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化疗药物诱导细胞凋亡并产生“阶梯”效应
实验步骤
6. 向ห้องสมุดไป่ตู้附柱CB3中加入600 μl 漂洗液PW(使用前请先检查是 否已加入无水乙醇),12,000 rpm (~13,400×g)离心30 sec, 倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中。
7. 重复操作步骤6。 8. 将吸附柱CB3放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g)离心2
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细胞凋亡
细胞凋亡是指细胞在一定的生理或病 理条件下,受内在遗传机制的控制自 动结束生命的过程
化疗药物诱导的细胞凋亡
细胞凋亡的过程不同于坏死性死亡,其染色质断裂, 细胞核碎裂程核裂片,细胞质浓缩,细胞体积减小, 细胞膜内折,整个细胞通过起泡和发芽方式形成大 小不等凋亡小体。
凋亡的细胞的核DNA的断裂发生在核小体之间,因此 产生的断裂DNA在电泳时会呈180-200bp整数倍大小 的阶梯状条带,这是识别凋亡细胞的可靠生化特征。 能诱导细胞凋亡的枉法有很多,这里主要采取化疗 药物诱导细胞凋亡
min,倒掉废液。将吸附柱CB3置于室温放置数分钟,以彻底 晾干吸附材料中残余的漂洗液。 9. 吸附柱CB3转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位 悬空滴加50-200 μl洗脱缓冲液TE,室温放置2-5 min, 12,000 rpm (~13,400×g)离心 2 min,将溶液收集到离心管 中。
讨论
DNA提取过程中哪些步骤会导致样品不纯,为 什么?
化疗药物诱导细胞凋亡的机制是什么?
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