关于血清胶冻样、
影响禽流感血凝和血凝抑制试验的因素及对策
影响禽流感血凝和血凝抑制试验的因素及对策作者:郑海玲来源:《兽医导刊》 2017年第8期常用试验方法可以用于鉴定流感病毒分离株HA 亚型,也可以对禽血清中是否存在抗原亚型相同的免疫抗体进行检测。
这种方法操作简单、方便、灵敏度高,在基层动物防疫部门得到广泛应用。
但是很多因素会导致HA-HI 试验结果失真,难以取得预期检测效果,下面将对相关影响因素与对策具体探究。
一、处理与保存血清1. 溶血。
很多因素影响下会使溶血形成,比如,注射器清洁不当,容器不干燥或者受到污染;穿刺方法不正确,损伤了组织;长时间的淤血;过快的抽血速度;将血液向容器中注入,未能将针头取下或者过快的注入速度使大量泡沫产生,久而久之会形成溶血;过于剧烈的震荡,这些都需要在操作中格外注意。
可以在采血时应用一次性注射器,让血清在注射器中自然析出,可以降低溶血发生率。
2. 血清分离。
采集完的血液呈45 ~ 60o 角于室温(20 ℃ ~25 ℃)下放置约2 ~ 3h 即可分离出血清,条件允许时可先将采好的血液呈45 ~ 60o 角于4℃冰箱放置约1h,然后用低速离心机离心3 ~ 5min,转速为3000 ~ 5000 转。
3. 胶冻样血清。
在采集血样中,因为血液中存有过多脂肪会出现胶冻样血清,处理这种血清的方法是应用干净的玻璃棒或者塑料棒挑起胶冻样的血清,在管壁上挤压,直到胶冻样消除为止,然后快速离心,这样可以快速获得检测用的血清样。
4. 保存血清。
血清通常在冰箱中冷藏,5℃为适宜温度。
如果检测用的样品需要保存1 周,需要放置冷冻箱中。
保存好的血清一定要做好标记与封闭处理,避免弄混。
有的血清样品需要反复检测,就需要多次冻融,这样将难以确保检测结果准确。
有研究人员将30 份抗体水平较高的血清作为试验样本,分为①组、②组和③组,①组为被检测血清反复冻融,②组为检测抗原,也反复冻融,③组为对照组。
3组均做血凝抑制试验,结果显示:①组抗体水平较对照组低1 个滴度,②组抗体水平较对照组低2 个滴度。
家畜家禽采血技术
家畜家禽采血技术一、采血前的准备1 物品准备采样箱,5~30mL一次性注射器(或一次性负压采血器),9#采血针,16#(16*38)注射针头,75%酒精,碘酊,干棉球,10mL离心管,止血钳,动物保定器或保定绳,记号笔,不干胶标签,采样登记表,乳胶手套,防护服,防护帽,一次性手套,一次性鞋套,长筒胶鞋等物品。
(注意:采样用的注射器、注射针头等易耗品按采样数的1.5倍以上准备。
)2 采血方式猪:前腔静脉采血、耳静脉采血。
其中,猪耳静脉采血法多用于中、大猪与种猪,猪前腔静脉采血法多用于仔猪。
牛:颈静脉采血、耳静脉采血、尾根静脉采血。
羊:前腔静脉采血、耳静脉采血、颈侧静脉采血。
禽类:翅内侧腋静脉采血、心脏采血、头部静脉窦采血。
3 采血注意事项免疫抗体监测样品采集,需要在动物免疫后14-20天采集血液,猪口蹄疫疫苗免疫28天后采血。
采血前动物最好空腹,鸡采血前30分钟请给予其充足饮水。
若血清呈胶冻样,则可能原因有:凝血时间不够、采血前刚刚喂食(没有空腹)、脂肪血(营养过剩)。
二、各种动物采血技术1 中大猪、公母猪前腔静脉采血1.1站立式保定让猪站立,助手面对猪的头部,用金属保定且套住猪的上颌骨,收紧金属保定圈环,向前方用力牵引,并将猪的上颌骨稍稍吊起,使猪两前肢刚好着地(在同一水平线上),猪呈后退姿势,从而保持安定的站立状态。
1.2找准采血部位用右手触膜胸骨柄最高点至第一肋骨间1厘米处,在第一对肋骨间的胸腔入口处的气管腹侧面,由左右两侧颈静脉和腋静脉汇合形成。
采血部位在第一对肋骨与胸骨柄结合处直前,但由于左侧靠近膈神经,故以右侧采血为宜。
公母猪和20kg以上中大猪可选颈部最低凹处。
1.3进针抽血公母猪宜选用16#50mm针头,30kg以上的中大猪,宜选用12#38mm针头。
用酒精棉球消毒进针,由下而上且垂直方向进针,采血人员觉得有负压感且有回血,则标志已刺入血管,然后轻轻抽动采血针内芯,采取血液。
一般采3毫升即可,采血完毕,拔出针头,采血部位用酒精棉球压迫片刻,采血即告完成。
禽类采血方法
1.常用采血方法有: 1.胫静脉采血法:在胫骨关节附近大腿中段找出中静脉或侧静脉,而以中静脉最易找到。
助手将鸡体侧卧或背卧,并将鸡腿伸直,术者将该处鸡毛沾湿使血管外露即可采血。
这种方法适用于小样品采血,不容易形成血肿。
2.心脏采血法:采血时助手一手将鸡的两翅膀抓住,另一手将鸡腿伸直,最好是平放于平台或桌面上,术者先在左胸部摸到心脏跳动的最强点,左手在左侧将心脏固定住,右手持带有7号针头的注射器进针,进针深度根据鸡的大小和营养状况而定。
如果针尖碰到心脏,针头就会随心脏跳动而跳动,只需稍调整一下则血液户回会自动流进注射器。
其优点是可以大量采血,缺点是对供血动物潜伏着生命危险。
3.枕骨静脉窦采血法:此法可用于禽或水禽,也可以经常采血和给大鹦鹉输血。
动物的头务必与颈保持90度角,术者用大拇指找到第一颈椎骨和颅骨形成的枕骨大孔,针头与颈部呈30一45度角进针。
枕骨静脉窦非常浅表,易于采血,但该法对供血者也潜在一定危险。
2.禽血样的采集家禽包括鸡、鸭、鹅、鸽、鸟等禽类,常用翼下静脉和心脏采血法,前者所采血量一般能够满足检测所需要的量,后一种方法的技术要求比较高,因此禽类翼下静脉采血法是一种比较常用的采血方法。
禽类翼下静脉采血:由助手将禽固定好,并使禽翅膀展开,露出腋窝部,拔去该部羽毛,即可见到由翼根进入腋窝的一条较粗的静脉,这就是翼根静脉。
其远心端有一条较细的静脉,即翼下静脉。
消毒后,术者用左手拇指压迫翼下静脉的近心端,使血管怒张,右手持带6号或7号针头的采血器,由翼根的肌肉处进针,向翅膀方向斜向刺入翼下静脉,即可抽取血液。
抽血时,一定要缓慢、轻柔,否则会使静脉瘪陷而采不出来。
采血完毕,拔出采血针,采血部位以酒精棉按压片刻即可,由于肌肉自身的收缩压迫止血,一般不会出血或者是形成出血性水肿。
此种方法克服了传统由皮肤直接刺向血管,拔出针头后一般都会出血或形成皮下出血性肿胀,这也是一直控绕基层兽医工作者和养殖户之间的难点问题,养殖户普遍认为禽类采血的扑捉就已经造成应激,影响养殖的经济效益,如果再造成出血或出血性水肿,对养殖造成的影响就更大了。
血液样品采集技术要点
2019年第9期(总第364期)畜禽业生产指导血液样品采集技术要点强 瑜1,孙 涛1,周丽梅2(1.铜川市宜君县动物疫病预防控制中心,陕西宜君727200;2.铜川市动物疫病预防控制中心,陕西铜川727000)摘 要:物疫病的防控工作中,实验室监测有着不可取代的重要作用,而样品的采集是实验室监测工作的前提和基础[1]。
规范的样品采集是有效控制动物疫病诊断和监测工作至关重要的一环,关系到实验结果的准确性。
基层实验室检测工作中血清学样品的采集是样品采集中的重点也是难点,浅谈血清学样品采集技术要点。
关键词:血清;样品;采集DOI:10.19567/j.cnki.1008-0414.2019.09.021 血液样品采集一般原则(1)采样应遵循典型、适时、适量、无菌、符合生物统计等原则。
(2)发现疑似炭疽时,禁止采样,可采用耳尖采血涂片镜检,排除炭疽后方可采样。
(3)根据不同的检验要求选择采样部位,采样容器等。
采血部位及方法2.1 鸡翅静脉采血保定人员侧卧保定鸡只,展开翅膀,暴露腋窝处,拔掉羽毛,在翅下静脉处用碘伏做点状螺旋式消毒。
采样人拇指压迫近心端,血管怒张后,将采血器针头平行于血管先行刺破皮肤,后逐渐刺入静脉[2],放松按压,缓缓抽取血液,采血量不少于2mL。
鸡翅静脉游离性较高,尽量不要直接从血管处刺入,可从平行于血管的地方进针,逐渐刺入血管。
2.2 猪前腔静脉采血站立保定操作步骤:用保定绳固定,尽量使猪的头颈与地面呈30°以上角度,头昂起,偏向一侧。
选择颈部最低凹处[3],用碘伏消毒,使针头偏向气管约15°方向下针,回抽见有回血时,采集血液5mL。
仰卧保定操作步骤:把前肢向后方拉直,选取胸骨端与耳基部的连线上胸骨端旁2cm的凹陷处,用碘伏消毒,采血针头刺入消毒部位,针刺方向为向后内方,刺入2~3cm,当进入约2cm时,可一边刺入一边回抽;刺入血管时即可见血液进入采血器内,采血量不少于5mL,拔出针头后用干棉球压迫止血。
动物疫病监测血清的采集方法
一、采样前的准备
(一)器具 1、器具的准备 真空采血管、冷藏箱,酒精棉,剪毛剪。 2、辅助器材的准备 试管架、记号笔、自封袋、采样登记表等。
真空采血管(抗凝剂):可达到快速分离血浆的目的
真空采血管(促凝剂):可以使血清分离快,分离血清多不易 受外界温度的影响。还可以减少溶血现象的发生,真空采血管 内涂有硅酮防止红细胞黏附于试管壁,如果使用普通的试管, 红细胞附于试管壁离心时红细胞碎裂易溶血。
二、采血
(二)羊常用采血部位为颈静脉。
保定人员可根据羊的大小,骑在羊身上进行站立保定,大 羊可以两人保定,一人保定住头部,另一人控制羊后腿, 取真空采血针头采血,待血量达到要求后,拔出针头,用 消毒过的干棉球按压针眼,轻压止血,采血完毕后,及时 做好血样的编号和采样表的填写工作。
二、采血
(三)猪常用采血部位为前腔静脉和耳缘静脉。前腔静脉采血不 同日龄的猪都适用, 15kg 以下可以仰卧保定。耳缘静脉采血 适用于耳缘静脉明显且较粗的猪,多为经产母猪,取真空采 血针头采血,待血量达到要求后,拔出针头,用消毒过的干 棉球按压针眼,轻压止血,采血完毕后,及时做好血样的编 号和采样表的填写工作。 。
动物疫病监测的 血清采样技术
动物疫病监测的意义
调查动物群体中某种疫病或病原的存在情况。
通过监测可以了解动物疫病的流行现状、危害程度、风险
因子和发展趋势,早期识别疫病的爆发和流行。
根据信息来源分为:问卷调查和实验室监测。
实验室监测的关键:样品和检测技术。
动物疫病监测的意义 畜禽采血是疫病采血部位为翼下静脉和心脏。翼下静脉采血根据 鸡的大小进行采集,取真空采血针头采血,待血量达到要求 后,拔出针头,用消毒过的干棉球按压针眼,轻压止血,采 血完毕后,及时做好血样的编号和采样表的填写工作。
家禽血凝试验及血凝抑制试验的操作方法及注意事项
家禽血凝试验及血凝抑制试验的操作方法及注意事项顾晓明【摘要】血凝试验及血凝抑制试验因其简便、快速、准确、实用被广泛应用.但在试验过程中,人为因素的影响很大,常常因为操作不规范等,导致试验结果不准确,甚至失败.因此,要了解试验的操作方法及注意事项,本文结合以往操作经验,简要总结归纳,供读者参考.【期刊名称】《中国畜牧兽医文摘》【年(卷),期】2016(032)008【总页数】2页(P50,97)【关键词】血凝试验;血凝抑制试验;操作方法;注意事项【作者】顾晓明【作者单位】江苏盐城市亭湖区动物卫生监督所,江苏盐城 224002【正文语种】中文血凝试验(Hemagglutination Test,HA)与血凝抑制试验(Hemagglutination Inhibition Test,HI)试验是检测家禽A类疾病(新城疫和禽流感等)的常规方法,也是检测家禽免疫抗体水平一种基本方法。
该方法具有经济、反应迅速可靠、操作简便和可以对抗体水平进行量化的优点,能够处理大量的样品,是一种在基层临床实践中极易推广的检验检疫手段与诊断方法[1]。
但试验结果受操作技术的影响很大,因此,试验时必须细心,保证试验的精准性。
采血在血清学检测和实验研究中是一项前提性工作,采血质量的好坏,直接影响能不能进行实验和判定实验结果[2]。
采血时,采血者除认真做好自身防护工作,采血设备需经消毒干燥,做到无菌采样。
分离血清的血液,试管要静置、斜放,便于血清析出。
温度在23℃以上时,血样在2 h内即可析出清亮的血清。
若温度为10℃左右的时候,最好立即放入37℃培养箱中孵育2~3 h。
在送样过程中,血样不可剧烈摇晃以免溶血,送至实验室后要立即分离血清,不能立即分离的血样要及时冷藏。
如血清样品有溶血、胶冻样现象出现时应弃去。
家禽中,除鸡外,有些禽(如水禽、鸽子)血清可能对鸡红细胞产生非特异性的凝集,造成假阳性反应。
可用待检血清做血凝试验,如果待检血清出现凝集红细胞的现象,则说明有非特异凝集素存在,需用鸡红细胞进行吸附。
牛血液采集及血清分离技术
牛血液采集及血清分离技术李强【摘要】各级畜牧兽医部门对牛采血及血清分离工作日趋频繁,但随着数量的增加,失败现象也日渐增多,从而导致养殖户反感,工作成本增加.因此,笔者根据自己20多年在此方面的一些体会,提出一些新的方法,以便提高工作效率.借鉴人用医学方面的技术,利用近年出现的一次性真空采血器和一次性注射器以及常规动物采血技术与离心分离技术等相结合的方法进行血清分离.采血及血清分离成功率100%.【期刊名称】《中国牛业科学》【年(卷),期】2013(039)003【总页数】3页(P80-82)【关键词】畜禽;血液采集技术;血清分离技术;体会【作者】李强【作者单位】甘肃省张掖市甘州区动物疫病预防控制中心,甘肃张掖734000;国家肉牛产业技术体系张掖综合试验站,甘肃张掖734000【正文语种】中文【中图分类】S851.34近年来各级畜牧兽医部门,每年都需要对畜禽进行采血及血清分离的工作,数量逐年增多且日趋频繁,如血常规检查、血片制作、红细胞泥采集分离、病原学检查,尤其是一年数次的抗体(免疫抗体、感染抗体)监测及范围广泛的布鲁氏杆菌病检疫监测等。
在工作中发现,有的技术人员在采血及分离血清时,时常有失败现象发生,如溶血、分离不出血清、血清如胶冻样物质及腐败等情况,这导致反复采血而引起养殖场户的反感、不配合甚至拒绝,也造成人财物的浪费,为此,笔者现将畜禽采血及血清分离技术等方面的一些做法与大家探讨。
1 材料准备保定用牛缰绳、麻绳、牛鼻钳,医用镊子、止血钳、医用胶贴、医用止血带、剪毛剪,微量移液器、移液头,70%~75%酒精、5%~10%碘酊、灭菌干棉球,消毒18#、16#、12#及9#针头,采血管或洁净干燥的青霉素瓶、一次性静脉采血真空管及针头、一次性注射器,工作服、帽、口罩、一次性手套、胶鞋、鞋套,采血登记表(见表1)、记录用笔、玻璃铅笔及冷藏箱、消毒液(用于工作人员及器械消毒)等。
表1 采血登记表年月日2 牛的采血技术2.1 牛血液采集技术2.1.1 颈静脉采血法穿戴好工作服、帽、口罩、胶鞋及手套等,用缰绳保定好牛,如牛跳动不安,需要夹上牛鼻钳;采血部位:其解剖位置为牛颈静脉沟;采血部位先用剪毛剪剪毛后,用10%碘酊棉球消毒,再以75%酒精棉球脱碘消毒;如在颈部左侧采血(以左侧为例),用左手的食指、中指及无名指(或半握拳)压住采血部位稍下(向心)端的颈静脉,使静脉回流受阻,静脉怒张,这时用右手拇指、食指及中指持紧消毒后并干燥的18#针头,用飞针方式扎入颈静脉(如用真空采血方法,因针头尖锐且较细,轻轻即可刺入颈静脉,当针头后方见血后,应迅速将连接针头的另一端插入真空管),血液便可从针头流出(或滴出),助手迅速递上已编号的采血管,接血时采血管应稍倾斜,使血液沿管壁徐徐流入采血管中,切勿使血液直接滴入采血管底部,以免产生气泡和因红细胞破裂而引起溶血。
采血后血液刚凝固
鸡血清分离技巧
采血后血液刚凝固,纤维蛋白原已经变成纤维蛋白并完全析出,再放上一段时间,纤维蛋白完全收缩后,上层就是清亮的血清。
血刚抽出来,收缩不完全就离心,血清则呈胶冻状,而且由于离心使红细胞、活化的血小板离开了纤维蛋白网,缺乏磷脂表面,胶冻状的纤维蛋白将再也无法收缩。
采血后要多放一段时间,待纤维蛋白收缩后,再离心,上层就是清亮的血清了。
我在采鸡血取血清的时候,也偶尔会碰到这种情况。
后面用了一个处理方法,就是采集后让血自然凝集,并在37度放置一段时间,析出部分血清以后再转移到4度冰箱,这样得到的血清比较多也比较好。
大家可以试下。
胶冻样我觉得可能是脂肪血,人或者动物营养好,血液粘度比较大造成的吧,反正我要是需要采鸡血,则会断其食物,多喂水,析出来的血清一般都比较的好。
关于血清的一些问题解读
关于血清的一些问题解读实验室里常会遇到的关于血清的问题1.血清的运用领域血清:离体的血液凝固之后,经血凝块聚缩释出的液体,即血清。
血清可以抗病毒,增强抵抗力血清属于生物制剂.小牛血清含在离开母体后自身产生的一些代谢物质,当然也包括一些生长激素,而胎牛血清绝大部分的物质来自于母体。
血液凝固析出的淡黄色透明液体。
如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。
凝血块收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。
在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆最大的区别。
而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。
这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。
这些也都是与血浆区别之处。
但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。
为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。
血清(serum)细胞培养的发展,培养基的质量又是关键,而培养基的主要成份中动物血清对细胞的生长繁殖发挥着重要甚至是难以替代的作用。
在动物血清的应用中牛血清又是最为广泛的,所以血清是医药生物技术产品中重要的原材料之一。
保证血清质量也是促进生物制品质量提高的重要环节。
1.血清种类:目前用于组织培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。
选择用牛血清培养细胞的原因:来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人们对其有比较深入的理解。
牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。
牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能。
牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。
胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
微量血凝及血凝抑制试验在实际操作中关键点解析
微量血凝及血凝抑制试验在实际操作中关键点解析作者:张瑜张庆霞吴娟来源:《兽医导刊》 2016年第4期张瑜张庆霞/ 北京信得威特科技有限公司吴娟/ 北京市通州区农业局在兽医免疫学实验中,血凝试验(HA)主要用来测定抗原的血凝价以及是否存在血凝性抗原,血凝抑制试验(HI)则作为一种抗体监测技术,广泛应用于兽医实验室监测、兽医门诊、大中型养禽场。
在实际应用中,HA 和HI 试验可用于病毒分离、鉴定、分型,检测抗原抗体、免疫鉴定等等,例如:养禽场常常将禽流感、新城疫、减蛋综合症等疫苗免疫后的抗体水平,作为衡量免疫程序是否合理的依据。
尽管此法操作简便、快速、准确、实用,但在实践中也常常由于某些因素的影响,从而使试验结果不精确,有时甚至无法判定结果。
本文主要对HA 和HI 在实际操作中的关键点进行阐述。
一、材料的准备及仪器校准HA 和HI 试验中用到的枪头、EP 管、采血管、PBS 必须全部高压灭菌。
注射器必须是新开封,PBS 必须在高压之前标定PH=7.2,单枪、排枪必须校准,确定刻度准确。
可重复使用的聚苯乙烯有机玻璃板购买时要注意底角是否为90 度,底面是否光滑,清洁,如果不清洁,清洗后可用棉签蘸酒精把孔底擦干净。
有机玻璃血凝板的好处是可以叠放,在做大批量检测实验时节省空间。
如使用一次性凝集板,要求试验前检查凝集板,剔除有漏洞、形状不规则、板面有褶皱、有接口、板面和板孔不干净、不光滑的凝集板。
微量移液器型号的选择、吸嘴的安装不当以及取样时吸嘴外壁是否粘有液体,都会造成移液不准,最终影响试验结果。
微量震荡器使用时应注意震动不宜过大,时间不能太长,一般震动10 秒钟即可。
多块板同时振动时要注意压住上板,以防液体溅出而影响结果。
二、缓冲体系的配置所用pH7.2、0.01 mol/L PBS缓冲液尽量现用现配,以免因PBS 缓冲液配制时间过长、pH 值发生变化,使检测结果不准确。
一般情况下PBS 配好后不需调节PH值,配好后高压灭菌,冷藏保存备用。
收集血清相关问题
如果是需要血清,采血后室温放置30-40min,然后全血离心,一般用4℃/ 4000 r离心,10min 就够了我们经常要采很多大鼠的血,一般我们用1万rpm离心3min,这样快,析出血清也比较清亮。
胶冻状物质在进食后采血容易发生。
一般给老鼠空腹采血。
针对你的问题,我的建议是:1. 一般常温下至少放置30 min~2 h左右(已有足量血清析出),而4度也可过夜充分析出血清;2. 是等血清析出后,直接对含有的血清的全血进行离心;3. 离心的转速一般根据离心机的大小,主要是转孔到中轴的距离大小。
一般3000 r/min*10min即可。
你也可以与实验室以前的方法统一,每次不同组别用同样的转速和时间。
请问常温离心可以吗?常温离心可以,最好的办法是4度放置过夜后再离心,原因是大鼠血清在2小时内并不能完全析出,获得的血清量可能只有总体积的1/4左右,而过夜后可以达到1/3。
离心时间,4000-5000转/分,5分钟。
为什么常温离心后有时候上清液是一团胶冻状的物质,无法从中吸取血清呢?我是室温放置半小时以上后开始离心的,转速3000r/min, 10min。
只是有时候呈胶冻状,多数时候不是,实在不理解!盼有高人指点!同样问题!原因有很多,例如抽血过程时间太长,过快都会造成这样的问题foxer wrote:为什么常温离心后有时候上清液是一团胶冻状的物质,无法从中吸取血清呢?我是室温放置半小时以上后开始离心的,转速3000r/min, 10min。
只是有时候呈胶冻状,多数时候不是,实在不理解!盼有高人指点!我个人认为,这种胶冻状的物质可能是胶原蛋白或者纤维蛋白原,是在血液凝固过程中形成的。
同时,血液凝固时,会逐步释出血清,因此,有些时候就会在血清中掺杂着这种胶冻状的物质。
不仅给分装工作造成麻烦,而且也影响日后检测时血样的真实体积,所以在分装血清样品时,可以先用枪头小心将胶冻状的物质挑去,然后开始吸取血清样品分装。
24085372_凝胶状血清检测样本的预防及处理方法
浙江畜牧兽医2021年第3期和我国南方,有主张对蓝耳病免疫。
对支原体、放线杆菌(APP),可用支原净,支原净已证明可以控制猪血痢、传染性胸膜肺炎、支原体肺炎,也可以减轻蓝耳病的病性。
将支原净加在后备母猪配种前45d、母猪产前7d至产后7d、断奶后4周、育肥猪14-15和17-18周龄的饲料中。
所用剂量为100ppm支原净+300ppm金霉素。
13 断奶后母猪发情推迟是什么原因?断奶后母猪发情推迟的原因主要是由于营养状况不良引起的。
如果临产前母猪体重为170kg,断奶时变为110kg,则20%断奶后4-5d发情,20%断奶后7-10d发情,60%不发情或看不出发情。
即使怀孕的母猪平均产仔数仅为7.8-8.5头。
如果临产前母猪体重为170kg,断奶时变为140kg,则80%断奶后4-5d发情;20%断奶7-10d发情。
怀孕后的平均产仔数可达9.2-11头。
14 夏季母猪产仔猪时子宫收缩无力,常出现死胎,是什么原因?引起的死胎可能是由病毒感染或母猪缺钙引起的。
因为母猪夏天温度高时吃饲料少。
钙摄入量不足。
可在母猪产前7d注射维生素AD3E。
并在产前10d开始,在饲料中加入磷酸二氢钙。
VA使子宫粘膜更健康;VD3帮助母猪吸收钙;VE帮助母猪增加激素,加速下次发情。
15 初产母猪断奶后发情率低,怎样预防?通过后备母猪群的管理来选留优良的后备母猪。
后备母猪应在8月龄左右,体重控制在120-130kg,常在第2次或第3次发情时配种。
过早或过迟均会影响到母猪的繁殖力和使用年限。
配种时,猪应为3号体型。
头胎母猪,不能携带多于9头哺乳仔猪。
另外,仔猪断奶期应在25d左右为佳,不能过长,否则直接影响下次发情时间。
通过怀孕母猪饲喂管理,控制母猪在分娩时的体型。
断奶当日,可停止喂料,提供充足饮水,有利于乳房萎缩,刺激母猪尽快发情,且同时增加母猪断奶后采食量。
断奶后的母猪,应增加日喂量,日喂3 0-3 5kg。
断奶后7d内没有发情的猪,集中放入栏内群饲,每天放1头性欲旺盛的公猪进去,刺激发情。
一例关于罕见胶冻状血清的病例解析
一例关于罕见胶冻状血清的病例解析基层检验网案例(第二期)前言检验与临床在疾病的诊治中既有分工又有合作,我们检验人比临床医生更容易掌握实验室的第一手资料,如果我们检验人能够在日常工作中发现问题,顺着蛛丝马迹,找答案,积极与临床医生护士沟通,对进一步的检查提出建议,不仅病人得到了尽早的诊断,及时的治疗,我们自己也很有成就感。
案例经过18年10月30日上午,笔者做标本的时候发现一个标本的结果极低,怀疑未吸到样本,查看病人标本发现血清成果冻样凝集。
遇到这样的标本,笔者首考虑的是现在温度低,采血后孵育时间短,血液凝固的不好,血清未析出。
笔者用竹签轻轻扎破果冻样血清,37摄氏度孵育10min,摇匀后离心,然而奇怪的的是离心后的标本还是果冻状,这就让人百思不得其解了。
于是笔者上网查询相关资料后发现,这种罕见的血液外观常见于下面三种情况:1、环境温度过低会影响血清析出;2、病人可能是肾病的病人,肾透前后;3、浆细胞系统疾病如:巨球蛋白血症、多发性骨髓瘤、及冷凝集综合症……;第一种情况基本可以排除了,因为笔者已经孵育,重新离心过;查看患者病历,并没有肾病,因此第二种情况也可以排除;那么极有可能是第三种情况。
为了验证笔者的猜测,笔者通知临床采一支肝素抗凝的血做总蛋白、白蛋白、球蛋白检测,结果如下:同时查看患者其他结果发现:患者贫血,血沉极快,尿蛋白阳性,总蛋白升高,白蛋白降低,球蛋白升高明显。
结合这些结果,极有可能是多发性骨髓瘤。
于是笔者立马联系临床医生,告诉他自己的猜测,并建议做骨髓穿刺。
第二日,患者做骨髓检测,骨髓象:有核细胞增生活跃,桨细胞明显增多,占17%有核细胞,以成熟浆细胞为主,但幼稚浆细胞、双核或多核浆细胞多见,提示骨髓瘤。
分析心得♦♦♦一、生化血清成果冻状大概有3大类原因:1.血液静置的时间过短,血没完全凝好;2.病人可能是肾病的病人,肾透前后;3.浆细胞系统疾病如:巨球蛋白血症、多发性骨髓瘤、及冷凝集综合症……;二、贫血,血清钙离子升高,尿蛋白阳性,总蛋白升高,白蛋白降低,球蛋白升高明显,有可能是多发性骨髓瘤。
血清制备的影响因素
血清制备的影响因素王荣华【期刊名称】《中国畜牧业》【年(卷),期】2016(000)005【总页数】1页(P50)【作者】王荣华【作者单位】河南省博爱县动物疫病预防控制中心【正文语种】中文血清学检测是诊断动物疫病、评价重大动物疫病强制免疫效果的重要手段,足量、合格的血清是保证血清学检测成功的基本条件。
血清的制备受多种因素的影响,现对各种影响因素进行探讨。
1.种类。
血清样品异常有多种情况:血清有析出,但呈胶冻样;血清有析出,但伴随溶血现象;无血清析出;血清中有沉淀。
2.原因。
(1)血清呈胶冻样的原因。
畜禽在刚采食后不久进行采血;采血后静置时间太短即进行离心;采血动物营养过剩,形成脂血。
(2)出现溶血的原因。
采血部位消毒液未干即开始采血;采血用注射器未干燥,内壁湿润;采血后未经静置即运送,送检时样品发生剧烈震动;采血后由注射器转入离心管时,未取下针头即快速转移血液。
(3)无血清析出的原因。
全血量过少;采血时注射器活塞没有往后拉留出空间致血清无法析出。
(4)血清中有沉淀的原因。
血清置37℃下时间太长;血清由室温转入-20℃或由-20℃转入室温时,未经过冷藏并摇匀处理;血清在高于60℃环境下时,球蛋白和白蛋白出现凝结。
1.采血环节的影响。
(1)采血部位。
猪采血部位可选择前腔静脉和耳静脉。
但大批量采血时宜选择前腔静脉。
禽采血部位可选择翅膀内侧腋下静脉和心脏。
一般选择翅膀内侧腋下静脉采血。
在对淘汰禽检测或技能竞赛时多选择心脏采血法。
牛采血部位可选择颈静脉和尾根静脉。
奶牛等宜选用尾根静脉采血。
羊采血部位在颈侧静脉。
(2)采血针头。
猪前腔静脉采血时因猪大小不同选用不同的针头,体重≤10千克的乳猪宜用9×20毫米针头,10千克<体重≤30千克的保育猪宜用9×25毫米针头,体重>30千克的育肥猪宜用12×38毫米针头,对种公母猪采血宜用16×50毫米针头。
猪耳静脉采血宜用7号针头。
动物疫病重在防——血清学检测在动物疫病防控中的应用
动物疫病重在防——血清学检测在动物疫病防控中的应用王建芳;裴莉贞;陈李岩【期刊名称】《中国动物保健》【年(卷),期】2011(013)003【总页数】3页(P1-3)【作者】王建芳;裴莉贞;陈李岩【作者单位】山西省长治市畜牧兽医局,山西长治,046000;山西省长治市畜牧兽医局,山西长治,046000;山西省长治市畜牧兽医局,山西长治,046000【正文语种】中文目前,畜牧产业正面临着转型跨越发展的新阶段,养殖业也要向专业化、科学化方向转变,伴随着集约化养殖程度的不断提高,疾病的感染压力也越来越大,疫病仍是制约我国养殖业发展的重要因素。
近年来由于动物重大疫病频频流行,广大养殖者对疫病防控加深了认识,政府加大了疫病防控力度,但是疾病感染的形势更加复杂化,大多疾病由多病原混合感染、多重感染;温和型、非典型病变不断增多、新病原或新病原型/亚型不断出现;持续感染与潜伏感染时常发生,真是旧病未除又添新病,动物临床表现和病理剖检又呈非典型性,给疾病的诊断和控制带来新的更大困难,单凭临床经验和动物剖检很难解决问题。
必须借助实验室诊断技术才能确诊,从根本上解决问题。
然而,我们仍有很多养殖场平时不注重疫病监测、不关注疫情动态,等疫情流行蔓涎开来造成损失才进行实验室诊断,采取措施扑灭疫情,我们谁也不愿付出这样惨痛的代价,我们应该积极主动地寻求得力的方法,预防疾病的发生,目的就是要提高养殖效益。
1 血清学检测目的1.1 免疫评估监测免疫效果利用血清学试验,监测动物免疫效果是预防动物疫病的重要手段,通过免疫抗体监测,可得知畜群免疫抗体水平和疫苗质量、疫苗接种方案的效果,从而达到判定选用的疫苗是否质量可靠、免疫方式是否确凿有效、免疫程序是否合理等目的。
通过综合评估分析,可提醒广大养殖业者对养殖过程中存在某些隐患引起注意,并采取有效防范措施。
修订免疫程序到目前为止,有不少养殖场户的免疫程序是借鉴别人的,因不同地区,不同动物群体,显然存在差异,并非适用本场户。
采血管中血液促凝剂的作用
促凝剂与纤维蛋白析出之间的故事血清是临床生化、免疫等试验检测的主要标本之一。
目前医疗机构获取血清标本的手段主要是通过采集静脉血液后,待血液完全凝固后离心分离而得。
正常情况下,离体后的血液标本需要60分钟以上才能完全凝固,甚至不凝固,难以满足实验室快速检测的需求。
因此缩短凝血过程、快速分离血清标本,是提高检验医学工作效率的重要因素。
促凝剂就由此而生了。
血液促凝剂的促凝原理:激活血浆中和血小板中的部分凝血因子,促进凝血活酶和纤维蛋白凝块的生成过程,加速血球凝块的收缩,达到快速分离血清的目的。
含有促凝剂的真空采血管,有时会出现纤维蛋白析出的丝状物、块状物,是因为没有规范化使用促凝采血管所致。
在制备真空采血管选择凝血速度过快的促凝剂会导致纤维蛋白收缩过快而脆弱的红细胞易碎裂引起轻度溶血。
一般纤维蛋白的析出有下列原因:使用促凝采血管或者分离胶促凝采血管,要使促凝剂均匀地分布于血液中,必须轻微颠倒混合4~5次,使采血管的中央与周围的血液同时凝固。
如果血液没有完全凝固好即离心,可造成纤维蛋白的析出。
血清上部出现胶冻样、碎块样,与血液混杂在一起。
纤维蛋白丝状物是纤维蛋白还没有收缩完全所致。
其次,采血管公司在制备促凝剂采血管时,促凝剂喷涂不足或者配好的水溶性促凝剂当天没有用完,次日继续使用而导致促凝剂效力降低。
血液中纤维蛋白原在促凝剂的作用下逐渐转变为不溶性纤维蛋白,如果促凝剂量不足或失效而延长了凝血时间,此时离心可导致纤维蛋白的析出。
如何防止真空采血管纤维蛋白的析出1、制备促凝剂真空采血管时要定量喷涂促凝剂,在小于45℃条件下吹干;如果高于50℃,促凝剂效力有下降的可能。
2、用蒸馏水配制的促凝剂或用无水乙醇配制要有规范的质量管理,定量喷涂促凝剂。
3、透析患者的血液要使用含有中和肝素促凝管分离血清,才能正确分离出高质量血清标本。
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关于血清胶冻样
采血后放置的时间太短,血液没有完全分层就做离心处理的原因, 血刚抽出来,收缩不完全就离心,血清则呈胶冻状,而且由于离心使红细胞、活化的血小板离开了纤维蛋白网,缺乏磷脂表面,胶冻状的纤维蛋白将再也无法收缩。采血后要多放一段时间,待纤维蛋白收缩后,再离心,上层就是清亮的血清了。
很简单,用一次性注射器针头在里面来回搅拌几次就可以了
血液从人体抽出时间放置太短,纤维蛋白没有析出,所以会变成胶冻状,只要放置一定时间后离心或者直接用促凝管离心,就不会出现这种情况了。
我们实验室采的是鱼血,也是最近的鱼血清有这样的情况出现.我们都是取血之后放置4度过夜,然后低温离心,得到的血清一直没有问题,最近这几次采血得到血清不久血清就成冻胶状了,用也用不了,我们的鱼采血前一直没有喂食,为啥会这样呢?
采血后要多放一段时间再离心,血清呈胶冻状估计是纤维蛋白原还没有完全析出,我是做检验的,就象人的血刚抽出来离心也很困难,在37度放上一段时间,再离心,纤维蛋白原收缩后,上层就是清亮的血清了。
我现在同意你的做法了。。因为我也遇到了 哈哈哈 时间 就是时间 和温度 就是凝血的程度。凝血的程度不够就会胶冻。。哈哈哈
我们以前经常是37度温箱半个小时,然后放4度冰箱,时间越长血清量越好(过夜),我碰到过在低温情况下凝固后有胶冻样的血清存在。
这种胶冻状的物质是胶原蛋白或者纤维蛋白原,在血液凝固过程中形成的。可以用枪头将胶冻状的物质挑去,然后吸取血清样品。一般进食后采血容出的血清一般不会出现这种情况,使用抗凝剂的很容易出现,抗凝剂抗凝得到的血浆可以加适量的氯化钙温育一下再离心就可以去除其中的纤维蛋白原和纤维蛋白!