血清总胆固醇浓度测定(精)
血清总胆固醇的测定
实验原理
• 第一步：血清胆固醇酯可被胆固醇酯酶水 解为游离胆固醇和游离脂肪酸 。
• 第二步：胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作 用下生成△4-胆甾烯酮和H2O2。
• 第三步：H2O2在4-氨基安替比林和酚存在 时，经过氧化物酶催化，反应生成苯醌亚 胺非那腙的红色醌类化合物，其颜色深浅 与标本中TC含量成正比。
• 鱼类。乌鱼又称黑鱼性寒味甘，能补脾利水同时 它又是一种高蛋白低脂肪食品。青鱼性平味甘， 能补气健脾化湿。鳆鱼又称鲍鱼，肉性平味甘咸， 蛋白质含量极高，而脂肪含量很低的清补营养品。 黄鳝甘温，古代医家认为它有添精益髓，又有通 血脉、壮筋骨的作用同时它又是一种低脂食品。 另外，如黄瓜、海带、羊栖菜、海藻、槐花等食 物，均有降低血中胆固醇的效果。
试剂
• 基础液：100ml 0.1mol/L 磷酸缓冲液 （pH=6.7）(含胆酸钠129mg),4-氨基安替 比林16mg,苯酚132mg,TritionX-100 0.2ml
• 酶试剂应用液：临用前取商品三酶（胆固 醇酯酶，胆固醇氧化酶，过氧化物酶）合 剂1ml,加基础液30ml,混匀既得
• 胆固醇标准液（5.17mmol/L）:精准称取胆 固醇200mg,用纯无水乙醇溶解，用乙醇定 容至100ml，分装4ºC保存，临用时取出
注意事项
• 1、最后加酶试剂，各管反应时间应一致； • 2、比色应在30min内完成； • 3、试管在操作前尽量保持干燥； • 4、试剂中酶的质量影响测定结果 ； • 5、若需检测游离胆固醇浓度，将酶试剂成
分中去掉胆固醇酯酶即可。
• 此法中血红蛋白高于2g/L时引起正干扰；胆 红素高于0.1g/L时有明显负干扰；血中维生 素C与甲基多巴浓度高于治疗水平时，会使 结果降低。高TG血症对本法无明显影响。 检测TC的血清(浆)标本密闭保存时，在4℃ 可稳定1周，－20℃可稳定半年以上。
血清总胆固醇测定实验报告
血清总胆固醇测定实验报告血清总胆固醇测定实验报告胆固醇是一种脂类物质，它在人体中起着重要的生理作用。
然而，当胆固醇水平过高时，就会增加心血管疾病的风险。
因此，了解自己的胆固醇水平对于保持健康至关重要。
本实验旨在测定血清中的总胆固醇水平，并通过结果分析对参与者的健康状况进行评估。
实验材料和方法：1. 实验材料：- 血清样本- 高精度血清胆固醇测定试剂盒- 试剂盒使用说明书- 分光光度计- 定量移液器和移液枪- 试管和离心管2. 实验步骤：a. 收集参与者的血液样本，并将其离心分离血清。
b. 根据试剂盒使用说明书，准备所需试剂和标准品。
c. 将标准品和血清样本分别加入试管中，并按照说明书中的步骤进行试剂添加和混合。
d. 使用分光光度计测量各试管中的吸光度，并记录结果。
e. 根据标准曲线计算出各样本中的总胆固醇浓度。
实验结果：通过实验测定，我们得到了参与者血清中的总胆固醇浓度。
根据标准曲线和试剂盒提供的计算公式，我们可以将各样本的吸光度值转换为胆固醇浓度。
根据实验数据，我们将参与者的胆固醇水平分为以下几个等级：1. 理想范围：参与者的胆固醇水平在正常范围内，表明其心血管健康状况良好。
他们应继续保持健康的生活方式，包括均衡的饮食、适当的运动和定期体检。
2. 边缘范围：参与者的胆固醇水平略高于正常范围，但尚未达到危险水平。
他们应该注意饮食结构，减少高胆固醇食物的摄入，并增加运动量。
此外，定期监测胆固醇水平也是必要的。
3. 高风险范围：参与者的胆固醇水平明显升高，表明他们存在心血管疾病的风险。
他们应立即采取行动，改变生活方式，如低脂饮食、戒烟、减少酒精摄入等。
此外，医生可能会建议他们接受进一步的检查和治疗。
实验讨论：通过本实验，我们不仅可以测定参与者血清中的总胆固醇水平，还可以根据结果评估其心血管健康状况。
然而，需要注意的是，本实验只是初步评估，并不能替代专业医生的诊断和建议。
对于高风险范围的参与者，他们应该咨询医生，制定个性化的治疗方案。
血清总胆固醇的测定实验报告
血清总胆固醇的测定实验报告实验报告
实验目的：
测定血清总胆固醇的浓度。
实验原理：
血清总胆固醇（total cholesterol, TC）可被酶促反应分析法（enzymatic reaction method）测定。
在反应液中加入胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶，使血清中的TC被水解成自由胆固醇和酯化胆固醇，同时释放出的氢过氧化物（H2O2）与4-氨基安替比林（4-AAP）和3,5-二溴-4-硝基苯磺酸（DHNS）在高温下作用形成紫色化合物，其吸光度与TC的浓度成正比。
实验原料：
1. TC标准品（10.0 mmol/L）
2. 4-AAP（0.5 mmol/L）
3. DHNS（0.65 mmol/L）
4. 胆固醇酯酶
5. 胆固醇氧化酶
6. 磷酸盐缓冲液（pH
7.4）
实验步骤：
1. 取血清标本1.0 mL，并用离心机离心10分钟，除去沉淀后得到澄清的血清。
2. 取1.0 mL澄清的血清加入10 μL胆固醇酯酶，放置于37℃恒温槽中加水浴反应30分钟。
3. 倒入10 μL胆固醇氧化酶，再加入2.0 mL磷酸盐缓冲液（pH 7.4），混匀。
4. 加入15 μL4-AAP和15 μLDHNS，混匀后在37℃恒温槽中加水浴反应10分钟。
5. 记录吸光度（A）值，以TC标准品作为对照，计算出血清中TC的浓度。
实验结果：
本实验测定血清总胆固醇的浓度为X mmol/L。
实验结论：
采用酶促反应分析法测定血清总胆固醇的浓度，结果可靠，该方法操作简便，对临床诊断有参考意义。
血清总胆固醇测定标准操作规程
血清总胆固醇测定标准操作规程1.检验原理：（氧化酶法）血清中总胆固醇（TC ）包括游离胆固醇（FC ）和胆固醇酯（CE ）两部分。
血清中胆固醇可被脂蛋白酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸（FFA ），胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成胆甾烯酮和过氧化氢，过氧化氢在4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸钠存在时，晶过氧化物酶（POD ）催化，反应生成苯醌亚胺非那腙的红色醌类化合物，其颜色深浅与标本中TC 含量成正比。
胆固醇酯+22O H −−−→−胆固醇酯酶胆固醇+脂肪酸 胆固醇+2O −−−−→−胆固醇氧化酶胆甾烯酮+22O H 222O H +4-AA+对羟基苯甲酸钠−−→−POD红色醌类物质+422O H 2.试剂主要组成成分3.样本要求：新鲜无溶血血清。
在22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃可保存1年。
样本应避免反复冻融！4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程） 5参考范围：6.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V）的氯化钠溶液稀释样本。
6.2.单位换算：mg/dl=mmol/L×38.77.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊，或以水空白在500nm处吸光度大于0.080时不能使用。
8.试剂性能指标8.1试剂外观：无色透明或淡黄色液体，无悬浮物及沉淀。
8.2装量：不低于标识值。
8.3空白吸光度：在500nm处，光径1cm时，空白吸光度A≤0.0808.4线性区间：试剂的线性区间为[0.5-20.0]mmol/L，在此线性区间内：a）线性相关系数r应不小于0.9900；b)[2.0-20.0]mmol/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。
8.5准确度：使用具有溯源性的标准品进行测定，实测值与标识值的相对偏差应在±10%内。
8.6分析灵敏度：在500nm处，光径1cm时，测量已知浓度样品换算成1mmol/L 的总胆固醇时，吸光度变化△Ammol/L≥0.0028.7批内精密度：CV≤4.0%8.8批间差：R≤6.0%8.9稳定性：（2-8）℃下，原包装存放的试剂有效期为12个月.取到期后1个月的试剂进行测试，应满足1-8.7的要求。
总胆固醇实验报告
实验名称：血清总胆固醇测定实验目的：通过本实验，掌握血清总胆固醇的测定方法，了解血清总胆固醇在临床诊断和预防治疗中的重要性。
实验原理：血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）是血液中所有胆固醇的总和，包括游离胆固醇和胆固醇酯。
血清总胆固醇的测定方法主要有酶法、比色法、沉淀法等。
本实验采用酶法测定血清总胆固醇，其原理是利用胆固醇酯酶（Cholesterol Esterase）将胆固醇酯水解为游离胆固醇，然后利用胆固醇氧化酶（Cholesterol Oxidase）将游离胆固醇氧化为胆汁酸，最后在碱性条件下与磷钼酸反应生成磷钼蓝，通过比色法测定其吸光度，从而计算出血清总胆固醇的浓度。
实验材料：1. 血清样品：取自健康志愿者，经离心分离后获得。
2. 胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、磷酸盐缓冲液、磷钼酸、抗坏血酸、硫酸铜、邻苯二甲酸氢钾、氯仿、无水乙醇等试剂。
3. 仪器：酶标仪、移液器、恒温水浴锅、离心机等。
实验步骤：1. 样品处理：取血清样品1.0ml，加入氯仿和无水乙醇（1:2，V/V）混合液5.0ml，涡旋混合，离心10分钟，取上清液待测。
2. 标准曲线绘制：将胆固醇标准品配制成一系列浓度梯度的标准溶液，分别加入胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、磷酸盐缓冲液、磷钼酸等试剂，按照实验步骤进行操作，测定吸光度。
以胆固醇浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 样品测定：取处理后的血清样品，按照标准曲线绘制步骤进行操作，测定吸光度。
根据标准曲线，计算样品中血清总胆固醇的浓度。
实验结果：1. 标准曲线绘制：以胆固醇浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
结果显示，胆固醇浓度在0.5-10.0mg/dl范围内，吸光度与胆固醇浓度呈线性关系。
2. 样品测定：根据标准曲线，计算样品中血清总胆固醇的浓度为X mg/dl。
实验讨论：1. 血清总胆固醇是人体内重要的脂质成分，其浓度异常与心血管疾病、动脉粥样硬化等疾病密切相关。
血清总胆固醇(TC)的测定
血清总胆固醇（TC）的测定胆固醇（cholesterol）是体内主要脂类之一。
人体内胆固醇来源除由食物摄取外，也可体内合成。
人体除脑组织外，几乎所有组织都合成胆固醇，其中肝脏是合成胆固醇的主要场所。
肝脏不仅是合成胆固醇的主要场所，也是调节血浆胆固醇水平和胆固醇脂与游离胆固醇比例的场所。
血中胆固醇有两种形式，一种是和脂肪酸结合的，称为胆固醇酯，另一种是未和脂肪酸结合的，称为游离胆固醇。
血浆脂蛋白分子中的游离胆固醇，可以通过卵磷脂-胆固醇酰基转移酶（LCAT）催化作用而接受卵磷脂β-碳位上脂酰基而生成胆固醇酯。
LCAT是在肝脏中合成，因此，肝细胞损伤时，血浆胆固醇酯化作用减弱，血浆中的胆固醇酯浓度下降。
正常人血浆中胆固醇约1/3以a-脂蛋白的形式转运，2/3以β-脂蛋白形式转运，TC＝HDL-C+LDL-C+VLDL-C。
胆固醇是体内某些激素、维生素和胆汁酸等合成的原料。
肝脏中的胆固醇，约80％直接转化为胆酸，胆酸又与甘氨酸或牛磺酸生成胆汁酸，随胆汁进入肠内，对肠内脂类的消化吸收起重要作用。
肾上腺皮质内的胆固醇，经酶催化可转变成肾上腺皮质激素和性激素。
此外，胆固醇在人体皮肤内可以氧化脱氢生成7-脱氢胆固醇，再经紫外线照射生成维生素D3，它能促进钙、磷的吸收，有利于骨骼的生成。
血清中胆固醇的浓度可作为脂类代谢的指标，但脂类代谢又常与糖类和激素的代谢密切相关，故在其他物质代谢异常时也可影响血清胆固醇的浓度。
【原理】（CHOD-PAP法，又称氧化酶法）酯化的胆固醇经酶水解后，经胆固醇氧化酶氧化，所产生的H2O2与4-氨基安替比林和ESBmT反应生成紫红色色素，颜色深浅与胆固醇含量成正比。
【试剂组成】（液体双试剂）1．4-氨基安替比林；胆固醇酯酶；过氧化物酶；缓冲液。
2．胆固醇氧化酶；ESBmT；缓冲液。
【操作方法】1．样本/试剂体积比：S:R1:R2＝3:260:130。
2．反应类型：终点法、反应方向向上。
【PPT】高铁-硫酸显色法测定血清总胆固醇(精)
表1-6 标准K2CrO4 在不同波长的标准吸光度值 波长 A 波长 A 波长 A 波长 A 波长 A 220 0.4559 280 0.7235 340 0.3143 400 0.3872 460 0.0173 230 0.1675 290 0.4295 350 0.5528 410 0.1972 470 0.0083 240 0.2933 300 0.1518 360 0.8297 420 0.1261 480 0.0035 250 0.4962 310 0.0458 370 0.9914 430 0.0841 490 0.0009 260 0.6345 320 0.0620 380 0.9281 440 0.0535 500 0.0000 270 0.7447 330 0.1457 390 0.6841 450 0.0325
【计算】血清TC= A测/A标*5.17mmol/L 血清参考值 3.0-5.2mmol/L
【注意事项】 1.抽提液与显色液混合时产生大量的热，影响显色反应。 （1）在测定同一批标本是选用型号一致的试管，口径大的 试管便于快速混合。 （2）加入显色剂时，应使之与异丙醇分两层，然后迅速混 合，是完全显色。 （3）显色剂要逐管加入快速混合，不可成批加入。 2. 反应中所用试管和比色杯应清洁干燥。 3. 防止浓硫酸吸水影响检测结果。
【思考题】 为什么要进行分光光度计的波长校正？如何进行分 光光度计的波长校正？
【目的要求】 1.掌握血浆胆固醇总量的测定方法，包括脂
溶性物质的定量提取，使用易燃有机溶剂 的注意事项及胆固醇的显色。 2.熟悉测定原理及影响因素。 3.了解血浆胆固醇总量的正常范围及临床意 义。
【实验原理】 用以丙醇沉淀血清蛋白质，提取上清液中的 胆固醇，再用氧化铝吸附胆红素、磷脂、 甘油等干扰物，离心后于上清液中加入高 铁-硫酸试剂，反应产物显紫红色，其显色 程度与TC成都成正比。
血清总胆固醇的测定实验报告
血清总胆固醇的测定实验报告胆固醇是人体内一种重要的脂质物质，它在维持细胞膜的完整性、合成激素和胆汁酸等方面发挥着重要作用。
然而，过高的血清总胆固醇水平会增加心脑血管疾病的风险。
因此，及时测定血清总胆固醇水平对于预防和治疗心脑血管疾病具有重要意义。
本实验旨在通过测定血清中总胆固醇的含量，掌握其测定方法，并了解不同因素对血清总胆固醇含量的影响，为临床诊断和研究提供参考。
1. 实验原理。
本实验采用酶法测定血清总胆固醇含量。
首先，将血清样本与试剂中的胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶发生反应，将胆固醇酯水解成游离的胆固醇和脂肪酸，然后游离的胆固醇与试剂中的胆固醇氧化酶再次发生反应，生成过氧化物酶，最终生成带有颜色的化合物。
通过测定产生的有色产物的光密度，即可计算出血清中总胆固醇的含量。
2. 实验步骤。
（1）取适量血清样本，离心沉淀，取上清液备用。
（2）将标准品和上清液分别加入反应管中，加入试剂A和试剂B，混匀后放置37℃恒温水浴中反应一定时间。
（3）加入硫酸后，混匀放置10min，再加入试剂C混匀后放置2min。
（4）测定吸光度值，并根据标准曲线计算出血清总胆固醇的含量。
3. 实验结果。
通过实验测定，得出不同血清样本中总胆固醇的含量分别为X mg/dL、Ymg/dL和Z mg/dL。
根据实验结果，我们可以得出……（根据实验结果进行分析和讨论）。
4. 实验结论。
本实验通过酶法测定了血清中总胆固醇的含量，结果表明……（根据实验结果进行结论）。
5. 实验注意事项。
（1）在实验过程中，要注意血清样本的保存和处理，避免样本受到污染或变质。
（2）在试剂配制和使用过程中，要按照相关操作规程，严格控制试剂的质量和使用量。
（3）实验操作过程中，要注意实验室安全，避免发生意外。
6. 实验意义和应用。
本实验方法可以准确测定血清中总胆固醇的含量，为临床诊断和研究提供了重要的参考数据。
同时，也为进一步研究血清总胆固醇与心脑血管疾病的关系提供了实验基础。
实验三、血清中总胆固醇的测定
三、实验器材
材料：人血清
试剂：总胆固醇测定试剂盒 用具：分光光度计，微量移液枪，试管，试管架， 恒温水浴锅
四、实验步骤
（1）取3支试管，按下表加入试剂:
充分混匀，37℃ 水浴中保温15min； 冷却至室温后，510nm处比色 比色方法：以空白管调零，读取标准管及样品管光密度值。
（2）计算： 依据朗伯-比尔定律： A=KLC
正确使用比色器皿：ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ拿比色皿的毛面；比 色液应占比色皿的2/3。
测定胆固醇所用的试剂应防止被葡萄糖和甘 油三酯污染。
微量移液枪的正确使用
思考题
1、简述胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇 的基本原理？ 2、分析影响实验结果的因素有哪些？如何 克服？
血清中总胆固醇的测定实验三4氨基安替吡啉4aap苯酚游离胆固醇faa胆固醇酯酶红色醌类物质过氧化物酶pod510nm光吸收法测定相对血清总胆固醇浓度血清总胆固醇游离胆固醇胆固醇酯胆固醇氧化酶游离胆固醇材料
实验三
血清中总胆固醇 的测定
（胆固醇氧化酶法）
一、实验目的
学习胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的原理。
标准管胆固醇浓度：5.17mmol/L
A样 C样= × C 标 A标
样品管光密度值 ×5.17 样品管胆固醇浓度 ＝ 标准管光密度值 (mmol/L)
参考值
胆固醇
血清参考值：3.0 ~ 5.20mmol/L 危险阈值：5.20 ~ 6.20mmol/L 高胆固醇血症：> 6.20mmol/L
注意事项
掌握血清总胆固醇的测定方法及操作技术。
二、实验原理
血清总胆固醇 （1） 胆固醇酯 游离胆固醇
胆固醇酯酶
游离胆固醇＋FAA
胆甾烯酮+H2O2
血清总胆固醇测定实验报告
血清总胆固醇测定实验报告背景介绍：总胆固醇（TC）是指血浆中所有脂蛋白的胆固醇总和，包括低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）。
总胆固醇水平的高低与心血管疾病的发生密切相关，因此对其进行准确测定具有重要的临床意义。
实验目的：通过本实验，掌握血清总胆固醇的测定方法，了解其在临床诊断中的应用。
实验原理：本实验采用酶法测定血清总胆固醇，其原理为将胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶加入样本中，将胆固醇和脂蛋白水解为游离胆固醇和过氧化物，再由过氧化物与酚类物质发生反应，生成有色产物，最后通过比色计测定其吸光度，从而计算出总胆固醇的含量。
实验步骤：1. 取血清标本，离心分离血清。
2. 用标准吸光度计预热，设置波长为500nm。
3. 取适量样本和对照品，加入试剂A和试剂B，混匀后在37°C恒温水浴中反应15分钟。
4. 加入试剂C混匀，再在37°C恒温水浴中反应5分钟。
5. 用比色计在波长为500nm处对样本和对照品吸光度，计算总胆固醇含量。
实验结果：样本A吸光度为0.6，对照品吸光度为0.3，根据标准曲线计算出样本A的总胆固醇含量为5.0mmol/L。
样本B吸光度为0.7，对照品吸光度为0.4，计算出样本B的总胆固醇含量为6.0mmol/L。
实验结论：根据上述实验结果，样本A的总胆固醇含量正常，而样本B的总胆固醇含量超标，提示可能存在心血管疾病的风险。
因此，血清总胆固醇的测定对于心血管疾病的筛查和诊断具有重要意义，有助于及时采取预防和治疗措施。
总结：通过本次实验，我们掌握了血清总胆固醇的测定方法及其临床意义，了解了其在心血管疾病中的重要性。
在临床实践中，我们应该重视血清总胆固醇的监测，及时发现异常情况并采取相应的干预措施，以保障患者的健康。
血清总胆固醇(TC)测定操作规程
血清总胆固醇(TC)测定操作规程A1．2 原理血清中的胆固醇酯(CE)被胆固醇酯水解酶(CEH)水解成游离胆固醇(Chol)，后者被胆固醇氧化酶(CHOD)氧化成△4—胆甾烯酮，并产生过氧化氢，再经过氧化物酶(POD)催化4—氨基安替比林与酚(三者合称PAP)，生成红色醌亚胺色素(Trinder反应)。
醌亚胺的最大吸收在500nm 左右，吸光度与标本中总胆固醇呈正比。
反应式如下：胆固醇酯+H2O CEH 胆固醇+游离脂肪酸胆固醇+02 CHOD △4-胆甾烯酮十H2022H202+4－氨基安替比林+酚POD 昆亚胺+4H2OA1．3．1 受检者(体检对象或病人)的准备：除总胆固醇不一定用空腹血外，测定甘油三酯、脂蛋白与载脂蛋白的病人必须空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，近期内体重稳定，无急性病、外伤、手术等意外情况。
妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或终止哺乳后3个月检验才能反映其基本血脂水平。
注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药、噻嗪类利尿剂、β受体阻滞剂、免疫抑制剂、某些降压剂、降糖药、胰岛素及其他激素制剂等，检验以前应根据所用药物的特性停止用药数天或数周，否则应记录用药情况。
对体检对象及做前瞻性观察者，还应注意采血的季节，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24h内不作剧烈运动。
A1．3．2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，因此影响血脂水平。
例如站立5 min 可使血脂浓度提高5％，15 min提高16％，故在采血前至少应***5min。
一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1 min，穿刺成功后立即松开止血带。
静脉阻滞5min可使甘油三酯增高10％～15％。
A1. 3．3 抗凝剂：我国多用血清作血脂检验。
如用血浆，多主张用EDTANa2(1mg／mL)抗凝。
血清总胆固醇测定法
血清总胆固醇测定法1.实验原理胆固醇酯被胆固醇酯酶水解酶(CEH)水解成游离胆固醇，后者被胆固醇氧化酶(COD)氧化成胆甾烯酮并产生过氧化氢，再经过氧化物酶(POD)催化，使4-氨基安替比林与酚（三者合称PAP）反应，生成红色醌亚胺色素（Trinder反应）。
醌亚胺的最大吸光度在500nm左右，吸光度与标本中TC含量成正比。
反应式如下：CEH胆固醇酯+ H2O 胆固醇＋脂肪酸COD胆固醇＋O2Δ4-胆甾烯酮＋H2O2POD2H2O2+ 4-AAP +酚苯醌亚胺(显色) + 4H2O 2. 标本：2.1 病人准备：12小时禁食。
2.2 类型：血清，肝素或EDTA抗凝血浆。
3. 标本存放：血清稳定性：20～25℃保存可稳定1周；4～8℃保存可稳定1周；-20℃保存可稳定3个月。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。
6. 实验材料6.1 试剂欧泰克总胆固醇试剂盒（货号：112 1307170 1 试剂8×70ml）6.1.1 试剂组成Tris缓冲液pH7.3 50mmol/L酚20mmol/L4-氨基安替比林 1.0mmol/L 胆固醇酯酶(CHE) ≥400U/L 胆固醇氧化酶(CHO) ≥200U/L 过氧化物酶(POD) ≥4000U/L 6.1.2 试剂准备试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂6.2 校准品：使用罗氏复合校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
04血清总胆固醇浓度测定
混匀后，37℃水浴5 min，立即用分光光度计比色，于 505 nm波长处以空白管调零，读出各管吸光度
测定管吸光度 ×胆固醇标准液浓度 血清总胆固醇＝ 标准管吸光度 （200 mg/dl）
【参考范围】 正常人血清总胆固醇：3.1-5.95 mmol/L(120-230 mg/dl)
721分光光度计的使用
[原理]
分光光度计工作原理：物质对不同波长光的吸收具有选择 性，不同的物质都有各自的吸收光带。当光色散后的光谱 通过某一溶液时，其中某些波长的光线就会被溶液吸收。 在一定的波长下，溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度 有一定的比例关系，即符合朗伯-比耳定律 (Lambert-Beer lg(Io/I)=abc
式中，T为透过率，Io为入射光强度，I为透射光强度， A为消光值(吸光度)，a为吸收系数，b为溶液的光径长度， c为溶液的浓度。从以上公式可以看出，当入射光、吸收 系数和溶液厚度一定时，透光率是根据溶液的浓度而变化 的。
[步骤] 1、取干燥试管3支，编号，按下表操作： 血清 标准液 蒸馏水 R试剂 空白管 － － 20µl 2ml 标准管 － 20µl － 2ml 测定管 20µl － － 2ml
1.打开电源开关，预热仪器20 min。 2.选定所需波长，灵敏度档调至1档。 3.打开暗盒盖，调0(用0透光率旋钮将指针调节到透光率0处)。 4.关上暗盒盖，调100%(用100%透光率旋钮将指针调节到透光 率100%处)。重复3-4步骤数次，直至指针稳定。 5.将装有空白液、标准液、待测液的比色皿依次放入比色架中， 盖上暗盒盖，此时光路开启，使空白液位于光路部分，用 100%透光率调节旋钮使电表指针指在透光率100%位置(即 A=0.00)。 6.将标准液、待测液分别推入光路，读取吸光度值，读罢将暗 盒盖打开。 注意事项：在使用过程中应注意保护比色皿的透光面，避免其 受损或产生划痕，影响透光率。
血清总胆固醇的测定实验报告
血清总胆固醇的测定实验报告一、实验目的。
本实验旨在通过测定血清中的总胆固醇水平，了解被检测者的心血管健康状况，为预防和治疗心血管疾病提供参考依据。
二、实验原理。
血清总胆固醇是指血液中所有脂蛋白和游离胆固醇的总和，通常以毫摩尔/升（mmol/L）为单位进行测定。
在实验室中，我们采用酶法测定血清总胆固醇，即通过酶的催化作用将胆固醇氧化成酮醇，然后通过比色法测定产生的色素来确定总胆固醇的浓度。
三、实验步骤。
1. 采集被检测者的静脉血样本，放置于离心管中，离心10分钟后取上清液。
2. 将上清液放入试剂盒中，按照说明书的操作步骤进行样本处理和试剂添加。
3. 使用分光光度计测定样本吸光度，根据标准曲线计算出血清总胆固醇的浓度。
四、实验结果。
根据实验测定，被检测者的血清总胆固醇水平为X mmol/L。
五、实验分析。
根据血清总胆固醇的测定结果，结合被检测者的年龄、性别、生活方式等因素，可以初步判断其心血管健康状况。
若总胆固醇水平偏高，可能存在心血管疾病的风险，需要进一步进行相关检查和干预措施。
若总胆固醇水平正常，被检测者的心血管健康状况良好。
六、实验注意事项。
1. 在采集血样和进行实验操作时，要严格遵守无菌操作规范，确保实验结果的准确性和可靠性。
2. 实验过程中要注意化学试剂的使用安全，避免接触皮肤和吸入气体，必要时戴上防护手套和口罩。
3. 实验设备的使用和维护要符合相关规定，保证设备的正常运转和数据的准确性。
七、实验结论。
通过本次实验测定，我们成功得出了被检测者的血清总胆固醇水平，并对其心血管健康状况进行了初步分析。
实验结果对于预防和治疗心血管疾病具有一定的参考价值。
八、实验展望。
在今后的实验中，我们将进一步完善实验方法，提高测定精度和准确性，为更多人群的心血管健康提供更多的数据支持和科学依据。
以上就是本次血清总胆固醇的测定实验报告，希望对大家有所帮助。
实验十七血清总胆固醇测定（CHODPAP终点法）45
实验十七血清总胆固醇测定（CHOD PAP终点法）一、实验目的与要求1 了解血清总胆固醇（cholesterol）测定在人体营养学上的意义及其生理学上的重要性。
2 掌握血清总胆固醇测定方法及721型分光光度计或半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。
二、实验原理胆固醇 + H2O胆固醇酯酶游离胆固醇 + 脂肪酸游离胆固醇+O2胆固醇酯酶Δ4胆甾烯酮+H2O2H2O2+4氨基安替吡啉+酚过氧化物酶红色醌亚胺 + H2O红色醌亚胺在波长505nm处有最大吸收峰,颜色深浅与标本中总胆固醇含量成正比。
三、实验仪器与试剂1 仪器（1） AT648半自动生化分析仪1台；（2）四孔恒温水浴锅1个；（3）振动摇床1台。
2 分组及仪器2人一组，每组仪器包括：（1）试管架1个；（2） 2ml试管10个；（3） 10μl微量加样器1个；（4） 1ml移液管1个；（5） 2ml移液管2个；（6）吸耳球1个；（7）搪瓷盘1个；（8）微量加样滴头；（9）吸水纸。
3 本试剂盒内含3种试剂：（1）酶试剂10ml×2瓶包括： 4AAP 2mmol/L胆固醇酯酶≥1500U/L胆固醇氧化酶≥1500U/L过氧化物酶≥3000U/L缓冲液 50mmol/L保护剂、稳定剂适量（2）稀释液 80ml×1瓶包括：缓冲液 50mmol/L酚 3.889mmol/L胆酸盐、乳化剂适量（3）胆固醇标准液 2ml×1瓶［5.17mmol/L(200mg/dl)］四、实验步骤1 配制酶工作液将酶试剂和稀释液按1∶4混合而成（4℃冰箱中可保存1周）。
2 于一系列试管中，按下表加入各溶液：表171系列反应管中各管所加溶液空白管标准管测定管蒸馏水（μl）10——标准液（μl）—10—血清（μl）——10酶工作液（ml）1.01.01.03 混合，置37℃水浴保温15min。
4 于波长510nm处以空白校零，读取各管吸光度（A）。
实验三血清总胆固醇的测定
实验三血清总胆固醇的测定目的要求了解并掌握胆固醇测定的原理和方法。
实验原理血清胆固醇(chol)测定是动脉粥样硬化性疾病防治、临床诊断和营养研究的重要指标。
正常人血清胆固醇含量范围为100 ~ 250mg/mL。
胆固醇是环戊烷多氢菲的衍生物，它不仅参与血浆蛋白的组成，而且也是细胞的必要结构成分，还可以转化成胆汁酸盐、肾上腺皮质激素和维生素D等。
胆固醇在体内以游离胆固醇及胆固醇酯两种形式存在，统称总胆固醇。
总胆固醇的测定有化学比色法和酶学方法两类。
本实验采用前一种方法。
胆固醇及其酯在硫酸作用下与邻苯二甲醛产生紫红色物质，此物质在550nm波长处有最大吸收。
因此，可用比色法作总胆固醇的定量测定。
胆固醇含量在400mg/100mL以内时，与光吸收值呈良好线性关系。
本法不必离心，颜色产物也比较稳定。
试剂和器材一、试剂邻苯二甲醛试剂：称取邻苯二甲醛50mg，以无水乙醇溶至50mL冷藏，有效期为一个半月。
混合酸：冰乙酸100mL与浓硫酸100mL混合。
标准胆固醇贮存液（1mg/mL）：准确称取胆固醇100mg，溶于冰乙酸中，定溶至100mL。
标准胆固醇工作液（0.1mg/mL）：将上述贮存液以冰乙酸稀释10倍，即取10mL用冰乙酸稀释至100mL。
二、测试样品0.1mL人血清以冰乙酸稀释至4.00mL。
三、器材试管1.5×15cm（×11）；移液枪，量筒50mL分光光度计。
操作方法一、制作标准曲线取9支试管编号后，按下表顺序加入试剂：加毕，温和混匀，20～37℃下静置10分钟，在550nm波长处测定光吸收值。
以总胆固醇量（mg%）为横坐标，光吸收值为纵坐标做出标准曲线。
二、样品测定取3支试管编号后，分别加入试剂，与标准曲线同时作比色测定：加毕，温和混匀，20～37℃下静置10分钟，在550nm下测定光吸收值。
然后，从标准曲线上可查出样品中总胆固醇的含量。
注意事项1.本法在20～37℃条件下显色。
血清总胆固醇测定实验报告
血清总胆固醇测定实验报告一、实验目的。
本实验旨在通过测定血清中的总胆固醇含量，了解被测者的血脂代谢情况，为临床诊断和治疗提供参考依据。
二、实验原理。
总胆固醇是人体内的一种脂质物质，主要存在于血浆中。
在正常情况下，总胆固醇主要由低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）三部分组成。
总胆固醇的测定是通过酶法或化学法测定血清中总胆固醇的含量，以反映被测者的血脂代谢情况。
三、实验步骤。
1. 采集被测者静脉血标本，禁食12小时以上。
2. 将采集的血清标本离心，取上清液用于测定。
3. 使用生化分析仪器，按照厂家提供的试剂盒说明书进行总胆固醇的测定。
4. 记录测定结果，并进行数据分析。
四、实验结果。
经测定，被测者血清中总胆固醇含量为XXX mmol/L（参考范围，2.85-5.69 mmol/L），属于正常范围。
五、实验分析。
根据实验结果，被测者的总胆固醇含量处于正常范围内，说明其血脂代谢情况良好。
但在临床实际操作中，还需结合被测者的其他临床指标进行综合分析，以全面了解其健康状况。
六、实验注意事项。
1. 采集血样时需遵守无菌操作规范，避免污染。
2. 实验过程中需严格按照试剂盒说明书进行操作，避免误差。
3. 实验结束后，及时清洗和消毒实验用具，保持实验环境整洁。
七、实验总结。
本次实验通过测定血清总胆固醇含量，了解了被测者的血脂代谢情况。
实验结果显示，被测者的总胆固醇含量处于正常范围内，说明其血脂代谢情况良好。
实验过程中，我们严格遵守了操作规范，保证了实验结果的准确性和可靠性。
实验结果为临床诊断和治疗提供了重要参考依据。
八、参考文献。
[1] XXX. 血脂代谢异常与心血管疾病的关系[J]. 中国循证心血管医学杂志, 2018, 20(3): 365-368.[2] XXX. 血清总胆固醇测定技术规范与质量控制[J]. 中国检验医学, 2019, 42(5): 689-692.以上为本次血清总胆固醇测定实验的报告内容，如有不足之处，欢迎批评指正。
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胆固醇氧化酶法 测定血清总胆固醇
实验原理
游离胆固醇(FC) 血清总胆固醇(TC)
胆固醇酯(CE)
1. 胆固醇酯
胆固醇酯酶
37℃水浴
游离胆固醇 ＋ 游离脂肪酸
胆固醇氧化酶
2. 胆固醇
Δ4-胆甾烯酮＋ H2O2
3. 2H2O2＋4-氨基安替比林＋酚
过氧化物酶
37℃水浴
苯醌亚胺非那腙＋4H2O
(红色，500nm波长)
计算：
测定管浓度 测定管吸光度=
标准管浓度 标准管吸光度
测定管吸光度
测定管浓度＝
× 标准液浓度
标准管吸光度
（血清TC）
操作步骤
1 按下表加样(试管应做好标记)
加入物(μl) 空白管
血清
—
胆固醇标准液 —
蒸馏水
20
酶试剂
1000
标准管 — 10 10 1000
测定管 20 —
20
—
试剂1
1000
1000
试剂2
1000
1000
测定管 20 — —
1000 1000
2 混匀，沸水浴15分钟 3 常温冷却5分钟 4 520nm波长比色，空白管调零，读出吸光度 5 计算：
血清尿素(mmol/L)= A测定 ×10 mmol/L A标准
参考范围：兔血清尿素2.86～8.20 mmol/L
1000
• 混匀，37oC保温5分钟
• 在试管中加入1ml蒸馏水
• 500nm波长比色，空白管调零，读出吸光度
• 计算：
血清TC(mmol/L)= A测定 ×5.17mmol/L
A标准
2
兔血清TC参考值：0.77～2.00 mmol/L
注意事项
1. 最后加酶试剂，各管反应时间应一致； 2.试管在操作前尽量保持干燥； 3.比色应及时，30min内完成; 4.若需检测游离胆固醇浓度，将酶试剂
注意事项
1. 煮沸显色经冷却后，应及时比色。 2. 注意试管洁净干燥，加量务必准确。 3. 水浴时注意打开水浴箱盖，以免水汽进
入试管。 4. 酸性试剂中酸的含量较浓，要小心使
用。 5. 尿液中尿素也可用此法测定，但因浓度
高，需先用去离子水作50倍以上稀释。
成分中去掉胆固醇酯酶即可。
第3次实验-2 二乙酰一肟法测定血清尿素
实验原理
二乙酰一肟 + H2O H+ 二乙酰＋羟胺
二乙酰 + 尿素
H+
△
4,5-二甲基-2氧咪唑化合物
(红色，520nm波长)
操作步骤
1 按下表加样（试管先做好标记）
加入物(μl) 空白管 标准管
血清
—
—
尿素标准液 —
20
蒸馏水