食用菌母种制作技术.doc

食用菌母种制作技术

食用菌母种制作技术

制作培养基

先将新鲜无病害的马铃薯洗净，去皮后切成小薄片，称200克，加水1000毫升，煮沸20分钟后过滤，其滤汁为马铃薯煮汁。然后在马铃薯煮汁中加琼脂20克和蔗糖20克煮溶，后补足水至1000毫升，调节pH值在5.5～6。调好pH值后进行分装，一般将培养基装至试管的1/4处，而后加盖棉塞，再用牛皮纸将试管每10支捆成一捆。分装时，注意培养基不可沾在近试管口的壁上，以免日后生霉菌。分装后要立即进行高压灭菌，不可过夜。高压灭菌

将用牛皮纸捆好的试管(棉塞朝上)竖直放入高压锅内进行灭菌。在0.11兆帕压力下维持30分钟，即可达到灭菌目的。灭菌时，放汽要充分，否则影响灭菌效果。开锅取出试管后趁热摆放，使培养基成斜面。试管的斜面以距棉塞3厘米为宜，斜面摆成后，不宜再摆动。

一级菌种扩管

扩管要在无菌条件下进行，先将扩管工具、培养基及菌种放到扩管箱内，然后按每立方米用高锰酸钾5克、40%的甲醛溶液10

毫升的量进行熏蒸消毒30分钟。扩管方法：先将扩管铲在酒精灯火焰上灼烧消毒，然后拔掉母种管上的棉塞，铲一块米粒大的母种，在酒精灯火焰无菌区内迅速送入菌种试管内。扩管后的母种培育10~15天即可投入生产。

食用菌母种怎么制作

母种制作：

母种培养基配制：母种培养基的原料是马铃薯，葡萄糖，蛋白胨，水，琼脂粉，以配制一千毫升的母种培养基为例，将马铃薯去皮后称重200克，葡萄糖20克，琼脂粉20克，蛋白胨10克，用量杯量取1000毫升的水倒入锅中，用刀将马铃薯切成片加入锅中，用文火煮沸，煮至用筷子轻轻一插既可插入，这时可以用四层的纱布过滤煮好的马铃薯汁，然后倒在量桶里，看一下，如果不足一千毫升可加水补足一千毫升，在倒入锅中煮，最后加入称好的葡萄糖、琼脂粉、蛋白胨，为了防止锅底烧焦要边加热边搅拌，煮至完全溶化，母种培养基就配制好了。

母种培养基的分装：

母种培养基配制好后要分装以试管中，这里用到的试管规格为18毫米X200毫米，每7根试管扎成一捆，分装培养基时用漏斗下面接一根塑料管，在通塑料管接装到试管内，分装量为试管高度的五分之一左右，分装完后及时用棉塞装试管口塞住，防止其

它杂菌侵蚀。要注意，母种培养基的温度降到45度以下时凝固，所以分装过程要在母种培养基凝固之前完成。

母种培养基的灭菌：

用白纸包裹试管口，在用绳子将白纸扎紧，将试管放入高压来菌锅中高压来菌，盖上锅盖，压紧螺帽，在压力为0.5MPa条件下持续来菌30分钟，来菌完后在让其在锅内自然冷却一小时，待压力为零时就可以打开锅将试管取出来，这样母种的培养基就制作好了。

制作母种：

母种接种：母种的接种也是在无菌工作室的无菌箱中进行的，另外要选取品质优，长势好的蘑菇来提取菌丝，分别用酒精棉球擦拭双手和蘑菇表面进行消毒，点燃酒精灯然后把长柄小刀放在酒精灯火焰上消毒2至3秒钟，用消毒后的小刀割开新鲜蘑菇的菌柄，在菌柄与菌盖连接处用小刀切割一小块蘑菇组织，打开母种培养基试管瓶塞，为了避免杂菌感染，要将试管口靠近酒精灯火焰，用长柄钩针钩取切割好的蘑菇组织带到试管中，放在试管培养基斜面的中部，退出长柄钩针，将棉塞在火焰上消毒，塞住试管口，母种的接种工作就完成了。

接种以后把试管放在摄氏25度的培养箱里进行培养。蘑菇的种子在适宜的温度下开始了生长发育，长出了嫩嫩的菌丝，蘑菇一

生的大部分时间都是以菌丝体的形式积累和吸取营养，逐渐发育的。5 10天左右，培养基里长满了菌丝体，这就是蘑菇的母种。由于母种的数量少还需要扩大种源增加繁殖。

食用菌母种其他制作方法

母种多用半合成培养基培养。母种的生产应有一个计划，即预计某一时期内所用生产种的数量，从而确定母种生产的数量。母种第一代尽量多转出斜面管，减少转管的代次，避免造成菌丝生活力下降、出菇率低等现象。斜面管在摄氏4度冰箱可保存3个月，但最好在一个月内使用。加石蜡油的斜面在摄氏4度时保藏时间可长些。母种扩大生产前要经严格检查是否污染病虫害、标签是否齐全，是否经过出菇试验等全面考核才能进行扩大生产。第一次母种转管，每管可转出60-80管第二次母种。第二次母种一部分用于转接原种使用，一部分保藏。同样做法，一般母种经3-4次代转传为好。

斜面母种转管方法：转管过程应在无菌箱或无菌室进行。工作人员、工作环境、一切器材要经严格消毒或灭菌。接种前斜面试管用75%酒精抹擦，酒精灯旁用拿接种铲的手的指间拔下棉塞向外夹着，火焰轻轻烧过管口才转管，已灭菌后稍凉的接种铲先在母种斜面上纵向切成2毫米宽的长条，再用接种铲沿斜面的水平方向深约2-3毫米铲离，然后用接种锄将斜面横向切成宽2毫米、

长4毫米的小块。用接种铲把斜面前段约1厘米的部分除去，其余菌种逐一小块接入空白斜面培养基内，菌种块放在空白斜面的中部为好。把管口烧过，塞上棉塞。以上操作在无杂菌条件下进行，称为无菌操作。离开酒精灯，写上标签。新接上的菌种立即进行适温培养。当原菌丝块的菌丝萌发新菌丝时，可将原来温度调低摄氏2-3度，让菌丝缓慢生长，会更强壮，更有生命力。至菌丝长满斜面即为菌种成熟。