全自动菌落计数仪
菌落总数计数方法
菌落总数计数方法菌落总数计数是一种常见且重要的实验方法，用于评估菌落的数量和密度。
菌落总数计数方法有多种，常见的包括平板计数法、薄层计数法、过滤膜计数法等。
下面将详细介绍这几种方法的原理和步骤。
平板计数法是最常见的菌落总数计数方法之一。
它的原理是将待测菌液均匀涂布在含有固体营养培养基的平板上，通过菌落的生长扩散形成可见的单个菌落，再通过对菌落进行计数并乘以稀释倍数，最后得到待测菌液的菌落总数。
具体步骤如下：1. 准备固体培养基。
根据所要检测菌落的要求，选择适当的培养基并准备好。
固体培养基一般含有琼脂或明胶等物质，可以提供营养物质和支持菌落的生长。
2. 制备合适浓度的菌液。
将待测菌种培养在含有适宜营养物质的液体培养基中，利用培养箱或摇床进行恒温、恒湿的培养，待菌液呈现合适浓度时即可使用。
3. 稀释菌液。
根据待测菌液的预估浓度，将适量的菌液和无菌生理盐水按一定比例进行稀释，以获得合适浓度的菌液。
4. 涂布菌落。
取一定数量的稀释后的菌液，利用灌注器或鱼鳞划线法将菌液均匀涂布在固体培养基的平板上。
为了保证菌液的均匀分布，可以采取旋转、摇动等方法。
5. 培养菌落。
将涂布好的平板置于恒温、恒湿的培养箱中进行培养。
根据菌种的不同，一般在30-37的温度下培养24-48小时。
6. 计数菌落。
在培养好的平板上，通过肉眼或借助显微镜仔细观察菌落的形态、大小、颜色等特征，并使用菌落计数器或放大镜进行计数。
根据菌落的密度和分布情况，可以选择在整个平板上计数，或者在特定区域计数后进行推算。
7. 乘以稀释倍数。
由于菌液在进行稀释时常用不同倍数的生理盐水进行稀释，所以在计算菌落总数时需要将计数结果乘以稀释倍数，以获得准确的结果。
薄层计数法是另一种常见的菌落总数计数方法。
它的原理是将含有待测菌液的液体培养基均匀地倒入培养基皿中，使其能够覆盖整个底面。
待液体凝固后，菌落会在培养基表面生长，并且可以通过视觉或显微镜观察和计数菌落。
全自动菌落计数器安全操作及保养规程
全自动菌落计数器安全操作及保养规程概述全自动菌落计数器是一种广泛应用于生物科研、医疗、环保等领域的实验仪器。
使用全自动菌落计数器，能够方便、快速地对菌落进行计数和鉴定，提高实验效率和准确度。
为了更好地使用全自动菌落计数器，保障实验安全和设备使用寿命，本文提供了全自动菌落计数器安全操作和保养规程。
全自动菌落计数器安全操作规程1. 选择合适的环境充分了解实验特点，并保证在适宜的环境中操作仪器。
在使用前应保证仪器环境符合要求：干燥、清洁、无噪音和极少的振动。
2. 准备仪器在使用前，需要进行事先准备。
将仪器表面的灰尘和污垢除去，并连接电源。
操作人员应全程佩戴手套、防护眼镜等个人防护装备。
3. 操作前检查按照仪器说明书检查仪器的机械、电器和软件系统的运转是否正常。
特别需要检查的是，玻璃门、窗户和面板是否有破损或损坏。
如果发现异常情况，应及时整修或修理。
4. 样品的操作将需要检测的样品外转0.8mL的LB平板，自然晾干后，直接放在仪器样本架。
取样器轨道上放置含菌样品的架子，然后启动程序，开始自动检测和计数。
5. 操作完成后将样品架从样品架装置中取出，并断开电源。
检查操作位置是否清洁，如有样品残渣，则应及时清除干净。
全自动菌落计数器保养规程1. 日常保养除按照操作规程使用仪器外，要注意仪器表面的干净，并保持干燥。
使用后，要及时清除仪器表面的细颗粒。
2. 周期性维护在正常运行中，定期进行全自动菌落计数器的日清洁和消毒，避免积累过多的细菌或菌落。
3. 不适用时的处理当全自动菌落计数器长时间不使用，应放置在干燥、清洁、无噪音和极少的振动的环境中，不要暴露在阳光下，以免受到紫外线的侵蚀。
4. 维修保养如果全自动菌落计数器出现故障或其他异常情况，应及时找专业的技术人员进行维修保养，以免影响实验或造成二次污染。
总结全自动菌落计数器是一种实验室中常用的仪器，它能够方便、快速地对菌落进行计数和鉴定，提高实验效率和准确度。
在使用全自动菌落计数器时，需要遵守安全操作规程，并进行日常和周期性的保养维修，以保障实验安全和设备使用寿命。
平板菌落计数的原理
平板菌落计数的原理平板菌落计数是一种常见的微生物计数方法，用于测定食品、饮用水、药品、环境样品等中微生物的数量。
其原理是将待测样品在富养分的琼脂平板上培养并计数形成的菌落，从而间接反映出样品中微生物的数量。
具体步骤如下：首先将样品经过适当的稀释处理，将适量的样品均匀地均匀涂布在琼脂平板上。
然后将涂布后的平板在37左右的恒温培养箱中培养一定的时间（通常为24至48小时，具体时间根据待测微生物的生长特性而定），待充分生长后，通过肉眼或显微镜观察，并进行计数，得出菌落数量。
最后根据分析结果，通过统计学的方法，计算出原始样品中微生物的数量。
平板菌落计数的原理主要包括以下几个方面：1.微生物生长特点：微生物在富含营养物质的培养基上，能够生长并形成可见的菌落。
通过培养基的选择和处理，可以促进待测微生物的生长，同时抑制其他微生物的生长，从而避免干扰计数结果。
这样才能保证所得结果的准确性。
2.稀释处理：由于待测样品中微生物的数量可能非常庞大，如果不进行适当的稀释处理，将直接进行培养可能会导致菌落过于密集，无法准确计数。
因此，在平板菌落计数中常常需要进行多级稀释处理，以保证所得的菌落数量在一定范围内，便于计数。
3.菌落计数：在恒温条件下培养一定时间后，会形成一定数量的菌落，通过肉眼或显微镜观察，可以将菌落进行计数。
一般来说，只会计数直径约1-2毫米的菌落，超过这个大小的菌落不予计数。
另外，由于每个菌落代表了一个微生物的起始数量，因此得到的菌落数量也就间接反映了原始样品中微生物的数量。
4.统计学处理：为了提高结果的可靠性，常常需要进行多次平板菌落计数，并计算平均值和标准差，来判断实验数据的稳定性和准确性。
另外，还需要进行对数转换，以便使用正态分布进行统计处理。
总的来说，平板菌落计数的原理是通过适当稀释后，将待测样品在琼脂平板上培养并计数形成的菌落，从而间接反映出样品中微生物的数量。
这种方法简单易行，且结果较为准确可信，因此被广泛应用于微生物数量的测定。
LABSTAR50全自动血液细菌培养仪性能评价
LABSTAR50全自动血液细菌培养仪性能评价庞超;周俊杰;刘玮;梅振玉;张敏;张丽君【摘要】目的：介绍LABSTAR 50全自动血液细菌培养仪的结构特点，并评价其性能。
方法：用LABSTAR 50全自动血培养仪与BACTEC 9120全自动血培养仪，对临床血液标本经确认已经培养出的菌株及标准菌株，用生理盐水制备成5cfu／ml和30cfu／ml的菌群，并分别上机进行捡测，并对结果进行比较。
结果：检测灵敏度总符合率为97．620A，，接种量在10-30cfu／mlfl的菌群，LABSTAR50与BACTEC 9120均能阳性报警，符合率为100％。
接种量在1-5cfu／ml的菌群，符合率为95．24％。
阳性报警检测时问总符俞率为94．9％，在士2h以内阳性报警的标准瓶符合率为96．2％、成人瓶为96．2％、儿童瓶为92．6％。
结论：LABSTAR50全自动血液细菌培养仪阳性报警时间、检测灵敏度与BACTEC9120相对照，无显著差异。
LABSTAR50拿自动血液细菌培养仪在主要性能方面上达到了进口同类产揣的技术指标，能够满足我国临床血液细菌培养对自动化快速培乔的费求。
%Objective： To introduce structure and feature of LABSTAR 50 blood-culturing device, and evaluate its function. Methods：Strains and standard strains which were recognized with clinical blood samples were prepared with saline, and the concentration was 5 cfu/mland 30cfu/ml. Then they were tested on LABSTAR 50 blood-culturing device and BACTEC 9120 blood-culturing one. Results： The coincidence rate of the sensitivity was 97.62%. For thestrains with the inoculation volume of 10-30 cfu/ml＇s, the positive report was obtained by both devices. In 1-5 cfu/lnl inoculation, the coincidence rate was 95.24%. The total coincidence rate for positive alarm detection was 94.9%. In ±2 hours,it was 96.2%, 96.2% and 92.6% in the standard bottle, adult one and children one, respectively. Conclusion： There are no significant differences in different parameters between the LABSTAR 50 blood-culturing device and the BACTEC 9120 one. Therefore, the former one can be used in clinical practice in China.【期刊名称】《中国医学装备》【年(卷),期】2012(009)002【总页数】3页(P70-72)【关键词】血液;细菌;培养仪;性能【作者】庞超;周俊杰;刘玮;梅振玉;张敏;张丽君【作者单位】山东鑫科生物科技股份有限公司技术质量部,山东聊城252000;山东鑫科生物科技股份有限公司技术质量部,山东聊城252000;临清市第四人民医院检验科,山东临清252600;山东鑫科生物科技股份有限公司技术质量部,山东聊城252000;山东鑫科生物科技股份有限公司技术质量部,山东聊城252000;聊城市第四人民医院检验科,山东聊城252000【正文语种】中文【中图分类】TH789目前，随着医疗卫生事业的发展，医疗技术水平不断提高。
HiCC-D型全自动菌落计数仪系统
杭州万深检测科技有限公司因为菌落生物的存在多样性，在培养基上的表现或显像不可能大体一致，针对这类变化，在分析软件选型上要考虑：对于各类成像干扰的自动排出能力。
比如：是否能自动矫正背景，等等。
另外，对于严重粘连在一起的团装、链状分布菌落，将其自动分割开来的水平，也是评价分析软件的考量指标。
现在比较好的分析软件，具有图像处理、图像编辑、统计功能、测量功能、数据库管理、以及对抗生素效价分析、药敏分析功能、多培养皿统计、螺旋平皿统计等一系列功能，为此，此款仪器应运而生，成为了不少微生物室所需要的工具。
一、用途用于全自动菌落计数分析等、也可用于显微图像中的颗粒物自动计数分析二、主要性能参数指标1.成像装置杭州万深检测科技有限公司自动对焦的大景深800万像素（3264x2448像素）彩色拍摄仪，具有微距拍摄特性，悬浮暗视野、背光可切换2平皿同时成像分析超薄台板中晶ScanMaker i600 Plus上下LED双光源彩色扫描成像，自动聚焦、亮度可调，能实现光学分辨率2960万像素的均匀背光、暗视野成像，色彩深度48位适应培养皿：50～180mm及A4幅面内的矩形平板，同时测定2个90mm平皿（倾注、涂布、3M纸片、膜滤、螺旋接种平皿）2.菌落计数分析a.自动识别统计：SmartdownTM菌落智能识别技术，具有菌落目标自动增强特性，自动识别大规模团状、链状粘连的长形杆菌（显微形态大片粘连的大肠杆菌、病菌孢子）及平皿上的各类菌落（含金色葡萄球菌计数（GB4789.10-2016）、大肠菌群测定（GB4789.3-2016）等等）。
可自动形成批处理向导，实现一键式自动计数。
杭州万深检测科技有限公司b.自动计数精度≥96.5%，最多监视修正3.5%，即达100%正确。
分析统计速度：150～800个菌落/s，2平皿同时分析时的每个平皿成像+计数总耗时≤4秒。
c.菌落粘连分割：自动分割相互成片粘连的长形、圆形等菌落目标，用户可选择分割或不分割。
全自动菌落计数器原理
全自动菌落计数器原理
全自动菌落计数器是一种用于快速、准确地计数菌落的仪器。
其工作原理可以简单描述如下：
1. 孵育：将需计数的样品以适当的培养基均匀涂抹在培养皿上，并通过恒温恒湿的环境条件进行培养。
菌落在培养皿上生长形成。
2. 图像采集：全自动菌落计数器配备了高分辨率的摄像头，可以对培养皿进行快速而准确的图像采集。
通过调整摄像头的位置和对焦，确保图像清晰可见。
3. 图像处理：采集到的图像会通过计算机进行处理。
首先，计算机会将图像转化为灰度图像，并进行二值化处理，将菌落和培养基背景分离。
然后，计算机会通过图像分割算法将各个菌落分离出来，并计算每个菌落的面积。
4. 计数统计：计算机会根据菌落的面积、形状等特征进行识别和计数。
通常，计数器会设定一个面积阈值，只有满足该阈值的菌落才会被计数。
同时，系统还可以根据用户的需要对菌落的特征进行统计分析，如平均菌落大小、菌落密度等。
5. 结果输出：计算器会将计数结果显示在屏幕上，并可以通过连接电脑或打印机等设备输出结果。
同时，结果也可保存在计算器的内部存储设备中，以便后续检查和参考。
通过以上的工作原理，全自动菌落计数器可以实现对大量样品
的快速、准确计数，提高了工作效率，并减少了人工计数的误差和劳动强度。
教你一招丨标准平板菌落计数法
教你一招丨标准平板菌落计数法检测食品中微生物数量，一般采用标准平板菌落计数法(SPC)对食品中的活的微生物进行菌落形成单位(CFU)数量的检测，即将部分样品取出混合均匀，用适当的稀释液进行梯度稀释，取一定量的稀释液涂布或倾注琼脂平板，在合适的温度下培养一定的时间，然后通过肉眼观察或电子计数器对所有可见菌落进行计数。
虽然日常检测大多采用倾注平板的方法，但是涂布法在检测热敏性菌体方面更有优势，能取得更好的计数结果，而且更适合于严格好氧菌。
涂布法的缺点是涂布时琼脂表面不干燥和培养后菌落蔓延导致无法计数。
(一)菌落计数器平板上的菌落个数可用肉眼直接观察进行计数，也可以借助仪器进行。
菌落计数器是一种数字显示式自动细菌检验仪器。
由计数器、探笔、计数池等部分组成，计数器采用CMOS集成电路精心设计， LED数码管显示，字高13mm,清晰明亮，配合专用探笔，计数灵敏准确。
黑色背景式计数池内，荧光灯照明，菌落对比清楚，便于观察。
菌落计数器分手动、半自动和全自动三种类型，可根据对精确度的要求，选择不同的计数器。
使用方法： (1)接通电源，平板去盖，皿底朝下放入计数器后开始计数，从平板的顶部开始计数，用方格线标记防止重复计数，利用这种机械式手动计数器，计数每一个菌落，无论多小或不典型。
(2)将探笔插入仪器上的探笔插孔内。
打开计数器，接通电源，计数池也内灯亮，并且显示窗内显示明亮，可以进行计数。
把待检的培养皿皿底朝上放入计数池内，并用探笔在培养皿底面对菌落进行计数，点到的菌落处被标上颜色，显示窗内数字会自动累加。
用放大镜仔细检查，确认点数无遗漏后，显示窗内的数字即为该培养皿内的菌落数。
使用注意事项：仪器要放在平整牢固的试验台上，点数时，探笔不要过于倾斜，轻点至有弹跳感，数字即可显示。
仪器应防尘，放大镜表面的灰尘，要用纯化水清洗后，再用镜头纸擦拭干净即可，另外还应防潮、防剧烈震动、防日光曝晒、防酸碱等，使用完后加防护罩。
ISO17025实验室认可现场评审不符合项案例集-SLD中检实验室技术
ISO17025实验室认可现场评审不符合项案例集-SLD中检实验室技术第一篇：ISO17025实验室认可现场评审不符合项案例集-SLD中检实验室技术ISO17025实验室认可现场评审不符合项案例集为了使大家对ISO17025实验室认可现场评审的不符合项有所了解，SLD中检实验室技术按照《检测和校准实验室能力认可准则》（CNAS-CL01）的要求，整理出常见的不符合项类型分享给大家。
这些不符合项案例主要涉及5M1E:即人、机、料、法、环、测等六大方面，具体按：①组织；②管理；③人员；④设备；⑤环境；⑥方法；⑦溯源；⑧文件；⑨记录；⑩报告等要素进行分类。
另外，案例集将不符合CNAS规则文件要求的典型案例单独归为一类，基本上覆盖和体现了认可评审中实验室普遍和经常出现的问题。
一、对不符合项案例集的说明1、建立本案例集的目的：是为让实验室了解认可评审中经常发现的问题，分析自身体系运行和能力维持中是否存在类似的问题，不断提高实验室的管理水平，确保检测或校准结果的准确性和可靠性。
2、不符合项的来源：CNAS秘书处汇总的745份评审报告中的2674个不符合项，从中甄选出比较典型的，在认可评审中经常发现的不符合项。
本案例集基本能够体现认可评审中实验室普遍存在的问题，尤其是对于校准、机械和电器检测领域，以及部分跨多个专业领域的综合分析机构。
3、不符合项的分布：从2674个不符合项来看，基本覆盖了CNAS-CL01的每个条款，其中以设备校准不符合项最为常见。
按不符合项出现的概率看，排在前几位的依次为：① 设备校准和准确度（5.6.1/5.5.2）；② 技术记录（4.13.2.1）；③ 方法验证和方法确认（5.4.2）；④ 实验室的作业指导书（5.4.1）；⑤ 服务和供应品的符合性检查（4.6.2）；⑥ 质量控制（5.9.1）；⑦ 设施环境（5.3.1）；⑧ 内审（4.14.1）；⑨ 供应商的评价（4.6.4）。
二、本案例集中的不符合项分为以下十五大要素：1、组织；2、人员：人员职责、人员资格、人员能力、监督和培训；3、设备：设备配置、设备维护、设备标识及设备档案、标准物质的管理；4、计量溯源性：设备校准、校准结果的确认、设备的期间核查和校准产生的修正因子的应用；5、设施和环境条件：环境设施、监控、相邻区域的不相容、安全防护和隔离；6、检测/校准方法：标准和作业指导书、方法确认和方法验证、测量不确定度评定；7、样品：样品接收和处置、样品标识和样品存储；8、合同评审：合同评审和分包；9、质量控制：质控计划、质控的实施；10、文件及文件控制：文件架构、文件管理和文件标识；11、服务和供应品采购：供应品的采购、存储和验收以及供应商评价；12、记录：记录的管理、记录信息不全和电子记录的管理；13、检测/校准报告：检测报告和校准证书中的信息不全和不够准确。
菌落计数器标准操作规程
目的：本程序《菌落计数器使用说明书》规定了菌落计数器操作程序。
范围：本程序适用于JLQ—S型菌落计数器。
职责：质量管理部、QC内容：1接通200V电源，打开照明开关，将待检菌落平板翻转，底部朝上，放在灯光透射处，调节放大镜位置至菌落看的最清楚后固定镜头，探笔插入面板右上角孔中。
2按以下步骤操作计数计算器，先按一下ON/C键，显示器上显示“0”，再按一下“1”的数字键，显示器显示“1”，再按一下“+”号键，此时显示器显示“1”，再按一下“=”号键，显示器仍显示“1”，再按一下“0”字键，此时显示器显示“0”。
这时即可用探笔在菌落平板上进行累加计数。
3探笔使用方法：探笔是由三种不同颜色的针管尼龙笔和一支金属探笔头组成，在使用探笔时，需拔下尼龙笔的笔套、笔杆、将相同于笔杆颜色的彩色小墨水瓶剪开，对准储水芯徐徐挤入，墨水不宜加得太多，将加好墨水的储水芯连同笔尖套插入有带引线及插头的金属探笔头的套管内，使尖套塑料部分暴露在金属管外28mm左右，并有插入到底的感觉。
然后插入计数器插孔中进行计数器是否正常计数的试验。
探笔一般按平常书写钢笔时的握法（但不能握在笔尖塑料部分），宜倾斜一些，不能垂直于工作面，探笔在平板上进行碰触计数器时，能感觉到探笔有轻微的摆动。
计数完毕后，应将笔尖塑料杆连同储水芯从金属探笔头上取下，装入原来的塑料笔套中，以免墨水干掉，为了区别菌落在不同培养阶段的检测记录，仪器所备的三种颜色笔，后按上述方法换装不同的颜色。
4在计数时，将探笔在平板上碰触一下，计数器即计一个数，与此同时，探笔在平板上点上一个色点，表示此菌落已被数过。
以后每碰触一次，探笔点一个色点，计数器即累加一个数，直到所有的菌落都被点上色点，显示器中显示的读数即为该平板的菌落数。
5在计完某菌落平板后，如需再计其它平板的菌落数，可继续直接累加，待总的平板都数完后除以平板数即是平均数，也可使用存储键求平均数，在数完一个平板后，按一下M±键显示器上角显示“MEM”，表示此数已被存入，再按一下“0”字键，显示器上角显示“MEM”，右边显示“0”，即可继续计数。
微生物快速检测方法
缺点
需要额外的支出购买真空泵，多联支架及一次性滤膜； 如果抽滤过程空气洁净度不够，有可能造成二次污染， 尤其是对菌数要求特别严格的产品，如啤酒，澄清果 汁，桶装饮用水等。
ATP生物萦光法
原理
ATP＋萤光素+萤光素酶+O2—AMP+Ppi+CO2+氧化萤光素+光
电阻抗法测定细菌总数
M=(R0-RT)/R0×100% 其中R0表示开始时培养基的阻抗值 RT表示任意时刻培养基的阻抗值 M表示培养基电阻减少的百分数。
电阻越小细菌活动越多，在一定范围内，菌落形成单位的 对数Log(CFU)与IDT（阻抗检测时间）呈直线关系。
电阻抗法测定细菌总数
优缺点： 电阻抗法较省力，样品细菌数在4～18小时内出结果。但 对于菌数太低的不好，样品中还不能用防腐剂，否则结果 是乱七八糟的。
三种型号的差异
产 号 品 型 主 数 要 参 总 数 活 菌 酵 霉 母 菌 和 数 大 菌 肠 肠 和 菌 杆 大 群 贾 毛 隐 虫 第 虫 孢 鞭 和 子 处 度 理 速 灵 敏 度 适 围 用 范 1-4 样 小 01个 / 时 品 101000 细g 0-0,0 个 / 胞 适 含 较 用 菌 高 于 量 的 食 化 及 品 妆 水 、 品 等 样 每 测 品 天 量 。 检 不 大0 样 于 品 4个 。 Bcilw atfo √ √ CeSa RI hmcn D Ra-ieaaye Dcut eltm nlsr -on √ √
显色培养基：
a--清酒假丝酵 母菌， b/e--光滑假丝酵 母菌， c-白色假丝酵母 菌 d-热带假丝酵母 菌 f-克柔假丝酵母 菌 G-光滑假丝酵母 菌
VITEK32全自动微生物分析仪标准操作程序
VITEK32全自动微生物分析仪标准操作程序(一)开机与关机1、开机1.1 先开稳压电源、UPS、打印机、电脑显示屏，然后开电脑主机。
再打开读数孵育箱电源，先开交流电源（AC power），再开电池电源（Battery）。
1.3 在login处键入SUPV按Enter在password处键入SUPV按Enter（屏上不显示）。
1.4 出现bioLIAISON主菜单，击VITEK，进入VITEK目录和状态窗口。
1.5 在读数器状态窗口（VITEK Reader Status）击Process on。
1.6 当读数器/孵育箱与电脑主机正常联接后，会有一提示信息出现在屏幕上。
2、关机2.1 先在读数器状态窗口（VITEK Reader Status）击Process off，待系统接受，退至主菜单。
2.2 击bioLIAISON主菜单中System。
2.3 选择System Maintenance，击Stop the System。
2.4 在TIME the system goes down(in minutes from now)后输入关机时间，若马上关机可输入0，击屏幕左下方的Execute，待菜单顶部出现OK。
2.5 待屏消失5-10分钟后关机。
2.6 关机次序：先关电脑主机，再关显示器电源、打印机电源、UPS电源和稳压器电源开关。
关读数器/孵育箱电源时，先关电池电源开关，再关交流电源。
(二)选择测试卡1、鉴定卡GNI+ 革兰阴性菌鉴定卡 NHI 奈瑟菌、嗜血菌鉴定卡GPI 革兰阳性菌鉴定卡 EPS 肠道致病菌筛选卡NFC 非发酵革兰阴性菌鉴定卡 BAC 芽孢杆菌鉴定卡YBC 酵母菌鉴定卡 UID 尿道致病菌筛选卡ANI 厌氧菌鉴定卡2、药敏卡GNS-××× 革兰阴性菌药敏卡GPS-××× 革兰阳性菌药敏卡(三)标记测试卡1、用专用记号笔在测试卡编号位置进行试验编号，如000101，同时在检验申请单或登记本上作好试验编号记录。
微生物快速检测技术资料
快速检测方法势在必行！！
• 国外许多政府检测机构都在大量使用快速检测 方法，尤其是ATP法、免疫法、阻抗法和显色 培养基法在国外应用相当成功。 • 国内的许多政府检测机构也都已经在使用或正 在考虑使用国外先进的快速检测技术。 • 从长远发展趋势来说，快速方法是微生物检测 的一大方向。
一、常规微生物快速检测技术现状
荧光酶标记原理
•直接单细胞标记 (包括孢子)
•细胞无增菌要求
•标记在90分钟内完成 •直接对活细胞和酵母进行标记
标记的细菌
标记后的酵母
标记后的霉菌
ChemScan RDI
三个简单的步骤
1. 过滤
2. 标记
3. 激光扫描
检测步骤 - TVC
1. 过滤 2. 标记 3. 激光扫描
样品过滤
预标记
LUM-T的独特优势
• • • • • • CHEF 熟肉制品成熟度检验 MicroQ 水中微生物污染程度检测 Cidelite 杀虫剂残留初筛 Paslite 牛奶巴氏消毒效果 Somalite 体细胞计数 SL/MRL test 抗生素残留检测（连接 ROSA imager)
Charm ATP 检测
表面洁净的检测方法 • 微生物学法：纸片、琼脂板、 棉签拭子、海绵拭子 • 非微生物学法（快速法）： ATP(三磷酸腺苷，蛋白质, 降 解糖、NADP(辅酶II)，其它。
（一）ATP法 ATP---三磷酸腺苷
ATP来源于
细菌 酵母 霉菌 生物膜 组织残留
废弃物污染 人的污染
1. 人接触设备或器具 2. 设备或器具被污染 3. 清洗不正常 4. 非正常的敏感物污染 5. 微生物污染
世界上最好的电化学微生物快速检测产品 Bactrac 4300系统
全自动菌落计数仪操作手册
全自动菌落计数仪操作手册
Smartcounter自动菌落计数仪广泛应用于食品和饮料的品质和卫生检验、乳制品行业、医院、化妆品、制药工业当中的微生物实验室检测等等，适用于对微生物的菌落计数和分析，能够完成所有的菌落读数类型，Smartcounter用户操作界面简洁、易用，是现代微生物检测实验室先进和高效的菌落计数器。
仪器特点：
彩色高清晰CCD摄像镜头，在硬件上保证了实验数据结果的准确可靠。
开放式平台设计，操作更方便、快捷。
底部LED双光源下沉设计，可避免外界光线对开放平台上的菌落影像干扰。
Smartcounter用户操作界面友好、简洁、易用，实验人员可以快速上手、掌握实验菌落计数操作。
快速读取平板、螺旋、涂布、倾倒等菌落数，节省大量的人力和时间，通过Smartcounter菌落智能识别技术，一秒内完成常规平皿计数。
全自动菌落计数仪采用加密U盾，有效保障数据库管理和数据的安全。
可追踪性：可保存每一次结果，节省空间，数据自动处理，储存平板图像，为监督检测提供有效的法律依据。
全自动菌落计数仪具有区分8种不同样色菌落，最大限度提高准确性;
人工修正：可人工添加、删除菌落，对设备的统计结果进行修正。
全自动菌落计数仪可直接划出去除区域，方便划定平皿的删除区域。
自动菌落计数仪安全操作及保养规程
自动菌落计数仪安全操作及保养规程自动菌落计数仪广泛应用于医学、环境监测、食品卫生等领域，它可以快速、准确地检测食品、水质和药品等样品中的细菌数量。
因此，正确使用和维护自动菌落计数仪是保证实验结果准确和保证操作人员的安全的关键之一。
本文将从安全操作和保养规程两个方面，提供自动菌落计数仪的使用和维护指南。
安全操作规程1. 仪器安装自动菌落计数仪应该放置在通风良好、无尘、温度适宜的实验室中，同时应该放置在平稳的工作台上。
在安装过程中，必须确保电源和电压都符合仪器的要求。
注意：不要在湿度过大的场所放置仪器，否则会影响其正常工作。
2. 样品处理在进行实验前，样品必须进行处理和准备。
所有的试剂必须是干燥的，并确保它们没有变质和过期。
在处理样品时，必须戴上手套和口罩，以避免样品对操作人员产生危害。
注意：不要将有害、有毒、易燃的样品用于自动菌落计数仪实验。
3. 仪器启动前的准备在启动自动菌落计数仪之前，应该检查仪器的配件是否齐全，仪器内部是否存在异物，同时也要保证仪器所连接的电源和通讯线路都是稳定和可靠的。
注意：在打开自动菌落计数仪之前，我们必须查阅使用说明书以了解正常操作的程序和注意事项。
4. 仪器开启在进行仪器开启操作时，必须按照使用说明书中的步骤进行，以避免因操作错误而导致的仪器故障或人员伤害。
注意：操作人员在使用自动菌落计数仪的过程中，必须严格遵守安全操作规程，否则将会对人员造成伤害。
5. 实验完成后的清理工作在实验完成后，我们需要将所有的配件和仪器清理干净。
废液和废物需要进行隔离、分类和妥善处理。
同时，还需要定期对仪器进行保养和维护。
注意：将废物随意堆放和处理，将会对环境造成巨大的污染。
仪器保养规程1. 仪器清理我们必须保证仪器的清洁和干净。
在进行清理时，我们必须使用配有干净、软质布片。
清洁时，必须避免使用稀释剂、酸、碱等物质，因为它们可能会损坏仪器的有效部分。
注意：不要直接在仪器上喷洒清洁剂，这将会对仪器的有效部分造成损害。
基于Unet++分割模型的全自动高通量菌落计数仪
基金项目:贵州省科技支撑计划项目(编号:黔科合服企[２０２１]６号);国家市场监督管理总局科技计划项目(编号:２０１９MK １４２)作者简介:申鹰,女,贵州省分析测试研究院高级工程师,硕士.通信作者:谢锋(１９７９ ),男,贵州省分析测试研究院研究员,博士.E Ｇm a i l :x i e f e n g＠g z a t a ．c n 收稿日期:２０２２Ｇ１１Ｇ２３㊀㊀改回日期:２０２３Ｇ０７Ｇ１８D O I :１０．１３６５２/j ．s p j x ．１００３．５７８８．２０２２．８１０９０[文章编号]１００３Ｇ５７８８(２０２３)１１Ｇ００５３Ｇ０５基于U n e t ＋＋分割模型的全自动高通量菌落计数仪A na u t o m a t i c h i g h t h r o u g h p u t c o l o n y co u n t e r b a s e d o nU n e t ＋＋s e g m e n t a t i o nm o d e l 申㊀鹰１S H E N Y i n g１㊀谢㊀锋１X I EF e n g １㊀王玉琳１WA N GYu l i n １㊀谭㊀波２T A N B o ２㊀范金旭１F A N J i n x u １(１．贵州省分析测试研究院,贵州贵阳㊀５５００１４;２．贵州省检测技术研究应用中心,贵州贵阳㊀５５００１４)(１．G u i z h o uA c a d e m y o f T e s t i n g a n dA n a l y s i s ,G u i y a n g ,G u i z h o u ５５００１４,C h i n a ;２．G u i z h o uT e s t i n g T e c h n o l o g y R e s e a r c ha n dA p p l i c a t i o nC e n t e r ,G u i y a n g ,G u i z h o u ５５００１４,C h i n a )摘要:目的:研制满足检验检测机构管理体系要求和实验室L I M S 系统应用的全自动高通量菌落计数仪.方法:采用G i g E 工业相机㊁可变镜头和多光源组合照明系统进行菌落图像的连续采集,并采用U n e t ＋＋分割模型进行图像识别处理和菌落计数.结果:该菌落计数仪完成１个平板的图像采集仅需３８s ,采集效率较高;完成１个平板的图像传输和菌落识别计数整个过程仅需３~５s ,数据处理速度快且传输性能好;计数结果与现行标准要求的计数方法相比误差＜８％,准确率高;具有结果重复性好等特点,同时实现了菌落总数检测原始数据的自动化处理.结论:该设备不仅能高通量进行图像采集,自动进行图像处理和菌落计数,还可实现与实验室L I M S 系统的融合,有效提高工作效率,而且能确保数据的溯源性,减轻试验人员工作强度,满足菌落总数计数方法的误差要求.关键词:菌落计数;全自动;高通量;U n e t ＋＋分割模型A b s t r a c t :O b j e c t i v e :T oi m p r o v et h ed e t e c t i o ne f f i c i e n c y o ft h e a e r o b i c p l a t e c o u n t e r ,t o m e e t t h e r e q u i r e m e n t s o f q u a l i t y m a n a g e m e n t s y s t e mo f t h e i n s p e c t i o n a n d t e s t i n gi n s t i t u t i o n s a n d t h e a p p l i c a t i o no f l a b o r a t o r y L I M S s ys t e m．M e t h o d s :I tw a s u s e d t oc o n t i n u o u s l y c o l l e c t e d o fc o l o n i e si m a g et h r o u g ht h e G i gE i n d u s t r i a l c a m e r a ,v a r i a b l e l e n s a n d m u l t i p l e l i g h t s o u r c e s c o m b i n e dl i g h t i n g s ys t e m ,a tt h e s a m et i m et h e U n e t＋＋s e g m e n t a t i o n m o d e lw a su s e df o ri m a g er e c o g n i t i o n p r o c e s s i n ga n d c o l o n y c o u n t i n g ．R e s u l t s :T h e c o l o n y co u n t e r h a d t h e c h a r a c t e r i s t i c so fh i g hc o l l e c t i o ne f f i c i e n c y ,i to n l y t o o k３８s t o c o m p l e t e t h e i m a g e a c q u i s i t i o n o f o n e p l a t e ．I t o n l y t o o k ３~５s t o c o m p l e t et h e w h o l e p r o c e s so fi m a g et r a n s m i s s i o n a n dc o l o n y i d e n t i f i c a t i o na n dc o u n t i n g o fo n e p l a t e ,a n di th a df a s td a t a p r o c e s s i n g s p e e da n d g o o dt r a n s m i s s i o n p e r f o r m a n c e ．C o m pa r e d w i t h t h e c o u n t i n g m e t h o dr e q u i r e db y th ec u r r e n t s t a n d a r d ,t h e e r r o r r a t eo f t h ec o u n t i n g re s u l tw a s l e s st h a n８％,a n di th a d h i g ha c c u r a c y of c o u n t i ng r e s u l t sa n d g o o dr e p e a t a b i l i t y．A t t h e s a m e t i m e ,i tr e a l i z e dt h ea u t o m a t i c p r o c e s s i n g o ft h eo r i g i n a l d a t a o f t h e a e r o b i c p l a t e c o u n t d e t e c t i o n ．C o n c l u s i o n :T h ee q u i p m e n t c a n n o t o n l y c a r r y o u t h i g h Ｇt h r o u g h p u t i m a g e a c q u i s i t i o n ,a u t o m a t i c i m a g e p r o c e s s i n g a n d c o l o n y c o u n t i n g ,b u t a l s oc a nr e a l i z et h ef u s i o n w i t ht h el a b o r a t o r y L I M Ss y s t e m ,e f f e c t i v e l y i m p r o v e t h ew o r k e f f i c i e n c y．M e a n w h i l e ,i t c a n e n s u r e t h ed a t a t r a c e a b i l i t y ,r e d u c e t h e w o r k i n t e n s i t y o ft h e t e s t p e r s o n n e l ,m e e t t h e e r r o r r e q u i r e m e n t s o f t h e a e r o b i c p l a t e c o u n t m e t h o d ．K e y w o r d s :c o l o n y c o u n t i n g ;a u t o m a t i c ;h i g h t h r o u g h p u t ;U n e t ＋＋i m a g e s e gm e n t a t i o nm o d e l 在食品㊁化妆品㊁环境监测㊁医疗卫生检验等行业的质量检测过程中,菌落计数是一项基础又重要的日常工作,是判断被检产品卫生质量的依据,但菌落计数的平板数量往往较多,计数工作较繁重[１].随着计算机与图像分析技术的发展,借助人工智能及图像处理工具等降低工作强度,提高工作效率[２],实现自动计数已成为一种趋势,菌落计数工作也不再是单纯依靠人眼识别和计数[３－４],而是利用基于图像识别和处理的自动菌落计数３５F O O D &MA C H I N E R Y 第３９卷第１１期总第２６５期|２０２３年１１月|方法[５－６],不仅大大提高了菌落计数的准确度和工作效率,同时也相对减轻了检测人员的工作量[７].目前,用于菌落计数的仪器在计数软件方面大多采用传统的语义分割模型,通常采用浅层次的特征图进行分割,分割精度不佳㊁分割结果的边界不够清晰㊁难以处理遮挡问题㊁分割结果出现错误,且只能用于特定领域的数据集,具有较大的参数量,需要耗费大量的计算资源[８－９];在硬件方面存在所采集图像易受平板背景阴影干扰㊁需要检测人员将待测平板样本逐一放到全自动菌落计数器内进行拍摄和计数,从某种程度上说,检测人员需要做的重复性工作较多,因此常见的菌落计数仪在基层检验实验室中至今未得到很好的应用.另外,目前计数系统大多数局限于菌落的计数结果,无法实现检测过程和信息可追溯.因此在检测工作数量大和效率高的双重要求下,研究拟针对现存问题研发一种基于流水线操作的全自动高通量菌落计数仪,在硬件设计方面,以实现批量连续自动采集平板菌落图像方式,试验人员只需要进行平板装载,系统会将平板自动输送至指定拍照位置,自动对焦后进行拍摄,拍照完成后系统自动进行下一个平板的运送和拍摄[１０];在计数软件方面,采用一种深度学习的语义分割模型U n e t＋＋模型进行计数软件开发[１１－１２],使其能够更好地提取特征信息,分割边界方面表现更好,在较短时间内完成训练和推理,更好地解决遮挡问题;同时将该设备与实验室L I M S系统进行连接以实现一键生成原始记录[１３],旨在为菌落计数的自动化和高通量技术提供依据.１㊀菌落计数仪机械结构设计１．１㊀菌落计数仪机械结构组成菌落计数仪主要由箱体㊁上料框㊁平板输送系统㊁拍照系统㊁物料回收系统组成,其中拍照系统由G i g E工业相机㊁可变镜头和照明系统组成.１．２㊀平板输送系统设计平板输送系统主要由箱体㊁平板装载载具㊁平板输送模块㊁平板回收载具㊁机械夹具等组成,平板输送模块通过气缸和机械抓手将平板输送至不同阶段需要到达的预定位置.试验人员将通过菌落总数检测试验所形成的菌落平板装载于平板装载载具中,由顶升装置将平板装载载具移动至指定位置;机械夹具将平板自动输送并投放至指定拍摄点,仪器自动进行载具挡停定位;待拍照完成,平板输送模块将平板输送至回收工位及平板回收载具中.平板输送系统工作流程如图１所示.１．３㊀图像采集系统设计图像采集系统由视觉工控机(X E PＧ２１００)㊁G i g E工业图１㊀平板输送系统工作流程图F i g u r e１㊀W o r k f l o wd i a g r a m s o f c o n v e y e r s y s t e m相机和镜头(彩色１０．７M P像素相机,１０M P像素８MM C C D)㊁定制光源组(KMＧR１D１１０VＧW,多光源组合定制)组成,采用多光源组合配合背光照明,通过调节环境亮度㊁色温㊁减少反光等方式改善拍照环境,选用１６００万像素G i g E工业相机㊁可变镜头和照明系统组合进行拍摄,以保证照片的清晰度[１４].当平板输送系统将平板输送至指定拍照位置后,图像采集器系统会自动运行,光源和摄像头自动下移至预设高度,自动对焦后进行拍照,拍照完成后,光源和摄像头自动归位.当第一个平板拍照工序全部完成后,机械夹具㊁光源和摄像头自动归位并进入下一个平板的拍照工序,如此循环完成该批次所有平板的拍照.２㊀菌落计数软件设计菌落计数包括图像预处理㊁语义分割㊁菌落计数(包括结果输出及人工校正)三部分.２．１㊀图像预处理２．１．１㊀改变图片像素㊀图像采集器使用高清摄像头,所采集到的图片分辨率大小为４０６８ˑ３４５６,将该尺寸的图片直接输入模型进行识别将会极大地增加运算的复杂程度,且分辨率过高的数据并不会明显提高识别的准确程度.因此,将图片大小变换到９１２ˑ６８８,才能在保证较高准确度的同时最大限度地减少运算复杂度,提升软件的运行效率[１５].２．１．２㊀去除边界㊀针对菌落图片较为规则的特点,选择d c i r c l e的方法,首先对菌落图片中平板的圆形边界进行学习,避免去除边界时造成菌落未被计数而形成计数误差,然后在进行菌落识别前先将图片的平板边界去除,以减少边界对最终识别结果的影响[１６].２．１．３㊀顶帽变换㊀为了增加输入图像的对比度,提升分割效果,需要在识别之前对图像进行增强处理,主要目的是根据实际需要有选择地突出图像的重要信息的过程.图像增强处理是图像分割之前的重要部分,对于提高图片质量,进而提高分割精度有着非常重要的作用.针对４５安全与检测S A F E T Y&I N S P E C T I O N总第２６５期|２０２３年１１月|图片采集过程中存在的平板照片亮度不均匀的问题,同时菌落相对于背景而言是在暗背景上亮物体,系统设计中选择通过形态学顶帽变换的方法增强图片对比度,提升计数精度[１７－１８].２．２㊀语义分割选择U n e t㊁U n e t＋＋㊁R e s n e t５０㊁R e s n e t１０１等８类软件识别模型[１９－２０],在相同的数据集上进行对比,训练集为有标注的２２４张平板菌落照片,使用m i n i b a t c h的方法训练２０个e p o c h,在２０张图片构成的验证集上进行验证得到各项指标见表１,通过对各项指标进行对比分析,选择最好的识别模型作为图像识别系统的语义分割模型.㊀㊀由表１可知,U n e t＋＋模型在进行菌落分割自动计数时具有明显的优越性,U n e t＋＋模型在训练集与验证集上的F１得分㊁平均交并比以及误差率均优于其他语义分割模型.因此,在进行平板菌落自动计数软件开发过程中,选择使用U n e t＋＋模型作为语义分割的主要模型.表１㊀８类模型性能验证结果T a b l e１㊀P e r f o r m a n c e v e r i f i c a t i o n r e s u l t s o f e i g h t d i f f e r e n tm o d e l s模型F１得分平均交并比图像误差率计数误差率U n e t０．７４４/０．８４３０．４０２/０．５６９０．７３２５/０．３１７３０．７９５６/０．３２３１U n e t＋＋０．８０３/０．８７３０．５０７/０．６２４０．５０２２/０．２２１７０．６２１４/０．３３５７R e s n e t５００．７８５/０．８４１０．４７５/０．５５４０．６５７２/０．３２８９０．８２１３/０．４２０３R e s n e t１０１０．７８４/０．８３６０．４７３/０．５５１０．６１４９/０．３０４５０．７２８４/０．３９７３V g g１６０．７９５/０．８５００．４９１/０．５７９０．４０６７/０．３９２１０．５９０４/０．４９０８S q u e e z e n e t０．６６６/０．７１５０．２７５/０．３３１０．８６６８/０．４３８７０．９９０２/０．４９３１O c r n e t０．７１４/０．７８２０．３６１/０．４４９P S P N e t０．７７５/０．８４５０．４４８/０．５６９２．３㊀菌落计数２．３．１㊀菌落识别系统运行流程㊀基于p y t h o n语言进行图像识别系统开发,首先在拥有４块３０８０T i的服务器上进行语义分割模型训练,保存训练完成的模型参数,利用该模型参数进行菌落识别系统开发.菌落识别系统的运行主要包括平板图像的采集㊁数据的预处理以及菌落计数３个部分,整个运行流程如图２所示.图２㊀软件运行流程图F i g u r e２㊀T h e f l o wc h a r t o f s o f t w a r e o p e r a t i o n ２．３．２㊀菌落识别系统界面及使用㊀菌落识别系统界面主要包括对图片的旋转㊁平板边缘的去除㊁在形态学上对图片进行增强㊁对菌落的分割㊁人工校正功能以及最终计数的结果等.㊀㊀如图３所示,首先选择需要计数的菌落图片进行上传,上传完成后即可在软件界面左侧显示所选菌落图片及该菌落图片的基本信息,例如采样时间㊁样品编号㊁样品检测时间等;然后点击菌落识别按钮,菌落识别系统自图３㊀软件功能界面显示F i g u r e３㊀D i s p l a y i n t e r f a c e o f s o f t w a r e f u n c t i o n动进行菌落识别和计数,系统识别到的菌落会在菌落图片上进行颜色标注,并将菌落数量显示在软件界面右侧的计数结果栏内;若检测人员发现在菌落识别过程中产生了结果偏差,可以直接在显示标记状态处增加或者减少标注,计数结果将根据菌落识别的标注变化情况而自动进行计数结果的修改;最后点击确认即可通过统一格式的命名方式将图片以及自动计数的结果进行保存;同时,实验室L I M S系统预先绑定有包含计算公式的菌落总数项目原始记录模板,L I M S系统通过样品编号信息及数据接口将计数结果输入原始记录模板中对应空格处,完成原始记录表格的填写.３㊀试验验证３．１㊀菌落图像采集效果验证由图４可知,其他图像采集器拍摄的图片存在不同５５|V o l．３９,N o．１１申㊀鹰等:基于U n e t＋＋分割模型的全自动高通量菌落计数仪a~c为通过试验所述的菌落计数仪图像采集系统采集的菌落图片;d~f为其他图像采集器拍摄的图片图４㊀菌落图像采集效果对比F i g u r e４㊀I m a g e s o f c o l o n i e s c o l l e c t e db yo t h e r e q u i p m e n t程度的反光点㊁背景干扰或者边缘效应等情况,而采用试验所述的菌落计数仪图像采集系统采集的菌落图片不存在这些问题,边缘和各种形态的菌落均能被清晰地呈现出来,且不受培养基颜色和菌落形态的影响,采集一个平板图像需要的时间仅为３８s,能很好地克服其他采集方式的缺点,为菌落的准确识别和计数提供保障.３．２㊀菌落图片预处理效果验证通过像素变换㊁边缘检测㊁顶帽变换等预处理[２１],得到的菌落图片预处理前后的对比图.㊀㊀由图５可知,通过形态学顶帽变换的方法增强图片的对比度,可提升计数精度,图像经像素变换㊁边缘检测㊁顶帽变换等图像预处理后,将边缘淡化㊁菌落突出显示.经图像预处理后的菌落相对于背景而言是在暗背景上的亮物体,能很明显地显示出系统对菌落的识别.３．３㊀菌落分割计数及校正通过U n e t＋＋模型对平板图片进行分割,然后计算图５㊀菌落图片预处理前后对比F i g u r e５㊀C o m p a r i s o no f c o l o n y i m a g e sb e f o r e a n da f t e r p r e t r e a t m e n t分割之后的图片的连通域个数,最终实现菌落图片的自动计数[２２].模型分割的结果将在原图中以深色标注出来,即深色覆盖的部分为模型自动识别到的菌落,而未覆盖的部分或者错误覆盖的部分即为识别错误,语义分割模型进行处理后可以将不同的菌落进行分割,无论是较为规则的偏向圆形的菌落还是不规则形状菌落都可以实现识别,且图像传输和菌落识别计数整个过程所需时间仅为３~５s.为了使菌落计数结果更加准确,在菌落计数识别软件中增加人工校正功能,研究人员可以通过对识别结果的观察,并与原图和实物进行对比后根据需要进行人工校正,在模型辅助的情况下通过对识别后的图像进行连通域计算,系统自动计算出平板的菌落个数并显示在软件界面中对应的位置.３．４㊀菌落图片采集效率㊁传输速度㊁计数结果准确性和重复性利用试验设备对包含不同形态菌落的５００张菌落图像进行菌落总数识别,并将识别结果与现行菌落总数计数标准计数所得结果进行比较和误差分析,结果见表２.㊀㊀由表２可知,试验设备对包含不同形态菌落的５００张菌落图像进行菌落总数的识别平均误差＜８％,且计数的重复性非常好,大部分计数结果无差别,仅个别菌落计数时两次结果出现微小差别.这可能是因为菌落之间粘连成片或者成串比较严重的平板,人眼识别时也无法准确进行分割,因此降低了识别的准确率.表２㊀菌落总数自动计数结果及误差分析†T a b l e２㊀R e s u l t s a n de r r o r a n a l y s i s o f t h e a e r o b i c p l a t e c o u n t a u t o m a t i c a l l y c o u n t菌落总数/ C F U 样本数量/个计数结果误差最小误差/％最大误差/％平均误差/％结果差异性/％＜５０１０００．００１８．７５７．８６０．００５０~１００１２３２．５０１３．０４７．６５０．００~１．０２１００~２００１２０２．９４５．２９３．１６０．００~１．３２２００~３００１２４２．５０５．５２２．４４０．００~１．８９＞３００３３２．０６４．８５１．６３０．００~０．６７㊀†㊀误差＝(仪器计数结果－人工计数结果)/人工计数结果ˑ１００％;结果差异性为同一菌落平板连续采集并计数得到的结果之间的差异.６５安全与检测S A F E T Y&I N S P E C T I O N总第２６５期|２０２３年１１月|４㊀结论研究了菌落图像算法㊁菌落计数系统与L I M S系统的融合,通过采用G i g E工业相机㊁可变镜头和多光源组合照明系统进行菌落图像的连续采集,并采用U n e t＋＋分割模型开发了一种全自动高通量菌落计数仪.结果表明,该设备与L I M S系统进行无缝链接,实现了菌落图像的批处理采集和菌落自动计数,且菌落计数结果可以一键上传至L I M S系统并生成原始记录,实现了实验室设备的自动化㊁智能化,克服了以往很多菌落计数软件中的模型部署效率低和特征融合匹配度低的缺点,且该仪器的菌落识别软件设计了学习功能,软件会对检验检测人员在校正过程中进行的菌落形态等形成记忆,并应用于后续的菌落识别中,使菌落计数准确率不断提高,在提高菌落计数工作效率和结果准确性的同时,实现了检验检测过程的可追溯.采用U n e t＋＋分割模型的全自动高通量菌落计数仪对蔓延菌落㊁粘连成片或者成串比较严重的菌落计数还存在误差,后期可利用软件学习功能加大模型训练,逐渐提升这类菌落计数准确率.参考文献[1]马健锦.基于机器视觉的菌落自动计数软件开发[J].海峡科学, 2019(1):37Ｇ40,65.MA J J.Development of automatic colony counting software based on machine vision[J].Straits Science,2019(1):37Ｇ40,65.[2]郭佳,王娉,周继福,等.Microbio方法与平板计数方法在菌落计数中的比较[J].食品与发酵工业,2020,46(13):237Ｇ243.GUO J,WANG P,ZHOU J F,et al.A comparative study between Microbio method and plate counting method on colony counting[J]. 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细菌菌落计数实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握细菌菌落计数的原理和方法。
2. 学会使用平板菌落计数法对细菌进行计数。
3. 了解不同细菌的生长特性和培养条件。
二、实验原理细菌菌落计数是微生物学中常用的实验方法，通过在固体培养基上培养细菌，观察并计数菌落，从而了解样品中细菌的数量。
实验原理基于以下步骤：1. 样品处理：将待测样品进行适当的稀释，以使菌落数量达到可计数的范围。
2. 接种：将稀释后的样品涂布在固体培养基上，使菌落分散生长。
3. 培养和观察：在一定条件下培养涂布后的培养基，观察菌落生长情况。
4. 计数：选择平均菌落数在30～300之间的平板进行计数，计算菌落数。
三、实验材料1. 样品：实验室自备的细菌样品。
2. 培养基：营养琼脂培养基、牛肉膏蛋白胨培养基等。
3. 仪器：无菌操作台、移液管、培养皿、酒精灯、恒温培养箱等。
4. 其他：无菌水、酒精、生理盐水、无菌棉签等。
四、实验方法1. 样品处理：将待测样品进行适当的稀释，以使菌落数量达到可计数的范围。
2. 接种：用无菌棉签将稀释后的样品涂布在固体培养基上，使菌落分散生长。
3. 培养和观察：将涂布后的培养基置于恒温培养箱中，在一定条件下培养。
4. 计数：观察菌落生长情况，选择平均菌落数在30～300之间的平板进行计数。
五、实验步骤1. 样品处理：取1mL待测样品，加入9mL无菌水中，进行10倍稀释。
2. 接种：用无菌棉签蘸取稀释后的样品，涂布在营养琼脂培养基上。
3. 培养和观察：将涂布后的培养基置于37℃恒温培养箱中，培养24小时。
4. 计数：观察菌落生长情况，选择平均菌落数在30～300之间的平板进行计数。
六、实验结果1. 样品1：菌落总数为100个。
2. 样品2：菌落总数为200个。
3. 样品3：菌落总数为150个。
七、实验分析1. 样品1的菌落总数较少，可能是因为样品中细菌数量较少或细菌生长条件不适宜。
2. 样品2的菌落总数较多，可能是因为样品中细菌数量较多或细菌生长条件适宜。
菌落总数计数方法
菌落总数计数方法菌落总数是指在一定条件下，通过培养基和培养方法，将微生物在培养基上生长形成的一个个可见的菌落进行计数，从而得到微生物在样品中的数量。
菌落总数计数方法是微生物学中常用的一种方法，下面将介绍几种常见的菌落总数计数方法。
首先，最常用的方法是平板计数法。
平板计数法是将待测样品经过适当稀释后，均匀涂布在含有培养基的平板上，然后进行培养，待菌落生长后进行计数。
这种方法简单易行，适用于各种微生物的计数，但需要注意的是，对于含有大量细菌的样品，需要进行适当的稀释，以避免菌落过多导致计数困难。
其次，滤膜计数法也是一种常见的菌落总数计数方法。
这种方法适用于水样、空气样等液态或气态样品的微生物计数。
首先，将待测样品通过滤膜过滤器过滤，然后将滤膜放置在含有培养基的平板上进行培养，待菌落生长后进行计数。
这种方法操作简单，适用范围广，但需要注意滤膜的选取和过滤条件的控制，以确保计数结果的准确性。
另外，膜过滤计数法也是一种常用的菌落总数计数方法。
这种方法同样适用于水样、空气样等液态或气态样品的微生物计数。
首先，将待测样品通过膜过滤器过滤，然后将膜放置在含有培养基的平板上进行培养，待菌落生长后进行计数。
这种方法操作简便，计数结果准确，但需要注意膜的选择和过滤条件的控制，以确保计数结果的准确性。
最后，荧光染色计数法是一种新兴的菌落总数计数方法。
这种方法利用荧光染色剂对微生物进行染色，然后通过荧光显微镜或自动计数仪进行计数。
这种方法操作简单，计数速度快，适用于各种微生物的计数，但需要注意染色条件的控制，以确保计数结果的准确性。
综上所述，菌落总数计数方法有多种多样，每种方法都有其适用的范围和注意事项。
在进行菌落总数计数时，需要根据样品的特点和实验的要求选择合适的方法，并严格按照操作规程进行操作，以确保计数结果的准确性和可靠性。
希望本文介绍的菌落总数计数方法能够为相关科研工作提供一定的参考价值。
VITEK 2 Compact 全自动细菌鉴定仪的操作规程
VITEK 2 Compact 全自动细菌鉴定仪的标准操作规程1.目的规范VITEK 2 Compact 全自动细菌鉴定仪的操作规程,保证检验质量.2.授权操作人经培训并通过考核合格的微生物实验室工作人员。
3.原理为光电技术,电脑技术和细菌八进位制数码鉴定技术相结合的鉴定方法。
每个鉴定卡内含有64项生化反应,每三项为一组,组内各项反应阳性时分别赋值为1,2,4,然后计算每组数值。
根据64项生化反应结果即可获得生物数码。
在电脑控制下,读数器每隔15分钟对每一试卡读数一次,对各反应孔底物进行光扫描,动态观察反应变化,一旦试卡内终点指示孔达到临界值,表示此卡检测完成,系统将最后一次判读结果所得的生物数码与菌种资料库标准菌生物模型相比较,经矩阵分析得到鉴定值和鉴定结果。
4.工作环境相对湿度：20%～80%；温度15～30℃；电源电压：200～240V，50/60Hz。
5.操作程序5.1 开机5.1.1 依次打开UPS,交流电源,仪器将自动进行初始化。
仪器孵育转盘温度上升至测试卡所需的温度。
（5～15分钟）5.1.2 启动完成之后,屏幕下方的状态区显示OK,代表仪器可以处理测试卡了。
5.1.3 依次打开显示器,打印机,电脑电源,进入VITEK 2 Compact 软件应用界面。
5.2 卡片的选择5.2.1 鉴定卡 GN：革兰阴性菌鉴定卡；GP：革兰阳性菌鉴定卡；YST：酵母菌鉴定卡；NH:苛养菌鉴定卡；ANC：厌氧菌及棒状杆菌鉴定卡5.2.2 药敏卡 AST-GNxx:革兰阴性菌药敏卡；AST-GPxx:革兰阳性菌药敏卡。
5.3菌悬液配置及药敏卡稀释5.3.1 悬浮液 0.45%NaCl 溶液,PH4.5～7.2。
5.3.2 菌悬液浓度：见表1表1 VITEK 2 Compact 全自动细菌鉴定仪各种鉴定卡所需细菌悬液浓度GN GP YST AST-GNxx AST-GPxx NH 0.5～0.63McF 0.5～0.63McF 1.8～2.2 McF 3.0ml盐水+145μl 3.0ml盐水+280μl 2.8～3.2McF0.5～0.63McF菌悬液 0.5～0.63McF菌悬液5.4操作流程5.4.1 根据细菌种类选卡。
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