭菌器内的剩余水排出。 （8）观察灭菌效果。把灭菌培养基放入25℃温箱 中，培养48小时观察灭菌效果。 48小时后不见杂
菌生出，便证明培养基已达到灭菌目的，可以使
用。
器皿的洗涤包 扎灭菌
一、实验目的
1、掌握玻璃器皿的洗涤和包扎方法；
2、了解玻璃器皿的灭菌方法和原理
二、实验原理
为确保实验顺利地进行，要求把实
验所用的玻璃器皿清洗干净。
为保持灭菌后和无菌状态，需要对
培养皿、吸管等进行包扎，
三、实验器材 高压蒸汽灭菌锅、试管、三角瓶、培养 皿和吸管、棉线、纱布、棉花、报纸等
四、操作步骤
（一）、玻璃器皿的洗涤方法
1、新玻璃器皿的洗涤
在2%的盐酸溶液中浸泡数小时，用自来水冲洗干 净（本次实验不要求）
2、旧玻璃器皿的洗涤 试管、培养皿、三角瓶：
洗衣粉和去污粉洗刷，自来水冲洗
装有固体培养基：
刮掉，洗涤
带病原菌培养物的器皿：
先高压蒸汽灭菌，倒去培养物后再洗涤
Байду номын сангаас
（二）玻璃器皿的包扎
（3）通电加温，排冷空气
通常当压力表指针升至0.05MPa时，打开排气阀
放气，待压力表指针降至零点一小段时间后，再