流式细胞细胞分析仪的
质谱流式细胞仪工作原理
质谱流式细胞仪工作原理随着生物技术和分子生物学的快速发展，细胞分析已经成为生物学研究中不可或缺的一部分。
流式细胞仪是目前最常用的细胞分析工具之一，它可以快速、精确地分析单个细胞的特征。
而质谱流式细胞仪则是一种结合了质谱分析和流式细胞仪技术的新型仪器，它可以同时分析单个细胞的形态、结构和代谢产物等信息，为细胞分析提供了更加全面的工具。
一、流式细胞仪的基本原理流式细胞仪是一种利用光学原理进行细胞分析的仪器，它可以将单个细胞从细胞混合物中分离出来，并通过光学检测和计算机处理，对细胞的大小、形状、表面标记、活性等多个方面进行分析。
流式细胞仪的基本原理是利用激光光源对细胞进行照射，使其发生荧光或散射，然后通过光学系统对细胞进行检测和分析。
流式细胞仪的主要组成部分包括激光、光学系统、流体控制系统和计算机等。
二、质谱分析的基本原理质谱分析是一种常用的分析技术，它可以通过对化学物质分子的质量-电荷比进行分析，来确定化学物质的成分和结构。
质谱分析的基本原理是将化学物质分子通过电离、加速和分离等过程，将其分解成带正电荷的离子，并通过磁场和电场的作用，将这些离子分离出来，并对其进行检测和分析。
三、质谱流式细胞仪的工作原理质谱流式细胞仪是一种结合了流式细胞仪和质谱分析技术的新型仪器，它可以同时分析单个细胞的形态、结构和代谢产物等信息。
质谱流式细胞仪的基本工作原理是将单个细胞通过流体控制系统进行分离，然后利用激光照射对其进行荧光或散射检测，同时将其离子化。
离子化后的细胞代谢产物经过分离和检测，可以得到细胞代谢产物的质谱图谱，从而确定细胞的代谢状态和代谢产物组成。
质谱流式细胞仪的主要组成部分包括激光、流体控制系统、离子源、分析器和检测器等。
激光是质谱流式细胞仪的光源，它可以对单个细胞进行荧光或散射检测，并将其离子化。
流体控制系统是质谱流式细胞仪的核心部分，它可以将单个细胞从细胞混合物中分离出来，并将其送入离子源进行离子化。
流式细胞仪工作原理
流式细胞仪工作原理
流式细胞仪是一种用于细胞分析的仪器，它可以快速、准确地对细胞进行检测
和分析。
其工作原理主要包括样本的准备、细胞的流动、激光的照射和数据的采集与分析。
首先，样本的准备是流式细胞仪工作的第一步。
通常情况下，我们需要将待检
测的细胞样本进行处理，如细胞的染色、固定和洗涤等。
这些处理可以帮助我们更好地识别和分析细胞，提高检测的准确性和可靠性。
接下来，样本被注入到流式细胞仪中，细胞在流动液体中以单个细胞或细胞团
的形式通过检测区域。
在流动过程中，细胞会以单个细胞的形式通过激光束，每个细胞都会被激光束逐个扫描。
然后，激光的照射是流式细胞仪工作的关键步骤。
激光束会照射通过细胞，激
发细胞内的荧光染料或标记物，这些标记物可以帮助我们识别细胞的特定属性，如细胞表面的蛋白质表达、DNA含量等。
不同的标记物会在不同的波长下发出荧光
信号，流式细胞仪会根据这些信号来对细胞进行识别和分类。
最后，数据的采集与分析是流式细胞仪工作的最后一步。
流式细胞仪会收集每
个细胞的荧光信号，并将这些信号转化为数字信号。
这些数字信号会被传输到计算机中，通过专门的软件进行数据的处理和分析，如细胞的数量、大小、形状、荧光信号的强度等。
通过这些数据，我们可以对细胞进行进一步的分析和研究。
总的来说，流式细胞仪通过对细胞的染色、流动、激光照射和数据采集与分析，可以快速、准确地对细胞进行检测和分析。
它在生物医学研究、临床诊断和药物研发等领域发挥着重要作用，为我们提供了强大的工具来深入了解细胞的结构和功能。
流式细胞分析仪
流式细胞分析仪流式细胞分析仪是一种高效、精确的生物学实验工具，广泛应用于细胞生物学、免疫学、遗传学等领域。
它的出现极大地促进了细胞研究的进展，为科学家们提供了更多的可能性。
本文将介绍流式细胞分析仪的原理、应用及其在生物科学研究中的重要性。
流式细胞分析仪（flow cytometer）是一种可以对细胞进行流式检测的仪器。
它通过检测光的散射和荧光来分析细胞的形态、大小、浓度和免疫表型等信息。
其原理主要是利用流式细胞术，将细胞通过细长的管道分流，并用激光或光源照射细胞，激发荧光信号并收集散射光信号，从而获得细胞的信息。
这种检测方法既高效又准确，可以同时分析数千个细胞。
而且，流式细胞分析仪具有高通量、高分辨率、快速、灵敏度高等优势，使其成为当前生物学研究中不可或缺的工具之一。
流式细胞分析仪广泛应用于细胞生物学研究。
例如，在肿瘤学研究中，通过流式细胞分析仪可以对肿瘤细胞进行快速、准确的鉴定和分类。
它可以检测肿瘤细胞的大小、形态、染色质含量以及免疫表型等特征，为研究人员提供了丰富的信息，有助于了解肿瘤细胞的发生和发展机制。
此外，流式细胞分析仪还可以用于研究细胞周期、细胞分化和凋亡等过程，为揭示细胞生物学的分子机制提供了有力的工具。
除了肿瘤学研究外，流式细胞分析仪在免疫学中也有重要的应用。
免疫表型是指细胞表面的免疫分子的表达情况。
通过流式细胞分析仪可以获得细胞的免疫表型信息，这有助于识别不同类型的免疫细胞并研究它们在免疫反应中的作用。
例如，在研究自身免疫性疾病时，可以利用流式细胞分析仪对免疫细胞进行免疫表型分析，了解其在疾病发生和发展过程中的变化，从而寻找潜在的治疗靶点。
此外，流式细胞分析仪还可用于细胞遗传学研究。
通过观察细胞的核酸含量和染色体结构等信息，可以识别不同类型的细胞，并对细胞的遗传变异进行分析。
例如，在遗传疾病研究中，可以利用流式细胞分析仪对细胞进行染色体异常的检测，对疾病相关的基因突变进行鉴定。
流式细胞仪工作原理
流式细胞仪工作原理流式细胞仪是一种广泛应用于生物医学研究领域的仪器，用于分析和计数细胞、细胞表面标记物以及细胞内部的功能分子。
它通过将细胞以单个的方式通过一个窄的光束，利用光学和电子学技术对其进行快速而精确的分析。
流式细胞仪的工作原理包括样本处理、流体力学、光学系统和信号检测四个主要方面。
1. 样本处理样本处理是流式细胞仪工作的第一步。
细胞样本通常需要经过预处理，包括细胞的收集、固定、染色等。
固定可以防止细胞在流式细胞仪中被破坏或改变形态，染色则可以标记细胞表面或内部的特定分子。
2. 流体力学流体力学是流式细胞仪中非常重要的一部分。
它通过控制样本的流动速度和流动性质，使细胞以单个的方式通过光束。
流体力学的核心是流速的控制和细胞的聚焦。
通过控制流速，可以使细胞以适当的间隔通过光束，避免细胞重叠造成的误差。
聚焦系统则可以确保细胞在光束中心通过，以获得最佳的检测信号。
3. 光学系统光学系统是流式细胞仪的核心部分。
它包括激光器、光学镜头、滤光片和检测器等。
激光器产生高强度的单色光束，常见的激光器包括氩离子激光器、固态激光器和半导体激光器等。
光学镜头用于聚焦激光束，使其通过细胞时具有最佳的光斑形状和大小。
滤光片则用于选择性地过滤掉不需要的光信号，以减少背景干扰。
检测器用于接收和转换细胞发出的荧光信号或散射光信号，常见的检测器包括光电倍增管（PMT）和光电二极管（APD）等。
4. 信号检测信号检测是流式细胞仪中的最后一步。
根据不同的实验目的，可以选择不同的检测模式。
常见的检测模式包括荧光检测、散射光检测和脉冲检测等。
荧光检测是通过标记细胞表面或内部的荧光染料，利用荧光信号来分析细胞的特定分子表达水平或功能状态。
散射光检测则是通过测量细胞散射光的强度和角度，来分析细胞的大小、形态和复杂度等。
脉冲检测则是通过检测细胞在流动过程中产生的光信号的强度和持续时间，来分析细胞的内部结构和功能。
总结：流式细胞仪是一种通过光学和电子学技术对细胞进行快速而精确分析的仪器。
流式细胞分析仪
*7.样本获取速度：不小于33000个细胞/秒。
8.变异系数：每一个荧光接收通道CV<2%（全峰宽）。
9.检测颗粒大小：0.5um-50um。
10.最小样本量：≤30ul，适合微量样本的检测。
11.交叉污染率：≤0.1%。
12.液流系统：要求配备独立的液流车系统，提供仪器使用所需的全部液流单独容器，包括鞘液，DI水，清洗液，废液等，以便仪器正常运行，并可全自动执行各类清洗程序，无需实验人员值守更换液体。
*3.光学检测系统：固定光路，采用光胶藕和石英杯激发方式；光纤信号导入检测系统；全反射荧光信号收集系统，先收集常波长信号，再收集短波长信号，每个激光接收通道最多可加配至8个荧光接收器，满足多色检测升级需要。
*4.液流系统：采用流体力学聚焦原理。
5.荧光检测灵敏度：FITC≤100 MESF，PEቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ50 MESF。
17.主软件：采用PC兼容机，Windows界面仪器控制，软件可同时安装在任意多台电脑上进行数据分析和报告。
*18.临床自动软件：要求配备临床自动软件，拥有具CFDA认证的4色及6色配套试剂，可自动完成4色或6色TBNK免疫分型和绝对计数、以及HLA-B27的自动检测。
项目需求书
序号
采购项名称
需求条款
数量
1
流式细胞仪
*1.主机系统：要求配备488nm、640nm、405nm三根固态激光器，可实现三激光10色荧光12参数的同时检测。
1台
*2.检测器：2个散射光检测器，10个荧光PMT检测器，其中要求488nm激光激发4色，640nm激光激发3色，405nm激光激发3色。
*13.连续检测时间：配备20L及其以上的鞘液，可支持连续20小时不间断的检测。
流式细胞分选仪的功能
流式细胞分选仪的功能流式细胞分选仪（Flow Cytometer）是一种广泛应用于细胞生物学和免疫学研究中的高级仪器。
它通过光学、电子和流体力学原理，对细胞进行高效、高精度的分析和分选。
流式细胞分选仪具有许多强大的功能，下面将详细介绍其主要功能。
1. 细胞计数和鉴定功能：流式细胞分选仪可以通过激光器发射的光束照射样本中的细胞，并通过光散射和荧光信号来对细胞进行计数和鉴定。
通过这一功能，我们可以准确地了解样本中不同类型细胞的数量和比例，为后续的实验设计和数据分析提供基础。
2. 细胞表面标记物检测：流式细胞分选仪可以根据细胞表面的特定标记物，如抗原、抗体等，对细胞进行检测和分析。
通过使用不同的荧光染料和探针，可以同时检测多个标记物，从而获得更多关于细胞表面分子的信息。
3. 细胞内标记物检测：除了表面标记物，流式细胞分选仪还可以检测细胞内的标记物。
通过细胞固定和渗透化处理，可以使细胞内的标记物暴露在外，从而进行检测和分析。
这一功能可以用于研究细胞内信号传导、代谢活性等方面的问题。
4. 细胞大小和形状分析：流式细胞分选仪可以通过光散射信号来分析细胞的大小和形状。
通过这一功能，我们可以获取细胞的体积、表面积、圆度等参数，从而了解细胞的形态特征以及细胞在不同状态下的变化。
5. 细胞生物学功能分析：流式细胞分选仪还可以进行细胞生物学功能的分析。
例如，通过检测细胞的凋亡、细胞周期、细胞增殖等指标，可以了解细胞的生存状态和功能活性。
这对于研究细胞的生长、分化、转化等过程具有重要意义。
6. 细胞分选和单细胞分析：流式细胞分选仪具有细胞分选功能，可以根据细胞的特定特征，将目标细胞从混合细胞群中分离出来。
这对于获取特定类型的细胞纯度较高的样本非常重要。
此外，流式细胞分选仪还可以进行单细胞分析，即对单个细胞进行检测和分析，从而获得更精细的数据。
总结：流式细胞分选仪作为一种高级细胞分析和分选仪器，具有多种强大的功能。
它可以进行细胞计数和鉴定、细胞表面标记物和细胞内标记物的检测、细胞大小和形状分析、细胞生物学功能分析等。
流式细胞仪荧光结果分析中的常见问题及解决方法
流式细胞仪荧光结果分析中的常见问题及解决方法流式细胞仪是一种用于细胞分析的实验室仪器，它能够对单个细胞进行快速而精确的定量和质量分析。
它主要通过将细胞悬浮液注入到仪器中，利用激光器照射细胞并检测经过细胞的光线散射和荧光信号，从而获取大量有关细胞形态、大小、复杂度、表面标记以及内部分子的信息。
它可同时测量多个参数，并具备高通量性能，能够快速分析数以万计的细胞，并提供详细的统计学数据。
它广泛应用于免疫学、细胞生物学、药理学、肿瘤学等领域的研究和实验中。
然而，在分析流式细胞仪得到的荧光结果时，常常会遇到一些问题，如信号强度弱、背景高、细胞群分布异常等。
本文将介绍常见问题，并提供相应的解决方法。
一、信号强度弱1. 信号补偿不正确：检查流式细胞仪上的单色阳性对照是否设置正确，并确保门控和补偿设置正确。
2. 用于检测的抗体不足：增加抗体的量或浓度。
二、荧光强度高1. 抗体浓度过高：减少每个样本中添加的抗体量。
2. 过量抗体被捕获：洗涤步骤要充分，并在洗涤缓冲液中加入吐温或Triton，以保持细胞的透化作用。
3. 封闭不足：在抗体混合液中加入1%-3%的封闭剂，并增加封闭步骤。
三、背景高/阳性细胞百分比高1. 增益设置过高/补偿过低：使用阳性对照正确设置流式细胞仪，并使用补偿减少小颗粒背景信号和降低增益。
2. 抗体过量：降低抗体的浓度，并在洗涤缓冲液中加入去污剂，确保洗去过量的抗体。
四、在应该只有一个细胞群的情况下观察到两个或多个细胞群1. 表达靶蛋白的细胞群不止一个：检查样本中包含的细胞类型预期的蛋白表达水平，并确保细胞充分分离。
2. 出现细胞双峰：细胞双峰显示为第二大细胞群，其荧光强度大约是单细胞荧光强度的两倍。
在染色前用移液枪将细胞轻柔混匀，并在细胞仪中运行之前再次混匀。
五、侧向散射背景偏高（来自小颗粒）1. 细胞裂解：确保样本中的细胞没有裂解和破碎，样本应新鲜并正确制备，避免高速离心或激烈涡旋的操作。
流式细胞仪结果分析
CD4+Th细胞、CD4+/CD8+比例
六、自身免疫病相关HLA抗原分析
HLA-B27可出现在58%～97%的强直 性脊椎炎 As 患者
七、移植免疫中的应用
FCM作为一个强大的技术平台,已应用于多个领 域,其在移植免疫分析中的应用也越来越广泛， 目前移植免疫中的FCM应用主要包括流式细胞 术的交叉配型 Flow cytometry cross-matching, FCXM 和群体反应性抗体 Panel reactive antibody, PRA 检测，
样本来源：各种细胞 如外（ZHOU）血,骨 髓,实体组织、悬浮或贴壁培养的细胞 ,微生 物,人工合成微球等， 检测大小：一般是0.5um～40um
流式细胞仪的组成
液流系统 光学系统 数据处理系统
分选系统
分析型流式细胞仪
分选型流式细胞仪
液1 液流流系统
流动室
流动室 Flow cell 是液流系统的核心部件,流动室是由石英 玻璃制成,单细胞悬液在流动室里被鞘液流包绕通过流动 室内一定孔径的孔,检测区在该孔的中心,细胞在此与激光 垂直相交，
荧光染料的特性
•激发波长 EXCITING •发射波长 EMISSION
荧光补偿
四、细胞分选原理
通过流式细胞仪进行细胞分选主 要是在对具有某种特征的细胞需进 一步培养和研究时进行的，
一 分选基本原理
细胞悬液形成液流柱 压电晶体 产生机械振动
流动室振动
液流断裂成液滴
空白液滴 不充电
弃去
含细胞的液滴 充电
微小的乳胶微球分别染成上百 种不同的荧光色 固相芯片是用 探针在芯片上的坐标位置给基 因的特异性编码；而液相芯片 则是用颜色来编码
流式血细胞分析仪试验报告
流式血细胞分析仪检测试验报告为检测血细胞中红细胞、白细胞、血小板的含量，设计以下实验对不同含量的全血进行检测。
试验一对10 ul的男性全血进行测定；试验二对20 ul的男性全血进行测定；试验三对10 ul的女性全血进行测定；试验四对20 ul的女性全血进行测定；试验五对10 ul的全血中的T细胞进行测定。
得出的数据说明流式细胞分析仪能够成功地检测出成人全血中的红细胞、白细胞、血小板的含量；鉴定出成人全血中中正常的T细胞和病变的T细胞的含量，得出检测的血样是否发生病变细胞和异常的细胞。
试验部分如下：值为7.09*109/L，血小板的平均值为144*109/L。
在正常男性血样中的红细胞、白细胞、血小板的数量范围，检测结果表明此样品血的红细胞、白细胞、血小板三项正常[1]。
证明流式细胞分析仪能正常检测出红细胞、白细胞、血小板的数量。
为5.77*109/L，血小板的平均值为144*109/L。
在正常男性血样中的红细胞、白细胞、血小板的数量范围，检测结果表明此样品血的红细胞、白细胞、血小板三项正常[1]。
证明流式细胞分析仪能正常检测出红细胞、白细胞、血小板的数量。
为7.16*109/L，血小板的平均值为199*109/L。
在成年女性正常血样中的红细胞、白细胞、血小板的数量范围，检测结果表明此样品血的红细胞、白细胞、血小板三项正常[1]。
证明流式细胞分析仪能正常检测出红细胞、白细胞、血小板的数量。
为4.94*109/L，血小板的平均值为204*109/L。
检测结果表明血样正常[1]。
证明流式细胞分析仪能检测出红细胞、白细胞、血小板的数量。
[1]备注：根据《全国临床检测操作规程》第三版规定各种细胞参考区间如下：红细胞：男性为（4.09~5.74）*1012/L；女性为（3.68~5.13）*1012/L。
白细胞：男性为（3.97~9.15）*109/L；女性为（3.69~9.16）*109/L。
血小板：男性为（85~303）*109/L；女性为（101~320）*109/L试验五，检测10ul全血中的T细胞：8 9 54 0.03 4.579 11 64 0.03 5.4211 61 59 0.18 5.0012 9 13 0.03 1.1913.1 28 39 0.08 3.5613.6 167 25 0.48 2.2814 12 9 0.03 0.8116 18 51 0.05 4.5617 149 26 0.43 2.3318 5 52 0.01 4.2318 33 9 0.10 0.7320 130 52 0.38 4.2321.3 33 17 0.10 1.3522 34 10 0.10 0.7923 159 13 0.46 1.03合计 3.88 80.35试验五：进口仪器检测对比：一：结论：CD3淋巴细胞增生以大B细胞为主，与最后诊断3级四倍体滤泡性淋巴瘤相符。
流式细胞仪(检验仪器)
流式细胞仪flow cytometer;FCM定义：将流体喷射技术、激光技术、空气技术、γ射线能谱术及电子计算机等技术与显微荧光光度计密切结合的一种非常先进的检测仪器。
通过测量细胞及其他生物颗粒的散射光和标记荧光强度，来快速分析颗粒的物理或化学性质，并可以对细胞进行分类收集，可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个细胞特征参数，进行定性或定量分析，具有速度快、精度高、准确性好等特点。
流式细胞仪流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。
它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。
多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器，它只能测量一个细胞的诸如总核酸量，总蛋白量等指标，而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。
也就是说，它的细节分辨率为零。
•查看精彩图册组成流式细胞仪主要由四部分组成。
它们是：流动室和液流系统；激光源和光学系统；光电管和检测系统；计算机和分析系统。
上图为其结构示意图。
流动室和液流系统流动室由样品管、鞘液管和喷嘴等组成，常用光学玻璃、石英等透明、稳定的材料制作。
设计和制作均很精细，是液流系统的心脏。
样品管贮放样品，单个细胞悬液在液流压力作用下从样品管射出；鞘液由鞘液管从四周流向喷孔，包围在样品外周后从喷嘴射出。
为了保证液流是稳液，一般限制液流速度υ<10m/s。
由于鞘液的作用，被检测细胞被限制在液流的轴线上。
流动室上装有压电晶体，受到振荡信号可发生振动。
激光源和光学系统经特异荧光染色的细胞需要合适的光源照射激发才能发出荧光供收集检测。
常用的光源有弧光灯和激光；激光器又以氩离子激光器为普遍，也有配和氪离子激光器或染料激光器。
光源的选择主要根据被激发物质的激发光谱而定。
汞灯是最常用的弧光灯，其发射光谱大部分集中于300～400nm，很适合需要用紫外光激发的场合。
氩离子激光器的发射光谱中，绿光514nm和蓝光488nm的谱线最强，约占总光强的80%；氪离子激光器光谱多集中在可见光部分，以647nm较强。
流式细胞仪工作原理
流式细胞仪工作原理
流式细胞仪是一种用于细胞分析和分类的仪器。
它通过将细胞单个地以高速通过一个光束，并测量其多个特性，从而对细胞进行识别、计数和分析。
其基本工作原理如下：首先，细胞样品被制备成单细胞悬浮液，并通过细胞特异性的染色物质或标记物进行标记，以将目标细胞与其他细胞区分开来。
然后，样品被注入到流式细胞仪中，通过注射器控制样品的流速和流量。
在流式细胞仪内部，样品被推进到一个称为流动细胞室的地方。
在流动细胞室中，样品通过一个狭窄的玻璃管道，产生一个细细的流动。
该管道上方有一个光源，通常是一束激光。
这束激光被聚焦成一束光束，对通过的细胞进行照射。
当细胞通过激光束时，它们与激光发生相互作用。
细胞中的标记物会吸收激光的能量，并重新发射出来。
这些重新发射的光信号被称为荧光信号。
荧光信号与细胞的特征和标记物有关。
流出流动细胞室的细胞荧光信号被收集并分析。
收集荧光信号的方法是通过使用一组光学器件，如透镜和滤光器，将荧光信号定向到光电倍增管中进行光电转换。
光电倍增管会将光信号转化为电信号，并放大。
最后，通过分析仪器中的电子元件收集的荧光信号和流速的数据，可以得出关于细胞数量、大小和标记物强度等的信息。
这
些信息可被用于鉴定和分类细胞，分析细胞的功能和活性，以及研究细胞的生理和病理状态。
BD FACSCANTO II 流式细胞分析仪标准操作规程
BD FACSCANTO II 流式细胞分析仪标准操作规程仪器设备检验项目血液淋巴细胞亚群，CD3、CD4、CD8、CD16+56、CD19细胞计数；HLA-B27阳性淋巴细胞细胞计数；髓系白血病、淋巴系白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤等细胞免疫表型分析；可溶性蛋白分析、细胞表面抗原、可溶性蛋白定量分析等。
系统组成和操作原理2.1 系统组成该BD FACSCanto Ⅱ系统由如下组件组成：流式细胞仪，设施独立的液流车和BD FACSCanto Ⅱ工作站。
系统可选项包括一个自动进样装置和一个条形码阅读器。
2.2 流式细胞仪组件2.3 液流车组件液流操作理论当你把试管安置到样本进入管（SIT ）中时，液流车内部的泵就会对其加压，于是为流动池提供鞘流。
与此同时，样本管加压并且样本被向上推到SIT 上并进流动池前盖光学仪器前盖电源开关液流车连接图1-1侧门数据端口获取指示灯样本进入管入到流动池中。
当你把试管从SIT取出时，流式细胞仪将鞘液向下冲洗试管的内部和外部。
经过冲洗的鞘液由废液吸引器臂抽吸出来。
2.4 流式细胞分析仪配套试剂FACSCANTO II 流式细胞分析仪配套试剂：鞘液、clean液、shutdowm液等。
所有试剂应放室温保存，注意防尘、防紫外线、防潮。
变质、超过效期的所有试剂不能使用。
仪器运行样本原始样本采集、制备、处理、检验和存放见《标本采集手册》。
仪器设备性能参数三激光八色：Argon(L1)：488nm Fluorescence Channel： FITC（Green） PE(Yellow) Percp（Red） PE-Cy7(Infia Red)Hene (L2)：633nm Fluorescence Channel： APC（Red） APC-Cy7(Infia Red) Voilet (L3)：405nm Fluorescence Channel： Pacific Blue（Blue）AmCyan (Cyan)三角形和八角形检测器滤光片检测器列阵PMT位置LP反光片BP滤光片或LP反光片使用的染料八角形检测器（488纳米蓝色激光）A 735 670 PE-Cy7B 655 空PerCP-Cy5.5或PerCPC 610 空－D 556 585/42 PEE 502 530/30 FITCF 空488/10和针孔SSCG 空空－H －空―三角形检测器（633纳米红色激光）A 735 780/60 APC-Cy7B 685 空－C －660/20 APC仪器设备环境要求，使用安全措施5.1 仪器设备环境要求环境温度要求：10~30℃（最佳温度：25℃）。
流式细胞仪工作原理
流式细胞仪工作原理流式细胞仪是一种广泛应用于生物医学研究和临床诊断的仪器，它可以对细胞和微粒进行高速、连续的检测和分析。
它的工作原理基于光学原理和流体动力学原理，下面将详细介绍流式细胞仪的工作原理。
1. 光学系统流式细胞仪的光学系统由激光器、光学镜头、滤光片、光散射器和光电探测器等组成。
激光器产生一束高能量、单色、相干的光束，经过光学镜头聚焦后照射到待测样品上。
样品中的细胞或微粒与激光相互作用后，会发生光散射、荧光发射等现象。
2. 流体系统流式细胞仪的流体系统由进样系统、流速控制装置和废液排放系统组成。
待测样品通过进样系统进入流动细胞仓，并在流速控制装置的控制下以稳定的速度通过激光束。
废液排放系统用于收集经过检测的样品。
3. 光散射检测光散射是流式细胞仪最常用的检测方式之一。
当细胞或微粒经过激光束时，光线会被散射。
光散射信号分为前向散射和侧向散射。
前向散射与细胞或微粒的大小和形状相关，侧向散射与细胞或微粒的复杂度和粒子表面的结构相关。
流式细胞仪通过收集和测量光散射信号的强度和角度，可以获取细胞或微粒的大小、形状、复杂度等信息。
4. 荧光检测荧光检测是流式细胞仪另一种常用的检测方式。
通过给待测样品添加荧光染料或标记抗体，当激光照射到样品时，荧光染料或标记抗体会发出特定波长的荧光信号。
流式细胞仪通过滤光片选择性地收集特定波长的荧光信号，并通过光电探测器转换为电信号。
荧光检测可以用于检测细胞表面标记物、细胞内某种分子的含量等。
5. 数据分析流式细胞仪通过光电探测器将光信号转换为电信号，并将其转化为数字信号进行处理和分析。
流式细胞仪配备了专业的数据分析软件，可以对收集到的数据进行多参数分析、绘制直方图、散点图等，以获取更多关于细胞或微粒的信息。
总结：流式细胞仪的工作原理基于光学原理和流体动力学原理，通过光散射和荧光检测来获取细胞或微粒的相关信息。
它可以用于细胞表面标记物的检测、细胞内某种分子的含量分析、细胞周期和凋亡的研究等。
流式细胞仪工作原理
流式细胞仪工作原理流式细胞仪是一种广泛应用于生物医学研究领域的仪器，用于分析和计数细胞、细胞内成分以及细胞表面标记物。
其工作原理基于细胞在流动状态下通过一个细长的流动细胞柱，并通过激光束的照射进行检测。
1. 流体系统流式细胞仪的流体系统由供液系统、样品注射系统和废液系统组成。
供液系统通过泵将缓冲液送入流动细胞柱，样品注射系统通过样品注射器将待测样品引入流动细胞柱，废液系统则负责收集排出的废液。
2. 光学系统流式细胞仪的光学系统包括激光器、光学过滤器和光散射器。
激光器产生高能量的激光束，通常使用氩离子激光器或固态激光器。
光学过滤器用于选择特定波长的光线，以便检测特定的荧光标记物。
光散射器用于测量细胞的散射光信号。
3. 细胞检测在流动细胞柱中，待测样品通过一个细长的通道，被激光束照射。
细胞与激光束相互作用后，会发生光散射、荧光激发和荧光发射等过程。
光散射信号和荧光信号被光电探测器接收并转换为电信号。
4. 数据采集和分析流式细胞仪通过光电探测器将细胞产生的电信号转换为数字信号，并通过计算机进行数据采集和分析。
数据分析软件可以根据用户的需求，对细胞进行计数、分类和分析。
常见的分析参数包括细胞大小、形状、荧光强度等。
5. 应用领域流式细胞仪在生物医学研究中有广泛的应用。
例如，在免疫学研究中，可以使用流式细胞仪对免疫细胞进行表型分析；在细胞生物学研究中，可以通过流式细胞仪对细胞周期进行分析；在肿瘤学研究中，可以使用流式细胞仪对肿瘤细胞进行检测和分析。
总结：流式细胞仪是一种基于细胞在流动状态下通过细长通道并被激光束照射进行检测的仪器。
它通过光学系统和流体系统实现对细胞的分析和计数。
流式细胞仪在生物医学领域有广泛的应用，可以用于免疫学、细胞生物学、肿瘤学等研究。
通过数据采集和分析，可以获取细胞的相关参数，为科学研究和临床诊断提供有价值的信息。
流式细胞分析仪2篇
流式细胞分析仪2篇第一篇：流式细胞分析仪的基本概念及原理流式细胞分析仪是一种广泛应用于生物医学和生物化学领域的仪器，它可以用来分析细胞的特定特征，如大小、形状、颜色、复数性质、光散射和荧光强度等等。
本篇文章将简要讲解流式细胞分析仪的基本概念及原理。
一、流式细胞分析仪的基本原理：流式细胞分析仪基于流式技术原理工作。
简单地说，也就是在持续液流的条件下，将含有细胞和颜色染料的混合物注射到设备中，经过激光的照射后，根据细胞对光的反射或散射强度、色素等分子上的荧光刺激发射的原理与生物信息软件的协作，来分析细胞的数量、类型、形态以及功能等。
二、流式细胞分析仪的基本组成：1. 激光系统：激光系统是流式细胞分析仪最核心的部件。
它的工作方式就是将激光束穿过光学元件，使其对细胞样品产生激发，发出相应的荧光信号。
2. 流式部件：流式部件由喷嘴、采集室和微处理器等部件组成。
在流式细胞分析中，样品要经过流式部件的采集室流动，由喷嘴排放。
3. 荧光检测器：荧光检测器是流式细胞分析仪中另一重要的组成部分。
它能够检测样品中的荧光信号，并将其转换为电信号，这样细胞样品的荧光强度就能够被测量到。
4. 数据分析系统：数据分析系统负责数据采集、加工和分析。
采集的数据由计算机处理和分析，最终输出并显示给用户。
三、流式细胞分析仪的应用：流式细胞分析仪被广泛应用于分子医学领域、免疫学、生物化学、生物医学等课程的研究领域。
其中，仪器的主要应用包括：细胞染色体分离和组分分析；细胞类型和形态特征的分析；免疫荧光染色技术；DNA合成和细胞周期分析等。
四、流式细胞分析仪的优点和局限：流式细胞分析仪具有高灵敏度、高分辨率、准确可靠等优点。
同时，这种仪器也存在一定局限性，如灵敏度受很多因素限制，制约着其在样品检测中的应用。
因此，在使用时，必须掌握其基本原理和操作技能才能真正发挥其应用价值。
综上所述，流式细胞分析仪是一种功能强大的生化仪器，广泛应用于生物医学、生物化学等相关领域，具有多种优点和局限，对于研究细胞的结构和功能有着重要的作用。
流式细胞仪工作原理
流式细胞仪工作原理流式细胞仪是一种广泛应用于生物学和医学研究领域的仪器，它能够对细胞进行高效、快速、准确的分析。
流式细胞仪的工作原理是基于细胞在流动液体中通过激光束的照射，测量细胞的不同特征参数。
本文将详细介绍流式细胞仪的工作原理。
一、激光照射及细胞流动1.1 激光源：流式细胞仪使用激光器作为光源，通常是氩氖激光器或者固态激光器。
1.2 激光照射：激光束照射到细胞悬液中的细胞，使细胞发生荧光或者散射。
1.3 细胞流动：细胞悬液通过流动系统，以单个细胞的形式通过激光束。
二、荧光检测系统2.1 光学系统：包括透镜、滤光片和光电倍增管等，用于检测细胞发出的荧光信号。
2.2 荧光探测：根据细胞内染料的荧光特性，检测细胞的荧光信号。
2.3 数据采集：将荧光信号转化为电信号，并通过计算机进行数据采集和分析。
三、细胞参数分析3.1 细胞大小：通过散射信号测量细胞的大小。
3.2 细胞形态：根据细胞的散射光信号，分析细胞的形态特征。
3.3 细胞表面标记：通过荧光信号检测细胞表面的标记物，如抗体或者荧光染料。
四、多参数分析4.1 多色荧光：流式细胞仪可以同时检测多种荧光信号，实现多参数分析。
4.2 细胞周期分析：通过不同荧光探针标记细胞周期不同阶段，进行细胞周期分析。
4.3 蛋白表达分析：通过检测细胞内特定蛋白的荧光信号，分析蛋白的表达水平。
五、应用领域5.1 免疫学研究：流式细胞仪广泛应用于免疫学研究中，用于检测免疫细胞的表面标记物。
5.2 肿瘤学研究：流式细胞仪可用于检测肿瘤细胞的表面标记物，分析肿瘤细胞的特性。
5.3 细胞生物学研究：流式细胞仪可用于细胞分析、细胞计数和细胞分选等细胞生物学研究领域。
总之，流式细胞仪通过激光照射、荧光检测系统、细胞参数分析、多参数分析和应用领域等多个方面的工作原理，实现了对细胞的高效、快速、准确的分析，为生物学和医学研究提供了重要的技术支持。
流式细胞仪原理及应用
流式细胞仪原理及应用流式细胞仪是一种用于细胞计数和表征的仪器，它基于细胞在流体中流动并通过光源的原理。
以下是流式细胞仪的原理和一些常见应用。
原理：1. 细胞准备：样品中的细胞首先需要进行适当的处理，包括细胞分离、去除细胞团块和杂质等，以确保流经流式细胞仪时的均匀性和准确性。
2. 细胞传递：样品中的细胞通过封闭的通道流动，形成单个细胞的串行排列，以便每个细胞能够单独接收光信号。
3. 激光照射：流式细胞仪使用激光器产生高强度的单色光束，照射到细胞上。
4. 光散射和吸收：细胞与经过的激光光束相互作用，发生光散射和吸收现象。
这些现象提供了关于细胞大小、形状、复杂度和细胞表面分子的信息。
5. 光信号收集：流式细胞仪使用多个光学组件和探测器来收集光信号。
不同的检测器可以收集不同的光散射角度和波长的光信号。
6. 数据分析：收集到的光信号通过计算机进行处理和分析，可以获得细胞的数量、计数、分类和细胞表面分子的信息。
应用：1. 细胞计数：流式细胞仪可以快速准确地计数细胞数量，并提供关于细胞浓度和细胞增殖的信息。
这在生物学研究和临床实验室中非常常见。
2. 细胞表征：通过测量细胞的大小、形状和表面标记物等特征，流式细胞仪可以对细胞进行表征，并帮助研究人员了解细胞类型和状态的变化。
3. 免疫细胞分析：流式细胞仪可以用于免疫学研究，如分析免疫系统中的不同细胞亚群、检测细胞表面抗原、测量细胞分泌物和研究细胞凋亡等。
4. DNA和蛋白质分析：通过使用荧光染料或抗体标记，流式细胞仪可以实现对DNA含量、染色体多样性以及特定蛋白质的定量和定位分析。
总之，流式细胞仪是一种功能强大的实验室工具，广泛应用于生物学、医学和药物研发等领域，为研究人员提供了大量有关细胞的信息。
细胞流式仪原理
细胞流式仪原理
细胞流式仪是一种用于测量和分析细胞的仪器。
其原理是利用激光器产生的高能光束照射样品中的细胞，同时通过一系列的光学组件将光信号转化为电信号，并在计算机中进行检测和分析。
首先，激光器会发射出一束单色、聚焦的光束，将样品中的细胞逐个照射到。
细胞在激光束的作用下会产生散射和荧光。
散射光是指细胞中的颗粒或结构对光的散射现象。
流式仪通常测量两种散射光信号：前向散射和侧向散射。
前向散射光信号与细胞的大小和形状有关，侧向散射光信号与细胞的复杂度和内部颗粒有关。
荧光是指细胞中特定染料或标记物受激光照射后发出的光信号。
荧光染料可以标记细胞表面蛋白、细胞器或特定分子，通过测量荧光强度可以获得关于细胞的更多信息。
光信号通过光学透镜和滤光片等光学组件传递到光电倍增管（photomultiplier tubes, PMT）中。
PMT是一种高灵敏度的光
电传感器，可以将光信号转化为电信号并放大。
电信号经过放大和数字化后，通过计算机进行数据采集和分析。
计算机软件可以根据测量的散射和荧光信号来判断细胞的性质，如大小、复杂度、表面标记物的表达等。
同时，流式仪还可以进行细胞分类、计数和分选，使得研究人员可以对不同类型的细胞进行深入研究。
总的来说，细胞流式仪通过激光器照射样品中的细胞，测量和分析散射和荧光信号，从而获得有关细胞性质和分子表达的信息。
这种原理使得流式仪成为生命科学研究和临床诊断中重要的工具之一。
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- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
一、常规清洁 清洁风扇空气滤网5个——每周（主机2个，电源箱 2个，计算机1个） 能确保进入仪器的气流清洁，保证光束稳定，保证 每日的质控数据（HPCV’S，Mean Channels,etc） 稳定。保证光路清洁，是得到良好质控数据的关键。 良好的气流能保证仪器内部的温度相对较低，保证 热交.
提高运行速度。
• 在C：提示符后，键入DEFRAG C：按回车键 • 建立时间表（每天或每周）进行数据文件整理，
删除不需要的文件。
• 八、工作站保养 • 定期检查硬盘空间是十分必要的，以便保证有足
够的空间进行数据储存XL SYSTEMⅡ,软件会提 示目前的硬盘空间. • 检查碎片，否则会使运行速度降低。 • 定期检查lost clusters,lost chains或未完成的文件， 也十分重要。
• 推荐方法 • 扫描硬盘——每月进行 • scandisk检查坏扇区，数据及未完成的文件 • 在C：提示符后键入SCANDISK C：按回车键。 • 碎片整理——每月进行，可修复被分割的文件，
二、清洁试剂室的漏液 清洗SHEATH试剂盒——每月 确保没有细菌生长，否则会污染鞘液，导致 过高的本底计数，并产生假结果。 清洗CLENSE试剂盒——每60天 清洁主机和电源箱的气水隔离瓶——如有液 体 清洗电源箱的负压保护瓶——如有液体 清洗样品进样管——样品残留 清洗真空管道——保证废液被清除，减少 Vacuum Chamber报警的可能性。
• 五、部件的更换 • 更换鞘液 清洁液盒 感应器 • 试剂盒上有明显的裂痕。经常报警“sheath
pressure warning”或“system pressure warning”，经常报警“sheath level empty error” 或”clenz level empty error”.
确保LASER HEAD的风冷气流通畅。 检查样品进样头有负压。
确认计算机屏幕无显示异常的报警
• 三、日常清洗程序 应用范围
• 清洗真空管路之前,关机之前,长期停机后第一次开机, Flow-Check CV＞2%,使用如下荧光染料之前: PI(Propidium Iodide) ,EB(Ethidium Bromide),AO(Acridine Orange) ,TO(Thiazole Orange) Coriphosphine-O, Fura 3 ,Fluorescein Diacetate,使用以上染料后，进行免疫标记 分析之前,如果有碎片或计数有明显增加.
• 操作步骤 • 1．将漂白水（建议使用花王漂白液）与双蒸水1：1稀释，
放入12X75mm的试管内。（现用现配） • 2．准备3ml双蒸水放入12X75mm试管内 • 3．在Acquisition状态栏下选择PANEL-Cleaning Panel • 4．按照提示，分别将装有稀释的漂白液和双蒸水的试管
开机常规检查
检查所有的风扇工作正常。
AIR FILTER，VACUUM FILTER必需干燥无 水，WATER TRAP液体不能超过 1/3,VACUUM TRAP液体不能超过1/4。 检查及调节压力为30 PSI 检查负压应高于17 in.Hg. 确认仪器LASER ON灯亮。 确认仪器启动10-30分钟后READY灯亮（绿 色）
• 六、更换手工进样样品头 • 插入样品管后，样品台不能上升。需要连
续用PRIME键进行排气泡。出现SAMPLE PRESSURE ERROR信息。样品头有明显 裂痕或缺口。 • 七、实验室工作环境 • 实验室的环境也会影响日常结果的稳定性。 通常环境温度在摄氏16~32度，建议控制在 25度左右，每小时最大温度变化在2摄氏度 之内。若环境温度会较高，需使用空调。 良好的环境会使质控结果更稳定，变化较 小。灰尘是所有电子设备的天敌，注意清 洁。
依次放入样本台，上机。
• 四、真空管清洗程序 • 应用范围： • 每一批样品测试后, 8小时连续工作后,关机前. • 步骤： • 1．按Cytometer主机上的RUN键，使其处于闪烁
状态。
• 2．将真空管洗器内加满双蒸水，放SE 键，进行清洗循环，结束后整个管道内充满清洁 液。