激光共焦角膜显微镜和角膜内皮镜.

独有的纵向断层扫描
角膜内皮细胞计数功能
临床应用
药物毒性眼表病变
• 42岁男性 • 左眼“霰粒肿”手术 后长期频点各种抗生 素滴眼液3月余 • 左眼红痛、流泪2月
治疗1月余
棘阿米巴性角膜炎
感染源：棘阿米巴原虫
病理： • 病变早期累及上皮，成假树枝状上皮混浊。 • 病灶反复破溃和愈合，渐向基质深层发展， 有大小不等斑片状或盘状基质混浊。 • 晚期可发生溃疡穿孔。 诊断：角膜刮片后培养找到阿米巴原虫； 共焦显微镜阿米巴包囊
50 µm
Tiefe:
0 µm
10 µm
30 µm
40 µm
62 µm
100 µm
300 µm
572 µm
Sequence模式：同一焦平面动 态扫描
同一焦平面动态连续记录图像 10幅/秒
Volumn模式：序列扫描图
沿Z轴向后 连续动态扫 描，每幅图 像间隔 2um ，共连续向 后扫描40幅 图像，深度 80µm
棘阿米巴性角膜炎
病例1 患者女，19岁，学生. 过夜配戴OK镜后出现左眼 红、疼痛、视力下降1月
deth 22μm
06-08-30
06-08-30 包囊
病例2
患者女, 22岁，学生. 配戴隐形眼镜后右眼红， 畏光，视力下降1月
deth 44μm
06-11-10
06-11-10 滋养体
病例3
患者女，19岁，学生. 过夜配戴OK镜后左眼红、 疼痛、视力下降1月
共焦激光技术
影像探测器
聚光镜 针孔样结构 670 nm
焦平面
激光发生器
分光镜
Courtesy of J. Flanagan PhD, MCOpt
技术参数
• • • • • • • 光学原理：激光共焦纤维扫描技术 激光光源：670nm 水平分辨率：1um 纵向分辨率：1um 观测范围：400um*400um 放大倍率：800x 扫描深度：1500um
deth 117μm
06-09-18
06-09-18 滋养体
病变角膜组织切片内可见棘阿米巴包囊(箭头) ，PAS 染色×40
角膜基质层出现断裂，表示扫描区位于溃疡灶内，溃疡边 缘可见有细小圆形阿米巴包囊结构，包囊中心可见白色高反光 区。
阿米巴性角膜炎的 微囊
离体组织学检查 (光学显微镜)
Biblioteka Baidu
活体检查 (HRT 3)
砂石等角膜异物后。 感染源：常见为曲霉菌、镰刀菌、白色念珠
菌、头孢霉菌、酵母菌。
病理：
• 早期角膜基质有脓疡形成，周围基质有卫星状浸 润坏死灶，内有破碎的板层和中性粒细胞浸润， 坏死灶内很少见完整的霉菌，但周围基质内却有 大量菌丝。 • 随着病情进展，临近脓疡趋于愈合，坏死物质连 同表面组织脱落形成溃疡，坏死程度依霉菌毒力、 抗原性、菌株种类而异。 • 部分霉菌可穿过后弹力层，形成角膜穿孔。 • 适当的抗霉菌治疗可使溃疡愈合而留有白斑， 若发生穿孔，常形成粘连性角膜白斑。
• 在角膜病诊断中应用的特点 活体组织切片 定性与定量分析 无创伤性 动态观察
0 µm
62 µm
10 µm
100 µm
30 µm
300 µm
40 µm
572 µm
检 查 窗口
HRTII角膜激光共焦显微镜
上皮细胞 - 30 µm
基质 - 300 µm
内皮细胞– 570 µm
四种检查模式
Section模式：可获取角膜不同深度的地形图
角膜上皮细胞呈局限性蜂窝状改变，细胞反光增强， 上皮层和基质层可见大量强反光区域，病变局限，与正常 组织分界清晰。
真菌性角膜炎
颗粒状角膜营养不良
组织病理学变化：角膜上皮变薄，前弹力 层破坏，实质浅层细胞内外有淡嗜伊红染 色颗粒状物，从实质层经过前弹力层破损 处进入上皮层内。
上皮和前弹力层尚完整，基底细胞失去极化，上皮下有颗粒 物质沉着，前弹力层消失。实质层内亦有颗粒或面包屑样物 质沉着，且部分融合成团块状。
盘状角膜炎
• 可在上皮感染的同时或之后发生，为一种亚急性 或慢性坏死性炎症。 • 轻型病例角膜混浊可完全吸收，长期或复发性病 例，基质炎症由前弹力层扩展至深层基质。 • 病变早期表现为板层水肿，细胞内和细胞间有液 体积聚 • 随着炎症发展，板层可发生断裂，白细胞从角膜 缘倾入病灶， • 晚期板层破坏严重，见大量巨噬细胞，血管侵入 坏死灶，出现炎性肉芽肿性病变。 • 最终出现不规则胶原沉积。
单纯疱疹病毒性角膜炎
树枝状角膜炎
• 可为单发或多发，组织学上的上皮损害表 现为沿树枝状走行曲的细胞丧失。 • 单个损害可扩大，或邻近的损害融合成大 的病灶，形态不规则，呈“地图状”损害， 组织学上“地图状”损害可累及基底层上 皮细胞。 • 反复感染可累及角膜深层。 • 角膜上皮下感觉神经丛及上皮内神经末梢 受损，从而出现角膜知觉减退。
激光角膜共焦显微镜
角膜的基本解剖结构
• • • • • 上皮细胞层 前弹力层 基质层 后弹力层 内皮细胞层
激光共焦显微镜的原理
• 光源为波长670 nm的二极管激光源 • 激光束聚焦在角膜焦平面，通过振荡镜周期性的移 动,连续扫描获得角膜各层二维图像。 • 光敏探测器可以测到每一点的光反射强度,接收焦 平面上的反射光及其周围的散射光。 • 共焦平面可以通过焦平面调解环进行手动调解,因 此可获得角膜各个层面的图像,一系列不同共焦平 面的图像组成了三维图像。
诊断： • 临床表现 • 坏死组织真菌培养 • 坏死组织涂片检查：找到真菌菌丝 • 角膜共焦显微镜检查：活体直接找到菌丝。
角膜浅基质层基质紊乱，可见大量菌丝分布，基质层结构破 坏，散在分布炎性细胞。
予全身及局部抗真菌治疗一周后复查共焦显微 镜，可见菌丝有明显减少。
患者，XXX，因“左眼眼痛、畏光、视物不见两月”， 外院诊断“真菌性角膜炎”，予抗真菌治疗后症状好转，但 视力无明显提高。入院行角膜共焦显微镜检查可见基质有高 反光区域，仅少量短小菌丝结构，但可见大量树突状细胞散 在分布于基质层内。
共焦显微镜下见，前弹力层局部出现皱褶，上皮下角 膜神经穿过皱褶处见皱褶甚至断裂。
患者，XXX，女，既往患双眼病毒性角膜炎史三年， 三年来双眼反复发作，来我院行共焦显微镜检查示，双 眼角膜上皮下神经广泛断裂，局部扭曲。
真菌性角膜炎
病因：致病真菌直接侵入角膜感染所致。多
见于农业性外伤（植物擦伤）或剔除泥土、