麻疹风疹联合减毒活疫苗生产过程中的无菌操作与无菌灌装
微生物的无菌操作及接种
202X
2、常用的接种方法
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连续划 ※划线 线法 接种
2、常用的接种方法
用接种针从菌种斜面上挑取少量菌体并把它穿刺到固体或半固体的深层培养基中的接种方法。
○ 用于厌气性细菌培养、检查细菌的运动能力、保藏菌种。 ○ 只适宜于细菌和酵母的接种培养
穿刺接种
2、常用的接种 方法
穿刺接种
斜面接种
三．接种：
四．接种:
○ 在火焰旁迅速将沾有菌种的接种环伸入待接斜面管。 从斜面培养基底部向上作“Z”形来回密集划线，勿划 破培养基。
○ 有时也可用接种针仅在斜面培养基的中央拉一条直线 作斜面接种，直线接种可观察不同菌种的生长特点。
斜面接种
3）接种：
七．塞管塞： 取出接种环，灼烧试管口，并在火焰旁将管塞旋上。不要用试管去迎 棉塞，以免试管在移动时纳入不洁空气。
殖动态。
无菌环境 的要求与 保持
2、超净工作台
超净工作台是为实验 室工作提供无菌操作 环境的设施，以保护 实验免受外部环境的 影响，同时为外部环 境提供某些程度的保 护以防污染并保护操 作者。
原理：超净工作台的 洁净环境是在特定的 空间内，洁净空气(进 滤空气)按设定的方向 流动而形成的。以气 流方向来分，现有的 超净工作台可分为垂 直式，由内向外式以 及侧向式。
八
七
六
五四
三
二一
接 穿 透 培 养 基 ？
． 穿 刺 接 种 时 能 否
放 ？
． 种 时
，
为
何
要
尽
包 括 哪 些 内 容 ？
． 验 操 作 过 程 的 无
备 工 作 ？
． 进 入 无 菌
室
2021消毒技术(中级)-相关专业知识(精选试题)
消毒技术（中级）-相关专业知识1、育龄期妇女，既往体健，实验室检查确定该女性风疹病毒抗体阴性，为预防怀孕期间感染风疹病毒，应在孕前几个月接种该疫苗（我国生产的风疹疫苗为减毒活疫苗）？（）A.3个月B.5个月C.2个月D.1个月E.6个月2、百日咳杆菌主要感染的途径是（）。
A.飞沫，空气，呼吸道B.一般社交接触，公共设施C.食物，水，消化道D.动物所致创伤E.接受血液或血液制品3、肾出血热综合征最基本的病理损伤部位是（）。
A.毛细血管B.小血管C.内脏D.大血管E.皮肤4、不属于我国肺结核疫情特点的是（）。
A.高感染率B.高病死率C.高死亡率D.高患病率E.低递减率5、可使有些患者皮肤出现玫瑰疹可能感染的细菌是（）。
A.ETECB.EPECC.伤寒沙门菌D.志贺菌E.假结核耶尔森菌6、O1群霍乱弧菌是霍乱的病原菌，自患者新分离的O1群霍乱弧菌的形态特征为（）。
A.革兰阳性短小稍弯曲的杆菌，无芽胞，无荚膜，有周身鞭毛B.革兰阳性短小稍弯曲的杆菌，无芽胞，有荚膜，有一根单端鞭毛C.革兰阴性短小稍弯曲的杆菌，无芽胞，无荚膜，有一根单端鞭毛D.革兰阴性短小稍弯曲的杆菌，无芽胞，有荚膜，有一根单端鞭毛E.革兰阴性短小稍弯曲的杆菌，无芽胞，无荚膜，无单端鞭毛7、我国沿海地区引起食物中毒最常见的病原菌是（）。
A.副溶血弧菌B.金黄色葡萄球菌C.产气荚膜梭菌D.蜡样芽胞杆菌E.霍乱弧菌8、分枝杆菌属内对人及动物致结核病的病原菌组是（）。
A.结核分枝杆菌，猿分枝杆菌B.堪萨斯分枝杆菌，牛分枝杆菌C.结核分枝杆菌，牛分枝杆菌D.龟分枝杆菌，牛分枝杆菌E.结核分枝杆菌，偶发分枝杆菌9、流感病毒最易发生变异的结构是（）。
A.核糖核蛋白B.膜蛋白（M蛋白）C.甲型流感病毒的血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）D.乙型流感病毒的血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）E.丙型流感病毒的血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）10、不能传播细菌性痢疾的是（）。
医药之大作业题答案-1
1、以下哪一位科学家所提出的侧链思想是现代药物靶点理论的雏形？（）A、发明百浪多息的Gerhard DomagkB、发明氟哌啶醇和芬太尼的Paul JanssenC、发明胂凡纳明的Paul EhrlichD、发明普萘洛尔和西咪替丁的James Black2、以下关于靶点的说法，不正确的是（）。
A、靶点理论是现代药物发现的基础B、靶点理论建立在通过表型发现药物的基础之上C、细胞因子也可以成为药物作用的靶点D、靶点的可成药性druggability是靶点验证的关键所在3、以下不属于靶点药物发现的案例是（）。
A、通过费城染色体易位机制发现了伊马替尼B、通过缓解牙痛现象发现了乙酰水杨酸C、通过EGFR活化突变机制发现了吉非替尼D、通过NS5B机制发现了索非布韦4、以下不属于药物靶点的是（）。
A、多巴胺受体B、五羟色胺重摄取转运体C、阿米巴原虫D、四氢蝶酸合成酶7、第二代抗肿瘤药物伊马替尼的研究假设是（）。
A、费城染色体畸变B、肿瘤血管新生C、EGFR水平表达过高D、p53抑癌基因失活8、对于药物靶点的要求，不正确的是（）。
A、药物靶点所在信号通路必须疾病具有关键影响B、药物靶点对于所在信号通路的功能必须具有关键作用C、药物靶点在结构上必须有口袋与药物发生结合D、药物靶点是对疾病与药物之间关系的简化9、以下哪一个分子属于卡培他滨的活性药物形式？（）A、尿酸B、氟尿嘧啶C、腺嘌呤D、硫唑嘌呤10、毒蕈碱型乙酰胆碱受体属于（）。
A、配基门控离子通道受体B、G蛋白偶联受体C、核受体D、酪氨酸激酶受体11、单胺氧化酶B的底物是（）。
A、五羟色胺B、去甲肾上腺素C、多巴胺D、谷氨酸12、平喘药物克伦特罗又名瘦肉精，属于β2肾上腺素受体的（）。
A、激动剂B、拮抗剂C、反向激动剂D、变构调节剂13、以下不适合作为药物靶点的有？（）A、组胺受体B、二氢叶酸还原酶C、肿瘤坏死因子D、以上均可作为药物靶点14、关于Druggability的说法，以下说法正确的是（）。
灭活疫苗包装工艺流程
灭活疫苗包装工艺流程
灭活疫苗包装工艺流程：
1.西林瓶的清洗和消毒：使用国产化设备进行清洗和高温消毒，确保西林瓶无菌。
2.灌装：在无菌车间内，使用自动化设备将灭活疫苗半成品灌装到西林瓶中。
3.预充式注射器的处理：预充式注射器为无菌产品，从拆包装开始都在无菌环境中进行，由机器人操作。
在针筒内灌入半成品后，机器会在针筒内加塞密封。
4.灯光检测：工作人员对西林瓶装疫苗进行灯光检测，以挑出不合格产品。
5.包装：合格产品进入包装线，说明书、药品追溯码、包装盒等都是依靠机器完成，人工负责一些辅助工作，如处理外包装粘连、疫苗瓶倾倒等问题。
6.大包装和存储：完成中包装的疫苗最后会被机器打成大包装，然后送往库房，准备发货。
疫苗生产流程
疫苗生产项目简介
2、圆弧转角； 、圆弧转角；
疫苗生产项目简介
3、单圆弧收边； 、单圆弧收边；
疫苗生产项目简介
4、可调式地轨+PVC地面； 、可调式地轨 地面； 地面
44 75
疫苗生产项目简介
5、双层玻璃观察窗； 、双层玻璃观察窗；
疫苗生产项目简介
6、暗架龙骨吊顶； 、暗架龙骨吊顶；
C
A
A B B
疫苗生产项目简介
3、设计中要把节约和合理利用能源放在重要 位置加以考虑。积极采用节能措施， 位置加以考虑。积极采用节能措施，尽量选用 节能工艺和设备，充分利用地下资源， 节能工艺和设备，充分利用地下资源，搞好水 的循环利 用。 设计中要精打细算， 4、 设计中要精打细算，把有限的资金用在关 键设备上，使资金使用更加合理化。 键设备上，使资金使用更加合理化。 5、严格按照国家环保法和有关文件精神搞好 “三废”治理和职业安全卫生设计工作。 三废”治理和职业安全卫生设计工作。
疫苗生产项目简介 生产过程举例１ 一. 生产过程举例１：
发酵
纯化Ⅰ
纯化Ⅱ
灭活吸附
疫苗生产项目简介 二、生产过程举例２： 生产过程举例２
发 酵
安全/抑制有效病原体
收集/灭活
安全/尤其产生不稳定病毒
加 工
去除杂质及所需产物特性相近 的外来物质 在辅助剂帮助下完成对大疫苗颗粒 的灭菌过滤滤
配制和灌装
疫苗生产项目简介
疫苗生产项目简介
• 3、细胞培养法 • 不同的病毒选用相应的敏感细胞，采用转瓶培养 不同的病毒选用相应的敏感细胞， •
、多层培养、微载体培养或悬浮搅拌培养等方法, 多层培养、微载体培养或悬浮搅拌培养等方法, 先大量增殖细胞，然后接种一定量的病毒, 先大量增殖细胞，然后接种一定量的病毒,继续培 养适当时间时，冻融细胞后，离心收获上清。 养适当时间时，冻融细胞后，离心收获上清。 以上病毒大量生产后可制作病毒疫苗（ 以上病毒大量生产后可制作病毒疫苗（死疫苗或 减毒活疫苗）， ），也可用来作干扰素诱生剂或提取 减毒活疫苗），也可用来作干扰素诱生剂或提取 病毒表面抗原成分。 病毒表面抗原成分。
疫苗生产流程(PPT53页)
疫苗生产项目简介
• 生产过程举例１：
发酵
纯化Ⅰ
纯化Ⅱ
灭活吸附
疫苗生产项目简介 二、生产过程举例２：
发酵 收集/灭活
加工
配制和灌装
安全/抑制有效病原体
安全/尤其产生不稳定病毒
去除杂质及所需产物特性相近 的外来物质
在辅助剂帮助下完成对大疫苗颗粒 的灭菌过滤滤
疫苗生产项目简介
• 无论一种疫苗在试验阶段是多么有效
疫苗生产项目简介
当我们拿到一个工程项目时，首先要做 的就是明确设计的依据，这个依据应该 包括：工艺技术、设备及公用辅助设施 等有关基础资料、生产规模、生产方式 、生产班制, 国家及行业主要有关规范和 规定等，只有有了这些依据，我们下一 步的工作才能做到有的放矢。然后就是 确定工程范围，明确我们要做的工作。
疫苗生产项目简介
• 经过机组处理过的洁净空气通过风管送到
各个洁净区域，再经过高效过滤器送到室 内，这与普通的空调送风没有太大的区别 ，不同之处在于疫苗生产车间有消毒杀菌 的需求，是生产过程中的重要一环，所以 选择一个好的杀菌方式是相当重要的，目 前常用的就是用外置臭氧发生器消毒，可 以满足一般的消毒杀菌的要求，但对于部 分有防爆要求的全新风房间，怎要根据具 体的情况选择合适的杀菌方式。
疫苗生产项目简介
生物医药厂房建筑必须针对生物医药工程存在的气溶胶泄露的 可能发生环节进行全面考虑，在产生安全隐患的地方进行彻底的 密封处理。生物医药厂房的维护结构的密封性能和平整度性能主 要体现在以下几个方面：
1、双圆弧天轨；
疫苗生产项目简介
2、圆弧转角；
疫苗生产项目简介
3、单圆弧收边；
疫苗生产项目简介
疫苗生产项目简介
疫苗生产实验方法
疫苗生产实验方法实验一生产用毒种制备一、实验目的1.掌握血凝（HA）实验的原理。
2.掌握病毒HA效价测定方法。
3.熟悉无菌操作采集尿囊液方法3.了解常用的生产用毒种的制备方法。
二、实验用品1.器具：照蛋器、鸡胚孵化箱、超净台、注射器、EP管、微量移液器、枪头、小烧杯、离心机、离心管、培养皿、96孔反应板、恒温箱等。
2.试剂：生理盐水、1%鸡红细胞悬液。
3.实验材料：9日龄鸡胚、未免疫过的鸡、新城疫种毒三、实验内容1.参加实验的学生领取鸡胚，做好标记。
2.教师讲解实验过程及步骤并演示具体的实验操作技术。
(1)病毒增殖将已分装的种毒用生理盐水作10-3倍稀释，尿囊腔接种10日龄鸡胚，每胚0.lmL。
(2)收集病毒病毒接种后24h，48h，96h分别来检验并记录活死胚情况于表1中，并及时弃去腐败胚。
无菌操作方法釆集48-96h死亡胚及96h活胚的尿囊液，收获前先将鸡胚置于4℃冷冻6-18小时，冷冻后的鸡胚钝端向上，将气室上方卵室用碘伏消毒除去，暴露壳膜，用无菌镊子小心将壳膜从绒毛尿囊膜上撕下，不要损伤绒毛尿囊膜。
用注射器刺入尿囊腔，吸取尿囊液，置低温保存。
可将若干胚液混合后测定血凝实验（HA）效价。
(3)HA效价测定用微量移液器向96孔反应板的第1-12孔各加生理盐水50uL。
用灭菌的生理盐水将收集的鸡新城疫抗原50uL加入第一孔中，反复吹打4-5次后，吸出50uL到第二孔，依次倍比稀释到第11孔，弃去50uL，病毒稀释倍数依次为1:2-1:2048，第12孔不加抗原作为红细胞对照。
用微量移液管向1-12个加1%的鸡红细胞悬液50uL。
置于微量振荡器上，振荡1-2分钟，室温静置15-20分钟后观察结果，记录于表2中。
结果判定：将反应板倾斜为45度角，沉于管底的红细胞沿着斜面向下呈线状流动者，表明红细胞未被或不完全被病毒凝集，如果孔底的红细胞铺平孔底，凝成均匀薄层，倾斜后红细胞不流动，说明红细胞被病毒所凝集。
麻疹疫苗基础知识
本次麻疹疫苗强化免疫活动中，出现以下疑似预防接种异常反应必须进行报告： 发热（腋温≥ 38.5 ℃ ）；局部红肿（直径≥15mm）； 过敏性休克、过敏性皮疹（荨麻疹、大疱型多形性红斑、麻疹猩红热样皮疹）、过敏性紫癜、血小板减少性紫癜、阿瑟氏反应、血管性水肿、其他过敏反应； 晕厥、热性惊厥； 多发性神经炎、臂丛神经炎、癫痫、脑病、脑炎、脑膜炎； 局部化脓性感染（局部脓肿、淋巴管炎、淋巴结炎、蜂窝织炎）、全身化脓性感染（毒血症、败血症、浓毒血症）； 其他不明原因的死亡、严重残疾或器官组织损伤； 心因性反应。
首先出现全身发痒，随之出现局部或全身广泛性的红疹或荨麻疹、水肿等皮肤症状
以后出现胸闷、气急、面色苍白和呼吸困难等，甚至出现喉头水肿、支气管平滑肌痉挛，而导致四肢发冷、脉搏细弱、血压下降
脑节率障碍,发生昏迷等一系列严重症状，如 救治不当可致死亡
临床表现
立即皮下注射1:1000肾上腺素，小儿为0.01ml/kg/次，最大量为0.33ml(1/3支)。如体重不明，用量为2岁以下0.0625ml(1/16支)；2-5岁为0.125ml(1/8支)；5-11岁为0. 25ml(1/4支)；11岁以上为0.33ml(1/3支)。必要时重复注射。注意：如受种者有心脏病史，应请专科临床医生紧急会诊。
（三）接种后工作：
清洁冷藏容器。 使用后一次性注射器及其他医疗废物严格按照《医疗废物处理条例》的规定处理。 镊子、治疗盘等器械按要求灭菌或消毒后备用。 记录疫苗的使用及废弃数量，剩余疫苗按以下要求处理： 废弃已开启的疫苗。 冷藏容器内未打开的疫苗做好标记，放回冰箱保存，下次接种时首先使用。 清理核对接种告知书和预防接种证，及时录入电脑。
（一）过敏性休克
过敏性休克
是由致敏原引起的一种严重的以周围循环衰竭为主要的症侯群。有过敏体质的儿童在接种含有微量鸡胚细胞、小牛血清的麻疹、风疹和乙脑疫苗时可能会发生。属于Ⅰ型变态反应。
灌装岗位标准操作规程
一、目的：建立活疫苗车间灌装岗位操作规程，使其操作规范化。
二、适用范围：活疫苗车间灌装岗位。
三、责任者：灌装岗位操作人员、QA 检查员。
四、正文：1.分装前一天的准备：1.1操作用具：将镊子、止血钳、灌装缓冲罐、分装管包扎后高压灭菌。
1.2无菌服：根据分装人数准备相应无菌服及口罩，放于灭菌箱高压灭菌。
1.3胶塞专用布袋：根据分装指令准备相应数量的布袋，放于灭菌箱高压灭菌。
1.4冻干盘：根据分装指令，准备相应数量的冻干盘，装入净化干热灭菌烘箱进行干热灭菌。
1.5灭菌好的用具、无菌服、胶塞专用布袋、冻干盘转入灌装间并放于指定位置。
1.6设备：分装前一天对联动线进行调试，确保机器正常运行。
1.7准备适量的75%和95%的酒精棉、消毒液。
1.8无菌间灭菌：灌装前一天用臭氧或甲醛熏蒸无菌间，隔三天不生产和换品种时用甲醛熏蒸，其它情况用臭氧熏蒸。
2.分装：2.1依据配苗时间，2名操作员分装前1小时更衣进入无菌间，用0.1%新洁尔灭消毒手及腕部，打开灌装间层流罩，冻干前室层流罩。
2.2将镊子、止血钳、75%和95%的酒精棉、酒精灯放于操作台上。
用75%酒精依次对送瓶轨道、转盘、胶塞振荡斗、接瓶盘等部位擦拭消毒，2.3接分装管：灌装机各部位消毒完毕后按编号将12根分装管接到灌装蠕动泵上，并在泵头与分装管的接触部位加适量硅油。
2.4 洗瓶人员更衣进入洗瓶间后，开启热风循环烘箱预热机器，热风循环烘箱温度达到330℃后开始洗瓶，分装瓶送至灌装机理瓶盘后停止洗瓶。
2.5灌装机操作员开启理瓶盘、输送带将分装瓶送到灌注器处，关闭理瓶盘、输送带，12个灌装针按编号接到灌注器上，灌装针安装完毕后火焰消毒灌装针。
2.6其他分装人员分装前30分钟进入无菌间。
将已灭菌的胶塞分别装入专用布袋中，倒入胶塞振荡斗中（以专用布袋为准，一次一袋大约1500个）。
2.7待苗液到位后，操作人员将配苗罐的硅胶管与缓冲罐接口经火焰消毒后连接，将硅胶管连接到蠕动泵上。
疫苗生产流程
疫苗生产项目简介
3、设计中要把节约和合理利用能源放在重要 位置加以考虑。积极采用节能措施， 位置加以考虑。积极采用节能措施，尽量选用 节能工艺和设备，充分利用地下资源， 节能工艺和设备，充分利用地下资源，搞好水 的循环利 用。 设计中要精打细算， 4、 设计中要精打细算，把有限的资金用在关 键设备上，使资金使用更加合理化。 键设备上，使资金使用更加合理化。 5、严格按照国家环保法和有关文件精神搞好 “三废”治理和职业安全卫生设计工作。 三废”治理和职业安全卫生设计工作。
•
疫苗生产项目简介
(三)亚单位疫苗：用化学试剂裂解病毒，提取包 亚单位疫苗：用化学试剂裂解病毒， 膜或衣壳上的亚单位，除去其核酸， 膜或衣壳上的亚单位，除去其核酸，以此制成 的疫苗称亚单位疫苗。 的疫苗称亚单位疫苗。如流感病毒的包膜提取 后制成的血凝素和神经氨酸酶亚单位疫苗。 后制成的血凝素和神经氨酸酶亚单位疫苗。 下面是几种疫苗的培养方法。 下面是几种疫苗的培养方法。
疫苗生产项目简介
2、圆弧转角； 、圆弧转角；
疫苗生产项目简介
3、单圆弧收边； 、单圆弧收边；
疫苗生产项目简介
4、可调式地轨+PVC地面； 、可调式地轨 地面； 地面
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疫苗生产项目简介
5、双层玻璃观察窗； 、双层玻璃观察窗；
疫苗生产项目简介
6、暗架龙骨吊顶； 、暗架龙骨吊顶；
C
A
A B B
疫苗生产项目简介
当我们拿到一个工程项目时， 当我们拿到一个工程项目时，首先要做的就是 明确设计的依据，这个依据应该包括： 明确设计的依据，这个依据应该包括：工艺技 设备及公用辅助设施等有关基础资料、 术、设备及公用辅助设施等有关基础资料、生 产规模、生产方式、生产班制, 国家及行业主 产规模、生产方式、生产班制, 要有关规范和规定等，只有有了这些依据， 要有关规范和规定等，只有有了这些依据，我 们下一步的工作才能做到有的放矢。 们下一步的工作才能做到有的放矢。然后就是 确定工程范围，明确我们要做的工作。 确定工程范围，明确我们要做的工作。
麻疹疫苗基础知识ppt课件
安全预防接种目的
一、对受种者安全； 二、对实施者安全； 三、对环境安全。
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怎样做才实现安全预防接种
1. 按照预防接种工作规范进行实施预防接种。 2. 熟练掌握正确的预防接种技术操作。 3. 加强工作责任心。
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预防接种实施
预防接种前准备工作 接种中的工作 接种后的工作
12
临时接种点布局要求
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5、接种现场疫苗管理： （1 ）所使用麻疹疫苗为 2 人份一支。接种 前将疫苗从冷藏容器内取出，尽量减少开启冷 藏容器的次数。严禁提前抽取疫苗待用！！ （2）核对疫苗的品种，检查疫苗外观质量。 凡过期、变色、污染、发霉、有摇不散凝块或 异物，无标签或标签不清楚，安瓿有裂纹的疫 苗一律不得使用。
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5、接种现场疫苗管理： （3）冻结过的疫苗一律不得使用。 当怀疑疫苗可能冻结过，检查方法：取正 常疫苗与受检查疫苗同时摇匀后静止竖立约5 分钟，判断：被检查疫苗在短时间内与对照疫 苗相比出现分层现象，且上层液体较清，即可 判继被检查疫苗冻结。 （4）注射疫苗时要摇匀后方可接种，吸取 疫苗和注射时不能触碰注射器的针芯。
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（二）接种时的工作
1、预诊 核实受种对象： 1. 查验接种证、摸底登记册，核对受种 者姓名、性别，出生年、月、日及接种记录， 确认是否为本次接种对象。 2. 询问并记录儿童健康状况。有接种禁 忌而不能接种的受种者，应提出医学建议并 记录。
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（二）接种时的工作
2、接种 （1 ）告知家长或其监护人所接种疫苗的 品种、作用、禁忌、不良反应以及注意事项； （2）再次核对受种儿童基本情况； （3）消毒皮肤 (严禁用含碘消毒剂)； （4 ）接种。（接种后不要用酒精棉球按 压或涂擦注射部位）
麻疹、腮腺炎、风疹三联减毒活疫苗制造及检定规程
麻腮风联合减毒活疫苗Measles，Mumps and Rubella Combined Vaccine, Live本品系用麻疹病毒减毒株和腮腺炎病毒减毒株分别接种鸡胚细胞、风疹病毒减毒株接种人二倍体细胞,经培养、收获病毒液，按比例混合配制,加适宜稳定剂冻干后制成。
用于预防麻疹、腮腺炎和风疹。
1 基本要求生产、检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”规定。
2 制造2.1 生产用细胞2.1.1 麻疹疫苗生产用细胞生产用细胞为原代鸡胚细胞，并应符合“麻疹减毒活疫苗”中2.1项的规定。
2.1.2 腮腺炎疫苗生产用细胞生产用细胞为原代鸡胚细胞，并应符合“腮腺炎减毒活疫苗”中2.1项的规定。
2.1.3 风疹疫苗生产用细胞生产用细胞为人二倍体细胞2BS株、MRC-5株或经批准的其他人二倍体细胞株，并应符合“风疹减毒活疫苗（人二倍体细胞）”中2.1项的规定。
2.2 毒种2.2.1 麻疹疫苗毒种生产用毒种为麻疹病毒沪-191株或经批准的其他麻疹病毒减毒株。
应符合“麻疹减毒活疫苗”中2.2项的规定。
2.2.2 腮腺炎疫苗毒种株或经批准的其他腮腺炎病毒减毒株。
应符合“腮腺生产用毒种为腮腺炎病毒S79炎减毒活疫苗”中2.2项的规定。
2.2.3 风疹疫苗毒种生产用毒种为风疹病毒BRD II减毒株或经批准的其他适应人二倍体细胞的风疹病毒减毒株。
应符合“风疹减毒活疫苗（人二倍体细胞）”中2.2项的规定。
2.3 单价原液2.3.1 麻疹病毒原液制备按“麻疹减毒活疫苗”中2.3项进行。
2.3.2麻疹病毒原液检定按3.1.1项进行。
2.3.3腮腺炎病毒原液制备按“腮腺炎减毒活疫苗”中2.3项进行。
2.3.4腮腺炎病毒原液检定按3.1.2项进行。
2.3.5 风疹病毒原液制备按“风疹减毒活疫苗（人二倍体细胞）”中2.3项的规定。
2.3.6 风疹病毒原液检定按3.1.3项进行。
2.4 半成品 2.4.1配制各项检定合格的麻疹、腮腺炎和风疹单价原液根据病毒滴度按一定比例进行配制， 其中麻疹和风疹病毒滴度比例应为按1：1， 腮腺炎病毒滴度至少是麻疹或风疹病毒滴度的5倍。
接种操作注意事项
接种箱使用规程1、接种箱必须放在清洁环境中使用。
使用前，先用清水擦洗外壁，再用2%来苏尔溶液清洗内壁和接种用具。
2、按甲醛10mL/m3+高锰酸钾7g/m3对接种箱进行熏蒸处理。
先将高锰酸钾倒入容器中，再加甲醛，迅速盖好箱盖，利用产生的甲醛气体密闭熏蒸12小时以上。
3、打开箱门通风30分钟，无明显刺激性气味时准备装箱。
4、接种完毕要及时清扫掉落在箱内的培养物和棉球等杂物，擦拭干净接种用具，并用清水擦拭箱内壁，再用甲醛10mL/m3+高锰酸钾7g/m3熏蒸接种箱，以备再用。
接种的无菌操作规程1、接种前对接种箱进行彻底消毒，并准备好接种工具。
2、操作人员用肥皂或消毒液洗手后装入菌包、菌种、接种工具等必须物品，点燃菇保，立即关闭箱门进行消毒。
3、操作人员工作前换好工作服，并戴口罩，手套。
4、操作人员在接种箱外用75%酒精棉擦拭双手，双手伸进箱内后，再用75%酒精棉球擦拭双手，接种工具及菌种，点燃酒精灯，进行接种。
在接种过程中，不能向箱内传递物品，以免造成杂菌污染。
5、酒精灯火焰不可过小，否则会缩小无菌区范围。
6、二级菌种袋口需要用酒精灯火焰无菌区封闭，接种必须在无菌区内进行，注意避免烧伤菌种。
7、接种工具在使用前，应用火焰灼烧灭菌，接种工具需要进入菌袋的部分，不得与未灭菌的物体接触，棉塞塞入袋口的部分拔出后不得与未灭菌的物体接触。
8、接种要做到“轻、快、准”：“轻”指接种动作幅度不要太大，尽量减少空气流动；“快”指接种动作要快，避免菌种和培养料在空气中停留的时间过长；“准”指接种动作要准确到位，接种工具放置有序。
9、接种过程中，不得把手伸出接种箱。
二级种接种操作的具体过程1、将接种物品搬进接种箱菌包摆在接种箱的左侧（左撇子放在右侧，下面的左右均互换），摆好接种用具，向箱内喷新吉尔灭。
2、将检查好的菌种用消毒液擦拭或喷洒后，放入接种箱内。
3、用菇保熏箱25分钟后，接种。
4、接种前，操作人员戴好口罩、手套，在接种箱外用75%酒精棉擦拭双手，双手伸进接种箱后，再次用75%酒精棉擦拭双手，特别是手指及指尖。
接种操作注意事项
接种箱使用规程1、接种箱必须放在清洁环境中使用。
使用前，先用清水擦洗外壁，再用2%来苏尔溶液清洗内壁和接种用具。
2、按甲醛10mL/m3+高锰酸钾7g/m3对接种箱进行熏蒸处理。
先将高锰酸钾倒入容器中，再加甲醛，迅速盖好箱盖，利用产生的甲醛气体密闭熏蒸12小时以上。
3、打开箱门通风30分钟，无明显刺激性气味时准备装箱。
4、接种完毕要及时清扫掉落在箱内的培养物和棉球等杂物，擦拭干净接种用具，并用清水擦拭箱内壁，再用甲醛10mL/m3+高锰酸钾7g/m3熏蒸接种箱，以备再用。
接种的无菌操作规程1、接种前对接种箱进行彻底消毒，并准备好接种工具。
2、操作人员用肥皂或消毒液洗手后装入菌包、菌种、接种工具等必须物品，点燃菇保，立即关闭箱门进行消毒。
3、操作人员工作前换好工作服，并戴口罩，手套。
4、操作人员在接种箱外用75%酒精棉擦拭双手，双手伸进箱内后，再用75%酒精棉球擦拭双手，接种工具及菌种，点燃酒精灯，进行接种。
在接种过程中，不能向箱内传递物品，以免造成杂菌污染。
5、酒精灯火焰不可过小，否则会缩小无菌区范围。
6、二级菌种袋口需要用酒精灯火焰无菌区封闭，接种必须在无菌区内进行，注意避免烧伤菌种。
7、接种工具在使用前，应用火焰灼烧灭菌，接种工具需要进入菌袋的部分，不得与未灭菌的物体接触，棉塞塞入袋口的部分拔出后不得与未灭菌的物体接触。
8、接种要做到“轻、快、准”：“轻”指接种动作幅度不要太大，尽量减少空气流动；“快”指接种动作要快，避免菌种和培养料在空气中停留的时间过长；“准”指接种动作要准确到位，接种工具放置有序。
9、接种过程中，不得把手伸出接种箱。
二级种接种操作的具体过程1、将接种物品搬进接种箱菌包摆在接种箱的左侧（左撇子放在右侧，下面的左右均互换），摆好接种用具，向箱内喷新吉尔灭。
2、将检查好的菌种用消毒液擦拭或喷洒后，放入接种箱内。
3、用菇保熏箱25分钟后，接种。
4、接种前，操作人员戴好口罩、手套，在接种箱外用75%酒精棉擦拭双手，双手伸进接种箱后，再次用75%酒精棉擦拭双手，特别是手指及指尖。
灌装岗位操作规程
山东信得动物疫苗有限公司GMP 管理文件一、目的：建立疫苗灌装岗位操作程序，使疫苗灌装操作人员认真执行。
二、适用范围：适用于疫苗灌装操作。
三、责任者：疫苗灌装岗位操作人员。
四、正文：1.工作准备。
1.1 操作人员必须按《万级洁净区个人卫生规程》，《万级洁净区清洁消毒规程》，《洁净区工艺卫生管理规程》，《进出万级洁净区更衣规程》等对个人、设备、房间进行清洁处理，达到清洁区生产条件后，才能进行生产。
1.2 灌装间必须达到万级清洁区要求，并有“清场合格证”。
1.3检查灌装机，应有“已清洁待运行”标志1.4 灌装机上盛装药液的缓冲罐、针头、管道和管件使用前应以清洁灭菌并处于有效期内。
1.5 检查压缩空气供应，应达到规定压力，能保证生产需要。
压缩空气，使用前需过滤处理。
1.7 药液灌装前检查生产指令单和半成品药液合格检验报告单，应相符。
2、灌装压塞：按照《液体灌装加塞机操作规程》操作。
2.1按照生产需要连接各管道与灌装针头。
2.2灌装机进瓶输送带轨道上布满瓶子，处于待灌装状态。
在振荡器中放入相应的胶塞。
2.3 按主机点动按钮，使灌装头抬起，并处于待灌装状态。
2.4 打开振荡器开关钮，把胶塞预送到振荡器导轨出口。
2.5 起动输送带开关，把待灌装的空瓶输送到灌装头下部位置。
2.6 启动轧盖机开关，做好轧盖的准备。
2.7 按主机按钮，启动主机，进入生产状态。
2.8 装量调整：通知配液人员，将配制好的药液输入高位罐。
试灌数瓶，测定装液量，如不符合立即调整装量，直至达到装量要求，装量不得低于252ml。
在差异范围内，才能灌装。
灌装过程中，每隔20—30分钟，抽样检查装量，发现异常立即调整至合格。
2.9加塞调整：准确压塞不漏液。
2.10 调整结束，保持调好的状态，开始正式灌装。
正式灌装后，应定时抽取少量瓶检查装量等质量状况。
2.11 及时补加包装瓶。
灌装后的瓶子经过加塞区域时，如未能及时加塞，应及时于出瓶区取出，以防进入下一道工序时药液溢出；2.12 注意高位罐中的液位，避免空灌。
无菌操作和接种技术
3、化学药剂消毒法：体积分数为70%的乙醇 杀菌效果最好（手）
4、 巴氏消毒法：是一种利用较低的温度既可杀死病菌 又能保持物品中营养物质风味不变的消毒法。 常用于消 毒牛奶和酒类等。
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经 高温、高压灭菌后倒平板 B．取10－4、10－5的土壤稀释液0.1 mL， 分别涂布于各组平板上 C．将培养皿倒置，37 ℃恒温培养24～48 小时 D．选择菌落数在300个以上的培养皿进行 计数
2.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品的细菌数，
D 在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几
条件
结果
常用的方法
消 较为温 毒 和的物
理或化 学方法
仅杀死物体表面或内
部一部分对人体有害 的微生物(不包括芽孢 和孢子)
煮沸消毒法、巴氏 消毒法、紫外线消 毒法和化学药剂消 毒法
灭 强烈的 杀死物体内外所有 灼烧灭菌、干热
菌 理化因 的微生物，包括芽 灭菌、高压蒸汽
素
孢和孢子
灭菌
一、消毒方法
1、煮沸消毒法：可用于饮水和一般器械（刀 剪、注射器等）的消毒。
(4)分离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行灭__菌____ 处理，利用高温可以使微生物的蛋__白__质_和__核_等酸物质发生变 性。
6、(2011·新课标全国卷，39)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏 造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解 原油的菌株。回答问题：
三、分离纯化某种微生物的接种技术-------
使用麻疹风疹联合减毒活疫苗的注意事项
使用麻疹风疹联合减毒活疫苗的注意事项
可能有一些朋友会听说过麻疹风疹联合减毒活疫苗吧，麻疹风疹联合减毒活疫苗是我们常见的一种疫苗，但是由于麻疹风疹联合减毒活疫苗的功效非常的强大，所以我们一定要多了解一些关于麻疹风疹联合减毒活疫苗的知识，下文我们给大家介绍一下使用麻疹风疹联合减毒活疫苗的注意事项。
成份与性状
本品系用麻疹病毒减毒毒株和风疹病毒减毒株分别接种鸡胚细胞和人二倍体细胞，经培养、收获病毒液，按比例混合配制，加适宜稳定剂冻干后制成。
为乳酪色疏松体，复溶后为橘
红色澄明液体。
冻干保护剂主要成分为人血白蛋白、明胶和蔗糖。
(1)开启疫苗瓶和注射时，切勿使消毒剂接触疫苗。
(2)疫苗加入灭菌注射用水后，轻轻振摇应能立即溶解。
(3)疫苗复溶后出现异常浑浊，疫苗瓶有裂纹、标签不清或过期失效者，均不得使用。
(4)疫苗复溶后如不能立即用完，应放置在2～8℃并于
1小时内用完，否则应予废弃。
(5)注射过免疫球蛋白者，应间隔1个月以上再接种本疫苗。
(6)在使用其他活疫苗前后1个月内，不得使用本疫苗，但可与腮腺炎活疫苗同时接种。
(7)本疫苗为减毒活疫苗，不推荐在该疾病流行季节使用。
在上面的文章里面我们介绍了一种比较常见的疫苗，那就是麻疹风疹联合减毒活疫苗，上文为我们详细介绍了使用麻疹风疹联合减毒活疫苗的注意事项，希望上文介绍的信息能够给大家带来一定的帮助。
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麻疹风疹联合减毒活疫苗生产过程中的无菌操作与无菌灌装
发表时间：2019-04-10T16:07:45.963Z 来源：《医师在线（学术版）》2019年第03期作者：王建京谢强宋薇王丰邢飞
[导读] 对麻疹风疹联合减毒活疫苗，在生产过程中保证无菌操作与无菌灌装操作，成功率较高，值得在临床中推广，疫苗的制作关系到人的生命安危与健康，应当保证产品的使用安全。
（北京北生研生物制品有限公司 101100）
【摘要】目的:探讨麻疹风疹联合减毒活疫苗生产过程中的无菌操作与无菌灌装。
方法:选取2016年2月-2017年9月制作的300支麻疹风疹疫苗，按照制作疫苗的过程分为两组，对照组采用无菌操作、灌装进行麻疹风疹疫苗的制作，研究组采用麻疹风疹联合减毒活疫苗进行制作。
对两组疫苗成功率进行统计。
结果: 研究组疫苗的成功率显著高于对照组（P<0.05）。
结论: 对麻疹风疹联合减毒活疫苗，在生产过程中保证无菌操作与无菌灌装操作，成功率较高，值得在临床中推广，疫苗的制作关系到人的生命安危与健康，应当保证产品的使用安全。
【关键词】麻疹风疹；减毒活疫苗；结肠癌；无菌操作；无菌灌装
【中图分类号】R186 【文献标识码】A 【文章编号】1439-3768-（2019）-1
随着医疗技术的迅速发展，我国医学不断进行改革，发展成功具有一定成效，无菌操作技术的发展属于医疗发展的独立的领域[1]。
随着经济迅速发展，人们逐渐追求更高的生活质量，对医疗药物制剂的标准更高，生产中保证无菌制剂更为重要。
在目前医学研究中，利用无菌操作技术为人们制作医疗制剂，更为安全、可靠、高效[2]。
应当加强无菌制剂的研究，提高药物的品质，提高药物的安全性。
我院选取制作的300支麻疹风疹疫苗，随机分组后对采用不同的制作方法，探究麻疹风疹联合减毒活疫苗生产过程中的无菌操作与无菌灌装过程，现报道如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
我院选取2016年2月-2017年9月制作的300支麻疹风疹疫苗，
两组疫苗的一般资料有可比性（P>0.05）。
本研究通过医院伦理委员会批准。
1.2方法
1.2.1 进行麻疹病毒原液制备，应符合麻疹减毒活疫苗中的相关规定。
进行风疹病毒原液制备，应符合风疹减毒活疫苗(人二倍体细胞)中的规定。
进行单价原液检定，麻疹病毒原液检定。
1.2.2 进行半成品配制，将通过检定且合格的麻疹风疹病毒单价原液按同一病毒滴度进行适当稀释后，进行比例混合，加入适宜的稳定剂配制，即为半成品。
半成品通过无菌检查、依法减产完成检定，成为成品。
1.3观察标准
对两组疫苗的制作成功的例数进行统计分析。
1.4统计学方法
数据应用SPSS20.0进行分析，其中计数进行X2（%）检验，计量进行t检测（x±s）检验， P＜0.05提示有显著差异。
2.结果
对比两组疫苗的成功率，研究组疫苗的成功率显著高于对照组（P<0.05），详情参见表1。
3.讨论
利用无菌操作、灌装技术在现代制药中具有重要的意义，成为作为无菌针剂的主要工艺。
采用无菌操作技术成为对药品安全保证的基本要求，因此必须保证无菌操作的有效性，避免生产环节出现的各个问题。
无菌药品在生产过程，具有高风险性的特性，必须继续增加对无菌制剂的生产量，以及保证对无菌操作技术进行实时创新，保证疫苗的合格与安全。
疫苗的本质为将病原微生物及其代谢产物，进行人工减毒、灭活或利用转基因等操作，制成的自动免疫制剂。
疫苗主要的作用为预防传染病，疫苗的特征为保留了病原菌刺激人体免疫系统的特性。
当人体被注射此类无危险性的病原菌后，免疫系统感应到，会产生相应的免疫激素等抗体；当人体再次被病原菌感染时，体内的免疫系统对其已经产生过抵抗，分泌出其他抗体避免对人体产生伤害。
减毒活疫苗的本质为对病原体进行各个环节的处理，使其出现变异，毒性减弱，但仍然存在免疫原性[3]。
将减毒活疫苗注射入人体内，不会导致患者发生疾病，但病原体对免疫系统产生刺激，引发机体出现免疫反应，进而起到保护作用。
减毒活疫苗是指使用甲醛对病原体进行处理，处理方式为对病原体的A亚单位的结构改变，减弱病原体的毒性，但保证病原体的B亚单位活性不变，保持了抗原性的疫苗。
注射此类疫苗身体内，人体不会患此类疾病，但病原体可以引发机体免疫反应，刺激人体分泌出具有特异性的记忆B细胞，起到获得长期或终生保护的作用。
这类疫苗的特点为免疫力强、作用时间长，但安全性较低，存在潜在威胁。
麻疹属于常见的急性呼吸道传染病，具有极强的传染性，主要的患病人群为儿童，以2～3年为一周期反复流行。
麻疹病毒的本质为副黏液病毒，传播途径为呼吸道分泌物飞沫，临床上的主要症状为发热、上呼吸道炎症等，患者皮肤出现红色斑丘疹，且颊黏膜上有麻疹黏膜斑，疹退后遗留色素沉着伴糠麸样脱屑为特征。
麻疹容易导致的并发症为中耳炎、肺炎等，若情况较为严重则，无特效药物治疗。
风疹属于急性呼吸道传染病，传染的病毒为风疹病毒（RV），发病的原因包括先天性感染和后天获得性感染。
临床上的主要特征为驱期短、低热、皮疹和耳后等情况。
此病的患者的一般病情较轻，患病时间短，且预后良好。
风疹容易出现暴发传染的情况，发病的时节为一年四季，以冬春季发病人群较多，易感年龄以1～5岁为主，因此主要发病人群为学龄前儿童。
孕妇早期若被风疹病毒传染后，无论病情的严重程度，病毒会通过胎血屏障对胎儿进行伤害，导致以婴儿出现先天性缺陷为主的先天性风疹综合征（CRS）。
综上所述，对麻疹风疹联合减毒活疫苗，在生产过程中保证无菌操作与无菌灌装操作，成功率较高，值得在临床中推广，疫苗的制作关系到人的生命安危与健康，应当保证产品的使用安全。
【参考文献】
[1] 刘小琦, 俞梅华, 罗小福,等. 乙型肝炎疫苗和麻疹风疹联合减毒活疫苗接种后致脊髓炎案例讨论与思考[J]. 中国疫苗和免疫, 2017，
98(3):347-348.
[2] 彭时辉, 文海蓉, 许波,等. 江西省南昌市2012～2015年麻疹风疹联合减毒活疫苗疑似预防接种异常反应监测分析[J]. 中国疫苗和免疫, 2016，87(6):679-683.
[3] 水痘减毒活疫苗与麻疹流行性腮腺炎风疹联合疫苗同时接种的免疫效果和安全性观察[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2016, 36(3):182-188.。