菌落计数器计数方法详解
微生物菌落计数方法公式
微生物菌落计数方法公式
微生物菌落计数方法是一种常用的微生物检测方法，具有快速、简便、实用的特点。
下面我们详细介绍微生物菌落计数方法，并给出具体的
计算公式。
一、微生物菌落计数方法
1. 样品制备：将待检样品用无菌物质稀释到合适的浓度，以便以下操作。
2. 平板涂布：将稀释后的样品倒入培养基中，用无菌铁环平均涂布在
琼脂平板上，使每个平板上菌液涂布均匀。
3. 培养：将涂好的琼脂平板置于恒温恒湿培养箱内，在适宜的培养条
件下进行菌落生长。
4. 计数：菌落生长一定时间后，在合适的光照条件下观察并计数。
二、微生物菌落计数公式
1. 常见单位及定义：
（1）CFU：Colony Forming Unit，即菌落形成单位。
（2）MPN：Most Probable Number，即最可能数量。
2. CFU计算公式：
CFU = （菌落数 / 涂样量）×稀释倍数
3. MPN计算公式：
（1）假定重复涂法：MPN = （a / b）×所需稀释倍数
其中，a为总正涂数，b为总涂数。
（2）浓度穿网法：MPN = 浓度对应格数
对于MPN计算法，还需根据不同的稀释方法，选择相应的查表文献进行计算。
在使用MPN方法时，计算前应根据实际情况，选择合适的稀释倍数。
以上就是微生物菌落计数方法及计算公式的详细介绍。
通过该方法，可以快速、简便、准确地对微生物进行检测，是一种常用的微生物质量控制手段。
微生物菌落总数计数方法
微生物菌落总数计数方法微生物菌落总数计数方法有很多种，下面列举了其中的50种方法并对其进行详细描述：1. 胶平板法：将微生物样品通过稀释后均匀涂布在富营养培养基上，培养后统计菌落数量。
2. 液体计数法：使用专门的装置进行微生物菌落计数，例如波形计数器。
3. 膜过滤法：将微生物样品通过膜过滤器，然后将膜放到富养分培养基上进行培养和计数。
4. 容积法：将微生物样品通过稀释，然后使用容积计数器对其进行计数。
5. 水平采样法：将微生物样品通过固体培养基，然后根据采样水平进行菌落计数。
6. 微阵列计数法：使用微阵列技术进行微生物菌落计数，高通量，自动化程度高。
7. 波数计数法：通过光学检测装置对微生物样品的波数进行计数。
8. 流式细胞技术：通过流式细胞仪对微生物样品中的细胞进行计数和分析。
9. PCR技术：通过定量PCR对微生物样品中的特定基因进行定量，从而间接计算出微生物菌落总数。
10. 分光光度计法：通过分光光度计测定微生物样品中生物的光学密度，进而计算其菌落总数。
11. 过膜法：利用薄膜将微生物分布均匀后计数。
12. 电子计数法：通过电子显微镜进行微生物菌落计数。
13. 温度计数法：根据微生物在不同温度下的生长特性进行计数。
14. 荧光法：利用荧光染料对微生物菌落进行标记并计数。
15. 光学显微镜法：利用光学显微镜对微生物进行直接观察和计数。
16. 超声波法：利用超声技术将微生物分散均匀后计数。
17. 图像分析法：对微生物样品在图像上的特征进行分析，并计算菌落总数。
18. 颜色计数法：通过颜色反应对微生物菌落进行计数。
19. 电泳计数法：通过蛋白电泳对微生物进行计数。
20. 微型生物反应器法：利用微型生物反应器的特性对微生物进行计数。
21. 电化学法：通过电化学技术对微生物样品进行计数。
22. 生物传感器法：利用生物传感器对微生物进行快速计数。
23. 感光计数法：利用光敏感材料对微生物进行计数。
24. 气溶胶计数法：利用气溶胶技术对微生物进行计数。
菌落总数计数方法
菌落总数计数方法菌落总数计数是一种常见且重要的实验方法，用于评估菌落的数量和密度。
菌落总数计数方法有多种，常见的包括平板计数法、薄层计数法、过滤膜计数法等。
下面将详细介绍这几种方法的原理和步骤。
平板计数法是最常见的菌落总数计数方法之一。
它的原理是将待测菌液均匀涂布在含有固体营养培养基的平板上，通过菌落的生长扩散形成可见的单个菌落，再通过对菌落进行计数并乘以稀释倍数，最后得到待测菌液的菌落总数。
具体步骤如下：1. 准备固体培养基。
根据所要检测菌落的要求，选择适当的培养基并准备好。
固体培养基一般含有琼脂或明胶等物质，可以提供营养物质和支持菌落的生长。
2. 制备合适浓度的菌液。
将待测菌种培养在含有适宜营养物质的液体培养基中，利用培养箱或摇床进行恒温、恒湿的培养，待菌液呈现合适浓度时即可使用。
3. 稀释菌液。
根据待测菌液的预估浓度，将适量的菌液和无菌生理盐水按一定比例进行稀释，以获得合适浓度的菌液。
4. 涂布菌落。
取一定数量的稀释后的菌液，利用灌注器或鱼鳞划线法将菌液均匀涂布在固体培养基的平板上。
为了保证菌液的均匀分布，可以采取旋转、摇动等方法。
5. 培养菌落。
将涂布好的平板置于恒温、恒湿的培养箱中进行培养。
根据菌种的不同，一般在30-37的温度下培养24-48小时。
6. 计数菌落。
在培养好的平板上，通过肉眼或借助显微镜仔细观察菌落的形态、大小、颜色等特征，并使用菌落计数器或放大镜进行计数。
根据菌落的密度和分布情况，可以选择在整个平板上计数，或者在特定区域计数后进行推算。
7. 乘以稀释倍数。
由于菌液在进行稀释时常用不同倍数的生理盐水进行稀释，所以在计算菌落总数时需要将计数结果乘以稀释倍数，以获得准确的结果。
薄层计数法是另一种常见的菌落总数计数方法。
它的原理是将含有待测菌液的液体培养基均匀地倒入培养基皿中，使其能够覆盖整个底面。
待液体凝固后，菌落会在培养基表面生长，并且可以通过视觉或显微镜观察和计数菌落。
X97-A菌落计数器操作指南
1.0 目的
规范、指导操作微生物实验室菌落计数器。
2.0 范围
本规程适用于微生物实验室菌落计数器。
3.0 职责
实验员：按标准操作指南使用和维护菌落计数器。
设备负责人：定期对菌落计数器的完好状况进行检查，并联系计量员定期送计量部门检定。
实验室负责人：对菌落计数器的使用和管理进行监督。
4.0 操作规程
4.1 将计数笔插头插入仪器的插孔，打开电源开关。
4.2 开关打开后，计数池内灯亮，同时数字显示为“000”，表示允许进行计数。
（如数字不为“000”，按“复
位”键）。
4.3 将待检的培养皿倒置放入计数池内。
4.4 用计数笔在培养皿底面对所有的菌落逐个点数，每点数一个应听到“嘟”声才说明有效，否则应重点。
4.5 用放大镜仔细检查，确认点数无遗留，计数完毕，记录数据。
4.6 注意事项
4.6.1 仪器放置在平整牢固的实验台上使用。
4.6.2 点数菌落时，计数笔不要过于倾斜，轻轻点下至有弹跳感，听到“嘟”声即可，如点按过重易损坏计数
笔。
4.6.3 仪器应防潮、防剧烈震动，防直接日光暴晒，防酸碱侵蚀，用后应加防尘罩。
4.6.4 注意防止细菌污染计数池。
4.6.5 如发生不计数的问题，可按动校验键进行自动检查；如能计数，说明计数笔坏。
如仍不计数，则说明仪
器本身有故障。
不得随意拆卸，联系厂家检修。
5.0 附页：
无
6.0 修订记录：。
菌落计数器的计数方法
菌落计数器的计数方法菌落计数器由计数器、探笔、计数池等部分组成，计数器采用CMOS集成电路精心设计，LED数码管显示，字高13mm，清晰明亮，配合专用探笔，计数灵敏准确，菌落对比清楚。
便于观察。
可广泛用于食品、饮料、药品、生物制品、化妆品、卫生用品、饮用水、生活污水、工业废水、临床标本中细菌数的检验。
那么菌落计数器都是怎样进行计数的呢？上海巴玖来为您详细讲解菌落计数器的计数方法。
1.计数器测定法即用血细胞计数器进行计数。
取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内，用显微镜观察计数。
由于计数室的容积是一定的(O.1mm3)，因而根据计数器刻度内的细菌数，可计算样品中的含菌数。
本法简便易行，可立即得出结果（本法不仅适于细菌计数，也适用于酵母菌及霉菌孢子计数）。
2.电子计数器计数法电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化，小孔仅能通过一个细胞，当一个细胞通过这个小孔时，电阻明显增加，形成一个脉冲，自动记录在电子记录装置上。
该法测定结果较准确，但它只识别颗粒大小，而不能区分是否为细菌。
因此，要求菌悬液中不含任何碎片。
3.活细胞计数法常用的有平板菌落计数法，是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。
取一定容量的菌悬液，作一系列的倍比稀释，然后将定量的稀释液进行平板，根据培养出的菌落数，可算出培养物中的活菌数。
此法灵敏度高，是一种检测污染活菌数的方法，也是目前国际上许多国家所采用的方法。
使用该法应注意：①一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数，过多或过少均不准确；②为了防止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中加入O．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用于形成菌落的微生物。
广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验，是常用的活菌计数法。
4.比浊法比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。
细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比，与光密度成正比，所以，可用光电比色计测定菌液，用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。
菌落计数仪使用说明
菌落计数仪使用说明1介绍菌落计数仪提供高效，准确，便利的菌落计数。
在完全的培养基上集中照明确保清晰迅速的结果。
通过使用计数探针接触计数（型号13332700/13332800），菌落通过数字显示记录，明亮的外观与其他结构形状相对容易区分。
2打开包装，组装小心地从包装箱里打开计数仪和附件的包装，检查，确保在运输过程中没有破坏。
把设备放在硬的平的台子上。
安放在下端的支腿能被设置成任何倾斜的角度。
同样，1.5倍的放大镜可以升高或降低来适合用户使用。
1.5倍辅助镜（目录13333100）可以作为附件利用，被设计安放在现在镜片的上面来增加实际的放大效果到三倍。
3测试设备在使用菌落计数仪前，应该测试。
插入电线在地面120/60 V循环交流电插座（型号13332500/13332700）或230/50循环交流控制插座（型号13332600/13280000）。
利用位于相邻控制面板上的开关调整设备。
探针的尖端与地面部分连接。
如果菌落计数仪被操作，计数应该通过液晶显示屏登记。
按下重新设置按钮，使菌落计数仪的液晶显示屏显示为0。
4计数探针的护理应该保持计数探针的尖端的锋利。
如果探针是炖的，小的菌落很难计数，准确登记。
触碰菌落的探针尖端应该按照规定的实验操作程序清洁。
5操作菌落计数仪准确计数在营养培养基表面的菌落，放置没有盖的培养皿在菌落仪座上。
旋松座上的两个螺钉使培养皿在计数仪的中间位置。
插入地面连接线和计数探针进入位于设备后部的电线接口，这样L形探针就与琼脂表面接触。
经过较短的时间，位于探针的入口和出口伸进培养基和延迟电路开始一个计数。
特征与一个熟练操作者计数的最大速度并不冲突。
6灯泡更换菌落计数仪的光源是40瓦德白炽灯泡。
7清洁计数盘拧开设备左部的螺丝。
旋转放大镜到一边，打开连接在铰链上的连接。
技数盘被用位于后部的4个翼型螺丝固定，旋松螺丝，移出计数盘。
用洗涤剂或水清洁计数盘。
不要使用磨蚀性洗涤剂，这样会损坏计数盘的白网。
菌落计数器操作流程与方法 菌落计数器解决方案
菌落计数器操作流程与方法菌落计数器解决方案菌落总数的测定，一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培育基混合，在确定温度下，培育确定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数。
基本操作一般包括：样品的稀释－－倾注平皿－－培育48小时－－计数报告。
国内外菌落总数测定方法基本一致，从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同，只是在某些实在要求方面稍有差别，如有的国家在样品稀释和倾注培育进，对吸管内液体的流速，稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较实在的规定。
检验方法参见：GB4789.2—94《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验菌落总数测定》SN0168—92《中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品菌落计数》1．操作方法：培育到时间后，计数每个平板上的菌落数。
可用肉眼察看，必要时用放大镜检查，以防遗漏。
在记下各平板的菌落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数，计算处原始样品中每克（或每ml）中的菌落数，进行报告。
2．到达规定培育时间，应立刻计数。
假如不能立刻计数，应将平板放置于0－4℃，但不得超过24h。
3．计数时应选取菌落数在30～300之间的平板（SN标准要求为25～250个菌落），若有二个稀释度均在30～300之间时，按国家标准方法要求应以二者比值决议，比值小于或等于2取平均数，比值大于2则其较小数字（有的规定不考虑其比值大小，均以平均数报告）。
4．若全部稀释度均不在计数区间。
如均大于300，则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
如均小于30，则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告之。
如菌落数有的大于300，有的又小于30，但均不在30～300之间，则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
如全部稀释度均无菌落生长，则应按小于1乘以最低稀释倍数报告之。
计算菌落数的方法
计算菌落数的方法在微生物学中，计算菌落数是非常重要的一项工作。
它可以帮助我们了解微生物的生长情况，评估食品、水源等环境的卫生状况，以及判断药物的抗菌效果等。
下面介绍几种常用的计算菌落数的方法。
1. 直接计数法直接计数法是最简单、最直接的计算菌落数的方法。
它的原理是将待测样品中的微生物直接计数。
具体操作步骤如下：（1）取一定量的待测样品，如10毫升。
（2）将样品适当稀释，使其菌落数在30~300之间。
（3）将适当稀释后的样品均匀涂在培养基上。
（4）在适当的温度下，培养一定时间后，用显微镜直接计数。
2. 漏斗法漏斗法是一种常用的计算菌落数的方法。
它的原理是将待测样品通过漏斗过滤，将微生物附着在过滤膜上，然后将过滤膜培养，最后计算菌落数。
具体操作步骤如下：（1）取一定量的待测样品，如100毫升。
（2）将样品通过漏斗过滤，过滤膜上附着的微生物即为待测菌落。
（3）将过滤膜放在培养基上，进行培养。
（4）在适当的温度下，培养一定时间后，计算菌落数。
3. 筛选法筛选法是一种常用的计算微生物菌落数的方法。
它的原理是将待测样品通过筛网过滤，将微生物附着在筛网上，然后将筛网培养，最后计算菌落数。
具体操作步骤如下：（1）取一定量的待测样品，如100毫升。
（2）将样品通过筛网过滤，筛网上附着的微生物即为待测菌落。
（3）将筛网放在培养基上，进行培养。
（4）在适当的温度下，培养一定时间后，计算菌落数。
计算菌落数是微生物学中非常重要的一项工作。
不同的计算方法适用于不同的样品类型和实验目的。
在实际操作中，需要根据具体情况选择合适的计算方法，以保证实验结果的准确性和可靠性。
统计菌落数目的方法
统计菌落数目的方法一、引言菌落是微生物繁殖形成的可见现象，可以用来估计菌落的数量。
统计菌落数目是微生物学中的重要研究方法之一。
本文将介绍统计菌落数目的方法及其应用场景。
二、直接计数法直接计数法是最简单、直接的方法之一，适用于较少数量的微生物菌落计数。
该方法通常使用显微镜和计数盘来进行菌落计数。
具体步骤如下：1.准备好培养基，并将待测样品在培养基上均匀涂布。
2.将培养基放置在适宜的环境中，培养一段时间，使菌落生长。
3.使用显微镜观察培养基，使用计数盘对菌落进行计数。
4.根据计数盘上的单位格数和菌落的平均大小计算总菌落数量。
三、稀释平板法稀释平板法适用于菌落数量较多的情况。
该方法通过连续稀释样品，将其均匀涂布在培养基上，然后计算每个稀释液中的菌落数量。
具体步骤如下：1.准备一系列含有不同菌落数量的稀释液。
2.取一定体积的稀释液，将其均匀涂布在培养基上。
3.培养一段时间后，使用计数盘对菌落进行计数。
4.根据每个稀释液中的菌落数量，绘制菌落数量与稀释倍数的曲线图。
5.根据曲线图中最合适的稀释倍数，计算原始样品中的菌落数量。
四、膜过滤法膜过滤法适用于水样和空气样品等液态或气态样品。
该方法通过将样品过滤，将菌落过滤在膜上，再将膜转移到培养基上进行培养和计数。
具体步骤如下：1.准备适用的膜过滤器，并将其放置在过滤装置中。
2.将待测样品通过过滤装置过滤，将菌落过滤在膜上。
3.将膜转移到培养基上，进行培养。
4.培养一段时间后，使用计数盘对菌落进行计数。
5.根据计数盘上的单位格数和菌落的平均大小计算总菌落数量。
五、应用场景统计菌落数目的方法在许多领域都有广泛应用，包括：1.食品卫生检验：通过统计菌落数量可以评估食品的卫生状况，判断是否符合相关标准。
2.环境监测：统计空气、水和土壤中的菌落数量，可以评估环境的卫生状况，指导环境治理工作。
3.医疗卫生：统计医院空气、器械和手术室中的菌落数量，可以评估感染风险，采取相应的防控措施。
细菌菌落 计数 (1)资料讲解
间 板法
• 方法：
1.以无菌操作方法用灭菌吸管吸取 0.9 ml 生理盐水，分别 加入6支灭菌EP管中。
2.以无菌操作方法吸取0.1ml充分混匀的待 检样本，注入盛有0.9ml灭菌生理盐水的 试管中，混匀成1:10稀释液。
3.吸取1:10的稀释液0.1ml注入盛有0.9ml 灭菌生理盐水的试管中，混匀成1:100稀 释液。按同法依次稀释成1:1000， 1:10000稀释液等备用。（如此递增稀 释一次，必须更换一支1ml灭菌吸管）
4.用灭菌吸管取2～3个适宜稀释度的稀释菌 液0.1ml，分别注入灭菌平皿内，每个稀 释度重复做两个平板，涂布均匀后，置 37℃，培养24-48h。
12
3
4
5
6
0.1ml
1
样本
0.1ml 0.1ml 0.1ml 0.1ml 0.1ml 0.1ml
123456
0.1ml
0.1ml
0.1ml
• 适用领域：
• 结果：
稀释度 菌落数 每毫升中 总活菌数
10-4
10-5
10-6
1 2 平均 1 2 平均 1 2 平均
总活细菌数（CFUs/ml）=某一稀释度的平均菌落数 ×10×稀释度
*注意事项见实验讲义
细菌菌落计数
▪直接法
✓血球记数板 ✓活菌染色：美蓝、吖啶橙、TTC
▪间接法
直接法—血球记数板
细菌计数板和血球计数板都用来侧微生物的总菌数。血球计数板用来测 较大微生物如酵母菌和霉菌孢子的总数，细菌计数板用来测细菌的总菌 数。两种计数板的构造相似，不同的是细菌计数板的深度仅为血球计数 板深度的1/5。
（2）菌落计数的报告 ①平板菌落数的选择
选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定 标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数， 其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应 以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状 菌落不到平板的一半，而其余的一半中菌落分布又很均匀， 即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。
培养皿菌落计数方法---平板法
培养⽫菌落计数⽅法---平板法（⼀）⽬的要求学习平板菌落计数的基本原理和⽅法。
（⼆）基本原理平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后，其中的微⽣物充分分散成单个细胞，取⼀定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞⽣长繁殖⽽形成⾁眼可见的菌落，即⼀个单菌落应代表原样品中的⼀个单细胞。
统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
但是，由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞，所以，长成的⼀个单菌落也可来⾃样品中的2～3或更多个细胞。
因此平板菌落计数的结果往往偏低。
为了清楚地阐述平板菌落计数的结果，现在已倾向使⽤菌落形成单位(colony-forming units，cfu)⽽不以绝对菌落数来表⽰样品的活菌含量。
平板菌落计数法虽然操作较繁，结果需要培养⼀段时间才能取得，⽽且测定结果易受多种因素的影响，但是，由于该计数⽅法的最⼤优点是可以获得活菌的信息，所以被⼴泛⽤于⽣物制品检验(如活菌制剂)，以及⾷品、饮料和⽔(包括⽔源⽔)等的含菌指数或污染程度的检测。
（三）器材1．菌种⼤肠杆菌菌悬液。
2．培养基⽜⾁膏蛋⽩胨培养基。
3．仪器或其他⽤具1mL⽆菌吸管，⽆菌平⽫，盛有4.5ml⽆菌⽔的试管，试管架，恒温培养箱等。
培养基（四）操作步骤l．编号取⽆菌平⽫9套，分别⽤记号笔标明10-4、10-5、10-6。
(稀释度)各3套。
另取6⽀盛有4.5mL⽆菌⽔的试管，依次标是10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。
微⽣物培养基2．稀释⽤lmL⽆菌吸管吸取lmL已充分混匀的⼤肠杆菌菌县液(待测样品)，精确地放0.5mL⾄10-1的试管中，此即为10倍稀释。
将多余的菌液放回原菌液中。
将 10-1试管置试管振荡器上振荡，使菌液充分混匀。
另取⼀⽀lml吸管插⼊10 1试管中来回吹吸菌悬液三次，进⼀步将菌体分散、混匀。
吹吸菌液时不要太猛太快，吸时吸管伸⼈管底，吹时离开液⾯，以免将吸管中的过滤棉花浸湿或使试管内液体外溢。
统计菌落数目的方法
统计菌落数目的方法一、引言菌落计数是微生物学研究中常用的方法之一，它可以用于测定微生物在不同环境条件下的生长情况，也可以用于检测食品、药品等产品中的微生物污染情况。
本文将介绍几种常见的菌落计数方法及其操作步骤。
二、培养基的选择在进行菌落计数前，需要选择合适的培养基。
不同的微生物对培养基有不同的要求，因此需要根据待检测微生物的特性和需求选择不同类型的培养基。
常见的培养基有营养琼脂、大肠杆菌选择性琼脂、香肠葡萄球菌选择性琼脂等。
三、样品制备样品制备是进行菌落计数前不可缺少的步骤。
首先需要将待检测样品进行适当处理，如对食品样品进行破碎、加入适量盐水等；对药品样品则需按照规定方法进行提取。
接着需要将处理后的样品进行稀释，以便于后续操作。
四、涂布法涂布法是最常见也是最简单易行的一种菌落计数方法。
其操作步骤如下：1. 取适量的稀释样品，用移液管滴在琼脂平板上。
2. 用无菌的铁环或棉签将滴在琼脂平板上的样品液匀开，使其均匀分布在琼脂平板表面。
3. 将琼脂平板倒置放置于恒温培养箱中，按照待测微生物的生长条件进行培养。
4. 培养一定时间后，可观察到在琼脂平板表面形成的菌落，并根据菌落数量进行计数。
五、过滤法过滤法适用于对样品中微生物数量较多时进行菌落计数。
其操作步骤如下：1. 取适量的稀释样品，将其通过0.45μm孔径的过滤器过滤，以去除大颗粒物质。
2. 将过滤器放置于含有所需培养基的培养皿中，并倒置放置于恒温培养箱中进行培养。
3. 培养一定时间后，观察到过滤器表面形成的菌落，并根据菌落数量进行计数。
六、热浸法热浸法是一种快速检测微生物数量的方法，其操作步骤如下：1. 将待检测样品进行适当处理后，用无菌的移液管将其滴在含有所需培养基的试管中。
2. 将试管放置于恒温水浴中加热，使其达到一定温度，一般为80℃左右。
3. 加热一定时间后，将试管从水浴中取出并立即冷却至室温。
4. 将培养基与待检测微生物混合均匀后涂布于琼脂平板上，并进行培养。
平板菌落计数法操作方法
平板菌落计数法操作方法
平板菌落计数法是一种常用的微生物计数方法，可用于定量测定空气、水、食品、药品等样品中的微生物菌落数量。
下面是平板菌落计数法的操作方法：
1. 准备培养基：选择适合待测微生物培养的培养基，如琼脂培养基、营养琼脂等。
按照培养基说明书的方法制备好培养基，并进行无菌处理。
2. 样品处理：将待测样品进行适当的预处理，如对液体样品可进行稀释，对固体样品可进行悬浮、研磨等处理，以保证样品均匀分散。
3. 平板接种：取适量的样品处理液，将其均匀地倒入已经凝固的培养基平板上，并用无菌棉签进行均匀涂抹，使样品和培养基充分接触。
4. 培养条件：将接种好的平板在适当的温度和湿度条件下进行培养，一般为37下培养24-48小时。
5. 统计菌落：培养结束后，观察平板上的菌落形成情况，对于较多菌落的平板，可以选择在菌落较少的区域进行计数。
使用放大镜或更高倍数显微镜对菌落进行统计。
6. 计算菌落数：根据统计的菌落数，可以根据所用的稀释倍数和接种体积计算出样品中的微生物菌落数量。
需要注意的是，平板菌落计数法需要仔细控制培养条件和接种技术，以减少误差。
同时，对于存在过多重叠菌落的情况，可能需要进行进一步的稀释和计数。
菌落计数器计数方法详解
菌落计数器计数方法详解菌落计数器（Colony Counter）是一种用于快速计算微生物菌落数量的仪器，广泛用于微生物学研究、环境保护、食品工业、医学和农业等领域。
本文将详细介绍菌落计数器的使用方法及注意事项。
1. 菌落计数器的结构一般来说，菌落计数器包括菌落计数板、LED光源、灯罩、目镜、宽幅板调节钮、突起按钮等部分。
在计数过程中，将培养基平板放在菌落计数板上，开启LED光源照射培养基平板，目镜上方会出现大量菌落，使用突起按钮进行纪录和计数。
2. 菌落计数器的使用方法2.1 准备工作在开始使用菌落计数器前，需要进行以下准备工作：1.准备好待测样本，应按照标准操作流程进行操作。
2.准备好培养基平板，应在标准条件下进行制备，避免污染和偏差。
3.清洁菌落计数器，并将培养基平板放在菌落计数板上。
2.2 计数步骤1.打开菌落计数器，并调节合适的光源亮度。
2.选择一个适宜的倍率，一般为1-1.5倍，使用宽幅板调节钮使目镜聚焦。
3.开始计数前，应将菌落计数板上的菌落进行清点，以免重复计数或漏计。
4.用突起按钮逐个记录每个菌落的数目，轻按一下突起按钮记录一个菌落。
5.计数结束后，应将目镜反转清洗，以避免污染。
2.3 防止误差的注意事项1.尽量避免检测手部微生物的可能性，操作人员必须在洁净间内使用无菌手套等防护装备。
2.培养基平板质量和保存条件应符合标准，以保证菌落的形成和生长。
3.菌落计数板的数量应符合要求，并根据菌落的密度调整倍率和光源亮度。
4.计数过程中应切勿使用手指或其他物体触碰培养基平板或菌落计数板，避免污染和误差。
5.若发现菌落过多或过密，可采用分区方法计数，避免漏计或重复计数。
3. 菌落计数器的常见问题3.1 菌落计数结果偏低菌落计数结果偏低可能是因为培养基平板制备不当，或者是计数过程中操作不规范，应重新制备培养基平板并检查计数方法。
3.2 菌落计数与实际数量不符这可能是因为样本不均匀或者操作错误导致的，应重新操作，并注意操作规范。
计算菌落数的方法
计算菌落数的方法
1.直接计数法：是最简单和常用的计数方法，常用于对肠道菌落进行定量计数。
2.平板计数法：分为表面计数法和浸没计数法。
表面计数法是将待检物展布于平板上，待培养后直接数出部分细菌落，以此推出全部细菌落的数量。
浸没计数法是将待检物悬浮于液体培养基中，静置后将液体转移到尺寸已知的容器中，然后计数。
3.膜过滤计数法：膜过滤计数法是将液体待测物过滤通过孔径已知的微孔膜，然后将膜移到含营养物质的培养基中，酝酿一段时间后计数。
4.间接计数法：间接计数法常用于活性菌落数或真菌的计数。
这种方法基于目标细胞的活性或生物特性生成信号。
应用于测定活细胞的方法通常包括：匀浆技术、活菌计数仪、流式细胞技术等。
5.显微镜统计法：适用于对微小微生物，如细菌、霉菌等小孢子菌的数目和形
态结构的鉴定。
在显微镜镜下，结合数学计算方法，统计细胞和孢子的数量。
菌落计数器操作规程
菌落计数器操作规程
《菌落计数器操作规程》
一、概述
菌落计数器是用于计算微生物菌落数量的仪器，通常应用于食品、药品、环境等领域。
正确的操作规程对于准确测得样品中的微生物菌落数量至关重要。
二、操作规程
1. 准备
在进行菌落计数之前，应确保工作台面干净整洁，使用紫外线灯或75%酒精擦拭工作台面。
同时确认菌落计数器灯管是否正常工作，灯管是否需要更换。
2. 样品处理
将待测样品放入灭菌的培养皿中，转动培养皿使样品均匀地分布在培养基表面。
3. 计数
将培养皿放入菌落计数器中，使用放大镜观察培养皿中的微生物菌落。
注意：在观察过程中要避免培养皿与灯管直接接触，以免造成灯管污染。
4. 记录结果
使用计数器进行菌落计数，记录每个培养皿中的菌落数量。
注意：每个培养皿中大于300个菌落的样品，应选取少于300个菌落的培养皿进行计数。
5. 结果分析
根据计数结果计算出菌落的数量，并根据需求制作相应的报告。
6. 清洁消毒
使用75%酒精或其他消毒液清洁菌落计数器的工作台面，确
保下次使用前的卫生条件。
三、注意事项
1. 在操作时要做到轻拿轻放，避免碰撞造成培养皿破裂。
2. 观察过程中注意保持适当的距离，避免过多照射紫外线对人体健康造成伤害。
3. 每次使用后及时进行清洁消毒，保持设备的卫生条件。
通过严格按照菌落计数器的操作规程进行操作，可以保证结果的准确性，为食品、药品、环境等领域的微生物检测提供可靠的数据支持。
菌落计数器操作规程
菌落计数器操作规程
1、目的：建立菌落计数器的操作规程，使检测员正确使用菌落计数器。
2、适用范围：本方法适用于菌落计数器的使用。
3、责任人：检测员。
4、正文：
4.1操作步骤
4.1.1将电源插头插入220V电源插座内。
4.1.2将探笔插入仪器上的探笔插孔内。
4.1.3将电源开关拨向“开”，计数池内灯亮。
同时显示明亮的“000”表示允许进行计数。
4.1.4将待检的培养皿，皿底朝上放入计数池内。
4.1.5用探笔在培养皿底面面对所有的菌落逐个点数。
此时，菌落处被标上颜色，显示窗内数字自动累加。
4.1.6用放大镜仔细检查，确认点数无遗漏，计数即已完毕。
4.1.7显示窗内的数字即为该培养皿内的菌落数。
4.1.8记录数字后取出培养皿，按复0键，显示恢复“000”。
为另一培养皿的计数做好准备。
4.2 注意事项
4.2.1仪器应放置在平整牢固的试验台上使用。
4.2.2点数菌落时，探笔不要过于倾斜。
轻轻点下有弹跳感时，数字即被输入。
4.2.3仪器应防潮、防强烈震动、防直接日光曝晒、防酸碱侵蚀。
用后应加防尘罩。
4.2.4注意防止细菌污染计数池。
4.2.5仪器及探笔均不能随意拆卸，发现故障，应请有经验的专业人员检修。
菌落计数及报告方法
菌落计数及报告方法1、目的建立微生物实验中菌落计数及报告规范，从实际生长的菌落数中计算出较为科学的结果2、方法说明本文件采用平板计数法，产品中污染的细菌种类不同，每种细菌都有它一定的生理特性，培养时对营养要求，培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等均有所不同。
在实际工作中，不可能做到满足所有菌的要求，因此所测定的结果，只包括在本方法所使用的条件下生长的微生物总数。
3、参考文件GB7918.2-1987化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定4、菌落计数方法先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5～10倍的放大镜检查，以防遗漏。
记下各平皿的菌落数后。
求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。
若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时，该平皿不宜计数。
若片状菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘2，以代表全皿菌落数。
5菌落计数及报告方法5.1 首先选取平均菌落数在30～300之间的平皿，作为菌落总数侧定的范围。
当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平皿菌落数乘其稀释倍数(见表中例1) ,5.2 若有两个稀释度，其平均菌落数均在30～300个之间，则应求出两者菌落总数之比值来决定。
若其比值小于或等于2 ，应报告其平均数，若大于2则报告其中较小的菌落数( 见表中例2及例3),5.3 若所有稀释度的平均菌落数均大于300 个，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例4)，5.4 若所有稀释度的平均菌落数均少于30个，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例5),5.5 若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300个之间，其中一个稀释度大于300个，而相邻的另一稀释度小于30个时，则以接近30 或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例6), 5.6 若所有的稀释度均无菌生长，报告数为每克或每毫升小于10 个。
5.7 菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告之，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，应以四舍五入法计算。
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菌落计数器计数方法详解
菌落计数器由计数器、探笔、计数池等部分组成，计数器采用CMOS集成电路精心设计，LED数码管显示，字高13mm，清晰明亮，配合专用探笔，计数灵敏准确，菌落对比清楚。
便于观察。
可广泛用于食品、饮料、药品、生物制品、化妆品、卫生用品、饮用水、生活污水、工业废水、临床标本中细菌数的检验。
那么菌落计数器都是怎样进行计数的呢？上海巴玖来为您详细讲解菌落计数器的计数方法。
1.计数器测定法
即用血细胞计数器进行计数。
取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内，用显微镜观察计数。
由于计数室的容积是一定的(O.1mm3)，因而根据计数器刻度内的细菌数，可计算样品中的含菌数。
本法简便易行，可立即得出结果（本法不仅适于细菌计数，也适用于酵母菌及霉菌孢子计数）。
2.电子计数器计数法
电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化，小孔仅能通过一个细胞，当一个细胞通过这个小孔时，电阻明显增加，形成一个脉冲，自动记录在电子记录装置上。
该法测定结果较准确，但它只识别颗粒大小，而不能区分是否为细菌。
因此，要求菌悬液中不含任何碎片。
3.活细胞计数法
常用的有平板菌落计数法，是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。
取一定容量的菌悬液，作一系列的倍比稀释，然后将定量的稀释液进行平板，根据培养出的菌落数，可算出培养物中的活菌数。
此法灵敏度高，是一种检测污染活菌数的方法，也是目前国际上许多国家所采用的方法。
使用该法应注意：①一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数，过多或过少均不准确；②为了防止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中加入O．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用于形成菌落的微生物。
广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验，是常用的活菌计数法。
4.比浊法
比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。
细菌悬浮液的浓度在一定
范围内与透光度成反比，与光密度成正比，所以，可用光电比色计测定菌液，用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。
此法简便快捷，但只能检测含有大量细菌的悬浮液，得出相对的细菌数目，对颜色太深的样品，不能用此法测定。
5.测定细胞重量法
此法分为湿重法和干重法。
湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重；干重法系单位体积培养物经离心后，以清水洗净放人干燥器加热烘干，使之失去水分然后称重。
此法适于菌体浓度较高的样品，是测定丝状真菌生长量的一种常用方法。
6.测定细胞总氮量或总碳量
氮、碳是细胞的主要成分，含量较稳定，测定氮、碳的含量可以推知细胞的质量。
此法适于细胞浓度较高的样品。
7、颜色改变单位法（colourchangeunit,简称CCU）
这种方法通常用于很小，用一般的比浊法无法计数的微生物，比如支原体等，因为支原体的液体培养物是完全透明的，呈现为清亮透明红色，因此无法用比浊法来计数，由于支原体固体培养很困难，用cfu法也不容易计数，因此需要用特殊的计数方法，即CCU法。
它是以微生物在培养基中的代谢活力为指标，来计数微生物的相对含量的。
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