生物指示剂管理规程

生物指示剂管理规程完整

范文范例参考指导目的建立生物指示剂管理规程，规范生物指示剂进厂质量验收、储存、使用和销毁程序，保证生物指示剂质量安全有效。

范围本规程适用于公司确认与验证及监控生物指示剂使用管理。

责任生物指示剂使用部门负责采购申请填写及按照说明书要求使用、储存、销毁生物指示剂，质量部QA负责监督和检查执行情况。

内容1. 生物指示剂概念生物指示剂（BI）：系一类特殊的活微生物制品，可用于确认灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。

用于灭菌验证中的生物指示剂一般是细菌的抱子。

2. 生物指示剂形式2.1 一定数量的抱子附着在惰性载体上，如滤纸条、玻片、不锈钢、塑料制品等。

2.2 抱子悬浮液密封于安瓿中。

3. 生物指示剂特性3.1 具有较高的耐受性、贮存稳定性、批与批之间的一致性、无致病性、易于培养和制备的细菌芽抱。

3.2 耐受性要高于灭菌前产品中污染菌的耐受性。

3.3 符合地方、国内、国际相关法规要求。

3.4 可根据灭菌程序的设计要求而制备。

4. 生物指示剂分类4.1 第一类生物指示剂：由微生物抱子和载体包装而成。

4.2 第二类生物指示剂：由可接种在产品表面或内部的抱子悬液构成。

4.3 第三类生物指示剂：包含微生物恢复生长培养基的类型。

5生物指示剂选择6. 生物指示剂管理流程合格7. 生物指示剂米购、验收、质量信息登记7.1生物指示剂使用部门根据年度验证总计划内容及临时需求说明填写生物指示剂购买申请，采购部门根据申请从有资质的生产厂家及供应商处购得相应生物指示剂，购买的生物指示剂应附有相应的合格质量检验报告单。

7.2 生物指示剂进厂验收部门为库房，库房人员应该仔细核对品名、规格、批号、数量、生产日期、有效期、生产厂家，检查外包装应完好，封口严密，标签完整，内容清晰，核对无误后填写《物料验收记录》（1））和《物料台账》（1），不合格的生物指示剂退回厂家处理。

7.3 生物指示剂质量信息登记部门为领用部门，登记内容包括生物指示剂名称，生产厂家，生产批号及生产日期，失效日期，Z值，储存环境和销毁方法。

压力灭菌用生物指示剂的使用方法

压力灭菌用生物指示剂1262该压力蒸汽灭菌生物培养指示剂用于压力蒸汽灭菌效果的生物监测包括下排气锅和预真空锅;通过培养基颜色变化;反应嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活;从而判断压力蒸汽灭菌生物监测结果..1.将压力蒸汽灭菌生物培养指示剂放于一标准测试包中;2.按照国家规范;分别将测试包放于锅内不同位置;3.灭菌完毕;取出该生物指示剂;4.挤破内含的安瓿;与一支对照管一起放于56℃培养锅内培养;48小时后阅读结果..结果阅读：1.培养后指示管不变色呈紫色;表示灭菌通过;2.培养后指示管变色呈黄色;表示灭菌不通过;必须及时查出灭菌失败原因..3.同时培养的对照管应为阳性呈黄色;如阴性;可能的原因为:培养条件不符合要求;生物指示剂有问题;应及时查出阴性原因..注意事项：1.灭菌完毕;含生物指示剂的包裹很热并有一定压力;需至少冷却10分钟以上;否则可能引起塑料管内的安瓿破裂;飞溅的碎片导致损伤;2.只有对照管为阳性;其生物监测结果才算有效..3.贮存于室温:15-30℃;相对湿度为35-60%;避免靠近灭菌器和化学消毒剂..1292该生物指示剂可用以121℃下排气和132℃预真空压力蒸汽灭菌锅..3MATTESTTM压力蒸汽灭菌生物培养指示剂快速在与3MATTEST290培养锅共用时;通过酶活性的灭活与否;探测嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活;从而判断压力蒸汽灭菌结果..使用方法:1、在生物指示剂标签上注明灭菌器锅号;负荷数量;灭菌日期;不要在指示剂的瓶或盖上另贴一个标签..将生物指示剂放于一个标准测试包内;并置于最难灭菌的位置..2、将含有生物指示剂的测试包放在灭菌器最难灭菌的位置;通常是灭菌器底层;近门或排气口上面..3、正常装载..4、灭菌循环完毕;取出生物指示剂..5、灭菌结束后;从灭菌器内取出含有生物指示剂的测试包;打开散热5分钟后才能取出生物指示剂..同时在压碎安瓿之前;让生物指示剂在培养锅外再冷却10分钟后才能压碎;然后进行生物培养..6、检查生物指示剂标签上的化学指示剂;颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理..该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的;如果化学指示剂没有变化;请检查灭菌过程..7、戴上防护眼镜;挤碎安瓿;然后培养生物指示剂..详细步骤请参阅3MATTEST290培养锅操作说明..8、每次培养须同时培养一个未灭菌过的生物指示剂进行阳性对照;阳性对照生物指示剂与经过灭菌处理的生物指示剂为相同生产日期和批号..阳性对照的目的是保证：1正确的培养条件2指示剂的活性不适当的贮存条件可能影响有效期内的指示剂活性33MATTEST290培养锅功能完好9、在3MATTEST290培养锅培养温度62+/-20C内;培养阳性对照和已处理的指示剂3小时;读出最终结果..阳性对照必须得出荧光阳性结果阅读器显示为红灯或+;如阳性对照读出荧光阴性绿灯或-;应检查培养锅温度和操作过程;直至阳性对照为阳性结果;生物监测的结果才是有效的..对于经过灭菌处理的指示剂;荧光阳性红灯或+表明灭菌过程失败;荧光阴性绿灯或-表明灭菌过程合格..10、如果需要通过颜色变化检测生物监测结果;应将生物指示剂放在培养锅内继续培养..同时随时监测阳性结果的出现;如8、12、24;直至168小时7天;最终视觉效果应在168小时7天得出..黄色表明细菌生长;灭菌过程失败..168小时7天没有颜色变化培养基为紫色表明灭菌过程合格..11、对任何为阳性生物监测结果应立即采取行动;如追回同锅次的灭菌物品;和寻找原因..直至生物指示剂的结果呈阴性..注意事项:冷却之前压碎或过度处理生物指示剂可能导致玻璃安瓿的破碎;飞溅的碎屑会使人员受伤;因此建议在从灭菌器内取出生物指示剂时戴防护眼镜和手套;在压碎生物指示剂时也需要戴防护眼镜..禁忌：该生物指示剂不能用于121℃预真空和132℃下排气压力蒸汽灭菌锅;及干热、化学蒸汽、环氧乙烷和其他的低温灭菌过程的生物监测..。

生物指示剂使用方法

生物指示剂使用方法生物指示剂是一种用来检测生物体活性、生长情况或生物学过程的工具。

根据不同的应用目的和需要，生物指示剂可以是细菌、酵母、植物细胞等。

下面将详细介绍生物指示剂的使用方法。

首先，使用生物指示剂前需要准备好培养基，并确保培养基的成分符合需要。

培养基是供生物指示剂生长发育所必需的营养物质，可通过配制或购买得到。

通常的培养基成分包括碳源、氮源、生长因子、无机盐等。

根据具体需求，可以添加适当的药品或抗生素以防止细菌污染。

接着，取出所需的生物指示剂，可以是培养基上生长的细菌或培养好的酵母细胞等。

要保证生物指示剂的纯度和活性，可以通过无菌技术操作来确保。

然后，在制备好的培养基上均匀涂布生物指示剂。

可以使用吸管、滴管或移液器等工具将生物指示剂均匀涂布在培养基表面。

为了确保涂布的均匀性，可以采用十字交叉或螺旋形涂布法，将生物指示剂涂布在培养基的不同位置。

接下来，将涂布好生物指示剂的培养基放置在适当的温度和湿度条件下进行培养。

不同的生物指示剂对培养条件有不同的要求，需要根据实验和应用目的进行合理调整。

通常情况下，细菌和酵母的培养温度为30-37摄氏度，湿度为相对湿度80-90%。

在培养过程中，需要定期观察生物指示剂的生长情况和表现。

可以通过目测、显微镜观察或光密度测定等方法来评估生物指示剂的活性和生长情况。

观察指标可以根据实验目的和应用需求来确定，例如细菌生长的菌落形态、颜色、大小等。

最后，根据实验或应用的需要，可以选择在生物指示剂生长达到一定程度后进行各种实验或应用。

例如，可以用生物指示剂来测试特定物质的抗菌活性、抗真菌活性、细胞毒性等。

需要注意的是，在使用生物指示剂的过程中，应该注意无菌操作，避免外源性细菌或真菌的污染。

同时，要严格按照实验室和安全卫生要求进行操作，避免对人体和环境造成危害。

总结起来，生物指示剂的使用方法包括准备培养基、涂布生物指示剂、培养、观察和实验等步骤。

通过合理操作和观察，可以使用生物指示剂来检测生物体活性、生长情况或生物学过程。

型生物指示剂培养器安全操作及保养规程

型生物指示剂培养器安全操作及保养规程1. 前言本文档旨在提供型生物指示剂（以下简称指示剂）培养器的安全操作和保养规程，确保工作人员的安全以及设备的正常运行。

2. 指示剂培养器概述指示剂培养器是一种用于培养和检测微生物指示剂的设备，用于验证灭菌设备（如灭菌器、灭菌包装机等）的灭菌效果。

其操作方法和使用注意事项如下。

3. 安全操作规程3.1 设备检查每次使用指示剂培养器之前，都应仔细检查设备是否完好无损。

检查包括但不限于以下内容：•确保电源线和插头没有损坏或暴露，电气设备正常工作；•检查培养器外壳有无破损或漏电等安全隐患；•确保设备的显示屏和按钮正常工作；•检查设备内部无异味或污染。

3.2 就位操作在使用指示剂培养器前，需要进行以下就位操作：•将设备放置在干燥、通风良好的工作台上；•确保周围环境没有易燃或易爆物品，确保设备周围有足够的空间；•确保设备接地良好，避免静电造成的危险；•确保设备连接正常、稳定，避免因连接不良导致的操作失败。

3.3 指示剂操作操作指示剂培养器需要遵循以下步骤：1.打开设备电源，等待设备初始化完成；2.根据指示剂培养器的说明书，将指示剂放入设备指定位置；3.关闭设备的扉门，并确保扉门安全锁定；4.根据指示剂培养器的设置要求，设置好培养时间和温度等参数；5.按下设备的启动按钮，开始培养过程；6.在培养过程中，不得随意打开扉门或对设备进行其他操作；7.培养结束后，根据指示剂的结果，进行相应的处理。

3.4 关机和清洁在使用完指示剂培养器后，需进行以下关机和清洁操作：1.关闭设备电源，确保设备处于关机状态；2.使用软布或纸巾清理设备的外壳和扉门，去除污垢和指纹等；3.定期对设备进行深度清洁，包括内部的灭菌室等。

4. 设备保养规程为了保证指示剂培养器的正常运行和延长设备的使用寿命，需要进行以下保养工作：1.定期检查设备的电源线和插头，确保连接良好并没有损坏；2.定期对设备进行内部和外部的清洁，去除灰尘和污垢；3.检查设备的过滤器和传感器等部件，确保其正常工作；4.定期检查设备的温度、湿度和压力等参数，确保其准确性；5.根据设备说明书，定期更换设备的耗材和易损件；6.遵循设备的操作指南，避免错误使用导致的设备故障。

QCP0001028 菌种和生物指示剂使用管理规程

目的：对菌种和生物指剂进行有效的及安全规范的使用范围：无菌检查、微生物限度检查和抗生素检测用菌种，灭菌设备质量监测用生物指示剂职责：菌种和生物指示剂管理使用人员对本规程负责规程：1、菌种1.1菌种管理1.1.1根据定期检查的结果，按时向省级药检所、卫生防疫站采购需用的标准菌种，并做好登记。

1.1.2以购入的菌种作必要的原始鉴定，主要通过观察菌落形态特征和革兰氏染色镜检。

鉴定结果出来后做好记录并对符合规定的菌种进行编号、贴上标签标明有效期等。

1.1.3菌种需单独放置于2~8℃冰箱内保藏。

1.1.4视细菌的生长情况，对菌种进行传代接种，正常情况下芽孢杆菌每3~6个月传代接种一次，其他细菌每月传代接种一次，酵母菌每4~6个月传代接种一次，丝状真菌每4个月传代接种一次，一般菌种购入后传代接种2次。

每次传代各接种2支试管，一支工作中使用，另一支作为备用及下一次传代使用。

1.1.5对于超出有效期的菌种，应按规定予以销毁，并做好记录。

1.1.6菌种应有专人保管，在使用时，保管人应作好菌种的使用记录1.2菌种的使用1.2.1菌种必须在有效期才能使用1.2.2每次菌种使用前应先将菌种从冰箱内取出在室温中复苏一段时间，一般为20分钟，以确保菌种在使用中的质量。

1.2.3菌种在使用过程中应做到安全、正确，按标准操作规程操作，以免影响检验工作及污染菌种和环境。

1.3菌种的处理1.3.1使用后的菌种经121℃30分钟灭菌处理，废液排入污水站。

1.4菌种的管理、使用、处理应有登记。

（见附录一、附录二）2、生物指示剂2.1生物指示剂的管理根据使用情况按时采购所需的生物指示剂。

生物指示剂应有专人保管，按说明书给出保存条件保存，使用时应做好相应的领用和使用记录，由于生物指示剂中含有活的微生物芽胞，对于使用后颜色的指示剂和超出使用期的指示剂必须经高压灭菌后方可遗弃。

2.2生物指示剂的使用方法2.2.1压力蒸汽灭菌生物指示剂：非致病性嗜热肪芽胞（ATCC7953）制成的蓝紫色液体2.2.1.1使用方法应用于药品、生物制品、无菌衣、包装材料、敷料等方面的压力蒸汽灭菌的质量监控和验证。

SMP-QC-0031-00生物指示剂标准管理规程

1.0 目的1.1规范生测组对生物指示剂的接收、质量检查、储藏、使用、销毁标准操作规程。

2.0 范围2.1验证或监控用生物指示剂的管理。

3.0 职责3.1质量控制（QC）部对本操作规程实施负责。

4.0 定义生物指示剂简称BI，是一类特殊的活微生物制品，是对特定灭菌工艺有一定耐受性并且能够定量测定灭菌效力的微生物制剂，可用于确定灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。

5.0 规程5.1生物指示剂管理流程图：5.2生物指示剂的接收5.2.1根据验证要求，确定所需要的生物指示剂。

新购入的生物指示剂应由生测组组长接收，购买的生物指示剂应附有相应的质量报告，内容包括微生物种类、孢子量、D 值、有效期等，仔细检查生物指示剂包装是否破损，有破损的剔出，核对生物指示剂的有效期，过期的剔出，核对生物指示剂是否与计划的相一致，不可用的剔出。

5.2.2登记：核对无误后及时填写《生物指示剂接收与发放记录》(R-SMP-QC-0031-02)内容包括生物指示剂名称、批号、数量、规格、生产厂家、接收日期、接收人、领用日期、领用人等。

5.3生物指示剂质量检验：测试内容包括含指示剂菌种形态学鉴别（Gram染色和芽孢染色）、载菌量检测和D值测定。

5.3.1生物指示剂菌种形态学鉴别（Gram染色和芽孢染色）5.3.1.1革兰氏染色操作步骤见《菌种鉴定标准操作规程》（SOP-QC-0009-00）。

5.3.1.2芽孢染色5.3.1.2.1染色试剂：5％孔雀绿水溶液、0.5％番红液5.3.1.2.2染色步骤5.3.1.2.2.1在载玻片上滴上一滴的超纯水，用无菌接种环挑取一颗菌落均匀涂开；5.3.1.2.2.2将载玻片通过酒精灯火焰上方快速来回 2～3 次使之干燥、固定；5.3.1.2.2.3涂片冷却后，滴加5％孔雀绿水溶液，微火加热，使冒蒸汽，但不干涸（随时补加染液）保持 5min；5.3.1.2.2.4倾去染液，待载玻片冷却后用已灭菌去离子水冲洗涂片至孔雀绿不再褪色为止；5.3.1.2.2.5在涂片上方滴加 0.5％番红液复染 1min 后水洗；5.3.1.2.2.6用滤纸吸干后镜检。

M压力灭菌用生物指示剂的使用方法

M压力灭菌用生物指示剂的使用方法集团标准化小组：[VVOPPT-JOPP28-JPPTL98-LOPPNN]压力灭菌用生物指示剂1262该压力蒸汽灭菌生物培养指示剂用于压力蒸汽灭菌效果的生物监测(包括下排气锅和预真空锅);通过培养基颜色变化，反应嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌生物监测结果。

1.将压力蒸汽灭菌生物培养指示剂放于一标准测试包中;2.按照国家规范,分别将测试包放于锅内不同位置;3.灭菌完毕,取出该生物指示剂;4.挤破内含的安瓿,与一支对照管一起放于56℃培养锅内培养;48小时后阅读结果。

结果阅读：1.培养后指示管不变色(呈紫色),表示灭菌通过;2.培养后指示管变色(呈黄色),表示灭菌不通过,(必须及时查出灭菌失败原因)。

3.同时培养的对照管应为阳性(呈黄色),如阴性,可能的原因为:培养条件不符合要求;生物指示剂有问题;(应及时查出阴性原因)。

注意事项：1.灭菌完毕,含生物指示剂的包裹很热并有一定压力;需至少冷却10分钟以上,否则可能引起塑料管内的安瓿破裂,飞溅的碎片导致损伤;2.只有对照管为阳性,其生物监测结果才算有效。

3.贮存于室温:15-30℃;相对湿度为35-60%;避免靠近灭菌器和化学消毒剂。

1292该生物指示剂可用以121℃下排气和132℃预真空压力蒸汽灭菌锅。

?3MATTESTTM压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速)在与3MATTEST290培养锅共用时,通过酶活性的灭活与否，探测嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌结果。

使用方法:?1、在生物指示剂标签上注明灭菌器锅号,负荷数量,灭菌日期;不要在指示剂的瓶或盖上另贴一个标签。

将生物指示剂放于一个标准测试包内，并置于最难灭菌的位置。

2、将含有生物指示剂的测试包放在灭菌器最难灭菌的位置，通常是灭菌器底层，近门或排气口上面。

3、正常装载。

4、灭菌循环完毕,取出生物指示剂。

5、灭菌结束后，从灭菌器内取出含有生物指示剂的测试包，打开散热5分钟后才能取出生物指示剂。

ISO13485体系生物指示剂活菌含量检验规程

生物指示剂活菌数含量检验规程1.目的：制订生物指示剂活菌数含量检验规程，规范及指导生物指示剂（枯草芽孢杆菌菌片）样本中含有的活菌数量的测定。

2.范围：适用于菌片活菌数确认。

3.术语和定义：无4.职责：质量部负责实施。

5.内容：5.1仪器设备生物安全柜、电热恒温培养箱、电炉、压力蒸汽灭菌器、鼓风干燥箱、电子天平、电热恒温水浴锅。

5.2操作方法a.每批菌片抽取3个菌片样品试验。

b.按要求对检验操作用具进行制备及灭菌，以下操作严格按无菌要求进行。

c.将菌片投入5.0ml 已灭菌的0.9%氯化钠溶液的无菌试管中，然后在手掌上用力振敲80次，直到菌片浸渍成浆状，再往试管中加入5.0ml0.9%无菌氯化钠溶液，再振摇1分钟。

形成1:10的菌液，作为①管。

d.按稀释级别（次数）需要，准备相应数量的试管，将试管分别排列在试管架上，每管加入9ml 已灭菌的0.9%氯化钠溶液，从左到右在试管上标上序号。

e.用无菌刻度吸管从①管内吸取1ml混匀后的菌液样本，加至②管内。

f.将②管依照前面方法在手掌上用力振敲80次混匀，再吸取出1ml加入③管内，依照此方法，直至最后一管。

g.选择适稀释度试管，以吸取其中混合均匀的菌液1ml加入无菌平皿中，每一稀释度接种3个平皿，需接种3个不同稀释度，平皿加样前，应先按组编号，以免弄混。

h.将冷至40℃～45℃的熔化营养基倒入已加入样液的平皿中，每平皿15～20ml。

i.倒置平皿35±2℃的温度下培养7天。

到达规定培养时间，应立即计数。

如果不能立即计数，应将平板放置于0~4℃，但不得超过24小时。

j.计数时应选取菌落数在30~300之间的平板。

k 若有两个稀释度均在30~300之间时，应以二者的比值（比值为高稀释级的菌落数乘以稀释倍数的值除以低稀释级的菌落数乘以稀释倍数的值）决定，比值小于或等于2时，以两个稀释级的菌落数乘以稀释倍数的均值报告菌数；比值大于2但不超过5时，以低级的菌落数乘以稀释倍数的值报告菌数；当出现比值大于5时或高稀释级的菌落数大于或等于低稀释级的菌落数等异常情况时，应查明原因再行检查。

0002015-01 生物指示剂(BI)管理规程

目录1. 目的 (3)2. 范围 (3)3. 定义 (3)4. 职责 (3)5. 程序 (3)6. 相关文件 (5)7. 附件 (5)8. 历史记录 (5)9. 发放部门 (5)1.目的建立生物指示剂管理规程，加强对生物指示剂购入、使用等的管理，保证生物指示剂在预定的质量状态，保证检验结果的准确和可信。

2.范围适用于广州科锐特生物科技有限公司质量控制实验室生物指示剂（BI）的管理。

3.定义3.1生物指示剂（Biological Indicators）：简称BI，是一类特殊的活微生物制品，是对特定灭菌工艺有一定耐受性并且能够定量测定灭菌效力的微生物制剂，可用于确定灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。

生物指示剂按用途可分为湿热灭菌用生物指示剂、干热灭菌用生物指示剂、离子辐射用生物指示剂、环氧乙烷灭菌生物指示剂、液态过氧化氢（VPHP）灭菌用生物指示剂。

生物指示剂按形态可分芽孢条（Spore Strip）、芽孢悬浮液（Spore Suspension）、自含型生物指示剂（Self-contained Indicator）。

3.2COA：产品质量检验报告书。

4.职责4.1质量控制部负责本文件的起草、修订、审核、培训及执行。

4.2质量保证部负责本文件的审核及文件执行过程中的监督。

4.3质量负责人负责本文件的审批。

5.程序5.1生物指示剂的申购5.1.1生物指示剂的使用人员应根据验证要求，选择合适的生物指示剂，应在生物指示剂还有一定的库存的时候，根据日后的验证需求，提出生物指示剂合理的购买数量。

5.1.2供应商需能够提供产品的COA，COA中需包括微生物种类、孢子量、D值、有效期等内容。

5.2生物指示剂的接收5.2.1新购入的生物指示剂由生物安全管理员接收，接收时需核对COA中微生物种类、孢子量和D值等内容，查看生物指示剂的规格是否与计划的一致，不可用的剔出；仔细检查生物指示剂包装是否破损，有破损的剔出；核对生物指示剂的有效期，过期的剔出。

生物指示剂培养器安全操作及保养规程

生物指示剂培养器安全操作及保养规程生物指示剂依赖于生物学特性以验证灭菌流程的有效性。

在这个过程中，个体健康和环境的安全都是非常重要的。

因此正确的使用和保养生物指示剂培养器非常重要。

本文将介绍生物指示剂培养器的安全操作和保养规程，以确保正确的进行生物指示剂实验。

安全操作预防和减少实验人员的潜在风险1.个人防护。

在接触生物指示剂和设备时，实验人员应该使用所需要的防护设备。

穿戴适合的实验室衣服、实验手套，必要时佩戴护目镜和面罩，以预防可能的实验伤害和病毒感染。

2.防护设备有效性检查。

检查防护设备的密封性和防水性。

例如，穿戴手套时，应检查手套周围是否有泄漏;佩戴口罩时，应检查口罩的鼻夹和面罩的密封性。

如有问题应及时更换防护设备，以确保设备的有效性和实验人员个人安全。

3.咨询专家。

需要了解并掌握有关生物指示剂培养器操作的规范化和标准的信息。

如果对有关设备操作的问题不确定，应请教专家或有经验的技术人员进行指导。

这可以提高实验的质量，并减少实验员的可能错误。

4.操作时格外小心。

在启动生物指示剂培养器和进行实验操作前，需要确认装置没有瑕疵和损伤。

并避免液体泼溅及高温的接近。

如果需要移动或安装设备，则应使用合适的车辆或吊具以确保操作及设备安全。

按规范使用生物指示剂1.确认实验室设备是否可以和指示剂配合使用。

在使用生物指示剂进行灭菌时，应确认类型和批号符合实验要求，并确定设备和指示剂是否相匹配，以避免操作上的失误和安全事故的发生。

2.严格按照指示使用。

按照说明书精确的倒入无菌水中进行培养。

需要非常小心和精确，以避免污染或误施。

相应的热循环曲线应该严格按照生物指示剂说明书中的要求设定。

3.妥善处理并报告。

实验完成后，应对生物指示剂进行妥善的处理和清洁，确认指示剂是否被灭活和无活菌, 并及时报告实验结果。

保养规程为了保证生物指示剂样品的完整性和试用期限内体外的存活率，本文提供以下保养规程：1.在每次使用生物指示剂后，应及时将培养容器和配件进行清洁处理。

自含式压力蒸汽灭菌生物指示剂使用方法

自含式压力蒸汽灭菌生物指示剂使用方法
以下是自含式压力蒸汽灭菌生物指示剂的使用方法：
1. 按照灭菌器说明书要求，将生物指示剂放置在灭菌器内不易被灭菌的部位。

2. 按照规定的灭菌温度和时间进行灭菌处理。

3. 灭菌完毕后，将生物指示剂取出，确认标签上的化学指示剂由蓝色变成黑色后，放置15分钟以上冷却至室温。

4. 将生物指示剂垂直放入夹子中，直到外管底部安定，手指按夹子上部将内部玻璃管夹破，使菌片浸在培养基中。

5. 将生物指示剂竖直放入56℃恒温培养箱中，同时放1支未经灭菌程序处
理的生物指示剂作为阳性对照，一并培养48小时，观察结果。

6. 确认灭菌效果后，将标签取下粘贴在记录薄留存。

使用过程中应注意安全，按照说明书和相关规定进行操作，如有疑问，建议咨询专业人士。

生物指示剂管理规程(精编文档).doc

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范围本规程适用于公司确认与验证及监控生物指示剂使用管理。

责任生物指示剂使用部门负责采购申请填写及按照说明书要求使用、储存、销毁生物指示剂，质量部QA负责监督和检查执行情况。

内容1.生物指示剂概念生物指示剂（BI）：系一类特殊的活微生物制品，可用于确认灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。

用于灭菌验证中的生物指示剂一般是细菌的孢子。

2.生物指示剂形式2.1 一定数量的孢子附着在惰性载体上，如滤纸条、玻片、不锈钢、塑料制品等。

2.2 孢子悬浮液密封于安瓿中。

3.生物指示剂特性3.1 具有较高的耐受性、贮存稳定性、批与批之间的一致性、无致病性、易于培养和制备的细菌芽孢。

3.2 耐受性要高于灭菌前产品中污染菌的耐受性。

3.3 符合地方、国内、国际相关法规要求。

3.4 可根据灭菌程序的设计要求而制备。

4. 生物指示剂分类4.1 第一类生物指示剂：由微生物孢子和载体包装而成。

4.2 第二类生物指示剂：由可接种在产品表面或内部的孢子悬液构成。

4.3 第三类生物指示剂：包含微生物恢复生长培养基的类型。

7. 生物指示剂采购、验收、质量信息登记7.1 生物指示剂使用部门根据年度验证总计划内容及临时需求说明填写生物指示剂购买申请，采购部门根据申请从有资质的生产厂家及供应商处购得相应生物指示剂，购买的生物指示剂应附有相应的合格质量检验报告单。

7.2 生物指示剂进厂验收部门为库房，库房人员应该仔细核对品名、规格、批号、数量、生产日期、有效期、生产厂家，检查外包装应完好，封口严密，标签完整，内容清晰，核对无误后填写《物料验收记录》（1））和《物料台账》（1），不合格的生物指示剂退回厂家处理。

7.3 生物指示剂质量信息登记部门为领用部门，登记内容包括生物指示剂名称，生产厂家，生产批号及生产日期，失效日期，Z值，储存环境和销毁方法。

R22058-A 生物指示剂管理规程

北京百慧生化制药有限责任公司工作标准文件名称生物指示剂管理规程文件编号22058-A 编制人编制部门编制日期审核人审核部门审核日期批准人批准部门批准日期生效日期年月日版本第2版颁发部门质量管理部制作备份1份分发部门质量管理部1 目的：为了安全、合理地使用生物指示剂，加强生物指示剂控制管理，制定本规程。

2 范围：本规程适用于干热灭菌、湿热灭菌验证或其他灭菌规程用生物指示剂的选择、购买、核对领取、保存、使用、销毁等。

3 责任：QC检验员对本规程实施负责。

4 内容：4.1 操作依据：《中国药典》2015年版四部通则1421灭菌法；生物指示剂说明书。

4.2 指示剂定义：生物指示剂系一类特殊的活微生物制品，可用于确认灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。

用于灭菌验证中的生物指示剂一般是细菌的孢子。

4.2.1 制备生物指示剂用微生物的基本要求不同的灭菌方法使用不同的生物指示剂，制备生物指示剂所选用的微生物必须具备以下特性：4.2.1.1 菌种的耐受性应大于需灭菌物品中所有可能污染菌的耐受性。

4.2.1.2 菌种应无致病性。

4.2.1.3 菌株应稳定。

存活期长，易于保存。

4.2.1.4 易于培养。

若使用休眠孢子，生物指示剂中休眠孢子含量要在90%以上。

4.2.2 生物指示剂的制备4.2.2.1生物指示剂的制备应按一定的程序进行，制备前，需先确定所用微生物的特性，如D 值(微生物的耐热参数，系指一定温度下，将微生物杀灭90%所需的时间，以分钟表示）等。

菌株应用适宜的培养基进行培养。

培养物应制成悬浮液，其中孢子的数量应占优势，孢子应悬浮于无营养的液体中保存。

4.2.2.2 生物指示剂中包含一定数量的一种或多种孢子，可制成多种形式。

通常是将一定数量的孢子附着在惰性的载体上，如滤纸条、玻片、不锈钢、塑料制品等；孢子悬浮液也可密封于安瓿中；有的生物指示剂还配有培养基系统。

D 值除与灭菌条件相关外，还与微生物存在的环境有关。

压力蒸气灭菌生物指示剂使用操作规程

压力蒸气灭菌生物指示剂使用操作规程
压力蒸气灭菌生物指示剂采用非致病性嗜热脂肪菌芽胞（ATCC 7953）制成紫色液体。

使用该生物指示剂能正确反映压力蒸气灭菌过程中时间温度和灭菌效果之间的关系，适用于监测压力蒸气灭菌锅的效能，压力蒸气灭菌方法的正确性和压力蒸气灭菌效果的判断。

一、用途用于我院压力蒸气灭菌锅的灭菌质量监控与验证。

二、使用方法：
将生物指示剂和被灭菌物品一起放置在灭菌锅内，对二层装灭菌柜设3个点，上层中央部位1个点，下层前后部位各一个点，对三层装灭菌柜设5个点，上层与中央部位各1个点，下层前、中、后各1个点，每点置生物指示剂2支。

灭菌后取出。

直接置于56—60℃培养24—48小时，并另取一支未经灭菌生物指示剂一起培养，作为阳性对照。

三、结果判断
根据颜色判断灭菌效果，培养后全部保持紫色灭菌合格。

若由紫色变为黄色判为不合格。

对照管应紫色变黄色为该指示剂有效。

四、耐热参数
芽胞含量应在5×105-6/支，121℃压力蒸气灭菌死亡时间不超过19分钟，存活时间不少于3.9分钟。

五、规格
F0≥12 1.7×106cfu/支由上海鸿雍生物科技有限公司提供。

（63034135）。

压力蒸汽灭菌生物指示剂

压力蒸汽灭菌生物指示剂压力蒸汽灭菌生物指示剂是由嗜热指肪杆菌(ATCC 7953)芽孢菌片、恢复培养基和外管组成。

菌片含菌量为5.0× ,5.0× cfu/片。

生物指示剂的抗力符合国际标准和国家标准的规定:既在121?饱和蒸汽作用下，存活时间?3.9min，杀灭时间?19min，D 10 值1.3,1.9min。

【适用范围】适用于 121?下排气式压力蒸汽灭菌器、132?,134?预真空或脉动真空压力蒸汽灭菌136?台式或卡式压力蒸汽灭菌器灭菌效果的监测和制药工业、医院制剂生产等器、134?,各行业使用的压力蒸汽灭菌器灭菌效果的监测。

【使用方法】，，，1 使用时，将生物指示剂放入标准检测包的中心或待灭菌物品包的中心，置于灭菌器的难消毒的位置按规定的灭菌温度和时间进行灭菌处理。

2 灭菌完毕，即刻将生物指示剂取出，盖朝上垂直握于手中，用专门工具夹碎管内安瓶，让培养液流出浸没菌片，置于56?恒温培养箱内或配套的微型培养器内培养24小时观察初步结果，48小时观察最终结果，按规定每月至少用生物指示剂进行一次灭菌效果监测。

【结果判定】培养后生物指示剂中的溴甲酚紫培养液由紫色澄清液体变为黄色澄清液体即表示有菌生长，判定为灭菌不合格;培养液仍为紫色澄清液体为无菌生长，同时阳性对照管中的嗜热脂肪杆菌生长正常即培养液由紫色澄清液体变为黄色澄清液体，判定为灭菌合格。

【注意事项】1将生物指示剂管从灭菌器内取出或从冰箱内取出后，需在室温下放10min左右，再夹碎安瓿，以免过热或过冷夹碎外管。

2液体培养基的pH值低于7.0或高于7.5，均可使嗜热脂肪杆菌不能生长;3 培养温度须在56?,65?之间，否则可导致嗜热脂肪杆菌生长不良，或不能生长。

4 灭菌处理后，生物指示剂中的液体培养基颜色与压力蒸汽灭菌前比较会变浅，呈显浅紫色，这种变化属正常现象。

5 用恢复培养液在56?培养时间过长(72小时以上)，阳性对照管中培养液的黄色容易消退，培养液逐渐干燥，应注意每天观察，随时记录培养结果。

9207 灭菌用生物指示剂指导原则

9207 灭菌用生物指示剂指导原则生物指示剂是一种对特定灭菌程序有确定及稳定耐受性的特殊活微生物制成品，可用于灭菌设备的性能确认，特定物品的灭菌工艺研发、建立、验证，生产过程灭菌效果的监控，也可用于隔离系统和无菌洁净室除菌效果的验证评估等。

生物指示剂的分类生物指示剂主要有以下三种类型，其特征需符合《医疗保健产品灭菌生物指示物》GB 18281的要求。

(1)载体型生物指示剂该类生物指示剂是由微生物芽孢和载体经包装而成，载体可以是碟形或条状的滤纸、玻璃、塑料或其他材料。

载体和内层包装不得含有物理、化学或微生物的污染物，避免影响生物指示剂的性能和稳定性；不得被特定的灭菌工艺降解；能被灭菌介质(蒸汽、射线、化学试剂等)穿透并使灭菌介质与生物指示剂能充分接触。

载体和包装的设计应保证生物指示剂不受污染、并使其所含的微生物在贮存及运输中损失最小，且方便取样、转移和接种。

(2)芽孢悬液生物指示剂该类生物指示剂是将芽孢混悬于液体中。

若用于液体物品灭菌，必须测定生物指示剂在灭菌液体物品中的芽孢数和D值。

(3)自含式生物指示剂该类生物指示剂是由芽孢和能够恢复微生物生长的培养基组成的系统，其耐受性是针对整个系统而言。

系统中的培养基用于培养灭菌后的生物指示剂，应制定程序确认该培养基能保证残存微生物的生长。

自含式生物指示剂系统所用的材料不应含有或在使用过程释放出抑制残存微生物生长的物质。

该系统的设计应能够承受运输和使用过程中的影响，不发生破损，并使原始接种的微生物损失减少到最小。

生物指示剂用微生物的基本要求生物指示剂含有对灭菌模式有明确耐受性的微生物。

除了电离辐射外，微生物芽孢较菌体有更强的耐受性。

一般认为含芽孢的细菌更适合用于制备生物指示剂。

不同灭菌工艺使用不同的生物指示剂，制备生物指示剂所选用的微生物应具备以下特性。

(1)菌种的耐受性应大于需灭菌物品中所有可能污染菌的耐受性。

(2)菌种应无致病性。

(3)菌株应稳定，存活期长，易于保存。

自含式生物指示剂安全操作及保养规程

自含式生物指示剂安全操作及保养规程1、引言自含式生物指示剂是医疗器械和手术器械灭菌的重要指示剂。

其操作使用要求高，需要规范性的保养与管理。

为更好的保证其使用效果和使用寿命，本文将介绍自含式生物指示剂的安全操作及保养规程。

2、自含式生物指示剂简介自含式生物指示剂是一种用于检测灭菌器具灭菌效果的化学标志物。

其结构主要由外层聚乙烯膜和内囊层、膜层、生物指示剂层组成。

其内部容纳有被高温杀灭的高致病性的芽孢，芽孢外覆有壳，具有一定的韧性。

在使用时，将自含式生物指示剂放入灭菌器内部，随着高温作用，芽孢被杀灭，有色底板为正常情况下变色，若灭菌器内温度过低，则芽孢不会被杀灭，底板不变色。

3、使用前安全操作3.1 环境检测对于自含式生物指示剂使用前，需要对灭菌器内部环境进行检测，确保温度，压力等环境参数正常。

3.2 管理人员操作指南在使用前，使用人员需要经过专业培训才可操作自含式生物指示剂。

使用人员需按照灭菌器的要求操作，正确放置自含式生物指示剂，确保其不会移位。

同时，使用人员需佩戴好手套等防护用品，避免芽孢杀死后直接接触自身，对身体造成危害。

4、使用后安全操作4.1 取出操作使用人员在使用后，应按照器具内部结构取出自含式生物指示剂，并将其送至专门的管理人员处进行处理，避免芽孢对环境造成污染。

4.2 处理方式使用人员在取出自含式生物指示剂后，需将其送至专门的管理人员处，由管理人员按照危险废物的处理方式进行处理，避免芽孢对环境造成污染。

5、保养规程5.1 储存条件自含式生物指示剂在储存时需避免与异物接触，存放温度条件在0℃~40℃之间。

同时，自含式生物指示剂在储存时需避免曝晒和潮湿。

5.2 盘点管理使用单位需定期进行自含式生物指示剂的盘点管理，确保数量准确，及时对丢失或者过期的指示剂进行处理。

5.3 保养管理为确保自含式生物指示剂的使用寿命和使用效果，需进行定期保养。

在使用自含式生物指示剂时，使用人员应消毒器械，避免夹杂异物，同时需按照使用说明进行正确的操作，避免损坏。

生物指示剂使用方法

生物指示剂使用方法生物指示剂是一种用于监测环境中生物学有效性的工具。

它们通常是一些微生物的菌株，可以通过对其生长、存活或其他生物学特性的观察，来评估环境中的潜在生物毒性、药物活性或其他有关生物过程的参数。

使用生物指示剂可以帮助研究人员更好地了解环境中的生物活性，并在环境、医药和其他领域中提供有用的信息。

下面是生物指示剂的使用方法：1. 筛选适合的生物指示剂：在选择生物指示剂之前，需要根据具体的应用领域和目标，确定需要监测的生物学参数。

例如，在环境中评估某种污染物的毒性时，可以选择对该污染物敏感的微生物菌株作为生物指示剂。

此外，还需要考虑生物指示剂的生长条件、稳定性和可重复性等因素。

2. 准备生物指示剂培养基：为了保证生物指示剂的生长和繁殖，需要准备适当的培养基。

培养基的成分应根据生物指示剂的需求进行调整，以提供必要的营养物质和生长条件。

一般来说，培养基应包含碳源、氮源、矿物盐和水。

同时，还应注意避免污染和细菌生长。

3. 培养生物指示剂：将所选的生物指示剂接种到培养基中，并提供适当的环境条件进行培养。

这些环境条件包括温度、湿度、氧气浓度和pH值等。

根据生物指示剂的要求进行培养时间，通常需要几小时到几天不等。

4. 添加样品：在生物指示剂达到适当的生长状态后，可以将待测样品添加到培养基中。

样品可以是土壤、水样、空气等。

在添加样品之前，应确保样品经过适当的处理和净化，以消除可能的干扰因素。

5. 观察和测量生物指示剂的反应：在加入样品后，观察并测量生物指示剂的生长、存活或其他生物学特性的变化。

这些变化可以是生物指示剂数量的增加或减少、菌落形成的变化等。

通过对生物指示剂的反应进行监测和分析，可以评估样品中存在的生物活性或其他相关参数。

6. 数据分析和结果解读：根据生物指示剂的反应结果，进行数据分析和结果解读。

根据具体的研究目的，可以通过比较不同样品的反应结果，来评估样品之间的差异或对比不同条件下的变化。

通过数据分析和结果解读，可以获得有关样品中生物活性的信息，并为后续研究或决策提供指导。