辅酶Q10检测试剂盒(比色法)
总抗氧化能力(T-AOC)比色法测试盒(ABTS酶催化法)
用途本试剂盒适用于检测血清(浆)、尿液、动植物组织、细胞等样本中总抗氧化能力。
检测范围及灵敏度检测范围:0.047-1.50 mmol/L灵敏度:0.047 mmol/L背景介绍机体存在两类抗氧化系统,一类是酶抗氧化系统,包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px);另一类是非酶抗氧化系统,包括尿酸、维生素C、维生素E、谷胱甘肽、胆红素、α-硫辛酸、类胡萝卜素[1-3]。
抗氧化能力被认为是血液和体液中所有抗氧化剂的累积效应[3]。
检测原理ABTS在适当的氧化剂作用下氧化成绿色的 ABTS●+,在抗氧化物存在时ABTS●+的产生会被抑制,在414 nm测定ABTS●+的吸光度即可测定并计算出样本中的总抗氧化能力。
Trolox是一种维生素E的类似物,具有和维生素E相近的抗氧化能力,用作其他抗氧化物总抗氧化能力的参考。
例如,Trolox的总抗氧化能力为1,相同浓度情况下,其他物质的总抗氧化能力用其抗氧化能力和Trolox相应的倍数来表示。
本试剂盒测组织和细胞样本时,需测定总蛋白浓度,推荐使用BCA法(货号:E-BC-K318-M)。
提供试剂和物品注:试剂严格按上表中的保存条件保存,不同批次试剂盒中的试剂不能混用。
Focus on your research Service for life science 耗材:枪头(1000 μL ,200 μL ,10 μL )。
仪器:酶标仪(405-425 nm )、微量移液器(1000 μL ,200 μL ,100 μL ,10 μL )。
所需自备物品配制试剂之前,请穿戴好防护装备。
试剂盒中部分试剂含有危险性物质。
禁止食入,吸入,直接接触眼睛、皮肤和衣物。
使用完后的试剂瓶经彻底清洗后再处理。
安全提示试剂:双蒸水、生理盐水(0.9% NaCl )、PBS (0.01 M,pH 7.4)、80%乙醇。
实验关键点ABTS工作液配制完成后,室温避光保存,在30 min内使用完毕。
辅酶Q10
辅酶Q10辅酶Q10(羟癸基泛醌)是一种脂溶性抗氧化剂,能激活人体细胞和细胞能量的营养,具有提高人体免疫力、增强抗氧化、延缓衰老和增强人体活力等功能,医学上广泛用于心血管系统疾病,国内外广泛将其用于营养保健品及食品添加剂。
中文名:辅酶Q10外文名:COENZYME Q10别名:泛醌10主要作用:抗氧化防衰老物理性质:受光照易分解分子量:863.36化学式:C59H90O4CAS号:303-98-0[1]EINECS号:206-147-9[1]熔点:48-52 ºC[1]目录1 名称2 理化性质▪性状▪溶解性▪熔点▪稳定性3 安全术语4 产品用途5 鉴别方法▪实验室法▪其他方法6 生产方法▪研制过程▪发酵法▪半合成法▪全合成法▪生物提取法▪细胞培养法7 药代动力学8 研究之父9 功能用途▪抗衰老▪抗疲劳▪抗氧化▪抗肿瘤▪安全性▪抗高血压▪保护皮肤▪保护心脏▪辅助药物▪增强能量▪适应症状10 含量用法▪人体含量▪食物含量▪补充剂量▪适用人群11 发展空间12 如何选择中文名称:辅酶Q10中文别名:癸烯醌;泛醌;泛癸利酮;辅酵素Q10;2-(3,7,11,15,19,23,27,31,35,39-十甲基-2,6,10,14,18,22,26,30,34,38-四十碳十烯基)-5,6-二甲氧基-3-甲基-p-苯醌;辅酶Q-10;Water_soluble辅酶Q-10;还原性辅酶Q-10;还原及Water_soluble辅酶Q-10。
英文名称:coenzyme Q10英文别名:coenzyme Q10 synthetic; ubidecarenone; coenzyme Q-10; Co Q10; Coenzymen Q10; Water-soluble Coenzymen Q10; Hydrosoluble Coenzymen Q10; QH 10; Water-soluble QH10; 2-[(2E,6E,10E,14E,18E,22E,26E,30E,34E)-3,7,11,15,19,23,27,31,35,39-decamethyltetraconta-2,6,1 0,14,18,22,26,30,34,38-decaen-1-yl]-5,6-dimethoxy-3-methylcyclohexa-2,5-diene-1,4-dione理化性质辅酶Q10(Coenzyme Q10)又称泛醌(Ubiquinone,缩写UQ),是一种存在于自然界的脂溶性醌类化合物,其结构与维生素K、维生素E与质体醌相似。
保健食品中辅酶Q10的测定-最新国标
保健食品中辅酶Q10的测定1范围本文件描述了保健食品中辅酶Q10的测定方法。
本文件适用于以辅酶Q10作为主要功效成分添加于保健食品中辅酶Q10的测定。
2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理根据不同的基质特点采用合适的前处理方式对试样中的辅酶Q10进行提取净化后,采用高效液相色谱法,经紫外检测器检测,根据保留时间定性,外标法定量。
5试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。
5.1试剂5.1.1甲醇(CH3OH):色谱纯。
5.1.2无水乙醇(C2H6O):色谱纯。
5.1.3异丙醇(C3H8O):色谱纯。
5.2标准品5.2.1辅酶Q10标准品(C59H90O4,CAS号:303-98-0):纯度≥99.5%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
5.2.2辅酶Q9标准品(C54H82O4,CAS号:303-97-9):纯度≥95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
5.3标准溶液配制5.3.1标准曲线A5.3.1.1辅酶Q10标准储备液A(500μg/mL):准确称取辅酶Q10标准品0.025g(精确至0.1mg),置于50mL棕色容量瓶中,加无水乙醇30mL,在50℃水浴中振摇使溶解,放冷至室温,用无水乙醇定容至刻度。
避光操作。
5.3.1.2辅酶Q10标准系列工作液A:准确吸取适量上述标准储备液(5.3.1.1),用无水乙醇配制成50.0μg/mL、100.0μg/mL、150.0μg/mL、200.0μg/mL、250.0μg/mL、300.0μg/mL的标准系列工作液。
避光操作。
5.3.2标准曲线B5.3.2.1辅酶Q10标准储备液B(1000μg/mL):准确称取辅酶Q10标准品0.025g(精确至0.1mg),置于25mL棕色容量瓶中,加异丙醇20mL,在50℃水浴中振摇使溶解,放冷至室温,用异丙醇定容至刻度。
苏州科铭试剂盒总清单-5.3
咨询 800 420 2300 1200 1000 520 1100 580 1550 800 1200 620
L-半乳糖苷-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒
L-半乳糖苷-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒
抗坏血酸氧化酶(AAO)测试盒
抗坏血酸氧化酶(AAO)测试盒
抗坏血酸过氧化物酶(APX)测试盒
抗坏血酸过氧化物酶(APX)测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)测试盒
微量法
紫外分光光度法
微量法
100管/48样 50管/24样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样
100管/96样
50管/48样
丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒
丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒
醇脱氢酶(ADH)测试盒
醇脱氢酶(ADH)测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)测试盒
乙醛脱氢酶(ALDH)测试盒 乙醛脱氢酶(ALDH)测试盒
烟酸含量测试盒
微量法 可见分光光度法 高效液相色谱法
微量法 可见分光光度法
脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)测试盒
脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)测试盒
Elabscience ATP含量比色法测试盒说明书
(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)Elabscience®ATP含量比色法测试盒ATP Colorimetric Assay Kit产品货号:E-BC-K157-S产品规格:50 assays(24 samples)/100 assays(48 samples)检测仪器:紫外-可见光分光光度计(636 nm)使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
用途本试剂盒适用于检测动物组织样本中A TP的含量。
检测原理肌酸激酶催化肌酸和A TP 反应生成磷酸肌酸,通过比色法检测磷酸肌酸的含量,以此反应出A TP的含量。
提供试剂和物品说明:试剂严格按上表中的保存条件保存,不同测试盒中的试剂不能混用。
对于体积较少的试剂,使用前请先离心,以免量取不到足够量的试剂。
所需自备物品仪器:紫外-可见光分光光度计(636 nm)、水浴锅(100°C )试剂:双蒸水、生理盐水(0.9% NaCl)试剂准备①检测前,所有的试剂平衡至室温。
②试剂二工作液的配制向试剂二中加入6 mL双蒸水,拧紧瓶盖,放入沸水中水浴使其完全溶解;使用前观察到有结晶析出,可沸水浴溶解后,放置37℃保存待用。
使用完后2-8℃保存7天。
③试剂四工作液的配制:取1.8mL双蒸水加入到试剂四中,充分溶解后放置冰盒上待用。
使用完后-20℃保存7天。
④对照工作液的配制:按试剂二工作液:试剂三:双蒸水=100:200:30的比例配制,现用现配,按需配制。
测定工作液的配制:按试剂二工作液:试剂三:试剂四工作液=100:200:30的比例配制,现用现配,按需配制。
⑤显色剂工作液配制:按试剂六:试剂七=3:1配制,37℃放置1小时,现用现配,按需配制。
4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL)检测试剂盒(香豆酸比色法)
组成:
编号 名称 试剂(A): 4CL Lysis buffer 试剂(B): 4CL Assay buffer 试剂(C): CoA-SH Solution 试剂(D): 4CL 终止液(备选) 使用说明书
TE0413 20T
Storage
125ml 4℃ 避光
4ml
4℃ 避光
32ml
-20℃
1ml
Leagene 4-香豆酸辅酶 A 连接酶(4CL)检测试剂盒(香豆酸比色法)检测原理是以香豆酸 作为底物,在酶促反应的最适条件下采用每隔一定时间测定产物生成量的方法,于分光光 度计检测吸光度,以吸光度变化所需酶量进行计算。该试剂盒主要用于植物组织的裂解液 或匀浆液、血清等样品中内源性的 4-香豆酸辅酶 A 连接酶活性,尤其适用于检测水果中 4香豆酸辅酶 A 连接酶活性。该试剂盒仅用于科研领域,不司
4-香豆酸辅酶 A 连接酶(4CL)检测试剂盒(香豆酸比色法)
简介:
4-香豆酸辅酶 A 连接酶是催化桂皮酸形成咖啡酸、香豆酸的酶。该酶多存在于高等植 物、酵母、菌类可溶性部分物质,属于细胞木质素合成途径中间的关键酶,研究该酶可以 探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理,为减少水果石细胞含量提高其品质 提供依据。
RT
1份
自备材料:
1、 蒸馏水 2、 研钵或匀浆器 3、 离心管或试管 4、 低温离心机 5、 水浴锅或恒温箱 6、 比色杯 7、 分光光度计
操作步骤(仅供参考):
1、 准备样品: ①植物样品:取植物组织或水果中层果肉,冰浴情况下充分捣碎研磨或匀浆,加入 4CL Lysis
北京雷根生物技术有限公司
计算:
4CL 活性单位的定义:在该实验条件下,每 1min 吸光度变化所需酶量为一个活性单 位。
南京建成 产品目录及价格表 17-3-22
抗坏血酸过氧化物酶(APX)测试盒(紫外 比色法) 抗坏血酸氧化酶(AAO)活性测试盒(比色 抗坏血酸(AsA)含量测试盒(紫外比色 γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)测试盒 (比色法) 硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)测试盒(比 色法) 硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)测试盒(紫 外比色法) NAD激酶(NADK)测试盒(比色法) NADH氧化酶(NOX)测试盒(比色法) 辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒(比色法) 辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒(比色法) 腺苷脱氨酶(ADA)测试盒(酶比色法) (微板法) 游离脂肪酸(NEFA)测试盒(酶法,双试 剂)(微板法) 5’-核苷酸酶(5’-NT)测试盒(酶比色法) (微板法) 糖化血清蛋白(GSP)试剂盒(NBT法) (微板法) 胆碱酯酶(CHE)测试盒(速率法)(微板 白蛋白(ALB)测定试剂盒(带标准:溴甲 酚绿法) 柠檬酸合成酶(CS)测定试剂盒(微板法) 柠檬酸合成酶(CS)测定试剂盒(微板法) 植物提取液 蔗糖测定试剂盒(国标法) 蔗糖测定试剂盒(紫外比色法) γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)测定试剂 盒(速率法) 糜蛋白酶测定试剂盒 谷氨酸测定试剂盒(紫外比色法) 超微量ATP酶测试盒(Na+K+、Ca2+Mg2+、 T-ATP酶) 超微量ATP酶测试盒(Na+K+、Ca2+Mg2+、 T-ATP酶) 超微量ATP酶测试盒(Na+K+、Ca2+Mg2+、 T-ATP酶) 超微量ATP酶测试盒(Na+K+、Ca2+Mg2+、 T-ATP酶) 超微量ATP酶测试盒(Na+K+、Ca2+Mg2+- ATP酶) 超微量ATP酶测试盒(Na+K+、Ca2+Mg2+- ATP酶)
辅酶Q10测量的疗效评估
辅酶Q10测量的疗效评估概述辅酶Q10是一种存在于体内的脂溶性物质,广泛存在于人体各个组织和器官中。
它在细胞呼吸链中起到辅助氧化还原酶的功能,参与细胞内能量生产的过程。
辅酶Q10在体内的含量与维持人体健康密切相关。
辅酶Q10的测量方法目前,常用的辅酶Q10测量方法有高效液相色谱法和酶联免疫吸附法。
高效液相色谱法通过分离样品中的辅酶Q10,并通过比色法或荧光法进行定量测量。
酶联免疫吸附法则通过将样品和特异性抗体结合,利用酶标记技术进行荧光或发光信号的测定。
辅酶Q10在疗效评估中的应用辅酶Q10在疗效评估中扮演着重要角色。
它可以作为衡量治疗效果的生物标志物,用于评估某些疾病的严重程度和预后。
以下是几个常见病症中辅酶Q10的应用:心血管疾病辅酶Q10在心血管疾病中的应用广泛被研究和探讨。
一些研究表明,心血管疾病患者辅酶Q10的水平较低,而通过补充辅酶Q10可以改善心脏功能和降低心血管事件的风险。
因此,在治疗心血管疾病的过程中,辅酶Q10的测量可以用来评估治疗效果。
神经系统疾病辅酶Q10在神经系统疾病中具有保护神经细胞、减轻氧化应激反应的作用。
临床研究发现,辅酶Q10的补充可以改善某些神经系统疾病的症状和减缓疾病的进展。
通过测量患者辅酶Q10的水平,可以更好地评估治疗效果和预测疾病的发展趋势。
能量代谢紊乱疾病辅酶Q10在能量代谢紊乱疾病中发挥重要作用。
一些研究发现,辅酶Q10的水平与机体能量代谢的正常运作密切相关。
通过测量辅酶Q10的含量,可以对能量代谢的紊乱程度进行评估,并指导治疗方法的选择和调整。
结论辅酶Q10的测量在疗效评估中具有重要意义。
通过对辅酶Q10的测定,可以更准确地评估治疗效果,指导疾病的预后和治疗方案的调整。
然而,辅酶Q10的测量方法和参考范围仍需进一步研究和标准化。
随着研究的不断深入,辅酶Q10在临床应用中的潜力将会被进一步挖掘和应用。
>注意:本文档为辅酶Q10测量的疗效评估的概述,不具备临床诊断和治疗建议的功能,请在使用时谨慎参考,并追踪最新的研究成果和临床指南。
Caspase 8 活性检测试剂盒(比色法)
Caspase 8 活性检测试剂盒(比色法)产品简介:Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)家族在介导细胞凋亡过程的起着极其重要的作用,其成员包括Caspase1~11等,均属于蛋白酶家族。
Caspase 8又称FLICE、MACH、Mch5、Caspase-8,通常以酶原的形式存在,在细胞凋亡的信号转异过程中被激活,在Fas-receptor和TNFR-1介导的细胞凋亡过程中Caspase 8被激活,形成一个由p18和p10组成的二聚体,进一步激活下游的Caspase 4、Caspase 6、Caspase 9、Caspase 10。
Jimei Caspase 8活性检测试剂盒(比色法)(Caspase 8 Colorimetric A ssay Kit)的检测原理是利用Caspase 8催化特异性底物acetyl- Ile -Glu-Thr-Asp p-nitroanilide(Ac-IETD-pNA)产生黄色的游离硝基笨胺pNA (p-nitroaniline),通过测定分光光度比色法测定pNA在400~410nm处吸光值,从而间接获得Caspase 8的活性。
自备材料:1、水浴锅或恒温箱2、96孔板3、酶标仪或分光光度操作步骤(仅供参考):1、制备标准曲线:①按照Caspase Lysis buffer:Assay buffer=1:9的比例配制适量的标准品稀释液。
②用标准品稀释液稀释pNA(10mM),使pNA分别达到200μM、100μM、50μM、25μM、12.5μM、6.25μM,另外设置一般不加pNA仅含标准品稀释液作为零管,把以上系列浓度物质作为标准品。
③取pNA浓度分别为200μM、100μM、50μM、25μM、12.5μM、6.25μM、0的标准品各100μl加入至96孔板或取适量体积加入至容量不超过100μl的比色杯,测定405nm处吸光值即A405。
辅酶 I NAD (H)含量检测试剂盒(WST 显色法)说明书__ 微量法UPLC-MS-6008
辅酶I NAD(H)含量检测试剂盒(WST显色法)说明书微量法货号:UPLC-MS-6008规格:100T/48S产品内容:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件酸性提取液液体25mL×1瓶2-8℃保存碱性提取液液体25mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体6mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体2mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体4mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体0.9mL×1支-20℃保存试剂五液体15mL×1瓶2-8℃保存NAD标准品粉剂×1支-20℃保存NADH标准品粉剂×1支-20℃保存溶液的配制:1、NAD标准品:临用前加入1.5mL蒸馏水,即2µmol/mL。
-20℃可以保存2周。
2、NADH标准品:临用前加入1.4mL蒸馏水,即2µmol/mL。
-20℃可以保存2周。
产品说明:辅酶I包括还原型和氧化型两种形式,在生物氧化中起传递氢的作用。
氧化型辅酶I又称烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)是脱氢酶的辅酶,它在糖酵解、糖异生、三羧酸循环和呼吸链中发挥着不可替代的作用。
中间产物会将脱下的氢递给NAD,使之成为NADH(还原型辅酶I)。
而NADH则会作为氢的载体,在呼吸链中通过化学渗透偶联的方式,合成ATP。
NAD(H)在机体内有重要的生理意义,与物质代谢、能量代谢、抗细胞衰老、抗氧化以及一些疾病的发生密切相关。
体内辅酶I含量降低会导致细胞损伤或衰亡。
分别用酸性和碱性提取液提取样本中NAD+和NADH,在1-mPMS作用下,WST-1可与NADH反应,产生水溶性formazan,在450nm下有特征吸收峰,而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH,进一步采用WST-1检测。
Ethanol+NAD+Alcohol Dehydrogenase Acetaldehyde+H++NADHNADH+WST-1+1-mPMS Formazan(450nm)注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
Caspase1活性检测试剂盒比色法
本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过 100µL 的分光光度检测杯检测时,除标准曲线外可以 检测 20 个样品。
试剂准备 1. 裂解液融化后混匀并置于冰浴上备用。 2. 检测缓冲液融化后混匀并置于冰浴上备用。
气泡。随后再加入 10µL Ac-YVAD-pNA(2mM)。
3. 加入 Ac-YVAD-pNA (2mM)后混匀,注意避免在混匀时产生气泡。37°C 孵育 60-120min。发
ห้องสมุดไป่ตู้
现颜色变化比较明显时即可测定 A405。如果颜色变化不明显,可以适当延长孵育时间,甚至可
以孵育过夜。
4. 样品的 A405 减去空白对照的 A405,即为样品中 caspase 1 催化产生的 pNA 产生的吸光度
二. 样品的收集: 1. 对于悬浮细胞:将没有诱导凋亡的对照品和诱导凋亡的样品,在 4°C 下,600g 离心 5min 后, 收集细胞,小心吸除上清,同时确保尽量没有细胞被吸除,PBS 洗涤一次。同前吸尽上清后,2×106 细胞加入 100µL 裂解液(建议加入 1%蛋白酶抑制剂(CC088)),重悬沉淀,冰浴裂解 15~20min。 下接步骤 4。 2. 对于贴壁细胞:将没有诱导凋亡的对照品和诱导凋亡的样品,吸取细胞培养液,备用。用胰 酶消化贴壁细胞,并收集至备用的细胞培养液中。在 4°C 下,600g 离心 5min 后,收集细胞,
1
小心吸除上清,同时确保尽量没有细胞被吸除,PBS 洗涤一次。同前吸尽上清后,2×106 细胞加
入 100µL 裂解液(建议加入 1%蛋白酶抑制剂(CC088)),重悬沉淀,冰浴裂解 15~20min。
辅酶ⅠNAD(H)含量试剂盒使用说明
辅酶ⅠNAD(H)含量试剂盒使用说明产品简介:辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD是糖酵解和TCA循环的主要氢受体,生成的NADH经呼吸电子链传递把电子交给氧,在合成ATP的同时,形成大量的ROS,同时NADH再生为NAD。
糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。
NAD(H)含量和NADH/NAD比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。
较高的NAD(H)及NADH/NAD比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态,NADH/NAD比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。
另外,NAD降解产物具有非常重要的调控作用。
NAD和NADH在254nm下有吸收峰,利用高效液相色谱法在相应波长下测定其含量。
试验中所需的仪器和试剂:高效液相色谱仪、低速离心机、溶剂抽滤装置、针头式过滤器(水系,50个,0.22μm)、滤膜(水系和有机系各2个,0.45μm)、C18柱(4.6×150mm)、可调式移液器、样品瓶(50个,2ml)、乙腈(120ml)、甲醇(色谱级,300ml)、蒸馏水注:若用自动进样器,需要样品瓶,测定时将不少于1ml的样品或标准品加入样品瓶中。
无自动进样器,需手动进样时,不需要样品瓶,用进样针将不少于20ul的样品或标准品打入进样阀。
产品内容:试剂一:粉剂1×1瓶,粉剂2×1瓶,4℃保存;临用前用少量蒸馏水将粉剂1和粉剂2溶解后倒入容量瓶中,用蒸馏水定容至100ml,形成NAD和NADH提取液(注:试剂瓶中的粉剂要冲洗干净),4℃保存3个月;试剂二:粉剂1×1瓶,粉剂2×1瓶,粉剂3×1瓶,4℃保存;临用前用少量蒸馏水将粉剂1、粉剂2和粉剂3溶解后倒入容量瓶中,用蒸馏水定容至1000ml,形成流动相缓冲液基质(注:试剂瓶中的粉剂要冲洗干净),4℃保存3个月。
试剂三:NAD标准品5mg×1支,-20℃保存。
辅酶Q10的制备及检测
辅酶Q10的制备及检测辅酶Q10(C O Q10)又称泛醌,癸烯醌,是碳6位上连结一个10单位异戊二烯侧链的2,3-二甲基-5-甲基-1,4-苯醌衍生物,其化学结构如下图所示。
辅酶Q10是一种脂溶性天然维生素类物质,在生物细胞内的线粒体中起递氢体作用,被还原为泛醌醇。
C O Q10的分子结构辅酶Q10可提高人体免疫力,广泛运用于治疗人体免疫系统疾病,是一种重要的生化药物。
辅酶Q10以极低的含量存在于动物、植物、微生物细胞内,在动物脏器(心脏、肝脏、肾脏)、沙丁鱼、鲭鱼和花生中含量相对较高。
制备辅酶Q10较常用的原料是动物的心、肝等脏器。
提取方法有醇碱皂化法、溶剂法及溶剂—皂化法等多种,由于皂化法制备的成品含杂质较少,且易于纯化,故便于推广,缺点是原料彻底破坏,不能综合利用,其碱性液对环境有污染。
一、实验目的1.了解生化药物制备的一般过程与原理。
2.掌握辅酶Q10制备及检测方法。
二、实验内容1.以猪心脏为实验原料,分离提纯辅酶Q10。
2.紫外分光光度计定量测定辅酶Q10含量。
三、实验原理辅酶Q10在猪心脏中含量较丰富,根据相似相容原理,采用有机溶剂进行萃取制备。
首先用酸水解心脏的脂肪组织,释放脂肪酸,用氢氧化钠的乙醇溶液进皂化反应,除去脂肪酸。
然后用异辛烷萃取与纯化辅酶Q10。
,经过皂化和层析,制备成辅酶Q10。
由于辅酶Q10在275nm处有最大吸收值,可用紫外分光光度计定量测定其含量。
四、实验材料与设备.1.实验设备与仪器水浴锅、电炉、铁架台、剪刀、组织捣碎机、薄膜蒸发器、紫外分光光度计、微量注射器、层析柱、圆底烧瓶、回流装置、分液漏斗、玻璃棉、玻璃漏斗、烧杯、具塞试管。
2.实验材料与试剂猪心,焦性没食子酸、氢氧化钠、乙醇、无水乙醇、异辛烷、色谱用硅胶、硼氢化钠、乙醚。
五、实验步骤1.水解与皂化用剪刀将冻猪心的心脏脂肪和结缔组织除去。
取心脏肌肉log,加水l0mL,用组织捣碎机破碎均匀。
转移到500mL圆底烧瓶中,加入30mL的10%焦性没食子酸。
辅酶ⅡNADP(H)含量试剂盒说明书分光光度法50管24样
辅酶ⅡNADP(H)含量试剂盒说明书分光光度法 50 管/24 样正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义辅酶ⅡNADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NADP+和 NADPH 含量测定可以计算 NADP(NADPH + NADP+)含量和 NADPH/NADP+比值,其变化与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。
NADPH/NADP+比值不仅是细胞氧化还原态的主要标志之一,而且在 PPP 途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。
测定原理分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NADP+和 NADPH。
NADPH 通过 PMS 的递氢作用,使氧化型噻唑蓝(MTT)还原为甲瓒,570nm 下检测吸光值,从而测定 NADPH 含量。
利用 6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原 NADP+为 NADPH,从而检测 NADP+含量。
所需的仪器和用品可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制酸性提取液:50mL×1 瓶,4℃保存;碱性提取液:50mL×1 瓶,4℃保存;试剂一:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1 支,-20 ℃保存,用时加入 4mL 蒸馏水,混匀;用不完的试剂 4℃保存一周;试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 4mL 蒸馏水,混匀;用不完的试剂 4℃保存一周;试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 4mL 蒸馏水,混匀;用不完的试剂 4℃保存一周;试剂五:液体 1.8mL×1 支,4 ℃保存;试剂六:液体 30mL×1 瓶,4 ℃保存;试剂七:液体 50mL×1 瓶,4 ℃保存。
NADP+和 NADPH 的提取1 血清(浆)中 NADP+和 NADPH 的提取NADP+的提取:按照血清(浆)体积(mL):酸性提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议取约 0.1mL 血清(浆),加入 1mL 酸性提取液),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
辅酶q10的质量标准
辅酶q10的质量标准
辅酶Q10是一种脂溶性维生素样的物质,是人体内一种重要
的辅酶,能够促进细胞呼吸作用,提高人体免疫力和抗氧化能力。
因此,辅酶Q10在医药和保健品领域得到了广泛的应用。
为了确保辅酶Q10的质量和安全性,国家和行业制定了一系
列的质量标准。
辅酶Q10的质量标准主要包括以下几个方面:
1. 外观要求
辅酶Q10应为黄色或橙黄色结晶性粉末,无明显异味。
外观
应干燥、无结块、无杂质、无变色现象。
2. 纯度要求
辅酶Q10的纯度要求应不低于98.0%。
同时,还需检测是否
含有其他杂质,如游离酸、游离碱、重金属等。
其中,重金属含量应小于10ppm。
3. 含量测定
辅酶Q10的含量测定应使用高效液相色谱法(HPLC)进行。
同时,还需检测是否含有其他成分,如辅酶Q9等。
4. 溶解度
辅酶Q10的溶解度应在45℃下不低于2mg/ml。
5. 水分含量
辅酶Q10的水分含量应小于0.5%。
6. 重金属含量
辅酶Q10的重金属含量应小于10ppm。
7. 微生物限度
辅酶Q10的微生物限度应符合国家标准。
总之,辅酶Q10的质量标准是一个综合性的体系,需要从多个方面进行检测和评估。
只有通过严格的质量控制和管理,才能保证辅酶Q10的质量和安全性,为人类健康事业做出更大的贡献。
辅酶Q10
制剂
(1)辅酶Q10片;(2)辅酶Q10软胶囊;(3)辅酶Q10注射液;(4)辅酶Q10胶囊。
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辅酶Q10
有机物
01 性状03 含量测定 来自5 制剂目录02 鉴别 04 贮藏
辅酶Q10,化学名称为2-[(全-E) 3,7,11,15,19,23,27,31,35,39-十甲基-2,6,10, 14,18,22,26,30,34,38-四十癸烯基}- 5,6-二甲氧基-3-甲基-p-苯醌,是真核细胞线粒体中电子传递链和有氧 呼吸的参与物质之一,为黄色至橙黄色结晶性粉末,无臭无味,遇光易分解。
含量测定
照高效液相色谱法测定。避光操作。
色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-无水乙醇(1 : 1)为流动相;柱 温为35°C;检测波长为275nm。取辅酶Q10对照品和辅酶Q9对照品适量,用无水乙醇溶解并稀释制成每1ml中各约 含0. 2mg的混合溶液,取20μl注入液相色谱仪,辅酶Q9峰与辅酶Q10峰的分离度应大于6.5,理论板数按辅酶 Q10峰计算不低于3000。
性状
为黄色至橙黄色结晶性粉末,无臭无味,遇光易分解。 在三氯甲烷或丙酮中溶解,在乙醇中极微溶解,在水中不溶。 熔点为48〜52°C。
鉴别
(1)取含量测定项下的供试品溶液,加硼氢化钠50mg,摇匀,溶液黄色消失。 (2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 (3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。
测定法:取本品20mg,精密称定,加无水乙醇约40mL,在50°C水浴中振摇溶解,放冷后,移至100mL量瓶中, 用无水乙醇稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液,精密量取20μL,注入液相色谱仪,记录色谱图;另取辅酶Q10 对照品适量,同法测定。按外标法以峰面积计算,即得。
RP-HPLC法测定辅酶Q10含量及其透光率的日变化分析
RP-HPLC法测定辅酶Q10含量及其透光率的日变化分析高代升;白琦;龚文;邓军;方泽银;祝春光【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)005【摘要】[目的]建立高效液相色谱法测定辅酶Q10的含量.[方法]采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)洲定辅酶Q10的含量,并采用紫外分光光度计法对其透光率的日变化进行了分析.[结果]辅酶Q10在RP-HPLC操作条件下分离度良好.在40~300 μg/ml范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9);最低检测限为0.4 ng;平均回收率为97.44%(n=3).RP-HPLC方法的系统适应性良好,回收率和精密度均满足分析要求.[结论]该方法简便、准确、重现性好,可用于辅酶Q10的质量控制,但应注意避光操作.【总页数】3页(P2527-2529)【作者】高代升;白琦;龚文;邓军;方泽银;祝春光【作者单位】四川业大学食品学院,四川雅安625014;四川业大学食品学院,四川雅安625014;四川业大学食品学院,四川雅安625014;四川业大学食品学院,四川雅安625014;四川业大学食品学院,四川雅安625014;四川业大学食品学院,四川雅安625014【正文语种】中文【中图分类】S188【相关文献】1.高效液相色谱法测定蜂王幼虫中辅酶Q10含量 [J], 岳兵;薛晓锋;吴黎明;李熠;赵静2.探析反相高效液相色谱法测定注射用辅酶Q10冻干乳的含量 [J], 张可君;张媛3.RP-HPLC测定辅酶Q10含量及有关物质的方法学研究 [J], 郭菊玲;白文莉;张树云;吴丽萍;梁伟4.RP-HPLC法测定辅酶Q_(10)含量及其透光率的日变化分析(英文) [J], 高代升;白琦;龚文;邓军;方泽银;祝春光5.RP-HPLC法测定辅酶Q10含量及其透光率的日变化分析 [J], 高代升; 白琦; 龚文; 邓军; 方泽银; 祝春光因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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辅酶Q 10(Co10)检测试剂盒(比色法)
简介:
辅酶Q 类广泛存在于生物界,故又称泛醌,他们与线粒体内膜相结合,是呼吸链中重要的递氢体,广泛参与体内的生物代谢过程,对多种酶有激活作用,是细胞代谢和细胞呼吸激活剂,辅酶Q 10(Coenzyme Q 10)是的重要成员之一。
不同生物体的n 值不同,人体的n 值为10。
Leagene 辅酶Q 10(CoQ 10)检测试剂盒(比色法)其检测原理是待测样品在碱性条件下,EC 取代了CoQ 10上的甲氰基,形成蓝色的化合物,通过分光光度计检测620处吸光度,根据标准曲线即可测出辅酶Q 10含量。
该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 稀释标准品:用EC buffer CoQ 10标准(5mg/ml)至0.1、0.3、0.5、1.0、2.0mg/ml ,
-20℃保存,备用。
2、 准备样品:取新鲜动物心脏或肝脏等样品,采用醇碱皂化法、溶剂皂化法等提取适量的
CoQ 10提取液。
3、 CoQ 10检测:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注
意避免产生气泡。
如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
编号 名称
TE1011 50T Storage
试剂(A): CoQ 10标准(5mg/ml) 1ml -20℃ 避光 试剂(B): EC solution 25ml RT 试剂(C): EC buffer
50ml RT 试剂(D): CoQ 10 Assay buffer 25ml
4℃ 避光 使用说明书
1份
空白管 标准管 测定管 EC buffer 2ml 1.75ml 1.75ml CoQ 10标准 — 0.25ml — 待测样品(提取液) — — 0.25ml EC solution
0.5ml
0.5ml
0.5ml
CoQ10 Assay buffer 0.5ml 0.5ml 0.5ml
4、盖紧盖子,混匀,室温避光孵育。
5、分光光度计620nm处检测吸光度值,1.0cm光径,以EC buffer调零,读取各管吸光
度值。
一般应数小时内检测完毕。
计算:
以0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10mg/ml的CoQ10标准为横坐标,以吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线,用待测样品吸光度值在标准曲线上查出相应的浓度,并计算含量。
注意事项:
1、待测样品中不能含有CoQ10抑制剂,同时需避免反复冻融。
2、CoQ10 Assay buffer如果出现浑浊或絮状物,应弃用。
3、在皂化过程中,震荡不要剧烈,以免形成乳化层。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。