小鼠发情周期观察与最佳超排时期的确定

２０北京农学院学报第２０卷
１材料与方法
１．１实验动物以ＩＣＲ系ＳＰＦ性成熟小鼠（购自北京实验动物中心）为实验动物。

雌鼠体重２９～３２ｇ，雄鼠体重３３～３５ｇ，雌雄分笼饲养在室温、自然光照、自由饮水的条件下，采用全价繁殖颗粒饲料饲养。

经７ｄ的适应性饲养后，按常规方法对雌鼠进行超数排卵处理。

１．２实验方法
１．２．１阴道涂片法判断小鼠发情周期及外阴部特点的观察采用阴道涂片方法［２］对小鼠进行发情周期观察。

首先将小鼠保定，翻提起尾巴露出阴道口，观察外阴的变化并记录其特点。

然后右手持滴管吸少量生理盐水滴入阴道口，当稍放松尾部及腰部时，生理盐水即被吸入阴道，稍候三指轻压腰部，黏液随生理盐水流出，吸入滴管中，滴到载玻片上。

待稍干后用酒精（９５％）固定５ｍｉｎ，然后用伊红染液染色１５ｍｉｎ，随后冲片，干燥，镜检。

１．２．２外部观察法确定小鼠发情时期根据阴道涂片结果及小鼠在不同发情周期所表现出的外阴部特点，依次将其分为发情前期（实验１组）、发情期（实验２组）、发情后期（实验３组）、问情期（实验４组）４个实验组别。

发情周期未观察小鼠作为对照组。

１．２．３小鼠超数排卵［３３雌性小鼠于１９：００腹腔注射ＰＭＳＧ（天津实验动物中心，批号：０４３２９）１０ＩＵ／只，间隔４８ｈ腹腔注射ｈＣＧ（国营南京动物激素厂，批号：９８０１０９）１０ＩＵ／只，注射ｈＣＧ后即与公鼠按１：１合笼。

次日８：ｏＯ检查阴栓，凡阴门处有阴道栓，合笼后４７ｈ脱臼处死小鼠，获取２一细胞胚胎。

１．３数据统计采用卡方检验。

２实验结果
２．１小鼠阴道涂片上皮细胞变化及外阴部特点观察‘２３见表１和图１、图２。

表１小鼠阴道涂片上皮细胞变化及外阴部特点
图１不同发情时期阴道上皮细胞变化
２．２不同发情周期小鼠超排效果由表２可知，（１）不同发情周期超排成功率，实验１组、２组和４组极显著高于３组和对照组（Ｐ＜ｏ．０１）。

（２）平均
图２不同发情时期外阴部特征
每组可用胚胎率，实验ｌ组、２组、４组与对照组无显著差异（Ｐ＞ｏ．０５），但与实验３组差异极显著（Ｐ＜
ｏ．０１）。

（３）平均每只小鼠获可用胚数，实验１组、４
小鼠发情周期观察与最佳超排时期的确定
作者：傅文栋， 孙玉成， 索伦， 高建明， FU Wen-dong， SUN Yu-cheng， Suo Lun， GAO Jian-ming
作者单位：北京农学院动物科学技术系,北京,102206
刊名：
北京农学院学报
英文刊名：JOURNAL OF BEIJING AGRICULTURAL COLLEGE
年，卷(期)：2005,20(2)
被引用次数：9次
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