疟疾诊断标准及处理原则【GB_
疟疾的诊断与预防措施
疟疾的诊断与预防措施疟疾是一种由寄生虫引起的传染病,主要通过蚊虫叮咬传播给人类。
这种疾病在全球范围内造成了严重的卫生问题,并且给许多发展中国家带来了巨大的经济和社会负担。
为了控制和预防疟疾的传播,正确的诊断和采取有效的预防措施至关重要。
本文将介绍关于疟疾诊断和预防措施的必备知识。
诊断篇1. 临床表现:对于怀疑患有疟疾的患者,医生需要认真询问其既往史以及目前出现的症状。
典型的临床表现包括周期性高热、寒战、头痛、乏力、肌肉酸痛等。
然而,部分患者可能没有明显的典型表现,尤其是在儿童、孕妇和老年人身上。
2. 实验室检查:为了确诊或排除患者是否感染了寄生虫,请务必进行实验室检查。
目前常用的方法包括厚滴片检查和脱氧核糖核酸(DNA)检测。
厚滴片是一种低成本、易于操作的方法,通过显微镜观察血液样品中的寄生虫形态来进行诊断。
而基于DNA技术的检测方法则更加敏感和特异。
3. 快速诊断试剂:为了加快疟疾的诊断速度,许多国家已经开始使用快速诊断试剂(RDTs)。
这种试剂不需要复杂的设备,通过取少量患者血液,并将其应用于试纸上,可以迅速得出结果。
然而,快速诊断试剂并不适用于所有情况,因此在使用之前必须确认其可靠性和准确性。
预防篇1. 蚊虫控制:作为传播疟疾的主要媒介,控制蚊虫非常重要。
常见的方法包括清除水源、改善卫生环境、覆盖暴露水体以及使用杀虫剂等。
特别是在高发病区域或季节性高发期,居民应该养成勤洗澡、穿长袖衣服和睡在帐篷等防虫习惯。
2. 抗疟药物预防:对于那些在高风险区域生活、工作或前往旅行的人群,抗疟药物预防被认为是非常重要的。
这些药物可以有效地预防感染和控制寄生虫数量,减少病例发生率。
然而,使用抗疟药物需要谨慎,并遵循医生的建议。
3. 疫苗研发:目前,尚无完全保护人类免受疟疾感染的有效疫苗。
然而,科学家一直在积极开展相关的研究,并已有几种候选疫苗正在进行临床试验。
如果能够成功开发出可行且安全的疫苗,将为全球范围内预防疟疾提供重要支持。
疟疾诊断和治疗
急性肾衰
G-6PD缺乏、疟原虫代谢产物、药物、人体过
敏反应
恶性疟患者或奎宁、伯喹治疗中出现
实验室检查
常规检查 厚或薄血涂片:疟原虫 免疫学检查:快速诊断试条(RDT)检测疟原虫抗原 分子生物学方法:PCR
诊
断
流行病学: 曾有于疟疾传播季节在疟疾流行区住
宿、夜间停留史,或近二周曾有输血史。
临床表现
实验室检查
诊断标准
疑似病例:具有流行病学史,且临床表现不典 型者。 临床诊断病例:具有流行病学史,且临床表现 典型者。 确诊病例:具有流行病学史、典型或不典型临 床表现、且实验室检查疟原虫(抗原或特异性 基因片段)阳性。确诊病例包括间日疟病例、 恶性疟病例、三日疟病例、卵形疟病例和混合 感染。
③复方磷酸萘酚喹片
④复方青蒿素片等
恶性疟病例:
①青蒿琥酯片加阿莫地喹片: 口服总剂量6片(每片含 青蒿琥酯100 mg,阿莫地喹270 mg)。 不同年龄组服药剂量(片)
年龄 ≥14 6-13
D1 2 1
D2 2 1
D3 2 1
1-5
0.5
0.5
0.5
恶性疟病例:
②双氢青蒿素哌喹片:口服总剂量8片(每片含双氢青蒿 素40mg,磷酸哌喹320mg)。 不同年龄组服药剂量(片)
-输血疟疾 -婴幼儿疟疾 -孕妇疟疾
临床表现
一、典型疟疾:
寒战期:10min-2h 高热期:2-6 h 大汗期 其他:贫血、脾大、肝大
间日疟、卵形疟48h发作1次,有迟发型子孢子,可复发 三日疟72 h发作1次,恶性疟无规则;两者无迟发型子 孢子,无复发
临床表现
疟疾处理原则
疟疾的处理原则主要包括以下几个方面:早期诊断和早期治疗:疟疾的早期诊断和早期治疗对于阻止疟疾的进一步发展和防止疟疾的复发具有重要的意义。
因此,一旦出现疟疾症状,应及时就医,进行血液检查以确定是否为疟疾。
个体化和全面性治疗:疟疾的治疗需要根据患者的具体情况,如疟疾的类型、疟疾的严重程度、患者的年龄和健康状况等,制定个体化的治疗方案。
同时,治疗应全面考虑患者的身体状况和心理状况,提供全面的医疗服务。
及时隔离和治疗复发:疟疾患者应及时隔离,以防止疟疾的传播。
对于复发的疟疾,应及时进行治疗,防止疟疾的进一步发展。
药物治疗:疟疾的治疗主要通过药物治疗进行。
抗疟药物的选择应根据疟疾的类型和疟疾的严重程度进行。
对于重症疟疾,可能需要入院治疗,使用静脉注射的抗疟药物。
同时,对症治疗如降温、止痛、补液等也是必要的。
预防和治疗并发症:在治疗过程中,应预防和治疗疟疾可能引起的并发症,如肺炎、心脏疾病等。
预防措施:预防疟疾的最好方法是避免进入疟疾流行区,或采取适当的防蚊措施,如穿长袖衣服、使用防蚊液等。
总之,对于疟疾的处理,应遵循早期诊断、早期治疗的原则,制定个体化的治疗方案,及时隔离和治疗复发,并使用适当的抗疟药物和对症治疗。
同时,预防措施也是非常重要的,可以减少感染的风险。
疟疾的诊断与防治【54页】
•
活动性Ⅰ级
活动性Ⅱ级
疟疾监测主要内容
• 流动人口疟疾管理:当地居民外出回归
外来流动人口
• 蚊情监测: 密度或叮人率
人血指数和媒介能量 对杀虫剂敏感性
薄血膜虫体形态完整,结构清晰,容 易辩认。但虫数少,容易漏诊; 厚血膜疟原虫较集中,易于检查,但 疟原虫形态不典型,鉴别困难。
实验诊断
• 血清学检查:IFA法检测特异性抗体,辅助 诊断和流行病调查时应用。
• 快速检测:澳卡、Dipstick、ParaSight-F 等。
• DNA探针和PCR方法需进一步简化、完善
• 适用于镜检或实验室技术质量难以保
证、亟待确定疟疾流行范围、疟疾呈 低度传播、需避免药物滥用以减少抗 性发展的地区。
• 局限性:用此法难以检出尚处于潜伏
期或血中仅含成熟配子体的恶性疟原 虫。
3.以分子生物学为基础的诊断 方法
• 多聚酶链反应(polymerase chain reaction,
300000 399 64
中国疟疾发病情况(千例)
600
500
1985-2000年
Number of malaria cases reported
400
300
200
100
0 85 87 89 91 93 95 97 99
无疟 发病率 < 1/ 万 发病率 >1/万 发病率> 10/万 发病率>100/万
3. 以分子生物学为基础,通过基因扩增,检测疟 原虫某特异片段的DNA序列,从而大大提高检 测 的 敏 感 性 和 特 异 性 , 如 探 针 技 术 和 PCR- ELISA等。
1. 以显微镜镜检为基础的方法
疟疾的诊断与治疗
1、典型疟疾 呈周期性发作,每天或隔天或隔两天发作一次。发作 时有寒颤、发热、出汗等症状。发作多次后可出现脾 大和贫血。
2、不典型疟疾 具有发冷、发热、出汗等症状,但热型和发作周期不 规律。
3、重症疟疾 昏迷、重度贫血、急性肾功能衰竭、肺水肿或急性呼 吸窘迫综合征、低血糖症、循环衰竭或休克、代谢性 酸中毒等。
• 疟疾的诊断 • 疟疾的治疗 • 抗疟药使用原则和治疗方案 • 重症疟疾的诊断与治疗
一、疟疾的诊断
• 基本原则: • 早期诊断,规范治疗 • 标准: • 疟疾病人在发生症状的24小时内接受正确、经济、、规
范的治疗。 • 好处:
–治愈病人 –防止病情恶化 –减少传播
一、疟疾的诊断标准
(一)流行病学史
• 曾于传播季节在疟疾流行区有夜间停留史;
• 近二周内有输血史。
• (母亲有疟疾感染史)
• 疟疾流行区:主要分布在非洲、加勒比海地 区、中美、南美、东亚、东南亚、中东、南 亚次大陆、南太平洋地区和东欧等。我国有 24个省具备疟疾传播条件,目前仅云南中缅 边境和西藏林芝地区有一定感染风险。
一、疟疾的诊断标准
•
蒸馏水
1000 ml
• 贮备液Ⅱ 1/15M磷酸二氢钾 (KH2PO4 )溶液
•
KH2PO4 9.07 g
•
蒸馏水
1000 ml
(2)缓冲液的配制
PH M/15 Na2HPO4 M/15 KH2PO4
DW
(ml)
(ml)
6.8
49
51
7.0
63
37
7.1
68
32
7.2
73
27
7.4
81
完整版中华医学会疟疾诊疗规范
【概述】疟疾是经按蚊叮咬或输入带疟原虫者的血液而感染疟原虫所引起的虫媒传染病.寄生于人体的疟原虫共有四种,即问日疟原虫,三日疟原虫,恶性疟原虫和卵形疟原虫.在我国主要是问日疟原虫和恶性疟原虫;其他二种少见,近年偶见国外输入的一些病例.不同的疟原虫分别引起问日疟、三日疟、恶性疟及卵圆疟.本病主要表现为周期性规律发作,全身发冷、发热、多汗,长期多次发作后,可引起贫血和脾月中大.【诊断依据】1.流行病学现居流行区或从非流行区进入流行区居住、工作、旅行等.2.临床表现〔一〕潜伏期本病的潜伏期一般在2周左右,但各种疟原虫所引起的疾病各有不同,恶性疟最短〔8-15天〕〕,问日疟和卵形疟次之〔12-20天〕,三日疟最长〔18-40 天〕〔二〕普通型疟疾其临床发作包括发冷、寒战,继之发热,可达39-40 C,持续2-6小时后出汗而体温迅速下降.问日疟与卵形疟患者间隔1天发热1次,三日疟那么间隔2天发热1次,恶性疟疾发热不规那么,每日均有发热.随着发作次数的增多,患者肝脾逐渐月中大,而以脾月中大尤为明显,同时贫血也逐渐加重.〔三〕重型或凶险型疟疾疟疾患者出现以下一种或一种以上临床表现时,可诊断为重型疟疾:1.脑型疟主要病症有昏迷、头痛、全身性抽搐、烦躁、澹妄等,病死率可达10%-30%2.休克成人的收缩压低于70mmHg,L童低于50mmH群伴有冷而黏湿的皮肤, 皮肤与中央体温相差>10C O3.急性肾衰竭多见于感染严重的患者,红细胞疟原虫感染率常在10犯上.患者出现尿少,24小时尿量成人<400ml或儿童<12ml/Kg,继而无尿,且在补充液体后仍无改善,血清肌酊>265umol/L,尿素氮也明显升高.4.血红蛋白尿〔黑热尿〕大多因患者红细胞缺乏6-磷酸葡萄糖脱氢酶,使用奎宁、伯氨唾或氨基比林等药物后发生血管内溶血,引起血红蛋白尿及急性肾衰竭.5.肺水月中或急性呼吸窘迫综合征患者出现呼吸加速、气短、呼吸困难、青紫, 咳血性泡沫痰等,双肺散在水泡音.对局部患者来说液体输入过量、高原虫血症、肾衰竭及妊娠是其发生的重要因素.6.黄疸及肝功能障碍轻度黄疸在重型疟疾患者中常见,抗疟药治疗后即可恢复.但重度黄疸,血清胆红素增高以直接胆红素为主,并有血清AL冰平明显升高,肝脏明显肿大且有压痛,外表肝脏明显受损,多见于重度感染者.少数患者可出现肝肾综合征.7.重度贫血疟疾患者血中疟原虫数超过1000/ul时,出现正细胞贫血,血细胞比容<15%£血红蛋白<50g/L8.弥散性血管内凝血齿龈、鼻腔、胃肠道等处出血及/或实验室DIC的证据. 胃肠道出血往往伴发于应用肾上腺皮质激素治疗的病人.9.低血糖症血糖<2.2mmol/l,低血糖越来越被认为时恶性疟的一种并发症,由于其临床表现常被重症疟疾的病症所掩盖,在临床上易被忽略.应用奎宁或奎宁丁、妊娠妇女是引起低血糖的常见诱因.有些重症疟疾患者在静脉注射50%®萄糖溶液后,可使呼吸状况改善及昏迷程度减轻.10.高原虫血症在无免疫力的患者中,感染疟原虫的红细胞>5%£恶性疟原虫患者末梢血片中出现恶性疟原虫的裂殖体.11.超高热患者肛门温度达40c或腋下温度达41.5 C可认为超高热,此与体温中枢失调及皮肤散热功能障碍有关,局部由输液反响引起.超高热易引起患者抽搐、呼吸衰竭、心率紊乱及心力衰竭.〔四〕实验室检查患者末梢血涂片或厚图片,经瑞氏或吉氏染色后找到疟原虫,在疑及疟疾而未找到疟原虫时,应在6小时后复查血涂片,必要时可做皮内血片或骨髓涂片.血清抗体检测对初发患者并无早期诊断价值,但对屡次发作而未确诊患者具有一定的诊断价值.血清循环抗原检测具有早期诊断价值,以抗恶性疟原虫富含组氨酸蛋白2抗体来检测患者血液中的pf.HPRH,对恶性疟的早期诊断具有重要价值.PC检测较为敏感,应用两套引物可同时检测恶性疟和问日疟.【鉴别诊断】疟疾须与流行性感冒、伤寒、败血症、钩端螺旋体病、急性血吸虫病、粟粒性肺结核等鉴别.典型疟疾须与其他病原引起的中枢神经感染特别是流行性乙型脑炎相鉴别. 【治疗原那么】疟疾的治疗原那么应以迅速杀灭疟原虫的无性期,限制临床病症、并预防其复燃或复发为主要原那么,并应同时杀灭其配子体预防传播.〔一〕问日疟的治疗目前问日疟原虫对氯唾较敏感,因此首选药为氯唾,一般采用3天8片疗法,可迅速限制临床发作.磷酸氯唾每片0.25g〔含基质0.15g〕,第1天腹0.6g 〔基质〕,第2、3天各0.3g〔基质〕,总剂量1.2g 〔基质〕.不良反应有头晕、头痛、恶心呕吐、食欲减退等,大多数稍微,停药后即可消失.为了消灭肝组织内的虫体〔休眠子〕以预防复发,应同时或在氯唾疗程后服用伯氨唯一疗程.磷酸伯氨唾每片13.2mg 〔含基质7.5mg〕,每日服15mg 〔基质〕,连服14天,总剂量为210mg〔1质〕.在红细胞G6P跳乏症较少的地区,也可每天22.5mg〔基质〕,连服8天.不良反响有厌食、恶心、腹痛、高铁血红蛋白血症及溶血.氯唾无效的问日疟患者可应用青蒿素衍生物或其他抗疟药治疗.〔二〕恶性疟的治疗1.氯唾敏感的恶性疟的治疗首选药为氯唾,可采用氯唾10片3天疗法, 但在我国的恶性疟流行去对氯唾已有耐药,不宜采用此方法.2.抗氯唾恶性疟的治疗首选药物为青蒿素及其衍生物,其次为奎宁.〔1〕青蒿素衍生物:1〕双氢青蒿素:每次80mg,每天1次,连服7天,首剂加倍,总剂量为640mg2〕青蒿琥酯:每次50mg,每天2次,连服7天,首剂加倍,总量为800mg3〕蒿甲醴:每次100mg,每天1次,连服7天,首剂加倍,总剂量为800mg〔2〕奎宁:常用的为硫酸奎宁,每次0.3-0.6mg,每日3次,连服7天,也可加用四环素或多西环素.不良反响有耳鸣、头痛、视力模糊、恶心、腹泻等金鸡纳反应.〔3〕磷酸咯蔡噬:第1天腹2次,间隔8小时,第2、3天各腹1次,每次0.3-0.4g〔基质〕,总剂J量为1.2-1.6g〔基质〕.不良反响有头晕、头痛、恶心、呕吐及上腹不适.〔4〕复方制剂:复方制剂可提升疗效,预防复发,延缓抗药性的产生及缩短疗程.现有复方制剂:1 〕复方双氢青蒿素〔双氢青蒿素加哌唾,每次2片,每天2次,间隔6-8小时, 共2天,不良反响少见,偶有恶心、呕吐.治愈率在95犯上.2〕复方蒿甲醴〔每片含蒿甲醴20mgffi本方醇120mg ,每次4片,第1天服2次, 以后每天1次,连服5天,治愈率在90犯上.〔三〕重症疟疾的治疗重症疟疾的治疗原那么是抗疟药结合支持疗法和对症处理,以迅速限制病情,挽救患者生命.1.抗疟治疗首选药物为青蒿素衍生物,其次为二盐酸奎宁、磷酸咯蔡噬.〔1〕青蒿素及其衍生物1〕青蒿琥酯有注射用粉针剂,供静脉或肌内注射,每瓶60mg,用前溶解于0.6ml5%碳酸氢钠溶液中,彳f完全溶解后参加5.4ml5%葡萄糖生理盐水中作缓慢静脉注射,每日一次,每次60mg首剂加倍,并于6小时后再注射一次,连用7天,总剂量为540mg2〕蒿甲醴油剂肌内注射,每支80mg每日肌注1次,首剂加倍,连用7天, 总剂量为640mg3〕青蒿素栓剂〔双氢青蒿素也有栓剂〕,对不能口服的患者或儿童也有良好疗效,尤其适用于遥远地区的患者.首剂600mg 4小时后再用600mg以后每天2次,每次400mg,共3天,总剂量为2800mg但复燃率可高达45.8%,待病情好转后,继续服用其他青蒿素衍生物.〔2〕二盐酸奎宁注射液:0.5g或10mg/Kgt1口于10%8萄糖溶液中,4小时内静脉滴入,8小时后可重复注射1次,每天药量不超过30mg/Kg国外学者推荐在未服用过奎宁的患者,首剂给与20mg/Kg勺负荷量.静脉滴注过快可引发血压下降,甚至虚脱.静脉推注可抑制心脏而引起死亡.奎宁注射液也可作深部肌肉注射.浅表肌内注射可引起局部组织坏死.〔3〕磷酸咯蔡噬注射液:可供肌内注射或加于5%8萄糖或生理盐水中作静脉滴注,每次80mg首剂加倍,6小时后再滴注1次,24小时及48小时后各滴注1次.该药对心脏有抑制作用,切忌作静脉推注.2. 一般治疗保持患者呼吸道通畅,增强昏迷患者的护理,预防继发性感染. 除外其他昏迷的原因,如低血糖、细菌性脑膜炎、病毒性脑炎等.适量补充液体,维持水电解质的平衡,纠正代谢性酸中毒.3.对症治疗对抢救患者、预防并发症和减少后遗症也很重要.〔1〕降温举措:高热〔肛门温度超过39c以上〕可增加患者脑细胞的耗氧量,尤其在儿童高热本身可引起抽搐,也可使脑型患者发生后遗症的几率增加,因此降温举措对重症疟疾十分重要.常用的退热药物有对乙酰氨基芬15mg/Kg经鼻饲管灌入或应用栓剂,也可肌注安乃近. 对持续高热的患者也可应用物理降温,如应用湿毛巾加冰块,并应用电扇吹风等,必须时可应用亚冬眠疗法,以使体温保持在38c以下.(2)减轻脑水月中:对脑型患者可使用20%r露醇溶液250ml静脉滴注,以后根据病情每6-8小时1次,以减轻脑水月中.地塞米松1 —20m解脉滴注, 有助于抗炎及消月中,可应用1-2次.(3)限制全身性抽搐:全身抽搐时,可静脉缓慢注射地西泮,成人5-10mg,儿童0.15mg/Kg,对反复发作的患者也可注射苯妥英钠.(4)纠正代谢性酸中毒:可静脉滴注5喊酸氢钠溶液200ml,以后根据患者CO2吉合力结果重复给予.(5)肾衰竭:早期少尿疑有肾衰竭时,可静脉注射20%t露醇100ml,如已确定为肾衰竭应限制入量,并应用味塞米.血尿素氮持续升高至24.99mmol/l以上时,可考虑透析疗法.(6)心功能不全:应限制液体输入量及速度,并静脉注射西地兰、地高辛或毒毛花甘感强心剂.如出现肺水月中时应停止输液,吸氧,注射速尿,必要时应用吗啡或杜冷丁,或放血.(7)纠正贫血:当患者血细胞比容低于20%£血红蛋白低于50g/L时,应考虑输血.(8)黑尿热:应停用奎宁抗疟药,改用青蒿素抗疟药,使用地塞米松等肾上腺皮质激素对限制溶血有效,并口服碳酸氢钠使尿呈碱性.贫血严重者输血.肾功能障碍明显者可用透析疗法.(9)休克:应补充血容量,纠正酸中毒,使用血管活性药物如多巴胺、问羟胺等. 【出院标准】患者临床病症消失,连续3次血涂片未找到疟原虫.。
疟疾诊断标准及处理原则
疟疾诊断标准及处理原则哎,说到疟疾,这可真是个让人头疼的病。
记得小时候,村里的老人总是说,这病是“蚊子病”,因为蚊子叮咬会传播疟疾。
不过,这病可不简单,诊断和处理都得讲究科学。
今天,咱们就聊聊疟疾的诊断标准和处理原则,让你对这个病有个更清晰的认识。
首先,疟疾的诊断,可不是随便就能下的。
它需要满足几个条件。
首先,你得有发热、寒战、出汗这些症状,这可是疟疾的典型表现。
然后,你得有疟疾的流行病学史,比如你最近有没有去过疟疾高发区,或者有没有被蚊子叮咬过。
最后,你得通过实验室检查,比如血液涂片检查,确认体内有疟原虫。
说到这,我得提个细节。
有一次,我有个朋友从非洲回来,突然就发起了高烧。
他一开始以为是感冒,结果去医院一查,血液涂片里发现了疟原虫。
这可把他吓坏了,好在医生及时诊断出是疟疾,给他开了抗疟药,这才慢慢好转。
所以,这疟疾的诊断,真是马虎不得。
接下来,咱们说说疟疾的处理原则。
这可是个大事,处理不好,可是会出人命的。
首先,你得及时就医,越早越好。
疟疾这病,越早治疗,效果越好。
然后,你得按照医生的指导,服用抗疟药。
这抗疟药,可不是随便吃的,得按照医生的处方来。
我记得有个邻居,他得了疟疾,结果自己乱吃药,结果病情加重,差点没命。
所以,这抗疟药,一定得按医嘱来。
除了吃药,你还得注意休息和营养。
疟疾这病,会消耗你大量的体力,所以得好好休息。
同时,你得保证营养,多吃点高蛋白、高维生素的食物,增强抵抗力。
我记得我那个朋友,他得了疟疾后,医生就让他多吃点鱼、肉、蛋,补充营养。
他还特意买了一堆维生素片,说是要增强免疫力。
最后,我得提醒你,疟疾这病,预防也很重要。
你得做好防蚊措施,比如穿长袖衣服、用蚊帐、点蚊香。
同时,你得避免去疟疾高发区,或者去的时候做好防护。
我记得我那个朋友,他去非洲前,就打了疟疾疫苗,还带了一堆防蚊用品。
虽然最后还是得了疟疾,但至少病情没那么严重。
总之,疟疾这病,虽然可怕,但只要我们做好诊断和处理,还是能控制住的。
疟疾诊断标准
疟疾的传播方式
疟疾通过雌性按蚊叮咬传播,按 蚊在叮咬疟疾病人后,再叮咬健 康人时,就会将疟原虫传染给健
康人。
传播媒介主要为按蚊属的某些种 类,如亚洲虎蚊、非洲蚊子等。
在某些地区,输血和母婴传播也 是疟疾的传播途径。
疟疾的症状和体征
疟疾的典型症状包括周期性发热、头痛、寒战、出汗等, 通常在发作后数小时或数天内自行消退。
严重疟疾可导致昏迷、休克甚至死亡,尤其是儿童和孕 妇。
疟疾发作时可能出现其他症状,如恶心、呕吐、腹泻、 肌肉疼痛等。
糖尿病的诊断标准
02
疟疾的诊断方法
显微镜检查
总结词
显微镜检查是一种传统的疟疾诊断方法,通过观察患者的血液样本中疟原虫的形态和数量来判断是否感染疟疾。
详细描述
显微镜检查通常采用薄血膜涂片法,将患者的血液涂抹在玻璃片上,干燥后用显微镜观察。医生可以根据疟原虫 的形态特征,如大小、形状、染色深浅等,以及其在红细胞内的寄生部位来判断是否感染疟疾。显微镜检查具有 操作简便、成本低廉的优点,但准确度相对较低,容易漏诊和误诊。
03
疟疾的诊断标准
临床诊断标准
01
02
03
临床表现
疟疾患者通常会出现寒战、 高热、大量出汗等症状, 并伴有头痛、乏力、厌食 等症状。
流行病学史
患者应具备在疟疾流行地 区旅行的历史或与疟疾患 者有过接触史。
体检
医生会检查患者的体温、 脉搏、呼吸等体征,以及 肝脾肿大等异常表现。
实验室诊断标准
血涂片检查
分子生物学诊断
总结词
分子生物学诊断是一种基于DNA检测的 疟疾诊断方法,具有高灵敏度和特异性 。
VS
详细描述
分子生物学诊断通常采用PCR(聚合酶链 式反应)技术检测患者血液中疟原虫的 DNA。通过设计特定的引物和探针,能够 特异性地扩增疟原虫的基因片段,从而判 断是否感染疟疾。分子生物学诊断具有高 灵敏度和特异性的优点,能够检测出极低 浓度的疟原虫DNA,减少漏诊和误诊的可 能性。但操作技术要求较高,需要专业的 实验室设备和人员,且成本相对较高。
疟疾的诊断和治疗
概况
疟疾是一种常见的寄生虫病 世界上尚有90多个国家有该病的流行 20亿人生活在疟疾高发流行区 每年有3-5亿人感染,死亡人数达270
万人
疟原虫→肝C →RBC →RBC破裂→发病
临床特点为间歇性发作的寒战、高热, 继以大汗而缓解
常有反复的发作,严重者可发生脑型疟 疾,严重的贫血
感染性子孢子→血→肝脏→裂殖子→裂殖体(含大量的裂殖子)→肝细胞破裂→释放 裂殖子→循环→RBC(开始RBC内的无性繁殖周期)
红细胞内发育
裂殖子→RBC后→发育成滋养体→成熟的裂殖体→释放出裂殖子及代谢产物→典型的 疟疾发作。裂殖子→RBC→周期性发作(裂殖子大部分被消灭,小部分侵入其它 红细胞重复上述裂体增殖以致引起间歇发作)
日疟为主 3. 输入性疟疾增加
发病机理
当红细胞被裂殖体胀破后,大量裂殖子,疟色 素和代谢产物进入血液,引进寒战、高热,继 之大汗
疟原虫在人体内增殖引起强烈的吞噬反应,以 致全身单核——巨噬细胞系统显著增生,肝脾 肿大,骨髓增生,周围血中单核细胞增多,血 浆球蛋白增高
带疟原虫者感染疟疾后,患者可以获得一定的 免疫力,此时虽然有小量疟原虫增殖,但可无 疟疾发作的临床表现,成为带疟原虫者
脑型疟疾
最为严重,多发生在恶性疟疾 尤其多见于缺乏免疫力的小孩与初进入疟区的
外来人口 急起高热、剧烈头痛、呕吐、谵妄、昏迷、抽
搐 脑脊液压力增高,白细胞大多正常,蛋白质轻
度增高、糖与氯化物正常
实验室检查
➢ 血象:白细胞总数正常或减少,大单核细胞增多。 可有严重贫血
➢ 血或骨髓查找疟原虫。(薄或厚血片) ➢ 血清学检查:免疫荧光、间接血凝与ELISA法,
病理解剖
疟疾的诊断和治疗方案
一般采用口服给药,成人总量 1.5g,分3次服,连用2天。服药 后24~48小时血中浓度达到高峰 ,可迅速控制症状。
青蒿素类药物及治疗方案
青蒿素
是从中药青蒿中提取的一种过氧桥结 构的倍半萜内酯类化合物,具有高效 、速效、低毒的特点。
治疗方案
青蒿素类药物可口服、肌肉注射或静 脉注射。具体剂量和疗程根据病情和 医生建议而定。
评估指标
02
包括临床症状、体征、血常规、尿常规、肝功能等实验室检查
。
注意事项
03
随访期间,患者应保持良好的生活习惯,避免再次感染;如出
现异常情况,应及时就医。
心理干预在康复过程中的作用
缓解焦虑情绪
疟疾患者常因病情反复、治疗周期长而产生焦虑情绪。心理干预 可帮助患者缓解焦虑,增强治疗信心。
改善睡眠质量
蚊虫驱除与灭杀方法
室内滞留喷洒
使用杀虫剂对室内墙壁、天花板 等蚊虫栖息地进行喷洒,降低蚊
虫密度。
蚊帐使用
在疟疾高发地区,提倡使用经杀虫 剂处理的蚊帐,有效减少蚊虫叮咬 。
室外环境整治
清除积水、杂草等蚊虫孳生地,降 低蚊虫数量。
加强个人防护意识
避免暴露
尽量减少在蚊虫活动高峰 时段(黄昏和黎明)外出 ,避免暴露于蚊虫环境中 。
穿着防护
外出时尽量穿着长袖衣服 、长裤和袜子,减少皮肤 暴露面积。
使用防蚊用品
涂抹驱蚊剂、使用驱蚊手 环等防蚊用品,降低蚊虫 叮咬风险。
05
并发症处理及康复期管理
常见并发症类型及处理原则
贫血
疟疾患者常出现贫血,严重时可 危及生命。治疗原则包括补充铁 剂、叶酸、维生素B12等造血原
料,必要时输血治疗。
疟疾诊断和治疗PPT课件
国际合作与交流
全球倡议和行动
参与全球疟疾防控倡议,推动国际社 会共同应对疟疾挑战。
技术合作与援助
提供技术支持和医疗援助,帮助受援 国提高疟疾防控能力。
信息共享和经验交流
分享疟疾防控信息和经验,促进国际 学术交流和研究合作。
资源整合与筹措
动员国际社会资源,筹措资金和技术 支持,推动全球疟疾防控事业的发展。
传播媒介研究
深入研究疟疾传播媒介的生态学和生物学特性,了解媒介分布和 传播规律,为防控措施提供科学依据。
疾病流行规律研究
通过对疟疾流行病学数据的收集和分析,研究疟疾的流行规律和趋 势,预测和评估疟疾的传播风险。
防控措施研究
研究和评估各种防控措施的效果和可行性,提出有效的防控策略和 措施,降低疟疾的发病率和死亡率。
疫苗研究
多肽疫苗
利用基因工程技术,设计和合成疟原虫特定抗原 的多肽片段,制备出具有免疫原性的多肽疫苗。
重组蛋白疫苗
将疟原虫的特定基因克隆到载体中,表达出具有 免疫原性的重组蛋白,制备出重组蛋白疫苗。
减毒活疫苗
通过基因工程技术,制备出疟原虫的减毒活疫苗, 激发人体免疫系统对疟原虫的免疫反应。
流行病学研究
个体化治疗方案
根据患者的病情、年龄、体重 等因素制定个体化的治疗方案
。
联合用药
针对疟原虫的多个生长阶段, 采用联合用药以提高疗效。
全程治疗
确保患者完成整个疗程,避免 复发和耐药性的产生。
04 疟疾的预防和控制
预防措施
药物预防
通过服用抗疟药物,降低感染 风险。
疫苗接种
研发和推广有效的疟疾疫苗, 提高人群免疫力。
况。
采集血液样本进行显微 镜检查、快速诊断试剂 检测或分子生物学检测。
各型疟疾的诊断与防治原则
二.疟疾诊断
临床遇有下列情况者, 临床遇有下列情况者,可疑为疟疾
生活在疫区或去过疫区, ① 生活在疫区或去过疫区 , 有感染疟疾的机 现有疑似疟疾的症状者; 会,现有疑似疟疾的症状者; ② 间歇性发热, 每天、 隔天或隔两天定时出 间歇性发热 , 每天 、 现一次; 现一次; 贫血, 红细胞内见粗细不一的嗜碱性点彩, ③ 贫血 , 红细胞内见粗细不一的嗜碱性点彩 , 白细胞数接近正常或偏低, 白细胞数接近正常或偏低 , 单核细胞比率增 白细胞内查见疟色素颗粒; 高,白细胞内查见疟色素颗粒;
东南亚区有8个国家流行疟疾 东南亚区有 个国家流行疟疾
孟加拉、不丹、印度、印尼、缅甸、尼泊尔、 孟加拉、不丹、印度、印尼、缅甸、尼泊尔、 斯里兰卡和泰国 14.15亿总人口中有 亿总人口中有12.12亿(86%)受疟疾威 亿总人口中有 亿 受疟疾威 报告了337万例镜检确诊疟疾患者, 万例镜检确诊疟疾患者, 胁,报告了 万例镜检确诊疟疾患者 41%为恶性疟,其中 为恶性疟, 来自印度, 为恶性疟 其中84%来自印度 其次为 来自印度 斯里兰卡(8%) 斯里兰卡
年
————————————————————
无法显示图像。计算机可能没有足够的内存以打开该图像,也可能是该图像已损坏。请重新启动计算机,然后重新打开该文件。如果仍然显示红色 “x”,则可能需要删除该图像,然后重新将其插入。
千例) 中国疟疾发病情况(千例)
1985-2000年 1985-2000年
寄生在人体的疟原虫有四种(间日疟原虫、 寄生在人体的疟原虫有四种(间日疟原虫、 三日疟原虫、恶性疟原虫和卵性疟原虫) 三日疟原虫、恶性疟原虫和卵性疟原虫)
恶性疟原虫
• 环状体:环纤细,多环(一个红细胞内有 个 环状体:环纤细,多环(一个红细胞内有2个 环状体) 多核( 一个环状体上有2个细胞核 个细胞核) 环状体 ) 、 多核 ( 一个环状体上有 个细胞核 ) 和边缘型(环状体沿红细胞边缘分布) 和边缘型(环状体沿红细胞边缘分布)。 • 配子体:雄配子体呈腊肠型,细胞质略红, 配子体:雄配子体呈腊肠型,细胞质略红, 核疏松,位于虫体中央,疟色素分布在核周; 核疏松,位于虫体中央,疟色素分布在核周; 雌配子体呈新月型,细胞质蓝色,核致密, 雌配子体呈新月型,细胞质蓝色,核致密, 核位置及疟色素分布特点同雄配子体 。
疟疾诊断标准及处理原则【GB-
【GB 15989—1995】疟疾诊断标准及处理原则根据《中华人民共和国传染病防治法》及《中华人民共和国传染病防治法实施办法》制订本标准。
1 主题内容与适用范围本标准规定了疟疾的诊断标准及处理原则。
本标准适用于各级各类防疫和医疗卫生机构对疟疾的诊断和处理。
2 诊断原则根据疟区住宿史,发病时有定期发冷、发热、出汗等临床症状,脾肿大等体征,以及病原学检查、血清免疫学检查等结果,予以诊断。
3 诊断标准3.1 曾于疟疾传播季节在疟疾流行区住宿,或有输血史。
3.2 间歇性定时发作,每天、隔天或隔两天发作一次。
发作时有发冷、发热、出汗等临床症状。
发作多次可出现脾肿大和贫血。
重症病例出现昏迷等症状(详见附录C)。
3.3 用抗疟药作假定性治疗,3天内症状得到控制者。
3.4 间接荧光抗体试验或酶联免疫吸附试验抗体阳性(详见附录B)。
3.5 血涂片查见疟原虫。
其种类有间日疟原虫、恶性疟原虫,三日疟原虫和卵形疟原虫(详见附录A)。
疑似病例:具备3.1与3.2。
临床诊断:疑似病例加3.3或3.4。
确诊病例:疑似病例加3.5。
按查见的疟原虫种类,分为间日疟、恶性疟、三日疟和卵形疟。
4 处理4.1 治疗4.1.1 间日疟、三日疟和卵形疟治疗成人量氯喹1.2~1.5g 3日分服(第1日0.6g,第2、3日各0.3或0.45g),加伯氨喹90~180mg 4~8日分服(每日22.5mg)。
4.1.2 恶性疟治疗4.1.2.1 对氯喹未产生抗性地区恶性疟治疗成人量氯喹1.2~1.5g 3日分服(第1日0.6g,第2、3日各0.3或0.45g),加伯氨喹67.5mg 3日分服(每日22.5mg)。
4.1.2.2 对氯喹产生抗性地区恶性疟治疗任选以下方案之一:哌喹1.5g 3日分服,加伯氨喹45或67.5mg 2日或3日分服;咯萘啶1.2g加磺胺多辛1.0g 2日分服,加伯氨喹45或67.5mg 2日或3日分服;咯萘啶0.8~1.0g加磺胺多辛1.0~1.5g加乙胺嘧啶50~75mg,均2日分服;青蒿琥酯钠600mg 5日分服(第1日100mg×2次,第2~5日每日50mg×2次),加伯氨喹67.5mg 3日分服(以上均为成人量)。
疟疾的疟疾诊断与防治
1. 出现严重发绀或伴有头昏、胸闷、心 悸及呼吸急促等缺氧症状时,应立即停 药,并给予美蓝(亚甲蓝)1~2mg/kg体重 溶于葡萄糖溶液中静脉缓慢注入。
也可口服美蓝,每天服150mg~300mg。 小儿每岁服10mg, 可使症状缓解, 但尿 液会出现暂时性呈蓝色。
1. 蒿甲醚
每天肌注1次, 每次80mg,连续3—5天,首剂加倍。若原虫 密度大于15万/μl,首剂给药后4—6小时,再给予80mg肌注。
2. 青蒿琥酯
每天静脉注射1次,每次60mg,连续3—5天,首剂加倍。 若原虫密度大于15万/μl,首剂给药后4—6小时,再给予 60mg静脉注射。注射时,需先将5%碳酸氢钠注射液1ml注入含 青蒿琥酯60mg粉针剂中,反复振摇2—3分钟,待溶解澄清后, 再注入5ml等渗葡萄糖或生理盐水,混匀后缓慢静脉注射。配 制后的溶液如发生混浊, 则不能使用。
恶性疟
常在一般寒热发作2—5天后出现,少数亦 可突然晕倒起病。症状类似脑炎及脑膜炎。
初有剧烈头痛、呕吐、烦躁不安、精神错 乱,随即出现谵妄、嗜睡或昏迷、常见惊 厥或抽搐,儿童尤多见。
1、胃肠型
高热弛张、恶心呕吐、腹泻频繁, 水样便或血便,可伴有里急后重, 剧烈腹痛及结肠部压痛,部分病人 以腹痛为主,而无腹泻,常易误诊 为急腹症。后期脉搏细弱、血压下 降,皮肤厥冷、冷汗、体温下降、 少尿或无尿。未及时治疗者,可能 死于急性肾衰。
当发现服用过量抗疟药引起中毒时, 应立即 停药, 并作以下处理。
1. 用物理方法或皮下注射催吐剂盐酸阿
朴吗啡5mg催吐。
2. 用高锰酸钾溶液或温开水洗胃, 至洗
出液变清为止,并灌注适量导泻剂, 尽可能排
疟疾诊断标准(WS259-2006)
疟疾诊断标准(WS259-2006)疟疾诊断标准(WS259-2006)1 范围本标准规定了疟疾诊断依据、诊断原则、诊断标准和鉴别诊断。
本标准适用于各级疾病预防控制机构和医疗机构对疟疾的诊断。
2 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
2.1 疟疾 malaria是由疟原虫寄生于人体引起的传染性寄生虫病,包括间日疟、恶性疟,三日疟和卵形疟等四种。
2.2 重症疟疾 severe malaria疟疾患者出现严重并发症,并需住院治疗。
其中.脑型疟多见。
2.3 带虫者 carrier血中有疟原虫而无临床症状者。
3 诊断依据3.1 流行病学史(参见附录A)曾于疟疾传播季节在疟疾流行区住宿、夜间停留或近二周内有输血史。
3.2 临床表现(参见附录A)3.2.1 典型的临床表现呈周期性发作.每天或隔天或隔两天发作一次。
发作时有发冷、发热、出汗等症状,发作多次后可出现脾大和贫血。
重症病例出现昏迷等症状。
3.2.2 具有发冷、发热、出汗等症状,但热型和发作周期不规律。
3.3 假定性治疗(参见附录B)用抗疟药作假定性治疗,3d内症状得到控制。
3.4 实验室检查3.4.1 显微镜检查血涂片查见疟原虫(见刚录C)。
3 . 4.2 疟原虫抗原检测阳性(见附录D)。
4 诊断原则根据流行病学史、临床表现以及实验室检测结果等,予以诊断。
5 诊断标准5.1 带虫者无临床症状,同时符合3.4.1。
5.2 疑似病例应同时符合3.1和3.2.2。
5.3 临床诊断病例具备下列之一者:5.3.1 应同时符合3.1和3.2.1;5.3.2 应同时符合3.1、3.2.2和3.3。
5.4 确诊病例具备下列之一者:5.4.1 应同时符合3.1、3.2.1和3.4.1;5.4.2 应同时符合3.1、3.2.1和3.4.2;5.4.3 应同时符合3.1、3.2.2和3.4.1;5.4.4 应同时符合3.1、3.2.2和3.4.2。
6 鉴别诊断临床诊断病例需与以发热为主要症状的其他疾病,如日本血吸虫病、急性上呼吸道感染、伤寒、结核、回归热、败血症、钩端螺旋体病、登革热、黑热病、巴山西虫病等相鉴别。
疟疾的管理原则
疟疾的管理原则
管理疟疾的原则包括以下几点:
1. 确定诊断:通过临床症状、过去的旅行史和实验室检查,如血涂片或快速诊断试剂盒,确诊患者是否患有疟疾。
2. 及早治疗:根据疟疾的种类、严重程度和患者的年龄、健康状况等因素,选择合适的抗疟药物进行治疗。
及早治疗可以减少症状的严重程度,防止并发症的发生。
3. 防止传播:对于已经确诊的病例,应立即采取措施防止疟原虫传播给其他人。
这包括采取有效的措施杀灭病媒蚊,如使用杀虫剂喷洒、室内室外残留喷洒,以及使用蚊帐等防护措施。
4. 追踪接触者:对于患者的密切接触者和可能受到感染的人群,应进行监测和追踪,并及早进行治疗,以防止疟疾的传播。
5. 预防措施:对于居住在高疟疾流行地区或前往高疟疾风险地区旅行的人群,可以采取预防性措施,如服用抗疟药物进行预防,并采取有效的个人防护措施,如使用蚊帐、穿着长袖衣物、使用驱蚊剂等。
6. 监测和报告:对疟疾疫情进行监测和报告,包括报告病例、死亡和流行趋势等信息,以便采取及时的控制措施和防控策略。
总之,疟疾的管理原则包括早期诊断和治疗、防止传播、追踪
接触者、预防措施和监测报告等。
这些措施的实施可以有效地控制和预防疟疾的发生和传播。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
【GB 15989—1995】疟疾诊断标准及处理原则根据《中华人民共和国传染病防治法》及《中华人民共和国传染病防治法实施办法》制订本标准。
1主题内容与适用范围本标准规定了疟疾的诊断标准及处理原则。
本标准适用于各级各类防疫和医疗卫生机构对疟疾的诊断和处理。
2诊断原则根据疟区住宿史,发病时有定期发冷、发热、出汗等临床症状,脾肿大等体征,以及病原学检查、血清免疫学检查等结果,予以诊断。
3诊断标准3.1曾于疟疾传播季节在疟疾流行区住宿,或有输血史。
3.2间歇性定时发作,每天、隔天或隔两天发作一次。
发作时有发冷、发热、出汗等临床症状。
发作多次可出现脾肿大和贫血。
重症病例出现昏迷等症状(详见附录C)。
3.3用抗疟药作假定性治疗,3天内症状得到控制者。
3.4间接荧光抗体试验或酶联免疫吸附试验抗体阳性(详见附录B)。
3.5血涂片查见疟原虫。
其种类有间日疟原虫、恶性疟原虫,三日疟原虫和卵形疟原虫(详见附录A)。
疑似病例:具备3.1与3.2。
临床诊断:疑似病例加3.3或3.4。
确诊病例:疑似病例加3.5。
按查见的疟原虫种类,分为间日疟、恶性疟、三日疟和卵形疟。
4处理4.1治疗4.1.1间日疟、三日疟和卵形疟治疗成人量氯喹1.2~1.5g 3日分服(第1日0.6g,第2、3日各0.3或0.45g),加伯氨喹90~180mg 4~8日分服(每日22.5mg)。
4.1.2恶性疟治疗4.1.2.1对氯喹未产生抗性地区恶性疟治疗成人量氯喹1.2~1.5g 3日分服(第1日0.6g,第2、3日各0.3或0.45g),加伯氨喹67.5mg 3日分服(每日22.5mg)。
4.1.2.2对氯喹产生抗性地区恶性疟治疗任选以下方案之一:哌喹1.5g3日分服,加伯氨喹45或67.5mg 2日或3日分服;咯萘啶1.2g加磺胺多辛1.0g 2日分服,加伯氨喹45或67.5mg 2日或3日分服;咯萘啶0.8~1.0g加磺胺多辛1.0~1.5g加乙胺嘧啶50~75mg,均2日分服;青蒿琥酯钠600mg 5日分服(第1日100mg×2次,第2~5日每日50mg×2次),加伯氨喹67.5mg 3日分服(以上均为成人量)。
4.1.3疑似病例假定性治疗成人量氯喹0.6g顿服,在氯喹抗性地区用哌喹0.6g顿服。
确诊后按4.1.1或4.1.2治疗。
4.1.4间日疟抗复发治疗流行季节前,对1或2年内有疟史者,成人用乙胺嘧啶100mg 2日分服,加伯氨喹90mg 4日分服。
4.1.5重症病例治疗(洋见附录C)4.1.5.1用青蒿琥酯钠或咯萘啶或蒿甲醚或二盐酸奎宁注射作抗疟治疗。
4.1.5.2输液,补充维生素,并作支持和辅助治疗。
4.1.5.3对症治疗和并发症处理。
4.2预防服药在高度流行区,对儿童、工地民工、疫点居民和流动人口,在流行季节成人用乙胺嘧啶50mg加伯氨喹22.5mg顿服,孕妇改用氯喹或哌喹0.3g顿服,均每10日一次。
在氯喹抗性地区用哌喹0.6g,或磺胺多辛500mg加乙胺嘧啶37.5mg,均每10日一次,首次连服2日。
4.3灭蚊在高度流行区或疫点,用DDT(2g/m2)滞留喷洒住屋和牲畜棚,在普遍使用蚊帐地区用溴氰菊酯(10~20mg/m2)或二氯苯醚菊酯(200~300mg/m2)浸泡(或喷洒)蚊帐。
4.4防蚊提倡使用蚊帐、蚊香,利用蒿、艾等野生植物烟熏驱蚊,有条件住户装置纱窗、纱门。
改变露宿习惯,减少蚊虫叮咬。
4.5环境治理结合农田水利和新农村建设,填平坑洼,排除积水,平整田地,修整沟渠,加深蓄水。
在有条件地区,稻田养鱼或润湿灌溉。
在大劣按蚊为媒介地区,结合生产开发村庄周围的灌木林。
附录A病原学检查(补充件)A1血涂片检查A1.1吉氏液染色-光学显微镜(油镜)检查A1.1.1血片制作在洁净载玻片上涂制薄血膜与厚血膜。
一般从耳垂或手指取血(婴儿可在足跟取血)。
先用酒精棉球消毒取血部位,然后用一次性刺血针(或用折断半边的蘸水笔尖代替,但每次使用后经煮沸消毒)迅速刺入,轻压挤出血液。
用推片边缘中部取少许(0.5~1.0μL)血液在载玻片上推制成薄血膜,再用推片的角,取血约4~5μL(火柴头大小的血滴),在同一载玻片上的适当位置涂制成直径为0.8~1.0cm的圆形厚血膜。
自然干燥,用铅笔在薄血膜上、或用特种蜡笔在玻片反面编号。
A1.1.2血片染色染色液用吉氏染粉10g、中性甘油500mL和纯甲醇500mL配制而成。
配制时将吉氏染粉置大研钵中,逐步加入少量甘油,充分研磨后,置有色玻瓶中,用甲醇分数次洗出研钵中的甘油染液,倒入瓶内摇匀,在室温下放置3~5天,即可使用。
染色前,先用甲醇固定薄血膜,将吉氏染液用pH7.0~7.2的水配成3%的稀释液,将血片插入染色缸内染色,或用滴管将此稀释液滴在厚、薄血膜上,染色30min。
若需快速染色,可在2mL 水中加吉氏染液3滴,染色6min。
或先在厚血膜上加几滴清水溶去血红蛋白后滴加染液,效果更佳。
染色后,用水轻轻冲洗,插在玻片板上晾干。
A1.1.3血片镜检在染色血片上滴少许柏油,用光学显微镜(油镜)检查。
应检查厚血膜为主,薄血膜主要用于原虫种类鉴别和原虫密度计数。
染色后疟原虫核呈红色,胞浆呈蓝色。
除环状体外,其他各期疟原虫均可查见褐色的疟色素。
现症病人至少检查100个厚血膜视野,带虫者应查完整个厚血膜,未发现疟原虫判为阴性。
以薄血膜中平均每100个红细胞中的原虫数或厚血膜平均每100个白细胞范围内的原虫数,推算每微升血中的原虫密度。
A1.2瑞氏液染色-光学显微镜(油镜)检查A1.2.1血片制作参见A1.1.1。
A1.2.2血片染色用瑞氏染粉0.2g,置于研钵内,加入中性甘油3mL,充分研磨,然后逐次加入少量甲醇至研钵内洗去染液,倒入有色玻璃瓶内,再在研钵内加甲醇冲洗,至用完100mL甲醇为止,摇匀过滤后即可使用。
染色时,先在厚、薄血膜间用蜡笔划一条横线,在厚血膜上加清水2~3滴溶去血红蛋白,在薄血膜上直接加约1mL瑞氏染液染色2min,然后在薄血膜上加与染液等量的水稀释,并引到厚血膜上,使厚、薄血膜同时再染色5~6min,水洗晾干。
本法不宜用于大量血片染色,但染色所需时间短,多用于医院门诊检验。
A1.2.3血片镜检参见A1.1.3。
A1.3荧光素吖啶橙染色-荧光显微镜检查A1.3.1血片制作参见A1.1.1,但厚血膜应比吉氏液染色的厚血膜略薄,即用3μL血涂成直径为1.2~1.5cm的亚厚血膜;薄血膜则不宜过薄,可在涂片时推片以45°角涂成较厚的薄血膜。
A1.3.2血片染色先用甲醇固定薄血膜,厚血膜用清水溶去血红蛋白。
用吖啶橙1g,加pH6.5~7.0磷酸缓冲液100mL配制成1%吖啶橙母液。
染色时,将吖啶橙母液0.1mL加生理盐水9.9mL配成万分之一稀释液。
用滴管取稀释液2~3滴于血膜上,染色40~60s,加盖玻片。
A1.3.3血片镜检用荧光显微镜(或普通光学显微镜加简便荧光光源装置代替)暗室检查。
疟原虫和白细胞的核呈现黄绿色荧光,胞浆呈桔红色荧光。
A2骨髓穿刺按医院常规进行。
本法一般不宜用于疟疾诊断,仅在特殊情况下用于鉴别诊断。
附录B血清免疫学检查(补充件)B1间接荧光抗体试验(IFAT)B1.1抗原片制备常用食蟹猴疟原虫为代用抗原。
以食蟹猴疟原虫感染恒河猴,待红细胞感染率超过2%,且多数原虫为裂殖体前期时取血,加肝素抗凝,经2000r/min离心15min,弃血浆,加5倍容积pH7.2的0.01mol/L磷酸盐缓冲盐水(PBS),混匀后再次离心,弃上清液,重复洗涤3~4次,将细胞沉淀物加PBS恢复至原血量后混匀成悬液,使厚血膜每个视野有5~8个裂殖体或大滋养体。
取悬液约10μL置干净载玻片的一端,推制成6.0cm×1.5cm 长条形亚厚血膜,置室温中晾干或吹干。
用纸包装放在有干燥剂的密封器内。
在-20℃有效期为1年,在4℃有效期为3个月。
用体外培养的恶性疟原虫制备抗原片,应在红细胞感染率为4%以上且以裂殖体为主时收集培养原虫,制片方法同前。
B1.2血样的采集、运送和保存血清、滤纸干血滴均可应用。
前者由不加抗凝剂的全血分离获得,在4℃可作运送及短期保存,-20℃可保存2年左右,但应减少反复冻融,以免影响抗体活性。
后者将滤纸切成10cm×2cm纸片,在滤纸上压出直径为1.2cm的圆形印迹,从受检者的耳垂或手指取血充满圆圈,其血量约为20μL(约相当血清10μL),编号后阴干,放入有干燥剂的密封塑料袋内,在4℃可保存半年,-20℃可保存2年。
B1.3操作方法受试血清以pH7.2的0.01mol/L PBS作1∶10或1∶20稀释,或将滤纸干血滴血样部分剪碎,放在有0.1或0.2mL PBS的井内,在4℃浸泡过夜,即成相当于1∶10或1∶20的血清稀释液。
对1∶10或1∶20稀释度反应阳性的血样,继续作倍比稀释(1∶40,1∶80…)进行检测,直至转为阴性。
最后的阳性稀释度即为终点滴度。
从冰箱中取出的抗原片,立即用电风扇吹干或在回暖后打开塑料袋,用特种蜡笔将每张抗原片划分成若干小格,每小格加一个血样或一个滴度,每批试验均设参考阳性、阴性血清及PBs空白对照。
加血清后即移入37℃湿盒,30min后取出,用PBS缓慢冲洗后放入有PBS 的缸内浸5~10min,用蒸馏水冲洗后再晾干或吹干。
然后逐格滴加PBS稀释的1∶10的抗人IgG荧光抗体(或按产品说明),置湿盒内37℃温育30min,然后按上述方法清洗、吹干,用荧光显微镜检查反应结果。
B1.4反应标准以裂殖体及大滋养体胞浆的荧光强度及形态结构清晰程度区分:无荧光为-,荧光微弱、形态结构不清为±,荧光较弱、形态结构尚清楚为+,根据荧光明亮度和结构清晰度的增加依次为++和+++。
一般以1∶20血清稀释度时十以上判为阳性。
B2酶联免疫吸附试验(ELISA)B2.1可溶性抗原按IFAT方法收集食蟹猴疟原虫,或在体外培养的恶性疟原虫红细胞感染率为4%~8%且以裂殖体为主时收集培养原虫,离心洗涤3~4次,吸取沉淀上层的褐色部分装入保存管内。
如当时不制备抗原,可放液氮内保存。
如立即制备则放入-20℃冰箱反复冻融3次,每次1h,离心洗除血红蛋白,收集黑褐色沉淀部分,加10倍量的pH7.4的0.01mol/L PBS,以150mA的电流强度冰浴超声3次,每次1min,间隔5min,10000r/min 离心30min,上清液即为可溶性抗原。
为了测得此抗原的适宜工作稀释度,在酶结合物的常用浓度及参考阳性、阴性血清1∶100稀释的条件下,将抗原从1∶50,1∶100 (10)浓度稀释,包被塑料板进行检测,选取参考阳性血清光密度(OD)值为1.0的抗原稀释度作抗原适宜浓度。