免疫球蛋白亚类检测及意义PPT

Data from PUMCH by Wen Zhang et al. Published in Eur J Nucl Med Mol Imaging. 2014 Aug;41(8):1624-34.
IgG4检测对IgG4-RD意义
疾病 诊断
IgG4血清学检测对 于IgG4相 关性疾病的诊 断非 常 重 要 ， IgG4越 高 ，患者发 生其它器官受 累 的 可 能 性 越 高，只有少数 IgG4升高 的患者都 可符 合此疾病诊断
First published articles aboutAIPin 1995 by Japanese
IgG4相关疾病（IgG4-RD）
近年来新认识的一种 由免疫介导的慢性炎 症伴纤维化的疾病。
•The birthday of a new syndrome: IgG4-related diseases constitute a clinical entity. Autoimmun Rev.
年龄的影响
Immunologic Disorders in Infants and Children (5th Ed), Ochs HD, Stiehm ER, Winkelstein JA (Eds), Elsevier Sanders, Philadelphia 2004. p.394.
正常参考值范围
血清IgG4升高的特异性？
血清IgG4升高与疾病的严重程度
血清IgG4水平与受累器官数正相关 系统性受累的患者IgG4水平较高
Am J Surg Pathol.2010;34:1812 –1819
糖皮质激素治疗后IgG4水平下降程度
注：以治疗3个月为观察终点
治疗后IgG4水平明显下降
降至正常： 24.2% 下降>50% ：62.6% 下降<50%：13.2%
IgG亚 类 的 表 达 水 平 的下调并不能 成为某一临床 诊断的确切 证 据，但是其可提示机体可能处于免疫失衡的状态，需要进 一 步的临床和实验室的随访观察
MeulenbroekAJ, ZeijlemakerWP. Human IgG subclasses: Useful diagnosticmarkers for immunocompetence, 2nd edition, CLB, Amsterdam,The Netherlands 2000.
免疫球蛋白亚类检测及意义
免疫球蛋白亚类概述
免疫球蛋白亚类概述
J.Exp.Med. 120,253 (1964). 1964年最早的关于免疫球蛋白亚类报导的文献，使用来自兔的多抗，针对人的骨 髓瘤蛋白IgG抗体，发现IgG有四个亚型的存在
免疫球蛋白亚类概述
60-70%
15-20%
5-10%
<5%
2000’s
1990’s IgG4RD正式诞生
(2010)
1980’s
AIP报道(1995)
1970’s
IgG亚类缺 陷报道(1975)
放射免疫扩散法
最早用于IgG亚类的检测方法 反应时间长（2-4d），耗费血清量大 灵敏度低(20mg/L), 尤其检测血清中含量较 低的IgG3, IgG4 时
质量管理
质量管理 CAP NEQAS
每年2次
J ALLERGY CLIN IMMUNOL APRIL 2005
质量管理
•测量方法差异 •健康对照人群的基线差异 •统计分析方法差异
It is recommended that each laboratory establish its own normal control values with proper statistical analysis.
用 药 初 期 患者IgG4 水平会急剧下 降，相应 的 临 床 症 状 好转。部分患 者使用维持药 物 剂量 IgG4会出现高于临界上限值的现象
疾病 治疗
疾病 定期对血清IgG4水平进行检测对于确定 监测 早期的复发患者是非常必要的
IgG4相关性疾病不是常见病，应先排除 注意 其它疾病后再考虑
IgG亚类临床应用小结
IgG亚类缺陷小结
The finding of a decreased level of one of the IgG subclasses can never provide a definite diagnosis, but should rather be considered as an indication of a disturbance of the immune system, requiring further diagnostic investigation
The history of IgG4-related disease
Autoimmunity Reviews 13 (2014) 451 –458
In 2001, Japanese researchers found high serum IgG4 and cutoff value 1350mg/l
பைடு நூலகம்
放射免疫扩散法
放射免疫扩散法
Commercial kits from the binding site
酶联免疫吸附法
酶联免疫吸附法
酶联免疫吸附法
➢定性或半定量的检测方法
➢灵敏度高（ng/ml），无需复杂仪器 ➢重 复性差：样本高度稀释，大量样本难以 标 准化；单抗来源及特异性，标准品，参考 范围等
免疫散射(透射)比浊法
免疫散射比浊法
免疫散射比浊法
免疫散射比浊法
免疫散射比浊法
免疫散射比浊法
缺点：标本乳糜 血、脂血等干扰。 抗原过量引起钩 状效应，造成实 验误差
方法学比较
方法
检测限
批间变异 批内变异 自动化
分析时间 工作量
RID ug/ml
小
小
否
长(>48 小时) 中等
Nephelo metry
血清IgG4对Ig4RD诊断价值
Ann Rheum Dis. 2014 Mar 20. doi: 10.1136/annrheumdis-2013-204907
血清IgG4升高的特异性？
淋巴瘤，结节病，系统性血管炎：EGPA、GPA，
过敏性疾病，CTD：RA、SSc、SLE、PBC、pSS：2-10%， 慢性肝炎和肝硬化，免疫缺陷等也可有血清IgG4的升高 约30%IgG4RD的病人血清IgG4水平并不升高：检测阈值， 检测方法，前带效应等
IgG2和IgG4的下降 ，也可有IgG3的下降
常见变异型免疫 缺 陷病(CVID)
IgG1, IgG2和IgG4的下降
Wiskott-Aldrich Syndrome (WAS)
IgG3和IgG4的下降
J Clin Immunol (2012) 32:961–966 Clin. exp. Immunol. (1979) 36, 112-116
IgG亚类特点
免疫球蛋白亚类检测方法
放射免疫扩散法 酶联免疫吸附法 免疫散射(透射)比浊法
免疫球蛋白亚类的检测与临床应用
BN prospect BN II 等自动化
首 次 I gG亚类及多 抗 应 用于放射免疫 扩 散 法检测IgG亚 类(1964)
1960’s
单抗用ELISA 及免疫比浊法 检测亚类
消化科和免疫科
呼吸和心内
其它科室
➢ 亚类单一或联合水平变化以及比例失调与 多种系统疾病相关
➢ 亚类相关疾病已有国际诊断标准 ➢ 血清学检测作为更为客观，准确和易于随
访的手段，与影像学，病理学证据为临床 提供更多更有价值的信息 ➢ 但血清亚类检测缺乏室间质控品，尚未建 立中国人群的正常参考值范围
PUMCH 标本量
60% 肾内和普内
ug/ml
非常小 非常小 完全
非常短(15分 钟)
较小
ELISA ng/ml
中等
中等
部分
短(数小时) 较高
MeulenbroekAJ, ZeijlemakerWP. Human IgG subclasses: Useful diagnosticmarkers for immunocompetence, 2nd edition, CLB, Amsterdam,The Netherlands 2000.
其他方法—免疫微珠
IgG4 检 出 范 围 0.02ng/ml —0.2mg/l 灵敏度很高，最低可 达到0.02ng/ml 可 一 次检测免疫蛋白 IgG、 IgM、 IgA、 IgE、 IgG亚类
其他方法--液相色谱串联质谱法
CAP回报实验室使用方法学
质量管理
特种蛋白参考血清： ✓WHO 1967年研发了批号：67/86的首批特种蛋白标 准品，随后衍生出67/95,67/97,67/99等 ✓CAP 与欧洲共同体标准局研发 ：CRM470/ERM DA-470
正常参考值范围
正常参考值范围
免疫球蛋白亚类临床意义
IgG4RD等
原发性、继发 性免疫缺陷等
IgG亚类缺陷
N Engl J Med 1970; 283:631-634
最早1970年研 究者对3例化
脓性肺炎患者 的报道
IgG亚类缺陷
儿童亚类缺陷
IgG亚类缺陷
原发性免疫缺陷 IgG亚类缺陷
IgA缺乏症
IgG亚类缺陷
继发性免疫缺陷 HIV感染 (III和IV期) 放疗,化疗(骨髓移植)
IgG亚类缺陷
IgG2及IgG4的下降, 然而IgG1 和 IgG3可能上升
IgG2及IgG4的下降
Ann. Rev. Med. 1987. 38: 325-40 Ann Clin Biochem 2002; 39: 374- 377
2010;9:591.
IgG4相关疾病（IgG4-RD）
Mod Rheumatol (2012) 22:1–14
血清IgG4对Ig4RD诊断价值
血清IgG4对Ig4RD诊断价值
Ann Rheum Dis. 2014 Mar 20
➢cut-off值设为1350mg/l 时，诊断的特异性为60% ， 敏感性为90% ➢cut-off值设为2700mg/l 时，诊断的特异性为91%， 敏感性为35%