小鼠的生殖生理学特点

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(一)性成熟和体成熟
动物生长发育到一定程度,即达到性成熟期。性成熟的表现是生殖器官发育完全,出现第二性征。这时雄性动物有产生精子、雌性动物有产生卵子的能力,并出现性的要求。

小鼠性成熟时期的标志是:雌性小鼠阴道口张开,出现求偶周期,有交配的欲望,愿意接近公鼠;公鼠睾丸下降,精子生成。雌鼠一般在20日龄以前阴道口由皮肤闭合,之后阴道口皮肤逐渐变薄,阴道开口,其开口与卵巢机能活动相一致,所以阴道开口是雌鼠性成熟的主要标志。雄鼠在25日龄左右,睾丸自腹腔落入阴囊,35日龄后睾丸形成精子,40日龄后的精子可受精,同时体重增加较快。

小鼠性成熟日龄因品系及饲养管理条件的不同而有所差异,一般雌性小鼠为35~50日龄,雄性小鼠为45~60日龄。小鼠的体成熟一般在60~90日龄,此时小鼠体重增长较缓慢,是小鼠的适宜配种年龄。

(二)性周期
小鼠为多周期发情动物。雌性小鼠除妊娠期,通常进行周期性排卵。性周期为4~5天,一般在发情后2~3小时即可排卵,其性活动一般可分为发情前期、发情期、发情后期和休情期。产后12~14小时内有一次产后性周期。自此以后,由于给仔鼠哺乳,性周期暂时停止。离公鼠独居生产的母鼠,在仔鼠断乳2~6天后可出现下一个性周期。

(三)排卵和交配
雌性小鼠排卵期为3~4天,但在排卵期仅有数小时允许公鼠交配。小鼠属于自发排卵的动物,排卵一般发生在发情期末的半夜至凌晨4:30左右,交配一般发生在排卵前的22:00至次日凌晨1:00,即交配早于排卵2小时左右。交配后精子到达输卵管受精部位的时间为20~60分钟,等待新鲜的卵子。小鼠的排卵数因品系、个体及饲养管理等环境因素的不同而有所差异,我们在实验中常选用的昆白系小鼠排卵较多,但个体差异较大。

小鼠自然繁殖交配或超排发情交配后,如要知道是否已经交配以及体内的卵母细胞是否受精,一般是在交配的次日晨8:00时以前检查雌鼠的阴门,如见有阴门栓(小块稠桨糊样物质),则认为已经交配,并表明卵母细胞可能受精。有的雌鼠形成的阴门栓在阴道口内,需翻开阴门检查。有时看不到阴门栓,可能是阴门栓形成后在短时间内自行脱落,或者个别小鼠交配后不形成阴门栓,但在这种情况下小鼠的阴门是紧缩的。阴门栓由交配公鼠副性腺(精囊腺、凝固腺)分泌物及母鼠阴道分泌物与阴道上皮等遇到空气后形成,开始粘稠,以后迅速变硬,遂将阴道口封闭。正常情况下,阴门栓在交配后24小时内自行脱落。

(四)精子运输及保持受精能力的时间
小鼠精子在配种后20~60分钟到达受精

部位。精子在雌鼠生殖道运行过程中完成获能,所需时间一般为1小时左右。精子在雌鼠生殖道内保持活力的时间(生存时间)比保持受精能力的时间长,前者可以达到13.5小时,但保持受精能力的时间仅为6小时。

(五)受精
小鼠体内精卵结合形成受精卵的过程是在输卵管壶腹部进行。在受精过程中,交配后10小时精子穿卵,17~18小时原核形成。卵母细胞刚从卵巢排出时处于次级卵母细胞分裂中期,即第二次成熟分裂中期(MⅡ)。受精时精子进入卵母细胞后刺激卵母细胞完成第二次成熟分裂。小鼠一般为单精子受精。卵母细胞刚排出时外包卵丘细胞,卵丘细胞最终消除在受精后20小时(体内),恰好处于受精卵的原核形成时期。精子头部的核膨大变为雄原核,卵母细胞抛出第二极体后所余染色体成为雌原核,雄原核大于雌原核。两性原核在迁移过程中进行DNA复制,为第一次卵裂做准备。在雌雄原核靠近、接触的同时,各自核膜呈锯齿状嵌合,最后核膜核仁消失,各自染色体排列在受精卵第一次分裂中期赤道板上并互相混合,之后完成第一次卵裂。

(六)卵裂和附植前胚胎发育
附植前胚胎发育存在着品种及个体差异,而且不同胚胎之间也有所不同。早期胚胎的卵裂前期在输卵管中进行,到中后期则由输卵管进入子宫中,囊胚期和孵化期的发育在子宫中进行。小鼠第一次卵裂在受精后18~24小时,只要分裂条件具备,真正分裂时间只需15分钟左右。以后每隔12小时左右分裂一次,每次约需5~10分钟。根据这一规律,基本上可以推算出早期卵裂胚胎各个时期的时龄,2-细胞为受精后约24~38小时,4-细胞为38~50小时,8-细胞为50~60小时,16-细胞为60~72小时。小鼠胚胎卵裂到8-细胞阶段时开始致密化,致密化的细胞分裂后,形成16-细胞的桑椹胚,在桑椹胚阶段,胚胎由输卵管进入子宫。在16~32细胞期(66~82小时)出现小的囊腔而进入囊胚期。囊胚期可分为四个阶段:16~32细胞期,囊胚腔很小,不易看见,为早期囊胚;有完整的囊胚腔,并能明显区分为内细胞团时为晚期囊胚;囊腔的体积进一步扩大,镜下像一个水泡,内细胞团相对较小的时期为扩张囊胚;扩张囊胚从透明带孵出后则为孵出囊胚,这时透明带并非溶解,而是由于子宫内及滋养层的一些酶使一部分透明带软化,囊胚细胞由软化部位钻出,孵化期的时龄约为96~110小时(教材图2-8)。

在观察小鼠附植前胚胎发育时,可按照配种时间将其分为几个日龄阶段:
配后日龄0~1天,为单细胞胚胎,即合子时期,形成雌雄二原核。雌原核位于第二极体之下,具多个核仁,雄原核位置接近中心,体积较大

,核仁少。合子位于输卵管漏斗部,透明带表面尚可见分散的卵丘细胞。有时多个合子期胚胎由输卵管粘性分泌物粘附,不易分开。
配后1天为2-细胞阶段。
配后2天为4~16-细胞期,个体间差异很大,最后发育到桑椹胚阶段,此期胚胎位于输卵管中。
配后3天,胚胎处于桑椹胚或早期囊胚,已经进入子宫角,最后分裂成32~64个卵裂球,囊胚腔逐渐扩大,顶壁为内细胞群,侧壁与底壁为滋养层细胞。
配后4天,胚胎脱去透明带孵出,成为典型的胚泡。脱带后,滋养层细胞直接与子宫上皮接触,子宫腔变小或闭合,以利于胚泡附植。

(七)妊娠、分娩和哺乳
小鼠的妊娠期,因品种不同而有所差异。纯系小鼠妊娠期一般为19天,部分20天;国内普通小白鼠妊娠期变化范围较纯系小鼠大,为18~21天。小鼠的分娩可昼夜进行,但以晚间为多。母鼠产前一般是表现不安状态,常常不停地整理产窝。母鼠分娩的全过程一般需要1小时左右,分娩完毕后约12~24小时出现产后发情,此时交配,多能受孕。仔鼠哺如期一般18~21天,留种仔鼠可延长到23天,但不能超过25天。

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